NO311362B1 - Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive polypeptider - Google Patents
Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive polypeptider Download PDFInfo
- Publication number
- NO311362B1 NO311362B1 NO19931977A NO931977A NO311362B1 NO 311362 B1 NO311362 B1 NO 311362B1 NO 19931977 A NO19931977 A NO 19931977A NO 931977 A NO931977 A NO 931977A NO 311362 B1 NO311362 B1 NO 311362B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- alkyl
- trp
- leu
- phenyl
- tpi
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 145
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 82
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 66
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 48
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 30
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 30
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 28
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 16
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 16
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims abstract description 14
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 9
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims abstract description 8
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 6
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 18
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 9
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 5
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- CKGCFBNYQJDIGS-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-azaniumyl-6-(phenylmethoxycarbonylamino)hexanoate Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCCCNC(=O)OCC1=CC=CC=C1 CKGCFBNYQJDIGS-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 3
- AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N N-methyl-L-valine Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(O)=O AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 3
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 3
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 claims description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 claims description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 claims description 2
- 125000004400 (C1-C12) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004209 (C1-C8) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003884 phenylalkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 claims 1
- 239000002790 bombesin antagonist Substances 0.000 abstract description 11
- 125000000008 (C1-C10) alkyl group Chemical group 0.000 abstract description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 125000006274 (C1-C3)alkoxy group Chemical group 0.000 abstract 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 104
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 104
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 45
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 45
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 45
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 27
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 27
- 102100036519 Gastrin-releasing peptide Human genes 0.000 description 26
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 26
- QXZBMSIDSOZZHK-DOPDSADYSA-N 31362-50-2 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C(C)C)C1=CNC=N1 QXZBMSIDSOZZHK-DOPDSADYSA-N 0.000 description 25
- 102000004862 Gastrin releasing peptide Human genes 0.000 description 25
- 108090001053 Gastrin releasing peptide Proteins 0.000 description 25
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- PUBCCFNQJQKCNC-XKNFJVFFSA-N gastrin-releasingpeptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)C(C)C)[C@@H](C)O)C(C)C)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CNC=N1 PUBCCFNQJQKCNC-XKNFJVFFSA-N 0.000 description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 23
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 108010051479 Bombesin Proteins 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 20
- -1 (D-Arg<1> Chemical class 0.000 description 19
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 11
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WXYGVKADAIJGHB-ZDUSSCGKSA-N (2s)-3-(1h-indol-2-yl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)=CC2=C1 WXYGVKADAIJGHB-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 9
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 9
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 9
- AYMLQYFMYHISQO-QMMMGPOBSA-N (2s)-3-(1h-imidazol-3-ium-5-yl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 AYMLQYFMYHISQO-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 8
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 7
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 6
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 6
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- RWBLWXCGQLZKLK-USVTTYPOSA-N (2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[2-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-amino-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-methyl-1-oxob Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CN)C(C)C)C1=CN=CN1 RWBLWXCGQLZKLK-USVTTYPOSA-N 0.000 description 5
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 5
- 206010065713 Gastric Fistula Diseases 0.000 description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 4
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 4
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 4
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 4
- 101800001638 Neuromedin-C Proteins 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 4
- GKKCIDNWFBPDBW-UHFFFAOYSA-M potassium cyanate Chemical compound [K]OC#N GKKCIDNWFBPDBW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 229940123804 Bombesin antagonist Drugs 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 206010060377 Hypergastrinaemia Diseases 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- IFIFCDMFVPNPSB-QEJDUTAOSA-N (2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]acetyl]amino]-N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]butanediamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 IFIFCDMFVPNPSB-QEJDUTAOSA-N 0.000 description 2
- OHCNRADJYUSTIV-FPNHNIPFSA-N (2s)-n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[2-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-amino-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl] Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 OHCNRADJYUSTIV-FPNHNIPFSA-N 0.000 description 2
- XXFIWKDBCZWORZ-YQZUKWOLSA-N (2s)-n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[2-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-amino-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl] Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)C1=CN=CN1 XXFIWKDBCZWORZ-YQZUKWOLSA-N 0.000 description 2
- FSNCEEGOMTYXKY-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydro-beta-carboline-3-carboxylic acid Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1CNC(C(=O)O)C2 FSNCEEGOMTYXKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 2
- PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 3-aminoalanine Chemical compound [NH3+]CC(N)C([O-])=O PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N 3-phenylpropionic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=CC=C1 XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 108010048151 gastrin releasing peptide (14-27) Proteins 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 210000000277 pancreatic duct Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000036515 potency Effects 0.000 description 2
- 239000002287 radioligand Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 2
- BQRXMLXVGQMIBO-UHFFFAOYSA-N 1,1-bis(sulfanyl)ethanol Chemical compound CC(O)(S)S BQRXMLXVGQMIBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(tritiooxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO[3H])O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 0.000 description 1
- DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GNPISAHACGIXLZ-UHFFFAOYSA-N 3-(4-methylphenoxy)propanoic acid Chemical compound CC1=CC=C(OCCC(O)=O)C=C1 GNPISAHACGIXLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ALKYHXVLJMQRLQ-UHFFFAOYSA-N 3-Hydroxy-2-naphthoate Chemical compound C1=CC=C2C=C(O)C(C(=O)O)=CC2=C1 ALKYHXVLJMQRLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 241000269350 Anura Species 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 241000269339 Bombina bombina Species 0.000 description 1
- 101001011741 Bos taurus Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 210000003771 C cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100030152 Complement C1r subcomponent-like protein Human genes 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N D-Proline Chemical compound OC(=O)[C@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 1
- 101100326463 Homo sapiens C1RL gene Proteins 0.000 description 1
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000766306 Homo sapiens Serotransferrin Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100220369 Mus musculus Csgalnact1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- NFVNYBJCJGKVQK-ZDUSSCGKSA-N N-[(Tert-butoxy)carbonyl]-L-tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 NFVNYBJCJGKVQK-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229910020889 NaBH3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000006809 Pancreatic Fistula Diseases 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 229920002253 Tannate Polymers 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 201000008629 Zollinger-Ellison syndrome Diseases 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBCVMFKXIKNREZ-UHFFFAOYSA-N acoh acetic acid Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O YBCVMFKXIKNREZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical compound [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006295 amino methylene group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N bis(2-methylpropyl)aluminum Chemical compound CC(C)C[Al]CC(C)C SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N bovine insulin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 1
- 208000002458 carcinoid tumor Diseases 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- BJDCWCLMFKKGEE-CMDXXVQNSA-N chembl252518 Chemical compound C([C@@](OO1)(C)O2)C[C@H]3[C@H](C)CC[C@@H]4[C@@]31[C@@H]2O[C@H](O)[C@@H]4C BJDCWCLMFKKGEE-CMDXXVQNSA-N 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 208000016644 chronic atrophic gastritis Diseases 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N cimetidine Chemical compound N#CNC(=N/C)\NCCSCC1=NC=N[C]1C CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001380 cimetidine Drugs 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001953 common bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000004188 enterochromaffin-like cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 208000017211 gastric neuroendocrine tumor G1 Diseases 0.000 description 1
- 201000000052 gastrinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 150000003949 imides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108010061043 litorin Proteins 0.000 description 1
- OHCNRADJYUSTIV-UHFFFAOYSA-N litorin Natural products C=1N=CNC=1CC(NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1NC(=O)CC1)C(C)C)C(=O)NC(C(=O)NC(CCSC)C(N)=O)CC1=CC=CC=C1 OHCNRADJYUSTIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- BCVXHSPFUWZLGQ-UHFFFAOYSA-N mecn acetonitrile Chemical compound CC#N.CC#N BCVXHSPFUWZLGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- QSEVMIMUBKMNOU-VIFPVBQESA-N methyl (2s)-4-methyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)OC(C)(C)C QSEVMIMUBKMNOU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 210000001819 pancreatic juice Anatomy 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 229960003424 phenylacetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003279 phenylacetic acid Substances 0.000 description 1
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 description 1
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N protirelin Chemical compound NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000001525 receptor binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- ZNJHFNUEQDVFCJ-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].OCCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 ZNJHFNUEQDVFCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical class C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229940075620 somatostatin analogue Drugs 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- ADNPLDHMAVUMIW-CUZNLEPHSA-N substance P Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 ADNPLDHMAVUMIW-CUZNLEPHSA-N 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012485 toluene extract Substances 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- APJYDQYYACXCRM-UHFFFAOYSA-N tryptamine Chemical compound C1=CC=C2C(CCN)=CNC2=C1 APJYDQYYACXCRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N β-(2-naphthyl)-alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
- C07K7/086—Bombesin; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører analogifremgangsmåte for fremstilling av nye peptider som innvirker på veksten av cancerholdige tumorer i mennesker. Foreliggende oppfinnelse vedrører spesielt bombesin antagonister som er [Y<8->^ pseudo] polypeptider inneholdende D- eller L tryptofan eller tryptofananalogen 2,3,4,9-tetrahydro-lH-pyrido[3,4-b]indol-3-karboksylsyre (Tpi) ved N eller/og C-terminalen som har antagonist egenskaper overfor bombesin eller bombesin-lignende peptider, salter derav og farmasøytiske sammensetninger og fremgangsmåter for anvendelse som vedrører disse peptidene.
Foreliggende oppfinnelse vedrører analogifremgangsmåte for fremstilling av polypeptidforbindelser som har antagonist egenskaper overfor bombesin eller bombesin-lignende peptider så som gastrin frigjørende peptid (GRP), neuromedin C og lignende, nedenfor referert til som bombesin antagonist egenskaper og er av verdi for foreksempel behandling av malign sykdom i varmblodige dyr så som mennesket. Oppfinnelsen innbefatter analogifremgangsmåte for fremstilling av nye polypeptid forbindelser og nye farmasøytiske sammensetninger inneholdende nevnte polypeptid forbindelser. Fremgangsmåter for fremstilling av medikamenter som inneholder disse, kan anvendes ved fremstilling av en bombesin antagonist effekt i varmblodige dyr så som mennesket.
Bombesin er et tetradekapeptidamid som først ble isolert fra huden til frosken Bombina-bombina (Anastasi, Erspamer and Bucci, Experientia, 1971, 27, 166). Det er kjent at bombesin er et potent mitogen for Swiss 3T3 fibroblast celler fra mus (Rozengurt og Sinnett-Smith, Proe. NAtl. Acad. Sei. USA, 1983,80,2936) og at det stimulerer amylase sekresjon fra bukspyttkjertel acini fra marsvin (Jensen, Jones, Folkers and Gardner, Nature, 1984, 309, 61 ). Det er også kjent at bombesin-lignende peptider blir produsert og utskilt av human small-cellelungecancer (SCLC) celler(Moody, Pert, Gazdar, Carney og Minna, Science, 1981, 214, 1246), og at eksogent tilsatte bombesin-lignende peptider kan stimulere veksten av human SCLC-celler in vitro (Carney, Cuttia, Moody og Minna, Cancer Research, 1987, 47, 821) og at et monoklonalt antistoff spesifikt for C-terminus region til bombesin og GRP kan blokkere bindingen av GRP til dets reseptorer og forhindre veksten av humane SCLC-celler både in vitro og in vivo (Cuttia, Carney, Mulshine, Moody, Fedorko, Fischler og Minna, Nature, 1985, 316, 823).
GRP som har bombesin-lignende egenskaper er et sterkt distribuert peptidamid inneholdende 27 aminosyrer isolert fra tarmen til gris (McDonald, Jornvall, Nilsson, Vågne, Ghatei, Bloom og Mutt, biochem. Biophys. Res. Commun., 1979, 90, 227) hvor C-terminus aminosyresekvensen er nesten identisk med den til bombesin. Neuromedin C er et dekapeptidamid og strukturen er identisk med de siste 10 aminosyrene i C-terminusregionen til GRP som er blitt isolert fra tynntarmen til kanin (Reeve, Walsh, Chew, Clark, Hawke og Shively, J. Biol. Chem., 1983, 258, 5582). GRP stimulerer forkjellige biologiske responser, inkludert frigjøring av gastrin i den systemiske sirkulasjon. Den virker også som en vekstfaktor i 3T3 musefibroblaster og small cellelungecancer (SCLC) celle. GRP har derfor blitt foreslått å spille en direkte patofysiologisk rolle ved utvikling av SCLC via en autokrin vekstmekanisme.
Strukturene til bombesin, neuromedin C og det karbokyl-terminale nonapeptidet til GRP er vist nedenfor: bombesin pGlu-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2
Neuromedin C H-Gly-Asn-His-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2 C-terminalt nonapeptid til GRP - Asn-His-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NHg
Søket etter andre amfibiske bombesin-lignende peptider førte til isolering av litorin som er et nonapeptid (pGlu-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2) i huden på frosk fra Papua, New Guinea som ser ut til å være det mest potente bombesinet
(Yasukara et al., Chem. Pharm. Bull., 1979, 27, 492). Studier på bombesinanaloger viste at et minimumssegment på 9 aminosyreresidier fra 6-134 posisjonen av bombesin har hele spekteret av bombesin aktivitet.
Flere typer av bombesin antagonister er nå kjente. Forbindele P (Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2) som nar en viss aminosyresekvens homologi med bombesin inhiberer ikke bindingen av bombesin og bombesin-lignende peptider, men forbindelse P analoger modifisert ved erstatning av flere L-aminosyrer med D-aminosyrene så som (D-Arg<1>, D-Pro<2>, D-Trp<7>'<9>, Leu<11>) forbindelse P og (D-Arg<1>, D-Phe5, D-Trp7»9, Leu<11>) forbindelse P (Moody et al., Fed. Proceedings, 1987, 46, 2201) ble funnet å blokkere utskillelse av bombesin i bukspyttkjertelacinar celler og å antagonisere de vekst-fremmende virkningene av bombesin i Swiss 3T3 celler. To typer av bombesinantagonister avledet fra bombesin, blant annet (D-Phe^, D-Phe<12>) bombesin og [Leu<1>3-psi-Leu<14>] bombesin (Coy et al., J. Biol. Chem., 1988, 263, 5056 og peptider, 1989, 10, 587 har vist seg å være potente in vitro og in vivo inhibitorer av bombesinresponsen.
En annen type bombesinantagonist bestemt av Heimbrook et al., (J. Biol. Chem., 1989, 264, 11258) er N-acetyl-GRP(20-26) og analoger derav hvori det C-terminale metioninresidiet er deletert fra GRP(20-27)analogene. Nylig rapporterte Coy [J. Biol. Chem. 1989, 264, 14691] at noen kortkjedede bombesinantagonister basert på Litorin sekvensen så som [D-Phe^-Leu1<3->psi-Phe<14>] bombesin (6-14) og [D-Phe^, Leu13-psi-Leu<14>] bombesin-(6-14) utviste høyere potens enn deres tilsvarende opprinnelsespeptid [Leu<13->psi-Leu<14>] bombesin.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive polypeptider med formel I:
hvor
Q er NH2 eller OQ<1> hvor Q<1> er hydrogen, C^-iQ-alkyl, fenyl eller fenyl-C7_10-alkyl;
X er hydrogen eller en enkelt binding koblet til A<2>, acylresidiet til en organisk syre eller en gruppe med formel Rico-
hvor
(1) R<1> er hydrogen, C<->j^Q-alkyl, fenyl eller fenyl-C7_10~
alkyl;
hvor
R<2> er hydrogen, <C>1_<1>0-alkyl, fenyl eller C7_10<fe>nyl-C7_10<->alkyl, R3 er hydrogen eller C^_^ q alkyl;
(b) R<4->0-C0- hvor R<4> er C-^oalkyl, fenyl eller fenyl-C7_10-alkyl
A<1> er D-, L- eller DL- pGlu, Nal, Phe, Thi , Tyr, Tpi, Hea, Hpp,. Mpp, Trp eller Trp substituert i benzenringen med en eller flere ledd valgt fra gruppen bestående av halogen, N02, NH2, OH, C-j^-alkyl og C1_3-alkoksy hvor halogen er fluor, klor og brom,
A<2> er Asn, Dpa, Gin, His, MeHis, His(Bz), His(X) eller en gruppe med formel Dpa (X), Asp (Y), Glu[-} og Glu (Y)
hvor
X er som ovenfor
hvor
R<5> er hydrogen, C^_3 alkyl eller fenyl;
R<5> er hydrogen eller C1_3alkyl;
R<7> er hydrogen, C-^alkyl eller -NHCONH2
og [-] er en enkelt binding som kobler sidekarboksylgruppen med alfaaminogruppen til A<1> hvor X er en enkeltbinding,
A<3> er Nal, Pal, Tpi, Trp, MeTrp, Trp(For) eller Trp substituert i benzenringen med en eller flere ledd valgt fra gruppen bestående av halogen, N02 , NH2, OH, C1_3alkyl og C^_ 3-alkoksy hvor halogen er fluor, klor og brom;
A<4> er Ala, MeAla eller Gin;
A<5> er Val eller MeVal;
A<6> er Gly, Phe eller D-Ala;
A<7> er His, MeHis, His(Bz), His(Z), Lys(Z) eller Pal;
A» er en redusert isoster av Leu eller Phe;
A<9> er Leu, Phe, Tpi, Trp eller Trp substituert i benzenringen med en eller flere ledd valgt fra gruppen bestående av halogen, N02, NH2, OH, <C>1_3alkyl og Ci_3alkoksy hvor halogen er fluor, klor og brom; forutsatt at når A<9> er Leu eller Phe er A<1> forskjellig fra D-Nal eller DL-Phe og hvor A<1> er D-Nal eller DL-Phe er A<9> forskjellig fra Leu eller Phe og saltene derav, kjennetegnet ved farmasøytisk akseptable syrer ved fragment kondensasjon av de tilsvarende peptidfragmentene som vanlig innen peptidkjemi eller ved trinnvis syntese som er vanlig i peptidkjemien og når nødvendig blir de på denne måten oppnådde peptidene acylert og/eller omdannet tiol farmasøytisk akseptable syresalter.
For å lette beskrivelsen av oppfinnelsen er de konvensjonelle forkortelsene for aminosyrer, peptider og derivater derav anvendt som generelt akseptert innen peptidområdet og som anbefalt av IUPAC-IUB (Commission og Biochemical Normen-clature [European J. Biocehm., 1984, 138 9-37].
Forkortelsene for de individuelle aminosyreresidier er basert på det trivielle navnet til aminosyren, for eksempel Trp er tryptofan, Gin er glutamin, His er histidin, Ala er alaniri, Val er val in, Gly er glycin, Leu er leucin, Phe er fenyl-alanin. Der hvor aminosyreresidiet har isomeriske former er det L-formen til aminosyren som er representert dersom ikke annet er angitt ved at D- eller DL- fremkommer foran aminosyresymbolet.
Forkortelser for de uvanlige aminosyrene anvendt i foreliggende oppfinnelse er som følger:
Dpa er 2,3-diaminopropionsyre
Nal er 3-(2-naftyl)-alanin
Thi er p<->2'-thienylalanin
Tpi er 2,3,4,9-tetrahydro-l H-pyrido-[3,4-b] indol-3-karboksylsyre
Peptidsekvensene er ført opp ifølge konvensjonen hvorved den N-terminale aminosyren er til venstre og den C-terminale aminosyren er til høyre.
Hea er hydrokanelsyre
Hna er 3-hydroksy-2-naftoinsyre
Hpp er 3-(4-hydroksyfenyl)propionsyre
Mpp er 3-(4-metoksyfenyl)propionsyre
Paa er fenyleddiksyre
Andre forkortelser som blir anvendt er:
AC acyl
Ac acetyl
AcOH eddiksyre
BOC tert-butoksykarbontl
(BOCjgO di-tert-butyldikarbonat
BHA benzhydrylamin
Bzl benzyl
BSA bovint serum albumin
DIC 1,3-diisopropylkarbodiimid
DMEM Dulbecco's modifiserte Eagles medium
Et etyl
EDTA etylendiamintetraeddiksyre
FCBS føtalt kalve bovint serum
FMOC 9-fluorenylmetyloksykarbonyl
For formyl
HITES RPMI 16 4D medium pluss IO"<8> M hydrokortison, 5 pl/ml bovint insulin, 10 ug/ml humant transferin, 10"<8> M p-estradiol og 3 x IO-<8> M Na2Se03
HOBt 1-hydroksybenzotriazol
HPLC høy-ytelses-væske-kromatograf i
Me metyl
MeCN acetonitril
MeOH metylalkohol
TEA trietylamin
PBS fosfat-buffret saltvann
PGlu pyroglutaminsyre
psi en pseudo peptid binding med struktur CH2-NH med unntagelse der følgende residie har en sekundær
N-terminal hvor betydningen er CHgN
TFA trifluoreddiksyre
Z benzyloksykarbonyl
De mest foretrukne polypeptidene i foreliggende oppfinnelse er
Spesielt foretrukne polypeptider i foreliggende oppfinnelse innbefatter peptid nummerene 5, 7, 12, 17, 18, 22, 26 og 38.
Syntese av polypeptider
Polypeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli fremstilt ved hvilke som helst av de kjente teknikkene innenfor dette fagområdet. En oppsummering av teknikkene som er tilgjengelige kan finnes i M. Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Heidelberg, 1984.
Teknikkene for ekslusiv fast-fase syntese er angitt i boken til J.M. Stewart og J.D. Young, Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chem. Co., Rockford, IL, 1984 (2nd.ed.) oversikten til G. Barany, et al., Int. J. Peptide Protein Res. , 30, 705-739, 1987.
En spesielt foretrukket fremgangsmåte for fremstilling av polypeptider og deres forpeptider ifølge denne oppfinnelsen er fast-fase syntese. Bæreren anvendt i fast-fase syntesen av polypeptidene ifølge denne oppfinnelsen er benzhydrylamin (BHA) harpiks eller klormetylert polystyrenharpiks som er 1% kryss-bundet med divinylbenzen som er kommersielt til-gjengelig. Den beskyttende gruppen valgt for a-amino gruppen var tert-butoksykarbonyl (Boe-)gruppen som ble fjernet ved hvert trinn av syntesen. Utgangsmaterialet inneholdende den beskyttede aminosyren ble dannet fra en Boe aminosyre koblet til BHA harpiks eller koblet til klormetylert polystyrenharpiks med KF. Syntesen begynte ved C-terminalen av polypeptidet og ble utført ved anvendelse av en manuell apparatur, gjentatt med trinnvis avspaltning av a-amino gruppen og kobling til den neste aminosyren.
Rensing av polypeptider
Polypeptidene ble generelt renset ved høy ytelse væske kromatografi (HPLC) på en revers fase kolonne utført på et Rainin HPLC system (Rainin Inc., Co., Woburn, MA) bestående av tre Rainin kanin HP HPLC pumper kontrollert av en Apple Macintosh Plus datamaskin, en Rheodyne injektor og en Knauer modell 87 variabel bølgelengde UV monitor. Råpeptider (10-40 mg) blir applisert på en Dynamax makro kolonne (21,2 x 250 mm) pakket med sfærisk C^g silikagel (porestørrelse:300A; partikkelstørrelse: 12pm) (Rainin Inc. Co.) og eluert med lineær gradient ved anvendelse av et oppløsningsmiddelsystem bestående av (A) 0,1$ TFA og (B) 0, 1% TFA i 70% vandig acetonitril med en strømningshastighet på 2,0 ml/min. Alle fraksjonene ble vurdert for renhet og retensjonstiden ved en analytisk HPLC beskrevet nedenfor.
Kvaliteten og karaktertrekkene for elueringen av rå og renset peptid ble bestemt ved analytisk HPLC på en Hewlett-Packard Model 1090 væske kromatografi utstyrt med et diode stråle detektorsett ved 220 og 280 nm og en revers fase 4,6 x 250 nm W-porex C-Lg kolonne (porestørrelse: 300A, partikkelstørrelse: 5 pm). En strømningshastighet på 1,2 ml/min. av oppløsnings-middelsystem (A) og (B) beskrevet som ovenfor ble opprettholdt og separasjoner ble utført ved romtemperatur.
I de fleste tilfellene ble polypeptidene ytterligere renset ved rekromatografi på samme kolonne med en viss modifikasjon når det gjelder gradient betingelsene. Homogeniteten av de rensede peptidene viste seg å være rene over 97$ i analytisk
HPLC.
Aminosyre analyser
Aminosyre analyser av polypeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse ble utført i Beckman 6300 aminosyre analysator på prøver som ble hydrolysert ved 110°C i 20 timer i forseglede, evakuerte rør med 4 M metansulfonsyre inneholdende 0,2$ 3-(2-aminoetyl)-indol. Forholdet til aminosyren var som ventet. Residiene til Leu-psi-Leu og Leu-psi-Phe viser absorbsjons-toppen med retensjonstider på henholdsvis 39.93, 44.56 min. Tpi ble ikke funnet etter 15 minutters fordøyning i analyse prosedyren.
Analyse prosedyrer
(A) Reseptorbindings analyse
Binding av <125>I-Grp(14-27) og erstatning av bombesinantagonister ble utført i 24-brønn vevskulturskåler (GIBCO) ved anvendelse av Swiss 3T3 celler. Murine Swiss 3T3 fibroblaster ble opprettholdt ved ukentlige føringer i DMEM inneholdende 10$ FCBS og antimykotika. Kulturene ble inkubert i 5% C02 i luft ved 37°C. Brønnene ble sådd med IO<5> celler/- brønn (levedyktighet >95#), dyrket til sammenløp og av-slutning. Bindingsprosedyren ble utført 7 dager etter utsåing. Cellene ble vasket to ganger med 0,5 ml bindingsbuffer (Dulbecco's modifiserte Eagels medium inneholdende 20 nM HEPES-NaOH (pH 7,4), 0, 2% BSA og 100 mcg/ml bacitracin). Cellene ble deretter inkubert med 0,2 nM <125>I-GRP (14-27) in nærvær eller fravær av forskjellige konsentrasjoner av antagonister (6xl0~1:1--6xl0_6M, totalvolum 0,4 ml).
Ifølge Zachary & Rozengurd, (Pres. Nati. Acad. Sei., USA, 1985, 85 3636-3670) og Layton et al. (Cancer Res., 1988, 43, 4783-4789) nådde binding av <125>I-GRP ved 37°C en maksimal-verdi ved 30 min. og ble deretter redusert slik at cellene ble inkubert ved 37° C i 30 min. Etter dette ble cellene vasket to ganger med iskald (4°C) bindingsbuffer og to ganger med is-kald fosfat-buffret saltvann (PBS.mM): NaCl 138, KC1 2,8, Na2HP048, KH2P04, 1,45, CaCl2 0,91, mgCl2 0,49. Vaskede kulturer ble ekstrahert i 0,5 ml 0.5 M NaOH og overført til rør for telling. Brønnene ble vasket en gang med 0,5 ml destillert vann (sterilt) og vaskevannet ble tilsatt til de hensiktsmessige rørene. Deretter ble radioaktiviteten til prøvene opptelt i en automatisk gammateller (Micromedic System, Inc., Huntsville, Ala.).
Ligand-PC data kurve tilpasningsprogrammet til Munson og Rodbard (Anal. Biochem., 1987, 107, 220-239) ble anvendt for å bestemme typer av reseptorbinding, dissosiasjonskonstant (Kd), assosiasjonskonstant (Ka), maksimal bindingskapasitet til reseptorene (Bmax) og halv-maksimal inhibisjon (ICgg). ICgo-verdiene representerer konsentrasjoner av antagonister som forårsaker halv-maksimal inhibisjon av 0,2 nM GRP(14-27) stimulert vekst. Dissosiasjonskonstanten og maksimal bindingskapasitet til <125>I-GRP (14-27) var i disse eksperimentene 1,32 nM og 0,769 pm/mg protein som var tilsvarende som de som ble rapportert for 12^-i-GRP Gg 125j_ Tyr<4->bombesin. Bindingskaraktertrekkene til GRP-reseptorene på 3T3 celler i disse eksperimentene er i samsvar med verdiene oppnådd for bombesinbinding til bukspyttkjertel acinar Jensen, et al. (Proe. Nati. Acad. Sei. USA 1978, 75, 6139-6143) og hypofyse cellene ifølge Westendorf og Schon-brunn, (J. Biol. Chem. 1983, 258, 7527-7335).
GRP(14-27) inhiberer binding av <125>I-GRP(14-27) med IC50 2,32 nM som er i samsvar med dataene fra Layton, et al. (Cancer Res., 1988, 48, 4783-4789) som er angitt å være 2,2 nM. Bindingsdata til polypeptidene i foreliggende oppfinnelse er oppført i vedlagte tabell I nedenfor.
BINDINGSDATA PÅ 3T# SWISS
IC50 sr konsentrasjonen av umerket ligand som erstattet halvparten av den spesifikke radioligand bindingen. Det blir beregnet ifølge ligningen til Cheng og Prusoff (Biochem-Pharmacol. 1973, 22, 3099): IC50 = Kc (1 + L/Kc og Kh hvor Kc og Kh er dissosiasjonskonstantene til henholdsvis umerket (kald) og merket (varm) ligand og L er konsentrasjonen av anvendt radioligand.
(B) Amylasefrigjøring
Isolert bukspyttkjertel acini ble preparert ved collagenase
spaltning av bukspyttkjertelen oppnådd fra hann Wistar rotter (150-180 g) som fastet over natt. Dyrene ble drept ved cervical dislokasjon og bukspyttkjertelen ble fjernet og deretter spaltet med sterkt renset collagenase (CLSPA, 540 U/mg, Cooper Biomedical, Freehold, N.J., USA) ifølge fremgangsmåten til Amsterdam, Solomon og Jamieson (1978).
Dispergert acini ble suspendert i et inkubasjonsmedium inneholdende 24,5 mM HEPES, 98 mM NaCl, 4,0 mM KC1, 11,7 mM KH2P04, 1,0 mM MgCl2, 0,3 mM CaCl2, 5,0 mM glucose, 1%
(vekt/vekt) essensiell og uessensiell aminosyreblanding (Serva Feinbiochemica, Heidelberg, FRG), 2 mM glutamin, 0,2$ BSA og 0,01$ (vekt/vekt) trypsin inhibitor. Inkubasjons-oppløsningen ble mettet med oksygen og opprettholdt ved 37"C i et ristebad (60 svingninger/min.). Acinar suspensjon ble inkubert i nærvær av forskjellige konsentrasjoner GRP eller GRP antagonister.
Etter inkubasjon ble rørene sentrifugert ved 1000 g i 5 min. og supernatanten ble separert fra pelleten. Amylaseinnholdet i supernatanten og oppløst pellet ble bestemt separat som beskrevet av Bernfeld (1955). Sekresjon av amylase ble gitt som prosentandeler over basalverdien.
Inkubasjonene ble duplisert. Ustimulert amylasefrigjøring i løpet av hele denne eksperimentelle perioden ble bestemt som basalverdien.
Når tilsatt til inkubasjonsmediet i gradvis økende konsentrasjoner førte dette til en konsentrasjons-avhengig inhibisjon av amylasefrigjøringen stimulert ved submaksimal konsentrasjon av GRP (10~<9>M). (C) Inhibisjon av <3>H-thymidin inkorporeringen ved 3T3 cellene.
SCLC cellene ble anvendt 2 til 4 dager etter overføring. Enkeltcelle suspensjoner ble dannet ved vasking av cellene (2 ganger med PBS og deretter pipettering av disse i PBS inneholdende 0,2 g/liter glucose, 0,2 g/liter EDTA og 14 mM 1ignocainhydroklorid ved 37°C helt til suspensjonen så ut til å være jevn (2-4 min). Cellene ble vasket tre ganger og resuspendert i HITES uten FCSB. Kulturer ble satt opp i 1,34 x 10<5> celler sådd ut på dag 0 og alle peptidene ble tilsatt på samme tid i 1 ml RPMI-1640 medium pluss HITES og 0,125$ albumin. 48 timer senere ble 1 uc. tritiert thymidin tilsatt til hver brønn og inkubasjonen ble fortsatt i ytterligere 24 timer. Cellene ble deretter vasket og avsatt på glassfilter-papir og vasket med iskald 5% trikloreddiksyre. Filterpapiret ble plassert i beholdere inneholdende scintillasjonsvæske og telt i 1 minutt.
(D) Inhibisjon av veksten til forskjellige small cellelunge carcinomer (S.C.L.C.): Stamkultur av H-69 og H-345 S.C.L.C cellene oppnådd fra National Cancer Institue (NCI) blir opprettholdt i suspen-sjonskultur. Inhibisjon av GRP-indusert DNA-syntese ved bombesin antagonister blir utført ved måling av (<3>H)-thymidin inkorporasjon, inhibisjon av GRP-indusert DNA syntese av bombesinantagonister ble vist å være signifikant og konsen-trasjonsavhengig. (E) Virkning på bukspyttkjertelsekresjon in vivo Studier av sekresjon ble utført på seks katter ved bevissthet
(2-3 kg) preparert med kronisk mave og bukspyttkjertel fistulae som tidligere beskrevet (Konturek et al., J. Physiology, London, 1976, 257, 663-672). Kanylen anvendt i mave fistula var av samme type som beskrevet av Ernas, gastroenterology, 1960, 39, 886-782). Denne kanylen ble satt inn i pylorisk kjertelområde nære ved større curvatur. Bykspyttkjertel fistula ble dannet ved anvendelse av spesial T-formet metallkanyle med lateral og hovedlemmer som tilpasset ved bruk for katter. Felles galletrakt ble oppdelt like før kobling av bukspyttkjertelkanalen og transplantert til øvre tolvfingertarm for å separere gallestrømmen fra bukspyttkjertelsaften. En liten tolvfingerpute inneholdende innførsel av viktigste bukspyttkjertelkanal ble dannet og lateral lem til bukspyttkjertel kanylen ble satt inn i denne puten. Hovedlemmen til kanylen ble plassert i distaltov-fingertarmen omtrent 3 cm forbi duodeno-duodenostoien.
Studier av utskillelsen begynte omtrent 3 måneder etter kirurgien, mat ble ikke tilført burene i minst 18 t. før hver test. I løpet av hver test (unntatt med foring) ble mavefistula latt stå åpen for å muliggjøre drenering av mavesaft til utsiden.
Sekresjon fra mavefistula ble samlet kontinuerlig og delt inn i 15 min. prøver. Volumet ble registrert og protein og bikarbonatkonsentrasjonene og utslagene ble bestemt som tidligere beskrevet (Konturek et al., 1976).
Flere serier av tester ble utført på hvert dyr for sammen-ligning av de sekretoriske potensene. GRP ble infusert i.v. i graderte doser (1250 pmol/kg-h GRP) i 1-dag testen uten eller med tilsetning av peptid 5. I tester med foring ble gastrisk fistula holdt lukket og hver katt mottok omtrent 50 g kokt homogenisert malt biff som vanligvis ble fullstendig konsumert. Intravenøs infusjon av saltvann (omtrent 10 ml/t) ble opprettholdt i løpet av den postpranidiale perioden og når responsen på bukspyttkjertelutskillelsen nådde et vedvarende platå ble peptid 5 administrert og sekresjonen ble undersøkt i en ytterligere periode på 2 t. I separate tester på fastende katter (uten peptid infusjon eller foring med kjøtt) ble den basale bukspyttkjertelsekresjonen (med åpen gastrisk fistula) målt i en 2 t. periode og deretter ble peptid 5 (10 nmol/kg-t) tilsatt til infusjonen ved en dose som fullstendig opphever bukspyttkjertelsekresjonen indusert av GRP. Resultatene er angitt nedenfor.
Bombesinanalogene peptidene (5), (10) og (2) ble testet in vivo på serumgastrin inhibisjon etter GRP-stimulering. Åtte
minutter etter stimulering med GRP (3>jg/100g BW) økte serumgastrin nivåene fra 16,7 pg/ml (kontroll) til 105 pg/ml.
Rotter injisert 10 min. før GRP-stimuleringen med en bolus av peptidene (5), (10) og (2) antagonistene (30 jjg/100 BW) viste en reduksjon i nivået av gastrinutskillelse (etter 8
min, 36,8 pg/ml for peptid (2); 24,2 pg/ml for peptid (10) pg 32,9 pg/ml for peptid (5).
Bombesin/GRP antagonistene er nyttige for behandling av tilstander av hypergastrinemi, for eksempel preniciøs anemi,
kronisk atrofisk gastritis, Zollinger-Ellison Syndrom og vittiligo, assosiert med diffus hyperplasi av gastriske enterokromafin-1ignende celler og med en øket risiko for utvikling av multifokale gastriske carcinoid tumorer.
Enterokromaffin-lignende celler hyperplasi blir lett produsert i dyr som blir gjort hypergastrinemiske.
En slik behandling er fordelaktig i forhold til kjente medikamenter på grunn av at Hg-antagonister som cimetidin som forårsaker hypergastrinemi og kan føre til carcinoid tumorer i mennesker. Stansing av terapi med Hg-antagonister forårsaker i tillegg en øyeblikkelig tilbakevending av sår på grunn av eksisterende hypergastrinemi.
På grunn av at disse forbindelsene kan antagonister av bombesin/GRP-reseptorer bli anvendt for behandling av lungecancer, tarmcancer og mavecancer.
På grunnlag av disse resultatene angitt ovenfor og data i rotter kan peptidene ifølge oppfinnelsen bli administrert i form av farmasøytisk akseptable, ikke-toksiske salter, så som syreaddisjonssalter, og eksempler på slike syreaddisjonssalter er hydroklorid, hydrobromid, sulfat, fosfat, fumarat, gluconat, tannat, maleat, acetat, sitrat, benzoat, succinat, alginat, pamoat, malat, ascorbat, tartrat og lignende.
Mikrokapsler eller mikropartikler av disse peptidene formulert fra poly(DL-lactid-coglycolid) kan være det foretrukne vedvarende leveringssystemet. Intravenøs, intramuskulær eller subkutant administrering i isotonisk saltvann, fosfatbufferoppløsninger eller lignende kan bli anvendt. Aerosoler for levering til lunger kan også bli anvendt.
Disse farmasøytiske sammensetningene vil inneholde peptider sammen med en konvensjonell, farmasøytisk-akseptabel bærer. Doseringen vil være fra omtrent 1 til 1000 \ ig av peptidet pr. kg kroppsvekt av verten når gitt parenteralt. Behandling av individene med disse peptidene kan bli utført på samme måte som den kliniske behandlingen ved anvendelse av andre agonister og antagonister av LHRH, somatostatinanaloger eller andre peptider.
Disse peptidene kan bli administrert til pattedyr intrave-nøst, subkutant, intramuskulært, intranasalt eller ved lungeaerosol for å oppnå gastrisk inhibisjon eller antitumor effekt. Effektive doseringen vil variere med formen for administrering og de bestemte artene av pattedyr som blir behandlet. Et eksempel på en typisk doseringsform er en fysiologisk saltvannsoppløsning inneholdende peptidet der oppløsningen blir administrert for å tilveiebringe en dose i området på omtrent 0,01 til 0,20 mg/kg kroppsvekt. Vedvarende lever ingsformuler inger kan bli gitt en gang pr. måned og varigheten av behandlingen kan være på flere måneder.
Til tross for at oppfinnelsen er blitt beskrevet med hensyn på foretrukne utførelsesformer er det innlysende at for-andringer og modifikasjoner kan bli utført uten å fravike
rammen av oppfinnelsen. Substitusjoner kjent innenfor fagområdet som ikke vesentlig fraviker fra dets effektivitet kan bli anvendt i oppfinnelsen.
Genrelle prosedyrer for polypeptldsyntese begynnende
med en boc- aminosyre- harpiksenhet
Prosedyre 1:
(1) vaske med CHgClg (3x1 min); (2) avspalt med 50$ TFA i CHgClg to ganger i 5 min. og 25 min. For peptidharpikser inneholdende D- eller L-Trp eller Tpi, avspaltning med 50$ TFA i CH2C12 inne-3 holdende 5$ merkaptoetanol og 5$ anisol; (3) vask med CHgClg (6x1 min.); (4) nøytraliser med 10$ trietylamin i CHgClg (2x3 min.) (5) vask med CHgClg (6x1 min.); (6) kobling: i) tilsetning av boc-aminosyre (3 ekv. ) bg
5 HOBt (3,3 ekv.) i DMF (3 min.)
ii) tilsetning av 20$ diisopropylkarbodimid
(3 ekv.) i CH2C12 og risting i 60-90 minutter (7) vaske med CH2C12 (2x1 min), etanol (2x1 min) og CH2C1<2> (5x1 min).
Prosedyre II:
For innføring av den reduserte peptidbindingen: -CH2NH. , "ble trinn (6) ifølge prosedyre (I) modifisert som følger:
(1) vaske med DMF (2x1 min.)
(2) tilsett bocleucinaldehyd (3 ekv.) i DMF inneholdende 1$ AcOH; (3) tilsetning av NaBH3CN (3,5 ekv.) i DMF og risting i 60 min.;
(4) vask med 50$ MeOH (3x1 min)
100$ MeoH (3x1 min)
CH2C12 (3x1 min)
Prosedyre III:
For kobling av Boc-Asn, Boc-Gln og Boc-Gly, blir trinn (6) ifølge prosedyre I modifisert som følger: 20$ diisopropylkarbodiimid (3 rkv.) i CH2C12 ble tilsatt til en blanding av DMF oppløsning av Bocaminosyre (3,0 ekv.) og HOBt (3,3 ekv.) ved 0°C i 15 min. og ved romtemperatur, uoppløselig materiale blir fjernet ved filtrering, filtratet tilsatt til peptidharpiks og ristet med Boc-Gln eller Boc-Asn i 2-4 timer eller Boc-Gly i ltime.
Prosedyre IV:
Følgende prosedyrer ble utført for innføring av Fmoc aminosyren. (1) etter avspaltning og nøytralisering, vask med CH2C12 (3x1 min) og DMF (3x1 min) (2) kobling i) tilsetning av Fmoc aminosyre (3 ekv.) og HOBt (3,3 ekv.) i DMF (3 min)
ii) tilsetning av 20$ diisopropylkarbodi-
imid (3 ekv.) CH2C12 og risting i 60
min.
(3) vask med etanol (3x1 min)
(4) avspaltning av Fmoc-gruppen med 50$ piperidin i DMF i
30 min.
(5) vask med DMF (6x1 min)
(6) en annen kobling som beskrevet i trinn (2)
Etter de ønskede forpeptidene med formel I er blitt dannet ble peptidharpiksen deretter behandlet med flytene HF i nærvær av anisol for å tilveiebringe polypeptidet i fri form hvor X med formel I var hydrogen og Y med formel I var NH2 eller OH; eller i beskyttet form hvor A<2> med formel I er Glu (OMe) eller His(Bz).
Omdanning av en funksjonell gruppe ved N, C-terminalen eller sidekjedegruppen til polypeptidet fra fri eller beskyttet form til en annen N eller C-terminal, eller sidegruppe funksjonell gruppe av polypeptidet ble utført med et egnet reagens i oppløsning. For eksempel ble et beskyttet polypeptid inneholdende Glu i posisjon A<2> omsatt med metylamin i nærvær av DIC for å oppnå et polypeptid inneholdende Glu(MeNH) i A<2->posisjonen. Et fritt N-terminalt polypeptid ble omsatt med KOCN for å gi et polypeptid inneholdende NH2C0- i X-posisjonen.
I følgende eksempler blir nummereringen anvendt for å identifisere mellomprodukter. Rekode a/b/Res er den opp-rinnelig harpiksen anvendt i eksempel "a" trinn "b". Kode a/b/c er en forløper for peptid "c" dannet i trinn "b" ifølge eksempel "a", a, b og c er alle tall.
Eksempel (1)
(1) A: Eksempel på L- og D- Tpi
2,04 g (10 mM) L-Trp ble løst opp i 25 ml kokende vann inneholdende 2,1 g sitronsyre. 0,5 ml 40$ formaldehyd ble tilsatt og de faste stoffene begynte øyeblikkelig å bli
dannet. Blandingen ble avkjølt i et isbad og de faste stoffene samlet og vasket med kaldt vann og fast stoffer lufttørket ved romtemperatur for å gi 2,14 g eller 99$ faste stoffer smp. med (dekomponering) ca. 310° . D-isomeren blir dannet på samme måte og har også smp. (dekomponering) ved ca. 310°C.
B: Eksempel på L- og D- Boc-Tpi
Til en omrørt suspensjon av 10,8 g (50 mM) D-Tpi i 250 ml 0,2 N NaOH og 7,5 ml trietylamin ble det tilsatt 10g Di-tert-butyldikarbonat og blandingen ble omrørt i 4 t. og deretter ble ytterligere 10g dikarbonat tilsatt og ytterligere 10g etter ytterligere 3 t. omrøring. Blandingen ble omrørt over natt og ekstrahert (2 x 100 ml) med eter som ble fjernet. Sitronsyre ble tilsatt til det vandige laget frem til surhet (pH 3-5). De faste stoffene ble samlet og vasket med vann og lufttørket over natt.
De faste stoffene ble suspendert i 100 ml tetrahydrofuran. Nesten alle faste stoffer ble oppløst. De uoppløselige stoffene ble fjernet ved filtrering og THF ble fjernet under vakuum. Resten ble triturert med eter for å tilveiebringe 9,20 58$. Dette materialet har samme smp. som utgangsmaterialet, men har forskjellig oppløselighet og TLC på silica ved anvendelse av 85:15:0,5 CHC13:MeOH.HOAc.
2,55 g L.Tpi gir 2,22 g eller 59$ Boc-Tpi ved anvendelse av samme metode.
(2) Eksempel på Boc-Leu-CHO
Boc-leucnmetylester (35 g, 134 mmol ) i tørr toluen (250 ml) under Ng ble avkjølt med tørr is/aceton og (150 ml) 25$ di-idobutyl-aluminiumhydrid i toluen ble tilsatt over 30 min. Blandingen ble omrørt i 20 min. i et bad av tørr is/aceton etter tilsetning av di-isobutylaluminiumhydrid og deretter ble metanol (15 ml) forsiktig tilsatt. Blandingen ble helt inn i 1000 ml iskaldt vann, ristet og filtrert. Toluen ble separert og den vandige fasen ble på ny ekstrahert med eter (3 x 300 ml). Toluen og eterekstraktene ble kombinert og tørket (NagSC^). Den resulterende oljen ble hurtig sendt gjennom en silica gel kolonne (3 x 50 cm) i 1500 ml 15$ EtOAc/petrol. Boc-Leualdehyd ble oppnådd som en olje (27,6g).
Eksempel 2
Peptid nr.
Polypeptidene i eksempelet inneholdt det samme fragmentet Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu NHg, men to forskjellige residier ved N-terminalen ble dannet trinn for trinn på benzhydryl (BHA) harpiksen i henhold til standard metodene for fast fase syntese.
0,50 g BHA harpiks (0,9 mmol NH2/g) ble behandlet med 10$ TEA i CHgClg (nøytralisering) to ganger hver i tre minutter og vasket med CHgClg seks ganger. Harpiksen ble blandet med 1,35 mmol Boc-Leu og 1,50 mmol 1-hydroksybenzotriazol (HOBt) i DMF i tre minutter. 20$ 1,3-diisopropylkarbodiimid (DIC) med 1,3 mmol i CHgClg ble tilsatt. Blandingen ble ristet ved romtemperatur i 60 minutter. Den resulterende Boc-Leu-BHA harpiksen ble vasket med CHgClg metanol to ganger hver og CHgClg tre ganger og deretter utsatt for en Kaiser test (Anal. Biochem. 34, 595 (1979)). I de tilfellene hvor ufullstendig kobling oppstår blir koblingsprosedyren gjentatt.
Fjerning av Boc-gruppen (avspaltning) fra Boc-Leu-BHA-harpiksen ble utført i en oppløsning av 50$ TFA i DCM i 5 minutter, filtrert og på ny behandlet i 25 min. og deretter vasket med DCM seks ganger.
Nøytraliseringen blir utført som beskrevet ovenfor for BHA-harpiksen.
Kobling av Boc-Leu-CHO blir utført som følgende prosedyre
(II):
(1) vaske med DMF to ganger; (2) tillsetning av 1,5 mmol Boc-Leu-CHO i DMF inneholdende 1$ AcOH; (3) tilsetning av 2,9 mmol NaBH3 i DMF og risting i 60 min. ; (4) Vask med 50$ metanol i H20 to ganger og 100$ MeOH to ganger CHgClg tre ganger;
Etter fjerning av Boc-gruppen fra Boc-Leu-psi-Leu-BHA-harpiksen og nøytralisering ble koblingen av Boc-His(Z) utført som beskrevet i prosedyre I.
Kobling av Boc-Gly blir utført som i prosedyre (III).
20$ 1,3-diisopropylkarbodiimid (1,5 mmol) i CHgClg ble tilsatt til en DMF oppløsning av 1,5 mmol Boc-Gly og 1,65 mmol HOBt ved 0°C, omrørt under avkjøling i 15 min. og ved romtemperatur i 15 min. og presipitatet ble filtrert ut og tilsatt til harpiksen og ristet i 60 min.
De påfølgende aminosyreresidiene Boc-Val, Boc-Ala og Boc-Trp ble deretter sekvensielt introdusert ved kobling på samme måte som angitt i prosedyre (I) for å gi 0,90 g beskyttet peptidharpiks med en struktur Boc-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks (2/1/res).
Etter inkorporering av Boc-Trp blir avspaltning av Boc-gruppen utført med 5 0$ TFA i DCM inneholdende 5$ merkaptoetanol og 5$ anisol for å tilveiebringe TFA-Trp-Ala-Val-Gly-Eis(Z)-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks (2/2/Res ).
0,91 g TFA-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks (2/2/res) blir delt inn i åtte porsjoner (omtrent 100 mg hver) som blir anvendt for å oppnå syntesen av konstruerte beskyttede polypeptidharpikser i henhold til prosedyrene beskrevet i prosedyre I for kobling av Boc-D-Trp, Boc-5F-D-Trp, Boc-D-Tpi og Boc-His(Z) og med prosedyre III for Boc-Gln.
Sekvensiell tilsetning av Boc-Gln og Boc-Trp til overnevnte heptapeptidharpiks (2/2/res) gir: Sekvensiell kobling av Boc-Gln og Boc-D-Trp til heptapeptidharpiks (2/2/res) gir;
Kobling av Boc-Gln og Boc-5F-D-Trp til heptapeptidharpiksen (2/2/res) fører til:
2/2/05 Boc-D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks blir oppnådd ved sukssesiv kobling av Boc-Gln og Boc-D-Tpi.
2/2/6 Boc-D-Tpi-Glu(0Me )-Trp-Al a-Val-Gly-His( Z )-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks blir oppnådd ved suksseiv kobling av Boc-Glu(OMe) og Boc-D-Tpi.
2/ 21 Gl Boc-D-Tpi -Hi s(Z)-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks blir oppnådd ved sukssesiv kobling av Boc-His(Z) og Boc-D-Tpi.
2/2/08 Boc-D-Tpi-His(Bz )Trp-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks blir oppnådd ved suksseseiv kobling av Boc-His(Bz) og Boc-D-Tpi.
Etter fjerning av Boc-gruppen med 50$ TFA i DCM inneholdende 5$ merkaptoetanol og 5$ anisol blir den Boc-avbeskyttede polypeptidharpiksen vasket med DCM, metanol og DCM tre ganger hver og behandlet med frisk destillert HF (5 ml) og anisol (0,25 ml) ved 0°C i 1 t. Oppløsningsmiddelet blir avdampet i vakuum og vasket med eter eller etylacetat og deretter ekstrahert med 70-80$ eddiksyre og lyofilisert for å tilveiebringe rå:
Peptid nr.
En blanding av 40 mg Trp-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-LeuNH2 (2/3/1) og 20 pl TEA i 0,5 ml DMF og 20 mg KOCN i 100 pl HgO ble omrørt ved 0°C og 100 pl AcOH ble deretter droppet inn i blandingen og omrørt ved 0°C i 1 time. Reaksjonsblandingen ble utsatt for rensing for å tilveiebringe:
Peptid (3) ble preparert ved sukssesiv kobling av Fmoc-Glu(OBut) og Fmoc-D-Trp ved fremgangsmåten angitt i prosedyre IV til Trp-Ala-Val-His(Z)-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks (2/2/res) gir Fmoc-D-Trp-Glu(OBut)-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)Leu-psi-Leu-BHA-harpiks (2/4/3). Peptidharpiksen ble behandlet med 10$ TFA i DCM inneholdende 5$ 2-merkaptoetanol i 30 minutter for å fjerne But-gruppen fra karboksylgruppen til Glu. Til vasking seks ganger med DCM ble MeNH2 boblet gjennom et Fmoc-D-Trp-Glu-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Leu-BHA-harpiks sjikt (2/5/res) i 5 ml DMF ved 0 ° C i 5 min., og 0,25 ml 20$ DIC i DCM ble tilsatt og omsatt ved 0"C i 2 timer. Harpiksen ble deretter vasket med DCM og Fmoc gruppen fjernet med piperidin.
Peptid (3) D-Trp-Glu(MeNH)Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu-NH2 (RC-3490) ble oppnådd etter behandling med HF.
Rensingen ble utført med HPLC med oppløsningssystemet bestående av (A) 0,1$ TFA og (B) 1$ TFA i 70$ acetonitril. Rensede peptider ble vist å være over 97$ rene i analytisk HPLC. Retensjonstidene til polypeptidene i dette eksempelet er beskrevet i følgende tabell.
ANALYTISK HPLC DATA
Resultatene av aminosyreanalysene for polypeptidene i dette eksempelet var som ventet. Aminosyreforholdene mellom peptid (2) og strukturen til D-Trp-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu-NH2 var 1.11:2.09:0.90:1.03:0.95:0.92 (Gin:Trp:Ala:Val:-Gly:His). Residiet Leu-psi-Leu viste en absorbsjonstopp med retensjonstid på 39,95 min. Tpi i peptidene (5), (6), (7) og (8) ble ikke detektert.
Eksempel 3
Polypeptidnr.
Polypeptidene i dette eksempelet inneholder det samme fragmentet Trp-Ala-Val-Gly-Eis-Leu-psi-PheNH2. Boc-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z )Leu-psi-Phe-BHA (3/1/res) harpiks ble dannet trinn for trinn på 0,5 g BHA harpiks (0,9 mmol NH2/g) i henhold til fastfase syntesen som beskrevet i eksempel (2) med unntagelse av at Boc-Phe er istedenfor Boc-Leu ved første kobling.
Partielt paptidharpiks inneholdende omtrent 150mg Boc-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Phe-BHA harpiks (3/1/res) blir hver koblet med de andre to residiene ifølge prosedyrene beskrevet i prosedyre I for kobling av Boc-Trp, Boc-D-Trp-Boc-D-Tpi og Boc-Glu(0Me) og prosedyre III for Boc-Gln for å gi den endelige polypeptidharpiksen.
Sekvensiell kobling av Boc-Gln og Boc-Trp til overnevnte heptapeptidharpiks (3/1/res) gir:
Sukssesiv tilsetning av Boc-Gln og Boc-D-Trp til heptapeptidharpiksen (3/1/res) gir:
Kobling av Boc-Gln og Boc-D-Tpi til heptapeptidharpiksen (3/1/res) gir:
3/2/13. Boc-D-Tpi-Glu(MeOH)-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Phe-BHA-harpiks blir dannet ved kobling av Boc-Glu(OMe) og Boc-D-Tpi til heptapeptidharpiks (3/1/res).
Etter fjerning av Boc-gruppen med 50$ TFA iDCM inneholdende 5$ merkaptoetanol og 5$ anisol ble polypeptidharpiksen vasket med DCM, metanol og DCM tre ganger hver og behandlet med frisk destillert HF (5 ml) og anisol (0,25 ml) ved 0°C i 1 time. Oppløsningsmiddelet blir avdampet i vakuum og vasket med etylacetat, ekstrahert med 70-80$ eddiksyre og lyofilisert. Følgende polypeptider blir oppnådd som følger:
Peptid nr.
Peptidet med NH2C0 ved N-terminalen ble preparert ved følgende prosedyre: En blanding av 40 mg råpolypeptid (3/3/9) Trp-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Phe-NH2 og 20 pl TEA i 0,5 ml DMF og 20 mg K0CN i 100 pl H20 ble omrørt ved 0"C og 100 pl AcOH ble derette droppet inn i overnvente blanding og reaksjonen ble omrørt ved 0°C i 1 t. Reaksjonsblandingen inneholdende det ønskede peptidet (9) NH2C0-Trp-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Phe-NH2 ble utsatt for HPLC rensing.
Peptid (11) ble preparert ved sukssesiv kobling av to Fmoc-aminosyrer ved fremgangsmåten indikert i fast-fase syntese prosedyre IV.
150 mg TFATrp-Ala-Val-Gly-His(Z)Leu-psi- Phe-BHA harpiks (3/1/res) ble nøytralisert med 10$ TEA, vasket med CH2C12 og DMF og koblet med Fmoc-Glu(OBut) for å tilveiebringe Fmoc-Glu(0But)-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Phe-BHA harpiks (3/5/11). Fmoc-D-Trp-Glu(OBut )-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Phe-BHA harpiks ble oppnådd etter avspaltning med 50& piperidin og og kobling med Fmoc-D-Trp. But gruppen ble fjernet fra den Fmoc beskyttede pept idharpiksen ved behandling med 10$ TFA i DCM inneholdende 2$ merkaptoetanol i 30 min. MeNH2 ble boblet gjennom et sjikt av 200 mg Fmoc-D-Trp-Glu-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)Leu-psi-Phe-BHA harpiks (3/6/11) i 5 ml DMF ved 0°C i 5 min., 0,2 ml 20$ DIC i DCM ble tilsatt og blandingen omrørt ved 0"C i 2 t. Harpiksen ble deretter vasket med DCM og Fmoc-gruppen ble fjernet med piperidin. Etter behandling med HF og anisol ble peptidet (11) D-Trp-Glu(MeNH)Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-PheNH2 utsatt for rensing med HPLC.
Retensjonstidene til peptidene i dette eksempelet er angitt i følgende tabell.
Analytiske HPLC data
Forholdet mellom aminosyrene vist ved aminosyreanalyser var som ventet. For eksempel var forholdene av peptid (10) D-Trp-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Phe-NH2 1,15:0.96:0,95:1:01:-0,94:1,97 (Glu:Gly:Ala:Val:His:Trp) og hadde en topp med retensjonstid på 44,56 min. Forholdene til peptid (13) var 1,04:0,98:1,02:1,00:1,03:0,94 ( Glu:Gly:Ala:Val:His:Trp) og en absorpsjonstopp med retensjonstid 44,56 Leu-psi-Phe. Tpi i peptid (13) ble ikke detektert.
Eksempel 4
Peptid nr.
Leu-psi-Tpi-BHA harpiksen blir dannet ved omsetning av Boc-Leu-psi-Trp-BHA harpiksen med formaldehyd i henhold til prosedyrene som følger: Boc-Leu-psi-Trp-BHA harpiks blir oppnådd fra l,0g BHA harpiks (0,9 mmol NH2/g) med sukssesiv kobling av Boc-Trp og Boc-Leu-CHO ved fremgangsmåten angitt i prosedyre I og prosedyre II. 10 ml DMF inneholdende 1$ eddiksyre blir tilsatt til ovennevnte peptidharpiks og deretter omsatt med 1 ml 10$ formaldehyd ved romtemperatur i 60 min. og vasket med DMF, MeoH og DCM.
Alle polypeptidene i dette eksempelet inneholder et felles fragment Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NH2.Boc-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks (4/1/res) ble dannet trinn for trinn på Leu-Psi-Tpi.BHA harpiksen ved sukssesiv kobling av Boc-His(Z) (prosedyre I), Boc-Gly (prosedyre III), Boc-Val, Boc-Ala og Boc-Trp (prosedyre I).
En 150 mg del av overnevnte mellompeptidharpiks blir utsatt for to ytterligere koblinger med prosedyrene beskrevet i prosedyre I for kobling av Hea, D-pGlu, Boc-Glu(OMe), Boc-Glu(OBz), Boc-D-Phe, Boc-D-Trp, Boc-His(Bz), Boc-Tpi, Bod-D-Tpi, AC-Tpi og Hna-Tpi og ved prosedyre III for Boc-Gln for å tilveiebringe de endelige peptidharpiksene.
Kobling av Boc-Gln og Hea sekvensielt til overnevnte heptapeptidharpiks (4/1/res) gir:
Sekvensiell tilsetning av Boc-Gln og D-pGlu til heptapeptidharpiksen (4/1/res) gir:
Sukssesiv kobling av Boc-Glu(OBz) og Boc-Phe til ovennevnte forpeptidharpiks (4/1/res) gir: Kobling av Boc-Gln og Boc-D-Phe til heptapeptidharpiksen (4/1/res) gir
4/2/18. Boc-D-Trp-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks blir dannet ved kobling av Boc-Gln og Boc-D-Trp til heptapeptid harpiks
(4/1/res).
4/2/19. Boc-D-Trp-His(Bz )-Trp-Ala-Vall-Gly-His(Z )-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks blir dannet ved kobling av
Boc-His(Bz) og Boc-D-Trp til heptapeptidharpiks (4/1/res).
4/2/21. Boc-D-Trp-Glu(OMe )-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks blir dannet ved kobling av Boc-Gln(MeO) og Boc-Tpi til heptapeptidharpiks (471/res).
4/2/22 . Boc-Tpi-Gln-rp-Ala-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks blir dannet ved kobling av Boc-Gln og Boc-Tpi til heptapeptidharpiks (471/res).
4/2/23. Ac-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His (Z)-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks blir dannet ved kobling av Boc-Gln og Ac-Tpi til heptapeptidharpiks (4/1/res).
4/2/25. Hna-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks blir dannet ved kobling av Boc-Gln og Hna-Tpi til heptapeptidharpiks (4/1/res).
4/2/26 . Boc-D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Tpi-BHA harpiks blir dannet ved kobling av Boc-Glu og Boc-D-Tpi til heptapeptidharpiks (4/1/res).
Etter fjerning av Boc-gruppen og behandling av overnevnte med HF og anisol som beskrevet i eksempel (2) og (3) blir følgende peptider oppnådd:
Peptid nr.
Peptid nr.
20 mg Phe-Glu-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NH2 (4/3/16), 5 mg dlfenylfosforylazld og 10 mg KHCO3 i 0,5 ml DMF ble omrørt ved 0°C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble utsatt for rensing med HPLC ved anvendelse av oppløsningsmiddelsystemet 40-70$ B i 60 min. for å tilveiebringe: Peptid (16). Phe-Glu-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NH2 omtrent 4,5 mg. Med renhet på (>95$) ved analytisk HPLC ved anvendelse av oppløsningsmiddelsystemet 25-65$ i 40 min.
En blanding av 40 mg råpolypeptid 22 Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NH2, 20 ul TEA i 0,5 ml DMF og 20 mg KOCN i 100 ul H20 ble omrørt ved 0°C. Få minutter senere ble 1++ ul AcOH droppet inn i overnevnte blanding og reaksjonen ble omrørt ved 0°C i 1 t. Reaksjonsblandingen inneholdende det ønskede oligo(peptidet): Peptid (24. NH2C0-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NHg ble utsatt for rensing med HPLC.
Fmoc-D-Trp-Gln(0But)-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Tpi-BHA-harpiks (4/2/res) ble dannet ved sukssesiv kobling av Fmoc-Glu(OBut) og Fmoc-D-Trp to Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Tpi-BHA-harpiks (4/1 res) ifølge fremgangsmåten angitt i preosedyre IV. Etter fjerning av But gruppe med 10$ TFA i DCM inneholdende 2$ 2-merkaptoetanol i 30 min., blir petid-harpiksen omsatt med MeHH2 og DIC ved fremgangsmåtene beskrevet i eksempel (3) for peptidharpiks (3/6/11) for å oppnå Fmoc-D-Trp-Glu(MeNH)-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)Leu-psi-Tpi-BHA harpiks (4/3/res). Etter fjerning av Fmoc-gruppen med piperidin ble peptidharpiksen behandlet med HF (5 ml) og anisol (0,25 ml) ved 0°C i 1 time for å tilveiebringe
peptid (20) D-Trp-Glu-(MeNH)-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NH2.
Retensjonstiden til peptidene i dette eksempelet er angitt ifølgende tabell.
Analytisk HPLC data
Aminosyreanalyse av peptidene i dette eksempelet ga de ventede sammensetningene. For eksempel hadde D-Phe-Gln-Trp-Ala-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NH2 (1?) forholdene 1,04:0,99:0,96:-1,00:0,94:0,99:1,06 (Glu:Gly:Ala:Val:Phe:His:Trp) Tpi i peptid nr. 17, 24 og 26 kom ikke frem i aminosyreanalysen.
Eksempel 5
Peptid nr.
Peptidene i dette eksempelet inneholder et felles fragment Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Trp-NH2 eller Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Trp(For)-NH2• Boc-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Trp(For)-BHA harpiks (5/1/res) blir dannet på 1,0 g BHA harpiks (0,9 mmol NH2/g) ved sukssesiv kobling med utførelse av fast fase syntese som beskrevet i eksempel (2) med unntagelse av at Boc-Trp(For) istedenfor Boc-Ley ved første kobling. 250 mg deler av overnevnte peptidharpikser blir anvendt for å oppnå syntesen av følgende fire beskyttede peptidharpikser ved den endelige koblingen med henholdsvis MPP, Boc-D-Phe, Boc-D-Trp eller Boc-D-Tpi, ifølge prosedyren beskrevet i prosedyre I.
Etter fjerning av Boc-gruppen med 50% TFA i DCM inneholdende 5% merkaptoetanol og 5% anisol ble halvparten av hver av de ovennevnte peptidharpiksene behandlet med HF (5 ml) og anisol (0,25 ml) ved 0°C i 1 time for å tilveiebringe peptider som følger:
Peptid nr.
Den gjenværende halvdelen av hver peptidharpiks ble behandlet med HF inneholdende 5% anisol og 5% dimerkaptoetanol ved 0°C ilt. for å tilveiebringen peptider som følger:
Peptid nr.
Peptidene ble renset med HPLC og retensjonstidene er angitt i følgende tabell:
Analytiske av HPLC data
Data fra aminosyreanalyse for peptidene i dette eksempelet var som ventet. For eksempel har (28) aminosyre forhold på 0,98:0,92.1,03:0,97:0,98:1,09 (Gly:Ala:Val:Phe:His:Trp ). Tpi i (30) og (34) ble ikke vist
Eksempel 6
Peptid nr.
<;> Boc-Trp-OCHg-harpiksen blir anvendt som utgangsmateriale som blir dannet ved følgende prosedyre: en blanding av CICHg-harpiks (l,0g, 0,7 mmol Cl/g), Boc-Trp (2,0 Trp mmol) og KF
(4 mmol) i 20 ml DMF ble omrørt ved 70-80°C 1 4 timer. Boc-Trp-0CH2-harpiksen ble deretter vasket to ganger hver med MeOH, H20, MeOH, DMF og DCM. Boc-Leu-psi-Trp-OCH2-harpiks blir oppnådd ved kobling av Boc-Leu-CHO til Trp-OCH2-harpiks med prosedyre II. Boc-Leu-psi-Tpi-OCH2-harpiks blir oppnådd ved omsetning av Boc-Leu-psi-Trp-0CH2-harpiks med formaldehyd ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel (4). ved sukssesiv kobling av Boc-His(Z), Boc-Gly-Boc, Val-Boc-Åla-Boc-Trp og Boc-Gln med prosedyrer for fast fase syntese beskrevet som før, ble 1,60 g Boc-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z )-Leu-psi-Tpi-OCH2-harpiks (6/1/res) oppnådd. En del av overnevnte forpeptidharpiks ble anvendt for å tilveiebringe Boc-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Tpi-0CH2-harpiks (6/2/35) ved kobling av Boc-Tpi. En annen alikvot av poeptidharpiksen ble anvendt for å tilveiebringe Boc-D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)Leu-psi-Tpi-0CH2-harpiks 6/2/36 ved kobling av Boc-D-Tpi .
Etter fjerning av Boc-gruppen med 50$ TFA i DEM inneholdende 5$ merkaptoetanol og 5$ anisol ble transforestringsprosedyren utført som følger: 0,5g Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Tpi-0CH2-harpiks (6/3/35) metanol (15 ml) DMF (15 ml) og diisopropyletylamin (3 ml) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 3 dager. Harpiksen ble vasket med DMF (3 ganger) og metanol (3 ganger). Filtratet og vaskingene ble kombinert og avdampet ved roterende avdampning i vakuum for å fjerne oppløsningsmidlene. Etter behandling HF og anisol ble 123 mg rå
oppnådd.
ble oppnådd ved samme prosedyre, men begynnende med (6/2/36).
En blanding av Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-TpiOCH3 (35) (40 mg), 20 ul TEA i 0,5 ml DMF og 50 mg KOCN i 100 ul H20 ble omrørt ved 0°C og noen minutter senere ble 50 ul AcOH tilsatt til blandingen og omsatt ved 0°C i 1 t. Blandingen blir deretter utsatt for rensing for å gi En blanding av D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-TpiOCH3 (36) og en 1:2 v/v oppløsning av metylamin i metnaol (2 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 16 t. Etter avdampning ved roterende avdampning i vakuum ble residie materialet frysetørket og behandlet med HF og anisol. Produktet var
som ble utsatt for rensing ved HPLC.
En annen del av D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His(Z)-Leu-psi-Tpi-OCHg-harpiksen (6/2/35) ble behandlet med HF og anisol for å gi :
En blanding av peptid 39 (40 mg), (Boc)20 (20 mg) og TEA (10 ul) i 0,5 DMF ble omrørt ved 0°C i 4 t og lyofilisert. Etter vasking med eter ble resten, HOBt (10 mg) og N2H3C0NH2 (20 mg) omsatt med DCI (100 ul 20$ DCI i DCM) ved 0°C over natt, DMF ble avdampet, vasket med eter og Boc-gruppen ble fjernet med 50$ TFA inneholdende 5$ merkaptoetanol og anisol for å gi rå
Claims (6)
1.
Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive polypeptider med formel I:
hvor
Q er NHg eller OQ<1> hvor Q<1> er hydrogen, C^_^g-alkyl, fenyl eller fenyl-C7_iø-alkyl >
X er hydrogen eller en enkelt binding koblet til A<2>, acylresidiet til en organisk syre eller en gruppe med formel R<1>CO-
hvor
(1) R<1> er hydrogen, C^_^Q-alkyl, fenyl eller fenyl-Cy_^Q<->
alkyl;
hvor
R<2> er hydrogen, C^-^^o-3-1^1» fenyl eller £7- 10? enyl-Cy.^Q-alkyl, R<3> er hydrogen eller C^_io alkyl; (b) R<4->0-CO- hvor R4 er C-^Qalkyl, fenyl eller
fenyl-C7_10-alkyl
A<1> er D-, L- eller DL- pGlu, Nal, Phe, Thi , Tyr, Tpi, Hea, Hpp,. Mpp, Trp eller Trp substituert i benzenringen med en eller flere ledd valgt fra gruppen bestående av halogen, NOgt NH2, OH, C^s-alkyl og C1_3-alkoksy hvor halogen er fluor, klor og brom,
A<2> er Asn, Dpa, Gin, His, MeHis, His(Bz), His(X) eller en gruppe med formel Dpa (X), Asp (Y), Glu[-> og Glu (Y) hvor
X er som ovenfor
R<5> er hydrogen, Ci_3 alkyl eller fenyl;
R<5> er hydrogen eller C1_3alkyl;
R<7> er hydrogen, C1_3alkyl eller -NHC0NH2
og [-] er en enkelt binding som kobler sidekarboksylgruppen med alfaaminogruppen til A<1> hvor X er en enkeltbinding,
A<3> er Nal, Pal, Tpi, Trp, MeTrp, Trp(For) eller Trp substituert i benzenringen med en eller flere ledd valgt fra gruppen bestående av halogen, N02, NH2, OH, C1_3alkyl og 3-alkoksy hvor halogen er fluor, klor og brom;
A<4> er Ala, MeAla eller Gin;
A<5> er Val eller MeVal;
A<6> er Gly, Phe eller D-Ala;
A<7> er His, MeHis, His(Bz), His(Z), Lys(Z) eller Pal;
A» er en redusert isoster av Leu eller Phe;
A<9> er Leu, Phe, Tpi, Trp eller Trp substituert i benzenringen med en eller flere ledd valgt fra gruppen bestående av halogen, N02, NH2, OH, C^_3alkyl og C^_3alkoksy hvor halogen er fluor, klor og brom; forutsatt at når A<9> er Leu eller Phe er A<1> forskjellig fra D-Nal eller DL-Phe og hvor A<1> er D-Nal eller DL-Phe er A<9> forskjellig fra Leu eller Phe og saltene derav, karakterisert ved farmasøytisk akseptable syrer ved fragment kondensasjon av de tilsvarende peptidfragmentene som vanlig innen peptidkjemi eller ved trinnvis syntese som er vanlig i peptidkjemien og når nødvendig blir de på denne måten oppnådde peptidene acylert og/eller omdannet tiol farmasøytisk akseptable syresalter.
2.
Fremgangsmåte for fremstilling av polypeptid ifølge krav 1, hvor
hvor
Q er NHg eller OQ<1> hvor Q<1> er hydrogen, C^^g-alkyl, fenyl eller C7_ig-fenyl-alkyl;
X er hydrogen, en enkeltbinding som kobler alfa-aminogruppen A<1> til sidekarboksylgruppen, hvor til stede, A<2>, eller en gruppe med formel R^-CO- hvor R<1> blir valgt fra gruppene bestående av: (a) hydrogen, C]__lg-alkyl, fenyl eller C^.<ig>-<f>enyl-
alkyl;
hvor R<2> er hydrogen, C^_<1>Q-alkyl, fenyl eller C7_^0-<fe>nyl-alkyl , R3 er hydrogen eller Ci- ±q alkyl; og (c) R4 -0- hvor R"1 er C^_^g-alkyl , fenyl eller
c7-10"fenyl-alkyl.
A<1> er L-, D- eller DL-Tpi,
A<2> er Asn, Dpa, Gin, His, MeHis, His(Bz), His(Z) eller en gruppe med formel Asp (Y), Glu[-] og Glu (Y);
hvori
R<5> er hydrogen, C^_3 alkyl eller fenyl; R<5> er hydrogen eller Cj^alkyl;
R<7> er hydrogen, C1_ 3 alkyl eller -NHC0NH2;
og [-] er en enkeltbinding som kobler sidekarboksylgruppen, når til stede, av A<2> med alfa-aminogruppen til A<1> hvor X er en enkeltbinding;
A<3> er Nal, Pal, Tpi, Trp, MeTrp, Trp(For) eller Trp substituert i benzenringen med en eller flere ledd valgt fra gruppen bestående av halogen, NOg, NHg, OH, C^_3 alkyl og C^_ 3-alkoksy hvor halogen er fluor, klor og brom;
A<4> er Ala, MeAla eller Gin;
A<5> er Val eller MeVal;
A<6> er Gly, Phe eller D-Ala;
A<7> er His, MeHis, His(Bz), His(Z), Lys(Z) eller Pal;
A» er en redusert isoster av Leu eller Phe;
A<9> er en D-, L- eller DL-aminosyrerest valgt fra gruppen bestående av Leu, Phe, Trp eller Trp(For); og salter derav, karakterisert ved at tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.
3.
Fremgangsmåte for fremstilling av polypeptid ifølge krav 1, hvor det har formelen D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu-NHg, karakterisert ved at tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.
4 .
Fremgangsmåte for fremstilling av polypeptid ifølge krav 1, hvor det har formelen D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NH^karakterisert ved at tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.
5 .
Fremgangsmåte for fremstilling av polypeptid ifølge krav 1, hvor det har formelen Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NHg, karakterisert ved at tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.
6.
Fremgangsmåte for fremstilling av polypeptid ifølge krav 1, hvor det har formelen D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Tpi-NHg, karakterisert ved at tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/619,747 US5244883A (en) | 1990-11-29 | 1990-11-29 | Nonapeptide bombesin antagonists |
| PCT/US1991/008534 WO1992009626A1 (en) | 1990-11-29 | 1991-11-15 | Nonapeptide bombesin antagonists |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO931977L NO931977L (no) | 1993-05-28 |
| NO931977D0 NO931977D0 (no) | 1993-05-28 |
| NO311362B1 true NO311362B1 (no) | 2001-11-19 |
Family
ID=24483142
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO19931977A NO311362B1 (no) | 1990-11-29 | 1993-05-28 | Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive polypeptider |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5244883A (no) |
| EP (1) | EP0559756B1 (no) |
| JP (1) | JPH06503090A (no) |
| KR (1) | KR100225679B1 (no) |
| AT (1) | ATE120760T1 (no) |
| AU (1) | AU657723B2 (no) |
| CA (1) | CA2097192C (no) |
| CZ (1) | CZ281533B6 (no) |
| DE (1) | DE69108738T2 (no) |
| DK (1) | DK0559756T3 (no) |
| ES (1) | ES2072137T3 (no) |
| FI (1) | FI104253B1 (no) |
| GR (1) | GR3015866T3 (no) |
| HU (2) | HU213114B (no) |
| IE (1) | IE62722B1 (no) |
| LV (1) | LV5794B4 (no) |
| MC (1) | MC2326A1 (no) |
| NO (1) | NO311362B1 (no) |
| NZ (1) | NZ240628A (no) |
| PL (1) | PL169498B1 (no) |
| PT (1) | PT99667B (no) |
| RU (1) | RU2115659C1 (no) |
| SK (1) | SK283541B6 (no) |
| WO (1) | WO1992009626A1 (no) |
| YU (1) | YU48751B (no) |
| ZA (1) | ZA919387B (no) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5877277A (en) | 1987-09-24 | 1999-03-02 | Biomeasure, Inc. | Octapeptide bombesin analogs |
| US5723578A (en) * | 1987-09-24 | 1998-03-03 | The Administrators Of Tulane Educational Fund | Peptide analogs of bombesin |
| WO1991004040A1 (en) * | 1989-09-15 | 1991-04-04 | Biomeasure, Inc. | Treatment of colon cancer |
| US5162336A (en) * | 1990-06-21 | 1992-11-10 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Tetrahydro-pyrido-indoles as cholecystokinin and gastrin antagonists |
| US5834433A (en) * | 1990-07-26 | 1998-11-10 | Merrell Pharmaceuticals Inc. | Compounds and pharmaceutical uses of peptides of bombesin and GRP |
| US5369094A (en) * | 1990-11-29 | 1994-11-29 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Polypeptide bombesin antagonists |
| EP0626973A1 (en) * | 1992-02-07 | 1994-12-07 | Merrell Pharmaceuticals Inc. | Phenylalanine analogs of bombesin |
| US5620955A (en) * | 1993-06-18 | 1997-04-15 | Peptide Technologies Corporation | Bombesin receptor antagonists and uses thereof |
| DE4320201A1 (de) * | 1993-06-18 | 1995-01-12 | Asta Medica Ag | Verwendung von Cetrorelix und weiteren Nona- und Dekapeptiden zur Herstellung eines Arzneimittels zur Bekämpfung von Aids und zur Wachstumsstimulation |
| US5997870A (en) * | 1994-06-03 | 1999-12-07 | Ludwig Institute For Cancer Research | Isolated peptides which bind to HLA-B44 Molecules |
| US5650395A (en) * | 1995-03-13 | 1997-07-22 | Hurel; Steven | Treatment of pulmonary hypertension |
| US5972895A (en) * | 1996-12-11 | 1999-10-26 | A. Glenn Braswell | Composition and method for increasing growth hormone levels |
| CA2283854A1 (en) * | 1997-04-22 | 1998-10-29 | The Curators Of The University Of Missouri | Gastrin receptor-avid peptide conjugates |
| US7850947B2 (en) * | 2003-01-13 | 2010-12-14 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7922998B2 (en) * | 2003-01-13 | 2011-04-12 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7226577B2 (en) * | 2003-01-13 | 2007-06-05 | Bracco Imaging, S. P. A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| EP1583564B1 (en) * | 2003-01-13 | 2009-07-01 | Bracco Imaging S.p.A | Improved linkers for radiopharmaceutical compounds |
| US8420050B2 (en) * | 2003-01-13 | 2013-04-16 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US20060239923A1 (en) * | 2003-01-13 | 2006-10-26 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7611692B2 (en) * | 2003-01-13 | 2009-11-03 | Bracco Imaging S.P.A. | Gastrin releasing peptide compounds |
| US7795385B2 (en) * | 2004-12-17 | 2010-09-14 | Bexar Global, Inc. | Use of bombesin/gastrin-releasing peptide antagonists for the treatment of inflammatory conditions, acute lung injury and bipolar disorder |
| EP1872795A4 (en) * | 2005-04-21 | 2009-07-22 | Astellas Pharma Inc | THERAPEUTIC AGENT AGAINST IRRITATION SYNDROME |
| US8557776B2 (en) * | 2006-09-08 | 2013-10-15 | Bayer Pharma AG | Compounds and methods for 18F labeled agents |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4839465A (en) * | 1987-01-20 | 1989-06-13 | Sterling Drug Inc. | Di-(D-tryptophyl and/or tetrahydropyridoindolylcarbonyl)-containing peptide amides and process for preparation thereof |
| WO1989002897A1 (en) * | 1987-09-24 | 1989-04-06 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Therapeutic peptides |
| GB8808768D0 (en) * | 1988-04-14 | 1988-05-18 | Erba Carlo Spa | Peptide ligands for bombesin receptors |
| GR1000608B (el) * | 1988-07-21 | 1992-08-31 | Erba Carlo Spa | Μεθοδος για την παρασκευη ανταγωνιστων bombesin. |
| MC2144A1 (fr) * | 1988-10-14 | 1992-02-19 | Univ Tulane | Peptides therapeutiques |
-
1990
- 1990-11-29 US US07/619,747 patent/US5244883A/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-11-15 DK DK92900740.9T patent/DK0559756T3/da active
- 1991-11-15 MC MC912326D patent/MC2326A1/xx unknown
- 1991-11-15 ES ES92900740T patent/ES2072137T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-11-15 KR KR1019930701620A patent/KR100225679B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-11-15 HU HU9301567A patent/HU213114B/hu unknown
- 1991-11-15 CA CA002097192A patent/CA2097192C/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-11-15 CZ CS931006A patent/CZ281533B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1991-11-15 SK SK551-93A patent/SK283541B6/sk unknown
- 1991-11-15 DE DE69108738T patent/DE69108738T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-11-15 RU RU93041053A patent/RU2115659C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1991-11-15 EP EP92900740A patent/EP0559756B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-11-15 JP JP4501946A patent/JPH06503090A/ja active Granted
- 1991-11-15 PL PL91300477A patent/PL169498B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1991-11-15 WO PCT/US1991/008534 patent/WO1992009626A1/en active IP Right Grant
- 1991-11-15 AT AT92900740T patent/ATE120760T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-11-15 AU AU90645/91A patent/AU657723B2/en not_active Ceased
- 1991-11-18 NZ NZ24062891A patent/NZ240628A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-11-22 YU YU183491A patent/YU48751B/sh unknown
- 1991-11-28 IE IE414091A patent/IE62722B1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-11-28 ZA ZA919387A patent/ZA919387B/xx unknown
- 1991-11-29 PT PT99667A patent/PT99667B/pt not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-05-28 NO NO19931977A patent/NO311362B1/no unknown
- 1993-05-28 FI FI932457A patent/FI104253B1/fi not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-04-19 GR GR950400995T patent/GR3015866T3/el unknown
- 1995-06-27 HU HU95P/P00466P patent/HU211603A9/hu unknown
-
1996
- 1996-07-22 LV LV960305A patent/LV5794B4/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO311362B1 (no) | Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive polypeptider | |
| EP0309297B1 (en) | Therapeutic peptides | |
| US5084555A (en) | An octapeptide bombesin analog | |
| US6307017B1 (en) | Octapeptide bombesin analogs | |
| KR100306506B1 (ko) | 폴리펩티드봄베신길항제 | |
| US5723578A (en) | Peptide analogs of bombesin | |
| WO1994021674A9 (en) | Polypeptide bombesin antagonists | |
| EP2198878A1 (en) | Polypeptide bombesin antagonists | |
| JP3040166B2 (ja) | ノナペプチドのボンベシン拮抗薬 | |
| HRP921277A2 (en) | Nonapeptide bombestin antagonists | |
| AU622123C (en) | Therapeutic peptides |