NO174898B - Testsett og fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika i melk, og en Streptococcus thermophilus-stamme for anvendelse derav - Google Patents
Testsett og fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika i melk, og en Streptococcus thermophilus-stamme for anvendelse derav Download PDFInfo
- Publication number
- NO174898B NO174898B NO880885A NO880885A NO174898B NO 174898 B NO174898 B NO 174898B NO 880885 A NO880885 A NO 880885A NO 880885 A NO880885 A NO 880885A NO 174898 B NO174898 B NO 174898B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- milk
- antibiotics
- test
- test set
- indicator
- Prior art date
Links
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims abstract description 22
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims abstract description 22
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 title claims abstract description 20
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 title claims abstract description 13
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 2
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 claims description 2
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 claims description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 10
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 6
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 6
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 6
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)phenol Chemical compound OC1=CC=C(CBr)C=C1 MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000193385 Geobacillus stearothermophilus Species 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 2
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N Lactic Acid Natural products CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 239000002696 acid base indicator Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000000383 hazardous chemical Substances 0.000 description 1
- 231100000206 health hazard Toxicity 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 1
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 235000020185 raw untreated milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
- C12Q1/14—Streptococcus; Staphylococcus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/18—Testing for antimicrobial activity of a material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/195—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria
- G01N2333/315—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Streptococcus (G), e.g. Enterococci
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse gjelder et testsett som
er egnet for bestemmelse av antiobika i melk. Oppfinnelsen gjelder også en ny Streptococcus thermophilus-stamme som kan anvendes i testsettet, og en fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika i melk ved hjelp av nevnte testsett.
I mange situasjoner er det av vital betydning å
være i stand til å påvise nærværet av små mengder av antibiotika. Dette er tilfellet i næringsmiddelindustrier,
f.eks. når den økede bruken av antibiotika og kjemotera-peutiske substanser ved behandling av dyr har skapt et behov for en enkel, pålitelig og følsom bestemmelsesmetode. Da antibiotika også anvendes ved behandling av kuer og da antibiotikarester i melk både kan forårsake helsefarer og være uheldig av næringsmiddelteknologiske grunner, er det spesielt viktig å utvikle fremgangsmåter som er egnet for en nøyaktig og rask undersøkelse av melk.
Antibiotikarester i melk påvises generelt ved
hjelp av mikrobiologiske prosesser som anvender det faktum at bakterier er i stand til å produsere syre, redusere farger og produsere vekst på et agarmedium. Disse prosessene er basert på den baktericide, inhiberende og morfologiske effekten av antibiotika på visse mikroorganismer.
Thermocult-skiveteknikken er en agardiffusjons-teknikk som er meget brukt i Finland og akseptert som en offisiell fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika. I denne teknikken er testorganismen B. stearothermophilus var. calidolactis. Den er utviklet på basis av en IDF standard-prosess (IDF 1970). En fremgangsmåte med tilsvarende føl-somhet er beskrevet av van Os et al., Diffusion Test for the Determination of Antibiotic Residues in Milk. Neth. Milk and Diary J. 29 (1975) 16. Delvotestprosessen anvender også B. stearothermophilus var. calidolactis som testorgan-isme. En prøve (0,1 ml) pipetteres på agar som inneholdes i en ampulle, og en tablett inneholdende næringsstoffer og en pH-indikator tilsettes til ampullen. Denne fremgangsmåte er basert på testorganismens syreproduserende evne. Ampullene inkuberes ved 64°C i 2,5 timer. Bestemmelsen er basert på
fargeforandringen i agarskiktet.
Standardteknikker omfatter dessuten Intertesten (BCP-test). Den testmikrobe som anvendes i fremgangsmåten, er Str. thermophilus. En testtablett inneholdende en lyofilisert kultur av testmikroben, næringsstoffer og en pH-indikator (bromcresolfiolett), tilsettes til en melkeprøve. Inkuberingstiden er 4 timer ved 45°C. Dersom prøven ikke inneholder noe antibiotikum, forandres løsningens farge fra blå til grønn og videre til gul. Mengden av antibiotikum kan til en viss grad bestemmes på basis av fargen ved å sammen-ligne med et fargekart (Thorogood et al., An Evaluation on the Charm Test - A Rapid Method for the Detection of Penicillin in milk. J. Dairy Research 50 (1983) 185).
En ulempe ved disse fremgangsmåter er deres util-strekkelige følsomhet i betraktning av behovene i melke-teknologien.
Bestemmelsen av antibiotikarester i melk ved hjelp av kjemiske eller fysisk-kjemiske prosesser, er betydelig mindre vanlig enn bruken av mikrobiologiske prosesser. Kolorimetriske og kromatografiske prosesser krever utdannet arbeidskraft og ofte et komplisert og kostbart analyseutstyr. Fremgangsmåtene er sjelden egnet for rutineanalyser.
Charm-testen (Charm, S.E., A 15-minute Assay for Penicillin and other Antibiotics. Cultured Dairy Products J. 14 (1979) 24) er basert på påvisning av radioaktivitet. En lyofilisert kultur av B. stearothermophilus-kultur og lyo-14 ..
filisert, C-merket penicillin, tilsettes til en prøve. Mengden <14>C inneholdt i bakteriecellene, påvises ved hjelp av en Geigerteller. Jo lavere penicillinkonsentrasjonen i prøven er, jo høyere er avlesningen av Geigertelleren. På-visningstiden er bare 15 minutter, og følsomheten i prosessen er 0,005 I.U. av penicillin pr. ml. Denne fremgangsmåte er heller ikke egnet for rutinebruk. Den er kostbar og komplisert og krever utdannede personer og kostbart utstyr for utførelse.
Det er således fortsatt et praktisk behov for en følsom prosess som er så bredspektret som mulig. Prosessen skal også være enkel, og det skal være mulig å utføre prosessen med et utstyr som er klart til bruk, hvorved testen ikke krever utdannede personer, men kan utføres f.eks. på en gård.
Disse fordeler oppnås ved hjelp av et testsett ifølge oppfinnelsen.
Oppfinnelsen angår således et testsett egnet for bestemmelse av antibiotika i melk, hvilket testsett er kjennetegnet ved at det omfatter et Streptococcus thermophilus T101, DSM 4022-konsentrat og et vannbasert beskyttelsesmiddel i et fortynnings forhold på 4 x IO"<2> til 5 x IO"2.
Oppfinnelsen angår enn videre en fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika i melk, hvilken fremgangsmåte er kjennetegnet ved at en prøve tilsettes til et testsett omfattende Streptococcus thermophilus T101, DSM 4022-konsentrat og et vannbasert beskyttelsesmiddel i et fortynningsforhold på 4 x IO"2 til 5 x IO"<2> og eventuelt en indikator, og dersom testsettet ikke inneholder en indikator, tilsettes også en indikator, testsettet og prøven inkuberes ved 38 til 42 °C i ca. 4 timer, og fargen vurderes. Sluttelig omfatter oppfinnelsen en biologisk renkultur av en Streptococcus thermophilus-stamme, som er kjennetegnet ved at stammen er Streptococcus thermophilus T101, DSM 4022.
Oppfinnelsen er basert på den nye Streptococcus thermophilus TIOl-stammen som er isolert ved Lammi-meieriet til Valio. Stammen er deponert i Deutsche Sammlung von Mikroorganismen under deponeringsnummeret DSM 4022 den
3. mars 1987, og har følgende egenskaper:
- grampositiv,
- danner lange coccus-kjeder.
- veksttemperatur:
vekst ved 50°C
ingen vekst ved 10 C
- saltresistens
vekst ved en NaCl-konsentrasjon på 2%
ingen vekst ved en NaCl-konsentrasjon på 6,5%,
- titrert surhet 25 til 29 °SH etter 7 timers inkubering ved 42°C (sterilisert, 10% melkepulvermelk)
- melkesyre %; 0,8% (inkubert 2 dager ved 42°C,
fra melkepulvermelk)
- fermenterer lactose, saccharose og glucose.
Å dømme av de verdier som er gitt innen teknikkens stand, er den nye mikroorganismestammen klart mere følsom enn kjente Streptococcus thermophilus-stammer, spesielt overfor penicillin og oxytetracyclin.
Testsettet fremstilles på følgende måte: Mikroorganismestammen dyrkes i et fermenteringskar ved en
pH på 6,2 til 6,5 og ved 38 til 42°C i et dyrkningsmedium basert på mysepermeat. Veksten observeres, og veksten stanses ved slutten av den logaritmiske vekstfase, hvoretter dyrkningsvæsken konsentreres ved filtrering til en 20 gangers konsentrasjon. Konsentratet måles i et fortynningsforhold på ca. 4 x 10~<2> til 5 x 10~2, fortrinnsvis ca. 5 x IO<-2>, i et beskyttelsesmiddel. Beskyttelsesmidlet kan bestå av vann-baserte beskyttelsesmidler som anvendes ved fremstilling av lyofiliserte mikrobepreparater. Fortrinnsvis er beskytt-elsesmidlét en vandig løsning omfattende 1,1% natriumglutamat, 1,1% ascorbinsyre og eventuelt 7% lactose, og pH er 6,5. Indikatoren kan tilsettes til beskyttelsesmidlet, eller den kan tilsettes til testsettet i forbindelse med bestemmelsen. Indikatoren er f.eks. en syre-base-indikator som f.eks. bromcresolfiolett. Konsentratet måles inn i et kar som kan være en konvensjonell ampulle, et forseglbart reagensglass, en prøvekolbe eller lignende. Karet avkjøles i et carbonsyre-sulfitt-alkoholbad, hvoretter det lyofilis-eres og lagres under vakuum. Det ferdige testsettet inneholder ca. 1 til 2 x 10^ bakterier pr. ml.
Den antibiotiske bestemmelsen utføres ved å til-sette en væskeprøve og eventuelt en indikator til testsettet. Testsettet og prøven inkuberes, og fargeforandr-ingene observeres. Dersom prøven inneholder antibiotika,
er mikroorganismene i testsettet ikke i stand til å vokse, og fargen forandres ikke. Om prøven inneholder antibiotika, vokser på den annen side mikroorganismene og induserer en fargeforandring mens de vokser.
Følsomheten til fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen ble sammenlignet med de tilsvarende, kommersielle "Thermocult"- (Orion Diagnostica) og "Delvotest P"- (Gist-Brocades) teknikkene og "Charm II"-teknikken. Prøven besto av melk som var forhåndsoppvarmet til 95°C i 5 minutter, og bestemmelsene ble utført ifølge de instruksjoner som er gitt av leverandørene. Resultatene fremgår av den følgende tabell, fra hvilken de data som er gitt av produsenten Intervet når det gjelder "Intertest", fremgår. Resultatene viser at fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er mer følsom enn de andre fremgangsmåtene og påviser klart nærvær av alle typer av antibiotika/kombinasjoner.
Eksempel 1
Fremstilling av testsettet.
Bakterier av Streptococcus thermophilus T101-stammen inokuleres i et dyrkningsmedium med følgende sammen-setning :
5% mysepermeatpulver
1,5% caseinhydrolysat
0,5% trypton
1% gjærekstrakt
Dyrkningsmediet ble sterilisert ved 120°C i 15 til 20 minutter, og dets pH er 6,4 etter steriliseringen.
Teststammen dyrkes i et fermenteringskar ved en pH på ca. 6,2 og ved ca. 42°C, og veksten følges ved å observere uklarheten i dyrkningsvæsken. Ved slutten av den logaritmiske vekstfasen stanses veksten, og dyrkningsvæsken konsentreres ved filtrering ved bruk av en "Millipore Pellicon" filtreringsenhet (0,45 pm) til en 20 gangers konsentrasjon, hvorved bakteriekonsentrasjonen i konsentratet er ca. 2 x 10<9 >bakterier pr. ml. Konsentratet vaskes med en liten mengde beskyttelsesmiddel, og ca. 5 ml tilsettes til 100 ml beskyttelsesmiddel, hvortil det eventuelt også tilsettes 1 ml bromcresolfiolett farge (en 0,8% løsning). Bakteriekonsentrasjonen i den således oppnådde løsning er ca. 1 x 10 p bakterier pr. ml. 1 ml av løsningen tilsettes til en konvensjonell 10 ml ampulle som motstår tørking og kan lukkes av vakuum.
Ampullen avkjøles raskt (20 til 60 s) i et carbonsyre-sulfitt-alkoholbad ved -60°C, hvoretter den frysetørkes og vakuumlukkes for lagring. Den således fremstilte ampullen inneholder 1 til 2 x 10 bakterier pr. ml.
Eksempel 2
Bestemmelse av antibiotika i en melkeprøve.
Rå melk oppvarmes ved 95°C i 5 minutter. 2 ml melk og eventuelt 20 ul av en fargeindikator tilsettes til et testsett som er fremstilt ifølge eksempel 1. Testsettet inkuberes i 4 timer ved ca. 42°C, og fargen vurderes. Melk fremstilt fra surt melkepulver og oppvarmet ved 95°C i 5 minutter, anvendes som en kontroll. Dersom melken inneholder antibiotika, forandres fargen til blå. Gul indi-kerer et negativt resultat.
Claims (5)
1. Testsett egnet for bestemmelse av antibiotika i melk, karakterisert ved at det omfatter et Streptococcus thermophilus T101, DSM 4022-konsentrat og et vannbasert beskyttelsesmiddel i et fortynningsforhold på 4 til 5 x IO"<2>.
2. Testsett ifølge krav 1,
karakterisert ved at beskyttelsesmidlet omfatter en vandig løsning omfattende 1,1 % natriumglutamat, 1,1 % ascorbinsyre og eventuelt 7 % lactose, og hvis pH er 6,5.
3. Testsett ifølge krav 1,
karakterisert ved at det ytterligere omfatter en indikator.
4. Testsett ifølge krav 3,
karakterisert ved at indikatoren er bromcresolfiolett.
5. Fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika i mei,.., karakterisert ved at en prøve tilsettes til et testsett omfattende Streptococcus thermophilus D101, DSM 4022-konsentrat og et vannbasert beskyttelsesmiddel i et for-tynningsf orhold på 4 til 5 x IO"<2> og eventuelt en indikator, og dersom testsettet ikke inneholder en indikator, tilsettes også en indikator, testsettet og prøven inkuberes ved 38 til 42 °C i ca. 4 timer, og fargen vurderes.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI871512A FI75865C (fi) | 1987-04-07 | 1987-04-07 | Testanordning och foerfarande foer bestaemning av antibiotika i mjoelk samt i dessa anvaendbar ny streptococcus thermophilus-stam. |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO880885D0 NO880885D0 (no) | 1988-02-29 |
| NO880885L NO880885L (no) | 1988-10-10 |
| NO174898B true NO174898B (no) | 1994-04-18 |
| NO174898C NO174898C (no) | 1997-11-20 |
Family
ID=8524275
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO880885A NO174898C (no) | 1987-04-07 | 1988-02-29 | Testsett og fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika i melk, og en Streptococcus thermophilus-stamme for anvendelse derav |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4929546A (no) |
| EP (1) | EP0285792B1 (no) |
| JP (1) | JPH072119B2 (no) |
| AT (1) | ATE76437T1 (no) |
| AU (1) | AU609794B2 (no) |
| CA (1) | CA1316442C (no) |
| DD (1) | DD268481A5 (no) |
| DE (1) | DE3871216D1 (no) |
| DK (1) | DK173966B1 (no) |
| FI (1) | FI75865C (no) |
| IE (1) | IE60699B1 (no) |
| NO (1) | NO174898C (no) |
| NZ (1) | NZ223750A (no) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5658790A (en) * | 1986-09-04 | 1997-08-19 | Bio 101, Inc. | Cell culture media formulated in unit dose |
| IL91596A0 (en) * | 1989-09-11 | 1990-04-29 | Orgenics Ltd | Microbiological assay kit and method for detecting antibacterial compounds |
| AU668023B2 (en) * | 1993-02-11 | 1996-04-18 | Dsm Ip Assets B.V. | Unit for the detection of residues of antibacterial compounds in liquids |
| FR2725212B1 (fr) * | 1994-09-30 | 1996-12-20 | Gervais Danone Co | Souche de streptococcus thermophilus, procede de fermentation mettant en oeuvre cette souche et produit obtenu |
| WO1996023901A1 (en) | 1995-02-01 | 1996-08-08 | Gist-Brocades B.V. | A rapid microbiological test for the detection of antibacterial compounds |
| FR2732693B1 (fr) * | 1995-04-06 | 1997-05-09 | Bio Veto Tests Bvt | Temoin de revelation de contaminants et procede d'application a la realisation d'un antibiogramme directement effectue sur prelevement |
| EP0861330B1 (en) * | 1995-07-12 | 2003-08-20 | Charm Sciences Inc. | Test apparatus, system and method for the detection of test samples |
| US5827675A (en) * | 1995-07-12 | 1998-10-27 | Charm Sciences, Inc. | Test apparatus, system and method for the detection of test samples |
| US5792622A (en) * | 1995-11-16 | 1998-08-11 | New Mexico State University Technology Transfer Corporation | Assay for chemicals |
| DE60028059T3 (de) * | 1999-10-04 | 2010-06-10 | Dsm Ip Assets B.V. | Verfahren zum nachweis antibiotische überreste |
| CA2464373A1 (en) | 2001-10-15 | 2003-04-24 | Dsm Ip Assets B.V. | Apparatus and method for detecting undesired residues in a sample |
| WO2005005656A1 (en) * | 2003-07-02 | 2005-01-20 | Dsm Ip Assets B.V. | Improved method for the determination of the presence of an antibiotic in a fluid |
| PL1664330T3 (pl) | 2003-09-11 | 2009-04-30 | Dsm Ip Assets Bv | Badanie krwi i moczu |
| US7897365B2 (en) * | 2003-11-18 | 2011-03-01 | Charm Sciences, Inc. | Method for adjusting antibiotic sensitivity of a test culture |
| WO2005118837A1 (en) * | 2004-06-02 | 2005-12-15 | Dsm Ip Assets B.V. | High ph test system for the determination of the presence of an antibiotic in a fluid |
| EP1984518A1 (en) | 2006-02-08 | 2008-10-29 | DSMIP Assets B.V. | Combination of reader and incubator |
| US8476064B2 (en) * | 2006-05-09 | 2013-07-02 | Charm Sciences, Inc. | Inhibition assay method and device for detection of antibiotics |
| WO2011091805A1 (en) | 2010-01-29 | 2011-08-04 | Tartu Ülikool (University Of Tartu) | On-line system, method of its calibration and simultaneous detection of antibiotic residues and their concentration in milk |
| WO2012156528A1 (en) | 2011-05-19 | 2012-11-22 | Dsm Ip Assets B.V. | Method for the determination of the presence of an antibiotic in a fluid |
| BR112014009194A8 (pt) | 2011-10-18 | 2017-06-20 | Dsm Ip Assets Bv | método para determinação da presença de um antibiótico em um flúido |
| EP2799881A1 (en) | 2013-05-02 | 2014-11-05 | DSM IP Assets B.V. | Method for the determination of the presence of an antibiotic in a fluid |
| DK2992108T3 (da) * | 2013-05-02 | 2017-11-27 | Dsm Ip Assets Bv | Fremgangsmåde til bestemmelse af antibiotika i et fluid |
| US20180327807A1 (en) | 2015-11-20 | 2018-11-15 | Dsm Sinochem Pharmaceuticals Netherlands B.V. | Assay for determining antibiotics in waste |
| CN106319023A (zh) * | 2016-08-19 | 2017-01-11 | 浙江工商大学 | 基于pgm快速检测牛乳或鸡组织中抗生素残留的方法 |
| CN108676841A (zh) * | 2018-05-25 | 2018-10-19 | 广州南侨食品有限公司 | 芽孢及耐热芽孢的检验方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3897307A (en) * | 1974-10-23 | 1975-07-29 | Hansens Lab Inc | Stabilized dry cultures of lactic acid-producing bacteria |
| DE2930394A1 (de) * | 1978-07-26 | 1980-02-14 | Seppo Kolehmainen | Verfahren zur bestimmung des antibiotikaspiegels in einem medium |
| US4235964A (en) * | 1978-09-28 | 1980-11-25 | Bochner Barry R | Method for testing and identifying microorganisms |
| US4615978A (en) * | 1979-06-28 | 1986-10-07 | The State Of Oregon, By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon State University | Bacterial growth medium and method of use |
| US4849341A (en) * | 1986-12-02 | 1989-07-18 | Proscience Corporation | Diagnostic test for Staphylococcal mastitis in cattle |
-
1987
- 1987-04-07 FI FI871512A patent/FI75865C/fi not_active IP Right Cessation
-
1988
- 1988-02-25 IE IE52088A patent/IE60699B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-02-26 DE DE8888102867T patent/DE3871216D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-02-26 EP EP88102867A patent/EP0285792B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-02-26 AT AT88102867T patent/ATE76437T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-02-29 NO NO880885A patent/NO174898C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-03-04 DK DK198801174A patent/DK173966B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-03-04 NZ NZ223750A patent/NZ223750A/xx unknown
- 1988-03-15 CA CA000561516A patent/CA1316442C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-04-05 AU AU14158/88A patent/AU609794B2/en not_active Ceased
- 1988-04-06 DD DD88314467A patent/DD268481A5/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-06 US US07/178,257 patent/US4929546A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-07 JP JP63086222A patent/JPH072119B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI75865C (fi) | 1988-08-08 |
| FI75865B (fi) | 1988-04-29 |
| CA1316442C (en) | 1993-04-20 |
| NZ223750A (en) | 1990-03-27 |
| NO880885D0 (no) | 1988-02-29 |
| NO880885L (no) | 1988-10-10 |
| IE60699B1 (en) | 1994-08-10 |
| DK173966B1 (da) | 2002-03-18 |
| DE3871216D1 (de) | 1992-06-25 |
| DK117488D0 (da) | 1988-03-04 |
| EP0285792A1 (en) | 1988-10-12 |
| DD268481A5 (de) | 1989-05-31 |
| FI871512A0 (fi) | 1987-04-07 |
| JPH072119B2 (ja) | 1995-01-18 |
| EP0285792B1 (en) | 1992-05-20 |
| IE880520L (en) | 1988-10-07 |
| AU609794B2 (en) | 1991-05-09 |
| DK117488A (da) | 1988-10-08 |
| ATE76437T1 (de) | 1992-06-15 |
| NO174898C (no) | 1997-11-20 |
| US4929546A (en) | 1990-05-29 |
| JPS63269999A (ja) | 1988-11-08 |
| AU1415888A (en) | 1988-10-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO174898B (no) | Testsett og fremgangsmåte for bestemmelse av antibiotika i melk, og en Streptococcus thermophilus-stamme for anvendelse derav | |
| Wagner et al. | Evaluation of swirling, pH, and glucose tests for the detection of bacterial contamination in platelet concentrates | |
| Meers et al. | Bacteriostatic and bactericidal actions of boric acid against bacteria and fungi commonly found in urine. | |
| US5786167A (en) | Method and culture medium for identification of salmonellae | |
| FI67725C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av enheter avsedda foer bestaemning av antibiotika- och sulfarester i biologiska vaetskor och framstaellda enheter | |
| Hampil | The influence of temperature on the life processes and death of bacteria | |
| Babu et al. | Evaluation of twenty-three blood culture media | |
| Kabay | Rapid quantitative microbiological assay of antibiotics and chemical preservatives of a nonantibiotic nature | |
| Lakshmi et al. | Utility of Urichrom II–A Chromogenic Medium for Uropathogens | |
| Dalet et al. | Evaluation of a new agar in Uricult-Trio for rapid detection of Escherichia coli in urine | |
| Hayward et al. | Assessment of technique for rapid detection of Escherichia coli and Proteus species in urine by head-space gas-liquid chromatography | |
| US6037140A (en) | Selective media for the culture and isolation of gram bacteria, antibiotic composition | |
| US3597321A (en) | Diagnostic compostion for the differentiation of staphylococci | |
| EP1357179B1 (en) | Solid culture medium and method for preparing the same | |
| Barr et al. | Biotypes of Klebsiella pneumoniae (sensu lato) and Enterobacter aerogenes characterised by differential substrate metabolism: application of the technique. | |
| RU2203317C2 (ru) | Спрособ обнаружения bacillus anthracis в молоке | |
| Webb | A Study of Test Media used for the Identification of Soft-rotting Erwinia-species. | |
| RU2063030C1 (ru) | Способ определения ингибирующих веществ в молоке | |
| Westhoff et al. | Detection of penicillin in milk by bioluminescence | |
| Harris et al. | Diagnostic Procedures and Reagents: Technics for the Laboratory Diagnosis and Control of the Communicable Diseases | |
| Rose | A note on yeast growth in media used for the cultivation of lactobacilli | |
| JPH07194394A (ja) | 乳酸菌含有物中の酵母類の検査用培地及び検査方法 | |
| Sng et al. | A rapid carbohydrate utilization test for the identification of pathogenic Neisseria | |
| Papadopoulou et al. | An assessment of Rappaport-Vassiliadis medium based on growth kinetics | |
| Askar et al. | Microbiological analysis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |