NO171728B - Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive 4'-demetylepipodofyllotoksin-glukosider - Google Patents

Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive 4'-demetylepipodofyllotoksin-glukosider Download PDF

Info

Publication number
NO171728B
NO171728B NO894304A NO894304A NO171728B NO 171728 B NO171728 B NO 171728B NO 894304 A NO894304 A NO 894304A NO 894304 A NO894304 A NO 894304A NO 171728 B NO171728 B NO 171728B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
formula
etoposide
compound
phenol
benzyloxycarbonyl
Prior art date
Application number
NO894304A
Other languages
English (en)
Other versions
NO171728C (no
NO894304D0 (no
NO894304L (no
Inventor
Takeshi Ohnuma
Tetsuro Yamasaki
Hideo Kamei
Takayuki Naito
Mark Saulnier
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of NO894304D0 publication Critical patent/NO894304D0/no
Publication of NO894304L publication Critical patent/NO894304L/no
Publication of NO171728B publication Critical patent/NO171728B/no
Publication of NO171728C publication Critical patent/NO171728C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

Den foreliggende oppfinnelse vedrører en analogifremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive 4<1->demetylepipodofyllotoksin-glukosider med formelen (V)
hvor
2
R er H, og
R<1> er valgt blant (C1_1Q)alkyl,
R3 og R<4> er valgt blant OH, -OS02R<6>, -OS03Hog -OP(0)(OR<7>)2, hvori R6 er hydrogen, (C1_5)alkyl eller (C1_5)alkylsubstituert fenyl, og R7 er hydrogen, fenyl eller benzyl, og farmasøytisk akseptable salter av gruppene -0S0-H eller -0P(0)(0H)9, og
5 3 4
R er H, under forutsetning av at R og R ikke begge er OH, eller med formelen (VI)
hvor
12 5
R , R og R har den ovenfor angitte betydning, og
R Q er H eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller 7 7
R , hvor R har den ovenfor angitte betydning.
Disse 4 *-demetylepipodofyllotoksin-glukosider med forskjel-lige substituenter på sukkerdelen, anvendes derav som antitumor-midler, samt i farmasøytiske preparater.
4<1->demetylepipodofyllotoksinglukosider med formelen (I) er antitumor-midler avledet fra den naturlige forekommende lignan, podofyllotoksin med formelen (II).
Fremgangsmåten til fremstilling derav er beskrevet i US-patentskrift 3.524.844. Blant forbindelsene med formelen (I) er det påvist at etoposid (Ia) og teniposid (Ib) er klinisk nyttige overfor en rekke tumorer, deriblant småcellet lungetumor, ovarie-, testikkel-, bryst-, blære- og hjernetumorer, ikke-lymfo-cyttisk leukemi samt Hodgkins sykdom.
Fra US-patentskrifter 4.547.567 og 4.716.221 er det kjent forbindelser med formelen (III)
hvor
den ene av X 1 og X 2 er OH, og den andre er amino, monoalkylamino eller dialkylamino. Det er angitt at disse derivater har høy løselighet i vann.
Seligman et al. (Cancer Chemotherapy Reports, Part I, 1975, 59:233-242) beskriver fremstillingen av podofyllotoksin-fosfatdi-natriumsalt med formelen (IV). Fosfatet ble imidlertid ikke hydrolysert av prostatinsyrefosfatase og viste ikke nedsatt toksisitet i forhold til stam-podofyllotoksin.
Analogifremgangsmåten ifølge den foreliggende oppfinnelse er kjennetegnet ved at man la) beskytter 4'-fenolgruppen i en forbindelse med formelen
hvor
1 2
R og R har den ovenfor angitte betydning,
b) omsetter det 4 *-fenolbeskyttede produkt fro trinn a) med en forbindelse valgt blant S03, R<6>S02C1 eller (R<7>0)2<P>(0)C1, hvor
R^ og R<7> har den ovenfor angitte betydning,
c) eventuelt fjerner den fosfatbeskyttende gruPP© R 7 °m~ fattende fenyl eller benzyl,
d) fjerner den 4<1->fenolbeskyttende gruppe, og
e) isolerer produktet,
(2) til fremstilling av forbindelsen med forme i-en (VI) eller
forbindelsen med formelen (V), hvor R<3> og R<4> er val'ft blant OH og
7 7 • -OP(0)(OR )2, hvor R har den ovenfor angitte betydning, og et farmasøytisk akseptabelt salt av gruppen -OP (0) (OH), med det forbehold at R<3> og R<4> ikke begge er OH, a) beskytter 4'-fenolgruppen i en forbindelse med formelen
hvor
1 2
R og R har den ovenfor angitte betydning,
b) omsetter det 4'-fenolbeskyttede produkt fra trinn a) omsettes med P0C1,, og behandler de oppnådde mellomprodukter in
7' 7'
situ med alkoholen R OH, hvor R er fenyl eller benzyl,
c) eventuelt fjerner den fosfatbeskyttende gruppe R 7 t,
d) fjerner den 4'-fenolbeskyttende gruppe, og
e) isolerer produktet, og, dersom det er mulig, om ønsket
omdanner det oppnådde produkt med formelen (V) eller (VI) til et
farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Fortrinnsvis fremstilles det forbindelser med formelen (V)
4 3
hvor R er OH, og R har den ovenfor angitte betydning.
I det foreliggende omfatter, med mindre annet er angitt, "fosfat", "fosforylering" og beslektede uttrykk "tir ,-f osf at" , "tiofosforylering" etc, "hal", "halogenid" og halogen henviser til klor, brom og jod, "alkyl" henviser til uforgrenete eller forgrenete karbonkjeder, og "L" henviser til en fraspaltbar gruppe, såsom klorid, som er alminnelig forekommende ved for-estringsreaksjoner.
Utgangsmaterialene, 4'-demetylepipodofyllotoksin-glukosider med formelen (I), kan fremstilles ved fremgangsmåtene som er beskrevet i US-patentskrift 3.524.844. Til effektiv derivatiser-ing av hydroksylgruppene på sukkerdelen er det nødvendig først å blokkere den reaktive fenolgruppe. Beskyttelse av 4 *-fenolgruppen i forbindelse med formelen (I) kan oppnås ved anvendelse av kjente metoder, som f.eks. omfatter dannelse av etere, acetaler eller estere. Valget av den fenolbeskyttende gruppe er ikke særlig begrenset og kan være en hvilket som helst av de konvensjonelle beskyttelsesgrupper som er kjent innen teknikken. Valget av beskyttelsesgruppe og metoder til blokkering og avblokkering av fenolgruppen er beskrevet i avhandlinger, såsom "Protective Groups in Organic Chemistry", J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973. Eksempler på en egnet fenolbeskyttende gruppe er tert-butyl, benzyl, 2-tetrahydropyranyl, 2,2,2-trikloretoksykarbonyl og benzyloksykarbonyl, hvor sistnevnte foretrekkes.
Sukker-hydroksylgruppene i et således beskyttet 4<1->demetylepipodofyllotoksin-glukosid med formelen (I) kan deretter omdannes til fosfater, sulfater eller sulfonater som ifølge den fore-liggende oppfinnelse ved konvensjonelle metoder som er beskrevet i litteraturen. Omsetningene er vanligvis ikke spesifikke for spesielle stillinger og resulterer i en blanding av 2''-, 3'<*-> og 2 1 1,31 '-bis-derivatiserte produkter, og når det gjelder fosforylering, også i fosfatdimeren med formelen (VI). Produktblandingen kan separeres i de individuelle bestanddeler ved metoder som er kjente innen teknikken, såsom kolonnekromatografi. Det er ikke kritisk på hvilket punkt av reaksjonssekvensen at blandingen av reaksjonsprodukter separeres.
Fosforylering kan oppnås ved omsetning av en 4'-fenolbeskyttet forbindelse med formelen (I) med fosforylhalogenidet POCl^
(generelt P(X)(hal)3 hvor X er svovel eller oksgen, i et inert organisk løsningsmiddel, f.eks. metylenklorid eller acetonitril, og i nærvær av en syreakseptor, fortrinnsvis en tertiær aminbase, såsom pyridin eller diisopropyletylamin. Den resulterende blanding av diklorfosfatmellomprodukter kan hydrolyseres in situ til dr.nnelse av f osf atmonoestre, og dersom hydrolysen utføres i nærvær av en base, såsom natriumhydrogenkarbonat eller liknende, oppnås det tilsvarende salt av fosfatmonoesteren. Den 4'-fenolbeskyttende gruppe fjernes deretter, hvorved det oppnås fosfater ifølge den foreliggende oppfinnelse.
Diklorfosfat-mellomproduktene kan også omdannes til fosfat-triestere ved behandling med en alkohol med formelen R 7 1OH, hvor R 7 er en fosfatbeskyttende gruppe -fenyl eller benzyl. Fosfattriesteren kan også oppnås ved behandling av en 4'-fenolbeskyttet forbindelse med formelen (I) med en forbindelse med formelen
(R<7>0)2P(0)C1 (generelt (R<7>0)2P(X)-L hvor X og L er som angitt foran, i et inert organisk løsningsmiddel i nærvær av en syreakseptor. R 7 -gruppen på o fosfattriesteren kan eventuelt fjernes for å frembringe fosfatmonoesteren, som lettvint kan omdannes til et farmasøytisk akseptabelt salt ved behandling derav med en base, såsom natriumhydrogenkarbonat. R<7->gruppen på fosfattriesteren kan velges slik at den fjernes samtidig med den fenolbeskyttende gruppe, eller den ene gruppe kan fjernes selek-tivt uten å påvirke den annen.
Sulfater kan fremstilles ved behandling av en 4'-fenolbeskyttet forbindelse med formelen (I) med svoveltrioksid eller et kompleks derav, såsom svoveltrioksid-pyridinkompleks, i et inert organisk løsningsmiddel ved omgivelsestemperatur. Fenolgruppen fjernes ved konvensjonelle metoder som er velkjente innen teknikken, til dannelse av produktet. Et sulfatderivat kan lettvint omdannes til dets farmasøytisk akseptable salter ved å bringe det i kontakt med en kilde for det ønskete kation.
Sulfonater kan ifølge den foreliggende oppfinnelse, oppnås på liknende måte ved omsetning av en 4'-fenolbeskyttet forbindelse med formelen (I) med en forbindelse med formelen R erS0-C1 (generelt R 6S02~L). Omsetningen utføres i et inert organisk løsningsmiddel og i nærvær av en syreakseptor ved en temperatur fra romtemperatur til t20°C. Fjerning av den fenolbeskyttende gruppe frembringer sluttproduktet.
Det er åpenbart at fremstillingen av forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelse ikke er begrenset til de ovennevnte fremgangsmåter og reaktanter, men kan omfatte andre fremgangsmåter som er i stand til å innføre en fosfat- eller sulfonat-gruppe på sukkerdelen av 4'-demetylepipodofyllotoksin-glukosi-dene. Reaksjonsbetingelsene vil selvfølgelig variere avhengig av valget av utgangsmaterialer, men kan fastsettes av fagmannen uten unødvendig eksperimentering.
Forbindelser fremstilt som ifølge den foreliggende oppfinnelse kan anvendes til inhibering av veksten av ondartede tumorer i pattedyrverter, også mennesker. Noen av forbindelsene, særlig fosfatene og sulfatene, kan betraktes som pro-legemidler for 4'-demetylepipodofyllotoksin-glukosider og omdannes som sådanne til det aktive stam-legemiddel in vivo av faktorer, som enten er endogene i verten eller tilføres eksogent. Disse pro-legemidler kan administreres alene eller i kombinasjon med et agens, som er i stand til å frigjøre den aktive form in vivo, f.eks. enzymer, som er i stand til å spalte fosfat- eller sulfatgruppen. Eksempler på egnete enzymer omfatter fosfataser, såsom alkalisk fosfatase, eller sulfataser, såsom arylsulfatase. Enzymet kan være bundet til et tumorspesifikt antistoff til dannelse av et enzym-antistoffkonjugat, som deretter kan administeres til en tumorbærende vert forut for, samtidig med eller etter administrering av pro-legemidlet. Pro-legemidlet pluss antistoff-enzym-konjugatet er den foretrukne fremgangsmåte ved administering av sulfat-pro-legemidlene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse. Antistoff-enzymkonjugater, fremgangsmåter til fremstilling derav, samt metoder til anvendelse av dem er beskrevet i detalj i amerikansk patentsøknad 211.301 av 29. juni 1988 og dens stamsøknad 161.068 av 26. februar 19 88 og dens stamsøknad 81.382 av 4. august 1987.
Representative forbindelser fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er blitt vurdert med hensyn til antitumor-virkning overfor transplanterbar murin P3 88 leukemi. Fem uker gamle CDF,-hunnmus ble inokulert intraperitonealt med 0,4 ml fortynnet ascitesvæske inneholdende 10 lymfocytiske leukemi P388-celler. Forsøksforbindelsene ble administrert intraperitonealt som en enkeltdose på dag 1, og dyrene ble iakttatt i 45 dager. Den prosentvise stigning i den gjennomsnittlige overlevelsestid (MST) for behandlete dyr i forhold til den gjennomsnittlige overlevelsestid for ubehandlete kontrolldyr ble bestemt og uttrykt som prosent %T/C. Forbindelser med %T/C-verdier på 12 5 eller mer anses for å ha vesentlig antitumor-virkning. I tabell I vises resultatene av vurderingen in vivo, idet bare den maksimale %T/C og den dose som gir maksimal virkning er angitt.
Cytotoksisiteten av forbindelsene fremstilt ifølge den fore-liggende oppfinnelse ble undersøkt under anvendelse av B16 melanoma-celler. B16 melanoma-celler ble dyrket til den logarit-miske fase i anriket "Eagle's minimum essentiel medium" supplert med kalvefosterserum (10%) og kanamycin (60 ug/ml). Tumorcellene ble høstet og implantert i brønner i mikrotiterplater med 96 brønner med forsøksmaterialer ved en inokolumstørrelse på 3,0 x 10 4 celler/ml. De ble inkubert ved 37°C i en fuktig atmosfære med 5% CO- og 95% luft i 72 timer. Den cytotoksiske virkning overfor ovennevnte cellelinje ble bestemt kolorimetrisk ved 540 nm etter farging av levedyktige celler ved nøytral rødt og er uttrykt som den konsentrasjon som inhiberer 50% cellevekst (IC^q). IC^q-verdier høyere enn 100 ug/ml anses vanligvis som indikasjon på manglende cytotoksisk virkning.
Ifølge den foreliggende oppfinnelse er det frembrakt forbindelser som kan inhibere tumorer hos pattedyr, og dette utføres ved at en virksom tumorinhiberende dose av en antiturnor-forbindelse med formelen (V) eller (VI) administeres til en tumorbærende vert. Til dette formål kan legemidlet administeres ad konvensjo-nell vei, såsom intravenøs, intramuskulær, intratumoral, intraarteriell, intralymfatisk eller oral vei. I visse tilfeller kan legemidlet administreres i kombinasjon med et antistoff-enzymkonjugat, som kan aktivere legemidlet in vivo.
Et frembrakt farmasøytisk preparat kan inneholde en forbindelse med formelen (V) eller (VI) og en farmasøytisk akseptabel bærer. Antitumorpreparatet kan gis en vilkårlig farmasøytisk form som egner seg for den ønskete administreringsvei. Eksempler på slike preparater omfatter faste preparater til oral administrering, såsom- tabletter, kapsler, piller, pulver og granulater, flytende preparater til oral administrering, såsom løsninger, suspensjoner, siruper eller eleksirer, samt preparater til parenteral administrering, såsom sterile løsninger, suspensjoner eller emulsjoner. De kan også utformes som sterile, faste preparater som kan løses i sterilt vann, fysiologisk saltvann eller et annet sterilt, injeserbart medium umiddelbart før anvendelse.
Optimale doser og doseringsmønstre for en gitt pattedyrvert kan lettvint fastsettes av fagmannen. Det er åpenbart at den faktiske dose som anvendes vil variere i overensstemmelse med det spesielle preparat som formuleres, den spesielle forbindelse som anvendes, administreringsmåte og det spesielle sted, den spesielle vert og sykdom som skal behandles. Det må tas hensyn til mange faktorer som kan modifisere virkningen av legemidlet, såsom alder, vekt, kjønn, kost, administreringstidspunkt, administreringsvei, utskillelseshastighet, pasientens tilstand, legemiddel-kombinasjoner, reaksjonsfølsomhet og alvorligheten av sykdommen.
Oppfinnelsen vil bli nærmere belyst i de etterfølgende eksempler.
Eksempel 1
a. Fremstilling av 4' - O- benzyloksykarbonyl- etoposid ( VII)
1,98 ml (15 mmol) benzylklorformiat ble i løpet av 30 minutter tilsatt til en blanding av 5,88 g (10 mmol) etoposid og 10 ml pyridin i 100 ml metylenklorid ved -M5°C. Blandingen ble omrørt ved -fl5°C i ytterligere 1 time, vasket etter tur med 5% HCl, vandig natriumhydrogenkarbonat og vann, og deretter tørket over vannfritt natriumsulfat. Løsningsmidlet ble avdampet, hvorved det ble oppnådd 8,05 g råprodukt, som ble renset på en silikagelkolonne (5% metanol-metyleklorid), hvorved det ble oppnådd 6,93 g (95%) av 4'-O-benzyloksykarbonyl-etoposid som et fargeløst halvfast stoff, smp. 152-155°C.
IRV (Nujol) cm<*1>: 3200-3600 (OH), 1760 (lakton og 4<1->O-benzyloksykarbonyl), 1600 (aromatisk).
<1>H-NMR (60 HMz, CDCl3o~ : 7,36 (5H, s, OC02CH2Ph) , 6,81 (1H, s, 5-H), 6,50 (1H, s, 8-H), 6,25 (2H, s, 2'- og 6'-H), 5,94 (2H, br.s, 0-CH2-0), 5,23 (2H, s, -OC02CH2<P>h), 4,89 (1H, d, J=4Hz, 4-H), 3,66 (6H, s, 3<f>,5'-OCH3), 2,8-3,0 (2H, m, 2,,,3,,-OH, D20 ombyttet), 1,38 (3H, d, J=5 Hz, 7•<1->CH3).
b. Fosforylering av 4'- O- benzyloksykarbonyl- etoppsid
280 uliter (3 mmol) fosforoksyklorid ble langsomt tilsatt til en kald løsning (0°C) av 1,511 g (2,1 mmol) 4'-O-benzyloksykarbonyl-etoposid i 10 ml tørt metylenklorid og 10 ml pyridin, og blandingen ble omrørt ved 0°C i 45 minutter. 620 uliter (6 mmol) benzylalkohol ble deretter tilsatt, og reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur, omrørt i 2 timer, tynnet med 50 ml
metylenklorid, vasket med vann og tørket over natriumsulfat. Løsningsmidlet ble avdampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 2,40 g av et rått, halvfast stoff som inneholdt tre bestanddeler (silikagel-tynnsjiktskrornatografi: Rf 0,66, 0,54 og 0,46), som ble separert ved silikagelkolonnekromatografi (1% metanol-metylenklorid). Fraksjoner som viste en flekk ved R^ 0,66 ble kombinert og inndampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 435 mg (21%) av 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-3'<1->fosfatdibenzylester (VIII). På liknende måte gav fraksjoner med R^ 0,54 352 mg (21%) av bis-(4'-benzyloksykarbonyletoposid-3''-0)fosfatbenzylester (IX) og R^ 0,46 262 mg (13%) av 4•-benzyloksykarbonyletoposid-2•<1->fosfat-dibenzylester (X) .
IRvmaks (Nu3o1) cm<4>"<1>: VIII: 3300 (br), 1760, 1600, IX: 3300 (br), 1760, 1600, X: 3350, 1760, 1600.
c. Fremstilling av dinatr ium- 3 ' ' og - 2 ' '- etoposid- f osf ater og natr ium- bis ( etoposidyl- 31 ') fosfat
En løsning av 270 mg 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-3''-fosfatdibenzylester i 20 ml metanol og 20 ml etylacetat som inneholdt 50 ml 10% palladium-på-karbon ble hydrogenert ved 1 atm. i 1 time. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og konsentratet ble konsentrert i vakuum, hvorved det ble oppnådd 188 mg av et halvfast stoff, som ble behandlet med etylacetat, hvorved det ble oppnådd 145 mg (79%) etoposid-3<1>'-dihydrogen-fosfat som et lysebrunt pulver. En 13 5 mg prøve av nevnte produkt ble løst i vandig natriumhydrogenkarbonat (33,6 mg i 2 ml vann) og lyofilisert, hvorved det ble oppnådd 140 mg dinatrium-etoposid-3''-fosfat (forbindelse XI) som et grått pulver, anslått renhet: 95% ved væskekromatografi ("LiChrosorb RP-18", 70% Me0H-H2O), smp. 262-263°C (dek.).
IRV v (Nujol) cm"<5>"<1>: 3377 (br), 1762, 1615.
UVAmaks (MeOH) nm (£") : 238 (sh, 13.000), 285 (4.010).
SIMS m/z: 713 (M+H)<+>.
I overensstemmelse med ovennevnte fremgangsmåte ble 97 mg 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-2'<1->fosfatdibenzylester hydrogenert, hvorved det ble oppnådd 70 mg (ca. 100%) dinatrium-etoposid-2''-fosfat (forbindelse XII) som et grått pulver, anslått renhet: 95% ved væskekromatografi, smp. 255-257°C (dek.).
IRV . (KBr) cm"<5>"<1>: 3460, 1772, 1615.
ItlclJC S
<UV/>^maks nm (£) : 240 (sh, 12 .600), 284 (3,740).
SIMS m/z: 713 (M+M)<+>, 735 (M+Na)<+>.
På liknende måte ble 13 5 mg
bis(4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-3' * -)fosfatbenzylester hydrogenert, hvorved det ble oppnådd 60 mg (58%) natrium-bis(etoposid-3''-)fosfat (forbindelse XIII) som et lysegrått pulver, anslått renhet: 95% ved væskekromatografi, smp. 265-266°C (dek).
IRvmaks (KBr) cm<*1>: 3460' 1772' 1620.
UV\iaks (Me0H> nm ^) : 240 (sh' 24.600), 285 (7.730).
SIMS m/z: 1262 (M+H)<+>, 1285 (M+Na+1)<+>.
Eksempel.2
a. Tosylering av 4 ' ^- benzyloksykarbonyl- etoposid
200 mg 4-dimetylaminopyridin og 870 mg (4,6 mmol) tosylklorid ble tilsatt til en løsning av 2,2 g (3 mmol) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid (produktet ifølge eksempel 1, trinn a) i 50 ml tørt pyridin ved 0°C, og blandingen ble omrørt i 3 dager ved
romtemperatur. Molekylsikter (4A) og ytterligere tosylklorid, 870 mg (4,6 mmol) ble tilsatt til blandingen, og omrøringen ble fort-satt i 1 uke ved romtemperatur. Ved avslutningen av dette tidsrom ble bunnfallet frafiltrert, filtratet tynnet med CH2C12, vasket
med vann, 5% HC1, vandig NaHC03 og vann, tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert i vakuum, hvorved det ble oppnådd 2,35 g av et rått faststoff som inneholdt tre bestanddeler (silikagel-tynnsjiktskromatografi: R_ 0,8, 0,6 og 0,4), som ble separert ved silikagel-kolonnekromatografi (2% MeOH-CH2Cl2). Fraksjoner som viste en flekk ved Rf 0,8 ble kombinert og inndampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 602 mg (19%) ved 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-2'',3'<*->ditosylat (XIV) som et farge-løst pulver. På liknende måte gav fraksjoner med Rf 0,6 690 mg (26%) 4<1->benzyloksykarbonyl-etoposid-3''-tosylat (XV) og Rf 0,4 156 mg (6%) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-2''-tosylat (XVI) som hygroskopisk, fargeløst pulver.
4'- benzyloksykarbonyl- etoposid- 3''- tosylat ( XV)
Smp. 145-148°C
Analyse for C44H44017<S>-3H20:
Beregnet: C: 56,77%, H: 5,41%, S: 3,44%.
Funnet: C: 56,84%, H: 4,91%, S: 3,90%.
4 ' - benzyloksykarbonyl- etoposia>2 ' '^- tosylat ( XVI)
Smp. 135-139°C.
Analyse for C44H44<0>17S.3H20:
Beregnet: C: 56,77%, H: 5,41%, S: 3,44%.
Funnet: C: 56,61%, H: 4,89%, S: 3,70%.
4'- benzyloksykarbonyl- etoposid- 2'', 3''- ditosylat ( XIV)
Smp. 149-152°C.
b. Fremstiling av etoposid^- 3' ' og 2 ' '- tosylater og 2'', 3''-ditosylat
En omrørt løsning av 47 mg (0,05 mmol) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-3 ''-tosylat i 2,5 ml etanol-aceton (4:1) ble hydrogenert ved 1 atm. i 1 time i nærvær av 40 mg 10% palladium-på-karbon. Katalysatoren ble frafiltrert og filtratet konsentrert i vakuum, hvorved det ble oppnådd 42 mg (ca. 100%) etoposid-3' * - tosylat (forbindelse XVII) som et fargeløst pulver, som deretter ble omkrystallisert fra metanol, hvorved produktet ble oppnådd som fargeløse krystaller. Anslått renhet: 9 0% ved væskekromatografi, smp. 175-178°C.
IRVmaks (KBr) cm<*1>: 3500 (br)' 1780, 1600.
UV\naks (Me0H) nm 245 (sh 10.260), 284 (3.900)
Analyse for C36H38°15S:
Beregnet: C: 58,21%, H: 5,16%, S: 4,32%.
Funnet: C: 57,80%, H: 5,14%, S: 4,43%.
I overensstemmelse med ovennevnte fremgangsmåte ble 100 mg (0,09 mmol) 4<1->benzyloksykarbonyl-etoposid-2<*>'-tosylat hydrogenert, hvorved det ble oppnådd 114 mg (ca. 100%) etoposid-2'1 - tosylat (forbindelse XVIII) som et fargeløst pulver, som ble omkrystallisert fra metanol, hvorved produktet ble oppnådd som hygroskopiske krystaller. Anslått renhet: 90% ved væskekromatografi, smp. 210-212°C.
IRvmaks (KBr) cm<*1>: 3500 (br), 1780, 1600.
UV\naks (Me0H) nm 243 <sh' 4,560), 282 (1,450).
Analyse for C35H38°15S*H20:
Beregnet: C: 56,83%, H: 5,30%, S: 4,21%.
Funnet: C: 56,87%, H: 5,37%, S: 4,19%.
På liknende måte ble 80 mg (0,08 mmol) 4 '-benzyloksykarbonyl-etoposid-2 ' 1 ,3' 1-ditosylat hydrogenert, hvorved det ble oppnådd 72 mg (ca. 100%) etoposid-2•',3''-ditosylat (forbindelse XIX) som et fargeløst pulver, som ble omkrystallisert fra metanol, hvorved produktet ble oppnådd som fargeløse krystaller. Anslått renhet: 90% ved væskekromatografi, smp. 169-171°C.
IR\>maks (KBr) cm*1: 3400 (br), 1770, 1600.
UvAmaks (MeOH) nm (£): 245 (sh, 11,750), 284 (3,840).
Eksempel 3
a. Mesylering av 4'- benzyloksykarbonyl- etoposid
270 ul (2,8 mmol) mesylklorid ble tilsatt til en løsning av 1,00 g (1,4 mmol) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid i 50 ml tørt pyridin, og blandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble tynnet med etylacetat, vasket med vann, 5% HC1, vandig natriumhydrogenkarbonat og vann, tørket over natriumsulfat og deretter filtrert. Filtratet ble konsentrert i vakuum, hvorved det ble oppnådd 1,4 g av et rått faststoff som inneholdt tre bestanddeler (silikagel-tynnsjiktskromatografi: R^ 0,51, 0,44, 0,40), som ble separert ved silikagel-kolonnekromatografi (1% metanol-metylenklorid). Fraksjoner som viste en flekk ved R^ 0,51 ble kombinert og inndampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 440 mg (36%) 4 *-benzyloksykarbonyl-etoposid-2'',3'1 - dimesylat (XX). På liknende måte gav Rf 0,44 314 mg (32%) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-3<1>'-mesylat (XXI) og R^ 0,40 248 mg (26%) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-2'<1->mesylat (XXII), som fargeløse pulver.
4'- benzyloksykarbonyl- etoposid- 3''- mesylat ( XXI)
Smp. 167-170°C.
Analyse for C38H4o°17<S>'<ly/>2 H20:
Beregnet: C: 56,36%, H: 4,98%, S: 3,96%.
Funnet: C: 56,23%, H: 5,06%, S: 4,14%.
4'- benzyloksykarbonyl- etoposid- 2''- mesylat ( XXII)
Smp. 159-161°C, hygroskopisk.
Analyse for C38H4o°17<S*>3H20:
Beregnet: C: 55,13%, H: 5,11%, S: 3,87%.
Funnet: C: 55,29%, H: 5,00%, S: 4,00%.
4.'- benzyloksykarbonyl- etoposid- 2 ' ', 3' '- dimesylat
Smp. 226-228°C.
Analyse for C3gH42<0>19<S>2.<1/>2 H20.
Beregnet: C: 52,76%, H: 4,77%, S: 7,22%.
Funnet: C: 52,78%, H: 4,77%, S: 7,31%.
b. Fremstilling av etoposid- 3''- og - 2' 1- mesylater
En omrørt løsning av 60 mg (0,07 mmol) 4 *-benzyloksykarbonyl-etoposid-31 '-mesylat i 2,5 ml metanol-aceton (4:1) ble hydrogenert ved 1 atm. i 1 time i nærvær av 30 mg 10% palladium-på-karbon. Etter frafiltrering av katalysatoren ble filtratet konsentrert i vakuum, hvorved etoposid-3''-mesylat (forbindelse XXIII) ble oppnådd som et fargeløst pulver, anslått renhet: 90% ved væskekromatografi, smp. 226-229°C.
IR\) . (KBr) cm<*1>: 3500 (br), 1770, 1610 .
IH3.K S
UV\iaks (Me0H) nm 740 (sh' 12,900), 286 (3,950).
På liknende måte ble 3 0 mg (0,04 mmol) 4 *-benzyloksykarbonyl-etoposid-2 '•-mesylat hydrogenert, hvorved det ble oppnådd 23 mg (94%) etoposid-2•<*->mesylat (forbindelse XXIV) som et fargeløst pulver. Anslått renhet: 9 5% ved væskekromatografi, smp. 179-181°C.
IRW . (KBr) cm<*1>: 3500 (br), 1770, 1620.
maks
UvXmaks (MeOH) nm (£): 240 (sh, 12,200), 285 (3,950).
Eksempel 4
En blanding av 350 mg (0,5 mmol) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid og 322 mg (1,2 mmol) difenylfosfonylklorid ble omrørt ved romtemperatur i 2 dager, tynnet med 50 ml metylenklorid, vasket med vann, 10% HCl og vandig natriumhydrogenkarbonat og deretter tørket over vannfritt natriumsulfat. Løsningsmidlet ble avdampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 290 mg 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid-3 ''-difenylfosfat som et rått, halvfast stoff. En omrørt løsning av 190 mg av dette halvfaste stoff ble hydrogenert ved 1 atm. med 10% palladium-på-karbon som katalysator. Etter frafiltrering av katalysatoren ble filtratet konsentrert i vakuum, hvorved det ble oppnådd 131 mg av et rått, halvfast stoff, som deretter ble kromatografert på en silikagel-kolonne (1% metanol-metylenklorid), hvorved det ble oppnådd 59 mg (20%) etoposid-3''-difenylfosfat (forbindelse XXVI). Anslått renhet: 80% ved væskekromatografi, smp. 126-130°C.
IRVmaks (Nujol) cm<:1>: 3350, 1770, 1600.
FAB MS m/z: 820 (M<+>).
Eksempel 5
Fremstilling av natrium^ 3''- og - 2' 1- etoposidsulfater
Til en løsning av 500 mg (0,69 mmol) 4'-benzyloksykarbonyl-etoposid i 20 ml tørr pyridin under argon ble det tilsatt 330 mg (2,07 mmol) svoveltrioksid-pyridinkompleks. Etter omrøring ved romtemperatur i 3 timer ble det tilsatt ytterligere 250 mg (1,59 mmol) svoveltrioksid-pyridinkompleks og omrørt ved romtemperatur i 15 timer. Blandingen ble konsentrert i vakuum under 40°C, hvorved det ble oppnådd 1,2 g av en rå olje, som ble kromatografert på en silikagelkolonne (2% MeOH-CH2Cl2), hvorved det ble oppnådd 411 mg av en blanding av 2'<*-> og 3<*>'-sulfater. En omrørt løsning av 400 mg (0,49 mmol) av denne blanding i 15 ml EtOH-aceton ble hydrogenert med 400 mg 10% palladium-på-karbon ved 1 atm. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble konsentrert i vakuum, hvorved det ble oppnådd 3 70 mg av en blanding av regio-isomerer, som ble separert ved Clg-omvendt fase kolonnekromatografi, hvorved det ble oppnådd 52 mg (16%) av 3''-sulfatet (XXVII), 107 mg (32%) av 2<*>'-sulfatet (XXVIII) og 138 mg av disse blandinger. 3''-sulfatet ble ledet gjennom en kolonne av "Dowex 50W" (Na<+>)-harpiks med vann som elueringsmiddel, og de vannløse-lige fraksjoner ble lyofilisert, hvorved det tilsvarende natrium-salt av forbindelsen med formelen XXVII ble oppnådd som et farge-løst pulver. På liknende måte ble natriumsulfatet av forbindelsen med formelen XXVIII oppnådd som et fargeløst pulver.
XXVII: Smp. 223-225°C, anslått renhet: 90% ved væskekromatografi.
IR^m (KBr) cm<*1>: 3440, 1770, 1620.
UVAmaks (MeOH) nm (£ ) : 240 (sh, 11,600), 284 (3,670). SIMS m/z: 691 (M+H)<+>, 713 (M+Na)<+>.
XXVIII: Smp. 246-247°C, anslått renhet: 95% ved væskekromatografi.
IRJmaks (KBr) cm<*1>: 3450' 1770, 1620.
UVXmaks (Me0H> nm 240 (sh' 11,200), 285 (3,650). SIMS m/z: 691 (M+H)<+>, 713 (M+Na)<+>.
Strukturene til forbindelsene i eksemplene 1-5 er angitt nedenfor:
Eks. Forb. R<1>R5R<8>
lb IX CH3 CBZ Bz
lc XIII CH3 H Na-
Eksentpel 6
Den generelle fremgangsmåte i eksemplene 1-5 ble gjentatt under anvendelse av teniposid i stedet for etoposid for oppnåelse av teniposidanaloger av forbindelsene VII-XXVIII (dvs. R<1> er 2-tienyl).

Claims (1)

1. Analogifremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive
4 *-demetylepipodofyllotoksin-glukosider med formelen (V) hvor 2 R er H, og R<1> er valgt blant (C1_1Q)alkyl, R<3> og R<4> er valgt blant OH, -OS<0>2R<6,> -OS03Hog -OP(0)(OR<7>)2, hvori R6 er hydrogen, (<C>1_5)alkyl eller (C1_5)alkylsubstituert fenyl, og R7 er hydrogen, fenyl eller benzyl, og farmasøytisk akseptable salter av gruppene -OSO-H eller -0P(0)(0H)9, og 5 3 4 R er H, under forutsetning av at R og R ikke begge er OH, eller med formelen (VI) hvor 12 5 R , R og R har den ovenfor angitte betydning, og R o er H eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav eller 7 7 R , hvor R har den ovenfor angitte betydning, karakterisert ved at man la) beskytter 4<1->fenolgruppen i en forbindelse med formelen hvor 1 2 R og R har den ovenfor angitte betydning, b) omsetter det 4'-fenolbeskyttede produkt fra trinn a) med en forbindelse valgt blant S03, R6S02C1 eller (R<7>0)2P(0)C1, hvor <R6> og <R7> har den ovenfor angitte betydning, c) eventuelt fjerner den fosfatbeskyttende gruppe R<7> om-fattende fenyl eller benzyl, d) fjerner den 4<1->fenolbeskyttende gruppe, og e) isolerer produktet, (2) til fremstilling av forbindelsen med formelen (VI) eller forbindelsen med formelen (V), hvor R 3 og R 4 er valgt blant OH og -OP(0)(OR 7 )2, hvor R 7har den ovenfor angitte betydning, og et farmasøytisk akseptabelt salt av gruppen -0P(0)(0H)9, med det 3 4 forbehold at R og R ikke begge er OH, a) beskytter 4 *-fenolgruppen i en forbindelse med formelen hvor 1 2 R og R har den ovenfor angitte betydning, b) omsetter det 4'-fenolbeskyttede produkt fra trinn a) omsettes med P0C1,, og behandler de oppnådde mellomprodukter in 7' 7 1 situ med alkoholen R OH, hvor R er fenyl eller benzyl, c) eventuelt fjerner den fosfatbeskyttende gruppe R 7 •, d) fjerner den 4'-fenolbeskyttende gruppe, og e) isolerer produktet, og, dersom det er mulig, om ønsket omdanner det oppnådde produkt med formelen (V) eller (VI) til et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
NO894304A 1988-10-31 1989-10-30 Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive 4'-demetylepipodofyllotoksin-glukosider NO171728C (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US26494088A 1988-10-31 1988-10-31

Publications (4)

Publication Number Publication Date
NO894304D0 NO894304D0 (no) 1989-10-30
NO894304L NO894304L (no) 1990-05-02
NO171728B true NO171728B (no) 1993-01-18
NO171728C NO171728C (no) 1993-04-28

Family

ID=23008291

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO894304A NO171728C (no) 1988-10-31 1989-10-30 Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive 4'-demetylepipodofyllotoksin-glukosider

Country Status (17)

Country Link
EP (1) EP0367189A3 (no)
JP (1) JPH02178299A (no)
KR (1) KR920001692B1 (no)
CN (2) CN1042362A (no)
AU (1) AU624189B2 (no)
BG (1) BG90160A (no)
DK (1) DK540089A (no)
FI (1) FI895087A0 (no)
HU (1) HU207734B (no)
IL (1) IL92149A0 (no)
NO (1) NO171728C (no)
NZ (1) NZ231187A (no)
OA (1) OA09141A (no)
PL (1) PL161731B1 (no)
PT (1) PT92152B (no)
YU (1) YU207389A (no)
ZA (1) ZA898224B (no)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4912204A (en) * 1988-09-06 1990-03-27 Bristol-Myers Company Fluoro-substituted epipodophyllotoxin glucosides
US4965348A (en) * 1989-05-19 1990-10-23 Bristol-Myers Company Dimeric epipodophyllotoxin glucoside derivatives
WO1999032499A1 (en) * 1997-12-23 1999-07-01 Korea Research Institute Of Chemical Technology 4'-O-DEMETHYL-EPIPODOPHYLLOTOXIN-β-D-GLUCOSIDE ACETAL DERIVATIVES
KR100798546B1 (ko) * 2007-01-25 2008-01-28 엘에스전선 주식회사 전선 피복용 절연재 제조용 조성물 및 이를 이용하여제조된 전선
KR101004668B1 (ko) * 2007-12-28 2011-01-04 제일모직주식회사 난연성 열가소성 수지 조성물 및 그 제조방법

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63192793A (ja) * 1987-02-06 1988-08-10 Nippon Kayaku Co Ltd ４′−デメチル−エピポドフイロトキシン誘導体の新規エステル

Also Published As

Publication number Publication date
HU207734B (en) 1993-05-28
PT92152B (pt) 1995-07-03
IL92149A0 (en) 1990-07-12
ZA898224B (en) 1990-07-25
EP0367189A3 (en) 1991-04-10
AU624189B2 (en) 1992-06-04
NZ231187A (en) 1991-03-26
PL161731B1 (pl) 1993-07-30
AU4394489A (en) 1990-05-03
JPH02178299A (ja) 1990-07-11
DK540089A (da) 1990-05-01
NO171728C (no) 1993-04-28
KR900006359A (ko) 1990-05-08
EP0367189A2 (en) 1990-05-09
HUT51286A (en) 1990-04-28
DK540089D0 (da) 1989-10-30
HU895601D0 (en) 1990-01-28
KR920001692B1 (ko) 1992-02-22
NO894304D0 (no) 1989-10-30
PT92152A (pt) 1990-05-31
NO894304L (no) 1990-05-02
YU207389A (en) 1990-12-31
JPH0585558B2 (no) 1993-12-07
BG90160A (bg) 1993-12-24
OA09141A (en) 1991-10-31
FI895087A0 (fi) 1989-10-26
CN1071929A (zh) 1993-05-12
CN1042362A (zh) 1990-05-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR900006230B1 (ko) 에피포도필로톡신 배당체의 4&#39;-포스페이트 유도체
EP0751144B1 (en) Novel anthracycline prodrugs, method for preparation as well as their use in selective chemotherapy
McGuigan et al. Anti-cancer ProTides: tuning the activity of BVDU phosphoramidates related to thymectacin
NO173548B (no) Analogifremgangsmaate for fremstilling av teraprutisk aktive glykokonjugater av fosforamidsennep eller ifosfamidsennep
EP0313874B1 (en) Disulfur analogs of LL-E33288 antitumor agents
EP0401800A2 (en) Acylated derivatives of etoposide
NO171728B (no) Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive 4&#39;-demetylepipodofyllotoksin-glukosider
KR900006217B1 (ko) 에피포도필로톡신 배당체의 질소함유 유도체
KR900006234B1 (ko) 신규의 3&#39;, 4&#39;-디니트로겐 치환 에피포도필로톡신 배당체의 유도체
US5081234A (en) 4&#39;-demethylepipodophyllotoxin glycosides
US5034380A (en) Alkoxymethylidene epipodophyllotoxin glucosides
RO106742B1 (ro) Derivați de 4’-dimetilpipodofilotoxin-gIucozide si procedeu de obținere a acestora
US8877720B2 (en) Epirubicin derivatives
US20040127467A1 (en) Synthesis of pancratistatin prodrugs
NO178826B (no) Fremgangsmåte til fremstilling av 4&#39;-demetylepipodofyllotoksin-glukosid-4&#39;-fosfater