NO169820B - Fremgangsmaate for fremstilling av en mastittvaksine - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av en mastittvaksine Download PDFInfo
- Publication number
- NO169820B NO169820B NO870123A NO870123A NO169820B NO 169820 B NO169820 B NO 169820B NO 870123 A NO870123 A NO 870123A NO 870123 A NO870123 A NO 870123A NO 169820 B NO169820 B NO 169820B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- aureus
- vaccine
- milk
- pseudocapsule
- strain
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 31
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 31
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 31
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 29
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 18
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 17
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 17
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 14
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims description 13
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims description 13
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims description 13
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 claims description 12
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 claims description 10
- 230000003095 anti-phagocytic effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 claims description 4
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 claims description 3
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 3
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 claims 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 description 9
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 7
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 4
- 244000309465 heifer Species 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 4
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 231100000033 toxigenic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001551 toxigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 108010065152 Coagulase Proteins 0.000 description 2
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000003229 cytophilic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000589567 Brucella abortus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 241001112695 Clostridiales Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 229920002306 Glycocalyx Polymers 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241001424929 Illawarra Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229960001212 bacterial vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 229940056450 brucella abortus Drugs 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000004517 glycocalyx Anatomy 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004124 hock Anatomy 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001662 opsonic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/085—Staphylococcus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/823—Bacterial vaccine for bovine species, e.g. cattle
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/882—Staphylococcus
- Y10S435/883—Staphylococcus aureus
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av en mastittvaksine omfattende det eller de antifagocytiske in vivo-antigener som fremstilles av en pseudokapselproduserende stamme av S. aureus, effektiv ved immunisering av drøvtyggere overfor intra-mamma angrep av S. aureus og andre arter av slekten Staphylococcus, og det særegne ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen er
(i) dyrking av en pseudokapselproduserende stamme av S.aureus in vitro i et nærende vekstmedium forsterket ved tilsetning av melk, melkemyse eller en annen melkekomponent inneholdende en aktiv bestanddel som finnes i melken eller melkemysen, idet denne aktive bestanddel er i stand til å indusere fremstilling av det eller de antifagocytiske
pseudokapsulære antigener når S. aureus dyrkes in vitro, (ii) deretter inaktiveres bakteriene, og eventuelt (iii) tilsettes et hjelpestoff som fremmer fremstillingen av IgG2 subtype antistoff.
Disse og andre trekk ved oppfinnelsen fremgår av patentkravene.
Mastitt (eller jurbetennelse) er en tilstand som rammer omtrent 25 % av det australske melkefeet, og som er angitt å koste industrien omtrent 50.000.000 dollar hvert år i tapt melkepro-duksjon, frasortering, antibiotika og kostbare behandlinger av bestandene av melkefeet.
Tradisjonelt behandles sykdommen, ved tilsynekomsten av kliniske symtomer, ved infusjon av antibiotika som er aktive mot den infeksiøse organismen Staphylococcus aureus, men en slik behandling er langt fra ideell. Bortsett fra å være mer helbredende enn preventiv, har man økonomiske hensyn slik som nødvendigheten av identifisering og individuell behandling av de berørte dyrene og uhensiktsmessigheten av antibiotikakonta-minert melk til menneskebruk eller videreforedling. Et ytterligere problem er den økende utvikling av antibiotikaresi-stente stammer av S.aureus. Man har derfor vendt oppmerksom-heten mot muligheten av å immunisere dyr overfor infeksjonen.
Man har utført en rekke forsøk med systematisk å immunisere drøvtyggere mot mastittpatogener ved anvendelse av vanlig fremstilte vaksiner som tilføres enten subkutant eller intra-muskulært. Drepte bakterieceller (Derbyshire (1960b)), iso-lerte bakteriecellevegger (Singleton et al. 1967), toksoider, (Minett 1939), drepte celletoksoide preparater (Bracewell og Pattison 1958) er alle blitt utprøvet med og uten immunologiske hjelpestoffer (Derbyshire 1961a). I noen av disse eksperi-mentene har man oppnådd en viss grad av beskyttelse, men totalt sett har resultatene vært skuffende. Sett på bakgrunn av de fremragende resultater for andre systemisk gitte bakterielle vaksiner i drøvtyggere (f.eks. Clostridiale vaksiner, Brucella abortus stamme 19), har det uheldige utfallet for mastittvaksiner generelt blitt tillagt effek-tiviteten av blodmelkebarrieren i å forhindre alle unntatt små mengder av sirkulerende antistoffer i å nå frem til melken (Lascelles og McDowell 1974).
I litteraturen har man hatt rapporter som (til tross for eks-perimentelle begrensninger i hvert tilfelle) er svært inte-ressante pga. den åpenbare suksessen som ble oppnådd ved immunisering av sauer (Bridre 1907) og geiter (Derbyshire
1961b) med levende S.aureus vaksiner (gitt subkutant). I begge disse undersøkelsene ble det rapportert at de vaksinerte dyrene var meget resistente overfor påfølgende intra-mamma angrep med virulent S.aureus. Senere undersøkelser har bekreftet den beskyttende evnen til levende S.aureus vaksine i hunnsauer (Watson and Lee 197 8) og forklart noen av mekanismene som trolig er involvert. Levende S.aureus vaksiner stimulerte syntesen av betydelige mengder IgG2 antistoff som er cytofile for nøytrofiler, og man har direkte bevis for at dette antistoff øker den spesifikke fagocytiske kapasiteten for nøytrofiler overfor S.aureus under in vitro-forhold (Watson 1975b, 1976). I motsetning til levende stafylokokkvaksiner som
hovedsakelig stimulerer syntesen av IgG2 (Kennedy et al 1981, Kennedy og Watson 1982), stimulerer drepte stafylokokkvaksiner som er gitt sammen med oljeaktige hjelpestoffer, produksjonen av hovedsakelig IgG^ antistoff (Yokomizo og Isayama 1978, Kennedy og Watson 1982). Således er i det minste en mulig grunn til de relativt dårlige resultatene med drepte S.aureus vaksiner ved profylakse av stafylokokkmastitt, at de ikke stimulerer syntesen av tilstrekkelige mengder av undergruppen av IgG som formidler beskyttelse gjennom sin opsoniske aktivitet. Videre har nylige studier i ikke-diende hunnsauer vist at en levende S.aureus vaksine var overlegen en drept vaksine med hensyn på å fremme en økende nøytrofil respons i mammakjertelen overfor et påfølgende intra-mamma angrep med levedyktige stafylokokker av en heterolog stamme (Colditz og
Watson 1982a, 1982b). Den levende vaksinen resulterer derfor i at flere nøytrofiler er tilstede etter noen få timers infeksjon og disse cellene er "bevæpnet" med cytofilt IgG2 som øker deres fagocytiske kapasitet overfor stafylokokker. Det gjenstår å bestemme om levende stafylokokkvaksiner kan beskytte mot de ulike S.aureus stammene som kan forårsake mastitt, skjønt nylige forsøk har tilveiebragt oppløftende resultater etter angrep med homologe eller heterologe stammer i både hunnsauer og kviger (Watson og Kennedy 1981, Watson 1984a). Australsk patentansøkning nr. 85929/82 omfatter en levende vaksine som er effektiv ved immunisering av drøvtyggere overfor intra-mamma angrep med homologe eller heterologe stammer av S.aureus, som er fremstilt ved svekkelse av en katalase- og koagulasepositiv stamme av S.aureus av drøvtyggeropprinnelse, ved en rekke overføringer inntil man observerer tap av hemolytisk aktivitet.
Det har i en årrekke vært kjent at de metaboliske og antigeniske egenskapene hos patogene mikroorganismer kan være svært forskjellige ved dyrking in vivo sammenlignet med dyrking in vitro ved standard laboratorieforhold (Beining og Kennedy 1963). In vivo-dyrket S.aureus, som er isolert fra kliniske mastittilfeller, er mer virulent og har vanligvis en antifagocytisk pseudokapsel i motsetning til den samme stafylo-kokkstammen som er dyrket in vitro (Watson Prideaux 1979,
Watson 1982, Norcross og Opdebeek 1983). Disse trekkene tilveiebringer en ytterligere forklaring med hensyn på suksessen med levende S.aureus vaksiner. Organismer som er dyrket i laboratorier og drept med hensyn på vaks.ne vil xkk. inneholde immunogeniske mengder av antifagocytiske pseudo-kapsulsre antigener og derfor er antistoffet som er dannet som "sjon på slike vaksiner ikke rettet mot disse beskyttende antigenene. I motsetning vil in vivo-formering av stafylokokker som er gitt i form av levende vaksme sikre fremsti-lingen av disse "in vivo"-pseudokapsulære antigenene og dannelse av antistoff overfor disse antigenene i dyret.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en fremgangsmåte for fremstilling av en drept vaksine som er
istand til å frembringe virkningsfull immunitet overfor stafylokokkmastitt.
I en større sammenheng tilveiebringer den foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for fremstillin<g> av en en are<p>t vaksine som er effektiv ved immunisering av
drøvtyggere overfor intra-mamma angrep av S.aureus og andre stammer av slekten av Staphylococcus, som omfatter det antifagocytiske in vivo-antigen (antigener) fremstilt ved hjelp av en pseudokapselproduserende stamme av S.aureus.
Som omtalt i det foregående, har man funnet (Watson og Prideaux 1979, Watson 1982) at in vivo-dyrket S.aureus har en forsterket virulens som sannsynligvis skyldes, i det minste delvis, ekspresjonen av antifagocytisk in vivo-antigen som er en egenskap hos pseudokapselproduserende stammer av S.aureus. Generelt er S.aureus ikke en innkapslet bakteriespecies, men innkapslede stammer, som er unntak fra denne regelen, er imidlertid kjent. Dannelsen av en kapsel ved hjelp av slike stammer, når de dyrkes under vanlige laboratorieforhold, kan lett vises ved hjelp av etablerte og vanlig anvendte teknikker (India ink testen - Butt 1936) som identifiserer stammene som innkapslet S.aureus. Stammer av S.aureus som danner en pseudokapsel kan skilles fra slike innkapslede stammer ved at de pseudokapselproduserende stammene er negative overfor India ink testen når de dyrkes under vanlige laboratorieforhold (in vitro) eller ved in vivo-forhold. Når de imidlertid dyrkes under in vivo-forhold eller isoleres fra et klinisk material, vil de produsere en substans på utsiden av celleveggen som i varierende grad er beskrevet som "pseudokapsel" eller "glycocalyx" (Caputy og Casterton, 1982). I de studier som er omtalt i det foregående, har man beskrevet et ytterligere antigen (antigener) i in vivo-dyrket S.aureus som ikke er tilstede når den samme stammen dyrkes under in vitro-betingelser, idet dette ytterligere antigen er identifisert som "in vivo-antigen (antigener)" og utgjør en del av pseudokapselen. Som beskrevet tidligere (Watson 1982), er "in vivo-antigen (antigener)" ikke den samme substansen som det ekstracellulære slimet som fremstilles av S.aureus under visse betingelser, og kan heller ikke sees som en kapselstruktur. Selv om den nøyaktige naturen av "in vivo-antigen (antigener)" ikke ennå er blitt konstatert, er det generelt akseptert at pseudokapselen overveiende er polysakkarider. Man antar imidlertid at minst en vesentlig komponent av pseudokapselen av natur er protein eller glycoprotein, noe som er basert på absorpsjonen ved en bølgelengde på 280 mu, farging av bånd i polyakrylamidgeler og positiv reaksjon med biuretreagens. Et viktig trekk i sammenheng med den foreliggende oppfinnelse er at man tilveiebringer en drept vaksine som omfatter dette in vivo-antigenet (antigener).
Mens man har oppdaget at in vivo-antigen (antigener) er tilstede i pseudokapselmaterialet i en rekke pseudokapselstammer av S.aureus (Watson 1982), vil, i en spesiell foretrukket ut-førelses form av denne oppfinnelsen, den drepte vaksinen omfat-te in vivo-antigen (antigener) som er avledet fra en spesiell stamme som er isolert fra et akutt tilfelle av sauemastitt og identifisert som stamme JG80. Stamme JG80 oppfyller alle krav med hensyn på en drøvtyggermastittstamme av S.aureus i overensstemmelse med "Bergeys Manual of Determinative Bacteriology". Denne stammen er Gram-positiv med druelignende klaser av kuleformede celler, og er karakterisert ved runde, glatte fløtefargede kolonier på blodagar. I tillegg er den både katalase- og koagulasepositiv, og er istand til å produsere syre fra mannitol. Stamme JG80 er en dårlig produsent av a-hemolysin og er en meget sterk produsent av B-hemolysin.
I en foretrukket utførelsesform av den foreliggende oppfinnelse omfatter vaksinen også et hjelpestoff, i særdeleshet et hjelpestoff som fremmer dannelsen av IgG2 subtypeantistoff. Man har funnet at dekstransulfat er et spesielt effektivt hjelpestoff for anvendelse i vaksinen som fremstilles ved oppfinnelsen og at det i betydelig grad øker den beskyttende immunresponsen. Dette antas å skyldes det faktum at dekstransulfat er en sterkt virkende stimulator av IgG2 antistoff overfor stafylokokkcelleoverflateantigener, idet, som tidligere omtalt, tilstedeværelsen av IgG2 på den nøytro- \ file membran resulterer i økt fagocytose av S.aureus organismer i mammakjertelen hvor nøytrofiler er den viktigste forsvars-mekanismen overfor bakterieinfeksjon.
Som bemerket over, vil stammer av S.aureus som produserer en pseudokapsel når de dyrkes i laboratoriet og drepes for vaksine ikke inneholde det antigeniske material som etterstrebes fremstilt ved den foreliggende oppfinnelse, og den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer derfor en fremgangsmåte for fremstilling av dette antigeniske material ved å utgå fra en ny dyrkingsmetode for de pseudokapselproduserende stammene av S.aureus, som i virkeligheten muliggjør dyrking under "simulerte" in vivo-betingelser.
Sett ut fra en slik synsvinkel for den foreliggende oppfinnelse, har man tilveiebragt en metode for dyrking av en pseudokapselproduserende stamme av S.aureus som går ut på at organismer av ovennevnte stamme av S.aureus dyrkes in vitro i et næringsrikt vekstmedium som er blitt styrket ved tilsetning av melk, melkesyre eller andre melkekomponenter.
Ut fra denne spesielle synsvinkelen for den foreliggende oppfinnelse, er en foretrukket tilsetning til dyrkningsmediumet steril melkemyse, f.eks. etter tilsetning av osteløype, for å styrke mediumet. Den nøyaktige naturen av melken eller melkekomponenten, slik som melkemyse, som er effektiv i styrking av mediumet for å muliggjøre "simulerte" in vivo-betingelser, er ikke kjent. Foreløpige undersøkelser med hensyn på dette synes å indikere at laktosen i den styrkende tilsetningen ikke er den avgjørende faktor i sauemelkemyse for induksjon av in vivo-antigen (antigener) i en in vitro-kultur. Disse undersøkelsene har fastslått at mens anvendelse av laktose alene som et tilsetningsmiddel foranlediger syntesen av en pseudokapsel i en in vitro-kultur, (skjønt den ikke er så effektiv som melkemyse i dette tilfellet), synes laktose ikke å foranledige syntesen av in vivo-antigen (antigener) i det hele tatt.
Når foreliggende oppfinnelse betraktes ut fra dette synspunkt, har man derfor funnet at en styrking av næringsmediumet for vekst ved tilsetning av, f.eks., melkemyse muliggjør in vitro-dyrking av S.aureus på en slik måte at "in vivo-antigen (antigener) " som normalt bare settes i forbindelse med in vivo-kulturer av disse organismene, fremstilles under in vitro-betingelser. For å redusere eller unngå risikoen av autoimmune reaksjoner, er det foretrukket tilrådelig å anvende melkemyse fra en "fremmed" drøvtyggerart, dvs. at for fremstilling av en vaksine for anvendelse i storfe, er det tilrådelig å anvende
saue- eller annen ikke-bovin melkemyse.
Dyrkingen av den pseudokapselproduserende stammen under "simulerte" in vivo-betingelser resulterer i dannelse av in
vivo-antigen (antigener) som del av pseudokapselen som beskrevet ovenfor. Inaktivering av bakterien kan utføres ved hjelp av en rekke kjente midler, f.eks. ved tilsetning av et baktericid slik som formalin etterfulgt av lagring mellom 2°C og 8°C i minst 24 timer. Etter inaktivering av bakterien vil man foretrukket separere cellene fra supernatanten, f.eks. ved
sentrifugering, og cellene oppslemmes deretter i et passende
sterilt bufret medium. Den endelige vaksinen kan også inneholde andre kjente vaksinekomponenter, slik som bakterio-stater.
Idet den vesentlige komponenten av vaksinen i overensstemmelse med oppfinnelsen er in vivo-antigen (antigener) komponenten som er beskrevet i det foregående, foretrekker man at vaksinen enten også omfatter en toksoid komponent som er basert på exotoksiner slik som a- og S-hemolysiner utskilt av S.aureus i en kultursupernatant, eller at en slik toksoid komponent til-føres samtidig med vaksinen fremstilt i overensstemmelse med oppfinnelsen. Det vesentligste toksinet i en slik toksoid komponent er toksinet B-hemolysin, et toksin som produseres av de fleste drøvtyggermastittstammene av S.aureus i en in vitro-kultur. Etter dyrking av bakterien, f.eks. i minst 36 timer i en anriket næringsvæske, kan toksinene lett høstes ved sentrifugering til separate celler og supernatant, etterfulgt av konsentrering av supernatanten ved lyofilisering og toksoi-disering ved kjente metoder, f.eks. med formalin. S.aureus JG80 som er beskrevet i det ovennevnte, er en meget sterk produsent av B-hemolysin, og er en foretrukket stamme for fremstilling av den toksoide komponenten når den dyrkes under betingelser som favoriserer utskillelse av exotoksiner, spesielt ved dyrking under anvendelse av en anriket næringsvæske .
Det vil være gunstig at S.aureus, i tillegg til B-hemolysin, også utskiller andre ekstracellulære produkter slik som enzymer og andre hemolysiner (a-, f- og 6-hemolysiner), og alle slike andre ekstracellulære produkter kan toksoidiseres og innlemmes i den toksoide komponenten som er beskrevet over.
Innlemmelsen av den toksoide komponenten som beskrevet heri, enten i selve vaksinen eller i vaksinasjonskuren, er spesielt fordelaktig for å tilveiebringe en beskyttelse overfor meget toksigene stammer av S.aureus. Således, idet vaksinen fremstilt ved oppfinnelsen som er basert på in vivo-antigen (antigener) tilveiebringer en god beskyttelse når det gjelder lave til moderate toksigene stammer, er beskyttelsen overfor selv høye toksigene stammer vesentlig når den toksoide komponenten er inkludert. Foretrukket er den toksoide komponenten kombinert med in vivo-antigen (antigener) komponenten i en kombinert vaksine. Serologiske undersøkelser har vist at der ikke er noen betydelig forskjell i antistofftitrene overfor in vivo-antigenet (antigener) eller B-hemolysinet når komponenten tilføres samtidig men på separate anatomiske steder (f.eks. for å unngå uønskede påvirkninger mellom lesjonene som er indusert av hver komponent) eller sammen.
Vaksinen fremstilt ved oppfinnelsen kan tildannes slik at den omfatter en "depot"-komponent for å øke retensjonen av det antigeniske material på tilføringsstedet. F.eks. kan mineral-olje tilsettes i tillegg til det foretrukne hjelpestoff, som er dekstransulfat, for å tilveiebringe denne depoteffekten.
Måten vaksinen tilføres på er ikke kritisk, og man kan f.eks. anvende subkutan, intra-kutan og intra-muskulær injeksjon. Vaksinen kan også tilføres intra-mammalt, om ønsket sammen med antibiotika, endelig vil det være ønskelig for den fagkyndige på området at vaksinen fremstilt i overensstemmelse med oppfinnelsen kan kombineres med vaksiner for andre bakterie-slekter for å tilveiebringe en eneste "bredspektret" vaksine.
Oppfinnelsen skal nå beskrives under henvisning til spesifikke eksempler på fremstilling av vaksinen ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen, og anvendelsen derav.
A. FREMSTILLING AV VAKSINE
1. Staphyloccocus aureus (Stamme JG80) ble dyrket fra en utgangskultur i 24 timer i 1 liter "Oxoid" næringsvæske hvortil man hadde tilsatt 10 % (v/v) steril sauemelkemyse. Kulturen ble dyrket ved 37°C med rysting på en bevegelig rysteinnretning. Etter dyrking i 24 timer, ble det tilsatt formalin til en endelig konsentrasjon på 1 % (v/v) og kulturen ble deretter holdt ved 4°C i 24 timer. Cellene ble deretter fjernet ved sentrifugering ved 7000 rpm (en time, 4°C) og supernatanten ble fjernet. Cellene ble resuspendert i steril fosfatbufret 0,9% saltløsning med pH 7,2 og justert til en konsentrasjon på 10<10>/ml spektro-fotometrisk. Tiomersal ble tilsatt til en endelig konsentrasjon på 0,015 % (w/v). Like før vaksinasjonen av dyrene ble dekstransulfat (molvekt = 500.000) (Pharmacia Fine Chemicals) tilsatt til denne vaksinen i en konsentrasjon på 50 mg/ml. Suspensjonen ble rystet kraftig i
omtrent 30 minutter. Denne vaksinen er "Cl".
I det foregående er "v" anført for volumm og "w" for vekt i samsvar med vanlig nomenklatur for volum- henholdsvis vekt-angivelser. 2. Staphyloccocus aureus (stamme JG80) ble dyrket fra en utgangskultur i 48 timer i 1 liter "Oxoid Brain-Heart Infusion" væske. Kulturen ble dyrket ved 37°C og rystet forsiktig på en orbital rysteinnetning. Kulturen ble sentrifugert ved 7.000 rpm i en time ved 4°C, og 800 ml av supernatanten ble konsentrert ved lyofilisering til et volum på 100 ml. Det ble tilsatt 1 ml formalin og prepa-ratet fikk stå ved romtemperatur i minst fire timer. Dette toksoidet ble deretter frosset (-16°C) i 10 ml prøvemengder og opptint like før bruk. Dette er vaksinen "Tl".
B. VAKSINASJON
Syv førstegangsfødende australske Illawarra Shorthorn kviger ble vaksinert omtrent tre uker etter fødselen. Syv like kviger var ikke-vaksinerte kontroller.
Vaksine Cl ble gitt i form av en 1 ml dose subkutant på baksiden av det venstre bakbenet omtrent 50 cm over hasen. Vaksine Tl ble også gitt i form av en 1 ml dose subkutant
på samme stedet på det høyre bakbenet.
To uker senere ble den samme vaksinasjonskuren gjentatt henholdsvis ved siden av de første stedene.
C. UTPRØVNING
Tre uker etter den andre vaksinasjonen ble alle kvigene smittet ved infusjon av omtrent 1000 kolonidannende enheter av S.aureus (stamme Newbould 305) inn i den fremre venstre spenen. Ulike målinger ble utført før og etter bakterieangrepet for å måle effekten av vaksinasjonen på angrepet.
Data som er vist i tabellene 1, 2 og 3 indikerer at vaksina-sjonsprotokollen viser en vesentlig grad av beskyttelse fra angrepsorganismene.
Resultatene fra lignede forsøk i hunnsauer (smittet med
S. aureus stamme JG80 eller Newbould 305) og kuer (smittet med S. aureus stamme 32V) er vist i henholdsvis tabellene 4, 5, 6 og 7.
I det følgende angis en oversikt over litteraturhenvisninger relatert til de anførte steder i beskrivelsen.
LITTERATURHENVISNINGER:
1. Beining, P.R. og Kennedy, E.R. (1963), J. Bact.
8J5 : 73 2. 2. Bracewell, C.D., og Pattison, I.H. (1958), J. comp. Path. 68 : 121. 3. Bridre. J. (1907), Bull. Soc. Cent. Med. Vet. 61 : 500.' 4. Butt, E.M., Bonynge, C.W. og. Joyce, R.L. (1936), J. Inf. Diseases. 58 : 5-9. 5. Caputy, G.G. og Casterton, J.w. (1982), Infect. Immun. 36 : 75 9. 6. Colditz,; I.G. og Watson, D.L. (1982a), Res. Vet. Sei. 33 : 146. 7. Colditz, I.G. og Watson, D.L. (1982b), Microbiol. Immunol. 26 : 1171. 8. Derbyshire, J.B. (1960b), J. comp. Path 7 0 : 222. 9. Derbyshire, J.B. (1961a), J. comp. Path. 7J. 146. 10. Derbyshire, J.B. (1961b), Res. vet. Sei. 2 : 112. 11. Kennedy, J.W., Watson, D.L. og Bennell, M.A.
(1981), Vet. Immunol. Immunopathol. 2 : 367 . 12. Kennedy, J.W. og Watson, D.L. (1982), Aust. J. exp. Biol. Med. Sei . 60 : 64 3 . 13. Lascelles, A.K. og McDowell, G.H. (1984), Transplant Rev. 19 : 170.
14. Minett, F.C. (1939), J. comp. Path. 5_2 : 167.
15. Norcross, N.L. og Opdebeeck, J.P. (1983), Vet. Microbiol. 8 : 397. 16. Singleton, L., Ross, G.W., Stedman, R.A. and Chanter, K.V. (1967), J. comp. Path. 77 : 279.
17. Watson, D.L. (1975), Res. vet. Sei. 19_ : 288.
18. Watson, D.L. (1976), Immunology 31 : 159.
19. Watson, D.L. (1982), Res. vet. Sei 32 : 311.
20. Watson, D.L. (1984), J. Dairy Sei 67 : 2608.
21. Watson, D.L. og Lees, C.G. (1978), Aust. vet. J. 54 : 374. 22. Watson, D.L. o<g>' Prideau, J.A. (1979), Microbiol. Immunol. 2 3,: 543. 23. Watson, D.L. og Kennedy, J.W. (1981), Aust. vet. J. 57 309. 24. Yokomizo, Y. og Isayama, Y. (1978), Microbiol. Immunol. 2:1.
Claims (4)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av en mastittvaksine omfattende det eller de antifagocytiske in vivo-antigener som fremstilles av en pseudokapselproduserende stamme av S. aureus, effektiv ved immunisering av drøvtyggere overfor intra-mamma angrep av S. aureus og andre arter av slekten Staphylococcus,
karakterisert ved(i) dyrking av en pseudokapselproduserende stamme av S.aureus in vitro i et nærende vekstmedium forsterket ved tilsetning av melk, melkemyse eller en annen melkekomponent inneholdende en aktiv bestanddel som finnes i melken eller melkemysen, idet denne aktive bestanddel er i stand til å indusere fremstilling av det eller de antifagocytiske pseudokapsulære antigener når S. aureus dyrkes in vitro, (ii) deretter inaktiveres bakteriene, og eventuelt (iii) tilsettes et hjelpestoff som fremmer fremstillingen av lgG2 subtype antistoff.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at det som pseudokapsel-produserende stamme av S.aureus anvendes stammen JG80.
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 1 eller 2, karakterisert ved at steril melkemyse tilsettes til det nærende vekstmedium.
4. Fremgangsmåte som angitt i krav 1 - 3, karakterisert ved at det som hjelpestoff anvendes dekstransulfat.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AUPH052885 | 1985-05-13 | ||
| PCT/AU1986/000134 WO1986006634A1 (en) | 1985-05-13 | 1986-05-13 | Mastitis vaccine |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO870123L NO870123L (no) | 1987-01-13 |
| NO870123D0 NO870123D0 (no) | 1987-01-13 |
| NO169820B true NO169820B (no) | 1992-05-04 |
| NO169820C NO169820C (no) | 1992-08-12 |
Family
ID=3771099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO870123A NO169820C (no) | 1985-05-13 | 1987-01-13 | Fremgangsmaate for fremstilling av en mastittvaksine |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4840794A (no) |
| EP (1) | EP0259324B1 (no) |
| JP (1) | JPS62502839A (no) |
| AT (1) | ATE78403T1 (no) |
| AU (1) | AU589185B2 (no) |
| CA (1) | CA1338879C (no) |
| DE (1) | DE3686158T2 (no) |
| DK (1) | DK16087D0 (no) |
| FI (1) | FI875015A (no) |
| IN (1) | IN164864B (no) |
| NO (1) | NO169820C (no) |
| NZ (1) | NZ216119A (no) |
| WO (1) | WO1986006634A1 (no) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5198215A (en) * | 1987-06-22 | 1993-03-30 | Noordzee Laboratorium N.V. | Composition for controlling mastitis in ruminants, method for its preparation and method of treatment of ruminants |
| NL8701451A (nl) * | 1987-06-22 | 1989-01-16 | Noordzee Lab N V | Preparaat voor de bestrijding van mastitis bij herkauwers, werkwijze voor de bereiding daarvan en werkwijze voor het behandelen van herkauwers. |
| GB9201013D0 (en) * | 1992-01-17 | 1992-03-11 | Animal Health Inst | Vaccines |
| EP0951296A1 (en) * | 1996-08-02 | 1999-10-27 | Smithkline Beecham Corporation | NOVEL FtsL |
| US5770208A (en) * | 1996-09-11 | 1998-06-23 | Nabi | Staphylococcus aureus B-linked hexosamine antigen |
| US6294177B1 (en) | 1996-09-11 | 2001-09-25 | Nabi | Staphylococcus aureus antigen-containing whole cell vaccine |
| WO2003049752A2 (en) | 2001-12-11 | 2003-06-19 | Institut Pasteur | Gram positive bacteria preparations for the treatment of diseases comprising an immune dysregulation |
| US6984381B2 (en) | 2002-07-05 | 2006-01-10 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Vaccine for the prevention of bacterial infection of the bovine mammary gland |
| JP5439127B2 (ja) * | 2009-11-13 | 2014-03-12 | 株式会社さいわいメディカル | 乾癬又はアトピー性皮膚炎治療剤 |
| KR102061735B1 (ko) | 2018-06-08 | 2020-01-02 | 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) | 황색포도알균 약독화 장독소 및 세포독소 재조합 단백질을 포함하는 백신 조성물 |
| CN110387341A (zh) * | 2019-07-17 | 2019-10-29 | 安徽赛德齐瑞生物科技有限公司 | 一种葡萄球菌培养液及其培养方法 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CH417852A (fr) * | 1961-05-15 | 1966-07-31 | Parke Davis & Co | Procédé de préparation d'un antigène staphylococcique |
| US3535121A (en) * | 1967-10-09 | 1970-10-20 | Beatrice Foods Co | Production of cream cheese flavor |
| GB1182555A (en) * | 1967-10-16 | 1970-02-25 | Saphar Lab Ltd | An Anti-Mastitis Vaccine |
| US3625833A (en) * | 1970-01-23 | 1971-12-07 | James J Schaffer | Process for producing antiviral substance from staphylococcus organisms |
| US4327082A (en) * | 1979-07-12 | 1982-04-27 | Adcock-Ingram Laboratories Limited | Mastitis vaccination |
| US4425330A (en) * | 1981-05-20 | 1984-01-10 | Cornell Research Foundation, Inc. | Bovine mastitis vaccine and method for detecting efficacy thereof |
| AU8592982A (en) * | 1981-07-14 | 1983-01-20 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Mastitis vaccine |
| US4762712A (en) * | 1983-08-31 | 1988-08-09 | Stolle Research & Development Corporation | Anti-mastitis polyvalent vaccine, method of administration and method for production thereof |
| US4591499A (en) * | 1984-01-20 | 1986-05-27 | J. B. Lima, Inc. | Method for treatment and prevention of mastitis |
-
1986
- 1986-05-12 NZ NZ216119A patent/NZ216119A/xx unknown
- 1986-05-12 CA CA000508934A patent/CA1338879C/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-05-12 IN IN360/CAL/86A patent/IN164864B/en unknown
- 1986-05-13 WO PCT/AU1986/000134 patent/WO1986006634A1/en active IP Right Grant
- 1986-05-13 US US07/012,060 patent/US4840794A/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-05-13 EP EP86903133A patent/EP0259324B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-05-13 AT AT86903133T patent/ATE78403T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-05-13 AU AU58619/86A patent/AU589185B2/en not_active Ceased
- 1986-05-13 DE DE8686903133T patent/DE3686158T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-05-13 JP JP61502816A patent/JPS62502839A/ja active Pending
-
1987
- 1987-01-13 DK DK016087A patent/DK16087D0/da not_active Application Discontinuation
- 1987-01-13 NO NO870123A patent/NO169820C/no unknown
- 1987-11-13 FI FI875015A patent/FI875015A/fi not_active Application Discontinuation
-
1989
- 1989-04-04 US US07/332,739 patent/US5032522A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NZ216119A (en) | 1989-01-06 |
| FI875015A0 (fi) | 1987-11-13 |
| DE3686158T2 (de) | 1993-02-25 |
| WO1986006634A1 (en) | 1986-11-20 |
| AU589185B2 (en) | 1989-10-05 |
| JPS62502839A (ja) | 1987-11-12 |
| NO870123L (no) | 1987-01-13 |
| DK16087A (da) | 1987-01-13 |
| IN164864B (no) | 1989-06-24 |
| CA1338879C (en) | 1997-01-28 |
| EP0259324B1 (en) | 1992-07-22 |
| FI875015A (fi) | 1987-11-13 |
| EP0259324A4 (en) | 1988-02-18 |
| US5032522A (en) | 1991-07-16 |
| NO870123D0 (no) | 1987-01-13 |
| EP0259324A1 (en) | 1988-03-16 |
| DE3686158D1 (de) | 1992-08-27 |
| US4840794A (en) | 1989-06-20 |
| ATE78403T1 (de) | 1992-08-15 |
| NO169820C (no) | 1992-08-12 |
| DK16087D0 (da) | 1987-01-13 |
| AU5861986A (en) | 1986-12-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5032522A (en) | Method of making staphylococcus aureus vaccine | |
| US5688682A (en) | Method for producing a bacterial vaccine and novel vaccines produced thereby | |
| Yoshida et al. | Staphylococcal capsular vaccine for preventing mastitis in two herds in Georgia | |
| US6391315B1 (en) | Vaccine for inhibiting and preventing induced staphylococcus infection, isolated antigens used therein, and isolated antibodies induced thereby | |
| KANEMORI et al. | The role of extracellular protease produced by Vibrio anguillarum | |
| JP3178720B2 (ja) | パスツレラ・ムルトシダのトキソイドワクチン | |
| WO1993010815A1 (en) | Non-capsulated mutants of bacteria useful as vaccines | |
| US5198215A (en) | Composition for controlling mastitis in ruminants, method for its preparation and method of treatment of ruminants | |
| NZ206083A (en) | Cattle vaccine against moraxella bovis | |
| US5059419A (en) | Streptococcus suis antiserum and its use in treating Streptococcus suis infections | |
| HAN et al. | Effects of adjuvants on the immune response of staphylococcal alpha toxin and capsular polysaccharide (CPS) in rabbit | |
| US5861162A (en) | Multivalent inocula for lessening incidence of liver abscesses in cattle | |
| PL201804B1 (pl) | Zastosowanie szczepów Lactobacillus | |
| WO1990011777A1 (en) | Preparation of unassembled pilus subunits and vaccines containing them | |
| CA1327313C (en) | Composition for controlling mastitis in ruminants, method for its preparation and method of treatment of ruminants | |
| US4465665A (en) | Detoxified E. coli neurotoxin, preparation thereof and immunological preparations containing it | |
| CA2223754C (en) | Actinomyces pyogenes and actinomyces pyogenes/fusobacterium necrophorum vaccines for immunizing cattle and sheep | |
| RU2815387C1 (ru) | Штамм бактерий Corynebacterium pseudotuberculosis, предназначенный для получения моно- или поливалентных иммуногенных композиций, направленных на специфическую профилактику казеозного лимфаденита (псевдотуберкулеза) мелкого рогатого скота | |
| EP0563288B1 (en) | Immunopotentiation of vaccines, particularly swine pleuropneumonia vaccines | |
| US4539201A (en) | Medicament and method for inducing immunity to infectious bovine keratoconjunctivitis | |
| Shakoor et al. | Experimental trials of live attenuated and inactivated Staphylococcus aureus vaccines in rabbits | |
| KR960014620B1 (ko) | 신규한 약독화 녹농균 및 그를 이용한 녹농균 감염 예방 백신 | |
| US6342230B1 (en) | Materials and methods for prevention or reduction of the severity of heartwater | |
| RU2248806C1 (ru) | Живая вакцина против колибактериоза свиней | |
| JPH06172213A (ja) | マイコプラズマ肺炎用ワクチン |