NO161826B - Proeveinnretning og fremgangsmaate for aa bestemme an analytt i en proeve. - Google Patents

Proeveinnretning og fremgangsmaate for aa bestemme an analytt i en proeve. Download PDF

Info

Publication number
NO161826B
NO161826B NO842055A NO842055A NO161826B NO 161826 B NO161826 B NO 161826B NO 842055 A NO842055 A NO 842055A NO 842055 A NO842055 A NO 842055A NO 161826 B NO161826 B NO 161826B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
sample
upper layer
blood
layer
glucose
Prior art date
Application number
NO842055A
Other languages
English (en)
Other versions
NO161826C (no
NO842055L (no
Inventor
Shuenn-Tzong Chen
Original Assignee
Miles Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Miles Inc filed Critical Miles Inc
Publication of NO842055L publication Critical patent/NO842055L/no
Publication of NO161826B publication Critical patent/NO161826B/no
Publication of NO161826C publication Critical patent/NO161826C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/525—Multi-layer analytical elements
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805—Test papers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Cable Accessories (AREA)
  • Fire-Detection Mechanisms (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Emergency Protection Circuit Devices (AREA)
  • Measurement Of The Respiration, Hearing Ability, Form, And Blood Characteristics Of Living Organisms (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en prøveinnretning og en fremgangsmåte for å bestemme en analytt i en prøve, hvorved prøven bringes i kontakt med innretningen og overskudd prøve deretter tørkes vekk. Etter avtørkingen iakttas en påvisbar respons i innretningen dersom den bestemte analytten er til-stede i prøven.
Oppfinnelsen har anvendbarhet innen mange anlyseområder. Måling av glukose i blod eller serum har lenge vært en
sak av viktigste betydning for diabetikeren. Måling av kaliumnivået i blod hjelper legene ved diagnosen av tilstander som fører til muskelirritabilitet og stimuleringsendrin-ger i infarktdannelse i hjertemuskelen. Slike tilstander omfatter oliguria, anuria, urinveishindring og nyresvikt på grunn av sjokk. Påvisningen av skjult blod i avføring er likeledes av betydelig hjelp ved diagnosen av mange indre-medisinske sykdomstilstander.
Med prøver slik som av blod og avføring, har en prøveinnret-ning hvor prøven tilføres fysisk etterfulgt av direkte visu-ell eller instrumentell observasjon, en medfølgende vanske-lighet som ikke fåes med vandige oppløsninger, slik som urin. Både blod og avføring inneholder sterkt pigmenterte bestanddeler som kan forstyrre observasjonen av en påvisbar respons som skyldes tilstedeværelsen av bestemte stoffer under analyse.
En hurtig, lettvint fremgangsmåte for å bestemme slike prøve-bestanddeler, hvorved prøveoverskudd bare kan tørkes bort ville selvsagt i stor grad øke nivået til disse teknikkene, såvel som andre hvor hurtige, nøyaktige bestemmelser ville være fordelaktige.
Bruken av en prøveinnretning hvor en bærergrunnmasse, slik som papir, er impregnert med en indikator for glukose er beskrevet i US patentskrift nr. 2.981.606. En slik innretning sies å være anvendelig ved bestemmelse av glukose i
blod.
Patentskriftet beskriver en glukoseindikator som omfatter
en blanding av glukoseoksydase, peroksydase og et farge-dannende stoff, slik som et benzidin eller o-tolidin. Ved å impregnere papir med en slik blanding og tørke, fåes det et prøvepapir som kan brukes til å måle glukose ved å bringe det i kontakt med en dråpe blod eller urin og iaktta even-tuell farge som dannes.
Innretningen ifølge patentskriftet har imidlertid en ulempe når prøven er blod: fargestoffet i blod forstyrrer den lette observasjonen av fargen som fåes ved en positiv prøve. Innehaverne av US patentskrift nr. 3.092.465 og 3.298.789
ga seg i kast med dette problemet. Begge disse patentene vedrører forskjellige aspekter ved en prøveinnretning for å analysere glukose i blod. Begge beskriver prøveinnretnin-ger med et enzymsystem i en porøs bærergrunnmasse, slik som i US patentskrift nr. 2.981.606.
Denne impregnerte sammensetningen er beskyttet mot fargings-tendensen til hemoglobin og andre blodbestanddeler ved bruk av et beskyttende belegg, eller øvre lag, av en membran som er gjennomtrengelig for vann og glukose, men som skiller ut forholdsvis store molekyler. Følgelig kan forstyrrende pigmenter slik som hemoglobin vaskes bort før innretningen observeres for tilsynekomsten av, eller endringen i farge som skyldes nærværet av glukose. Den beskyttende membran kan være formet som en flytende film, f.eks. en oppløsning av celluloseacetat i benzen, som får tørke og derved etter-later en kontinuerlig, porøs film over det reagensimpregnerte papirlaget.
Lignende teknikk er beskrevet i US patentskrift nr. 3.992.158. Denne beskrivelsen er generelt rettet mot et prøveelement i et stykke som har minst to lag og omfatter et spredningslag og et reagenslag. En flytende prøve bringes i kontakt med spredningslaget som er porøst og som forårsaker at prøven fordeler seg ut over overflaten av spredningslaget.
For å oppsummere den teknologiske utviklingsbakgrunnen som fører frem til foreliggende oppfinnelse, så er det kjent innretninger som påviser tilstedeværelsen av mange analyt-ter i væskeprøver. F.eks. kan glukose i blod påvises ved å bruke en papirstrimmel impregnert med glukoseoksydase, peroksydase og en passende indikator.
En slik innretning har, selv om den har hatt stor kommer-siell suksess, ved glukoseanalyse av urin, ikke desto mindre en alvorlig ulempe ved blodanalyse: forstyrrelse ved observasjon av fargedannelse som skyldes slike blodbestanddeler som hemoglobin. US patentskrift nr. 3.092.465, 3.298.789 og 3.992.158 ga seg i kast med dette problemet ved å tilveiebringe et porøst filmoverlag for å filtrere ut de forstyrrende blodbestanddelene mens den vandige delen av prøven fikk trenge gjennom filmen og komme i kontakt med reagenslaget.
Slike innretninger muliggjør fjerning av de forstyrrende bestanddelene ved vasking i en vannstrøm. En bort-tørkings-teknikk har imidlertid for alle praktiske formål unnveket tidligere eksperimentatorer. Den foreliggende oppfinnelse gir brukeren fordelen av bare å tørke bort prøveoverskudd fra prøveinnretningen og derved eliminere nødvendigheten av vasking.
Visse uttrykk som er brukt i den foreliggende sammenheng, bør på dette punkt nevnes, og følgende definisjoner gis følgelig for å klargjøre omfanget av den foreliggende oppfinnelse og for å muliggjøre dens utforming og bruk. Uttrykket "stoff" er brukt for å betegne vannoppløselige bestanddeler i blod, avføring eller andre prøver som foreliggende oppfinnelse kan brukes til å påvise. F.eks. kan stoff omfatte glukose, hydrogenion (pH), urinsyre, kolesterol og aminosyrer.
Med "bærergrunnmasse" er det ment en fysisk enhet som skal inneholde et reagenssystem som er istand til å påvise stoffet, og som tillater separasjon og lett fjerning av blodbestanddeler som ikke er vannoppløselige. Bærergrunnmassen omfatter minst to lag; et øvre lag som er porøst for, og tillater passeringen av, vann og oppløste stoffer gjennom det øvre laget, og et nedre lag som inneholder reagenssystemet.
Den omtalte "bærerdel" omfatter en lang rekke materialer
og størrelser. Ideelt sett er den en forholdsvis tynn film som er avlang og har hovedsakelig plan over- og underside. Bærergrunnmassen er festet til en ende av oversiden, idet
den andre enden tjener som et håndtak. Typisk for egnede materialer til bærerdelen er en lang rekke plaster og polymerer slik som celluloseacetat, polyetylentereftalat, poly-karbonater og polystyren.
Et "reagenssystem", slik uttrykket her er ment, omfatter
en eller flere bestanddeler som, når de virker alene eller sammen, er i stand til å gi en påvisbar eller detekterbar respons i nærvær av det bestemte stoffet som analyseres. Et slikt reagenssystem som f.eks. kan anvendes til påvisning av glukose i blod, kan omfatte glukoseoksydase, peroksydase og en indikator som endrer farge i nærvær av hydrogenperoksyd. Reagenssystemet kan i tillegg omfatte en hvilken som helst av flere kjente pH-indikatorer. Det sistnevnte kan brukes i en prøve på blod-pH. Mange andre reagenssystemer kan brukes i foreliggende oppfinnelse, idet utvelgelsen av disse ligger innenfor kunnskapene til en fagmann på området, for-utsatt kjennskap til foreliggende beskrivelse.
En "detekterbar respons" er et fysikalsk eller kjemisk utslag eller endring som skyldes tilstedeværelsen av det bestemte stoffet i prøven. Det kan være en endring i eller tilsynekomsten av farge, fluorescens, luminescens, lysabsorbsjon eller -refleksjon, ultrafiolette eller innfrarøde spektra og enhver annen egenskap som kan iakttas visuelt eller in-strumentelt .
Med "polymer" er det ment et materiale som hovedsakelig
er sammensatt av protein eller karbohydrat og følgelig inneholder kjeder av aminosyrer, glukosid o.l., med høy molekyl-vekt. Inkludert i uttrykket polymer er gelatin, alginsyre og dens salter, og agarose.
Foreliggende oppfinnelse ligger i oppdagelsen av en ny prøve-innretning for å påvise tilstedeværelsen av et stoff i blod. Den omfatter en forbedring av tidligere kjente innretninger som inneholder et reagenssystemlag festet med en av sine sider til en bærerdel, idet den andre siden har festet til seg et øvre lag som er porøst for vann og stoffet, men som er i det vesentlige ugjennomtrengelig for proteiner og fargede pigmenter, slik som hemoglobin, som finnes i blod. Forbedringen ligger i bruken av, som det øvre lag, minst delvis kryssbundede polymerer, inkludert gelatin, alginsyre og dens salter, og agarose. Den forbedrede prøveinnretnin-gen gjør det mulig for brukeren å tilføre blod eller andre prøver til det øvre laget, vente en på forhånd bestemt tid for å la stoffet passere gjennom det øvre laget til reagenssystemlaget og ganske enkelt tørke bort prøveoverskuddet. Nødvendigheten av forsiktig å vaske bort overskytende blod eller annen prøve, og det medfølgende forstyrrende protein-aktige materialet og fargede pigmenter, utelukkes følgelig. Ved å ha evnen til å kunne tørkes av, gir prøveinnretningen forbedret observerbarhet for den detekterbare respons, større nøyaktighet og bekvemhet, og minimaliserer fremkomsten av falske, negative resultater.
Ifølge oppfinnelsen er det således tilveiebragt en prøve-innretning og en fremgangsmåte for å bestemme tilstedeværelsen av et stoff i en prøve, og denne innretning og fremgangsmåte er kjennetegnet ved de trekk som fremgår fra krav 1-3, henholdsvis krav 4.
Foreliggende prøveinnretning omfatter 4 grunnelementer: en bærerdel, et nedre reagenssystemlag, et reagenssystem og et øvre lag. Reagenssystemlaget inneholder reagens systemet som gir respons på stoffet
som skal analyseres, og har det øvre laget festet til den ene siden, idet den andre siden er festet til bærerdelen.
Det øvre og nedre laget i sammensetningen(bærergrunnmassen) er festet
til en ende av en avlang bærerdel slik at det nedre laget i grunnmassen befinner seg mellom det øvre laget og bærerdelen. Ved bruk tjener den andre enden av bærerdelen som et bekvemt håndtak. En slik prøveinnretning kan holdes i håndtaksenden mens den andre enden med bærergrunnmassen bringes i kontakt med prøven.
Anvendelige materialer til bærerdelen omfatter filmer av en lang rekke plaster eller polymerer. Eksempler omfatter slike polymerer som cellulose-aoetat, polyetylentereftalat, polykarbonat og polystyren. Bæreren kan være opak, eller den kan slippe gjennom lys eller annen energi. Foretrukne bærere omfatter gjennomskinnelige materialer sem er i stand til å slippe gjennom elektromagnetisk stråling med en bølgelengde i området fra 200 nm til 90 nm. Bærere behøver selvfølgelig ikke slippe gjennom over hele 200-900 nm området, selv am det for fluorametrisk påvisning av analytiske resultater er ønskelig at bærer er gjennomskinnelig over et bånd som er videre enn, eller minst like stort som absorpsjons- og emisjonsspektraene til ethvert fluorescerende materiale som brukes til påvisning. Det kan også være ønskelig å ha en bærer som slipper gjennom ett eller flere trange bølgelengdebånd, og sam er opak overfor tilgrensende bølgelengdebånd. Dette kan f.eks. oppnås ved å impregnere eller belegge bæreren med ett eller flere fargestoffer som har egnede absorpsjonskarakteristika.
Bærergrunnmassen er fortrinnsvis festet til en avlang bærerdel med den øvre, hovedsakelig plan overflate, slik som et avlangt stykke polystyrenfilm. Bærergrunnmassen festes til den plane overflaten i en ende, idet den andre enden av polystyrenet for tjene som et bekvemt håndtak.
Bærergrunnmassen kan være festet til bærerdelen ved hjelp
av hvilket som helst middel som er forenlig med den påtenkte bruk. En fremgangsmåte er å bruke en dobbeltsidig tape mellom bærergrunnmassen og bærerdelen. En slik tape er kjent som Double-Stick R . En annen måo te a o feste prøve-enheten er å forme en film av en emulsjon av en vandig poly-merfase (dvs. en hydrofil bærergrunnmasse) som inneholder reagenssystemet, direkte til bæreren etterfulgt av et tørke-trinn.
Som fastslått ovenfor, avhenger reagenssystemet som anvendes av den endelige analyse som skal utføres med prøveinnret-ningen. Dersom stoffet som skal analyseres er glukose,
er reagenssystemet et av mange kjente sammensetninger som gir en kolorimetrisk eller annen påvisbar respons på det sukkeret. Et foretrukket reagenssystemet for glukose omfatter glukoseoksydase, peroksydase og en Redox-indikator, slik som benzidin og/eller dets derivater. Redix-indikatorer som er egnet til et slikt glukosefølsomt reagenssystemet, omfatter o-tolidin, 3,3', 5,5'-tetrametylbenzidin (TMB), guaiac, o-dianisidin, 4-aminoantripyren og andre som er kjente innen teknikken. De er istand til å bli oksydert i nærvær av hydrogenperoksyd og et peroksydativt, aktivt stoff, hvorved det dannes et farget produkt.
Andre reagenssystemer som kan brukes i oppfinnelsen omfatter de som er istand til å påvise urinsyre, kolesterol og aminosyrer. For urinsyre kan et egnet reagenssystem omfatte uricase, peroksydase og en redox indikator; for kolesterol kan det omfatte kolesteroloksydase, peroksydase og en redox indikator; og for aminosyrer, den respektive aminosyreoksy-dase, peroksydase og en redox indikator.
Oppfinnelsen kan også brukes til å påvise skjult blod i avføring, og et egnet reagenssystemet til den bruken kan omfatte et organisk hydroperoksyd og en redox indikator.
Reagenssystemet inneholdes i et lag av bærergrunnmassen
som befinner seg mellom det øvre laget og bærerdelen. I tillegg til et reagenssystem kan reagenslaget også omfatte andre lag som er komplementære med reagenssystemet, og som hjelper til ved bruken av prøveinnretningen. Det kan f.eks. være ønskelig å innlemme et lysreflekterende lag for å hjelpe til ved lysrefleksjonsmålinger, eller et absorberende lag for å hjelpe til ved absorbsjon av prøven fra det øvre laget.
Et foretrukket reagenslag omfatter filterpapir og andre sugende materialer som er blitt inkorporert med bestanddelene i reagenssystemet, slik som glukoseoksydase, peroksydase og TMB. Filterpapiret kan være impregnert med reagenssystemet ved å dyppe det i en oppløsning som inneholder bestanddelene i reagenssystemet. Om nødvendig kan det anvendes to eller flere dyppeoppløsninger, slik at filterpapiret i rekkefølge dyppes i hver oppløsning med tørking mellom dyppingene. En slik flerdyppingsfremgangsmåte mulig-gjør isoleringen av reagenssystembestanddeler som ikke er forenlige med hverandre i oppløsning, men som er forenlige i den tørre tilstanden.
Etter impregnering, kan det tørkede filterpapiret belegges med det øvre laget for å danne en sammensatt bærergrunnmasse og deretter monteres på bærerdelen, eller det kan monteres direkte på bærerdelen etterfulgt av anbringelse av det øvre laget. Alternativt kan andre lag festes til filterpapiret, slik som lysreflekterende og/eller absorberende lag, etterfulgt av anbringelse av det øvre laget og festing av bærergrunnmassen til bærerdelen.
Selv om mange måter å feste bærergrunnmassen til bærerdelen vil være åpenbar for fagfolk på området, er det foretrukket å o bruke en dobbeltsidig tape, slik som Double StickR
Det unike øvre laget ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter en protein- eller karbohydratpolymer som er blitt herdet ved kryssbinding. Den resulterende kryssbundne polymer er funnet å være enestående motstandsdyktig mot farging som skyldes blodbestanddeler. Mens filmenbeleggene som er nevnt ovenfor kan brukes i en vaskefremgangsmåte, resul-terer forsøk på å tørke bort prøveoverskudd i minst delvis innleiring av fargestoffet i filmen og/eller ødeleggelse av filmens overflate. Den herdede polymeren ifølge foreliggende oppfinnelse lider ikke av en slik feil. Den her beskrevne og krevde prøveinnretning brukes således kun ved å tilføre prøven til gunnmassen og tørke den av, slik som med en serviett, bomullsdott eller papirhåndkle. Enhver respons på analytten iakttas så uhindret av forstyrrende prøvebestanddeler.
Det øvre laget tilføres fortrinnsvis til reagenslaget direkte som en oppløsning eller emulsjon. Således tas polymer,
et passende kryssbindingsmiddel og mulige andre bestanddeler opp i et egnet oppløsningsmiddel, slik som vann, og formes som en film på reagenslaget. Derpå følgende tørking gir en bærergrunnmasse som er istand til å påvise en prøve-bestanddel, mens forstyrrende prøvebestanddeler fanges opp på overflaten av det øvre laget. Videre kan slike forstyrrende stoffer tørkes bort fra overflaten av det øvre laget hvorved den kryssbundne polymerfilmen forblir praktisk talt uskadd.
Kryssbinding av polymeren som brukes i det øvre laget, kan oppnås ved hjelp av enhver kjent kryssbindingsfremgangsmåte, enten kjemisk (gjennom et hvilket som helst av flere kryss-bindingsmidler) eller ved bruken av høyenergistråling, slik som ultrafiolett lys med høy styrke. Typiske kjemiske kryss-bindingsmidler omfatter flerfunksjonene aziridinforbindel-ser, slik som "XAMA 7" og glutaraldehyd, og det er bruken av slike forbindelser som er en foretrukket vei til den ønskede herding av det øvre laget.
Kryssbindingsgraden som er nødvendig for å oppnå det øvre laget med herdet polymer, kan variere over et stort område, og eksperimentatoren kan lett skreddersy den passende ut-strekning av kryssbinding, etter den bestemte påtenkte analyse som den endelige prøveinnretningen skal brukes til. Ved siden av de bestemte kryssbindingsgradene som er opp-nådd i eksemplene nedenunder, er således enhver kryssbind-ingsgrad innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse for-utsatt at den er tilstrekkelig til å gi et herdet, øvre lag som forblir uskadd etter borttørking av prøveoverskudd, slik som med silkepapir eller papirhåndkle. Graden av kryssbinding bør selvfølgelig ikke være slik at den uteluk-ker gjennomtrengning av de vandige bestanddelene i prøven gjennom det øvre laget til reagenssystemlaget. Det regnes også med at for mye kryssbinding kan resultere i kryssbundne polymerer som er skjøre og/eller vanskelige å tilføre eller feste til reagenslaget.
De følgende eksempler er gitt for ytterligere å gi anvisning på utførelse av foreliggende oppfinnelse. Foretrukne ut-førelsesformer er beskrevet i eksperimentell detalj, og resultatene er analysert.
Eksempel 1.
Fremstilling av en avstrykningsprøveinnretning for glukose
i blod.
Det ble utført eksperimenter for å fremstille en prøvestrim-melinnretning for å måle glukose i helblod. Laboratorie-filterpapir ble impregnert med glukoseoksydase, peroksydase og TMB, etterfulgt av tørking. En vandig oppløsning av gelatin og kryssbindingsmiddel ble belagt på en side av det tørkede filterpapiret og fikk tørke. Det belagte papiret ble så montert med papirsiden ned, på en polystyrenstrimmel.
En strimmel med filterpapir ("whatman 3 MM") ble dyppet
i en oppløsning som inneholdt 1,5% (vekt/volum) TMB.2HC1
og 1,0% (vekt/volum) "Gantrez AN-139" i vann og tørket ved 60°C. "Gantrez AN" er en interpolymer mellom metylvinyl-eter og maleinsyreanhydrid. Det tørkede papiret ble så senket ned i en andre oppløsning som inneholdt 4,8% (vekt/ volum) polyvinylpyrrolidon, 5,2% (vekt/volum) tris(hyroksy-metyl)aminometan, 2,2% (vekt/volum) malonsyre, 3,7% (vekt/ volum) dinatriumalonat, 4 x 10^ IU/L peroksydase og 56.000 IU/L glukoseoksydase i destillert vann. Etter tørking ved 60°C ble papiret senket ned i en tredje oppløsning som inneholdt 1,5% (vekt/volum) etylcellulose i et oppløsningsmid-del som besto av 5% (volum/volum) etanol og 95% (volum/volum) toluen etterfulgt av tørking ved 60°C.
Det således fremstilte glukosepapiret gir en blå farge når det bringes i kontakt med en vandig oppløsning som inneholder glukose.
Det ble fremstilt en beleggoppløsning som inneholdt 12,5%
(vekt/volum) gelatin ("type A, 275 Bloom"), 0,1% (vekt/volum) natriumbenzoat, 0,5% (vekt/vekt) "XAMA-7" (et kryssbindingsmiddel basert på aziridin) i vann.
Glukosepapir fremstilt som ovenfor ble belagt med belegg-oppløsningen ved å bruke en nr. 46 Mayer stav (våtfilmtykk-else på 0,1 mm). Filmen ble tørket i en luftovn ved ca. 40°C.
Den således fremstilte bærergrunnmasse ble så kuttet opp
i en strimmel som var 5 mm bred og montert til kanten av en polystyrenfilmstrimmel ved å bruke en dobbeltsidig tape, kjent som "Double Stick". En side av den klebende tapen ble tilført den ubelagte siden av den impregnerte filter-papirstrimmelen. Den andre siden av tapen ble ført sammen med polystyrenfilmen.
Polystyrenfilraen med bærergrunnmassen påfestet ble så klip-pet opp vinkelrett på aksen til papirstrimmelen. De resulterende prøveinnretninger målte 5 x 79,6 mm. Til hver av disse ble et 5 mm stort kvadrat av bærergrunnmassen festet til en ende.
Eksempel 2.
Vurdering av den glukosemålende evne til prøveinnretningen.
En vurdering av prøveinnretningen ifølge eksempel 1 ble utført. Formålet med vurderingen var å fastslå innretnin-gens evne til å måle glukose ved å bruke en avstryknings-teknikk.
Prøveinnretningen ble inokulert med helblodprøver som det var sørget for hadde forskjellige glukosekonsentrasjoner. For hver prøve ble en dråpe helblod tilført en reagens-strimmel og deretter tørket av 30 sekunder senere med en bomullsdott. Den omsatte reagensstrimmelen ble undersøkt med et SERALYZER Rreflektansfotometer ved 770 nm, 20 sekunder etter fjerning av prøven. Denne fremgangsmåten ble gjentatt ved å bruke blodprøve med 10 forskjellige glukose-konsentras joner .
De resulterende data er stilt opp i tabellen nedenunder
og er tegnet opp grafisk i fig. I.
(K/S) er definert som
hvor R er refleksjonsdelen fra prøveinnretningen, K er en konstant og S er lysspredningskoeffesienten til det bestemte reflekterende medium. Ligningen ovenfor er en for-enklet form for den velkjente Kubelka-Munk ligning (se Gustav Kortiim, "Reflectance Spectroscopy", sidene 106-111, Springer Verlag, New York (1969).
Dataene viser en lineær dose/respons-kurve, noe som indike-rer god yteevne.
1. Prøveinnretning for å bestemme tilstedeværelsen av et stoff i en prøve omfattende en grunnmasse i et øvre og nedre lag, idet det nedre lag er festet til en bæredel, hvor det øvre lag er porøst for vann, men ugjennomtrengelig for proteiner, fargede pigmenter som er inneholdt i prøven, og det nedre lag omfatter et reagenssystem i stand til å
gi en detekterbar respons på nærvær av stoffet, karakterisert ved at det øvre lag består vesentlig av delvis kryssbundet polymer av gelatin, agarose, alginsyre, et salt av alginsyre eller blandinger herav.
2. Prøveinnretning ifølge krav 1, karakterisert ved at polymeren er gelatin. 3. Prøveinnretning for bestemmelse av nærvær av et stoff i en prøve, karakterisert ved at innretningen omfatter: - en bærergrunnmasse som har et øvre lag og et reagenssystemlag festet til det øvre lag, idet reagenssystemlaget omfatter et sugende materiale inkorporert med et reagenssystem i stand til å danne et senere svar i nærvær av stoffet, og det øvre lag omfatter en kontinuerlig film av delvis kryssbundet polymer av gelatin, agarose, alginsyre, et salt av alginsyre eller blandinger derav,
og
en bærer som har reagenssystemlaget av bærergrunnmassen festet dertil. 4. Fremgangsmåte for bestemmelse av nærvær av et stoff i en prøve, karakterisert ved føl-gende trinn:
anbringelse av prøveinnretningen ifølge krav 1
i kontakt med en prøve,

Claims (1)

  1. ».«-t. ::retter «*tlag av prøve.
NO842055A 1983-06-03 1984-05-23 Proeveinnretning og fremgangsmaate for aa bestemme en analytt i en proeve. NO161826C (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/500,976 US4543338A (en) 1983-06-03 1983-06-03 Wipe-off test device

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO842055L NO842055L (no) 1984-12-04
NO161826B true NO161826B (no) 1989-06-19
NO161826C NO161826C (no) 1989-09-27

Family

ID=23991643

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO842055A NO161826C (no) 1983-06-03 1984-05-23 Proeveinnretning og fremgangsmaate for aa bestemme en analytt i en proeve.

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4543338A (no)
EP (1) EP0130335B1 (no)
JP (1) JPS59228166A (no)
AT (1) ATE31822T1 (no)
AU (1) AU547916B2 (no)
CA (1) CA1223183A (no)
DE (1) DE3468533D1 (no)
DK (1) DK159172C (no)
ES (1) ES8605102A1 (no)
FI (1) FI80343C (no)
IE (1) IE55445B1 (no)
IL (1) IL71704A (no)
NO (1) NO161826C (no)
ZA (1) ZA843494B (no)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USRE34405E (en) * 1983-08-01 1993-10-12 Abbott Laboratories Determination of analytes in particle-containing medium
DD247808C2 (de) * 1984-04-09 1989-01-11 Dresden Arzneimittel Teststreifen zur aufnahme von blutzuckertagesprofilen und verfahren zu seiner herstellung
US4678757A (en) * 1985-04-11 1987-07-07 Smithkline Diagnostics, Inc. Device and method for whole blood separation and analysis
US4689240A (en) * 1985-06-20 1987-08-25 Miles Laboratories, Inc. Method for forming volume independent test device
CA1271398C (en) * 1985-06-28 1990-07-10 DIAGNOSTIC KIT
JPS62291565A (ja) * 1986-05-28 1987-12-18 マイルス・ラボラトリ−ズ・インコ−ポレ−テッド 硬化試薬マトリックス被膜及びその製造方法
DE3624301A1 (de) * 1986-05-28 1987-12-10 Miles Lab Gehaertete reagenzschichten und verfahren zu deren herstellung
JPS6319559A (ja) * 1986-07-11 1988-01-27 Fuji Photo Film Co Ltd 免疫分析方法
US4774192A (en) * 1987-01-28 1988-09-27 Technimed Corporation A dry reagent delivery system with membrane having porosity gradient
WO1988009824A1 (en) * 1987-06-05 1988-12-15 National Diagnostic Products (Australia) Pty. Limi Improvements in diagnostic test strips
AU626794B2 (en) * 1987-06-05 1992-08-13 National Diagnostic Products (Australia) Pty. Limited Improvements in diagnostic test strips
US4883764A (en) * 1987-07-20 1989-11-28 Kloepfer Mary A Blood test strip
US4994238A (en) * 1988-06-09 1991-02-19 Daffern George M Constant volume chemical analysis test device
US5182191A (en) * 1988-10-14 1993-01-26 Pacific Biotech, Inc. Occult blood sampling device and assay
US5212060A (en) * 1990-04-27 1993-05-18 Genesis Labs, Inc. Dry test strip comprising a dextran barrier for excluding erythrocytes
ATE137334T1 (de) * 1991-02-28 1996-05-15 Boehringer Mannheim Gmbh Testträger zur bestimmung eines analyten aus vollblut
US5268146A (en) * 1992-03-25 1993-12-07 Litmus Concepts, Inc. Fast response test panel
US5447868A (en) * 1993-09-14 1995-09-05 Propper Manufacturing Co. Inc. Method, reagent and kit for the detection of fecal occult blood
US5725774A (en) * 1995-04-07 1998-03-10 Lxn Corp. Whole blood separation method and devices using the same
US20040121339A1 (en) * 2002-12-19 2004-06-24 Jizhong Zhou Special film-coated substrate for bio-microarray fabrication and use thereof
GB2426334A (en) * 2005-05-20 2006-11-22 Orion Diagnostica Oy Application of a reagent to a matrix material
JP4675219B2 (ja) * 2005-11-16 2011-04-20 富士通株式会社 検知体
JP6219719B2 (ja) * 2010-10-23 2017-10-25 ポップ テスト エルエルシー 体液内の特定の成分のレベルを検出、検査、および監視するための装置および調合物、ならびに方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3092465A (en) * 1960-03-25 1963-06-04 Miles Lab Diagnostic test device for blood sugar
US3298789A (en) * 1964-12-14 1967-01-17 Miles Lab Test article for the detection of glucose
DE1598153C3 (de) * 1966-11-22 1973-11-22 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Diagnostisches Mittel zum Nach weis der Inhaltsstoffe von Korperflus sigkeiten
US3992158A (en) * 1973-08-16 1976-11-16 Eastman Kodak Company Integral analytical element
CA1056282A (en) * 1974-03-25 1979-06-12 Charles T. Goodhue Multilayer analytical elements for use in the assay of cholesterol
DE2460903C3 (de) * 1974-12-21 1981-12-24 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Neue 3,3',5,5'-Tetraalkylbenzidine
US4015462A (en) * 1976-01-08 1977-04-05 Miles Laboratories, Inc. Device and method for the determination of the specific gravity or osmolality of a liquid
NO770196L (no) * 1976-01-22 1977-07-25 Wellcome Found Kjemiske pr¦vesystemer.
US4301115A (en) * 1979-06-22 1981-11-17 Miles Laboratories, Inc. Test device resistant to cross contamination between reactant areas and process for making it
US4278439A (en) * 1979-12-17 1981-07-14 Miles Laboratories, Inc. Sensitizers for peroxidative activity tests

Also Published As

Publication number Publication date
ES532954A0 (es) 1986-02-16
FI80343B (fi) 1990-01-31
ZA843494B (en) 1984-12-24
IE55445B1 (en) 1990-09-12
AU547916B2 (en) 1985-11-14
FI80343C (fi) 1990-05-10
DK270684A (da) 1984-12-04
DE3468533D1 (en) 1988-02-11
EP0130335A1 (en) 1985-01-09
FI842189A0 (fi) 1984-05-31
IE841371L (en) 1984-12-03
JPS59228166A (ja) 1984-12-21
DK159172B (da) 1990-09-10
IL71704A (en) 1988-10-31
NO161826C (no) 1989-09-27
CA1223183A (en) 1987-06-23
DK270684D0 (da) 1984-05-30
AU2856484A (en) 1984-12-06
EP0130335B1 (en) 1988-01-07
ES8605102A1 (es) 1986-02-16
ATE31822T1 (de) 1988-01-15
US4543338A (en) 1985-09-24
DK159172C (da) 1991-02-11
FI842189A (fi) 1984-12-04
NO842055L (no) 1984-12-04
IL71704A0 (en) 1984-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO161826B (no) Proeveinnretning og fremgangsmaate for aa bestemme an analytt i en proeve.
KR970003312B1 (ko) 검체 결정용 최소 공정 시스템
US7323315B2 (en) Method for reducing effect of hematocrit on measurement of an analyte in whole blood
US5460974A (en) Method of assaying whole blood for HDL cholesterol
US4994238A (en) Constant volume chemical analysis test device
US5846837A (en) Volume-independent diagnostic test carrier and methods in which it is used to determine an analyte
US4057394A (en) Test device and method for determining blood hemoglobin
EP0345781B1 (en) Defined volume test device
NO317632B1 (no) Reagenstestremse for bruk i et apparat for bestemmelse av blodglukose
MXPA97002503A (en) Reagent test stress to determine glucose in the san
GB2036963A (en) Glucose indicator and method
MXPA97002502A (en) Reagent test for the determination of glucose in the san
KR980010427A (ko) 다층시험 필드를 갖는 진단 시험 담체 및 피분석물의 측정을 위한 이의 사용 방법
MXPA97005535A (en) Carrier of diagnostic test independent of the volume and methods in which they are used to determine an analyst or substance that goes to anali
US4273868A (en) Color stable glucose test
JPS6371652A (ja) 液体試料の成分を分析測定するための多層試験支持体
JPH0726960B2 (ja) 乾式全血分析要素
NO161703B (no) Proeveinnretning til bestemmelse av en ligand i en flytende proeve ved en homogen immunoanalyse.
DK155349B (da) Fremgangsmaade og integralt analytisk legeme til bestemmelse af koncentrationen af en specifik ionisk analyt i en flydende proeve og anvendelse af dette legeme
US4876207A (en) Compositions for the detection of high levels of hydrogen peroxide
NO146922B (no) Testremse for bestemmelse av glucose og galactose i blod og urin samt okkult blod i faeces
JPH02290541A (ja) 分析素子
JPH0579319B2 (no)
JPH01107137A (ja) 液体分析方法
JPH01107136A (ja) 液体分析方法