NO154919B - Analogifremgangsmaate ved fremstilling av nye kinazolinderivater. - Google Patents

Analogifremgangsmaate ved fremstilling av nye kinazolinderivater. Download PDF

Info

Publication number
NO154919B
NO154919B NO803868A NO803868A NO154919B NO 154919 B NO154919 B NO 154919B NO 803868 A NO803868 A NO 803868A NO 803868 A NO803868 A NO 803868A NO 154919 B NO154919 B NO 154919B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
group
formula
compound
amino
methyl
Prior art date
Application number
NO803868A
Other languages
English (en)
Other versions
NO803868L (no
NO154919C (no
Inventor
Terence Richard Jones
Kenneth Reginald Harrap
Alan Hilary Calvert
Original Assignee
Nat Res Dev
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nat Res Dev filed Critical Nat Res Dev
Publication of NO803868L publication Critical patent/NO803868L/no
Publication of NO154919B publication Critical patent/NO154919B/no
Publication of NO154919C publication Critical patent/NO154919C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/95—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in positions 2 and 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører kinazolinderivater som er sterke antitumor (antikreft) midler.
Storparten av drogene som har vært brukt for å behandle tumorer har interferert enten direkte eller indirekte med re-plikasjonen av nukleinsyrer i de delende celler. Mange midler som kalles antimetabolitter er utviklet for få drepe tumoren ved å bruke opp dens vesentlige vekstelementer ved konkurranse med og fortrengning av substratene til spesifikke enzymer som inngår i DNA-syntesen. Antimetabolitter kan klas-sifiseres som funksjon av deres spesifikke inhiberende virkning, og eksempler er analoger av puriner og pyrimidiner og folinsyreantagonister såsom aminopterin og ametopterin (metotreksat).
Av de metabolitter som er folinsyreantagonister brukes metotreksat meget i behandling av human-ondartede svulter, spesielt ved behandling av koriokarsinom og osteosarkom og til vedvarende terapi av akutt lymfeleukemi. Dets inhibering av enzymet dihydrofolinsyrereduktase (DHFR, EC 1.5.1.4) forårsa-ker en sterk reduksjon av den ene karbonbærende tetrahydrofolinsyrepol,som resulterer i inhibering av de novo syntesen både av tymidin og purin-nukleotidet som er nødvendige for DNA syntese.
Selv om den "purinløse" tilstand som fremkalles av metotreksat er påvist å gi toksisitet i fordøyelseskanalen til mus, bidrar den ikke til den cytotoksiske effekten av metotreksat mot noen dyrkede tumorcellelinjer og kan antagonisere den hos andre. Metotreksat krever ikke metabolsk aktivering og undergår ikke betydelig metabolisk nedbrytning i hoved-delen av celletyper. Kjente grunner for metotreksat mot-stand innebefatter redusert membrantransport og øket cellular DHFR. I dette siste tilfellet kan den virkelige målset-ning for metotreksat bli tymidylatsyntetase (TS, EC 2.1.1.
45), det enzym som katalyserer slutt-trinnet i de novo av tymidylat som kreves utelukkende for DNA syntese. Direkte inhibering av TS kan oppnås ved en aktiv metabolitt av 5-fluorurasil, 5-fluordeoksyuridinmonofosfat. Imidlertid føl-ges 5-fluoruracil motstandsdyktighet ofte av en reduksjon av de nødvendige aktiveringsenzymer og drogen kan også ha
giftvirkninger som tilskrives at den innbygges i RNA.
Det er derfor et behov for et middel som konkurrerer med tetrahydrofolatkosubstrat for TS fremfor pyrimidinsubstra-tet, da en slik forbindelse kan ventes å ha lik eller bedre aktivitet overfor metotreksat ikke bare i metotreksat-sen-sitive tumorer, men også i slike som er resistente i kraft av øket cellular DHFR. Det skulle også være mindre toksisk for verten da syntesen av puriner ikke ville påvirkes. Videre skulle folatanaloger være mer effektive enn pyrimidiner da de ikke krever metabolsk aktivering.
Flere klassiske kinazolinantifolater har vist å være inhibitorer for TS, f.eks. 2-amino-4-hydroksy og 2,4-diaminoderi-vater, skjønt om disse siste er påvist å være noenlunde effektive inhibitorer for TS; bindes de også ekstremt sterkt til DHFR.
Ifølge foreliggende oppfinnelse er det nå funnet at øket antitumor aktivitet kan oppnås ved å substituere med visse grupper, spesielt umettede hydrokarbongrupper, i 10-stillingen i 2-amino-kiriazolinderivater. De umettede forbindelser spesielt inhiberer TS i større utstrekning enn deres tilsvarende mettede analoger og er således mer effektive .
Ifølge foreliggende oppfinnelse tilveiebringes et kinazolinderivat med formelen:
hvor R betyr: 1) en rettlinjet eller forgrenet umettet hydrokarbongruppe med 2 til 6 karbonatomer, eller 2) en rettlinjet eller forgrenet mettet eller umettet hydrokarbongruppe som er substituert med minst en substituent som er -CN, -COOH eller et salt eller en ester derav;
OH, = 0, halogen, NH2, -CONH2, -CO-CgH5, oksiranyl eller 5-uracinyl;
n er 0 eller et heltall fra 1-4,
X, eller, når n er et heltall på minst 2, betyr hver X uavhengig et halogen, C-^-C^ alkyl, aryl eller aralkylgruppe C-^-C^-alkoksy eller N02 , og
Y betyr en gruppe med formel: -
hvori m er et heltall som er minst 1 (poly-L-glutåmat), fortrinnsvis 1-9, spesielt 1,
eller et farmasøytisk fordragelig salt eller ester derav.
Forbindelsene som fremstilles ifølge foreliggende oppfinnelse er anvendelige som antikreftmidler som enten er aktive som sådanne eller er egnede som pro-droger hvilke kan overføres in vivo til aktive forbindelser.
Blant substituenter R under 1) er de spesielt foretrukne som inneholder f.eks. 4 og spesielt 3 karbonatomer, og spesielt sådanne som er umettede minst i 2- eller itø -stilling. Eksempler på slike grupper er alkenyl, alkadienyl, alkynyl og alkadiynylgrupper og spesielle eksempler er allyl, propargyl, but-2-ynyl, but-3-ynyl og l-metylprop-2-
ynyl.
Gruppene R som er angitt under 2) inneholder
opptil 6 karbonatomer i hydrokarbonkjeden og spesielt opp til totalt 4 karbonatomer i gruppen R tilsammen. Den umettede hydrokarbonkjeden innholder 1 til 3 karbonatomer mens den umettede hydrokarbonkjeden fortrinnsvis inneholder 3
eller 4 karbonatomer. Disse er fortrinnsvis 1, 2 eller 3 substituentgrupper på kjeden. Foretrukne heteroatomsubstitu-enter er halogen, f.eks. Cl, Br eller F og, i tilfellet eller høyere hydrokarbongrupper, = 0 som fortrinnsvis er knyttet til et annet karbonatom enn ct-karbonatomet. Eksempler på slike grupper er 2-oksypropyl, formylmetyl, 2,2,2-trifluoretyl og 2-klor-, 2-brom- eller 2-fluoretyl.
Foretrukne karbocykliske substituentgrupper inneholder 3-6 ringkarbonatomer, spesielt 3-5. Et eksempel på en slik gruppe R er cyklopropylmetyl. Den karbocykliske ringen kan i seg selv ha minst en C^-C^ alkylsubstituent, fortrinnsvis metyl hvorav det er fortrinnsvis 1-3, spesielt 1.
Substituentgruppene som inneholder minst et heterogenatom f.eks. være 2-hydroksyetyl, 3-hydroksypropyl, karbamoylmetyl, 2-aminoetyl, cyanometyl, karboksymetyl, etoksykarbonylmetyl, metylsulfonyloksyetyl, dimetylaminoetyl eller metoksymetyl.
De heterogenatomholdige substituentgrupper kan også inneholde ringer som enten er karbocykliske eller heterocykliske ringer.Et spesielt eksempel på en gruppe som inneholder en karbocyklisk ring og et heterogenatom er fenacyl. Heterocykliske substituentgrupper kan være oksiranylmetyl eller 5-urasi-lylmetyl, d.v.s. en tyminylgruppe.
Gruppen X kan være C-^-C^ alkoksy eller NO,, eller halogen, f. eks. klor eller f.eks. metyl. Alkylgruppene i aralkyl X sub-stituentene vil normalt være 1-4 karbonatomgrupper.
Spesielt sterke antikreftmidler som fremstilles ifølge foreliggende oppfinnelse er sådanne hvor R er propargyl, n=0 og Y betyr en glutaminsyrerest eller et salt eller ester derav. I tillegg viser de tilsvarende forbindelser hvor n=l og X
er klor eller metyl i 2-stilling sterk aktivitet.
Som ovenfor angitt dekker foreliggende oppfinnelse fremstilling av kinazolinderivater i form av deres frie syrer og også i form av farmasøytisk aksepterbare salter eller estere av disse syrer som kan være partialsalter og estere. Således omfattes i det tilfellet forbindelsene inneholder glutaminsyre og aspertinsyrerester monoestermonosyre og diesterderi-vater og tilsvarende saltformer. I tillegg kan R grupper som inneholder COOH grupper f.eks. foreligge i salt- eller esterform f.eks. etylesteren. Saltene kan være salter som dannes med fysiologisk fordragelige uorganiske eller organiske syrer eller baser og er fortrinnsvis natriumsålter, f. eks. dinatriumsalter. Esterene er fortrinnsvis lipofile estere i hvilken form forbindelsen som en pro-droge kan transporteres til enzymposisjonen før den nedbrytes til den tilsvarende syreform. Eksempel på foretrukne estere er sådanne med c1~C2o alifatiske grupper, f.eks. alkylestere, fortrinnsvis med 1 til 4 karbonatomer, spesielt dietylester-ene.
Forbindelsene kan fremstilles ifølge foreliggende oppfinnelse ved at man
A) fullstendig eller delvis avbeskytter en forbindelse med formel: hvor X og n er som ovenfor definert, R 2 er ekvivalent med R som er ovenfor definert eller en gruppe R i beskyttet form, R"<*>" er hydrogen eller en aminobeskyttelsesgruppe og Y' betyr en gruppe med formel a), b) eller c) som ovenfor angitt for Y eller et salt av disse grupper eller disse grupper i delvis eller fullstendig beskyttet form, idet beskyttelsesgruppen i Y' er en estergruppe eller annen beskyttelsesgruppe, med det forbehold at forbindelsen med formel Ia inneholder minst en beskyttelsesgruppe og at, hvis avbeskyttelse utføres for å fjerne mer enn en beskyttelsesgruppe kan avbeskyttelsen ut-føres samtidig eller i hvilken som helst rekkefølge, eller B) kobler en forbindelse med formel hvor R"*" er som definert under A) og X1 1 er en avgangsgruppe, med en forbindelse med formel
hvor R 2, X, n og Y<1> er som definert under A) ovenfor under dannelse av en forbindelse med formel Ia som angitt under A) ovenfor, men som ikke trenger å inneholde noen beskyttelses-grupper, og, om nødvendig, avbeskytter forbindelsen med formel Ia som angitt under A), hvoretter man om ønsket overfører
en erholdt forbindelse med formel I i et farmasøytisk akseptabelt salt ved tilsetning av en syre eller base.
Således kan f.eks. syrene og saltene fremstilles ifølge foreliggende oppfinnelse ved fullstendig avbeskyttelse av en forbindelse med formel Ia, de partielle estere kan fremstilles ved avbeskyttelse av 2-aminogruppe og R 2gruppen om nødven-dig, med Y' enten allerede foreliggende i partialesterform eller fullstendig forestret form som deretter partialt avbeskyttes og de fullstendige estere kan fremstilles ved avbeskyttelse av 2-amino og R 2 gruppen etter behov, med Y' gruppen i fullstendig forestret form.
Avbeskyttelsen av gruppen Y' i esterform under dannelse av
en syre kan f.eks. utføres ved mild forsåpning ved bruk av en base såsom NaOH. Den resulterende syre kan om ønsket deretter omsettes med en syre eller base under dannelse av et farmasøytisk aksepterbart salt. Fortrinnsvis får syren reagere med NaOH under dannelse av det tilsvarende dinatriumsalt.
Alternativt kan et syreprodukt forestres, et saltprodukt kan overføres til en syre eller ester eller et esterprodukt kan omestres. Det kan være ønskelig å danne et salt direkte fra en ester ved avbeskyttelsesprosessen når forbindelsen med formel I foreligger i form av en dies ter, dinatriumsaltet av forbindelsen med formel lakan dannes ved forsåpning av di-esteren med 3 mol NaOH aq pr. mol diester, og når denne reaksjonen er fullstendig, tilsette 1 mol HC1 aq pr. mol diester og fortrinnsvis frysetørke saltproduktet. Salter kan også dannes, f.eks. på 2-aminogruppen, med en syre såsom HC1 eller HBr.
Den spesielle beskyttelsesgruppe R"<*>" vil normalt velges under hensyn til R og Y' gruppene og det ønskede produkt, dvs. slik at de nødvendige betingelser for å fjerne R^ gruppen ikke vil påvirke den ubeskyttede R gruppe og ikke vil fjerne be-skyttelsesester i Y<1> hvor disse er nødvendige i sluttprodu-ktet. Et eksempel på en R<1> gruppe er pivaloylgruppen som kan fjernes i et forsåpningstrinn ved å bruke f.eks. NaOH for å fjerne estergrupper fra Y<1>.
R 2 er som angitt enten lik R eller er en ønsket gruppe R i beskyttet form. Således kan R 2 i sistnevnte tilfelle f.eks. inneholde gruppen COOH i esterform eller gruppen OH beskyttet med en syregruppe. Eksempler på slike grupper R 2 er etoksykarbonylmetyl og 3-acetoksypropyl som avbeskyttes til karboksymetyl og 3-hydroksypropyl henholdsvis. Disse R 2 grupper kan imidlertid i seg selv være eksempler på R. Et annet eksempel på en beskyttet form for R er hvor substituenten R<2 >ikke bare inneholder en ekstra gruppe men hvor den foreligger i forskjellig form fra R gruppen og gjennomgår forandr-ing i avbeskyttelsestrinnet. Et eksempel på dette er gitt senere hvor en R gruppe 2-hydroksy-3-brompropyl gjennomgår en cykliseringsreaksjon under forsåpningsbetingelsene for fjerning av estergrupper fra Y' og danner en oksiranylmetyl-gruppe R.
Denne beskyttede forbindelsen med formel Ia kan i seg selv fremstilles ved en koblingsreaksjon som følger:
1 2
hvor R , R , X, n og Y<1> er som angitt for forbindelsen tned formel Ia og X<1>' er en avgangsgruppe, fortrinnsvis halogen, f.eks. klor eller brom, p_-toluensulf onat, metylsulfonat eller trifluormetylsulfonat. Denne konjugering utføres i allminne-lighet i nærvær av en syreakseptor, f.eks. kalsiumkarbonat, kaliumkarbonat, 2,6-dimetylpyridin eller trietylamin og i et løsningsmiddel, f.eks. N,N-dimetylacetamid eller cello-solv.
Aminene med formel II ovenfor kan fremstilles ved den dir-
2 2 ekte omsetning av en forbindelse med formel R X' (hvor R er som angitt ovenfor og X' er an avgangsgruppe, fortrinnsvis halogen, f. eks. klor eller brom, p_-to lu en sul f onat, metylsulfonat eller trifluormetylsulfonat) med N-(4-aminobenzoyl)-L-glutamat, -L-aspartat eller -poly-L-glutamat i beskyttet form.
En alternativ metode for å danne aminet med formel II er angitt av Santi (se J. Heterocyclic. Chem. 4 475) ved bruk av en 4-(((4-metylfenyl)-sulfonyl)amino)benzoatester som utgangsmateriale,dvs. benzylesteren som får reagere med en forbindelse R 2 X' (hvor R 2og X' er som ovenfor angitt) for å innføre R 2gruppen på aminonitrogenet. Esteren forsåpes deretter til den frie syre, overføres til syrekloridet og kobles så med en Y' gruppe i beskyttet, f.eks. diesterform. Produktet er aminet med formel II som har beskyttelsesgruppen CH^-Ø-SC^ på aminogruppen som deretter kan fjernes.
Hvor det er ønsket å fremstilles forbindelsene ifølge oppfinnelsen som inneholder substituenter X, foretrekkes det først å fremstille det tilsvarende N-(4-nitrobenzyl)-L-glutamat, -L-aspartat eller poly-L-glutamat i beskyttet form inneholdende den riktige X substituent og å overføre dette ved hydrogenering eller reduksjon til det tilsvarende 4-amino derivat som så omsettes med R 2X' under dannelse av et amin med formel II.
Reaktantene med formel III ovenfor hvor R^"=H og X1 ' er brom eller klor kan fremstilles fra den tilsvarende 6-brom-metyl-2-trimetylacetamido (pivaloyl)forbindelse ved omsetning i tetrahydrofuran med vandig HBr og vandige metanoler HC1 henholdsvis. N-bromsuccinimidet kan brukes til å utføre brom-ering av 6-metyl-2-trimetylacetamido-kinazolinet.
En alternativ metode for dannelse av den beskyttede amino-forbindelse med formel Ia er omsetning av den N<10->usubstitu-erte konjugerte forbindeJ.se i 2-amino beskyttet form og Y<1> i
2 2
beskyttet form med R X' (hvor R og X' er som ovenfor angitt) ifølge det følgende skjema:
Forbindelsen med formel Ib kan i seg selv fremstilles ved følgende omsetning:
hvor X'<1> er som ovenfor angitt. I denne reaksjonen er det i stedet for 6-CH2"X'<1> forbindelsen med formel III mulig å bruke de tilsvarende 6-formyl eller 6-cyanoforbindelser da forbindelsene med formel Ila ikke har noen R gruppe på aminogruppen på dette reaksjonsstadium.
Farmasøytiske preparater kan inneholde terapeutisk virksomme mengder av et antikreftmiddel fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse og et farmasøytisk aksepterbart bæremiddel eller fortynnings-middel. Eksperimenter som bruker mus med kunstig implanterte tumorer har vist at intraperitoneal injeksjon av antikreft-midlene ifølge foreliggende oppfinnelse kan gi en økning i den gjennomsnittlige overlevelsestid for musen som er doseavhengig. Videre viste disse dyrene ikke noe betydelig vekt-tap eller viste andre tegn på toksisitet under behandling med drogen.
Blandingen kan f.eks. være i form av en administrering som er egnet for parenteral (f.eks. intravenøs, intramuskulær eller intrakavitar),oral, topisk eller rektal bruk. Spesielle former for blandinger kan f.eks. være løsninger, sus-pensjoner, emulsjoner, kremer, tabletter, kapsler, liposomer eller mikroreservoirer, spesielt blandinger i steril injeser-bar form. Et videre aspekt ved foreliggende oppfinnelse ligger således i en metode for behandling av kreft hos mennesker eller dyr ved å administrere et antikreftmiddel ifølge foreliggende oppfinnelse. Terapeutisk effektive doser på mennesker ansees å ligge i området 50 til 500 mg/kg kropps-vekt.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen forventes å vise et bredt antitumorspektrum mot leukemier, lymfekreft og et spektrum av faste tumorer, spesielt karsinomer og sarkomer. Således kunne de fremstilte forbindelser i tillegg til å brukes som midler enkeltvis i sammen med eller i blandet formulering med f.eks. mitotiske inhibitorer (f.eks. vinkristin, vinblas-tin), alkyleringsmidler (f.eks. cyklofosfamid, melfalan, myleran, klorambusil, mustin), antimetabolitter (f.eks. 5-fluorurasil, 6-merkarptourin, tioguanin, cytosinarabinosid, hydroksyurea), interkalatisk antibiotika (f.eks. adriamysin, bleomysin), eller enzymer (f.eks. asparaginase).
Forbindelsene som fremstilles ifølge foreliggende oppfinnelse kan også brukes som en komponent for en kombinert kreft-behandling, f.eks. sammen med radioterapi og/eller kirurgi.
Foreliggende oppfinnelse illustreres gjennom de følgende eksempler:
EKSEMPEL 1
Dietyl N-(4-(prop-2-enylamino)benzoyl)-L-glutamat og dietyl N-(4-(prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutamat ble begge alkyl-ert med 2-amino-6-klormetyl-4-hydroksykinazolin.
En omrørt blanding av klormetylkinazolinhydroklorid og aminet (1 mol ekvivalent) i 2-etoksyetanol (2,5 ml pr. mmol) ble oppvarmet til 80°C. Trietylamin (2 mol ekvivalenter1 ble deretter tilsatt og ga en klar oppløsning som ble oppvarmet inntil TLC (10 % EtOH-CHCl3/Si02). indikerte maksimum (om enn ufullstendig) omsetning. (Reaksjonstid og temperatur var henholdsvis 5 timer ved 100°C og 6 timer ved 105°C.
Løsningsmiddelet ble fjernet i vakuum og resten oppløst i CHCl^ og løsningen vasket med vann. Ekstraktet ble tørket (MgSO^) og konsentrert hvilket ga det råe produkt. Dette ble renset på kisélgel (180 g) ved HPLC under eluering med 5 % EtOH-CHCl3.
Produktene var dietyl N-(4-N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazol-inyl)metyl)prop-2-enylamino)benzoyl)-L-glutamat (ester av CB 3716) og dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazoli-nyl)metyl) prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutamat (CB 3712) i form av ikke krystallinske gummiaktige faste stoffer hvis struktur ble fastslått ved elementæranalyse og NMR (løsninger i DMSO-Dg) og utbyttene og smeltepunktene var: ester av CB 3716: - 21,5%, 107-112°C; CB 3721: - 27,5% 143-147°C.
EKSEMPEL 2
Dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutamat, et produkt fra eksempel 1, ble også fremstilt ved følgende fremgangsmåte: En løsning av 2-amino-6-brommetyl-4-hydroksy-kinazolinhydro-bromid (15,1 g) og dietyl N-(4-(prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutamat (16,2 g) i N,N-dimetyl-acetamid (300 ml) ble rørt over kalsiumkarbonat (13,5 g) i 65 timer ved 25°C. Kalsiumkarbonatet ble fjernet ved sentrifugering ved 2000 opm i 15 minutter, (dette kan også fjernes ved filtrering gjennom selitt). Løsningsmiddelet ble så fjernet ved 40°C/0,2 mm. Det således erholdte råprodukt ble oppløst i 5% v/v etanol
i kloroform med unntagelse av en liten rest og kromatografert på kiselgel (Merck, Art 15111) under eluering med 5% EtOH-CHCl3- Produktet, dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutamat (CB3721), var et gråhvitt fast stoff, smeltepunkt 146-148°C (ikke korrigert),utbytte 69%. Strukturen ble bekreftet ved elementæranalyse. Funnet: C, 62,54; H, 5,65; N, 13,07. C28H31N5°69ir C' 63'03; H' 5'86i N' 13,13%.
Utgangsmaterialene for bruk i eksemplene 1 og 2 ovenfor kan fremstilles som følger: Dietyl N-(4-(prop-2-enylamino).benzoyl)-L-glutamat ble fremstilt ved å behandle dietyl N-(4-amino benzoyl)-L-glutamat (5,00' g) i etanolisk løsning (100 ml) i 8 timer ved 60°C med allylbromid (5,4 ml) i nærvær av kaliumkarbonat (2,14 g). Etter fjerning av løsningsmiddelet i vakuum ble resten opp-løst i kloroform og løsningen vasket med vann. Ekstraktet ble tørket (MgSO^) og konsentrert til å gi råproduktet. Dette ble renset ved HPLC ved bruk av 50:50 kloroform:petroleter som elueringsmiddel.
For å danne dietyl N-(4-(prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutamat ble prosedyren gjentatt bortsett fra at reaksjonen ble utført ved 4 timer ved 7 0°C ved bruk av 10 ml av en 80% løs-ning av propargylbromid i toluen i stedet for allylbromidet.
Strukturene ble bekreftet ved elementæranalyse og NMR spektroskopi og utbyttene og smeltepunktene var: 76,5%, 60-61°C; og 55,5%, 98-99°C henholdsvis.
EKSEMPEL 3
N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)-metyl)prop-2-enylamino)benzoyl)-L-glutaminsyre (CB 3716) og N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)-metyl)prop-2-ynylamino)benzoyl) -L-glutaminsyre (CB 3717) erholdtes fra de tilsvarende diétylestere, hvilke kan fremstilles som beskrevet i eksempel 1 og 2, ved å oppslemme dem i 25% EtOH aq. (20 ml pr. mmol) og behandle dem med IN NaOH aq. (4 mol ek.). Kraftig rysting ga en løsning i løpet av 5 minutter. Etter 1 time ble løs-ningen gjort klar ved filtrering gjennom "Hyflo" og pH bragt til 4,1 ved bruk av IN HC1 aq. En gelatinøs felling av produktet oppstod. Denne ble befridd for uorganiske ioner ved tre omløp av oppslemming -sentrifugering-dekantering. Det amorfe gråhvite hygroskopiske faste stoff ble så tørket ved 100°C i vakuum. Det var homogent i TLC i to systemer: (i) n-butanol:eddiksyre:vann (5:2:3); (ii) klorform:metanol: eddiksyre (75:20:5).
Strukturene ble bekreftet ved élementæranalyse og UV spektroskopi (spektra opptatt i 0,1N aq. NaOH). Utbyttet, smelte-punktet og UV data var som følger:
CB 3716:- utbytte 46% smp. 207-9°C,
UV \ (nm) (<f ) maksimalt: 311,5 (29,100), 276 (17 ,600).,
228,5 (49,300),
minimalt: 282 (16,900), 252 (9,060).
CB 3717:- utbytte 81%, smp. 232-5°C, UV X(nm)(& ) maksimalt: 301,5 (26,600), 279 (23,900), 229 (50,7001, minimalt: 284, (23,700), 251,5 (9,800). For bruk kan CB 3717 formuleres i en konsentrasjon på 10 mg/ml som dinatriumsalt ved pH 8,5 til 9,0 i en løsning av fysiologisk saltvann (0,9% vekt/volum NaCl).
I eksemplene 1 og 3 ble smeltepunktene bestemt på en Kofler
benk og er korrigerte, og élementæranalyse for folatanalogene ble gjort ved bruk av både katalytisk tilsetningsmiddel og en oksygenavgiver. Alle forbindelser hadde en tilfredsstillende (+ 0,4%) mikroanalyse for C, H og N. NMR spekteret ble tatt på et Perkin-Elmer R12B 60MHz spektrofotometer bortsett fra sådanne for produktene fra eksempel 1 som ble tatt ved 50°C på et Bruker HFX 90MHz Fourier transformasjonsinstrument. Preparativ HPLC ble foretatt på en Jobin-Yvon Chromatospac Prep 10 ved bruk av kiselgel (Merck Art 11695), hvor eluen-ten passerte gjennom en Cecil 212A variabelbølgelengde ultra-fiolettmonitor. TLC ble utført på Polygram PG 23 forbelagte
kiselgelplater (Macherey-Nagel & Co.). Sentrifugering ble utført ved 20 000 g.
EKSEMPEL 4
a) Dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl) prop-2-ynylamino)benzoyl-L-glutamat (6,436 g.) ble oppslemmet i vann (13 0 ml) og behandlet med 0,1 N NaOH (3 6,19 ml, 3,00 mol. ek.). Blandingen ble rystet voldsomt i 45 minutter hvorpå man fikk en løsning. Svakt uklart stoff ble
fjernet ved filtrering gjennom et grad 3 sinter. Etter 6 timer fra den opprinnelige tilsetning av kaustisk soda til-sattes 0,1 N HC1 (13,00 ml) hvilket ga en pH på 8,45.
aq
Løsningen som inneholdt noen få korn av utfelt materiale ble frysetørket og ga en blanding av dinatriumsaltet av N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)prop-2-ynyl-amino)benzoyl-L-glutaminsyre (CB 3717) og natriumklorid som et kremfarget flakdannende, amorft pulver. HPLC analyse viste at N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)-metyl) prop-2-ynylamino)benzoyl-L-glutaminsyre (CB 3717) utgjorde 99 % av det organiske materialet. b) I en annen fremstilling ble dietylesteren (14 g) rørt med vann (400 ml), etanol (68 ml) og 0,1 N NaOH (78,7 ml).
aq
Etter en time ble løsningen klaret ved filtrering og nøytra-lisert til pH 8,35 med 0,1 N HC1 . Blandingen ble fryse-tørket og ga et kremfarget fast stoff (15,5 g). Da blandingen er ekstremt hygroskopisk fikk den innstille høy like-vekt med atmosfæren før man foretok mikroanalyse.
Funnet: C, 43,41; H, 4,03; N, 10,91; Cl, 8,68; Na, 11,53; H20, 7,69; c24H21N5°6Na2 + 1,31 (NaC1) + °'51 <HC1) + 2'5 (H20) (<=C>24<H>26f51N508f5Na3/31Cllj82) <b>eregnete, 43,56;
H, 4,03; N, 10,58; Cl, 9,75; Na, 11,50; H20, 6,81%. Mer nøyaktige tall for Cl og H20 erholdtes fra en separat ana-lysert prøve man fikk ved ekvilibrering av det tørre materialet med atmosfæren i 24 timer - Funnet: Cl, 9,48; H20, 7,12 %. HPLC analyse for denne satsen viste at CB 3717 utgjorde 98% av det organiske materialet.
EKSEMPEL 5
En blanding av 2-amino-6-brommetyl-4-hydroksy-kinazolinhyd-robromid (1 mol ek.), kalsiumkarbonat (1 mol ek.) og dietyl N-(4-(fenacylamino)benzoyl)-L-glutamat (1 mol ek.) i N,N-dimetylacetamid (5 ml pr. mmol) ble rørt ved romtemperatur i 60 timer. Blandingen ble filtrert og løsningsmiddelet fjernet i vakuum. Den resulterende olje ble renset ved kromatografi på kiselgel. Eluering med 5% metanolrnety-lenklorid. Produktet, dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)fenacylamino)-benzoyl)-L-glutamat (CB 3744) hadde smeltepunkt 148-150°C og ble bekreftet ved élementæranalyse og NMR. En anne reaksjon ved bruk av 2,6-dimetylpyridin (2 mol ek.), i stedet for kalsiumkarbonatet ga et identisk produkt.
På lignende måte ved å bruke kalsiumkarbonat som base frem-stiltes de følgende forbindelser ved alkylering av det tilsvarende amin:
Eluert med 10% metanol-metylenklorid
<2>Eluert med 15% metanol-metylenklorid
<3>Reaksjon rørt 100 timer ved romtemperatur
<4>Preparert ved alkylisering av dietyl 4-(3-hydroksy-l-azeti-dinyl) benzoyl-L-glutamat.
Aminutgangsmaterialene for bruk i eksempel 5 ovenfor kan fremstilles som følger
En blanding av dietyl N-(4-aminobenzoyl)L-glutamat (1 mol ek.), 2,6-dimetylpyridin (1 mol ek.) og etylbromacetat (1 mol ek.) i N,N-dimetylacetamid (2,5 ml pr. mmol) ble rørt ved 90°C i 5 timer. Blandingen ble helt i vann, ekstrahert med etylacetat og den organiske fase vasket i rekkefølge med vann, IN svovelsyre og saltvann. Etter tørking over vannfritt natriumsulfat ble løsningsmiddelet fjernet i vakuum og ga en brun olje som krystalliserte etter rivning med cyklo-heksan. Produktet, dietyl N-(4-(etoksykarbonylmetylamino) benzoyl)-L-glutamat (Ilb: R 2= -CP^COCX^H^) hadde smeltepunkt 84-85°C og ble bekreftet ved élementæranalyse og NMR. På lignende måte ble de følgende forbindelser fremstilt ved inn-virkning av det tilsvarende alkyleringsmiddel på aminet:
"'"Vannfritt kaliumkarbonat (0,5 mol ekvivalent) kan erstatte
2,6-dimetylpyridin i reaksjonen
<2>Rørt ved 110°C i 4 timer
<3>Rørt ved romtemperatur i 16 timer
<4>Rekrystallisert fra etanol
En blanding av dietyl N-(4-amino-2-metylbenzoyl)-L-glutamat (1 mol ek.), 2,6-dimetylpyridin (1,1 mol ek.) og propargylbromid (1,1 mol ek.) i N,N-dimetylacetamid (2 ml pr. mmol av aminet) ble rørt ved romtempertur i 16 timer. Blandingen ble helt i vann, ekstrahert med etylacetat og den organiske fasen vasket med vann, tørket over vannfritt magnesiumsulfat og løsningsmiddelet fjernet i vakuum. Den resulterende olje ble renset ved kromatografi på kiselgel under eluering med 30% etylacetat-metylenklorid. Produktet, dietyl N-(4-(prop-2-ynylamino)-2-metylbenzoyl)-L-glutamat (lic: R = -CH2C=CH,
X = -CH3, m = 2) hadde smeltepunkt 85-87°C og ble stadfestet ved élementæranalyse og NMR. På lignende måte ble de følg-ende forbindelser fremstilt ved omsetning av det tilsvarende alkyleringsmiddel og det -relevante amin:
En blanding av dietyl N-(4-aminobenzoyl)-L-glutamat (1 mol ek.), kalsiumkarbonat (2,5 mol ek.) og epibromhydrin (5 mol ek.) og N,N-dimetylacetamid (2 ml pr. mmol av aminet), ble rørt ved 90° i 40 timer. Blandingen ble filtrert og løsnings-middelet fjernet i vakuum. Den resulterende olje ble renset ved kromatografi på kiselgel. Eluering med 25% etylacetat-heksan. Produktet, dietyl 4-(3-hydroksy-l-azetidinyl)benzoyl-L-glutamat hadde smeltepunkt 87-90°C og ble stadfestet ved élementæranalyse og NMR. D) Til en omrørt løsning av dietyl N-(2-klor-4-nitrobenzoyl)-L-glutamat i 55% etanolvann (20 ml pr. mmol) ved romtemperatur satte man natriumhydrogenkarbonat (6 mol ek.) etterfulgt av porsjonsvis tilsetning av natriumditionitt (3 mol ek.) gjennom 20 minutter.. Etter røring i ytterligere 1 time ble etanolen fjernet i vakuum og resten fortynnet med saltvann. Forbindelsen ble ekstrahert over i etylacetat og renset ved tilbakeekstraksjon til 2N saltsyre, nøytralisering med nat-riumbikarbonat og reekstraksjon over i eter. Eterekstraktet ble tørket over vannfritt magnesiumsulfat og løsningsmiddelet fjernet i vakuum hvilket ga en olje som krystalliserte etter henstand. Produktet, dietyl N-(2-klor-4-aminobenzoyl)-L-glutamat hadde smeltepunkt 73-75°C og ble stadfestet ved élementæranalyse og NMR.
5) Dietyl N-(2-metyl-4-nitrobenzoyl) -L-glutamat i etanolisk løs-ning (8 ml pr. mmol) ble hydrogenert ved bruk av 10% palla-dium-karbon inntil den teoretiske mengde hydrogen var for-brukt. Reaksjonsløsningen ble filtrert og løsningsmiddelet fjernet i vakuum og ga en olje som krystalliserte etter henstand. Produktet, dietyl N-(2-metyl-4-aminobenzoyl)-L-glutamat hadde smeltepunkt 98-100°c og ble stadfestet ved ele-
mentæranalyse og NMR.
F) Til en omrørt oppslemraing av dietyl L-glutamathydroklorid (1 mol ek.) i toluen (0,5 ml pr. mmol) avkjølt til 0°C satte man pyridin (2,5 mol ek.) etterfulgt av dråpevis tilsetning av en løsning av 2-metyl-4-nitrobenzoylklorid (1,5
mol ek.) oppløst i toluen (0,7 ml pr. mmol) over 20 minutter. Røring ble fortsatt i ytterligere 3 0 minutter ved 0°C og deretter en time ved romtemperatur. Etter fortynning med toluen ble blandingen ekstrahert med vann, 2N saltsyre, 5% nat-riumhydrogenkarbonatløsning og vann. Den organiske fasen
ble tørket over vannfritt magnesiumsulfat og løsningsmiddelet fjernet i vakuum. Den resulterende olje ble renset :ved kromatografi på kiselgel under eluering med etylacetat - 60-80° C petroleter (1:1). Produktet, dietyl N-(4-amino-2-metyl-benzoyl)-L-glutamat hadde smeltepunkt 67-68°C og ble stadfestet ved élementæranalyse og NMR.
Dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl) metyl) fenacylamino)benzoyl)-L-glutamat (1 mol ek.) ble oppslemmet i 33% etanol-vann (40 ml pr. mmol) og behandlet med IN vandig natriumhydroksydløsning (3 mol ek.) og blandingen rørt ved romtemperatur i 13 timer. Tilsetning av 0,IN vandig saltsyre (3 mol ek.) ga en gelatinøs felling som ble renset ved seks runder sentrifugering-dekantering og gjenoppslemming i destillert vann. Den endelige vandige oppslemming ble frysetørket og ga et amorft hvitt fast stoff. Produktet, N-(4- (N- ((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)fenacylamino) benzoyl)-L-glutamisk syre (Id: R = -CI^-CO-©, no X gruppe,
m = 2,CB 3733) ble stadfestet ved élementæranalyse og pro-ton NMR (oppløsning i DMSO-dg), & 2,0 (2H,m), 2,3 (2H,m),
4.4 (lH,m), 4,7 (2H,s), 5,2 (2H,s), 6,6 (2H,d), 6,5-7,0 (2H, b), 7,2 (lH,d,J 7Hz), 7,4-7,8 (6H,m), 7,85 (lH,d,J 3 Hz), 8.05 (2H,m) 8, 15 (lH,d) .
Hydrolysereaksjonen i ovennevnte eksempel forløper fra di-esteren via en monosyremonoester som ikke isoleres men hyd-roliseres in situ til disyren. På lignende måte ble de føl-gende forbindelser fremstilt ved hydrolyse av de tilsvarende estere:
Brukt 4 molekvivalenter av natriumhydroksyd og hydrokloridsyre
2 10
Utgangsmateriale var N etoksykarbonylmetylderivatet <3>Reaksjonstid 6 timer ved romtemperatur
4
Brukt etanolvann (1:1)
<5>Brukt 4 molekvivalenter av natriumhydroksyd
^Utgangsmateriale var N 2-hydroksy-3-brompropylderivatet
<7>NMR i DMSO-d6£2,0 (2H,m) , 2.,3 (2H,m) , 4,2 (2H,s), 4,4 (1H, m) , 4,7 (2H,s), 6,65 (2H,d) , 7,1 (lH,d,J 7 Hz), 7,5 (lH,dd, J 7,3 Hz), 7,7 (2H,d), 7,8 (lH,d,J 3 Hz), 7,9 (lH,d).
<8>NMR i DMSO-d66 2,05 (2H,m), 2,4 (2H,m), 4,1 (2H,s), 4,4 (1H, m), 4,7 (2H,s), 6,3 (2H,b), 6,7, (2H,d), 7,15 (lH, d, J 7
Hz), 7,0-7,4 (2H,b) 7,5 (lH,dd,J 7, 3Hz), 7,7 (2H,d), 7,75 (lH,d,J 3Hz), 8,1 (lH,d).
<9>NMR i DMSO-d,, 6 1,9 (2H,m), 2,2 (2H,m), 3,6-4,0 (4H,m) 4,25 (lH,m), 4,6 (2H,s), 6,3 (2H,b), 6,7 (2H,d), 7,1 (lH,d, J 7Hz), 7,3 (lH,bd), 7,6 (3H,m), 8,1 (lH,d),
<10>NMR i DMSO-d 6 6 2,7 (2H,m), 3,1 (lH,t, J l,-5Hz), 4,3 (2H, d,J 1,5Hz), 4,7 (3H,m(, 6,4 (2H,b), 6,85 (2H,d), 7,2 (lH,d, J 7Hz), 7,5 (lH,dd,J 7,3Hz), 7,7 (2H,d), 7,8 (lH,d,J 3Hz), 8,2 (lH,d).
<l:L>NnR i DMSO-d6 6 1,95 (2H,m), 2,3 (2H,m) , 3,2 (lH,s), 4,3 (3H,m), 4,6S (2H,s), 6,5 (2H,b) , 6,7-6,9 (2H,m) ,' 7,15 (1H, d,J 7Hz), 7,25 (lH,d,J 7Hz), 7,5 (lH,dd,J 7, 3Hz), 7,8 (1H, d,J 3Hz), 8,35 (lH,d).
<12>NMR i DMSO-db, <5 2,0 (2H,m) 2,3 (2H,m) , 2,4 (3H,s), 3,1 (lH,t,J 1,4Hz), 4,2 (2H,bs) 4,3 (lh,m), 4,6 (2H,s), 6,1-6,6 (2H,b), 6,6-6,8 (2H,m), 7,15 (lH,d,J7Hz), 7,25 (lH,d,J 7Hz), 7,5 (lH,dd, J 7, 3Hz), 7,8 (lH,d,J 3Hz), 8,1 (lH,d). <13>NMR i DMSO-db, 6 1,9 (2H,m), 2,2 (2H,m), 2,5 (lH,dd, J 5,2 Hz), 2,65 (lH,t,J 5Hz), 3,1 (lH,m), 3,3-4,0 (2H,m) 4,3 (1H, n) , 4,6 (2H,s) 6,3 (2H,b)., 6,7 (2H,d) , 7,1 (lH,d, J 7Hz) , 7,35 (lH,bd, J 7Hz), 7,6 (3H,m), 8,1 (lH,d).
EKSEMPEL 7
En oppløsning av 6-brommetyl-4-hydroksy-2-trimetylacétamido-kinazolin (7,5mM) i N,N-dimetyl-acetamid (25 ml) hvori det er oppslemmet kalsiumkarbonat (15 mM) ble fremstilt ved 60°C. En løsning av dietyl N-(4-(3-acetoksypropylamino)benzoyl)-L-glutamat (7,5 mM) i N,N-dimetylacetamid (10 ml) ble satt til den omrørte reaksjonsblanding over 90 minutter. Etter røring i ytterligere 12 timer ved 60°C ble reaksjonsblandingen filtrert og filtratet ble etter tilsetning av vann (10 volum-deler) ekstrahert med etylacetat. Den organiske fasen ble vasket med vann og løsningsmiddelet fjernet i vakuum hvilket ga en olje.
Oljen ble kromatografert på kiselgel (Merck 60) ved bruk av blandinger av metylenklorid og etylacetat som elueringsmiddel. De riktige fraksjonene ble inndampet til tørrhet under redusert trykk og ga en olje. Når dette produktet ble tør-ket i vakuum fikk man et skumlignende fast stoff, dietyl N-(4-(N-((4-hydroksy-2-trimetyl-acetamido-6-kinazolinyl)metyl)-3-acetoksypropylamino)-benzoyl)-L-glutamat,smeltepunkt 61-64°C.
Aminutgangsmaterialet for bruk i eksempel 7 ovenfor kan fremstilles som følger: Dietyl N-(4-aminobenzoyl)-L-glutamat (0,02 M) og 3-acetok-sypropylbromid (0,02 M) ble kondensert i N,N-dimetylacetamid (20 ml) i 12 timer ved 100°C i nærvær av kaliumkarbonat (0,02 M).
Produktet ble isolert som i eksempel 5B) og den resulterende olje kromatografert på kiselgel (Merck 60) ved bruk av en blanding (2:1) av metylenklorid og etylacetat som elueringsmiddel, hvilket ga en olje som krystalliserte etter henstand, smeltepunkt 59-62°C.
EKSEMPEL 8
Dietyl N-(4-(N-((4-hydroksy-2-trimetylacetamido-6-kinazoli-nyl)metyl)-3-acetoksypropylamino)benzoyl)-L-glutamat (0,74 mM) ble hydrolisert ved bruk av 5 ekvivalenter vannfritt natriumhydroksydløsriing (0,2 N, 18,4 ml) i etanol (75 ml) ved 50°C natten over. Produktet ble isolert ved tilsetning av 0,2 aq. HC1 til pH 4 og deretter som eksempel 6 hvilket ga N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)-3-hydr-oskypropylamino)-benzoyl)-L-glutaminsyre (CB 3729); smp. 220°C (d). NMR (90 MHz i DMSO-dg) : 6 1,7-2,5, en multiplet (6H).; <$3,6, en multiplet (4H); 6 4,4, en multiplet (1H) ; 64,7, en singlet (2H) ; <5 6,5, en bred singlet (2H) ; c?6,<7>, en doublet J=8.5Hz(2H); 6 7,2, en doublet J=8Hz (1H) ; 61, 5, en doublet av doubletter J=l,5,8Hz (1H); 6 1, 1, en singlet og doublet (3H) ; d8,l, en doublet J=7Hz (1H) .
EKSEMPEL 9
En løsning av 2-amino-6-brommetyl-4-hydroksykinazolinhydro-bromid (1,00 g) og dietyl N-( 4-( ( (5-urasilyl)metyl)amino) benzoyl)-L-glutamat (1,00 g) i N,N-dimetylacetamid (20 ml) ble rørt over kalsiumkarbonat (0,67 g) i 140 timer ved romtemperatur (23°C). Kalsiumkarbonatet ble fjernet ved filtrering gjennom selitt og løsningsmiddelet så fjernet ved 45°C/0,05 mm. Det således erholdte råprodukt ble oppløst i 20% v/v etanol i kloroform med unntagelse av en liten rest, og kromatografert på kisélgel (Merck, Art 15111) under eluering med 20% EtOH-CHCl3. De riktige fraksjoner ble slått sammen og konsentrert og den endelige løsning overført til etanol ved gjentatte inndampninger av tilsatt etanol. Vo-lumet ble redusert til 50 ml og de resulterende hvite krystaller som erholdtes ved sentrifugering ble vasket ved re-oppslemming i etanol, sentrifugering og dekantering. Tør-king (P20^) ga det urene produkt (32,7%) som et gråhvitt fast stoff, smeltepunkt > 350°C med noe svak spaltning opp til denne temperaturen. NMR spektroskopi viste at materialet hadde kinazolin, uras il og benzoylglutamatrester i det riktige 1:1:1 forhold for produktet dietyl N-(4-(N-(2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl-N-(5-urasilyl)metylamino)benzoyl ) -L-glutamat .
Aminutgangsmaterialet som brukes i eksempel 9 ovenfor kan fremstilles som følger: Dietyl N-(4-aminobenzoyl)-L-glutamat (3,22 g) ble behandlet i N,N-dimetylacetamidløsning (60 ml) i 70 timer ved 23°C med 6-klormetylurasil (1,93 g) i nærvær av kalsiumkarbonat (3,00 g). Kalsiumkarbonatet ble fjernet ved filtrering gjennom selitt og råproduktet erholdt ved fjerning av løsnings-middelet ved 40°c/O,2 mm. Et forsøk på rensning ved fordel-ing av oljen mellom kloroform og vann førte til dannelse av en emulsjonslignende felling i det organiske sjiktet. Det vandige sjiktet blé dekantert og den gjenværende oppslemming filtrert, det tilbakeholdte hvite faste stoff ble vasket med varm etanol. Det kombinerte filtrat og vaskevæske ble inndampet til tørrhet. Det resulterende faste stoff ble ekstrahert først med varm kloroform og deretter med varm diklor-metan for å fjerne noe utgangsamin. Det gjenværende hvite faste stoff ble tilslutt omkrystallisert fra etanol og ga et produkt som var hvite mikronåler med smeltepunkt 183-200°C. Strukturen ble bestemt ved élementæranalyse og NMR spektroskopi.
EKSEMPEL 10
Dietyl N-(4-(N-(2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl-N-(5-urasilyl)metyl-amino)benzoyl)-L-glutamat (0,327 g) ble oppslemmet i blanding av vann (7 ml) og etanol (2 ml) og behandlet med IN NaOH aq. (6 mol ek.). Kraftig rysting ga en oppløsning i løpet av 30 minutter. Etter ytterligere 1,5 timer ble løsningen klaret ved filtrering og pH bragt til 4,0 med IN HC1 aq. En partikkelformet felling av produktet resulterte. Dette ble befridd for uorganiske ioner ved tre cykler av suspensjon-sentrifugering-dekantering. Det amorfe hvite faste stoff ble tørket ved 40°C i vakuum og ga den
rene disyre, N-(4-(N-(2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl-N-(5-urasilyl)metyl-amino)benzoyl)-L-glutaminsyre (CB 3743), som dihydrat (68%), smp. 250-255°C. Strukturen ble fastslått ved élementæranalyse (C,H,N) og ved uv spektroskopi (spektrum opptatt i 0,1N NaOH aq.). A. (nm) (£) maksimalt: 310 (29,200), 276,5(22,000), 230 (50,700); minimalt: 282,5 (21, 500), 251,5 (11,600).
EKSEMPEL 11
En løsning av 2-amino-6-brommetyl-4-hydroksykinazolinhydro-bromid (0,420 g) og dietyl N-(4- (2-fluoretylamino)benzoyl)-L-glutamat (0,370 g) i dimetylacetamid (8 ml) ble rørt over kalsiumkarbonat (0,417 g) i 45 timer ved romtemperatur (23°C). Kalsiumkarbonatet ble fjernet ved filtrering gjennom selitt og løsningsmiddelet deretter fjernet ved 40-55°C/0,02 mm.
Det således erholdte råprodukt ble oppløst i 5% v/v etanol i kloroform med unntagelse av en liten rest, og kromatografert på kiselgel (Merck, Art 15111, 250 g) ved eluering med 5% EtOH-CHCl3. Produktet, dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)2-fluoretylamino)benzoyl)-L-glutamat var et hvitt fast stoff smp. 115-120°C (46,3 %) . Strukturen ble fastslått ved élementæranalyse (C,H,N og F) og ved NMR spektroskopi.
Aminutgangsmaterialet som brukes i eksempel 11 ovenfor kan
fremstilles som følger:
Dietyl N-(4-aminobenzoyl)-L-glutamat (3,22 g) ble behandlet
i DMF løsning (40 ml) i 17 timer ved 13 5°C med 2-fluoretyl p_-toluensulfonat (4,36 g) (W.F. Edgell og L. Parts, J.Am. Chem. Soc, 11_, 4899, (1955)) i nærvær av kalsiumkarbonat (3,00 g). Det var nødvendig å tilsette ytterligere reagens (4,36 g) etter 2 timer 45 minutter. Kalsiumkarbonatet ble fjernet ved filtrering gjennom selitt og- etter fjerning av løsningsmiddelet i vakuum ble resten oppløst i kloroform og løsningen vasket med vann. Ekstraktet ble tørket (MgS04) og konsentrert hvilket ga råproduktet. Dette ble renset ved HPLC på kiselgel (Merck, Art 15111) ved bruk av 50:50 kloroform: petroleter som elueringsmiddel. Hvite krystaller erholdtes (11,3%) smp. 105,5-106,5°C. Strukturen ble fastslått ved élementæranalyse (C,H,N og F) og ved NMR spektroskopi.
EKSEMPEL 12
N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)2-fluor-etylamino) benzoyl) -L-glutamat (0,206 g) ble oppslemmet i en blanding av vann (4,5 ml) og etanol (1 ml) og behandlet med IN NaOH aq. (5 mol ek.). Kraftig rysting ga en løsning i løpet av 5 minutter. Etter to timer ble løsningen klaret ved filtrering og pH bragt til 4,0 ved bruk av IN HC1 aq.
Et gelatinøst presipitat av produktet resulterte. Dette ble befridd for uorganiske ioner ved tre cykler av suspensjon-sentrifugering-dekantering. Det amorfe hvite faste stoff ble tørket ved 7 0°C i vakuum, (smp. /<>> 350°C med noe mørkning og langsom dekomponering fra 245°C) og ga N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)2-fluoretylamino)benzoyl)-L-glutaminsyre. (CB 3731) Utbytte 60,1 %. Strukturen ble bekreftet ved élementæranalyse (C,H,N og F) og ved uv spektroskopi (spektrum opptatt i 0,1N NaOH aq.). uv A. (nm) (£) maksimalt: 307 (29,200), 275 (19,500), 227,5 (49,700); minimalt: 279 (19,200), 250 (9,100).
EKSEMPEL 13
Til en løsning av dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kina-zolinyl)metyl)amino)benzoyl)-L-glutamat (S.P. Acharya og J.B. Hynes, J. Heterocyclic Chem. 12, 1283 (1975)) (2.111g) i is-eddik (21 ml) satte men paraformaldehyd (0,384 g, 3 mol ek.), kaliumcyanid (0,832 g, 3 mol ek.) og vannfritt sinkklorid (2,119 g, 3,65 mol ek.). Den resulterende grøt ble etter røring under utelukkelse av fuktighet i 16 og en halv time fordelt mellom kloroform og vann.
Den organiske fasen ble fjernet, vasket med vann og tørket (MgSO^). Fordampning av løsningsmiddelet ga tilbake råproduktet som et gult fast stoff. Dette ble to ganger kromatografert på kiselgel (Merck, Art. 11695) og satt på kolon-nen hver gang i 6% etanol i kloroform og eluert med det samme løsningsmiddel. Produktet ble så videre renset ved gjennomløp gjennom en tredje kiselgelkolonne (Merck, Art. 15111), og denne satt som et sjikt på kiselgel (Merck, Art 77 34) erholdt ved inndampning av en DMF løsning med 7 0°C.
(Spor av DMF ble fjernet ved tørking (P20,-) i vakuum i 48 timer). Eluering med 6% etanol i kloroform. Produktet, dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl) cyanometylamino)benzoyl)-L-glutamat var et gråhvitt fast stoff, smp. 145-160°C. Utbytte 44%. Strukturen ble bekreftet ved élementæranalyse og PMR spektroskopi. Funnet: C, 60,53; H, 5,85; N, 15,86. C27H30N6°6 gir C' 60'66' H' 5'66' N, 15,72%. At -CH-CN resten (64,73 s,2H) var knyttet til
10
N ble bekreftet ved at signalet (d, 2H) fra 3' og 5' pro-tonene hadde skiftet fra 6 6,62 til 6 6,95 indikerer elektron-abstrahering fra molekylets bro område.
EKSEMPEL 14
Dietyl N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)cy-anometylamino) benzoyl)-L-glutamat (0,108 g} ble oppslemmet i en blanding av vann (2,5 ml), og etanol (0,5 ml) og behandlet med IN NaOH aq. (3 mol ekvivalenter). Kort røring (10 minutter), ga en nesten fullstendig oppløsning. Etter ytterligere 1,25 timer ble litt uoppløst stoff fjernet ved filtrering og pH bragt til 4,1 med IN HC1 aq. Et gelatinøst presipitat av produktet resulterte. Det ble befridd for uorganiske ioner ved to cykler av suspensjon-sentrifugering-dekantering. Det faste produktet,N-(4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl) metyl(cyanometylamino)benzoyl)-L-glutaminsyre (CB 3726) ble tørket over P205, til slutt ved 80°C i vakuum, ikke smeltepunkt da det gikk over i harpiks mellom 210 og 250 C. Utbytte 46%. Élementæranalyse: Funnet: C, 57,89; H, 4,77;
N, 17,5<9.><C>23<H>22<N>6<0>6 ga C 57,74; H, 4,6<3;> N, 17,56%.
Forbindelsene fra eksempel 3 ble undersøkt in vitro som inhibitorer for TS og cellevekst og in vivo mot L1210 tumoren. Da metotreksat (MTX) resistens er et viktig problem i kreft-terapi, ble forbindelsene som fremstilles i foreliggende oppfinnelse også undersøkt i dette henseende. Kryssresis-tensen til den MTX resistente cellelinje L1210/R71 som er kjent å ha forhøyet DHFR, men normal MTX transport ble målt i kultur, og forbindelsenes evne til å konkurrere med MTX eller folinsyre ved transport til L1210 celler ble også målt.
Enzymologi
Forbindelsene CB3716 og CB3717 ble begge oppløst i N/10 NaOH og nøytralisert ved bruk. Cytosolen fra logfase L1210 celler innsamlet fra dyr ble delvis renset for TS I D rU„ °9 Ki bestem-meiser for å fjerne en fosfatase fra preparatet som nedbryter dUMP til deoksyuridin. (I, fl ^ e definert som den nødvendige inhibitorkonsentrasjonen for å redusere reaksjonshastigheten til TS med 50%). DHFR ble renset ved affinitetskromatografi og Ki bestemmelser utført.
Resultatene er vist i den følgende tabell 1 og sammenligning utført med 10-propylforbindelsen svarende til CB3716 og 3717. Nærværet av allyl og propargylgrupper i 10-stillingen sammenlignet med propylgruppen gir TS inhiberingsverdier som er henholdsvis ca. 3 og 30 ganger større, mens inhiberin<g>en av DHFR forblir av samme størrelsesorden. Inhiberingen av TS ved forbindelse CB3717 ble karakterisert og funnet å være kompetitiv med N^,N"^-metylentetrahydrofolat med en Ki på ca. l,lnM.
Cellekultur
L1210 og L1210:R71 celler ble dyrket i kontinuerlig suspen-sjonskultur i RPMI 1640 medium som inneholdt 10% hesteserum (Flow Laboratories, Irvine, Scotland, UK). Celler ble fortynnet til 10^/ml og tilsetninger (fortynnet i medium og sterilisert ved mikroporefiltrering) foretatt før starting av hver inkubering. Celletellinger ble utført étter 24 og 48 timer ved bruk av et forbedret Neubauer haemocytometer. ID5q ble definert som den konsentrasjon av droge som var nødvendig for å redusere 48 timers tellingen til 50% av kontrollen.
ID50 konsentrasjonene i cellekultur for L1210 og L1210:R71 (MTX-resistent) er vist i tabell 2 nedenfor. Ikke bare økte toksisiteten til drogene til begge cellelinjer med tiltagende umetning av 10-substituenten,men også graden av kryssresis-tens for L1210:R71 ble mindre markert. L1210:R71 er ca. 600 ganger resistent overfor MTX.
Nedsettelse av toksisiteten til forbindelsen CB 3717 kunne oppnås ved koinkubering med tymidin (10 pm) men bare delvis nedsettelse ble oppnådd med folinsyre i alle konsentrasjoner opptil 100 ^iM. Disse resultater er illustrert i figur 1 på de medfølgende tegninger som viser beskyttelse av L1210 celler i kultur fra 20 ;iM CB 3717. • CB 3717 alene; oCB 3717 + folinsyre 5 pM;
oCB 3717 + folinsyre 50 uM; ■ CB 3717 +
folinsyre 500 uM;
a CB 3717 + TdR luM; aCB 3717 + TdR lO^M
Disse resultater indikerer at CB 3717 virker på TS som hoved-sted spesielt fordi dets affinitet til DHFR er ti ganger mindre enn for TS og også fordi det er mulig å oppnå praktisk talt fullstendig beskyttelse overfor L1210 celler ved tilset-ningen av tymidin til mediet,mens tilsetning av folinsyre ikke nedsetter virkningen av midlene selv når høye konsentrasjoner (100 jam) brukes.
Forbindelser som fremstilles i de andre eksempler ble tilsvarende undersøkt in vitro som inhibitorer for TS og cellevekst med de følgende resultater: -
(i disse eksperimenter ble det brukt TS renset > 2000 ganger fra L1210 celler ved affinitetskromatografi).
[Selv om disse forbindelser ikke viser spesielt god TS inhibering, er de av potensiell interesse som antikreftmidler ved at de har lav toksisitet overfor L1210 celler i vevs-kultur . ]
Transportstudier
Tr.ansportstudier ble utført med forbindelse CB 3717 som re-presentant for forbindelsene som fremstilles ifølge oppfinnelsen ved å inkubere celler i nærvær av en markert substans, fjerne alikoter, separere og vaske cellene ved sentrifugering og telling av brikken.
Virkningen av de forskjellige konsentrasjoner av forbindelse CB 3717 i mediet etter transport av tritiert metotreksat og tritiert folinsyre er vist i figur 2 på de vedlagte tegninger.
• 4pM MTX; * 4fuM folinsyre
Transporten av begge disse forbindelser ble inhibert ved forbindelsen CB 3717.
Således unngår CB 3717 tydeligvis problemene ved å bruke metotreksat,overfor hvilken resistens kan oppstå ved en økning av cellulært DHFR innhold og en reduksjon i den celle-membran transportmekanisme som er ansvarlig for å føre både metotreksat og tetrahydrofolatderivatene. Det cytotoksiske sted for CB 3717 er TS og ikke DHFR og transportstudiene viser at denne forbindelsen åpenbart kan transporteres ved den rute som brukes for metotreksat og også den for folinsyre da CB 3717 forårsaket en doseavhengig reduksjon i transporten av begge disse materialer.
Behandling av L 1210 tumorbærende dyr
L1210 tumoren ble rutinemessig innført i DBA2 mus. For eksperimenter ble 5 x 10 4 celler implantert i.p. i hunmus C57B1 x DBA2 Fl hybridmus 3 dager før behandling, hvilket ga en etablert tumor på ca. 2 x 10 celler på tidspunktet for behandling. Forbindelsen CB 3717 ble oppløst i N/10 NaOH, fortynnet til det riktige volum og pH justert til 8,5 før .
i.p. injeksjon.
Resultatene er sammenfattet i tabell 3 som følger:
Figur 3 illustrerer overlevelsen av L1210 bærende mus injesert med CB 3717.
•Ingen behandling (10 dyr)-MTX kontroll
□Ingen behandling (20 dyr)-CB 3717 kontroll
Dyr ble injesert med 20- mM NaHCO^ buffer 0,4 ml daglig x
5 dager.
• MTX 3mg/kg daglig x 5 (10 dyr)
aCB 3717 125mg/kg daglig x 5 (10 dyr)
aCB 3717 200 mg/kg daglig x 5 (10 dyr)
Forskjellen i overlevelsen av CB 3717 MTX behandlede dyr er meget tydelig, p<0,001 ved bruk av log rangeringsforsøk.
Enkelte doser av forbindelsen CB 3717 opp til 160 mg/kg var ikke toksiske og ga meget liten terapeutisk virkning. En 5 daglig doseplan ga økning i midlere overlevelsestid som var doseavhengig (se tabell 3). I doser på 125 og 200 mg/kg fant man 9 av 10 langtidsoverlevende (over 12 0 dager) (se figur 3).
Drogetilgjengelighet og oppløselighet utelukket bruk av høy-ere doser. Da injeksjonsløsningene bare kunne nøytraliseres til pH 8,5 under bibehold av oppløselighet ble riktige kontroller injesert med bikarbonat ved pH 8,5. Ingen av kon-trollgruppene viste noen økning i livslengde. For sammen-ligningsgrunner ble ytterligere grupper av dyr behandlet.med forskjellige doser metotreksat gitt etter samme plan. Den optimale dose av metotreksat, 3 mg/kg, ga en økning i median livslengde på 71% men bare 2/10 langtidsoverlevende.
Disse dyrene tapte ikke betydelig vekt eller viste andre tegn på toksisitet under behandlingen med drogen som illustrert i figur 4 i de vedlagte tegninger som viser kroppsvektfdr-andringer i grupper på 10 mus behandlet med 5 daglige doser av CB 3717 ved 125 mg/kg pr. dag. (■ ): 200 mg/kg/dag (A); ubehandlede tumorbærende kontroller ubehandlede kontroller uten tumor (o).
Resultatene av forsøkene inklusive behandling av L1210 tumorbærende dyr viser en betydelig økning av langtidsoverlevende sammenlignet med dyr behandlet optimalt med metotreksat.

Claims (4)

1. Analogifremgangsmåte ved fremstilling av et terapeutisk aktivt 2-araino-kinazolinderivat med formel hvor R betyr:
1) en rettlinjet eller forgrenet umettet hydrokarbongruppe med 2 til 6 karbonatomer, eller
2) en rettlinjet eller forgrenet mettet eller umettet hydrokarbongruppe som er substituert med minst en substituent som er -CN, -COOH eller et salt eller en ester derav; OH, = 0, halogen, NH2, -CONH,,, -CO-CgHj., oksiranyl eller 5-uracinyl; n er 0 eller et heltall fra 1-4, X,eller, når n er et heltall på minst 2, betyr hver X uavhengig et halogen, C^ C^ alkyl, aryl eller aralkylgruppe C1-C4-alkoksy eller N02, og Y betyr en gruppe med formel: - eller hvori m er et heltall som er minst 1 (poly-L-glutamat) eller et farmasøytisk fordragelig salt eller ester derav, karakterisert ved at man A) fullstendig eller delvis avbeskytter en forbindelse med hvor X og n er som ovenfor definert, R 2 er ekvivalent med R som er ovenfor definert eller er en gruppe R i beskyttet form, R"*" er hydrogen eller en aminobeskyttelsesgruppe og Y' betyr en gruppe med formel a), b) eller c) som ovenfor angitt for Y eller et salt av disse grupper eller disse grupper i delvis eller fullstendig beskyttet form, idet beskyttelsesgruppen i Y<1> er en estergruppe eller annen beskyttelsesgruppe, med det forbehold at forbindelsen med formel la inneholder minst en beskyttelsesgruppe og at, hvis avbeskyttelse utføres for å fjerne mer enn en beskyttelsesgruppe kan avbeskyttelsen utføres samtidig eller i hvilken som helst rekkefølge, eller B) kobler en forbindelse med formel hvor R"<*>" er som definert under A) og X'' er en avgangsgruppe, med en forbindelse med formel hvor R , X, n og Y' er som definert under A) ovenfor under dannelse av en forbindelse med formel Ia som angitt under A) ovenfor, men som ikke trenger å inneholde noen beskyttelses-grupper, og, om nødvendig, avbeskytter forbindelsen med formel Ia som angitt under A), hvoretter man om ønsket over-fører en erholdt forbindelse med formel I i et farmasøytisk akseptabelt salt ved tilsetning av en syre eller base.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, ved fremstilling av N-(4-(N- ( (2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)prop-2-ynylamino)-benzoyl-L-glutaminsyre eller et salt eller en ester derav, karakterisert ved at man velger tilsvarende substituerte utgangsmaterialer.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av N-(2-metyl-4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutaminsyre eller et salt eller en ester derav, karakterisert ved at man velger tilsvarende substituerte utgangsmaterialer.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av N-(2-klor-4-(N-((2-amino-4-hydroksy-6-kinazolinyl)metyl)prop-2-ynylamino)benzoyl)-L-glutaminsyre eller et salt eller en ester derav, karakterisert ved at man velger tilsvarende substituerte utgangsmaterialer.
NO803868A 1979-12-19 1980-12-18 Analogifremgangsmaate ved fremstilling av nye kinazolinderivater. NO154919C (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB7943715 1979-12-19
GB8006813 1980-02-28

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO803868L NO803868L (no) 1981-06-22
NO154919B true NO154919B (no) 1986-10-06
NO154919C NO154919C (no) 1987-01-14

Family

ID=26273917

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO803868A NO154919C (no) 1979-12-19 1980-12-18 Analogifremgangsmaate ved fremstilling av nye kinazolinderivater.

Country Status (17)

Country Link
US (2) US4447608A (no)
EP (1) EP0031237B1 (no)
AU (1) AU543237B2 (no)
CA (1) CA1184900A (no)
DE (1) DE3069468D1 (no)
DK (1) DK157019C (no)
ES (3) ES8300716A1 (no)
FI (1) FI76791C (no)
GB (1) GB2065653B (no)
GR (1) GR72847B (no)
HU (1) HU193505B (no)
IE (1) IE51188B1 (no)
IL (1) IL61756A (no)
NO (1) NO154919C (no)
NZ (1) NZ195876A (no)
PT (1) PT72232B (no)
YU (1) YU321180A (no)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4684653A (en) * 1985-03-08 1987-08-04 The Trustees Of Princeton University Pyrido(2,3-d)pyrimidine derivatives
US4927828A (en) * 1985-03-08 1990-05-22 The Trustees Of Princeton University Diastereoisomeric tetrahydropyrido-(2,3,d) pyrimidine derivatives
US5026851A (en) * 1985-03-08 1991-06-25 The Trustees Of Princeton University Pyrido[2,3-]pyrimidine derivatives
GB8513754D0 (en) * 1985-05-31 1985-07-03 Jones T R Anti-cancer quinazoline derivatives
GB8607683D0 (en) * 1986-03-27 1986-04-30 Ici Plc Anti-tumor agents
US5187167A (en) * 1986-03-27 1993-02-16 Imperial Chemical Industries Plc Pharmaceutical compositions comprising quinazolin-4-one derivatives
US4833145A (en) * 1986-06-30 1989-05-23 The Trustees Of Princeton University 4(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidine derivatives
US4902796A (en) * 1986-10-20 1990-02-20 The Trustees Of Princeton University 6-alkenyl and ethynyl derivatives of 2-amino-4-hydroxypyrido[2,3-d]pyrimidines
US4818819A (en) * 1986-10-20 1989-04-04 The Trustees Of Princeton University Process for the preparation of fused pyridine compounds
GB8707053D0 (en) * 1987-03-25 1987-04-29 Ici Plc Anti-tumour agents
US4857530A (en) * 1987-11-03 1989-08-15 Warner-Lambert Company Substituted quinazolinones as anticancer agents
GB8727737D0 (en) * 1987-11-26 1987-12-31 Ici Plc Antitumour agents
JP2830008B2 (ja) * 1988-04-01 1998-12-02 武田薬品工業株式会社 縮合ピリミジン誘導体
US5223620A (en) * 1988-04-01 1993-06-29 Takeda Chemical Industries, Ltd. Pyrido[2,3-d]pyrimidine compounds useful as intermediates
GB8809978D0 (en) * 1988-04-27 1988-06-02 Ici Plc Anti-tumour agents
EP0365763A1 (en) * 1988-09-30 1990-05-02 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Antiproliferative cyclic compounds
GB8829296D0 (en) * 1988-12-15 1989-01-25 Ici Plc Anti-tumour compounds
US5252573A (en) * 1988-12-15 1993-10-12 Imperial Chemical Industries Plc Anti-tumor agents
US5028608A (en) * 1989-12-11 1991-07-02 The Trustees Of Princeton University N-(6-Amino-(pyrrolo(2,3-d)pyrimidin-3-ylacyl) )-glutamic acid derivatives
US5160727A (en) * 1990-02-13 1992-11-03 Warner-Lambert Company Tumor cell sensitization method using quinazolinedione derivatives
US5286726A (en) * 1990-04-12 1994-02-15 The Regents Of The University Of Michigan Difluoroglutamic acid conjugates with folates and anti-folates for the treatment of neoplastic diseases
AU640016B2 (en) * 1990-05-30 1993-08-12 Imperial Chemical Industries Plc Hydroquinazoline derivatives
US6762188B1 (en) 1990-06-19 2004-07-13 Smithkline Beecham Corporation Pharmaceutically active benzoquinazoline compounds
GB9013615D0 (en) 1990-06-19 1990-08-08 Wellcome Found Pharmaceutical compounds
GB9105771D0 (en) * 1991-03-19 1991-05-01 Cancer Res Inst Royal Anti-cancer compounds
US5145854A (en) * 1991-11-27 1992-09-08 Nair Madhavan G 1-formyl-5,8,10-trideazafolates
GB9205320D0 (en) * 1992-03-11 1992-04-22 Ici Plc Anti-tumour compounds
GB9205907D0 (en) * 1992-03-18 1992-04-29 Cancer Res Inst Royal Anti-cancer compounds
US5430148A (en) * 1992-03-31 1995-07-04 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Antiproliferative quinazolines
CH684644A5 (de) * 1992-07-13 1994-11-15 Eprova Ag 5,10-Methylentetrahydrofolsäure-Cyclodextrin-Einschlussverbindungen.
GB9223352D0 (en) * 1992-11-06 1992-12-23 Ici Plc Tricyclic compounds
US5821231A (en) * 1993-12-06 1998-10-13 Cytel Corporation CS-1 peptidomimetics, compositions and methods of using same
EP0737204A4 (en) * 1993-12-06 1999-06-23 Cytel Corp CS - 1 peptide mimetics, compositions and methods of their use
WO1995015973A1 (en) * 1993-12-06 1995-06-15 Cytel Corporation Cs-1 peptidomimetics, compositions and methods of using the same
US5770573A (en) * 1993-12-06 1998-06-23 Cytel Corporation CS-1 peptidomimetics, compositions and methods of using the same
US5804396A (en) * 1994-10-12 1998-09-08 Sugen, Inc. Assay for agents active in proliferative disorders
US5837524A (en) * 1994-12-15 1998-11-17 Sugen, Inc. PYK2 related polynucleotide products
US5837815A (en) * 1994-12-15 1998-11-17 Sugen, Inc. PYK2 related polypeptide products
EP0832073B1 (en) * 1995-06-07 2002-01-16 Sugen, Inc. Quinazolines and pharmaceutical compositions
US5593999A (en) * 1995-06-07 1997-01-14 Nair; Madhavan G. Non-classical folate analogue inhibitors of glycinamide ribonucleotide formyltransferase (GARFT)
US6716575B2 (en) 1995-12-18 2004-04-06 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of AUR1 and/or AUR2 related disorders
US7119174B2 (en) * 1995-12-18 2006-10-10 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of AUR1 and/or AUR2 related disorders
DE69729954T2 (de) * 1996-12-11 2005-09-08 Sugen, Inc., San Francisco Identifizierungsverfahren für Substanzen die an das Pyk2 Polypeptid binden
US6818440B2 (en) 1997-04-28 2004-11-16 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of alk-7 related disorders
US6228641B1 (en) 1997-05-20 2001-05-08 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of PTP04 related disorders
US7115710B2 (en) * 1997-06-11 2006-10-03 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of PTP related disorders
US6342593B1 (en) 1997-06-11 2002-01-29 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of ALP related disorders
US6388063B1 (en) * 1997-06-18 2002-05-14 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of SAD related disorders
US6495353B1 (en) 1998-01-21 2002-12-17 Sugen, Inc. Human orthologues of wart
JP2002522009A (ja) 1998-04-14 2002-07-23 スージェン・インコーポレーテッド Ｓｔｅ−２０関連蛋白質キナーゼ
US6861442B1 (en) * 1998-12-30 2005-03-01 Sugen, Inc. PYK2 and inflammation
GB9904275D0 (en) 1999-02-24 1999-04-21 Cancer Res Campaign Tech Anti-cancer compounds
US6677382B1 (en) 1999-09-23 2004-01-13 Pharmacia Corporation Substituted N,N-bis-phenyl aminoalcohol compounds useful for inhibiting cholesteryl ester transfer protein activity
US6476057B1 (en) 1999-09-23 2002-11-05 G.D. Searle & Co. Use of substituted N, N-disubstituted cycloalkyl aminoalcohol compounds for inhibiting cholesteryl ester transfer protein activity
US6683113B2 (en) 1999-09-23 2004-01-27 Pharmacia Corporation (R)-chiral halogenated substituted N,N-Bis-benzyl aminioalcohol compounds useful for inhibiting cholesteryl ester transfer protein activity
EP1222273A2 (en) 1999-10-22 2002-07-17 PHARMACIA &amp; UPJOHN COMPANY Drosophila g protein coupled receptors, nucleic acids, and methods related to the same
US7364866B2 (en) * 1999-10-22 2008-04-29 Pharmacia & Upjohn Company Drosophila G protein coupled receptors, nucleic acids, and methods related to the same
US20030162223A1 (en) * 1999-10-22 2003-08-28 Lowery David E. Drosophila G protein coupled receptors, nucleic acids, and methods related to the same
EP1237909A2 (en) * 1999-11-16 2002-09-11 PHARMACIA &amp; UPJOHN COMPANY Human g protein-coupled receptors
US20030082534A1 (en) * 1999-11-16 2003-05-01 Peter Lind Novel G protein-coupled receptors
US6143776A (en) * 2000-02-02 2000-11-07 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Tosylproline analogs as thymidylate synthase inhibitors
US20030003451A1 (en) * 2000-02-23 2003-01-02 Gabriel Vogeli Novel G protein-coupled receptors
US20030027308A1 (en) * 2000-05-30 2003-02-06 Sugen Incorporated Novel human protein phosphatases identified from genomic sequencing
CA2321345A1 (fr) * 2000-10-02 2002-04-02 Abdelbast Guerfi Utilisation du graphite dans un composite pour reduire l'accumulation de glace
US20040157306A1 (en) * 2000-11-13 2004-08-12 Sugen Incorporated Mammalian protein phosphatases
US20050069976A1 (en) * 2001-02-14 2005-03-31 Peter Lind Protein-coupled receptor
PT1421105E (pt) 2001-08-31 2010-12-07 Btg Int Ltd Compostos anticancerígenos de ciclopenta-g quinazolina
WO2003020300A1 (en) 2001-08-31 2003-03-13 Btg International Limited Use of cyclopenta[g]quinazoline derivatives for treating cancer
JP2005509418A (ja) * 2001-11-13 2005-04-14 スージェン・インコーポレーテッド 哺乳動物蛋白質ホスファターゼ
US7537774B2 (en) * 2005-12-23 2009-05-26 Orion Therapeautics, Llc Therapeutic formulation
US20110008347A1 (en) * 2006-12-01 2011-01-13 Agency For Science ,Technology And Research Cancer-related protein kinases
AU2008237934B2 (en) 2007-04-11 2014-03-27 Merck & Cie 18F-labelled folates
US8273617B2 (en) 2009-09-30 2012-09-25 Suvolta, Inc. Electronic devices and systems, and methods for making and using the same

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1021196A (en) * 1964-02-20 1966-03-02 Parke Davis & Co Novel amino acids and means for producing the same
US3471498A (en) * 1967-08-11 1969-10-07 Parke Davis & Co Certain n-p-((2,4-diamino-6-quinazolinyl)-methyl)benzoylamino acids

Also Published As

Publication number Publication date
ES8308314A1 (es) 1983-09-01
FI76791C (fi) 1988-12-12
ES8307762A1 (es) 1983-08-01
US4447608A (en) 1984-05-08
IL61756A (en) 1987-02-27
NO803868L (no) 1981-06-22
US4564616A (en) 1986-01-14
IE51188B1 (en) 1986-10-29
ES497884A0 (es) 1982-11-01
EP0031237A1 (en) 1981-07-01
AU6549580A (en) 1981-06-25
GR72847B (no) 1983-12-07
DK157019C (da) 1990-03-26
GB2065653A (en) 1981-07-01
IL61756A0 (en) 1981-01-30
ES508454A0 (es) 1983-08-01
DK540080A (da) 1981-06-20
IE802672L (en) 1981-06-19
PT72232B (en) 1981-11-02
DK157019B (da) 1989-10-30
FI76791B (fi) 1988-08-31
NO154919C (no) 1987-01-14
GB2065653B (en) 1983-03-09
CA1184900A (en) 1985-04-02
ES8300716A1 (es) 1982-11-01
FI803957L (fi) 1981-06-20
DE3069468D1 (en) 1984-11-22
EP0031237B1 (en) 1984-10-17
YU321180A (en) 1983-06-30
HU193505B (en) 1987-10-28
ES508453A0 (es) 1983-09-01
PT72232A (en) 1981-01-01
AU543237B2 (en) 1985-04-04
NZ195876A (en) 1983-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO154919B (no) Analogifremgangsmaate ved fremstilling av nye kinazolinderivater.
EP0204529B1 (en) Anti-cancer quinazoline derivatives
GB2188319A (en) Anti-tumour quinazolines
KR100221011B1 (ko) 항-종양 화합물, 이의 제조 방법 및 이를 함유하는 약학 조성물
KR20090104920A (ko) Ｈｓｐ90 억제제로서 5,6,7,8-테트라히드로프테리딘 유도체
JPH04505932A (ja) 三つの新規非ポリグルタマートのデアザアミノプテリンと合成方法
JP2002509139A (ja) 代謝的に不活性な抗炎症性および抗腫瘍性葉酸拮抗剤
US8518954B2 (en) Inhibitors of folic acid-dependent enzymes
AU8545091A (en) Antiproliferative substituted naphthalene compounds
EP0365763A1 (en) Antiproliferative cyclic compounds
WO1992005173A1 (en) Substituted tricyclic compounds
CN117343052B (zh) 蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂及其应用
US5145854A (en) 1-formyl-5,8,10-trideazafolates
WO1993004051A1 (en) 2-aza-2-desamino analogues of 5,8-dideazafolic acid
JPH0512347B2 (no)