NL8520047A - Werkwijze voor het bereiden van n-acylphenylalanines. - Google Patents

Description

: t - Werkwijze voor het bereiden van N-acylphenylalanines -

De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het bereiden van een N-acylphenylalanine, en in het bijzonder op een werkwijze voor het bereiden van een N-acylphenyl-: alanine door het overeenkomstige N-acyl- (¾-phenylserine kata- '

i 5 lytisch te reduceren in aanwezigheid van een reducerende kataly-; I

sator in een oplosmiddel. i ! N-acylphenylalanines zijn belangrijke verbin- ! ! dingen als voorlopers voor al dan niet gesubstitueerde phenyl- ]

j I

j alanines. Vooral niet-gesubstitueerd N-acylphenylalanine is ; I 10 een belangrijke verbinding als een tussenprodukt voor L-phenyl- j ! alanine dat bruikbaar is als een uitgangsstof voor aspartaam dat ! j in de laatste tijd aandacht trekt als een kalorie-arme kunstmatige i ! 1 i ! zoetstof. L-phenylalanine kan gemakkelijk bereid worden, : | bijvoorbeeld door een enzym , acylase, op N-acetylphenylalanine j 15 te laten werken.

Als een werkwijze voor het bereiden van een ; N-acylphenylalanine, heeft men gewoonlijk N-acetylglycine of j ; j N-benzoylglycine gecondenseerd met een benzaldehyd ter verkrij- ; ging van 2-methyl(of phenyl)-4-benzylideen-5- oxazolon , het 2q oxazolon gehydrolyseerd tot het overeenkomstige -acylamino-I kaneelzuur, en vervolgens het kaneelzuur onderworpen aan kataly- .

j tische reductie //bijvoorbeeld , "Organic Synthesis", Coll. Vol. : ! 2, p.1 en p. 491 (1943) J. . De bovengenoemde werkwijze heeft echter tot resultaat dat verschillende nevenprodukten ontstaan, 25 omdat de condensatiereaktie tussen N-acetylglycine of N-benzoylglycine en het benzaldehyd in azijnzuuranhydride , in aanwezigheid van natriumacetaat en onder verhitting en terugvloeiing teweeg gebracht wordt. Dienovereenkomstig heeft de bovengenoemde werkwijze in het algemeen als nadelen, dat het resulterende 30 2-methyl(of benzoyl)-4-benzylideen-5-oxazolon een slechte kwaliteit en een lage opbrengst heeft. Ook is een werkwijze beschreven 8520047 i : : voor het bereiden van N-acetylphenylalanine uit benzylchloride, aceetamide , koolstofmonoxyde en waterstof in aanwezigheid van een kobaltcarbonylkatalysator (Japanse octrooipublikatie Nr. 37585/1982), of een werkwijze voor het bereiden van N-acetylphenji-5 alanine door reaktie van styreenoxyde , aceetamide , koolstof- i j monoxyde en waterstof in aanwezigheid van een kobaltcarbonyl/ j titaniumisopropanolaatkatalysator ( Japanse ter inzage gelegde i octrooipublikatie 85845/1983) .

i Aan deze werkwijze kleven echter problemen, I 10 zoals beperkingen wat betreft de apparatuur en het bestaan van ; i j j potentieel gevaar aangezien al deze werkwijzen reakties bij hoge i I temperaturen en verhoogde drukken zijn. ' ! i j Het eerste oogmerk van de uitvinding is een j i | nieuwe werkwijze voor het bereiden van N-acylphenylalanines te | 15 verschaffen.

! Het tweede oogmerk van de uitvinding is een i · | werkwijze te verschaffen waarmee gemakkelijk en mèt hoge opbrengst : N-acylphenylalanines bereid kunnen worden.

! Door de uitvinding wordt de volgende werkwijze 20 voor het bereiden van een N-acylphenylalanine verschaft:

Een werkwijze voor het bereiden van een N- : i acylphenylalanine dat voorgesteld wordt door de formule 2, waarin

Rg en/of R^ een waterstofatoom of een C^-C^-alkyl-, C,j-C -alkoxy-, fenoxy-, hydroxy- of methyleendioxygroep zijn, en ! 25 R een methyl- of phenylgroep is ,bij welke werkwijze men een i ; ! N-acyl-P- phenylserine dat voorgesteld wordt door de formule 1, : waarin R^ en/of R£ een waterstofatoom of een C^-C^- alkyl-, ! i C^-C^-alkoxy-, fenoxy-, benzyloxy- of methyleendioxygroep zijn, en R een methyl- of phenylgroep is, katalytisch reduceert in ' 30 aanwezigheid van een reducerende katalysator in een oplosmiddel.

Wanneer de bovenstaande katalytische reductie uitgevoerd wordt in aanwezigheid van een reducerende katalysator en een zuur , en een alkohol als een oplosmiddel bij de uitvinding gebruikt wordt, kan een N-acylphenylalanine met de formule 35 8520047 2 verkregenworden door het reducerende reaktiemengsel te behandelen met een waterige alkalische oplossing.

Als N-acyl-ft -phenylserines die bruikbaar zijn | als uitgangsstoffen bij de werkwijze van de uitvinding , kunnen 5 in het bijzonder bij wijze van voorbeeld genoemd worden: ; N-acetyl- ft1-phenylserine, N-benzoyl--phenylserine, N-acetyl-ft- j (p-methylphenyl)serine, N-benzoyl- ft-(p-methylphenyl)- serine, N-acetyl-ft -(p-ethylphenyl)serine, N-benzoyl-ft- I ; (p-ethylphenyl)serine, N-acetyl- ft-(p-methoxyphenyl)- j I 10 serine, N-benzoyl-ft -(p-methoxyphenyl)serine, N-acetyl- j ; ft -(m-methoxyphenyl)serine, N-benzoyl-ft -(m-methoxy- | phenyl)serine, N-acetyl-ft)-(3,4-dimethoxyphenyl)serine, I N-benzoyl-ft -(3,4-dimethoxyphenyl)serine, N-acetyl-ft - j | (m-fënoxyphenyl)serine, N-benzoyl-ft -(m-fenoxyphenyl)- j

15 serine, N-acetyl-ft -(p-benzyloxyphehyl)serine, N- I

benzoyl-ft-(p-b.enzyloxyphenyl)serine, N-acetyl-ft -(m-i benzyloxyphenyl)serine, N-benzoyl-ft -(m-benzyloxy- ! ! phenyl)serine, N-acetyl-ft -(3,4-dibenzyloxyphenyl)serine, N-benzoyl- i ft -(3,4-dibenzyloxyphenyl)serine,N-acetyl-ft -(3,4-methyleen- j ; 20 dioxyphenyl)serine, N-benzoyl-ft-(3,4-methyleendioxy- i | phenyl)serine, enz. Deze verbindingen kunnen gemakkelijk bereid j j worden door ^-phenylserines te acyleren, welke laatstgenoemde | verbindingen verkregen zijn door glycine en benzaldehyden in ] ; aanwezigheid van een alkali te condenseren en vervolgens de 25 condensaten met een zuur , met azijnzuuranhydride of benzoylchlo- ' ride volgens een gebruikelijke methode te behandelen. f*-phenyl- ; serines kunnen vooral doelmatig bereid worden door glycine en benzaldehyden te laten reageren in uit twee lagen bestaande systemen, en wel uit water en een hydrofoob organisch oplos-30 middel (Japanse ter inzage gelegde octrooipublikatie Nr.

32753/1985) .

Volgens de werkwijze van de uitvinding kunnen N-acylphenylalanines verkregen worden door N-acyl- β-phenyl-serines met de formule 1 in gesuspendeerde of opgeloste toestand 35 8520047 i : 4 - • in een oplosmiddel katalytisch te reduceren in aanwezigheid van i : een reducerende katalysator en bij normale druk of verhoogde i i druk. | : Er wordt geen bijzondere beperking gelegd op 5 het te gebruiken oplosmiddel, tenzij het oplosmiddel zelf bij | de katalytische reductie gereduceerd wordt. Gexjoonlijk worden | polaire oplosmiddelen met een goede mengbaarheid met de uit- i | gangsstoffen op grote schaal gebruikt. Als specifieke oplosmid- i : delen kunnen genoemd worden water; lagere alkoholen zoals IQ methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, tert-b.utanol, -hydroxyethylmethylether en β-hydroxyethylethyl-.ether; ethers zoals diethylether, dioxan, tetrahydrofuran en j i diethyleenglycoldialkylether ; organische ..zuren zoals miere- j zuur, azijnzuur en propionzuur; oplosmiddelen van het estertype i i 15 zoals ethylacetaat, butylacetaat, triethylfosfaat en tributyl- j fosfaat; stikstofbevattende oplosmiddelen zoals acetonitril, ' pyridine, N,N-dimethyl-formamide, Ν,Ν-dimethylacetamide en N- < I methylpyrrolidon ; zwavelbevattende oplosmiddelen zoals sulforan j # j | en dimethylsulfoxyde ; en dergelijke. Daarnaast kunnen ook oplos-! j 20 middelen zoals benzeen, tolueen, dichloormethaan en dichloor- | ethaan gebruikt worden. Twee of meer van deze oplosmiddelen j ! kunnen in combinatie gebruikt worden. Er ligt geen bepaalde | i beperking op de te gebruiken hoeveelheid van het oplosmiddel.

i : j Het oplosmiddel kan in elke hoeveelheid gebruikt worden mits ; 25 ket resulterende reaktiemengsel volledig geroerd kan worden. j

Normaliter kan het oplosmiddel gebruikt worden in een hoeveelheid ! van 1-100 gew.delen of bij voorkeur 2-50 gew.delen , beide berekend per gew.deel van de uitgangsstof, dat wil zeggen N-acyl-β -phenylserine.

30 De reducerende katalysator die bij het uit voeren van de werkwijze van de uitvinding gebruikt kan worden, is een reducerende katalysator voor hët heterogene systeem, zoals palladium, platina of rhodium, waarbij palladium bijzondere voorkeur heeft. Deze katalysatoren worden in het algemeen gebruikt 35 op verschillende dragers. Als dergelijke dragers kan een aantal 8520047 - 5 - 1 verschillende dragers gebruikt worden zoals geaktiveerde koolstof, bariumsulfaat , aluminiumoxyde, siliciumdioxyde en ferriet . Katalysatoren die palladium in een hoeveelheid van 1-10 gew.% op deze dragers 5 dragen , worden vaak gebruikt. Onnodig te zeggen, dat palladium-j zwart ook gebruikt kan worden zonder dat zich enige problemen ! voordoen. De reducerende katalysator kan gebruikt worden in een hoeveelheid van 0,3 gew.% of meer, bij voorkeur in een hoe-j veelheid van 0,5-30 gew.%, of met grotere voorkeur in een | io hoeveelheid van 1-20 gew.%, alle gebaseerd op het N-acyl-$ - ! phenylserine. j

| De katalytische reductie bij de uitvinding kan I

j uitgevoerd worden onder normale of een verhoogde druk. Wanneer j | de reaktie onder een verhoogde druk teweeg gebracht wordt , | 15 verdient het normaliter de voorkeur de reaktie uit te voeren I 2 i | onder een verhoogde waterstofdruk tot aan 30 kg/cm om hydrogene- j | ren van de kern te onderdrukken. Aan de andere kant bedraagt ! OOi ! .de reaktietemperatuur 10-120 C, bij voorkeur 20-100 C, of met : i grotere voorkeur 30-80°C. Als de reaktietemperatuur hoger is dan' ! 20 120°C, treden nevenreakties op zoals ontledingen van uit- ; gangsstoffen en reaktieprodukt . Aan dergelijke hoge reaktie- ! temperaturen wordt dan ook niet de voorkeur gegeven.

Door de boven beschreven katalytische reductie uit te voeren in aanwezigheid van een zuur bij de uitvinding , 25 verloopt de katalytische reductie van het N-acyl-β-phenylserine vlotter en wordt de opbrengst van het N-acylphenylalanine duidelijk verbeterd. In dit geval kunnen anorganische zuren zoals zoutzuur (waterstofchloride ), broomwaterstofzuur, zwavelzuur, perchloorzuur en chloorsulfonzuur, alifatische carbon-30 zuren of sulfonzuren zoals trifluorazijnzuur , methaansulfonzuur en trifluormethaansulfonzuur en aromatische sulfonzuren zoals benzeensulfonzuur , p-tolueensulfonzuur, xyleensulfonzuur , p-1 chloorbenzeensulfonzuur en naftaleensulfonzuur gebruikt worden.

Wanneer deze zuren gebruikt worden , worden zij vaak alleen toege-' 35 past , maar er zullen geen problemen ontstaan uit het gecombineer- 8520047

I I

j I de gebruik van twee of meer zuren. Het zuur kan gebruikt worden ! in een hoeveelheid van 0,05-4 equivalent of geschikt 0,1-2 j | equivalent , beide gebaseerd op de uitgangsstof , N-acyl-Τ’ - ! phenylserine. Als het zuur in kleinere hoeveelheden dan 0,05 equi- 5 valent gebruikt wordt, heeft de toevoeging ervan weinig effekt j j op de snelheid van de reductie. Als het zuur in grotere hoeveelhe- | den dan 4 equivalent toegevoegd wordt, worden meer nevenprodukten' [ gevormd door hydrolyse van de acylgroepen in het N-acyl- P - | phenylserine en N-acylphenylalanine , en wordt de opbrengst van

| 10 het N-acylphenylalanine kleiner. Er wordt dan ook niet de I

| voorkeur aan gegeven het zuur in hoeveelheden buiten het boven ; j genoemde gebied te gebruiken. j ! Wanneer een N-acylphenylalanine met de formule i I | | 2 bereid wordt door de katalytische reductie van het overeenkom- ; j 15 stige N-acyl-^ -phenylserine met de formule 1 in de gelijktijdige; i aanwezigheid van een zuur , kunnen oplosmiddelen die gebruikt I , i i worden voor de reaktie ruwweg verdeeld worden in drie types, | | afhankelijk van de methode voor de isolatie van het Nv.acylphenyl- j alanine na de reaktie. i | 20 Oplosmiddelen van het eerste type zijn orga- i | nische oplosmiddelen en/of water.Geschikte organische oplosmiddelen J zijn oplosmiddelen die de uitgangsstof N-acyl- β- phenylserine of1 s , het reductieprodukt N-acylphenylalanine goed kunnen oplossen, en goed met water mengbaar zijm>. Als specifieke oplosmiddelen 25 kunnen genoemd worden lagere alkoholen zoals methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, tert-butanol, β-hydroxyethylmethylether ; en β-hydroxyethylethylether, oplosmiddelen van het ethertype zoals dioxan en tetrahydrofuran, carbonzuren zoals azijnzuur en propionzuur , dimethylformamide, dimethylaceetamide , N-30 methylpyrrolidon enz. Wanneer van deze oplosmiddelen de lagere alkoholen gebruikt worden, worden ze gebruikt als waterige oplossingen met 10 gew.% of meer water om de verestering van uitgangsstof en reaktieprodukt te vertragen. Wanneer andere organische oplosmiddelen dan alkoholen gebruikt worden als gemengde oplosmid-35 8520047

V

J.

- 7 - ·: ! delen met water, zijn er geen bepaalde beperkingen wat betreft i de verhoudingen van water tot dergelijke organische oplosmiddelen.

Oplosmiddelen van het tweede type zijn triesters van fosforzuur. Tributylfosfaat heeft in het bijzonder | 5 de voorkeur. Dit oplosmiddel heeft een grote oplosbaarheid voor | de uitgangsstof en het reaktieprodukt en laat de katalytische : reductie vlot verlopen. Aangezien het een organisch oplosmid- i del is dat niet mengbaar is met water , heeft het als voordeel | dat na de reaktie de isolatie van het N-acylphenylalanine en ; ! 10 het terugwinnen van het oplosmiddel vereenvoudigd kunnen worden, ; zoals hierin beschreven wordt. i ; i i Oplosmiddelen van het derde type zijn lagere j ! alkoholen. Als specifieke lagere alkoholen kunnen methanol, i j ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, tert- | i 15 butanol, P-hydroxyethylmethylether , f-hydroxyethylethylether | en dergelijke genoemd worden. Wanneer de katalytische reductie i | in deze oplosmiddelen uitgevoerd wordt, is het door de reaktie j gevormde N-acylphenylalanine gedeeltelijk of grotendeels ver- | esterd door de alkoholen die als oplosmiddelen gebruikt worden, : ^0 hoewel de verestering kan afhangen van het type en de hoeveel heid zuur en dergelijke. Zoals hier^in beschreven wordt, wordt het reaktiemengsel na de katalytische reductie dan ook behandeld · : met een waterige alkalische oplossing voor de hydrolyse, zodat ' het veresterde N-acylphenylalanine omgezet wordt tot het vrije J N-acylphenylalanme.

Het resulterende N-acylphenylalanine wordt op de volgende wijze gewonnen.

In het geval van een oplosmiddel van het eerste ; type kan de volgende werkwijze gevolgd worden voor de winning 50 vanUhet resulterende N-acylphenylalanine uit het reaktiemengsel na de katalytische reductie. Wanneer het reaktieprodukt in een opgeloste toestand is na de reaktie , kan het N-acylphenylalanine gewonnen worden door de reducerende katalysator af te filtreren, een waterige alkalische oplossing toe te voegen om het zuur te 35 8520047 - 8 - I : i neutraliseren , het organische oplosmiddel onder verminderde j druk af te destilleren en het residu met water en een anorganisch: zuur zoals zoutzuur te behandelen. Wanneer de reaktie uitgevoerd j is in water of in een gemengd oplosmiddel van water en een | 5 organisch oplosmiddel, is het N-acylphenylalanine vaak na de ! rèaktie in een kristallijne vorm. Bijgevolg kan het N-acylphenylalanine geprecipiteerd worden door een waterige alkalische ; I oplossing na de reaktie toe te voegen om het N-acylphenylalanine ; | op te lossen, de katalysator af te filtreren, het oplosmiddel I 10 te verdrijven en vervolgens een anorganisch zuur zoals zoutzuur j ί i I toe te voegen. j | In het geval van een oplosmiddel van het tweede ! | j j type kan het N-acylphenylalanine op de volgende wijze na de

| katalytische reductie gewonnen worden. Wanneer het reaktieproduktI

in opgeloste vorm is na de reaktie , kan het N-acylphenylalanine* I i j geprecipiteerd worden door de reducerende katalysator af te i i filtreren onder verkrijging van een filtraat, het N-acylphenyl- j | alanine uit het filtraat te extraheren met een waterige alkalischë

! I

j oplossing, bijvoorbeeld een waterige natriumhydroxydeoplossing I 20 in een hoeveelheid die tenminste gelijk is aan de totale equiva- j I lente hoeveelheid van het bij de reaktie gebruikte sterke zuur ! | en de uitgangsstof N-acyl- β-phenylserine, de lagen van het ί resulterende mengsel te scheiden, een anorganisch zuur zoals ; j zoutzuur aan de waterlaag toe te voegen om deze aan te zuren.

25 Wanneer het geproduceerde N-acylphenylalanine gedeeltelijk of grotendeels als een precipitaat na de reaktie uitgekristalliseerd is, is het slechts noodzakelijk het N-acylphenylalanine met de reducerende katalysator te verzamelen, de gefiltreerde massa met een waterige alkalische oplossing zoals een natriumhydroxyde- 30 oplossing in water op te lossen^zodat de N-acylphenylalanine- oplossing van de katalysator gescheiden wordt, het in het filtraat opgelos.te N-acylphenylalanine te extraheren en af te scheiden met een waterige alkalische oplossing , de oplossing en het extract te combineren en vervolgens een zuur aan de gecombi- 35 8520047 I neerde oplossing toe te voegen voor de kristallisatie van het I N-acylphenylalanine.

I Wanneer een organisch oplosmiddel dat niet i . mengbaar is met water, zoals het boven vermelde tributylfosfaat, ^ gebruikt wordt, kan het oplosmiddel dat teruggewonnen wordt na de extractie en afscheiding van het N-acylphenylalanine met de waterige alkalische oplossing,opnieuw in het proces gebracht worden om opnieuw gebruikt te worden, nadat alleen met water I gewassen is, zonder dat het verder door destillatie gezuiverd 10 I hoeft te worden.

| In het geval van een oplosmiddel van het derde

I type, is het door de reaktie gevormde N-acylphenylalanine gedeel- I

! telijk of grotendeels veresterd met de als het oplosmiddel gebruikte alkohol, hoewel de verestering kan afhangen van het 15 . i type en de hoeveelheid van het gebruikte zuur en dergelijke. i | Om het aldus veresterde N-acylphenylalanine om te zetten tot het ! I · i j vrije N-acylphenylalanine wordt het reaktiemengsel na de reductie j | behandeld met een waterige alkalische oplossing. Deze behandeling i i !

1 kan uitgevoerd worden na de reducerende reaktie , door de I

! 20 waterige alkalische oplossing toe te voegen aan de door affiltre-; ren van de reducerende katalysator verkregen oplossing of door | de waterige alkalische oplossing toe te voegen voor het affil- | ! I treren van de reducerende katalysator. Als de waterige alkalische! ! oplossing bij de bovengenoemde behandeling worden vaak waterige 25 , < i j oplossingen van alkalimetaalhydroxyden gebruikt. Ook kan echter i ; I het hydroxyde of oxyde van een aardalkalimetaal , gesuspendeerd i ' in water, gebruikt worden. Als specifieke voorbeelden van de i waterige alkalische oplossing kunnen waterige oplossingen en suspensies van natriumhydroxyde, kaliumhydroxyde, lithiurnhydroxyde^ 30 .

calciumhydroxyde, calciumoxyde, bariumhydroxyde en bariumoxyde genoemd worden. Het is noodzakelijk de waterige alkalische oplossing te gebruiken in een hoeveelheid die tenminste gelijk is aan het totaal van de hoeveelheid welke vereist, wordt om het voor de katalytische reductie gebruikte zuur te neutraliseren en 35 van de hoeveelheid die equivalent is aan de uitgangsstof N-acyl- 8520047 i - 10 - fi>-phenylserine. Aan de andere kant kunnen de temperatuur en ! tijd van de behandeling met de waterige alkalische oplossing 20- i 100°C respectievelijk 0,5-5 uur of bij voorkeur 30-80°C respectievelijk 1-3 uur bedragen. Onder deze omstandigheden wordt de ! 5 ester gehydrolyseerd tot het vrije N-acylphenylalanine. Het | aldus bereide N-acylphenylalanine kan als kristallen gewonnen ! worden, als het alkohol oplosmiddel van de met de waterige alka- j lische oplossing behandelde oplossing onder verminderde druk ! afgedestilleerd wordt, en het resulterende mengsel vervolgens | 10 met een anorganisch zuur zoals zoutzuur of zwavelzuur aangezuurd j wordt voor de precipitatie van het N-acylphenylalanine. j

Op de bovengenoemde wijze kan met de werkwijze ; i van de uitvinding het N-acylphenylalanine,dat met het als de | uitgangsstof gebruikte N-acyl-?1 -phenylserine overeenkomt, zeer j 15 doelmatig bereid worden. Wanneer de uitgangsstof echter een benzyloxy gesubstitueerd N-acyl- f-phenylserine is , wordt de benzyloxygroep ook gereduceerd en wordt een hydroxy gesubstitu-| eerd N-acylphenylalanine verkregen.

| Zoals hierboven beschreven is , heeft de werk-; | 20 wijze van de uitvinding grote waarde als een industriële i # ! bereidmgswerkwijze, omdat het een bereidingswerkwijze is met i j verschillende voordelen, namelijk dat 1) de N-acyl- Φ-phenylserines j ' I waarvan uitgegaan wordt, gemakkelijk bereid kunnen worden uit ! glycine en benzaldehyden via ^-phenylserines; 2) de katalytische 25 reducties van de N-acyl-(¾-phenylserines vlot verlopen onder milde omstandigheden vooral wanneer een zuur aanwezig is, waardoor de N-acylphenylalanines in hoge opbrengsten bereid worden; en 3) de reaktiemethode en dergelijke eenvoudig zijn.

De uitvinding wordt hierna gedetailleerd be-30 schreven met behulp van de volgende voorbeelden.

In de volgende voorbeelden werden de volgende analytische omstandigheden gebruikt voor vloeistofchromatografie met groot scheidend vermogen.

Kolom : YMC-Pack A-312, 6 mm middellijn x 150 mm 35 (pakkingsmateriaal: ODS).

1520047 - 11 - I Mobiele fase : 0,005 M/liter waterige oplossing van natrium- I heptaansulfonaat:methanol= 6:4 (volumever- houding) ... ingesteld op pH 2 met fosfor-zuur.

! 5 Stroomsnelheid : 1,0 ml/mm.

i Detector : Ultraviolet-spectrofotometer | (golflengte: 225 nm). ; i :

Voorbeeld I· | 10 .

In een hermetisch afgesloten glazen vat van ; 100'ml werden 5,6 g N-acetyl- f? -phenylserine, 30 ml isopropanol eh

0,22 g 5% palladium/koolstof gebracht . Na een doorspoeling met I

stikstof werd de katalytische reductie bij 40-45°C gedurende j 8 uur en bij normale druk uitgevoerd. j 15 . .

Na de reaktie werd de katalysator afgefiltreerd ' j en werd het filtraat geanalyseerd met behulp van chromatografie ! I met een groot scheidend vermogen. Als resultaat bleek het : | filtraat 0,16 g N-acetylphenylalanine te bevatten. Dit komt over- j I en met een opbrengst van 3,1 mol% gebaseerd op de uitgangsstof, i I ^ dat wil zeggen N-acetyl-$-phenylserine.

! ! I i j Voorbeelden II-V. i ! ; | Katalytische reducties werden op dezelfde wijze : ; j j als in voorbeeld I uitgevoerd, behalve dat 5,6 g N-acetyl- β- ί 25 ! phenylsenne gebruikt werd en de katalysator, het oplosmiddel en i j : j de waterstofdruk gevarieerd werden. Resultaten worden in tabel ! 1 getoond.

| 8520047 - 12 - "...........r..................................................................................

CU CM : •Η Ai 0 : +j 3 i—i υ AS M cd i

cd o3 cd bO

CJ 6 0 0 ^ · i Pi M O) d)

i O Ti XI O

Ö -r( -rl CM

ö IK cö ώ ! > .§ ! y i 8λ, kihhn co T- co · r--

00 ίθ Cd Λ ft ft ft Pi I

pï 4-J i—i i—i oo oo o-. vo cu O O iA O t>0 i

i M U pl g O

yo nj a) ' 0 (¾ I 43 ' o !3 ft a ; >

j Tl 'O

( | -n ö i CU -1-1 ft -u O)

0 1 2H

aj pl ^ oo co oo <r cu : μ O \ \ -0 β ί ίο o o o a \ ·Η MN. MDVOLO'X) W 1

s 4J a O I I I I

M 3o o o m in 4-i i I cd 4J '-J ΙΟ 1Λ <1· LO o ; a) cd 0 i ! “ μ S, is 8 ; ia) a)

rö O LA lO O

! i—I i—I CO CO CO CO 4-1

<U E V

! a) ^ 0 I >

1 <u <D

; i—I O t4 ;

; 0) Xi tJ

03 cd od i—i d i ·Η O W)

! 0 d U Pl O

! iH CO ^ Pl Cd 4-J

cu o p) p) yd 2 j ,43 r-4 N NI 4-1 0 cd ft 0) W Pl pl CU o h o ft cu ·ι-ι 1i-) y IA 4-1 ·γ4 -r-ι 6¾ rd ; 4-J cd n ν o υ : s cd cd σι m-ι ; ; o 4-1 ! co s •r4 ! CU !

i O

03 CM CM v- 1—I

i -H CM CM CM T- > [ Q.) rv r> r\ «\ i Pd o o o o 1-4 C“N > ! CU bO · i CU rd > ' i ; <U I 0 : M O 0 I o ,c i pi i i μ

j 4-> r-Η »H ι—I r-1 · H

cd O 5-1 O O cu 01 o cd o o > iO Ai A> 4-1 AS Ai

i—! -- Cd \ bO

cd 03 03 cd 4J 03 CU

-μ cu ftmp-i4-ip-imp-|!4-i w> cd ft o i-4 o o cu W fO ^4->6'?P)&'S4J&'S4J Cfl A ίΠωίΑΜίΛαιίΑω ίο

r—I

! cd I_j ϊ<3 > s Η, Η > 2 ^ Η Η I—I >' - 13 -

Voorbeeld VI. ι ! In 30 ml water werd 5,6 g N-acetyl- $-phenyl- | | serine gesuspendeerd, gevolgd door toevoegen en oplossen van t j | 2,2 g 45% natriumhydroxyde. De resulterende waterige oplossing ι | 5 werd in een 300 ml autoclaaf gebracht, en nadat deze met ; i stikstof doorspoeld was, werd waterstof onder druk ingeleid tot j 2 ' : een waterstofdruk van 20 kg/cm . Daarna werd de temperatuur | opgevoerd tot 50°C , waarna de katalytische reductie gedurende ' j 5 uur bij 50-55°C uitgevoerd werd. Nadat waterstof uit de | 10 autoclaaf gevoerd was en de autoclaaf met stikstof doorspoeld | was na de reaktie , werd de katalysator afgefiltreerd en werd j | het filtraat geanalyseerd met behulp van vloeistofchromatografie j met een groot scheidend vermogen. Als resultaat werd gevonden, : dat N-acetylphenylalanine bereid werd met een opbrengst van 7,2 15 mol%. i

Voorbeeld VII.

De methode van voorbeeld VI werd gevolgd, behalve dat 6,73 g N-benzoyl-β-phenylseline gebruikt werd in I 20 plaats van het N-acetyl-1> -phenylserine en de hoeveelheid water ! tot 50 ml verhoogd werd . N-benzoylphenylalanine werd in een ! opbrengst van 6,8 mol% bereid.

| Voorbeeld VIII.

I 25 In een hermetisch'afgesloten glazen vat van \ 100 ml werden 5,6 g N-acetyl-Φ-phenylserine, 50 ml dioxan, ι 0,28 g 5% palladium/koolstof en 1,2 g p-tolueensulfonzuur- monohydraat gebracht. Nadat het inwendige van het vat gespoeld was met stikstof en vervolgens met waterstof, werd een katalytische; 30 reductie gedurende 9 uur bij 50-52°C uitgevoerd. Tijdens deze periode werd waargenomen dat de waterstofabsorptie opliep tot ongeveer 95% van de stoechiometrische hoeveelheid. Na de reaktie werd het vat afgekoeld tot kamertemperatuur en gespoeld met stikstof. Vervolgens werd de katalysator afgefiltreerd en met een ; 35 kleine hoeveelheid dioxan gewassen. Het filtraat en de wassing 8520047 I werden gecombineerd . De resultaten van een analyse van de i gecombineerde oplossing waren als volgt: I N-acetylphenylalanine : 92,5 mol% (gebaseerd op N-acetyl-β- : I phenylserine) i I j j 5 N-acetyl-P -phenylserine : 1,8 mol% (gebaseerd op N-acetyl-P- ! phenylserine) ! | P-Phenylserine : 1,5 mol% (gebaseerd op N-acetyl-P - 1 phenylserine)

Phenylalanine : 1,3 mol% (gebaseerd op N-acetyl-f> -; I 10 phenylserine) ! i i i ί ! Nadat 2,5 g van een 10% natriumhydroxydeoplossing j | | in water toegevoegd was aan de oplossing, werd het dioxan onder i I verminderde druk afgedestilleerd. Na toevoegen van 20 ml water ; ^ en 1,0 g 35% zoutzuur aan het residu en krachtig roeren van het | mengsel werd het mengsel bij 5°C gefiltreerd, met gekoeld j water gewassen en vervolgens gedroogd , waardoor 4,40 g wit N- j i acetylphenylalanine verkregen werd. ;

Zuiverheid : 100% ! 2q Smeltpunt : 150-15:1°C j

Opbrengst : 84,9 % j j i i ί j i | Voorbeeld IX. j I j j In een hermetisch afgesloten glazen vat van I 100 ml werd 5,6 g N-acetyl-¢)-phenylserine, 50 ml water, | 0,28 g 5% palladium/koolstof en 1,2 g 98% zwavelzuur gebracht. !

Nadat het inwendige van het vat met stikstof en vervolgens met waterstof gespoeld was , werd een katalytische reductie bij 60-65°C gedurende 20 uur uitgevoerd. Tijdens deze periode werd 2o waargenomen dat de absorptie van waterstof opliep tot ongeveer 70% van de stoechiometrische hoeveelheid. Na de reaktie werd het vat afgekoeld tot kamertemperatuur en doorspuid met stikstof. Vervolgens werd 45% natriumhydroxyde toegevoegd om de pH in te stellen op 8 . Het filtraat en de wassing werden ge- ; 25 combineerd. De resultaten van een analyse van de gecombineerde 8520047 I 15 ί oplossing waren als volgt: | N-acetylphenylalanine : 62,4 mol% (gebaseerd op N-acetyl-'fr -: I ; • phenyls enne) ; N-acetyl-β -phenylserine : 15,3 mol% (gebaseerd op N-acetyl-f-j i r | phenyl serine) ! j ' Phenylalanine : 6,8 mol% (gebaseerd op N-acetyl- 'P -j j phenylserine) ; P* -Phenylserine : 14,9 mol% (gebaseerd op N-acetyl-^ 4 | phenylserine).

10

Voorbeeld X.

j Een katalytische reductie werd op precies i | dezelfde manier als in voorbeeld VIII uitgevoerd , behalve dat i 50 g tetrahydrofuran in plaats van het dioxan en 1,2 g methaan- j ί ί j sulfonzuur in plaats van p-tölueensulfonzuur gebruikt werd. |

i 15 I

| Absorptie van waterstof van ongeveer 95% van de stoechiometrische | hoeveelheid werd waargenomen bij 50-52°C in 9 uur. Na de reaktie \ werd het vat afgekoeld tot kamertemperatuur en doorspuid met j stikstof. Vervolgeiis werd de katalysator af gefiltreerd en gewas- | sen met een kleine hoeveelheid tetrahydrofuran. Het filtraat en ! 20 _ _ ! de wassingen werden gecombineerd, en de resulterende oplossing j i werd geanalyseerd. De volgende resultaten werden verkregen : j N-acetylphenylalanine : 91,7 mol% (gebaseerd op N-acetyl-^- ! phenylserine) j ^ N-acetyl- f> -phenylserine : 2,6 mol% (gebaseerd op N-acetyl- phenylserine) ; | P5-Phenylserine : 1,3 mol% (gebaseerd op N-acetyl-ft - ! i phenylserine) ; | Phenylalanine : 1,6 mol% (gebaseerd op N-acetyl-$- ! phenylserine). i 30 N-acetylphenylalanine werd op dezelfde wijze als in voorbeeld VIII uit de reaktieoplossing gewonnen.

Als resultaat werd N-acetylphenylalanine verkregen in een opbrengst van 4,43 g en met een smeltpunt van 150-151°C.

35 8520047 ............................- 16 -

Voorbeeld XI. i . . i

Een katalytische reductie werd op dezelfde ; wijze als in voorbeeld VIII uitgevoerd , behalve dat 1,43 g ! trifluorazijnzuur in plaats van'.'het p-tolueensulfonzuur gebruikt | ! 5 werd. Absorptie van waterstof die opliep tot ongeveer 95% van j ; de stoechiometrische hoeveelheid werd waargenomen bij 50-52°C j | in 8 uur. Na de reaktie werd het vat doorspuid met stikstof j en werd de katalysator afgefiltreerd en met een kleine hoeveel- . . . i heid dioxan gewassen. Het filtraat en de wassing werden gecombi- j 10 neerd en de resulterende oplossing werd geanalyseerd. De volgende | i resultaten werden verkregen. j N-acetylphenylalanine : 90,8 mol% (gebaseerd op N-acetyl-l $-phenylserine) j N-acetyl- 'jb-phenylserine : 4,3 mol% (gebaseerd op N-acetyl- | 15 £ -phenylserine) ! $ -Phenylserine : 2,1 mol% (gebaseerd op N-acetyl- \ β -phenylserine) j

Phenylalanine : 1,9 mol% (gebaseerd op N-acetyl- | β -phenylserine) j ! 20 !

I Voorbeeld XII. I

j De katalytische reductie van voorbeeld VIII j | werd bij een waterstofdruk van 5 kg/cm^ , bij 50°C en gedurende ! 8 uur uitgevoerd onder toepassing van een glazen autoclaaf. : j ; I De volgende resultaten werden verkregen. j 25 | N-acetylphenylalanine : 94,9 mol% (gebaseerd op N-acetyl-' j β-phenylserine) | N-acetyl-jb-phenylserine : 0,3 mol% (gebaseerd op N-acetyl- β-phenylserine)

Phenylalanine : 0,7 mol% (gebaseerd op N-acetyl- ^-phenylserine) 1b -Phenylserine : 1,3 mol% (gebaseerd op N-acetyl- 1^-phenyl s erine)

Voorbeeld XIII.

35 8520047 i 1 I In een hermetisch afgesloten glazen vat van I 200 ml werden 7,88 g N-acetyl- fa-(m-fenoxyphenyl)-serine, 80 g dioxan, 0,3 g 5% palladium/koolstof (50% waterbevattend produkt) | en 1,2 g p-tolueen-sulfonzuur-monohydraat gebracht. Een kataly- | 5 tische reductie werd vervolgens bij 50-55°C en normale druk | uitgevoerd, op dezelfde wijze als in voorbeeld VIII. In 10 uur werd absorptie van waterstof welke opliep tot ongeveer 95% van de stoechiometrische hoeveelheid,waargenomen. Na de reaktie j j i werd de katalysator afgefiltreerd en werd de oplossing geanalyseerd I 10 met behulp van vloeistofchromatografie met groot scheidend ! i i j vermogen. Als resultaat werd gevonden dat de opbrengst aan | φ i | N-acetyl-(m-fenoxyphenyl)alanine 92,9 mol% was /gebaseerd op j | N-acetyl-'P'-Cm-fenoxyphenyl) serine J. Door de oplossing op i | dezelfde wijze als in voorbeeld VIII te behandelen werd 6,7 g j 15 N-acetyl-(m-fenoxyphenyl)alanine verkregen.Smeltpunt:145-146°C.

! I Voorbeeld XIV.

i | In een hermetisch afgesloten glazen vat van | 20 100 ml werden 5,60 g N-acetyl- V>-phenyls erine en 50 ml tributyl-: | fosfaat gebracht , waarna verder 0,28 g 5% palladium/koolstof I i ! en 1,2 g p-tolueensulfonzuur-monohydraat toegevoegd werden. | ! Nadat het inwendige van het reaktievat met stikstof en vervolgens | | met waterstof doorspuid was, werd een reductie onder normale j | 25 druk, bij 50-60°C en gedurende 15 uur uitgevoerd. Tijdens deze | periode werd absorptie van waterstof van nagenoeg de stoechio- j | metrische hoeveelheid ( molverhouding: 1) waargenomen. i

Nadat bij dezelfde temperatuur na de reaktie | | met stikstof doorspuid was , werd de katalysator afgefiltreerd 30 en met een kleine hoeveelheid tributylfosfaat gewassen .

! Het filtraat en de wassingen werden gecombineerd. 30 g van een i ! 5% natriumhydroxydeoplossing in water werd aan de resulterende oplossing toegevoegd om deze te extraheren. Nadat men het ; resulterende mengsel had laten staan , werden de waterlaag en 35 de oplosmiddellaag gescheiden. De oplosmiddellaag werd weer geëxtraheerd met 20 ml van een 1% natriumhydroxydeoplossing in wa-: * 8520047 I ; i ter. De waterlagen van de extractie werden gecombineerd. j j De waterige oplossing werd met behulp van ; ί . !

i vloeistofchromatografie met groot scheidend vermogen geanalyseerd. I

Als resultaat werd gevonden dat de opbrengst aan N-acetylphenyl- j 5 alanine 96,2 mol% (gebaseerd op N-acetyl- Φ-phenylserine) bedroeg.; j ί I Aan de andere kant bedroeg het percentage overgebleven uitgangs- j | stof, te weten N-acetyl-j^-phenylserine, 0,8 mol%. De opbrengsten ί aan ^-phenylserine en phenylalanine als nevenprodukten waren j j respectievelijk 0,7 mol% en 1,4 mol% j 10 Na toevoegen van geconcentreerd zoutzuur aan j de waterige oplossing bij 20-25°C om de pH op 1 in te stellen, j werd de waterige oplossing afgekoeld tot 0-5°C en werden de ! i afgezette kristallen door filtratie verzameld. Door de kristallen i met gekoeld water te wassen en vervolgens te drogen, werd j ^ 4,54 g wit N-acetylphenylalanine verkregen. |

Smeltpunt : 150—151°C !

Zuiverheid : 99,8% ' ί Opbrengst : 87,6 mol% (gebaseerd op N-acetyl-/^-phenylserine).

I ! i i I 20 Voorbeelden XV-XXI. j i Reakties werden uitgevoerd met 5,6 g N- ! acetyl-$-phenylserine , waarbij de hoeveelheid tributylfosfaat, ! ί ! j het type en de hoeveelheid van de reducerende katalysator en het j j ! j type en de hoeveelheid van het sterke zuur veranderd werden, j 25 Resultaten worden getoond in tabel 2. De analysegegevens werden verkregen door filtraten , die verkregen waren door de katalysato-" | ren na de reakties af te filtreren, te extraheren met een natrium- ' hydroxydeoplossing in water en vervolgens de afgescheiden water- lagen op dezelfde wijze als in voorbeeld XIV te analyseren.

30 8520047 - 19 - f H >> Ί? “ " »o oo <o -j- r-> <o C-CC -* »V *v ·Λ **\ *V «Λ e 1 *£ csj^ o eg co co ο o V <L> CO CÜ. (Λ • 4 >> c: I <v φ «—» c

% = C

αί -ë ™ ^ ~ ” ^ " Q- <0 «—« *

>N I

*-* CQ 4)

0 I t0 «—I

1 >s I

SS 4J « 0>

a* o e .5 ^ ^ ^ CO Γ*" CO

1 ? _c α» ° <r CO <± in ^ eg z: Ou co o

E

S jj- ® p5 ii Ξ E "s. ·> *\ ^ ^ ω ro c° eg en co co co m «Iz'S.'ra °* 01 00 00 «o en σι

fS

— _— - § i n ^ tn o m vn eg evi co

S υ C C C ~ C. C

β °' “^tnoo ooo π womtototocoirï 1 * t I l l i i

n\ O O O O O tO O

Qj CO LO U~> LO LD LO

Ό

CS C

QJ dj rH t-I i—I i—I i—I i—I

ra ra ca ra ra ra ai <d cd cd ra es es ca <n u ps n a s s ε ε ε ε « 3 MO Q M !-i Ρι μ t-j Jj

r-t T3- ·γ-Ι | *d> O O O O O O

CUCUTJCnS^ZZZZ-ZZ

pp Pi Pd ^ ra-------

H

A JJ 12 10 OOIT)

**-* CM ^3- O p** CM

1—i' ^- ** ^ *" «-c r\ Q) ^ -4 —« eg o <U i o M > 0 ° ^3m 3 CU o cc o σΓ 3 0 Y 3

Si T I 1 s s V

w ?r c^ ro en 3: zr- 03*- *-> <-> o> cj m J3 g Λ _

> . 1—I _ , ~ 00 co 00 CO CO

£ <u O, ~ «1 CM CM ” O U M r-Γ^-Γ *"* Λ Λ ·\ 4J>^ ° ° 0 O O O o cd ei) ω o <f >> Pd o c-l <Q.

Cö o u <S

ra " ^ -o ii “ ü ü c° up lo ld en m / ^y —- m ra ^Cd E O O o O O O o > w *« -J· <r <f 3 3 3

’“- S

1— o c+-j

·. . H H

C< S-4 C· M tx? S<^

PS PS rS rS rS rS

8520047 r_._................................................................................- 20 . -........................................................................................................................................

Voorbeeld XXII. | j ^ ; j In een hermetisch afgesloten glazen vat van ; ! 100 ml werden 7,13 g N-benzoyl- jb -phenylserine en 60 ml tri- | butylfosfaat gebracht , waarna voorts 0,28 g 5% palladium/kool- i P stof en 2,4 g p-tolueensulfonzuur-monohydraat toegevoegd werden. | I Nadat het inwendige van het reaktievat doorspuid was met stikstof i | en vervolgens met waterstof , werd een reductie onder normale j | o j | druk , bij 55-60uC en gedurende 15 uur uitgevoerd. Tijdens deze ; ! periode werd absorptie van waterstof van ongeveer 95% van de j HO . . , ! j stoechiometnsche hoeveelheid waargenomen.

! I

| Na doorspuien met stikstof bij dezelfde tempe- j | j | ratuur na de reaktie, werd de katalysator afgefiltreerd en met | ! een kleine hoeveelheid tributylfosfaat gewassen. Het filtraat en I de wassing werden gecombineerd. 50 g 5% natriumhydroxyde werd 15 I toegevoegd aan de resulterende oplossing om deze te extraheren.

| Men liet het resulterende mengsel staan, waarna de waterlaag en j de oplosmiddellaag gescheiden werden. De oplosmiddellaag werd | opnieuw met 30 ml 1 % natriumhydroxydeoplossing in water geextra- ! heerd. De waterige lagen van de extractie werden gecombineerd j

20 · , ! I en met behulp van vloeistofchromatografie met een groot scheidend I

| vermogen geanalyseerd . De volgende resultaten werden verkregen. j

| N-benzoylphenylalanine : 92,8 mol% (gebaseerd op N-benzoyl- I

| f> -phenylserinec) ; | N-benzoyl-$ -phenylserine : 3,9 mol% (gebaseerd op N-benzoyl- j P £ -phenylserine) I Phenylalanine : 1,7 mol% (gebaseerd op N-benzoyl- ! β -phenylserine) -Phenylserine : 1,4 mol% (gebaseerd op N-benzoyl- -phenylserine).

30 o

Geconcentreerd zoutzuur werd bij 20-25 C toe- | gevoegd aan de waterlaag tot de pH daarvan 1 was. Na afkoelen van de oplossing tot 5°C werden de afgezette kristallen door filtratie verzameld, met gekoeld water gewassen en vervolgens gedroogd onder verkrijging van 6,00 g wit N-benzoylphenylalanine.

35 8520047 - 21 - ί j j Smeltpunt : 186-186,5°C j

Zuiverheid : 99,6 % I

| Opbrengst : 88,8 % ! i : j : i 5 Voorbeeld XXIII. | | Nadat 7,88 g N-acetyl-ft -(m-fenoxyphenyl)serine, i ! 70 ml tributylfosfaat, 0,39 g 5% palladium/koolstof en 2,4 g p- | tolueensulfonzuur-monohydraat in een hermetisch afgesloten glazen vat van 100 ml gebracht waren , werd een katalytische reductie < i u bij normale druk op dezelfde wijze als in voorbeeld XIV uitgevoerd. , I 1 I Absorptie van waterstof in nagenoeg de stoechiometrische j hoeveelheid werd waargenomen bij 50-60°C in 15 uur.

j ; j Een waterlaag , die verkregen was door extra- \ j heren met een waterige oplossing van natriumhydroxyde , werd j ^ op dezelfde wijze als in voorbeeld XIV geanalyseerd. Als resultaat ! I ! i werd gevonden dat de opbrengst aan N-acetyl-m-fenoxyphenylalanine i

! 94,5 % bedroeg. Door de waterlaag met een zuur te behandelen I

| ! I werd 6,7 g N-acetyl-m-fenoxyphenylalanine als witte kristallen ! i o ί verkregen met een smeltpunt van 145-146 C. Opbrengst: 89,6 %. ! 20 |

Voorbeeld XXIV. j j

In een hermetisch afgesloten glazen vat van j 100 ml werden 5,6 g N-acetyl-^-phenylserine, 50 g methanol, j ί 1,23 g 98% geconcentreerd zwavelzuur en 0,56 g 5% palladium/koolstof | ^5 (50% waterbevattend produkt) gebracht. ! ! | | Nadat het inwendige van het reaktievat doorspuid | was met stikstof en vervolgens met waterstof, werd een reductie ! | bij normale druk, bij 50-55°C en gedurende 12 uur uitgevoerd.

Tijdens deze periode werd absorptie van waterstof welke opliep 30 95% van do theoretische waarde , waargenomen. Na afkoelen van het reaktievat tot 30 C en doorspuien met stikstof na de reaktie werd de palladium/koolstofkatalysator afgefiltreerd en met een kleine hoeveelheid methanol gewassen. Het filtraat en de wassing werden, gecombineerd.50 g 5% natriumhydroxydeoplossing in 35 water werd aan de oplossing toegevoegd, en het resulterende mengsel 8520047 - 22 -

1 I

: I

..0 1 ; werd gedurende 2 uur bij 30-35 C geroerd. Daarna werd de methanol j onder verminderde druk afgedestilleerd, en werd de resulterende ! j waterige oplossing met behulp van vloeistofchromatografie met | een groot scheidend vermogen geanalyseerd. Als resultaat werd ; ! j I 5 gevonden dat de opbrengst aan N-acetylphenylalanine 87,1 mol% j | (gebaseerd op N-acetyl-ft -phenylserine) bedroeg, terwijl vastgestelcl

| werd, dat het percentage overgebleven uitgangsstof N-acetyl-·$- I

j phenylserine 4,1 mol% bedroeg. De bijproduktie van phenylalanine en f-phenylserine, die beide door hydrolyse van de acetylgroep 10 verkregen werden , bedroeg respectievelijk 5,6 mol% en 3,2 mol% (beide gebaseerd op N-acetyl-^-phenylserine). ; i

Nadat geconcentreerd zoutzuur aan de waterige j i oplossing bij 30 C toegevoegd was om de pH in te stellen op 1, | werd de waterige oplossing afgekoeld tot 5°C en werden de j 15 afgezette kristallen door filtratie verzameld. Door de kristallen | j te wassen met een kleine hoeveelheid gekoeld water en ze vervol- i

i I

I i I gens te drogen , werd 4,3 g N-acetylphenylalanine als witte j j kristallen verkregen. j j Smeltpunt : 150-151°C j I 20 Zuiverheid : 100 % | | . i | Voorbeelden XXV-XXIX .

! # i

I 0p soortgelijke wijze als in voorbeeld XXIV

: werden katalytische reducties met 5,6 g N-acetyl- ^-phenylserine i ;

! 25 uitgevoerd, waarbij het type alkohol oplosmiddel, het type en de I

hoeveelheid reducerende katalysator , het type zuur en dergelijke j veranderd werden. Daarna werden de reaktiemengsels behandeld : I i ; met een natriumhycjroxydeoplossing in water om de analyse van N-acetylphenylalanine uit te\oeren. Resultaten worden in tabel 3 i 30 getoond.

8520047 " <u

- X

- o o - X) 3 Δ-> 60 0)

d) M

. O dl 01

> -U +J

______ d) r—l 60 * 3 ai co co

O OJ <U

1 4J IS μ - Ü μ X d) * c m cn tc» rv 5) B tJ .

<U«UO) *X Λ Λ ·. Λ JJ 2 η-* C -c c rn' 04 η -Λ- CD TrtSn-iTi

—4 O. -rl 3 O X H

t- I t- > > M 0) <u ® <u aj ai Z ^ ” 3 60 IS co c dl C t—4 * . m 60 ‘i—I d) 3

Q.—IC oi m n -4 co jtiS

I >> «W rv #> A 'HU Λ (Q

ta. c c m ,* in m rr> CO 3 X d) . " " CO X μ 60 J. f « ° JU Φ _ >4 i-4 μ a) d 4-» r*H d) * 1 O d) r-4 60

0 ca <U X) ·Η O

14 to CO 04 t—. 'P 3 El ..

3E ·“♦ ΙΛ €\ *> «s «\ ^,'Γ) tö |J

1 Φ >> C O rO T3 > ' O C ·<Η Md) -η «J a> ς. ^ O) DOTd ° ' -5 " >l'rl 1)4 fj 3 ,3x33 m J, ί Μ·Η «*£ 4 · Ï 5 2 2 MH-ZZ *V " ~ ΰ 3 x υ

d O C C CD 00 -d- lΛ CT> CÖCÜCO

(O < « Λ CO CO CO CO CO C3(L)

=s U'S φ X) 4J

Ά__O'? X μ O

- ιη φ o

k 2 2 £ ïï Ξ MOÖM

o -e O in in in *o Oxl g 3 tüSu “? *7 47 ^ m n n Hl

o 0001A Jj 01 O

M ·* minion g > ÏÏÏii" *d μ Φ μ dl m^PscCT 2 X Χ r-4 0) Md) e

m e 2 2 Φ Φ d) X

222 mo S dj-td ai μ o 3 <u 3(3«·^ μ S s 6 μθ η .μ "22 k “ 2 μ ί-* μ 1,1 i-iin0M-i 66 2 μ o*— S; o o. o. τι to * υ 05 w = Z Z Z 14-( -I 'r-4 μ 1-4 —-----------—. dl O O 60 d) jö 60 n ,c! o '"S- §} 3 ” 3 -r-,,3 3 uï -V ? ^ ~ ’ H ifl =n o i o ri: o O μ CO CsJ CO CNJ CO CV| Ü H (11 ,Γ*'

P O o nr o =c aJdTJU

m j? Jf x « 5 «ii

a % o o lol IsJ SnmS

s 2,l«» °° 31 =:-3: =: ti S Ïï σι cjoocj 00X3(1)

-—---- 3i dl ·Η O

τ3 ; x) e r-4 •d d) 3 μ >

Γ* CM CO CO CO co Tj Φ O

μ 3 M °iv ^ ^ X 3 ^ 3

Sr 0 0 0 ° ° μ X o > •y e*' , d) d) Φ Φ μ fe 60 μ ft ? 5 . <Ü "O d) r-4 μ® 32 c? d)r-l-C3

Ti 2 m ^ ^ w ή o) *ci 2 „ & μ μ S « μ co xj <u 3 S. “ 3 ^ ^ “ , >1 0θμ3 Ό T3 "O 222 "*— o. o )> o *μ o. o_ o_ <D dJ £3 μ i^tndl c- »? μθα) in — Λ o. m tn in w 03 g -----dl d) 3 • Η X X) μ 60 3 3 ti co c rS d) d) CO ·μ en '’hn o o o o o μμου) — 60 u-) m m 10 in d)d)C0

2 . O μ · O

m i 3 r-j 3 1—1 -.2 ft X 3 0) ft o 5 >- d) co μ o jz ι-t -c μ d) cl)

o Μ II) II

Z *3 " 2 d) >! 60 <t Cx4-> ^bij 4J rH ·Η '

·—· *~h ro o φ r—1 r-HOOM

. c ê m^32 g; J ^ 2 33^3 V— 4-» -+-* o 1 ftj 4-> iZd)X3[5 «ü <U Ui <u <u ΚΗμ-4μ> sc ac ·--« ca e ac ^ 11 ^ ï 1 a « 8520047 ί ! I Voorbeeld XXX. j

' Een katalytische reductie werd op precies I

! ί ; dezelfde wijze als m voorbeeld XXIV uitgevoerd, behalve dat j I 7,13 g N-benzoyl- $ -phenylserine in plaats van het N-acetyl-ft- ! i j 5 phenylserine gebruikt werd. Na de reaktie werd de katalysator j ί afgefiltreerd en met een kleine hoeveelheid methanol gewassen, j | Het filtraat en de wassing werden gecombineerd, en 50 g 5% j I natriumhydroxyde werd aan de resulterende oplossing toegevoegd, gevolgd door een reaktie bij 30-35°C gedurende 1 uur. Daarna werd 10 de methanol onder verminderde druk afgedestilleerd en werd de zo verkregen waterige oplossing met behulp van vloeistofchromato- grafie met een groot scheidend vermogen geanalyseerd. De volgende j

resultaten werden verkregen. I

N-benzoylphenylalanine : 85,9 mol% (gebaseerd op N-benzoyl-j 15 fc-phenyl serine) ! N-benzoyl--phenylserine : 5,6 mol% (gebaseerd op N-benzoyl- j l^-phenyls erine) j

Phenylalanine : 4,1 mol% (gebaseerd op N-benzoyl- ; β-phenylserine) j | 20 β-Phenylserine : 4,0 mol% (gebaseerd op N-benzoyl- \ | ^-phenylserine) ! Geconcentreerd zoutzuur werd bij 30°C toe- ; | gevoegd aan de waterige oplossing om de pH te verlagen tot 1.

! Na afkoelen van de oplossing tot 5°C werden de afgezette kristallen*

ί 25 . . I

j door filtratie verzameld, met een kleine hoeveelheid gekoeld : water gewassen en vervolgens gedroogd onder verkrijging van 5,15 g ί N-benzoylphenylalanine als witte kristallen.

Smeltpunt : 186-187°C

Zuiverheid : 99,8 % 30

Opbrengst : 81,8 %

Voorbeeld XXXI.

Een reaktie werd op dezelfde wijze als .in voorbeeld XXIV uitgevoerd, behalve dat 7,88 g N-acetyl- B-(m-fenoxy- 35 8520047 ! η · I phenyl)serine in plaats van het N-acetyl- P-phenylserine gebruikt

I werd. I

I Absorptie van waterstof die opliep tot ongeveer ; I 95% van de stoechiometrische hoeveelheid , werd waargenomen bij I 5 50-55°C in 12 uur. j ! Na de reductie werd het reaktiemengsel eveneens ;

| , I

| behandeld met een waterige natriumhydroxydeoplossing op dezelfde j I , i | wijze als in voorbeeld XXIV . Een waterige oplossing die verkregen ! j was door het oplosmiddel af te destilleren werd geanalyseerd met i

i I

I 10 behulp van vloeistofchromatografie met een groot scheidend vermogen, i

| · I

! Als resultaat werd gevonden dat de opbrengst aan N-acetyl-m-fenoxy- I

i phenylalanine 87,6 % bedroeg. Door de resulterende waterige oplos- j sing met zoutzuur te behandelen werd 6,3 g N-acetyl-m-fenoxyphenyl- j alanine als witte kristallen verkregen met een smeltpunt van 145- | i 15 146°C. Opbrengst : 84,2 %. j

i 1 I

| ’ I

i ! j : ! ; ! | i ( ! i : i ; i ; 8520047

Claims (13)

1·. Werkwijze voor het bereiden van N-acylphenyl-: i alanine dat voorgesteld wordt door de formule 2, waarin R^ en/of ! R^ een waterstofatoom of een alkyl-, alkoxy-, fenoxy-, hydroxy- j | of methyleendioxygroep voorstellen , en R een methyl- of phenyl- |5 groep voorstelt, bij welke werkwijze men een N-acyl-(5-phenylserine j | dat voorgesteld wordt door de formule 1 , waarin R1 en/of R~ een waterstofatoom of een alkyl-, alkoxy-, fenoxy-, benzyloxy- of methyleendioxygroep voorstellen, en R dezelfde betekenis heeft ! als in de formule 2 , katalytisch reduceert in aanwezigheid van j 10 een reducerende katalysator in een oplosmiddel. j

2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het j kenmerk, dat de katalytische reductie uitgevoerd wordt in aanwezig-! heid van een zuur. j

3. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met het ! j 15 kenmerk, dat het oplosmiddel gekozen wordt uit water, organische j i ! oplosmiddelen en gemengde oplosmiddelen van water en organische j oplosmiddelen. '

4. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met j het kenmerk, dat de reducerende katalysator palladium, platina · ί 20 of rhodium is.

5. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de reducerende katalysator palladium is.

6. Werkwijze volgens conclusie 2, met het ken- ! merk, dat het zuur een anorganisch zuur is. '25

7. Werkwijze volgens conclusie 2, met het ken merk, dat het zuur een alifatisch sulfonzuur is.

8. Werkwijze volgens conclusie 2, met het kenmerk, dat het zuur een aromatisch sulfonzuur is.

9. Werkwijze volgens conclusie 2, met het ken- I 30 merk, dat het zuur trifluorazijnzuur is.

10. Werkwijze volgens conclusie 2, met het ken-' merk, dat het oplosmiddel een triester van fosforzuur is. , 8520047 * ¥

11. Werkwijze volgens conclusie 3, met het ken- ; ; merk, dat het oplosmiddel een lagere, alkohol is.

12. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met het ; | kenmerk, dat de reaktietemperatuur 10-120°C bedraagt. ; | < ] | 5

13. Werkwijze volgens conclusie 11, met het j kenmerk, dat na de katalytische reductie het reaktiemengsel met i een waterige alkalische oplossing behandeld wordt. ! i | 10 • i i i i i s ; 8520047