NL8103350A - Nieuwe cefalosporineverbindingen met antibiotische activiteit. - Google Patents

Description

* * VO 2121 lïieuwe cefalosporineverbindingen met antibiotische activiteit.

* ··. .

De^ uitvinding betreft nieuwe 1,3-thiazolidin-H-yl-carbon-zuur derivaten met de formule 1 van het formuleblad, waarin R waterstof,

Cs-Ct.-alkyl, aralkyl, fenyl, door halogeen of methoxy gesubstitueerd fenyl, forayl, acyl, trimethylsilyl, R' waterstof, een farmaceutisch 5 geschikt anorganisch of organisch kat ion, C.-C^-alkyl, 2,2,2-trichloor-ethyl, acetonyl, b§nzyl, door nitro of methoxy gesubstitueerd benzyl, fènyl, nitrofènyl, benzhydryl of trimethylsilyl; Rf ook een groep, die in vivo een metabole activering oplevert, gekozen uit acetoxymethyl, pivalcyloxymethyl, ftalidyl, benzoylosymethyl, 5-indanyl, een groep 10 met de formule -CH-O-C-OCgiï^ of een groep met de formule -GHgHH-C-R" CH3 () 0 waarin R" C^-C^-alkyl, C^-Cg-cycloaliyl of aryl; A waterstof, halogeen,

R^, OS, HH^ of een kwaternair stikfstof atoom, liefst -O

(en in dit geval is R* een negatieve lading); of een O-CQ-RH*, groep; 15 dan wel een groep met de formule OR"’, O-COR"’, HH-CO-R"* of SR"', waarbij R"' C^-C^-alkyl, aryl, gesubstitueerde aryl of een heterocyclische groep, die alkylgroepen kan dragen; en n nul of 1 voorstellen.

Karakteristieke betekenissen voor de groep R zijn naast de bovengenoemde: methyl, ethyl, isopropyl, benzyl, trityl, acetyl, 20 propionyl, tri fluor acetyl, benzoyl, door 1-3 hydroxygr oepen, methyl-groepen, me thoxygroepen, halogeengroepen, aminogroepen of nitrogroepen gesubstitueerd benzoyl, benzyloxycarbonyl, t.butoxycarbonyl of een groep, afgeleid van een natuurlijk aminozuur.

Karakteristieke maar niet beperkende voorbeelden voor de 25 anorganische of organische kat ionen voor de groep R' zijn natrium, kalium, calcium en magnesiumkationen; kationen afgeleid van organische basen als dibenzylamine, N ,H-dibenzylethyleendiamine, glupamine, R-methylglucamine, hexamethyleentet ramine, 2-ami no-2-hydroxyinethyl-1,3-propaandiol, arginine, lysine, proline, carnitine; dan wel alüminium, 30 zink of zilverkationen.

Karakteristieke betekenissen voor R"’ naast de reeds genoemde zijn methyl, ethyl, propyl, butyl, isobufcyl, fenyl .of"benzyl, imidazol- 2-yl, 1,2,3-triazol-5-yl, 1 -methyl-1,2,3",k-tetrazol-5-yl, thiazol-2-yl, 1,3,^-thiadiazol-2-yl, 5-®ethyl-1,3,ij—thiadiazol-2-yl, 1,2,3,^-35 thiatriazol-5-yl, oxazol-5-yl, 3-methylisoxazol-5-yl, 1,2,^-oxadiazol-5yl en pyrazinyl.

8103350 * * -2-

Vanwege de aanwezigheid van een asymmetrisch, koolstof at oom op de U-plaats van de thiazolidinering, kan de' verbinding met de formule 1 deD- of L-configuratie hebben, dan wel de configuratie van een racemische verbinding. De uitvinding betreft al deze mogelijkheden, 5 hoewel de L-configuratie de voorkeur verdient.

Een verder onderwerp van uitvinding wordt gevormd door de zouten van -de verbindingen met de formule 1, waarin het stikstofatoom van de thiazolidinering een basisch·karakter heeft, met farmaceutisch geschikte zuren, bijv. citroenzuur, ascorbinezuur, maleïnezuur, 10 azijnzuur, waterstof chloride, salpeterzuur, waterstofbromide en zwavelzuur.

Voorts betreft de uitvinding farmaceutische preparaten voor menselijk of veterinair gebruik, dan wel pesticide preparaten voor landbouwtoepassingen met daarin als actief bestanddeel een of meer 15 van de verbindingen met de formule 1 of een farmaceutisch geschikt zuuradditiezout daarvan.

Verrassenderwijs werd gevonden, dat de verbindingen met de formule 1 bijzonder resistent zijn tegen penicillinasen bij de proef volgens Grove et al, Assay Methods of antibiotics, A Laboratory Manual, 20 Med.Encyclop.Inc.,(1955), 7 of volgens Lorian Antibiotics and chemotherapeutic agents in clinical and laboratory practice, C.C.Thomas Publ., 1966, 2h2. Ze zijn bovendien actief gebleken tegen een groot aantal pathogenen, bijv. grampositieve en gramnegatieve, aerobe::, en anaerobe bacteriën, met inbegrip van beta-lactamase producerende 25 stammen.

Meer in het bijzonder zijn de onderhavige verbindingen actief tegen grampositieve bacteriën, zoals Staphylococcus aureus, Diplococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus faecalis, Bacillus subtilis en Sarcina lutea, alsmede gramnegatieve bacteriën 30 als Escherichia coli, Proteus mirabilis, Shigella sonnei, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae en Salmonella typhimurium.

De onderhavige verbindingen ontplooien tevens een opmerkelijke activiteit tegen diverse pathogenen, die verantwoordelijk 35 zijn voor infecties bij planten, zoals Pseudomonas syringae, die bacteriosis bij citrusvruchten en seringen veroorzaakt, Pseudomonas phaseolicola (plantenziekte bij bonen); Pseudomonas aliicola (een para- 81 0 3 3 5 0 .

-3- * · siet voor uien); Pseudomonas savastandi (die ziekte bij olijven veroorzaakt); Pseudomonas marginata (die gladiolen aantast); Xantomonas phaseoli (meeldauw bij bonen); Pectob.carotovorum (een aardappelziekte en een infectie bij iris rhizomen); Erwinia amilovora (necrosis bij 5 vruchtbomen); Erwinia carotovora (infecties bij wortelen); Corynebac-terium flaccum-faciens (bacterie-infectie bij bonen); Penicillum sp.

(scbimmelinf eeties bij bollen).

Als een representatief maar niet beperkend voorbeeld kan worden gezegd, dat 7-( N-pivaloyl-1,3-thiazolidin-l;-yl)-carboxamido-10 cefalosporanzuur (de verbinding met formule 1, waarin R^CH^)^-00, R’ is H, A is O-CQ-CHg en n is nul) een antibacteriële activiteit tegen grampositieve bacteriën bezit, die overeenkomt en soms beter is dan die van cefaloridine en cefalexin. Een verdere verbinding met de formule 1 te weten 7-(ïH?ivaloyl-1,3-thiazolidin -U-yl)-carboxamido-)-3-15 JT.{ 5-methyl-1,3, U-thiadiazol-2-yl-thio )methyl_7-3-cefem-k-carbonzuur (R^CH^C-CO, R' = H, A = 2_ -CH a = aal) is tenminste zo actief als cefalexine tegen grampositieve bacteriën, maar levert geen f resistentie op, terwijl cefalexine bij S. Aureus stammen in een dosis 20 van 25 mg/1 een duidelijke resistentie opwekt.

De onderhavige verbindingen volgens de uitvinding kunnen aan warmbloedige dieren met inbegrip van de mens langs orale, parente-rale of topische weg worden toegediend voor het bestrijden van septicaemieën, meningitis, endocarditis; infecties van de luchtwegen, 25 het maagdarmkanaal en de genitale sn urinewegen alsmede de huis; voorts infecties van oren, neus en keel, alsmede botten, de buik en endo-pleurale infecties. Zij kunnen tevens worden toegepast voor het asep-tisch maken van de huid alvorens injecties te geven of chirurgische ingrepen te verrichten; voorts kunnen ze chirurgische apparaten des-30 infecteren.

De farmaceutische doseringsvormen, geschikt voor orale toediening kunnen bijv. tabletten, capsules, pillen, met suiker beklede tabletten, stropen, suspensies, druppels, elixirs en granules zijn. Farmaceutische toedieningsvormen voor topicaal gebruik zijn bijv.

35 zalven, crèmes, embrocaties, collyriën en lotions.

Al deze farmaceutische preparaten zijn bekend en bevatten naast het actieve bestanddeel een glijmiddel, verdunningsmiddel, ex- 8103350 cipiens en zoet middelen, alsmede gebruikelijke farmaceutische toeslag- stoffen.

Als fytofarmaceutica kunnen de onderhavige verbindingen worden toegepast in diverse toepassingsvormen, zoals waterige oplos-5 singen met of zonder gebruikelijke toeslagstoffen, bijv. talk of klei, poeders, maar ook verstuivingspreparaten, versproeiingen, zowel vast als vloeibaar, suppositoria, met inbegrip van langzaam afgevende preparaten, granules en langzaam afgevende granules, .geabsor beerd op inerte materialen of ionenuitwisselende harsen, capsules en 10 microcapsule-preparaten. Al deze toedienings- en toepassingsvormen zijn de deskundigen wel bekend. De onderhavige verbindingen kunnen dus goed worden gebruikt voor het conserveren van voedingsmiddelen, zoals citrus fruit of aardappelen, waarbij1 ze in tegenstelling tot gebruikelijke effectieve verbindingen als bis-fenyl een bijzonder geringe giftigheid 15 bezitten.

De onderhavige verbindingen kunnen volgens verschillende methoden worden bereid. Bijv. wordt de aminogroep van een verbinding met de formule 2_van het formuleblad, waarin R', A en n de bovenweergege- _ ven betekenis bezitten, met een passend R-acyleermiddel, afgeleid van een 20' zuur met de formule 3 geacyleerd, waarbij R de boven weergegeven betekenis bezit. Indien beschermgroepen aanwezig zijn, moeten deze onder'milde voorwaarden worden verwijderd. Een karakteristiek voorbeeld van een be-schermgroep is de benzyloxycarbonylgroep. Dergelijke acyleringsreakties zijn bij peniciïlinen en cefalosporinen uiteraard wel bekend (zie 25 Flynn, Cephalosporins and penicyllins, Academie Press, 1972). Ook de uitgangsstoffen met de formules 2 en 3 zijn deskundigen bekend. De keuze van het acyleermiddel hangt uiteraard af van de chemische aard van de substituent E en R', zoals deskundigen wel bekend is.

De U-acyleringsmiddelen, afgeleid van de verbinding met de 30 formule ;3, zijn bijv. de halogeniden of verbindingen, verkregen door een reaktie van 3 met carbodiimide of azide; bij voorkeur wordt evenwel een anhydride gebruikt en liefst een gemengd anhydride dat in situ wordt verkregen met ethyl- of isobutylchloorcarbonaat dan wel pivaloyl-chloride.

35 De keuze van het reaktieoplosmiddel en de re akt ie voorwaar den, die afhangen van het betreffende N-acyleermiddel is een gebruikelijke taak voor de deskundige. Bijv. zal indien het acyleermiddel een gemengd 81 0 3 3 5 0 —_ - .

‘ -5- ahhydride is de reactie worden uit gevoerd in een organisch oplosmiddel als ethylaeetaat, dimethylformami de, diethylether, tetrahydrofuran, dioxan, methyleenchloride of een analoog inert oplosmiddel; de temperatuur kan zijn gelegen tussen -^0°C en ca. kamertemperatuur; liefst 5 wordt omgezet tussen -20 en -30°C.

Een verdere gunstige methode voor het "bereiden van de onderhavige verbindingen omvat een reaktie van de verbindingen met de formules 2 en 3 net siliciumtetrachloride volgens de Italiaanse octrooiaanvrage N.29^5 A/7T. De onderhavige verbindingen kunnen volgens ge- .

10 bruikelijke technieken voor penicilline en eefalosporine worden geïsoleerd, bijv. door kristalliseren, lyofiliseren, of sproeidrogen.

Een passende isolatiemethode omvat de absorptie op chemisch inert of geactiveerd materiaal, bijv. een ionenuitwisselende hars, deze methode kan bijzonder toepasbaar zijn wanneer het verkregen derivaat 15 moet worden gebruikt als dierlijk voeder of als iytopharmaceuticum.

De volgende voorbeelden lichten de uitvinding nader toe, maar moeten niet als beperkend worden opgevat.

Het 7-amino-cefalosporanzuur wordt hieronder aangeduid als / 7-ACA en het 7-amino-desacetoxycefalosporanzuur met 7-ADCA.

20 Voorbeeld I

7—(1,3-thiazolidin -^-ylj-carboxamido-desacetoxycefalosporanzuur-natriumzout._____

O

25,0 g 7-ADCA, gesuspendeerd in 185 cm methyleenchloride van -Uo°C werden onder goed roeren begiftigd met 13,0 g n-propylamine, 2^ waarbij ervoor werd gezorgd, dat de temperatuur op ca.-25°C werd gehouden. Na 30 minuten bij deze temperatuur werd langzaam 26,0 g trimethylchloorsilaan aan dit mengsel toegevoegd, waarbij tegen het eind van de reaktie de temperatuur was opgelopen tot -5 - 0°C. Na 30 minuten roeren en koelen op -10°C werden 18,5 g N,N-dimethylaniline ~q en 87,5 g van het hydrochloride van 7,3-thiazolidin -4-yl-carbonzuur-chloride snel toegevoegd, waarbij de temperatuur op kamertemperatuur opliep. Het verkregen mengsel werd 2 uren bij kamertemperatuur geroerd, begiftigd met 500 cm3 -water, 30 minuten geroerd ter volledige verwijdering van de trimethylsilylgroep en met een 10$*s waterige natronloog 35 voorzichtig op pH 7-7,5 gebracht.

De organische fase werd weggeworpen, de bovenlaag werd ge-extraheer! met 100 cmr'methyl-isobutylketon en 100 cm diethylether, met ontkleurende kool (tevoren gewassen met zoutzuur en water) behandeld 8103350 __ V ’v f ~ “ • -6- en onder vacuum gefiltreerd door Dicalite H38. De verkregen oplossing werd gelyofiliseerd tot een poeder. I.R. en N.M.-R. analyses bevestigden de structuur. T.L.C. (dunne laag chromatografie) toonde aan, dat de verbinding nagenoeg zuiver was.

5 Voorbeeld II

7-( 1.,3-thiazolidin —t-yl)-carb oxamidó-cefalospöranzuur-natriumzóüt .

29,5 g 1,3-thiazolidin —U-yl-carbonzuur werd gesuspendeerd in 200 cur aceton en onder roeren hieraan 2b,2 g triethylaraine toegevoegd. Het mengsel werd op -20°C gekoeld en bij deze temperatuur *3 10 begiftigd met een oplossing van 2b,0 g pivaloylchloride in 1*0 cur aceton. Na 30 minuten handhaven van deze temperatuur werd een tevoren bereide oplossing van 5^*^ g 7-ACA en 2b,2 g triethylaraine in 1*00 cm^ chloroform, gekoeld op -10°C, aan deze oplossing toegevoegd en het geheel 30 minuten bij -10°C, 1 uur bij 0°C en 3 uren zonder uitwendig 15 koelen weggezet. Het oplosmiddel werd hierna in vacuo af gedestilleerd bij een temperatuur beneden 1*0°C en het verkregen residu opgenomen in 200 cm water met daarin 10$ natriumwaterstofcarbonaat. Het verkregen mengsel werd goed geroerd en met waterig 15$'s zoutzuur op pH 1-1,5 gebracht, eerst geextraheerd met 100 cm diethylether, die werd wegge- . 3 .

20 gooid en daarna met 300 cnr ethylacetaat. Dit ethylacetaatextract werd 3 .

tweemaal met 100 cm water gewassen, met natnumsulfaat gedroogd en het oplosmiddel in vacuo afgedestilleerd bij een temperatuur van ten hoogste b0°C. Een residu werd verkregen, dat met 200 cm^ water werd behandeld, voorzichtig neutraal werd gemaakt met 10$ natronloog, de 25 onoplosbare materialen uit deze waterige oplossing afgefiltreerd en het heldere filtraat gelyofiliseerd, waarbij de gewenste verbinding werd verkregen.

I.R. en N.M.R. analysen bevestigden de structuur. TLC-analyse over silicagel F 25U platen (Merck), onder elueren met n-30 butanol/azijnzuur/water (3:1:1) en zichtbaar maken met UV-licht Q\ = 25b nm) en jodiumdampen toonden aan, dat de verbinding nagenoeg zuiver was.

Voorbeeld III

7-( 1,3-thiazolidin — l+-yl)-carbaxamido-cefalosporanzuur-hexamethyleen-__ tetranu'nezout_' .......' ' ' '_ 1000 g van de verbinding volgens voorbeeld I werd voor de ______ behandeling met water en natronloog gesuspendeerd in 5 1 water en de 8103350 -7- verkregen suspensie onder roeren begiftigd met een ongeveer equimolaire hoeveelheid hexamethyleent et r amine, waarbij de pH op 7-7 »5 kwam.

De verkregen oplossing werd gefiltreerd en het verkregen filtraat ge-sproeidroogd tot een wit in water oplosbaar poeder, dat geschikt was 5 voor veterinair gebruik ofwel als zodanig, dan wel gemengd met een voeder of drinkwater en wel voor een proiylaxe of een behandeling van infecties door pathogenen, die gevoelig zijn voor dit antibioticum.

Het verkregen poeder kan ook worden gebruikt in preparaten voor fytofarmaceutische doeleinden, op zichzelf of met gebruikelijke 10 toeslagstoffen. Het volgende preparaat bleek bijzonder effectief: verbinding volgens voorbeeld III: 1 deel, 2eep: 1 deel; petroleum: 1 deel; water: 100 delen. Dit preparaat kan worden verneveld.

Voorbeeld IV

7-( 1,3-thi az olidin —U-yl)-carboxamido)-jT3-(5-methyl-1,3, U-thiadiazol— 2-yl-thio)methyl Z-S-cefem-^-carbonzuur _

Een suspensie van 0,1 mol van de verbinding volgens voorbeeld II in 1000 cm^ van een 0,1 M fosfaatbuffer met pH 6,k werd in kleine porties onder roeren begiftigd met 0,11 mol 2-methyl-5-mercapto- 1,3,^-thiadiazool en 0,15 mol NaiïCO^* waarbij ervoor werd gezorgd, dat 1 gasontwikkeling niet te sterk was. Het verkregen mengsel werd op 50-60°C gebracht en 6 uren qp deze temperatuur gehouden, in ieder geval tot de geacyleerde verbinding was verdwenen; vervolgens werd afgekoeld en tweemaal gewassen met 200 cm methyl-isobutylketon. Nadat de pH voorzichtig op 2,5-3,5 was gebracht werd na enige uren een neerslag ver-__ kregen, dat werd afgefiltreerd, met water gewassen en beneden Uo°C werd gedroogd. I.H. en N.M.B. analysen zijn in overeenstemming met de verwachte structuur. TLC analyse over silicagel Er.25^ platen met n-butanol/azijnzuur/water = 3:1:1 en zichtbaar maken met UV-licht ()\- 25b nm) en jodiumazide toonde aan, dat de verbinding nagenoeg zuiver was.

Voorbeeld V

7-( 1,3-thiazolidin —4-yl) carboxamido)-3-(5-met hy 1-1,3,^-thiadiazol—^-yl-thio )methyl)-3-cefem-k-carbonzuur N-methylglucaminezout_ 1 Mol van de verbinding volgens voorbeeld IV werd gesuspen-• "5 deerd in 1000 car water en onder goed roeren en continue controle van 35 de pH begiftigd met 1 mol N-methylglucamine in zodanige porties, dat de pH nooit opliep boven 7-755· Na het bereiken van deze pH-waarde werd 8103350 .-5*——---------- -8- de verkregen oplossing over een steriliserend en depyrogenerend filter gefiltreerd, het filtraat gelyof iliseerd volgens gebruikelijke technieken en wel tot de titelverbinding in de vorm een steriel en pyrogeen vrij poeder, dat bruikbaar is voor intramusculaire injecties in een 5 veterinaire praktijk.

Voorbeeld VI

3-(pyridiniomethyl)-7-( 1,3-thiazolidin —H-yl) -carboxamido-3-cefem-^-carbokylaat ................... · · -

Een oplossing van 180 g van de verbinding volgens voorbeeld II in 500 cm water werd onder goed roeren begiftigd met 100 cnr pyridine en vervolgens met 100 g kaliumthiocyanaat in kleine porties.

Het verkregen mengsel werd met 85$ fosforzuur op pH 6,5 gebracht en onder roeren 6 uren op 60°C verwarmd. Na koelen op kamertemperatuur werd het reaktiemengsel behandeld met Amberlite LA-1 (als acetaat) . ^ . en gesuspendeerd in 25$ methylisobutylketon. Drie behandelingehtmétll 1 telkens werden uitgevoerd. De aldus behandelde waterige oplossing werd • 3 opnieuw geexfcraheerd en wel driemaal met 200 cm methylisobutylketon en uiteindelijk gelyofiliseerd, waarbij een nagenoeg wit poeder werd verkregen. I.E. en N.M.R. analysen bevestigden de structuur. TLC ana- 2Q lyse over silicagel F-25^,platen met ethylacetaat/azijnzuur 6:2, verzadigd met waterden zichtbaar maken met UV licht en jodiumdampen toonden aan, dat de verbinding nagenoeg zuiver was.

Voorbeeld VII

7-/~(N-pivaloyl)-1,3-thiazolidin —^t—yl 7-carbóxamidó-céf aJLósporanzuür „ 10,0 g N-pivaloyl-thiazolidinecarbonzuur werd gesuspendeerd · 3 in 10 cm aceton, waarna ^,65 g triethylamine werd toegevoegd. Na koelen op-15°C werd de suspensie begiftigd met 5 »5 g pi val oyl chloride in 25 cm aceton, waarbij ervoor werd gezorgd, dat de temperatuur niet boven -10°C kwam. Na afloop van de toevoeging werden 2 druppels ^-methylmorfoline toegevoegd, het mengsel 20 minuten bij -15°C bewaard en een tevoren bereide oplossing van 12,5 g 7-ACA in 10 cm^ water toe- 3 gevoegd, alsmede 20 cm aceton en 5»0 g TEA. Het verkregen mengsel liet men U uren reageren, verwijderde het koelbad na 2 uren, waarbij de temperatuur op 20°C kwam, vervolgens werd 2,0 g Dicalite toegevoegd en het geheel onder vacuum gefiltreerd. Men verkreeg een residu, dat met 20 cm aceton en 5 cnr water werd gewassen; de verkregen oplossing werd — gefiltreerd en het filtraat in vacuo drooggedarapt bij een temperatuur 81 0 3 3 5 0

Jr* -9- beneden Uo0C. De verkregen roodachtige olie werd in 100 cm^ water ge- 3 cfepergeerd, de waterige dispersie tweemaal geextraheerd met 50 cm diethylether, de etherextracten weggeworpen en de waterfase met 10$Ts zoutzuur op pH 1 gebracht. De verkregen emulsie werd tweemaal geextra-5 heerd met 100 resp. 50 cm ethylacetaat, de organische fasen, verenigd, 3 met 50 cm van een verzadigde natriumchlorideoplossing gewassen, met natriumsulfaat gedroogd en uiteindelijk drooggedampt bij een tenders-tuur van ten hoogste te°C. Een kristallijn materiaal werd aldus ver-kregen, dit werd af gefiltreerd, met 10 cm diethylether gewassen en 10 aan de lucht gedroogd. Opbrengst 10 g tit elverbinding met smeltpunt lte-50°C. De TLC analyse leverde een enkelvoudige vlek met Ef waarde 0,53 (silicagelplaat F 25b, elueersysteem ethylacetaat/aceton/ijsazijn/ water 5:2:1:1, zichtbaar maken met jodiumdamp) ♦ De structuur van de verbinding werd bevestigd met een N.M.R. analyse in CDCl^ onder toepas-15 sing van TMS (trimethylchloorsilaan) als inwendige standaard. δ - 1,3 (s, 9H, tert.-butyl) S = 2,2 (s, 3H, CH3-C0) S = 3,2-3,7 (m, te, S-CT2) ( J = 3,55 (s, 1H, CH-C0) 20 5 = ^,3-5,3 (m, 5H, CK''® + CH^N + CH2-0) ^ = 5,8 (m, 1H, CH-M) b= 7,8 (d, 1H, ÏÏH) s = singlet; d = doublet; m = multiplet.

25 Voorbeeld VIII

3-((5-methyl-1,3,k-thiadiazol. —2-yl-thio)methyl)-7-(H-pivaloyl-1,3-thiazolidin —U-yl)-carboxamido-3-cefem-^-carbonzuur_ 10,0 g N-pivaloyl-1,3-thiazolidin —U-yl-carbcnzuur werd

O

gesuspendeerd in 50 cnr aceton tezamen met k,65 g triethylamine, waama de verkregen suspensie op -15°C werd gekoeld en vervolgpis druppels- 30 · · 3 gewijs begiftigd met een oplossing van 5,5 g pivaloylchlonde m 25 cm aceton, alsmede 2 druppels U-methylmorfoline. Ha 20 minuten staan bij -15°C werd een tevoren bereide oplossing van 15,5 g 7-amino-3-/~(5- methyl-1,3,^-thiadiazol —2-yl-thio)-methyl/-Δ^-cefem-^-carbonzuur in 10 cm^ water en 20 em^ aceton snel toegevoegd, waarbij de temperatuur 35 J tot 0°C opliep en de pH met triethylamine op 8,5 gebracht. Het verkregen mengsel werd 2 uren bij 2°C bewaard en nog 2 uren waarbij de temperatuur op 20°C opliep. Het gevormde onoplosbare materiaal werd afge- 8103350 3 ψ *£- -10- filtreerd, op het filter gewassen met 10 cm aceton en de verenigde : . 3 acetonoplossmgen met 100 cm water verdund en tweemaal geëxtraheerd

O

met 100 cm*3 van een m engsel van ethylacetaat/diethylether. De water-

O

fase werd op pH 3 gebracht met 10$ zoutzuur en driemaal met 50 cnr

O

5 ethylacetaat geëxtraheerd; de ethylacetaatfase werd gewassen met 50 cnr van een verzadigde waterige oplossing van natriumchloride, met natrium-sulfaat gedroogd en in vacuo drooggedampt bij een temperatuur van ten hoogste 1*0°C. Het verkregen residu werd opgenomen in 50 cm^ diethylether, waarbij een kristallijn materiaal werd verkregen, dat 3 10 werd afgefiltreerd, met 20 cm diethylether werd gewassen en aan de lucht werd gedroogd. Opbrengst 6,5 g van de titelverbinding met smeltpunt 158-60°C.

TLC analyse leverde een enkelvoudige vlek met Rf waarde 0,^9 (silicagel F 25^· platen, elueersysteem ethylacetaat racet on: 15 ijsazijn:water is 5:2:1:1; zichtbaar gemaakt met jodiumdamp).

De structuur van de verbinding werd bevestigd met een ÏÏ.M.R.analyse in CDClg onder toepassing van TMS als inwendige standaard.

S = 1,3 (s, pH, tert.-butyl) § = 2,1 (s, 3H, CH3) 20 éi — 2,75 (s, 2H, CHg-S-heteroring) £ = 3,0-3,8 (m, 5H, CH-CONH)

H N

S = ^,3-5,2 (m, 3H, CH + CH )

S S

. 25 /ƒ = 5,8 (m, 1H, CH-HH) ë = 7,3 (s, 1H, C00H) £ = 7,9 (d, 1H, M) s = singulet; d = doublet; m = multiplet.

8103350 ”

Claims (10)

1. Verbindingen met antibiotische activiteit met de formule 1 van het formuleblad, waarin R waterstof, C^-C^ alkyl, aralkyl, fenyl, met halogeen of methoxy gesubstitueerd fenyl, formyl, acyl of tri-methylsilyl; R' waterstof, een farmaceutisch geschikt anorganisch 5 of organisch kation, (C-j-C^) alkyl, 2,2,2-trichloorethyl, acetonyl, benzyl, met:;nitro of methoxy gesubstitueerd benzyl, fenyl, nitrofenyl, benzhydryl of trimethylsilyl, R’ ook een groep die in vivo metabool kan worden geactiveerd in de vorm van acetoxymethyl, pivloyloxymethyl, ftalidyl, benzoyloxymethyl, 5-indanyl, een groep met de formule 10 -CH-O-CO-OCgHtj of met de formule -CH^BH-CO-R", waarin R” C^-C^ alkyl, K C^-Cg cycloalkyl of aryl en R' ook een negatieve lading; A waterstof, halogeen, azido, hydroxy, amino, pyridinio, een groep met de formule O-CO-NH^, een groep 0R"*, een groep 0-C0-R"*, een groep NH-CO-R"’, 15 een groep SR"’, waarin R"* C^-C^ alkyl, aryl, gesubstitueerd aryl, een heteroring of een gesubstitueerde heteroring^en n 0 of 1 voorstellen, waarbij het koolstof atoom van de thiazolidinering dat met een sterretje is gemerkt de D-, L- of racemische configuratie bezit; { alsmede zouten daarvan met farmaceutisch geschikte zuren.

2. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R, R* en A water stof zijn en n nul is.

3. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R en A waterstof zijn en R* natrium is en n nul is. U. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R en R' waterstof, 25. acetoxy en.n nul voorstellen.

5. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R waterstof, Rf natrium, A acetoxy en n nul voorstellen.

6. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R waterstof, R* hexamethyleentetraminekation, A acetoxy en n nul voorstellen. 30 7· Verbinding volgens conclusie 1, waarin RenE' waterstof, A 5-methyl-1,3,^-thiadiazool-2-yl-thio en n nul voorstellen.

8. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R waterstof, Rr het R-methylglucaminekation, A 5-methyl-1,3,^-thiadiazol—5-yl-thio en n nul voorstelt. 35 9· Verbinding volgens conclusie 1, waarin R waterstof, R* een negatieve lading, A pyridinio en n nul voorstellen.

10. Verbindings volgaas conclusie 1, waarin R pivaloyl, 8103350 i-:--- “ ___ *· * I -12- R' waterstof, A acetoxy en n nul voorstellen.

11. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R pivaloyl, R' waterstof, A 5-methyl-1,3,H-thiadiazol.—5-yl-thio en n vnul voorstellen.

12. Werkwijze voor het bereiden van verbindingen met een antibiotische activiteit met de formule 1 van het formuleblad, waarin R, R’, R', R,M, A, n en. het koolstofatoom gemerkt met een sterretje de in conclusie 1 beschreven betekenis bezitten, met het kenmerk, dat men een verbinding met de formule 2, waarin R', A en n de boven weer- : 10 gegeven betekenis bezitten, laat reageren met een ïï-acylerend derivaat van een zuur met formule 3, waarin R en het koolstofatoom gemerkt met een sterretje de in conclusie 1 weergegeven betekenis bezitten, volgens op zichzelf bekende acyleringsmethoden.

13· Farmaceutische preparaten voor menselijk, veterinair 15 en landbouwkundig gebruik, welke als actief bestanddeel een antibiotisch effectieve hoeveelheid van een of meer van de verbindingen volgens conclusie 1, gemengd met de gebruikelijk toegepaste dragers bevatten. 20 ...... 81 0 3 3 5 0 , (OL 1 fn s S-N-r-CO-R^j-f N V COOR* Co) -1 s ¥"]- I cT COOR» _3_ R-N-Ï-COOH 8103350 . Ausonia Farmaceutiei S.r.1.