NL8004944A

NL8004944A - Werkwijze voor de bereiding van stabiele suspensies of poeders van stabiele microcapsules met een veranderlijk porositeit en aldus verkregen produkten.

Info

Publication number: NL8004944A
Application number: NL8004944A
Authority: NL
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1979-08-30
Filing date: 1980-08-29
Publication date: 1981-03-03
Also published as: ES8103665A1; MX7014E; EP0025379B1; CA1156519A; ZA805240B; BR8005502A; GR69948B; IT8049572A0; US4376113A; BE884992A; TR21880A; DE3032616C2; DE3032616A1; OA06595A; IL60864A; SU1655294A3; ES494487A0; GB2057389B; FR2464093A1; JPS5637042A

Description

. _____* * * - ... .803275/vdveken

Korte aanduidingi Werkwijze voor de bereiding van stabiele suspensies of poeders van stabiele microcapsules met een veranderlijke porositeit en aldus verkregen produkten.

De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor de bereiding van stabiele suspensies of poeders van stabiele microcap-sules met veranderlijke porositeit en de volgens deze werkwijze verkregen suspensies of poeders· 5 Meer in het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op een werkwijze voor de bereiding van stabiele suspensies of poeders van stabiele miorocapsules met een veranderlijke porositeit die een of meer werkzame stoffen bevatten.

Onder de uitdrukking werkzame stof, verstaat men in het na-10 volgende elke volgens de onderhavige uitvinding ingekapselde stof die geschikt is om op zijn omgeving in te werken.

De miorocapsules verkregen tijdens de uitvoering van de werkwijze volgens de uitvinding bezitten een stabiliteit ten aanzien van fysicochemische invloeden en meer in het algemeen ten 15 aanzien van uitwendige elementen zoals lichtstraling of temperatuursveranderingen. Zij waarborgen ook een doelmatige bescherming van de micro-ingekapselde werkzame stoffen en maken het mogelijk om hun biologische werkzaamheid te behouden.

Volgens de werkwijze der uitvinding kan men bovendien micro-20 capsules verkrijgen met veranderlijke porositeit afhankelijk van de gebruiksbehoefte. Dankzij deze werkwijze kan namelijk de porositeit van de wand van de miorocapsules geregeld worden afhankelijk van de gebruiksbehoeften.

De suspensies en de poeders, die eveneens het onderwerp van 25 de uitvinding vormen, verkregen uitgaande van microeapsules gevormd tijdens de uitvoering van de werkwijze, bezitten eveneens een opmerkelijke stabiliteit bij hun bewaring alsmede een weerstand tegen chemische invloeden en tegen uitwendige elementen, zoals lichtstraling, temperatuurverandering of weerstand tegen verplettering.

30 Er zijn reeds werkwijzen bekend voor de bereiding van sus pensies of poeders van miorocapsules die een werkzame stof bevatten waarvan de omhulling verkregen werd door coacervatie van colloïdale oplossingen en daarop volgende inkapseling van geëmulgeerde o η n / o / l - 2 - druppeltjes, zoals die van gelatine en van acaciagom.

Volgens deze werkwijzen, bereide men in de warmte en onder roeren een waterige colloldale oplossing van gelatine en van acaciagom, waaraan men de werkzame stof of de werkzame stoffen toevoegde 5 in de vorm van een oplossing, een emulsie of een olieachtige dispersie.

Men onderwierp vervolgens de verkregen emulsie aan een co-acervatie en daarop volgende inkapseling van de aanwezige werkzame stof door regeling van de pH met behulp van een zuur of van een 10 base door verdunning en door verlaging van de temperatuur van het reaktiemedium.

Ha het vormen van de microcapsules, ging men over tot de verknoping van het coacervaat dat de wand van de omhulling van de ingekapselde druppeltjes vormt, De verknoping werd uitgevoerd met 15 een aldehyde of met een verbinding van de taninereeks.

Men ging vervolgens over tot het suspenderen van de verkregen microcapsules of isoleerde deze in de vorm van poeders,

De kwaliteit van de wand van de omhulling die een dergelijke microcapsule vormig kon wat de permeabiliteit betreft variëren, 20 Deze permeabiliteit die een funktie is van de porositeit van de wand hing af van verschillende faktoren. Tan deze faktoren kunnen in het bijzonder genoemd worden de snelheid en de mate van verlaging van de temperatuur van het reaktiemedium bij de coacervatie, de voor de verknoping van het coacervaat gebruikte hoeveelheid 25 tanine, de fysische eigenschappen van de micro-ingekapselde stof of stoffen (viscositeit, vluchtigheid, vaste toestand of vloeibare toestand), de dikte van de wand van de omhulling of de grootte van de te omhullen deeltjes, Toor eenzelfde hoeveelheid micro-ingekap-seld produkt was het uitwisselingsoppervlak belangrijker bij micro-50 capsules op basis van kleine deeltjes dan op basis van grote deeltjes.

Bij de uitvoering van deze werkwijzen, ter verkrijging van microcapsules met een redelijk kleine diameter, was men verplicht om tamelijk hoge roersnelheden toe te passen. Dit feit vormde ech-55 ter op industriële schaal een nadeel vanwege de vorming van schuim tijdens het roeren en eiste anderzijds kostbare installaties.

De globale hoeveelheden van de gebruikte colloïden bij de 8004944 , I S ** i - 3 - uitvoering van deze werkwijzen waren tamelijk hoog en gaven aanleiding tot de vorming van microcapsules die vaak niet de vereiste eigenschappen bezaten. Zo werden bijvoorbeeld de wanden van de gevormde omhulling zeer dicht, waardoor het onmogelijk was om de ver-5 knoping van het coacervaat in de diepte op de juiste wijze uit te voeren. Hieruit vloeide eveneens voort dat de onoplosbaarheid en de weerstand tegen uitwendige fysische en chemische effekten niet altijd verkregen konden worden zoals gewenst was.

Deze feiten zijn vooral van belang bij het gebruik van der-10 gelijke microcapsules in bijvoorbeeld de landbouw. De levensduur van de microcapsules die een werkzame stof bevatten, moet in dit geval voldoende zijn om de maximale werkzaamheid van de aanwezige stof te waarborgen.

.Anderzijds waren de volgens deze werkwijzen verkregen sus-15 pensies op basis van microcapsules bijvoorbeeld niet altijd bestand tegen een langdurige bewaring. Bij dergelijke suspensies trad namelijk vaak na een bepaalde tijd, een sedimentatie van de microcapsules op en werd een agglomeratieverschijnsel waargenomen. Een dergelijke suspensie loopt het gevaar bij verdunning voor verstuiving 20 bijvoorbeeld om niet meer homogeen te zijn en de verstuivings-opening te verstoppen.

lat de poeders betreft gevormd uitgaande van volgens deze werkwijzen verkregen microcapsules, gezien het feit dat de microcapsules vaak de neiging hadden om bij het drogen te agglomereren 25 en aan elkaar vast te kleven, was men in een dergelijk geval verplicht om zijn toevlucht te nemen tot fijnmalen ter verkrijging van een fijnverdeeld poeder.

Om aan deze nadelen tegemoet .te komen wordt de werkwijze volgens de uitvinding voorgesteld.

50 Met deze werkwijze kan men in het bijzonder microcapsules verkrijgen, die een of meer werkzame stoffen bevatten, waarvan de porositeit van de wanden afhankelijk van de behoefte geregeld kan worden. De microcapsules verkregen volgens deze werkwijze bezitten eveneens een stabiliteit ten aanzien van chemische invloeden en ten 55 aanzien van uitwendige elementen. Dit geldt eveneens voor suspensies of poeders van deze microcapsules die geschikt zijn om naar willekeur bewaard te worden.

S004944 - 4 -

Deze resultaten konden verkregen worden dankzij de bijzondere keuze van de parameters zoals de totale concentratie aan colloïden, de aanwezigheid van een porositeitsregelmiddel, de roer-snelheid, de keuze van. de pH van het reaktiemedium, de verhouding 5 van de concentraties van de colloïden en van de in te kapselen werkzame stof of werkzame stoffen, de hoeveelheid organisch oplosmiddel, de coacervatieduur door verlaging van de temperatuur en de keuze van de coacervatietemperatuur en de daarop volgende micro-inkapseling, de wijze van uitvoering van de verknoping van het co-10 acervaat in twee trappen en het vormen van de suspensies en poeders van deze microcapsules.

Zoals de totale concentratie aan colloïden een grote invloed heeft op het volume van het te verkrijgen eoacervaat en zoals de micro-inkapseling een oppervlakkige adsorptie is van het eoacervaat 15 op het oppervlak van de in de waterfase geëmulgeerde druppeltjes, is bij het ontwerpen van de onderhavige werkwijze bijzondere aandacht besteed aan de keuze van de concentratie aan colloïden ten opzichte van de concentratie van de werkzame stof of werkzame stoffen en van de hoeveelheid organisch oplosmiddel.

20 Dankzij deze oordeelkundige keuze kan men volgens de onder havige werkwijze eoacervaat in voldoende hoeveelheid vormen voor het omhullen van het globale oppervlak van de in de "olie in water” emulsie aanwezige druppeltjes door een laag eoacervaat van gewenste kwaliteit· 25 Van de gewenste eigenschappen van de coacervaatlaag die de wand van de microcapsule vormt welke een geëmulgeerd druppeltje omhult, speelt de permeabiliteit een belangrijke rol.

Daar deze permeabiliteit een funktie is van de porositeit van deze wand, beoogt de werkwijze volgens de uitvinding een middel 30 te verschaffen om de permeabiliteit te regelen.

Men heeft nu gevonden dat, in plaats om bij elke gelegenheid de talrijke parameters trachten te bepalen die een micro-inkapseling beheersen, met behulp van gelatine en acaciagom, om wanden te verkrijgen met een bepaalde porositeit zoals de bekende literatuur 35 dit leert, het voordelig was om op de volgende wijze tewerk te gaan.

(Tijdens de eerste trap, bepaalt men een keer voor alles de 8004944 - 5 - r · optimale parameters van een dergelijke micro-inkapseling als funk-tie van de gewenste maximale porositeit, waarna men na het vaststellen van deze parameters de eigenlijke regeling van de porositeit van de wanden tot stand "brengt. Dit doel wordt bereikt door 5 aan de voor de coacervatie bestemde emulsie een veranderlijke hoeveelheid toe te voegen van een produkt dat in staat is om door het coacervaat te worden ingesloten. De insluiting van dit produkt veroorzaakt de afsluiting van de poriën van de door het coacervaat gevormde wanden. Afhankelijk van de gebruikte hoeveelheid van dit 10 produkt, zullen de poriën meer of minder verstopt zijn en hierdoor kan men de porositeit van de microcapsules regelen.

Het is niet noodzakelijk om de belangrijkheid van de porositeit en zijn regeling in het geval van microcapsules die een werkzame stof bevatten, te onderstrepen. Dankzij deze porositeit, kun-15 nen de werkzame stoffen meer of minder lange tijd diffunderen afhankelijk van de orde van grootte van de poriën in de wand en de aard van de genoemde stof. Wanneer men de gewenste duur van de diffusie van een werkzame stof kent, kan men derhalve microcapsules vormen met een porositeit die deze diffusie zal waarborgen, 20 Om te voldoen aan de eis van weerstand tegen chemische in vloeden en meer in het algemeen tegen uitwendige elementen, zoals lichtstraling, temperatuursverandering, oplosbaarheid of mechanische weerstand, als de omstandigheden voor de coacervatie en voor de micro-inkapseling bepaald zijn, is gevonden dat deze weerstand 25 aanzienlijk verbeterd kan worden als de verknoping van het coacervaat in twee trappen uitgevoerd wordt.

In een eerste trap waarbij men op het coacervaat een aldehyde -laat inwerken, reageert dit namelijk met een deel van de aminegroepen van het gelatine en maakt de gevormde microcapsules 50 onoplosbaar. In een tweede trap voltooit men de verknoping door het tanine te laten inwerken dat ook met de nog vrije aminefunkties van de gelatine reageert. Op deze wijze, ontstaan eveneens dwars-bindingen tussen de gelatinemoleculen en verkrijgt een microcapsule de gewenste stabiliteitseigenschappen.

55 De microcapsules verkregen volgens de werkwijze van de onder havige aanvrage kunnen, als ingekapselde produkten, verschillende pesticidestoffen bevatten zoals biociden, fongiciden, insecticiden, 8004944 - 6 - herbiciden, acariciden, nematiciden, alsmede virussen, enzymen,, feromonen, jeugdhormonen, of ook wel aantrekkelijke kunstmatige voedingsmedia.

De volgens de werkwijze van de onderhavige aanvrage verkre-5 gen microcapsules kunnen een enkele van de hierboven genoemde stoffen of meerdere van deze stoffen tezamen bevatten· Ze kunnen bijvoorbeeld een insecticide tezamen met een feromon, een jeugdhor-moon of een virus bevatten.

Eet is duidelijk dat men, desgewenst, in eenzelfde microcap-10 sule slechts twee of meer chemisch met elkaar verdraagbare stoffen verenigt. Wanneer dit niet het geval is, gaat men over tot gescheiden micro-inkapselingen, waarbij het mengsel later tot stand komt·

De microcapsules verkregen volgens de werkwijze der uitvinding kunnen in het bijzonder gebruikt worden in de landbouw doch 15 anderzijds kunnen zij het onderwerp vormen van andere toepassingen bijvoorbeeld in verven of papierpasta's, voor het verbeteren van het ΧΊ aanhouden van de werking van een werkzaam bestanddeel of ook wel in aerosolen om bij de verstuiving een te grote adsorptie van het pro-dukt op de drager te voorkomen.

20 Van de mogelijke toepassingen kunnen meer in het bijzonder genoemd worden de biologische bestrijding (bijvoorbeeld simuleren van kunst eieren voor de vorming van trichogrammen), formuleringen met toenemende effekten, mogelijke aanbiedingen voor de aantrekkende stoffen of afstotende stoffen met verlengde werkingsduur, behan-25 delingen van grote omvang (vijvers, bossen....), behandelingen van stallen, de micro-inkapseling van waterige produkten, en de micro-inkapseling van niet met elkaar verdraagzame werkzame stoffen.

Het kan eveneens van belang zijn om bepaalde microcapsules te verenigen in de mate waarin zij niet reeds een vereniging bevat-50 ten. Men kan derhalve bijvoorbeeld microcapsules die een pesticide bevatten, in het bijzonder een pyrethrinolde verenigen met microcapsules die een feromon, een jeugdhormoon of een virus bevatten.

In het geval van gebruik als insecticide, kunnen de volgens de werkwijze der uitvinding verkregen microcapsules ontworpen zijn 55 om ofwel het werkzame bestanddeel in de atmosfeer af te geven, ofwel om door de insecten te worden opgenomen, waarbij het werkzame bestanddeel in dit geval vrij gemaakt wordt binnen in het organisme 8004944 11 ♦ -i

1 I

- 7 - van het insect*

De werkwijze, die het onderwerp van de uitvinding vormt, heeft derhalve betrekking op de bereiding van stabiele suspensies of poeders van stabiele microeapsules met een veranderlijke porosi-5 teit, bevattende tenminste een werkzame stof, welke werkwijze de volgende trappen omvats - bereiding van een "olie in water" emulsie uitgaande van een col-loldale oplossing van gelatine en acaciagom met gelijk gewicht, waarbij hun totale concentratie loopt van 4 tot 6 gew.$ emulsie en 10 van een emulsie, oplossing of een olie dispersie van de werkzame stof of werkzame stoffen, waarbij de concentratie loopt van 1 tot 5 gew*$ van de "olie in water" emulsie onder roeren, bij een temperatuur van ongeveer 50°C en in tegenwoordigheid van een emulgeer-middel, 15 - coacervatie en daarop volgende micro-inkapseling van geëmulgeerde druppeltjes, die de werkzame stof of werkzame stoffen bevatten, door instellen van de pH-waarde van het reaktiemedium op 4>2-4,4 met behulp van een zuur, en vervolgens door verlaging van de temperatuur tot 20°C steeds onder roeren, 20 - verknoping van de wanden van de gevormde microeapsules, door in werking van een middel dat met de amine funkties van de gelatine kan reageren, - en formulering van de verkregen microeapsules, welke werkwijze gekenmerkt is doordat mens 25 - aan de "olie in water" emulsie een veranderlijke hoeveelheid in organisch oplosmiddel oplosbaar ethylhydroxyethyleellulose toevoegt afhankelijk van de gewenste porositeit van de microeapsules, - op de tengevolge van de coacervatie gevormde microeapsules, achtereenvolgens, als verknopingsmiddel glutaaraldehyde en tanine 50 laat inwerken, onder langzaam roeren bij 20°C waarbij men verknoopte microeapsules verkrijgt waaraan men ofwel, onder langzaam roeren bij 20°C in water oplosbaar ethylhydroxyethyleellulose toevoegt en de geconcentreerde suspensie van microeapsules verkrijgt, ofwel met een vaste drager behandelt onder roeren bij 20° G en na 35 drogen, het gewenste poeder isoleert.

Deze werkwijze is nog gekenmerkt door de volgende punten: t men bereidt de "olie in water" emulsie door roeren bij ongeveer 8004944 - 8 - 400 tot 600 t/min* in tegenwoordigheid van een schuimwerend middel, zoals een secondaire alcohol zoals secundaire octylalcohol, waarvan de concentratie 0,2 tot 0,7 gew.$ van de emulsie bedraagt en in tegenwoordigheid van een mengsel van een anionogene oppervlakte-5 aktieve stof en van niet ionogene oppervlakte-aktieve stof, - de concentratie van in organisch oplosmiddel oplosbaar ethyl-hydroxyethylcellulose in de "olie in water" emulsie bedraagt 0,01 tot 20 gew·$ van de colloïden, - de concentratie van het glutaaraldehyde bedraagt 2 tot 5 $ en die 10 van het tanine 3 tot 8 gew,$ van de colloïden en de roering in deze trap bedraagt ongeveer 400 tot 600 t/min· bij 20° C; - men voegt aan de suspensie van de verknoopte microcapsules 0,5 tot 2 gew.$ in water oplosbaar ethylhydroxyethylcellulose toe; - men voegt aan de suspensie van de verknoopte microcapsules 1 tot 15 15 gewe$ calcium chloride toe; - men voegt/water oplosbaar ethylhydroxyethylcelluiose en calcium-chloride toe in tegenwoordigheid van een niet ionogene oppervlakte-aktieve stof, onder roeren van 400 tot 600 t/min. bij 20°C; - de vaste drager waarmee men de verknoopte microcapsules behandelt 20 is talk, in een gewichtsconcentratie van 7 tot 13$ van de suspensie van de microcapsules; - de micro in te kapselen werkzame stof is een pyrethrinoïdeverbinding, .zoals de (s)a-cyaan 3-fenoxybenzylester van (lS, cis) 2,2-dimethyl 3-(2,2-dibroomvinyl) cyclopropaan-l-carbonzuur of decame- 25 trine of de 5-benzyl 3-f^rylmethylester van (lR,3S,E) 2,2-dimethyl 3-(2-óxo 2,3,4,5-tetrahydro 3-thiofenylideenmethyl)cyclopropaan-l-carbonzuur of kadetrine; - de micro in te kapselen werkzame stof is een virus in het bijzonder Bacil'lus Thurigiensis of Heliothis Huclear Polyhedrosis virus, 30 een enzym, een feromon, een jeugdhormoon, een kunstmatig voedings-medium, een niet pyretrinolde insecticide, een herbicide, een biocide, een fungicide, een acaricide of een nematieide ofwel een vereniging van twee of meer van de hierboven genoemde stoffen·

Be uitvinding heeft eveneens betrekking ops 35 - de stabiele suspensies of poeders op basis van stabiele micro capsules die een werkzame stof bevatten zoals verkregen volgens de werkwijze der uitvinding; 8004944 J» 1 - 9 - * # - de stabiele suspensie of poeders verkregen volgens de werkwijze der uitvinding, waarbij de werkzame stof^yretrinoïdeverbinding is, in het bijzonder de (s)a-cyaan 3-fenoxybenzylester van (lR, cis) 2,2-dimethyl 3-(2,2-dibroomvinyl)cyclopropaan-l-carbonzuur of deca- 5 metrine of de 5-benzyl 3“fu£y3methylester van (lR,3S,E) 2,2-dime-thyl 3-(2-oxo-2,3»4»5-tetrahydro 3-thiofenylideenmethyl) cyclopro-paan-l-carbonzuur of kadetrine, - de stabiele suspensies of poeders verkregen volgens de werkwijze der uitvinding, waarbij de werkzame stof een virus is, in het bij- 10 zonder de Bacillus Thurigiensis of "Heliothis Uuclear Polyhedrosis Virus", - de stabiele suspensies of poeders verkregen volgens de werkwijze der uitvinding waarbij de werkzame stof een enzym, een feromon, een jeugdhormoon, een kunstmatig voedingsmedium, een niet pyretrinoïde 15 insecticide, een herbicide, een biocide, een fungicide, een acari-cide, een nematicide of een vereniging van 2 of meer van de hierboven genoemde stoffen is.

De werkwijze volgens de uitvinding kan nog worden toegelicht door de hierna volgende gegevens» 20 - de totale concentratie aan colloïden wordt zodanig gekozen dat deze bij voorkeur 5f° bedraagt, om onder de gekozen reaktie-omstan-digheden, een maximaal volume coacervaat te verkrijgen.

- De micro in te kapselen werkzame stof, kan vloeibaar of vast zijn maar is niet wateroplosbaar. Zij wordt opgelost, geëmulgeerd of ge- 25 dispergeerd in een gebruikelijk organisch oplosmiddel zoals xyleen, dimethylftalaat of een ander ftalaat. Een dergelijke oplossing, emulsie of dispersie kan bereid worden onder toepassing van een niet ionogene oppervlakte-aktieve stof, zoals Galoryl EM 60 en een anionogene oppervlakte-aktieve stof zoals Galoryl 520· De aard van 30 de oppervlakte-aktieve stoffen alsmede hun concentratie worden zodanig gekozen dat men de coacervatie en de micro-inkapseling niet stoort.

- Het voor het instellen van de ρΞ-waarde gekozen zuur is IQffo azijnzuur.

35 - Bij de bereiding van een geconcentreerde suspensie, met behulp van microcapsules verkregen zoals hierboven beschreven, moet men rekening houden met faktoren zoals de bescherming tegen het gel, de - 10 - viscositeit van de suspensie en het gedrag in suspensie bij verdunning voor zijn gebruik.

- Men gebruikt als antigel middel calciumchlonide bijvoorbeeld in een concentratie van 12$.

5 - Be keuze van het verdikkingsmiddel waarmee men de viscositeit van de suspensie regelt hangt af van zijn chemische inertheid ten opzichte van verschillende bestanddelen van een suspensie. In het onderhavige geval kiest men in het bijzonder wateroplosbaar ethyl-hydroxyethylcellulose. Vanwege de gekozen concentratie van het 10 calciumchloride voorkomt men dat de uitvlokking van het ethylhydro-xyethylcellulose kan optreden.

Bij de bereiding van poeders op basis van microcapsules verkregen volgens de werkwijze der uitvinding voegt men onder roeren aan het reaktiemengsel, na beëindiging van de verknoping van het 15 coacervaat, talk toe in een concentratie van ongeveer 10 gew.$.

33e talk omhult de verknoopte microcapsules en verhindert op deze wijze dat zij agglomereren tijdens het drogen. Op deze wijze voorkomt men vervolgens dat men over moet gaan tot fijnmalen van de geagglomereerde microcapsules ter verkrijging van een fijn poeder. 20 Het vervallen van het malen vormt ook een belangrijk voordeel van de werkwijze volgens de uitvinding vanwege het feit dat de wanden van de microcapsules niet meer gevaar lopen om te worden beschadigd Char de samenhang van de microcapsules derhalve gehandhaafd wordt, treedt niet het gevaar op dat de beoogde diffusie van de aanwezige 25 werkzame stof gewijzigd wordt.

Er zullen nu niet beperkende voorbeelden gegeven worden van de uitvoering van de werkwijze volgens de uitvinding.

Voorbeeld I; Bereiding_van_een_waterige_susgensie_van_microcapsules met geringe porositeit die de (s)g-cyaan 5-fenoxybenzylester van 50 IR. cis 2,2-dimethyl 5-(2,2-dibroomvinyl)cyclopropaan-l-carbonzuur of decame trine (verbinding A) bevatten.

Men bereidt onder roeren met een snelheid van 500 toeren/ minuut bij 50°C een eerste oplossing (l) van 20 g gelatine en 20 g acaciagom in 760 ml gedemineraliseerd water in tegenwoordigheid van 35 0,5 g secundaire octanol.

Men bereidt anderzijds een tweede oplossing (II) onder roeren met een snelheid van 500 toeren/minuut en bij 50°C, 8004944 ’ - 11 - uitgaande van 25 g verbinding A, 46,4 g xyleen, 96,6 g dimethyl ftalaat, 4,0 g secundaire octorïol, 6,5 g in organisch oplosmiddel oplosbaar ethylhydroxyethyleellulose, 0,8 g Galoryl EM 520 en 0,2 g Galoryl M 60.

5 Men bereidt een "olie in water" emulsie onder langzaam toe voegen van de oplossing II aan de oplossing I, steeds onder roeren met een snelheid 500 toeren/minuut bij 50°C.

Sa het vormen van de "olie in water" emulsie stelt men de pH van het reaktiemedium in op 4»2 tot 4»4 door toevoegen een 10$'s 10 azijnzuuroplossing, waarna men langzaam, in ongeveer 1 uur, de temperatuur verlaagt tot 20°C.

Men voegt vervolgens, steeds onder roeren met een snelheid van 500 toeren/minuut, 5 ml 25$'s glutaaraldehyde toe. Na ongeveer 1 uur, steeds onder roeren met een snelheid van 500 toeren/minuut, 15 voegt men 10 g toe van een 15$’s tanine-oplossing in water. Het reaktiemedium wordt gedurende 5 uren bij kamertemperatuur, geroerd met een snelheid van 500 toeren/minuut. Men verkrijgt op deze wijze verknoopte microcapsules waarvan de diameter ten hoogste gelijk is aan 50 micron.

20 Na vorming van de verknoopte microcapsules, voegt men achtereenvolgens een gram secundaire octanol, 119 g ealciumchloride (in kleine hoeveelheden), 10 g in water oplosbare ethylhydroxy-ethylcellulose, 12 g Galoryl EM 42 en 0,04 g Hhodamine^toe, waarna men voort gaat met roeren gedurende ongeveer 5 uren en de verkregen 25 suspensie over een zeef leidt, Deze suspensie bevat 98,1 $ van het als uitgangsmateriaal gebruikte werkzame bestanddeel.

Yoorbeeld_IIi Bereiding van een waterige_suspensie van microcapsu-les met sterke porositeit die de verbinding A bevatten.

Op analoge wijze als in voorbeeld I en onder toepassing van 50 dezelfde hoeveelheden bestanddelen, doch onder achterwege laten van de aanwezigheid van in organisch oplosmiddel oplosbaar ethylhydroxyethyleellulose in oplossing II, verkrijgt men een suspensie waarvan de microcapsules een grote porositeit bezitten. Deze suspensie bevat 98,7 i° van het als uitgangsprodukt gebruikte werkzame 55 bestanddeel.

Voorbeeld IIIi Bereiding vaneen_poeder op__basis van microcapsules.

De microcapsules verkregen volgens de voorbeelden I en II

8004944 - 12 - kunnen ook geïsoleerd worden in de vorm van een poeder. Voor het bereiden van een dergelijk poeder, voegt men onder roeren met een snelheid van 500 toeren/minuut aan het geheel van het na de verknoping van het coacervaat van voorbeeld I of II verkregen reaktie-5 mengsel, 110 g talk toe, gaat door met roeren gedurende ongeveer 15 minuten, leidt de suspensie over een zeef, zuigt de microcapsules af en droogt ze* Het verkregen poeder kan vervolgens geconditioneerd worden volgens de gebruikelijke methoden zoals bijvoorbeeld in de vorm van lokmiddelen.

10 Voorbeeld IV: Bereiding van een poeder og basis van microcapsules die een "Heliothis Nuclear Pol^hedrosis" virus bevat.

Men bereidt onder roeren met een snelheid van 500 toeren/ minuut bij 50°C een eerste oplossing (i) van 20 g gelatine en van 20 g acaciagom in 760 ml gedemineraliseerd water.

15 Men bereidt anderzijds een tweede oplossing (ll) onder roe ren met een snelheid van 500 toeren/minuut en bij 50°C uitgaande van 25 g poeder van ’’Heliothis Nuclear Polyhedrosis" virus, 46,4 g xyleen, 96,6 g dimethylftalaat, 0,8 g Galoryl EM 520 en 0,2 g Galoryl EM 60.

20 Men bereidt een "olie in water" emulsie door langzaam toe voegen van de oplossing II aan de oplossing I steeds onder roeren met een snelheid van 500 toeren/minuut bij 50°C.

Na vorming van de "olie in water" emulsie stelt men de pH van het reaktiemedium in op 4»2 tot 4>4 door toevoegen van 10$’s 25 azijnzuuroplossing waarna men langzaam in ongeveer 1 uur, de tenn peratuur verlaagt tot 20°C.

Men voegt vervolgens nog steeds onder roeren met een snelheid van 500 toeren/minuut, 5 ml 25$ ’s glutaaraldehyde toe. Na ongeveer 1 uur, steeds onder roeren, met een snelheid van 500 toeren/ 50 minuut, voegt men 10 g toe van een 15$‘s tanine-oplossing in water. Het reaktiemengsel wordt gedurende ongeveer 3 uren bij kamertemperatuur geroerd met een snelheid van 500 toeren/minuut. Men verkrijgt op deze wijze verknoopte microcapsules waarvan de diameter ten hoogste gelijk-is aan 30 micron.

35 Na vorming van de verknoopte microcapsules voegt men onder roeren met een snelheid van 500 toeren/minuut aan het geheel van het verkregen reaktiemengsel na verknoping van het coacervaat, 8004944 - 13 - 110 g talk toe, handhaaft het roeren gedurende ongeveer 15 minuten, leidt de suspensie over een zeef, zuigt de microcapsules af en droogt ze. Het verkregen poeder kan vervolgens geconditioneerd worden volgens de gebruikelijke methoden zoals bijvoorbeeld in de vorm 5 van lokmiddelen.

Het is opmerkelijk dat de werkwijze volgens de uitvinding de micro-inkapseling van virus zonder dit te vernietigen toelaat.

Voorbeeld V: Onderzoek van de porositeit van microcapsules verkre-gen volgens_ de_werkwij ze der uitvinding.

10 Yoor het onderzoek van de porositeit van de microcapsules, bereidt men deze volgens de werkwijze beschreven in de voorbeelden I en II, waarbij men steeds als micro-ingekapselde stof naftaleen kiest in plaats van de verbinding A.

De concentratie van organo-oplosbaar ethylhydroethylcellu-15 lose uit oplossing I wordt gevarieerd afhankelijk van de proeven, zoals aangegeven in de volgende tabel:

Proeven Δ Proeven B Proeven C 20 Haf tal een 25 # 25 fo 25 $

Xyleen 75 5^ 70 $ 65 i* r

Organo-oplosbaar ethyl- Q ^ ^ ^ 25 hydroxyethylcellulose 100 mg van de verkregen microcapsules die naftaleen bevatten afkomstig van de proeven A, B en C worden geplaatst op filtreer-papier rondjes. Men brengt als vergelijking een gelijke hoeveelheid 30 niet micro-ingekapseld naftaleen aan. Het onderzoek wordt uitgevoerd onder uitsluiting van licht, bij -een gemiddelde temperatuur en een gemiddelde relatieve vochtigheid van respektievelijk 25° C en 60 fo, onder een luchtstroom van 143 m3/h.

Be bepaling van het gesublimeerde naftaleen wordt uitgevoerd 35 aet een apparaat voor dampfase chromatografie na 24 uren, 7 dagen en 28 dagen.

Het niet micro-ingekapselde naftaleen is totaal gesublimeerd 8004944 - 14 - na 24 uren, terwijl de microcapsules van de proeven A, B en C de volgende percentages gaven voor verliezen aan naftaleen als funktie van de tijd en van de hoeveelheid organo-oplosbaar ethylhydroxy-ethyl.cellulose (EHEC) dat aanwezig is in de wanden van de microcap-5 sules.

Sublimatie $ 1 dag 7 dagen 28 dagen 10---------------------------------------------------------------------

Met micro-ingekapseld , ^ naftaleen 100 56

Microcapsules met 0 fo EHEC 22 % 28 $ 30 % 15 Microcapsules met 5 $ EHEC 16 fo 22 $ 24 i°

Microcapsules met 10 $ EHEC 0 fo 0 $ 0 fo

Men kan volgens deze proeven constateren dat het verschil 20 van porositeit van de microcapsules afhangt van de concentratie aan organo-oplosbaar ethylhydroxyethylcellulose in de wanden.

Door dus de concentratie aan organo-oplosbaar ethylhydroxyethylcellulose in de microcapsules te variëren is het mogelijk om de porositeit vsn de wand van een microcapsule als funktie van de 25 aard van de in te kapselen werkzame stof en van het gebruik waarvoor zij bestemd is, te regelen.

Voorbeeld VI: Onderzoek_van_de_bescherming_te gen_1ichtstraling bij microcapsules verkregen volgens de uitvinding met een werkzame_stof.

50 Voor het uitvoeren van dit onderzoek, wordt een lichtgevoe lige verbinding zoals bijvoorbeeld 5-benzyl 3-furylmethy1ester van (IE, 5S, E) 2,2-dimethyl 3-(2-oxo 2, 3» 4» 5 tetrahydro 3-thiofenyl-ideenmethyl) cyclopropaancarbonzuur of kadetrine (verbinding B) micro-ingekapseld en de microcapsules gesuspendeerd volgens de 35 werkwijze der uitvinding. Deze suspensie en een emulgeerbaar concentraat op basis van dezelfde lichtgevoelige verbinding en in dezelfde concentratie, worden onderworpen aan dezelfde lichtstraling, 8004944 - 15 - die het zonnespectrum weergeeft. De gemiddelde temperatuur en vochtigheid zijn respektievelijk 25° C en 75

De bepalingen van de verliezen aan werkzame stof (verbinding B) zijn uitgevoerd na 24 uren, 7 en 14 dagen blootstellen aan de 5 genoemde straling en met behulp van een apparaat voor chromatogra-fie in vloeibare fase bij hoge druk.

De resultaten van deze proeven zijn vermeld in de volgende tabel: ------------------------------------------—J--------------------—, 10 Tijd 24 uren 7 dagen 14 dagen % verlies emulgeerbaar 100 * 100 < 100 « concetraat 15 <fo verlies suspensie van 13 cfQ 34 cfQ 71 ^ microcapsules 7 ^ ' ' '

Deze resultaten tonen duidelijk de doelmatigheid van de bescherming van de volgens de werkwijze der uitvinding micro-ingekap-20 selde werkzame stof.

Voorbeeld VII: Onderzoek van behoud van biologische werkzaamheid «o··™—G1 ““ ,e 11 1 1 r ‘I ^ *" m·"· n " 1 1 **1 1 1 · van een volgens de werkwijze_der uitvinding_micro-ingekapselde werkzame^ stof.

Voor het uitvoeren van dit onderzoek, is de verbinding A 25 (decametrine) micro-ingekapseld en gesuspendeerd of geconditioneerd tot korreltjes bereid uitgaande van het poeder van de genoemde microcapsules. Deze suspensie en deze korreltjes zijn vergeleken met een emulgeerbaar concentraat op basis van verbinding A bij een gelijke concentratie.

JO a) Onderzoek_van de biologisohewgrkzaamheid van_desuspen- sie van de microcapsules_en van het ^emulgeerbare^concentraat.

Het voor deze biologische proef gebruikte insect is een rups (SPQDOPTERA LITTORALIS). Men verdunt de suspensie van de microcapsules en het emulgeerbare concentraat met water, waarna de twe^èle 35 verbinding A bevattende waterige verdunningen volgens verstoven worden in een hoeveelheid van 10 ml per 4 bonenplanten (8 bladeren). Op elke plant worden 0, 3, 5» 7 en 14 dagen na de behandeling 8004944 - 16 - twintig rupsen (in het stadium 1 4) geplaatst. De bepalingen worden 24 en 48 uren na het opbrengen van de rupsen uitgevoerd.

De resultaten van deze proeven zijn weergegeven in de volgende tabel: 8004944 - η -

} I 1 ί ~ I

! ! § ! co ! $ IS

I | 60 I ^ I I

i i « ! I--1 i i 'ö i —l i i _ι Λ i _ !

| I I | O | lf\ I

I I Η I ί KN I (

| | | CM I I I

! ! lil Λ ; _ ! I « I | I O . O j

| -P ! S I co I C— H

| © I © I -Φ I i I

I S I I-i--- I I te t ^ I : I S I 'd I .S I I _

| <13 | 1 | ΙΛ 1 O I

i ho i c- i l VO 1 I .5 ! 1 *1_I_

ί £ 1 ! & ! ί I

I © I I I O i ΙΛ I

1 Si ö i co I co ! I

I a I © I I ; ! 1 © f hD I-1-- 1 1 I fit I cd I 1 1 I I -d 1 Λ I ^ I Ό | I I ΙΛ i !

I ·Η 1 1Λ I I E— I I

I >Ω I 1 CM I I I

1 |-1-1---1----

I © I I I I

I -P 1 I Λ I Λ J

1 <H I ί I o

1 14 I 1 CO I σ\ I H

ί © ί ö ί t ! ί I -P I © U-1--

I 01 1 bo I I 1 I

I I © I A I ! ! I © I rö I 1 o I UN 1

I δο ί I I σ\ 1 J

i cd ι nn I cm ι ί I

I -p u-!-j—-j— -

I s r I . I

I © I 1 Λ I _ _ ί ο ί ί i2 2 ! S ! ! $! S . h ί * ! o i-1-1-1 ! ! ii ! λ ί ί _ i

ί I I 1 UN 1 Ο I

l [ 1-3 I <· I on I o 1

I I I CM I I Η I

till j J

I I- I-{-- -

I III

ί til

1 III

I © I 1 I

Η I I I

I M I I

I S Η I I

I o Si 1 ί

I & \ I I I

! δδ ί ο ί ο I

I ra I H 1 H I

I Ή Vi I I [ i ra ο I I :

I o -p ί I I

l O a I ! !

I

I III

___I- -4- 1 j I {

I III

1 I gi J

I I cd I I

I I Ü I I

IS Ip I I

I © IS I I

I ho I O I I

IS I Ή IS I

I I Td I S S I

I S IS I a +5 I

ί pq ί ο η ί s s ί

1 H S I S O I

80 0 4 9 4 4' 1 1 ‘ - 18 -

Leze resultaten (voorgaande tabel) geven aan dat het emul-geerbaar concentraat een zeer duidelijke werkzaamheidsverlaging te zien gééft na de derde dag, terwijl de suspensie van microcapsules nog een bepaalde werkzaamheid bezit na 14 dagen.

3 b) Onderzoek van'de_biologische werkzaaH^eid_van_een_volgens de uitvinding^micro-ingekapsglde werkzame^stof _en_geconditioneerd tot lokmiddelen_in ^e_vorm_van_korreltjes.

Leze lokmiddelen in korrelvorm worden verkregen uitgaande van microcapsules geïsoleerd, in de vorm van een poeder en welke 10 de verbinding A als werkzame stof bevatten.

Zij worden uitgespreid over de grond om sla te beschermen tegen aantasting door rupsen (SPOLOPTERA LITTORALIS). Vooraf, is waargenomen dat de verbinding A die direkt in de lokmiddelen opgenomen is, zonder micro-inkapseling, zeer snel ontleedt en vlug 15 zijn biologische werkzaamheid verloor.

Het behandelde perceel omvat twintig slaplanten in het 2-3 bladeren stadium geplant volgens vier lijnen.

Men plaats op de grond twintig rupsen. Le bepalingen vinden negentien dagen na de verontreiniging met de rupsen plaats. De 20 resultaten (onderstaande tabel) tonen dat de lokmiddelen een werk-zaamheidsniveau bezitten dat geheel vergelijkbaar is met een verge-lijkingsprodukt (Toxafeen).

Losis in grammen Behandelings- Percentage af- Percentage 25 werkzame stofptóha. wijze gevreten sla- levende planten rupsen

Verbinding A 500 g/ha verspreiden microcapsules op het opper- 0 $ 4 vlak van de 30 grond 35 Le resultaten van deze proeven tonen duidelijk dat het dankzij de werkwijze volgens de uitvinding mogelijk is om de stabiele suspensies of poeders te verkrijgen op basis van stabiele microcapsules, die werkzame stoffen bevatten, welke de diffusie 8004944 - 19 - van de genoemde werkzame stoffen afhankelijk van hun aard en afhankelijk van de gebruikseisen regelen· Bovendien, tonen zij dat de microcapsules aan een ingekapselde stof een bescherming geven tegen chemische invloeden en uitwendige elementen zoals lichtstraling of 5 temperatuursverandering* geheel onder behoud van de biologische werkzaamheid van de genoemde stof·

Zoals men kan waarnemen, bij onderzoeken van de resultaten welke beschreven zijn, zijn gewoonlijk in het gebied van de landbouw gebruikte produkten vermeld.

10 Eet is echter duidelijk dat elke andere werkzame stof be stemd voor voedings, dieet, diagnostisch, farmaceutisch of para-farmaceutisch gebruik alsmede elke andere werkzame stof waarvan de mogelijke toepassingen, anders dan de hierboven genoemde, reeds eerder beschreven zijn, micro-ingekapseld kunnen worden volgens de 15 werkwijze der uitvinding en de aldus verkregen microcapsules geconditioneerd kunnen worden tot met het gebruik overeenkomende gewoonlijke vormen· 8004944

Claims

1. Werkwijze voor de "bereiding van stabiele suspensies of poeders van stabiele microcapsules met een veranderlijke porositeit bevattende tenminste een werkzame stof, welke werkwijze de trappen omvat: 5. bereiding van een olie in water emulsie uitgaande van een col- loidale oplossing van gelatine en acaciagom in gelijk gewicht, waarbij hun totale concentratie varieert van 4 tot 6 gew,$ van de emulsie en van een emulsie, van een oplossing of van een olieachtige dispersie van de werkzame stof of van de werkzame stoffen, 10 waarbij de concentratie varieert van 1 tot 5 gew*^ van de "olie in water" emulsie onder roeren bij een temperatuur van ongeveer 50°C en in tegenwoordigheid van een emulgeermiddel, - coacervatie en daarop volgende micro-inkapseling van de werkzame stof of werkzame stoffen bevattende geëmulgeerde druppeltjes door 15 instellen van de pïï-waarde van het reaktiemedium op 4»2 tot 4j4 met behulp van een zuur gevolgd door verlaging van de temperatuur tot 20°C steeds onder roeren, - verknoping van de wanden van de gevormde microcapsules door inwerking van een middel dat kan reageren met de aminefunkties van 20 het gelatine, - en formulering van de verkregen microcapsules, met het kenmerk, dat men: - aan de "olie in water" emulsie een veranderlijke hoeveelheid or-gano-oplosbaar ethylhydroxyethylcellulose toevoegt afhankelijk van 25 de gewenste porositeit van de microcapsules, - op de na de coacervatie gevormde microcapsules achtereenvolgens, als verknopingsmiddel, glutaaraldehyde en tanine. laat inwerken onder langzaam roeren bij 20°C en de verknoopte microcapsules verkrijgt en dat men: 50 ofwel onder langzaam roeren bij 20° C wateroplosbaar ethylhydroxyethylcellulose toevoegt en een geconcentreerde suspensie van microcapsules verkrijgt, ofwel behandelt met een vaste drager, onder roeren bij 20°C en na drogen het gewenste poeder isoleert. 55 2» Werkwijze volgens conclusie 1, met_het_kenmerk, dat men de "olie in water" emulsie bereidt door roeren bij ongeveer 400 tot 8004944 ' 1 ' - 21 - 600 toeren/minuut, in tegenwoordigheid van een schuimwerend middel, zoals een secundaire alcohol, zoals secundaire oètylalcohol, waarvan de concentratie 0,2 tot 0,7 gew.$ van de genoemde emulsie bedraagt en in tegenwoordigheid van een mengsel van een anionogene 5 oppervlakte-aktieve stof en van een niet-ionogene oppervlakte-aktieve stof.

3. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met^het kenmerk, dat de concentratie aan organo-oplosbare ethylhydroxyethylcellulose in de olie in water emulsie 0,01 tot 20 gew.$ van de colloïden bedraagt·

4. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-3, 10 met het kenmerk, dat de concentratie van het glutaaraldehyde 2 tot 5 fa en die van het tanine 3 tot 8 gew.$ van de colloïden bedraagt en het roeren, in deze trap, geschiedt met een snelheid van ongeveer 40O tot 600 toeren/minuut bij 20° C. 5* Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-4» 15 met het kenmerk, dat men aan de suspensie van de verknoopte micro-capsules, 0,5 tot 2 gew.$ wateroplosbaar ethylhydroxyethylcellulose toevoegt.

6. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-5» met het kenmerk, dat men aan de suspensie van de verknoopte micro-20 capsules 1 tot 15 gew.$ calciumchloride toevoegt.

7. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-6, met het kenmerk, dat men wateroplosbaar ethylhydroxyethylcellulose en calciumchloride toevoegt in tegenwoordigheid van een niet-ionogene oppervlakte-aktieve stof, onder roeren, met een snelheid van 25 400 tot 600 toeren/minuut bij 20°C. 8« Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-7» met het kenmerk, dat de vaste drager waarmee men de verknoopte microcapsules behandelt talk is, in een gewichtsconcentratie van 7 tot 13 i> van de suspensie van de genoemde microcapsules.

9. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-8, met het kenmerk, dat de micro in te kapselen werkzame stof een pyretrinolde-verbinding is.

10. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-9, met het kenmerk, dat de micro in te kapselen werkzame stof de (s) 55 α-cyaan 3-fenoxybenzylester van (lR, cis) 2,2-dimethyl 3-(2,2-di-broomvinyl) cyclopropaan-l-carbonzuur of decametrine is. 8004944 - 22 -

11. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-9» met het kenmerk, dat de micro in te kapselen werkzame stof de 5-benzyl 3-ïu2yliaethylester van js, 2,2-dimethyl 3-(2-oxo 2, 3, 4, 5-tetrahydro 3-thiofenylideenmethyl) cyclopropaan-l-carbon-5 zuur of kadetrine is.

12. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-8, met het kenmerk, dat de in te kapselen werkzame stof een element is gekozen uit de groep bestaande uit de virussen, enzymen, feromonen, j eugdhormonen ·

10 IJ. Werkwijze volgens conclusie 12, met_het kenmerk, dat het virus Bacillus Thurigiensis of Heliothis Huclear Polyhedrosis virus is.

14. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-8, met het kenmerk, dat de in te kapselen werkzame stof een kunstmatig 15 voedingsmedium is.

15. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-8, met het kenmerk, dat de in te kapselen werkzame stof een element is gekozen uit de groep bestaande uit de niet-pyretrinolde insecticiden, de herbiciden, biociden, fnngiciden, acariciden en nematiciden. 20 16. Werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-8, met het kenmerk, dat de in te kapselen werkzame stof een vereniging is van twee of meer stoffen zoals omschreven in een der conclusies 9-15.

17· Stabiele suspensies of poeders op basis van stabiele micro-25 capsules die een werkzame stof bevatten zoals verkregen met behulp van de werkwijze volgens een of meer der conclusies 1-16.

18. Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 17, metjhet kenmerk, dat de werkzame stof een pyretrinoïdeverbinding is. 19· Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 17 of 18, 30 met het kenmerk, dat de pyretrinoïdeverbinding de (S)a-cyaan 3-fenoxybenzylester van (lR, cis) 2,2-dimethyl 3-(2,2-dibroomvinyl) cyclopropaan-l-carbonzuur is.

20. Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 17 of 18, met het kenmerk, dat de pyretrinoldeverbinding de 5-benzyl 3-furyl- 35 methylester van (lR, 3S, E) 2,2-dimethyl 3-(2-oxo 2, 3» 4» 5-tetra-hydro 3”thiofenylideenmethyl) cyclopropaan-l-carbonzuur is.

21. Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 17, 8004944 - 23 - met het kenmerk, dat de werkzame stof een element is gekozen uit de groep bestaande uit virussen, enzymen, feromonen, of jeugdhor-monen.

22. Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 21, 5 met het kenmerk, dat het virus Bacillus ïhurigiensis of Beliothis Nuclear Polyhedrosis virus is.

25. Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 17, met het kenmerk, dat de werkzame stof een kunstmatig voedings-medium is.

24. Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 17» met het kenmerk, dat de werkzame stof een element is gekozen uit de groep bestaande uit de niet-pyretrinoide insecticiden, biociden, fongiciden, herbiciden, acariciden en nematiciden.

25. Stabiele suspensies of poeders volgens conclusie 17, 15 met het kenmerk, dat de werkzame stof een vereniging is van twee of meer stoffen zoals omschreven in een of meer der conclusies 18-24. 8004944