MXPA05004526A - Derivados isoflavonoides aminados y usos de los mismos. - Google Patents

Abstract

Isoflavonoides aminados sintetizados mediante la aminacion del grupo 4-ceto de la isoflavanona y los sistemas de anillos de isoflavanona, composiciones farmaceuticas que los contienen y usos de los mismos como agentes terapeuticos.

Description

DERIVADOS ISOFLAVONOIDES AMINADOS Y USOS DE LOS MISMOS CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se relaciona con derivados isoflavonoides aminados basados en la sustitución con nitrógeno del grupo 4-ceto de isoflavona y sistemas de anillos isoflavanona . La presente invención se relaciona además con la síntesis de los derivados isoflavonoides aminados, composiciones que los contienen y usos de los mismos como agentes terapéuticos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las isoflavononas de plantas naturales se conocen por que poseen un amplio intervalo de efectos biológicos fundamentales en células humanas que incluyen la antioxidación y la sobre y la sub-regulación de una amplia variedad de enzimas y mecanismos de transducción de señales. La detención mitótica y la citotoxicidad de células cancerosas humanas, la permeabilidad capilar incrementada, la adhesión celular incrementada, la respuesta incrementada de células del músculo liso vascular a vaso-relajantes y agonismo de receptores de estrógeno, son solamente algunos ejemplos de las respuestas de las células animales a los efectos biológicos de los isoflavonoides que se presentan en la naturaleza.

Un intervalo de beneficios terapéuticos como un resultado de estos resultados biológicos han sido identificados incluyendo el tratamiento y prevención de síntomas pre-menopáusicos tales como el síndrome pre-menstrual, endometriosis, fibroides uterinos, hiperlipidemia , enfermedades cardiovasculares, síntomas menopáusicos tales como osteoporosis y demencia senil, alcoholismo, hipertrofia prostética benigna y cánceres de próstata, mama y carcinomas de intestino grueso [ver WO 93/23069; WO 96/10341; US 5424331; JP 62-106017; JP 62-106016; US 5516528; JP 62-106016A2; JP 62-106017A2; JP 61-246124; WO 98/50026; WO 99/43335; WO 0049009; WO 00/644438; WO 99/48496] . Mientras que se describen más de 700 isoflavonas que se presentan de manera natural, solamente una cuantas han sido confirmadas por tener beneficios terapéuticos potenciales en animales incluyendo humanos. Estas incluyen daidzeina, genisteina, formononetina, biochanina y gliciteina. Estas y todas las isoflavonas que se presentan de manera natural se encuentran en la naturaleza en forma monomérica ya sea en estado libre o más probablemente, unidas a una porción de carbohidratos (glicosidas ) . La isoflavonona debe ser separada de esta porción antes de ser biológicamente activa. Numerosos compuestos con una estructura relacionada con las isoflavonas de plantas que se presentan de manera natural, son también descritos como compuestos que tienen propiedades biológicas con beneficios terapéuticos potenciales para animales incluyendo humanos. Estos incluyen compuestos que son metabolitos de isoflavonas de plantas que se presentan de forma natural producidas por fermentación bacteriana por la flora del intestino e incluyen compuestos tales como equol y O-desmetilangolensina [WO 93/23069; WO 98/08503; WO 01/17986; WO 00/66576]. También se incluye en este grupo la ipriflavona isoflavonoide sintética que se desarrolló para el tratamiento de osteoporosis post-menopáusica [WO 91/14429] y un amplio intervalo de análogos de isoflavonoide sintético [WO98/08503] . A pesar de la considerable investigación y del conocimiento acumulado en relación con los compuestos isoflavonoides y derivados de los mismos, aún falta investigar el ámbito completo de los compuestos isoflavonoides útiles terapéuticamente y sus actividades. Además, existe una necesidad continua de nuevos agentes, mejorados o al menos alternativos para el tratamiento, profilaxis, mitigación, defensa en contra de y/o prevención de varias enfermedades y padecimientos. Existe por tanto, una necesidad de generar nuevos compuestos que muestren importantes propiedades fisiológicas para la salud y bienestar de animales, particularmente humanos y de encontrar nuevos métodos que exploten estas propiedades para tratar, mitigar y para la profilaxis de enfermedades . SUMARIO DE LA INVENCIÓN Sorprendentemente, los inventores de la presente descubrieron una nueva clase de moléculas basadas en los compuestos isoflav-4-ona e isof lavan-4-ona aminados. En particular los compuestos isoflavonoides aminados de la invención se relacionan con derivados de imina, hidrazona, semicarbazona, azina, oxima y amina de isoflav-4-onas e isof lavan-4-onas . Las actividades de los compuestos de la invención son sorprendentes y totalmente inesperados, aún en vista de lo que actualmente se conoce sobre los compuestos de isof lav-4-ona e isoflavan-4-onas, no aminados, a partir de los cuales estas se pueden derivar. Asi conforme a un aspecto de la presente invención se proporciona un compuesto de la fórmula general (I) : en donde Ri> Ri RJ R-4r R5, RÓ/ R7 y s son independientemente hidrógeno, hidroxi, OR9/ 0C(0)H, OC(0)R¾, OS(0)R¾, OSi(R10)3, C(0)Rn, CO2 12, alquilo, haloalquilo, arilo, arilalquilo, tio, alquiltio, amino, alquilamino, dialquílamino , nitro o halo, o cualquiera de los dos sustituyentes R2, R3 y R junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos forman una estructura alquilo cíclico, heteroalquilo cíclico, arilo o heteroarilo-, Rg es alquilo, haloalquilo, arilo, arilalquilo o alquilarilo, R:o es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, Rn es hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo, arilalquilo o un amino ácido, y R12 es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, arilo, arilaquilo o alquilarilo, X es 0, R12 o S, Z es R13 , NRi4R15 , N R1 3CONR1 R15 , N=CR1 6Ri7 o bien, OR13, R13, R14 y R15 son independientemente hidrógeno, amino, tio, nitro, ciano; o alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente sustituidos, o los sustituyentes R14 y R15 junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman una estructura heteroaromática o un heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido, y Ri6 y R17 son independientemente hidrógeno, amino, tio, nitro, ciano; o alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente sustituidos, o los sustituyentes R1 6 y R17 tomados juntos con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isoflavonoide opcionalraente sustituido, o cuando X es NRi2, el sustituyente R12 puede ser un enlace de tal forma que R8 y X junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos forman una de las siguientes estructuras: en donde Y es: R-y en donde if 2, 3, P-ir R Rbr R? , a y Z son como antes se definieron, y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un enlace doble, Los cuales compuestos incluyen las sales y derivados aceptables farmacéuticamente de los mismos. Conforme a otro aspecto de la presente invención se proporciona un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula (I) que comprende la etapa de hacer reaccionar el grupo 4-ceto de un compuesto de la fórmula (X) : en donde Rif R2, R3r R;f 5, f./ R7, R8 y X son como antes se definieron, y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un doble enlace, con un agente aminado. Sorprendentemente, los inventores de la presente han encontrado que los derivados isoflavonoides aminados de la fórmula general (I) tienen una utilidad particular y efectividad en la regulación de una variedad de objetivos moleculares en células animales y que estos objetivos moleculares están intimamente involucrados en los procesos de transducción de señales que son fundamentales para procesos celulares críticos tales como crecimiento, diferenciación, migración y muerte celular. Se encontró que los compuestos aminados de la presente invención regulan una amplia variedad de procesos de transducción de señales dentro de células animales y que estos procesos de transducción de señales están involucrados en una amplia gama de funciones que son vitales para la supervivencia y función de todas las células animales. Por tanto, estos compuestos tienen un amplio intervalo e importantes beneficios en la salud de animales incluyendo humanos y en particular, tienen el potencial para evitar y tratar enfermedades, padecimientos y funciones humanas comunes e importantes. Los beneficios particulares de esta invención recaen en (a) una amplia gama de procesos de transducción de señales, que son un objetivo de los compuestos, (b) el hecho de que la regulación de estos varios procesos incluye tanto la sobre-regulación de algunos procesos como la sub-regulación de otros, y (c) que tal efecto amplio y variado en los procesos de transducción de señales también esté acompañado de un efecto independiente en una gama de importantes enzimas que son fundamentales para el metabolismo y la esteroidogénesis .

Asi de conformidad con otro aspecto de la presente invención se proporciona un método para el tratamiento, profilaxis o mitigación de una enfermedad o padecimiento, el cual método incluye la etapa de administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado del mismo a un sujeto. En particular, la presente invención proporciona un método para tratamiento, prevención o mitigación de enfermedades asociadas con la supervivencia de células aberrantes, proliferación de células aberrantes, migración de células anormales, angiogénesis anormal, equilibrio anormal de estrógeno/andrógeno o génesis anormal o disfuncional de esteroides, degeneración que incluye cambios degenerativos dentro de las paredes de vasos sanguíneos, inflamación y desequilibrio inmunológico, que comprende administrar a un sujeto uno o más compuestos de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado del mismo opcionalmente asociado con un portador y/o excipiente. De conformidad con otro aspecto de la presente invención se proporciona un método para inducir la apoptósis en células que expresan un fenotipo pro-supervivencia anormal que comprende poner en contacto dichas células con uno o más compuestos de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado del mismos opcionalmente en asociación con un portador o excipiente. De conformidad . con otro aspecto de la invención se proporciona un método para inhibir la migración de células que tienen un fenotipo de migración celular anormal el cual comprende poner en contacto dichas células con un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado del mismo opcionalmente en asociación con un portador o excipiente. De conformidad con otro aspecto de la invención se proporciona un método para inhibir la angiogénesis en tejido que expresa un fenotipo angiogénico anormal, que comprende poner en contacto el tejido con un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado del mismo opcionalmente en asociación con un portador o excipiente . De conformidad con otro aspecto de la invención se proporciona un método para el tratamiento, prevención o alivio de cáncer en mamíferos, que comprende la etapa de llevar un compuesto de fórmula (I) o una sal o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, en contacto con tejido canceroso en un mamífero que sufre de un tumor tal que el desarrollo neoplásico en tal tejido canceroso es retrasado o detenido. f De conformidad con otro aspecto de la presente invención se proporciona el uso de uno o más compuestos de fórmula (I) o una sal o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o padecimiento. De conformidad con otro aspecto de la presente invención se proporciona un agente para el tratamiento, profilaxis o mitigación de una enfermedad o padecimiento, agente que comprende de uno o más compuestos de fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo. De conformidad con otro aspecto de la presente invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de fórmula (I) o una sal o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo en asociación con uno o más portadores excipientes, auxiliares y/o diluyentes farmacéuticos . De conformidad con otro aspecto de la presente invención se proporciona una bebida o alimento que contiene uno o más compuestos de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o un derivado del mismo. En una modalidad particularmente preferida los compuestos aminados de la presente invención muestran la siguientes actividades terapéuticas: 1. Función anti-cáncer directa vía la inhibición de la transducción de señales, la regulación del ciclo celular y la inducción de la apoptósis. 2. Prevención del establecimiento de cáncer y la proliferación vía la inhibición de COX 3. Prevención del establecimiento de cáncer y la proliferación vía la inhibición especifica de la ' alfareductasa 4. Efectos anti-inflamatorios . Estos y otros aspectos de la invención se harán evidentes a partir de la siguiente descripción y reivindicaciones, junto con los dibujos que se acompañan. A través de la siguiente descripción y reivindicaciones, a menos que el contexto lo requiere de otra forma la palabra "comprende" y las variaciones de la misma tales como "que comprende" o "que comprenden" se entenderá que implican la inclusión de un número entero estable o grupo de enteros o etapas pero sin excluir ninguno de los otros enteros o etapas o grupo de enteros o etapas/ BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 representa curvas de citotoxicidad para los compuestos 1 y 3 en contra de lineas de tumores seleccionados LNCaP, DU145 y NCI-H460 como sigue: La Gráfica A Comp. 1/LNCaP La Gráfica B Comp. 1/DU145 La Gráfica C Comp. 3/LNCaP La Gráfica D Comp. 3/NCI-H460 La Figura 2 representa la inhibición de testosterona inducida por la proliferación de LNCaP inducida por el compuesto 1 (Gráfica A) y el compuesto 2 y el compuesto 3 (Gráfica B) . La Figura 3 representa un perfil de inhibición de testosterona inducida por la proliferación de LNCaP inducida por el compuesto 1, el compuesto 2 y el compuesto 3. La Figura 4 representa la inhibición de la actividad de COS (PGE 3) y tromboxano sintasa (TBXZ) por el compuesto 1, el compuesto 2 y el compuesto 3. La Figura 5 representa el espectro de r.m.n. H1 (acetona d6) del compuesto 1. La Figura 6 representa el espectro de r.m.n. H1 (acetonitrilo d3) del compuesto 2.

La Figura 7 representa el espectro de r.m.n. H1 (acetonitrilo d3) del compuesto 3.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los compuestos aminados de la presente invención se basan en los compuestos de isoflavona y derivados de los mismos. El término "isoflavona" se utiliza en la presente de la manera más amplia para incluir moléculas de benzopirano fusionadas al anillo que tienen un grupo fenilo pendiente del anillo .pirano basado en un sistema 1, 2-difenilpropano . Asi, las clases de compuestos generalmente referidas como isoflavonas, isoflavenos, isoflavanos, isoflavanonas, isoflavonoles y similares están genéricamente referidos en la presente como derivados de isoflavonas, isoflavona o moléculas de isoflavonoides , compuestos o derivados. El término "alquilo" se toma para incluir grupos alquilo saturados de cadena recta, ramificada y cíclica (en el caso de 5 carbones o más), de 1 a 10 átomos de carbono, de preferencia 1 a 6 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, secbutilo, butilo terciario, pentilo, ciclopentilo y los similares. El grupo alquilo es más preferentemente metilo, etilo, propilo o isopropilo. El grupo alquilo puede estar sustituido opcionalmente por uno o más de flúor, cloro, bromo, yodo, carboxilo, alcoxicarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, alquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, di- (alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) aminocarbonilo, hidroxilo, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, formiloxi, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-carboniloxi, alquiltio de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o fenilo. El término "alquenilo" incluye hidrocarbonos de 2 a 10 átomos de carbono de cadena lineal, ramificada y cíclica (en el caso de 5 carbonos o más) , de preferencia de 2 a 6 átomos de carbono, con al menos un doble enlace tal como etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, 2-metil-l-propenilo, 2-metil-2-propenilo y los similares. El grupo alquenilo es más preferentemente etenilo, 1-propenilo o 2-propenilo. Los grupos alquenilo opcionalmente pueden estar sustituidos por uno ó más de flúor, cloro, bromo, yodo, carboxilo, alcoxicarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, carbonil-alquilamino Ci a C , di- (alquilo de Ci a C4) -aminocarbonilo, hidroxilo, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, formiloxi, alquilo de Ci a C^-carboniloxi , alquiltio de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o fenilo. El término "alquinilo" incluye hidrocarburos de 2 a 10 átomos de carbono tanto de cadena lineal como ramificada, de preferencia de 2 a 6 átomos de carbono con al menos un triple enlace tal como etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo y los similares. El grupo alquinilo más preferentemente es etinilo 1-propinilo o 2-propinilo. El grupo alquinilo puede estar sustituido opcionalmente por uno 0 más de flúor, cloro, bromo, yodo, carboxilo, alcoxicarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo, di- (alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) -amino-carbonilo, hidroxilo, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, formiloxi, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-carboniloxi , alquiltio de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 o fenilo. El término "arilo" se toma para incluir fenilo, bifenilo y naftilo y puede estar opcionalmente sustituido por uno o más de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, carbonilo, alcoxicarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, alquilcarboniloxi de 1 a 4 átomos de carbono, nitro o halo. El término "heteroarilo" se toma para incluir anillos de 5 miembros y de 6 miembros que incluyen por lo menos un átomo de oxigeno, azufre o nitrógeno en el anillo, anillo que puede estar opcionalmente fusionado a otros anillos heteroarilo o arilo incluyendo pero sin limitarse a furilo, piridilo, pirimidilo, tienilo, imidazolilo, tetrazolilo, pirazinilo, benzofuranilo, benzotiofenilo, quinolilo, isopuinolilo, purinilo, morfolinilo , oxazolilo, tiazolilo, pirrolilo, xantinilo, purina, timina, citosina, uracilo e isoxazolilo. El grupo del heteroátomo puede estar opcionalmente sustituido por uno o más de flúor, cloro, bromo, yodo, carboxilo, nitro, alcoxicarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, alquilamino de Ci a Cq-carbonilo, di- (alquilo de CL a C4 ) -amino-carbonilo , hidroxilo, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, formiloxi, alquilo de C: a C4-carboniloxi, alquiltio de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o fenilo. El heteroátomo puede estar parcial o totalmente hidrogenado según se deseé. El término "halo" se toma para incluir flúor, cloro, bromo y yodo, de preferencia flúor y cloro, más preferentemente flúor. La referencia por ejemplo, "haloalquilo" incluirá grupos alquilo monohalogenados, dihalogenados y hasta perhalogenados . Los grupos haloalquilo preferidos son trifluorometilo y pentafluoroetilo ÷ Los grupos opcionalmente sustituidos son aquellos grupos en donde uno o más hidrógenos han sido independientemente remplazados por hidroxi, alcoxi, acilo, tio, alquiltio, ciano, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, halo o carboxi . Los inventores de la presente han descubierto una nueva clase de moléculas basada en derivados isoflavonoides aminados. La invención se relaciona a la sustitución del grupo 4-ceto de los compuestos isoflavona e isoflavanona por fracciones basadas en nitrógeno. En particular, los derivados de isoflavona aminados se refieren a iminas, hidrazonas, semicarbazonas , azinas y oximas como se ilustra por las fórmulas generales (II) a (VIII) : en donde Ri, R?, R3, R4, R5, Rer R? Y Rs son independientemente hidrógeno, hidroxi, ORs, OC(0)Rg, 0S(0)Rg, alquilo, arilo, arilalquilo, tio, alquiltio, bromo, cloro o flúor, R9 es alquilo, fluoroalquilo, arilalquilo, i3 14 y R15 son independientemente hidrógeno, amino, ciano, tio, nitro u alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente sustituidos o los sustituyentes R14 y R15 juntos con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido o una estructura heteroaromática , Ríe y R17 son independientemente hidrógeno, amino, ciano, tio, nitro, o alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente substituidos o los sustituyentes RIÓ y Ri7 tomados juntos con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isof lavonoide opcionalmente sustituidos; y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un enlace doble; más preferentemente tienen los siguientes sustituyentes, en donde Ri es hidrógeno, R3 Rt y Re son independientemente hidrógeno, hidroxi, 0R9, OC(0)Rg, alquilo, arilo o arilalquilo; R4 y R-7 son independientemente hidroxi, 0R9, ó 0C(0) R9, R9 es metilo, etilo, propilo, isopropilo o trifluorometilo, y i3, 14 y 15 son independientemente hidrógeno, metilo, etilo, propilo, isopropilo, trifluorometilo; o fenilo, naftilo o bencilo opcionalmente sustituidos; o los sustituyentes R14 y R15 juntos con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman una estructura heteroaromática o un heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido, y Ri6 y Rn son independientemente hidrógeno, metilo, etilo, propilo, isopropilo, trifluorometilo; o fenilo, naftilo o bencilo opcionalmente sustituido; o los sustituyentes Ri¿ y Ri7 tomados junto con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isoflavonoide opcionalmente sustituido, y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un enlace doble; y más preferentemente tienen los siguientes sustituyentes en donde: Ri, es hidrógeno, R2, R3, R5, Re y Rs son independientemente hidrógeno, hidroxi, OR9, OC(0)R9 o metilo, R4 y R7 son independientemente hidroxi, OR9 o OC(0)R9, Rg es metilo, R13 es hidrógeno, metilo, etilo, trif luorometilo, fenilo, clorofenilo, nitrofenilo, toluilo, naftilo, bencilo, clorobencilo, nitrobencilo o metilbencilo, R14 es hidrógeno y R15 es hidrógeno, metilo, etilo, trifluorometilo, fenilo, clorofenilo, nitrofenilo, toluilo, naftilo, bencilo, clorobencilo, nitrobencilo o metilbencilo, o los sustituyentes Ri4 y R15 junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman una estructura heteroaromática o heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido, i6 y 17 son independientemente hidrógeno, metilo, etilo, trifluorometilo, fenilo, clorofenilo, nitrofenilo, toluilo, naftilo, bencilo, clorobencilo, nitrobencilo o metilbencilo o los sustituyentes RIÉ y R17 tomados junto con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isoflavonoide opcionalmente sustituido, y el dibujo " " representa un enlace sencillo. Más preferiblemente, los isoflavonoides aminados novedosos de fórmula (I) son compuestos (1) a (14) , como sigue: ?? Los compuestos de la invención incluyen todas las sales, tales como sales de adición de ácido, sales aniónicas y sales zwiteriónicas, y en particular incluyen sales aceptables farmacéuticamente. Pueden usarse técnicas como la protección del grupo funcional químico, la desprotección, sintones y otras técnicas conocidas por aquellos expertos en el arte en donde sea apropiado para ayudar en la síntesis de los compuestos de la presente invención y sus materiales de partida. Los compuestos preferidos de la presente invención también incluyen todos los derivados con grupos salientes que se desdoblan o disocian fisiológicamente que pueden ser disociados in vivo a partir de la isoflavona o de la molécula derivada a la cual se encuentra unida. Los grupos salientes incluyen acilo, fosfato, sulfato, sulfonato y de preferencia son compuestos mono-, di- y per-acilo oxi-sustituidos , en donde uno o más de los grupos hidroxi colgantes están protegidos por un grupo acilo, de preferencia un grupo acetilo. Típicamente las isoflavonas aciloxi sustituidas y sus derivados son fácilmente disociables a los compuestos hidroxi sustituidos correspondientes. Además, la protección de los grupos funcionales en los compuestos de isoflavona y derivados de la presente invención puede ser llevada a cabo por medio de métodos bien establecidos en el arte, por ejemplo, como se describe en T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1981. Los compuestos de partida de isoflavona e isoflavanona más preferidos contemplados para usarse de conformidad con la invención incluyen formononetina , biochanina, genisteina, daidzeina y equol, y derivados funcionales, equivalentes o análogos de los mismos. De manera similar los compuestos importantes son los metabolitos de isoflavona que incluyen dihidrodaidzeina , cis- y trans-tetrahidrodaidzeina y dehidro-equol y derivados y profármacos de los mismos. Los equivalentes químicos y funcionales de una isoflavona en particular deben entenderse como moléculas que muestran cualquier actividad funcional adicional de la isoflavona y pueden ser derivadas a partir de cualquier fuente tal como ser sintetizadas químicamente o identificadas vía procesos de selección tal como la selección natural del producto . El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una porción orgánica o inorgánica que lleva una carga y que puede ser administrada en asociación con un agente farmacéutico, por ejemplo, como un contra-catión o un contraanión en una sal. Los cationes aceptables farmacéuticamente son conocidos para expertos en el arte, e incluyen pero no se limitan a sodio, potasio, calcio, zinc y amina cuaternaria. Los aniones aceptables farmacéuticamente son conocidos para expertos en el arte, e incluyen pero no se limitan a cloruro, acetato, citrato, bicarbonato y carbonato. El término "derivado farmacéuticamente aceptable" o "profármaco" se refiere a un derivado del compuesto activo que al administrarse al recipiente, es capaz de proporcionar directa o indirectamente, el compuesto original o metabolito, o que muestra actividad por sí mismo. Como se usan en la presente, los términos "tratamiento", "profilaxis", "prevención", "alivio" y similares deben interpretarse en su más amplio contexto. En particular, el término "tratamiento" no necesariamente implica que un animal es tratado hasta su recuperación total. Por lo tanto, "tratamiento" incluye la mejoría de los síntomas o de la severidad de una condición particular o la prevención o de otra manera la disminución del riesgo de desarrollar una condición particular. La cantidad de uno o más compuestos de fórmula (I) que se requiere en un tratamiento terapéutico, de conformidad con la invención, dependerá de un gran número de factores, que incluyen la aplicación específica, la naturaleza del compuesto en particular usado, la condición a ser tratada, la forma de administración y la condición del paciente. Los compuestos de la fórmula (I) pueden ser administrados de una manera y cantidad como sea convencionalmente practicado. Ver, por ejemplo, Goodman y Gilman, "The pharmacological basis of therapeutics", 7th Edition, (1985) . La dosis específica utilizada dependerá de la condición a ser tratada, del estado del sujeto, de la vía de administración y de otros factores bien conocidos como se indicaron anteriormente. En general, una dosis diaria por paciente puede estar en el intervalo de 0.1 mg a 5 g; típicamente de 0.5 mg a 1 g; de preferencia de 50 mg a 200 mg . La proporción de la dosis puede variar desde una sola dosis dada una vez al día o dos, a dos o tres dosis diarias proporcionadas en el transcurso de desde una semana a muchos meses a muchos años según se requiera, dependiendo de la severidad de la enfermedad a ser tratada o aliviada. Se entenderá además que para cualquier sujeto en particular, los regímenes de dosis específicas deben ser ajustados con respecto a tiempo de conformidad a las necesidades individuales y al juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones. Loa tratamientos de término relativamente corto con los compuestos activos puede usarse para causar la estabilización o disminución de lesiones de enfermedades de arterias coronarias que no pueden ser tratadas ya sea por angioplastía o cirugía. Los tratamientos a más largo plazo pueden ser empleados para evitar el desarrollo de lesiones avanzadas en pacientes de alto riesgo. La producción de composiciones farmacéuticas para el tratamiento de las indicaciones terapéuticas aquí descritas son típicamente preparadas mezclando los compuestos de la invención (por conveniencia de aquí en adelante referidos como "compuestos activos") con uno o más portadores y/o excipientes farmacéutica o veterinariamente aceptables que son bien conocidos en el arte. Los portadores deben, por supuesto, ser aceptables en el sentido de ser compatibles con cualquier otro ingrediente en la formulación y no deben de ser nocivos para el sujeto. El portador o excipiente puede ser un sólido o un líquido, o ambos y está formulado preferiblemente con el compuesto como una dosis unitaria, por ejemplo, una tableta que puede contener hasta 100% en peso del compuesto activo, de preferencia de 0.5% a 59% por peso del compuesto activo. Uno o más compuestos activos pueden ser incorporados en las formulaciones de la invención, que pueden prepararse por cualquiera de las técnicas bien conocidas en farmacia que consisten esencialmente de mezclar los componentes, opcionalmente incluyendo uno o más ingredientes secundarios. La concentración preferida del compuesto activo en la composición de fármaco dependerá de la absorción, distribución, inactivación y velocidades de excreción del fármaco asi como de otros factores conocidos por aquellos expertos en el arte. Las formulaciones de la invención incluyen aquellas apropiadas para administración oral, rectal, ocular, bucal (por ejemplo sublingual), parenteral (por ejemplo subcutánea, intramuscular, intradérmica o intravenosa) , administración transdérmica, incluyendo la administración a la mucosa vía la nariz, boca, vagina o recto y como inhalantes, aunque la vía más apropiada en cualquier caso dependerá de la naturaleza y de la severidad de la enfermedad que esté siendo tratada y de la naturaleza del compuesto activo particular que se esté usando . La formulación apropiada para administración oral puede presentarse en unidades discretas tales como cápsulas, bolsitas, grageas o tabletas, cada una conteniendo una cantidad predeterminada del compuesto activo; como un polvo o gránulos; como una solución o una suspensión en un liquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión de aceite-en-agua o agua-en-aceite . Tales formulaciones pueden prepararse por medio de cualquier método apropiado de farmacia que incluye la etapa de llevar en asociación el compuesto activo y un portador apropiado (el cual puede contener uno o más ingredientes secundarios como se hizo notar anteriormente) . En general, las formulaciones de la invención son preparadas mezclando el compuesto activo uniforme e intimamente con un liquido o con un portador sólido finamente dividido, o ambos, y después, si es necesario, conformar la mezcla resultante de tal manera para formar una dosis unitaria. Por ejemplo, se puede preparar una tableta comprimiendo o moldeando un polvo o gránulos que contengan el compuesto activo, opcionalmente con uno o más ingredientes secundarios. Las tabletas comprimidas pueden ser preparadas comprimiendo, en una máquina apropiada, el compuesto de flujo libre, tal como un polvo o gránulos opcionalmente mezclados con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte y/o agente (s) dispersante (s) / tensioactivo (s) . Las tabletas moldeadas pueden prepararse moldeando, en una máquina apropiada, el compuesto en polvo humectado con un aglutinante liquido inerte.

Las formulaciones adecuadas para administración bucal (sublingual) incluyen grageas que comprenden el compuesto activo en una base con sabor, generalmente sacarosa y acacia o tragacanto; y pastillas que comprenden el compuesto en una base inerte tal como gelatina y glicerina o sacarosa y acacia . Las formulaciones apropiadas para la administración ocular incluyen líquidos, geles y cremas que comprenden el compuesto activo en un portador o diluyente aceptable ocularmente. Las composiciones de la presente invención apropiadas para administración parenteral comprenden convenientemente preparaciones acuosas estériles de los compuestos activos, preparaciones que son de preferencia isotónicas con la sangre del paciente tratado. Estas preparaciones se administran preferiblemente de manera intravenosa, aunque la administración también puede ser efectuada por medio de inyecciones subcutánea, intramuscular o intradérmica . Tales preparaciones pueden ser preparadas convenientemente mezclando el compuesto con agua o un amortiguador de glicina y haciendo que la solución resultante sea estéril e isotónica con la sangre. Las formulaciones inyectables de conformidad con la presente invención generalmente contienen de 0.1% a 60% peso/volumen del compuesto activo y se administran a una velocidad de 0.1 ml/minuto/kg.

Las formulaciones apropiadas para administración rectal se presentan preferiblemente como supositorios por unidad de dosis. Las formulaciones apropiadas para administración vaginal se presentan, de preferencia, como supositorios vaginales de dosis unitaria. Estos pueden prepararse mezclando el compuesto activo con uno o más portadores sólidos convencionales, por ejemplo, manteca de cacao y, posteriormente conformando la mezcla resultante. Las formulaciones o composiciones apropiadas para administración tópica a la piel, preferiblemente están en la forma de un ungüento, crema, loción, pasta, gel, atomizador, aerosol o aceite. Los portadores que pueden ser utilizados incluyen Vaselina, lanolina, glicoles de polietileno, alcoholes y combinación de dos o más de los mismos. El compuesto activo está presente generalmente en una concentración de desde 0.1% a 5% peso/peso, más particularmente de 0.5% a 2% peso/peso. Ejemplos de tales composiciones incluyen cremas cosméticas para la piel. Las formulaciones apropiadas para administración transdérmica pueden presentarse como parches discretos adaptados para permanecer en contacto intimo con la epidermis del paciente por un periodo de tiempo prolongado. Tales parches contienen apropiadamente el compuesto activo como una solución acuosa opcionalmente amortiguada con una concentración de, por ejemplo, 0.1M a 0.2M con respecto al compuesto activo. Ver por ejemplo Brown L. et . al (1998) . Las formulaciones apropiadas para administración transdérmica también puede*n ser proporcionadas por iontoforésis (ver, por ejemplo Panchagnula R, et al., 2000) y generalmente toman la forma de una solución acuosa opcionalmente amortiguada del compuesto activo. Formulaciones apropiadas comprenden citrato o amortiguador Bis/Tris (pH 6) o etanol/agua y contienen de 0.1M a 0.2M de ingrediente activo . Las formulaciones apropiadas para inhalación pueden ser suministradas como una composición para nebulizar en la forma de una solución, suspensión o emulsión. La composición en nebulizador para inhalación puede comprender además un propelente farmacéuticamente aceptable, tal como dióxido de carbono u óxido nitroso. Los compuestos activos pueden proporcionarse en la forma de alimentos, tales como ser adicionados a, mezclados en, recubiertos, combinados o agregados de alguna otra forma a los alimentos. El término alimento se usa en el sentido más amplio posible e incluye formulaciones liquidas tales como bebidas incluyendo productos de consumo diario y otros alimentos tales como barras dietéticas, postres, etc. Las formulaciones alimenticias contienen compuestos de la invención que pueden ser preparados fácilmente conforme a las prácticas estándar.

Los métodos terapéuticos, usos y composiciones pueden ser para administración a humanos o animales, incluyendo mamíferos tales como animales domésticos y mascotas (tales como perros y gatos) y animales de granero (tales como ganado, ovejas, cerdos y cabras), aves (tales como gallina, pavos, patos) , animales marinos que incluyen aquellos de acuacultivo (tales como pescados, crustáceos y animales marinos de concha o caparazón) y similares. El compuesto activo o los profármacos derivados aceptables farmacéuticamente o sales de los mismos, también pueden ser coadministrados con otros materiales activos que no perjudican la acción deseada o con materiales que adicionan la acción deseada tales como antibióticos, compuestos anti-fúngicos , anti-inflamatorios o antivirales. El agente activo puede comprender dos o más isoflavonas o derivados de las mismas en combinación o en mezcla sinérgica. Los compuestos activos también pueden administrarse con agentes para disminuir lípidos tales como probucol y ácido nicotínico; inhibidores de la agregación de plaquetas tal como la aspirina; agentes anti-trombóticos, tales como coumadina; bloqueadores del canal de calcio tales como verapamil, diltiazem y nifedipina; inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (ACE) tales como captopril y enalapril, y bloqueadores-ß tales como propanolol, terbutalol y labetalol. Los compuestos también pueden ser administrados en combinación con anti-inflamatorios no esteroidéos tales como ibuprofén, indometacina , aspirina, fenoprofén, ácido mefenámico, ácido flufenámico y sulindac. Los compuestos también pueden administrarse con corticoesteroides. La co-administración puede ser simultánea o secuencial.

La administración simultánea puede efectuarse por medio de los compuestos que están en la misma dosis unitaria o en dosis unitarias individuales y discretas en tiempos iguales o similares. La administración secuencial puede ser en cualquier orden según se requiera y generalmente, requerirá un efecto fisiológico concomitante del agente activo primero o inicial a ser común cuando se administre el segundo o el último agente activo, especialmente cuando se desea un efecto sinérgico o acumulativo. Los compuestos de isoflavona e isoflavanona para usarse en los métodos sintéticos preferidos de la presente invención pueden derivarse a partir de cualquier número de fuentes fácilmente identificables para una persona versada en el arte. De preferencia, las isoflavonas se obtienen en la forma de concentrados o extractos a partir de fuentes vegetales. Nuevamente, aquellos expertos en el arte serán capaces de identificar fácilmente especies vegetales adecuadas, sin embargo, por ejemplo, las plantas de uso particular en la invención incluyen plantas leguminosas. Más preferentemente, el extracto de isoflavona se obtiene a partir de garbanzo, lentejas, frijoles, trébol rojo o especies de trébol subterráneo y similares. Los extractos de isoflavona pueden prepararse por cualquier número de técnicas conocidas en el arte. Por ejemplo, los extractos de isoflavona apropiados pueden prepararse mediante extracción con solventes acuosos/ orgánicos a partir de una fuente vegetal. Se apreciará que puede prepararse un extracto de isoflavona a partir de cualquier tejido simple de una sola especie de planta o de una combinación de dos o más tejidos diferentes de la misma. Análogamente un extracto puede prepararse a partir de un material de partida que contenga una mezcla heterogénea de tejidos de dos o más especies diferentes de plantas. En general, cuando se prepara un extracto de isoflavona a partir de un material vegetal, el material debe ser triturado o cortado en piezas más pequeñas, parcialmente triturado o cortado en piezas más pequeñas y puestos en contacto con agua y con un solvente orgánico, tal como un solvente orgánico miscible en agua. De manera alternativa, el material vegetal se pone en contacto con agua y con un solvente orgánico sin necesidad de ningún pre-tratamiento . La proporción de agua con respecto al solvente orgánico puede estar generalmente, en el intervalo de 1:10 a 10:1 y puede, por ejemplo, comprender proporciones iguales de agua y solvente, o desde 1% a 30% (v/v) de solvente orgánico.

Cualquier solvente orgánico o una mezcla de tales solventes puede ser utilizada. El solvente orgánico puede ser preferiblemente un solvente orgánico de C2-10 más preferiblemente, un solvente orgánico de C1-4 (tal como metanol, cloroformo, etanol, propanol, propilénglicol , eritritol, butanol, butanodiol, acetonitrilo, etilénglicol , acetato de etilo, glicidol, glicerol dihidroxiacetona o acetona) . Opcionalmente la mezcla de solvente orgánico/agua puede incluir una enzima que desdobla glicósidos de isoflavona a la forma aglicona. La mezcla puede ser agitada vigorosamente de tal manera de formar una emulsión. La temperatura de la mezcla puede variar, por ejemplo, de una temperatura ambiente a la temperatura de ebullición. El tiempo de exposición puede estar entre una hora a varias semanas. Un periodo de extracción conveniente es de 24 horas a 90°C. El extracto puede ser separado de una material vegetal no disuelto y el solvente orgánico eliminado, tal como por destilación, evaporación giratoria u otros procedimientos estándar para la eliminación del solvente. El extracto resultante que contiene componentes solubles en agua y componentes no solubles en agua puede ser secado para dar un extracto que contiene isoflavona, el cual puede ser formulado con uno o más portadores excipientes y/o auxiliares aceptables farmacéuticamente, conforme a la invención. Un extracto preparado de conformidad con la presente descripción proporcionada en los párrafos anteriores puede contener pequeñas cantidades de aceite que incluye isoflavonas y su forma aglicona (referida en la presente como isoflavonas) . Este aceite enriquecido de isoflavona puede ser sometido a HPLC para ajusfar las proporciones de isoflavona, o si es a la proporción deseada de isoflavona puede ser secada, por ejemplo en presencia de sílice, y ser formulada con uno o más portadores, excipientes y/o auxiliares para dar un extracto que contiene isoflavona. De manera alternativa, las isoflavonas contenidas en dichas pequeñas cantidades de aceite pueden concentrarse más por la adición al aceite de un solventes orgánico no soluble en agua tal como hexano, heptano, octano, acetona o una mezcla de uno o más de tales solventes. Un ejemplo es 80% de hexano, 20% de acetona peso/peso que tiene una alta solubilidad para aceites pero una baja solubilidad para isoflavonas. El aceite se distribuye fácilmente en el solvente orgánico y un extracto enriquecido que contiene isoflavona cae fuera de la solución. El extracto recuperado puede secarse, por ejemplo en un horno a 50°C a alrededor de 120°C, y formularse con uno o más portadores, excipientes y/o auxiliares aceptables farmacéuticamente, . Se apreciará que la presente invención también contempla la producción de isoflavonas de partida apropiadas, derivados funcionales, equivalentes o análogos de las mismas, por medio de técnicas sintéticas establecidas bien conocidas en el arte. Ver, por ejemplo, Chang et al. (1994) que describe métodos apropiados para la síntesis de diversas isoflavonas como materiales de partida. Otros métodos apropiados pueden encontrarse en, por ejemplo, las solicitudes de Patente Internacional publicadas como WO 98/08503 y WO 00/49009 y en las referencias citadas en las mismas, las cuales están incorporadas en la presente en su totalidad como referencia. Función Celular Todas las funciones celulares bajo el control de innumerable señales se derivan ya sea de células distantes (señales endocrinas) , células vecinas (señales paracrinas) o a partir del interior de la misma célula (señales autócrinas). Estas diversas señales trabajan ampliamente estimulando el genoma de la célula (ADN) a partir del cual se inicia la respuesta celular apropiada. El proceso por medio del cual se transmite la señal al genoma se conoce como transducción de señal. Por esto, se entiende vías, la mayoría involucra diferentes proteínas, en donde la activación de una proteína cataliza la respuesta de otra proteína, resultando finalmente en la transcripción de un gen en particular o de un conjunto de genes. La homeostasis, por la cual se entiende el funcionamiento integrado de células, tejidos y órganos que resulta en una buena salud, es el producto final de cientos, tal vez miles de distintas señales que entran a las células del cuerpo en una base continua. A partir de este medio de señalamiento, es posible dividir las señales arbitrariamente en aquellas que están relacionadas a una 'función especializada' y aquellas que están relacionadas a la habilidad fundamental de la célula para existir y para funcionar. Ejemplos de 'funciones especializadas' son la percepción del dolor por una célula nerviosa, la producción de anticuerpos por una célula inmune, las reacciones de desintoxicación por una célula hepática o la formación de orina por una célula de riñon. Ejemplos de "funciones esenciales" son la supervivencia de las células o la muerte celular, la proliferación de células, la migración de células y la angiogénesis . Puede verse que la clave para regular si o no una célula es capaz de desarrollar 'funciones especializadas' es la regulación de las 'funciones esenciales' de las células. Los solicitantes han encontrado que los compuestos de la fórmula (I) regulan muchas de las 'funciones esenciales' de las células. Las siguientes son algunos ejemplos de las 'funciones esenciales' que los inventores han encontrado que son reguladas por los compuestos aminados de la presente invención . 1. Supervivencia/Muerte Celular A efecto de continuar la función, incluyendo la capacidad de responder a las funciones especializadas, las células necesitan estar activando continuamente los mecanismos de transducción de señales pro-supervivencia. Los mecanismos de pro-supervivencia actúan en dos niveles principales - aquellos que promueven activamente la supervivencia y aquellos que suprimen activamente la muerte celular (apoptósis). Los mecanismos de pro-supervivencia involucran numerosos procesos diferentes de transducción de señales que finalmente causan la transcripción de ciertos genes cuyo productos finales promueven la supervivencia celular. Estos diferentes procesos involucran, pero se limitan a, tales objetivos o blancos moleculares tales como MEK, ERK y NFKB. Se ha descubierto que el fenoxodiol opera a través de una gama de estos procedimientos. Uno en particular a forma de ejemplo es la enzima esfingosina quinasa. La esfingosina quinasa fosforila el sustrato, esfingosina, a esfingosina-l-fosfato . La esfingosina 1-fosfato es un estimulador importante de los mecanismos pro-supervivencia y está sobre-expresado en un intervalo de estados de enfermedades caracterizados porque involucran la longevidad incrementada de las células. Los derivados isoflavonoides aminados regulan disminuyendo la actividad de la esfingosina quinasa. La apoptósis puede ser lograda por numerosos mecanismos como sigue: (a) Un mecanismo involucra receptores conocidos como 'receptores de muerte' . Estos incluyen receptores tales como Fas/Mort, TGF y TNRF. La activación de receptores normalmente es suprimida a través de la producción de proteínas de bloqueo tales como c-flip. Se ha descubierto que los derivados isoflavonoides aminados bloquean la producción de c-flip y al hacerlo, promueven la muerte celular. (b) Otro mecanismo involucra la activación de enzimas proteolíticas conocidas como caspasas. Una vez activadas, estas enzimas autolisan la célula. Se ha descubierto que los derivados isoflavonoides aminados sobre regulan la actividad de las caspasas. (c) Otro mecanismo involucra la interrupción de la mitocondria que lleva a la producción de varios factores pro-muerte. Se ha descubierto que los derivados isoflavonoides aminados promueven tal interrupción a través de un efecto novedoso y directo en la mitocondria . Puede observarse a partir de la descripción anterior que los derivados isoflavonoides aminados son capaces de inducir la muerte celular en una forma entendible mediante numerosas vías diferentes. La capacidad de un único compuesto de tener tales efectos amplios y complementarios es novedoso. Pero es sorprendente el encontrar que los derivados isoflavonoides aminados influyen en tales efectos pro-muerte solamente en células anormales. Es decir, en células normales saludables, los derivados isoflavonoides aminados no tiene un efecto discernible en estos procesos de regulación. Las células que muestran actividades anormales de estos procesos de regulación incluyen pero no se limitan a células involucradas en tales condiciones patológicas como cáncer, enfermedades cardiovasculares, enfermedades autoinmunes y enfermedad con componentes hiperproliferativos o inflamatorios, inmunológicos . 2. Proliferación Celular La capacidad de dividir en respuesta a señales de desarrollo es otra función esencial requerida por células saludables, normales. La esfingosina-l-fosfato parece tener un papel clave en facilitar la capacidad de las células a dividirse. La acción de la división celular involucra numerosas enzimas diferentes como sigue: (a) la activación de topoisomerasas (I y II) cuya labor o tarea es organizar el ADN antes de la mitosis; (b) la activación de quinasas dependientes de ciclinas (CDKs) cuya labor es mover el genoma a través de diversas etapas de mitosis; (c) la inactivación de inhibidores de quinasas dependientes de ciclinas (CDKIs) cuya tarea es inhibir la mitosis a través de la supresión de CDKs. Los derivados isoflavonoides aminados sorprendentemente inhiben los 3 sistemas enzimáticos anteriores, viz. la topoisomerasa II, CKDs y CDKIs en células que están comportándose anormalmente, particularmente las células que expresan un fenotipo de pro-supervivencia anormal o la proliferación celular aberrante. 3. Migración celular Se entiende bien que la capacidad de una célula de migrar y de interactuar con sus células vecinas es fundamental para la salud y la enfermedad. La esfingosina quinasa y las metaloproteasas de matriz son factores de regulación clave de esta importante función celular. Los derivados isoflavonoides aminados solamente regulan disminuyendo ambos de estos sistemas enzimáticos, reduciendo asi la capacidad de las células a migrar en un estado patogénico . 4. Angiogénesis La capacidad de formar nuevos vasos sanguíneos es bien conocida por ser un evento clave fundamental de muchas enfermedades asociadas con hiperplasia. La esfingosina quinasa es un facilitador clave de este evento. Los derivados isoflavonoides aminados regulan disminuyendo esta enzima, deteriorando selectivamente la angiogénesis cuando ocurre en asociación con una enfermedad, y no en tejidos saludables.

Estos efectos de amplia gama de los derivados isoflavonoides aminados en mecanismos de transducción de señales son complementados sorprendentemente por efectos inhibitorios en una amplia gama de enzimas, tales enzimas no son normalmente consideradas como parte de los procesos de transducción de señales, sino de la fisiología de41 cuerpo en términos más generales. Estos efectos también incluyen los siguientes : 5. Esteroidogénesis Los derivados isoflavonoides aminados inhiben numerosas enzimas involucradas en la esteroidogénesis. Estas incluyen pero no se limitan a la deshidrogenasa esteroidea, 5-oc-reductasa y aromatasa. Aquellos expertos en el arte reconocerán que tales efectos tendrían un impacto importante en la producción de hormonas esferoides incluyendo andrógenos, estrógenos y corticoesteroides . Tales efectos serían considerados por alguien experto en el arte como en tener un impacto en la función normal del tejido reproductivo de macho y hembra incluyendo la mama, ovario, útero, endometrio, cerviz, vagina, próstata y pene. En resumen, los inventores han sorprendentemente encontrado que los derivados de isoflavonoides aminados regulan una colección única de enzimas involucradas en ambos, la función fisiológica y el metabolismo general, y en las vías de transducción de señales que tienen un papel crucial en la supervivencia celular, el desarrollo celular, la diferenciación celular y la respuesta celular a la inflamación y a moduladores inmunes. A través de la regulación de este grupo de enzimas, los compuestos de la invención tienen la capacidad de: (a) evitar o tratar muchas formas de enfermedades independientemente de la causa o patogénesis de esa enfermedad, y (b) influir en una amplia gama de actividades biológicas de los tejidos del cuerpo y en la forma en la cual la enfermedad, edad, influencias ambientales y otras fármacos influyen en aquellas actividades . Además, es sorprendente y novedoso encontrar que estos compuestos pueden provocar que una células de cáncer de mama humana sufra apoptósis y muera, también pueden tener diversos efectos como antagonizar la hipertensión, corregir el desequilibrio inflamatorio e inmunológico implícito en la enfermedad inflamatoria del intestino, invertir la diabetes Tipo I e invertir el patrón de la calvicie en el hombre. Fácilmente puede verse que los derivados isoflavonoides aminados de la presente invención tendrían una importancia particular en la prevención y en el tratamiento de diversos estados patogénicos y enfermedades como sigue: A. Enfermedades y padecimientos asociados con respuestas anormales a señales de crecimiento, proliferación celular anormal, apoptósis disfuncional y patrones de migración anormal (metástasis) Estos incluyen: 1. todas las formas de cáncer (pre-maligno, benigno y maligno) en todos los tejidos del cuerpo. A este respecto, los compuestos pueden usarse como la única forma de terapia en contra del cáncer o en combinación con otras formas de terapia anti-cáncer incluyendo pero sin limitarse a radioterapia y quimioterapia; 2. lesiones de piel papulonodular pero sin limitarse a sarcoidosis, angiosarcoma, sarcoma de Kaposi, Enfermedad de Fabry. 3. lesiones de piel papuloescamosa incluyendo pero sin limitarse a psoriasis, Enfermedad de Bowen y Enfermedad de Reiter; 4. enfermedades proliferativas de la médula ósea incluyendo pero sin limitarse a enfermedad megaloblástica , síndromes de mielodisplásia, policitemia vera, trombocitosis y mielofibrosis ; 5. enfermedades hiperplásicas del aparato reproductivo incluyendo pero sin limitarse a hiperplasia prostática benigna, endometriosis , fibroides uterinos y enfermedad poliquística ovárica. B. Enfermedades y padecimientos asociados con angiogénesis anormal Estas incluyen: 1. Enfermedades y padecimientos asociados con angiogénesis anormal afectando cualquier tejido dentro del cuerpo incluyendo pero sin limitarse a cáncer metastásico, psoriasis, hemangiomas y telangiectasia .

C. Enfermedades y padecimientos asociados con respuestas inmunológicas/inflamatorias anormales Estas incluyen: 1. enfermedades y padecimientos asociados con reacciones inflamatorias de naturaleza anormal o prolongada en cualquiera de los tejidos humanos del cuerpo incluyendo pero sin limitarse a artritis reumatoide, tendonitis, enfermedad del intestino inflamatoria, colitis ulcerativa, Enfermedad de Crohn, colángitis esclerosante; 2. enfermedades y padecimientos asociados con cambios degenerativos dentro de las paredes de los vasos sanguíneos incluyendo pero sin limitarse al síndrome conocido comúnmente como enfermedad cardiovascular (incluyendo las enfermedades de ateroesclerosis , ateroma, enfermedad de arterias coronarias, apoplejía, infarto al miocardio, restenosis post-angioplastía , enfermedad vascular hipertensiva, hipertensión maligna, tromboangeitis obliterante, displasia fibromuscular ) ; 3. enfermedades y padecimientos asociados con respuestas inmunológicas anormales incluyendo pero sin limitarse a dermatomiositis y escleroderma; 4 . desequilibrio inmunológico incluyendo deficiencia inmune asociada con V.I.H. u otros agentes infecciosos virales o agentes infecciosos bacterianos y deficiencias inmunes relacionadas a la inmadurez o envejecimiento. D. Enfermedades y padecimientos asociados con la disminución de la función celular incluyendo una respuesta deprimida a las señales de crecimiento y la velocidad de incremento de la muerte celular Estas incluyen: 1. daño actinico caracterizado por cambios degenerativos en la piel incluyendo pero sin limitarse a queratosis solar, enfermedades de fotosensibilidad y arrugamiento; 2. enfermedades autoinmunes caracterizadas por respuestas inmunológicas anormales incluyendo pero sin limitarse a esclerosis múltiple, diabetes Tipo I, lupus eritematoso sistémico y cirrosis biliar; 3. enfermedades neurodegenerativas y padecimientos caracterizados por cambios degenerativos en la estructura del sistema neurológico incluyendo pero sin limitarse a Enfermedad de Parkinson, Enfermedad de Alzheimer, distrofia muscular, Enfermedad de Lou-Gehrig, enfermedad motorneuronal ; . enfermedades y padecimientos asociados con cambios degenerativos dentro del ojo incluyendo pero sin limitarse a cataratas, degeneración macular, atrofia de la retina. E. Enfermedades y padecimientos asociados con esteroidogenesis anormal o disfuncional y la función de hormonas reproductivas Estas incluyen: 1. Condiciones en la mujer asociadas con el equilibrio estrógeno/andrógeno anormal incluyendo pero sin limitarse a mastalgia cíclica, acné, dismenorrea, fibroides uterinos, endometriosis, quistes ováricos, síndrome premenstrual, síntomas menopáusicos agudos, osteoporosís , demencia senil, infertilidad; 2. condiciones en el hombre asociadas con el equilibrio de estrógeno/andrógeno anormal incluyendo pero sin limitarse a hipertrofia prostética benigna, infertilidad, ginecomastia , alopecia hereditaria y varias otras formas de calvicie. Los efectos fisiológicos atribuidos a los derivados isoflavonoides aminados de la invención se relacionan en particular a las áreas generales de vías de transducción de señales, aplicaciones anti-cáncer, actividad antiinflamatoria y como agentes cardio-protectores . Más particularmente, los derivados isoflavonoides aminados de la invención muestran indicaciones terapéuticas amplias incluyendo, y en particular, actividad anti-cáncer vía la inhibición de la transducción de señales, regulación del ciclo celular e inducción de la apoptósis, antiangiogénesis (inhibición de MMP) , perturbación de la transducción de señales (inhibidor del receptor de la proteina tirosina quinasa) , inhibición COX, inhibición de la 5' -alfa reductasa, propiedades cardio protectoras y efectos anti-inflamatorios . Las áreas especificas de utilidad los compuestos de la presente invención se describen y ejemplifican como sigue: Anti-cáncer : En muchos países occidentales el adenocarcinoma prostético, secundario al cáncer de pulmón, es el padecimiento maligno más comúnmente diagnosticado en hombres y es la causa más común de muerte (Landis et al., 1999; Hsing. et al., 2000) . Las opciones establecidas del tratamiento para cáncer de próstata localizado, que incluyen la cirugía (prostatectomía radical) y la terapia de radiación, son curativas solamente en un 52% a 78% de los casos con la proporción restante de casos que sufren recaídas debidas a la enfermedad residual (Morris and Scher, 2000; Papatsoris y Papavassiliou, 2001) . Mientras los andrógenos tienen un papel importante en el control del crecimiento de la glándula prostética normal, también promueven el establecimiento de hiperplasia prostética benigna (BPH) y el progreso del cáncer de próstata transactivando los genes la proliferación celular facilitada vía el receptor de andrógeno (AR) enlazado al ligando (Amanatullah et al., 2000) . Por lo tanto, en enfermedad temprana el soporte principal de las opciones de tratamiento primario es la terapia de desgaste con andrógenos usando ambos métodos fármaco-terapéutico y/o quirúrgico (Papatsoris y Papavassiliou, 2001). Estudios epidemiológicos interesantes sobre la frecuencia de cáncer de próstata en eunucos, quienes tienen una deficiencia en la 5' -alfa-reductasa muestran que este subconjunto de población tiene una incidencia muy baja de la enfermedad. En la cascada de señales de andrógeno la 5'AR es responsable de la conversión de la testosterona a dihidrotestosterona que, en comparación con la testosterona, tiene una afinidad a enlazarse mucho más fuerte para el AR y es capaz de lograr una respuesta de proliferación más fuerte (Papatsoris y Papavassiliou, 2001). Como tal esfuerzo considerable de investigación se ha enfocado en definir inhibidores novedosos de la 5'AR. Existen dos isoformas de 5-alfa-reductasa dependiente de NADPH, llamadas tipos I y II, el tipo I se expresa básicamente en el cuero cabelludo, piel y en el hígado, y el tipo II se expresa primariamente en la próstata. La finasterida, un inhibidor específico del tipo II, es el único inhibidor 5AR disponible para tratar BPH, y un cáncer de próstata de fase temprana cuando se usa en combinación con un anti-andrógeno (tal como acetato de megestrol) . Sin embargo, dada la estructura esteroidal de la finasterida y los efectos adversos potenciales, la investigación se ha enfocado en elucidar otros inhibidores no esteroideos de la 5 ' -alfa-reductasa que son clínicamente aceptables (Chen, et al, 2001) . Una evidencia reciente infiere que el inicio del cáncer y su progreso puede ser facilitado vía la producción excesiva de prtoaglandenos en tejido inflamado (Vainio, 2001) . Las ciclo-oxigenasas (COX) catalizan la conversión de ácido araquidónico (AA) a prostaglandinas y tromboxanos. Estudios de soporte epidemiológicos en conjunto con estudio de laboratorio proporciona una fuerte evidencia para sugerir que los fármacos anti-inflamatorios no esteroidales tradicionales (NSAIDs, incluyendo la aspirina) y los inhibidores COX-2 (celecoxib) pueden reducir el riesgo de cáncer de colon (Koki et al., 2002) . De hecho, las biopsias clínicas de muchas enfermedades malignas diferentes muestran consistentemente una sobre expresión de la COX-2. Se considera que el mecanismo supuesto de acción anti-cáncer producido por los NSAIDs es debido a su capacidad para inhibir la producción de prostaglandinas vía la COX-2, que puede llevar a la angiogénesis y evitar la apoptósis de células de cáncer (Vaino, 2001; Fosslien, 2001) . Anti-inflamatorio Las prostaglandinas tales como la PGE2 y la PGI2 y los tromboxanos (TXs) tales como el TXA2 son derivados de ácidos grasos conocidos como eicosanoides (Penglis et al. 2000) . Estos están involucrados en ambas respuestas inflamatoria y de fisiología normal. Los AA liberados de fosfolípidos de la membrana, es el sustrato primario para las enzimas COX dando así lugar a los eicosanoides. Sin importar el isotipo de COX (COX 1 y COX 2) la prostaglandina (PGH2) es el intermediario principal de esta reacción y es el precursor común para la producción de prostanoides corriente abajo (PGE2/ PGI2 y TXA2) . El potencial de un agente de prueba para demostrar la actividad inflamatoria puede ser evaluado midiendo la capacidad del compuesto para inhibir la síntesis de PG y TX en pruebas de selección. Los datos preliminares presentados en los siguientes Ejemplos de las isoflavonas aminadas de la invención y su capacidad para inhibir tanto la tromboxano sintasa como la COX apoya que esta clase de moléculas tiene una aplicación terapéutica como un NSAID. La invención es además ilustrada por los siguientes ejemplos no limitativos y las Figuras que se acompañan. Ejemplo 1 Métodos sintéticos Generales 1. Síntesis de Imina Síntesis de hidrazona Síntesis de Semicarbazona Síntesis de Azina Síntesis de dímeros de Azina . Síntesis de Oxina En los métodos generales anteriores, las estructuras pueden estar opcionalmente sustituidas con los sustituyentes deseados, o sintones o derivados de los mismos. Los compuestos de amina reactiva pueden estar presentes como, por ejemplo, sus sales de clorhidrato y las reacciones desarrolladas en la presencia de una base tal como acetato de sodio, o como sea apropiado según sea determinado por un químico experto en síntesis. Síntesis La dihidrodaidzeina (lmmol) se sometió a reflujo con 3 equivalentes molares de clorhidrato de fenilhidrazina y 3 equivalentes molares de acetato de sodio (246 mmol) en 4 mi de metano! durante 6 horas. La solución se filtró y se eliminó el metanol bajo presión reducida. Después el producto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (10% éter, 90% de díclorometano) , produciéndose entre 40% y 60% del producto.

C C Compuesto 3 R= p-CH¿ R H H-NMR: (d6-acetona) 8.046(s), 8.018(s), 7.787(s), 7.194(t), 7.088(d), 6.762(m), 6.542(d de d) , 6.292(d), 4.400(d de d) , .3165 (d of d) , 4.198 (s) . CI-MS (+) : 256 R=p-NQ2 H-NMR: (d3-acetonitrilo) 8.685(s), 8.638(s), 8.239(d), 8.079 (d), 7.247(t) , 7.046(m) , 6.817(d de d) , 6.60(d), 6.646(d), 6.583(d de d), 4.546(d), 4.392(d), 4.309(s) . CI-MS (+) : 298 =P-CH3 H-NMR: (d3-acetonitrilo) 8.028(s), 7.999(s), 7.689(s), 7.085 (d), 7.000(d), 6.45(d), 6.529(d of d) , 6.285(d), 4.388(d of d) , 4.321(d of d) , 4.180(s), 2.220(s). CI-MS (+) : 361, 344, 256. En una forma similar, también se prepararon el compuesto 4 sustituido con bencilo, los compuestos 6-8 substituidos con cloro fenilo, el compuesto 9 de pirido y el compuesto 10 de ciano . El compuesto dimérico 5 se preparó por síntesis de azina estándar . La reacción de dihidrodaidzeina (1 mmol) con metilamina (3 mmol) proporcionó el metil imina compuesto 11. En una forma similar la hidroxiimina 12 también se preparó con hidroxilamina . La acilación del derivado amino 13 de la aminación reductiva (amonio/H2/Ni Raney) con 3 equivalentes de anhídrido acético y condiciones ácidas moderadas dieron el derivado N-acetilo 14 en un rendimiento cercano al cuantitativo. Ejemplo 2 - Métodos Análisis de citotoxicidad celular: Se siguió el método de Alley et al. (1988) . Brevemente, previo a la selección de la citotoxicidad se construyó una curva para cada línea tumoral a ser seleccionada para determinar la cinética del crecimiento, la densidad de sembrado óptima para producir un crecimiento logarítmico en cinco días, y el tiempo correspondiente de retrazo o incubación. El medio de cultivo gastado fue aspirado desde un cultivo monocapa (T-75) adherente sub-confluente, las células fueron tripsinizadas y resuspendidas en un volumen mínimo del medio de cultivo. Después de contar las células, se sembró en una placa de 96 pozos a una densidad apropiada (???µ?) para producir parámetros de crecimiento óptimos y después, se incubó la placa a 37°C bajo 5% de C02. Después de un tiempo de incubación pre-determinado la placa se trató con cualquier vehículo (control negativo) o diluciones en serie de los compuestos de prueba preparados en el medio de cultivo y posteriormente incubados durante cinco días más. Se agregó MTT (0.5 mg/ml) preparado en PBS a todos los pozos y se incubó a 37 °C durante aproximadamente 3 horas. El medio gastado fue entonces aspirado cuidadosamente y se agregó DMSO (150 µ?) para solubilizar las células y el formazan reducido. Se leyó entonces la absorbancia en un lector de placa SpectraMax a 570 nm y las células viables en placas tratadas se expresaron como un porcentaje de células en las placas de control . Estudios de inhibición de Andrógenos: Se siguió el método de Negri-Cesi y Motta (1994) y Negri-Cesi et al (1999) . Brevemente, se cultivaron las células LNCaP en RMPI adicionado con suero bovino fetal al 10% y L-glutamina 2mM a 37°C bajo 5% de C02. En el día 0 se cosechó un matraz de cultivo de subconfluente LNCaP (80%) mediante tripsinización, se lavó, se resuspendió en medio RPMI completado con suero bovino fetal sin carbón (RPMIi) y se sembró en placas de 12 pozos con 30, 000 células por pozo (15, 000 células/mL) . Las placas se cultivaron a 37°C con un 5% de C02 durante 48 horas. En el día 2 el medio gastado fue aspirado cuidadosamente de todos las placas y después se rellenaron con 2 mi de RPMIi que contenía cualquier testosterona (0.5 pM) como control positivo, testosterona más finasterida (luM) como control de inhibidor y vehículo como control de crecimiento (concentración equivalente de DMSO) . Las placas de prueba fueron tratadas como antes se describió; solamente se usaron diluciones en serie de compuestos de prueba preparados en RPMIi. Las concentraciones de los compuestos de prueba se seleccionaron en base a su perfil de citotoxicidad como se determinó en la sección anterior de métodos de análisis de citotoxicidad de células i.e. la concentración máxima usada en la prueba de proliferación de LNCaP se determinó como la concentración en la cual las células aparecen primero cercanas al 100% de viabilidad a lo largo de la curva de citotoxicidad. Esta concentración se seleccionó para asegurar que cualquier inhibición de la proliferación impartida por el agente de prueba se debía a la inhibición de 5'AR y no se debía a una muerte directa de las células. Es importante no perturbar la monocapa celular durante la adición de los tratamientos. En los días 5 y 8, se repitió el proceso seguido en el día 2 para todas las placas. En el dia 11, el medio gastado se aspiró de todos los pozos, las células fueron lavadas suavemente con PBS (500 µ?) , tripsinizadas y se contaron las células en cada pozo usando un hemocitómetro . Se calculó la cuenta promedio de células y la desviación estándar y los resultados se expresaron como el % de inhibición de la proliferación inducida por la tetosterona en comparación con el control del vehículo . Pruebas de selección e inhibición de tromboxano sintasa y COX: Se prepararon revestimientos leucocitarios humano obtenidos a partir de un Blanco Sanguíneo de la Cruz Roja. El revestimiento leucocitario (50 mi) se diluyó 1:2 con una solución salina amortiguada con fosfatos estéril (PBS) , recubriendo con una capa sobre la linfo-preparación de medio con gradiente de densidad y se centrífugo a 800 g durante 20 minutos. La capa de células mononuclear (MNC) fue eliminada y lavada con PBS y las células enriquecidas con monocitos se prepararon a partir de MNC por elutriación centrífuga a contracorriente. Posteriormente, los monocitos se resuspendieron en un medio de cultivo de tejidos RPMI con 10% de suero bovino fetal al 10% en 1.5 X 106 células/ml. Se prepararon análogos de prueba en DMSO y se incubaron con monocitos a 37 °C durante 30 minutos ya sea en 10 ó 100 µ . Después de una pre-incubación de 30 minutos se agregó lipopolisacárido bacteriano (LPS) (200 ng/ml) y se incubaron las células durante 18 horas más a 37 °C en CO2 al 5%. Después de la centrifugación, los sobrenadantes libres de células fueron eliminados entonces y se probaron ya sea para producción de prostaglandinas o tromboxano, según se determinó por radioinmunoensayo . Debido a que TXA; es lábil en medio acuoso, el TXB2, el producto estable de la hidrólisis de TXA2, fue medido. Para cada dosis (0, 10, ???µ?) , las incubaciones fueron llevadas a cabo por triplicado. Los resultados están expresados como promedio de DS+, n=3. Se utilizó ANOVA seguido por pruebas de comparaciones múltiples Newman-Keuls para examinar diferencias entre las dosis y los valores de control. Análisis de Citotoxicidad: Los compuestos 1 y 3 mostraron actividad anti-cáncer moderada con el compuesto 1 que demostró actividad en contra de lineas de cáncer de próstata LNCaP y DU-145 (Figs. 1A y IB; Tabla 1.) . Se observo una IC50 ligeramente mejor en contra de linea de cáncer de próstata independiente del andrógeno DU-145 (13.81 µ?) cuando se comparó con LNCAP (16.25 µ?) , el cual responde al andrógeno. También se observó una modesta actividad (>20 µ?) en contra de otras lineas celulares examinadas. Al igual que el compuesto 1, el compuesto 3 también mostró una actividad moderada en contra de LNCaP (16.26 µ?) (Fig. 1C; Tabla 1.), sin embargo mientras demostró alguna eficacia en contra de DU-145 (19.2 µ?) , el compuesto 3 tenia actividad en contra de la linea de carcinoma de pulmón de células largas NCI-H460 (13.3 µ?) (Fig. ID) y Tabla 1) . El compuesto 3 tuvo el mejor promedio de actividad en la muerte celular en contra de las lineas celulares examinadas. A diferencia del compuesto 3, el compuesto 2 que tenía un grupo nitro en lugar de un grupo metilo en la posición 4 del anillo del fenilo, tuvo la más baja actividad en contra de todas la líneas celulares examinadas (Tabla 1) . Estudios de Inhibición de Andrógeno : En ambos estudios de investigación de la proliferación inducida por testosterona de células LNCaP se observó una inducción de dos a cuatro veces en la velocidad de crecimiento de estas células en respuesta a la testosterona (Fig 2A y B) . Esta proliferación inducida por testosterona fue bloqueada potentemente por finasterida (1 µ?) (Fig. 2A y B) . Tomados juntos, estos datos demuestran que el modelo de selección está funcionando. De los 3 análogos examinados, el compuesto 1 fue el inhibidor (2.25 µ?) menos potente de la proliferación inducida por testosterona, mientras que el compuesto 3 mostró un resultado 3 veces mejor (IC50 0.68 µ?) con respecto al compuesto 1 (Figs. 2, 3 y Tabla 2) . El compuesto 2 fue el análogo más efectivo en la inhibición de la proliferación inducida por testosterona sin ningún IC50 determinado a 37 nM, que es algunas 60 veces efectivo que el compuesto 1 (Figs. 2, 3 y Tabla 2) . Se hace notar que el compuesto 2 que tiene un grupo para receptor electrones (-NO2) en la posición 4 en comparación con un grupo donador de electrones (-CH3) (compuesto 3) aumenta la actividad inhibidora de la molécula en esta prueba en particular.

Ejemplo 3 Resultados y Discusiones Tabla 1. Comparación de la Citotoxicidad del Comp. 1, Comp. 2 y Comp. 3 en contra de PC3 (AR negativa próstata Ca) , LNCaP (AR positivo Próstata Ca), DU145 (AR negativo próstata Ca), DA-MB-468 (ER negativo mama Ca) y NCI-H460 (Células de pulmón largas Ca) Linea Celular (uM) Análogo MDA-MB-468 NCI-H460 Prom. D.E. Prom. D.E.

Com . 1 34.9 19.3 27.6 0.60 Comp . 2 26.1 1.20 32.7 0.30 Com . 3 22.4 5.52 13.3 1.62 D.E. = desviación estándar Tabla 2. Perfil de inhibición del análogo de fenilhidrazona de la proliferación de LNCaP inducida por testosterona Análogo IC50 (uM) Com . 1 2.25 Com . 2 ND @ 0.035 Comp . 3 0.68 Inhibición de la Tromboxano sintasa y COX: El compuesto 1 y el compuesto 3 mostraron 100% de inhibición de la actividad de COX cuando se probaron a 10 µ?, mientras que el compuesto 2 inhibió esta actividad por 77% (Figura 4) . De igual manera, el compuesto 1 10 mM, el compuesto 2 y el compuesto 3 inhibieron la tromboxano sintasa por 33, 27 y 60% respectivamente, pero su efecto inhibitorio fue menos potente en comparación con su inhibición de COX. Estos datos apoyan el hallazgo de que los análogos de isoflavona aminada son inhibidores de tromboxano sintasa y de COX y como tales, las moléculas con este escenario muestran potencial como agentes anti-inflamatorios . Además, la aplicación terapéutica como la inhibición de NSAIDS de la actividad COX apoya que los análogos de fenilhidrazona también muestren actividad anti-cáncer. Se encontró que los compuestos 3 y 1 son los agentes anti-cáncer más efectivos con respecto a su capacidad de matar directamente, sin embargo, fueron menos efectivos inhibiendo la proliferación inducida por testosterona . El análogo más efectivo inhibiendo la proliferación inducida por testosterona fue el compuesto 2, el cual fue el análogo menos efectivo en la prueba de muerte celular directa. Estos resultados muestran que existen variaciones en las actividades y modos de acción en las dos investigaciones anti-cáncer a las cuales se sometieron los compuestos de prueba. Además, la capacidad de estos análogos aminados de inhibir COX confirma que esta clase de molécula tiene múltiples aplicaciones anti-cáncer y su capacidad de inhibir la tromboxano sintasa sugiere un papel en anti-inflamación . La invención ha sido descrito en la presente, con referencia a ciertas modalidades preferidas, a efecto de permitir al lector llevar a la práctica la invención sin experimentación indebida. Sin embargo, una persona con conocimiento promedio en el arte, fácilmente reconocerá que muchos de los componentes y parámetros pueden variar o modificarse hasta un cierto punto sin apartarse del alcance de la invención. Además, los títulos, encabezados o similares están proporcionados para aumentar la comprensión de lector a este documento y no deben leerse en forma limitativa del alcance de la presente invención. La descripción completa de todas las solicitudes, patentes y publicaciones citadas en la presente, si hubiere alguna, se incorporan a la presente como referencia. El versado en el arte apreciará que la invención aquí descrita es susceptible de variaciones y modificaciones diferentes de aquellas especialmente descritas. Debe entenderse que la invención incluye todas esas variaciones y modificaciones. La invención también incluye todas las etapas, modalidades, composiciones y compuestos referidos o indicados en esta descripción de manera individual o colectiva y cualquiera o todas las combinaciones de cualquiera de dos o más etapas o modalidades. La referencia a cualquier documento del arte previo en esta descripción no es y no debe tomarse como un reconocimiento o ningún tipo de sugerencia de que al arte previo forma parte del conocimiento general en el campo de dedicación .

Referencias Alley MC, Scudiero DA, Monks A, Hursey ML, Czerwinski MJ, Fine DL, Abbott BJ, Mayo JG, Shoemaker RH, Boyd MR. 1988. Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell lines using a microculture tetrazolium assay. Cáncer Res. 48: 589-601. Amanatullah DF, Reutens AT, Zafonte BT, Fu M, Mani S, Pestell RG. 2000 Cell-cycle dysregulation and the molecular mechanisms of prostate cáncer. Front. Biosci., 5:D372-90. Chen GS, Chang CS, Kan WM, Chang CL, Wang KC, Chern JW 2001 Novel lead generation through hypothetical pharmacophore three-dimensional datábase searching: discovery of isoflavonoids as nonsteroidal inhibitors of rat 5 alpha-reductase. J Med CHEM 44,3759-63. Hsing AW, Tsao L, Devesa SS. 2000 International trends and patterns of prostate cáncer incidence and mortality. Int. J. Cáncer 85, 60-7. Fosslien, E. 2001 Molecular pathology of COX-2 in cancer-induced angiogenesis . Ann. Clin. Lab. Science. 31,325-348. Koki, A. T. and Masferrer, J. L. 2002 Celecoxib: A specific COX-2 Inhibitor with anticancer properties. Cáncer Control 9, Supp. 28-35. Landis SH, Murray T, Bolden S, ingo PA. 1999 CA Cáncer J. Clin. 49, 8-31.

Morris, M.J. and Scher, H.I. 2000. Novel strategies and therapeutics for the treatment of prostate carcinoma. Cáncer 89, 1329-1348. Negri-Cesi, P. , Motta, M., 1994. Androgen metabolism in the human prostatic cáncer cell line LNCaP. 1994 J. Steroid Biochem. Molec. Biol. 51, 89-96. Negri-Cesi, P., Colciago, A., Poletti, A. and Motta, M. 1995 5a-Reductase isozymes and aromatase are differentially expressed and active in the androgen-independent human prostate cáncer cell lines DU145 and PC3. The Prostate 41, 224-232. Papatsoris, A.G and Papavassiliou, A.G. 2001 Prostate cáncer: horizons in the development of novel anti-cancer strategies. Curr. Med. Chem. Anti-cancer agents. 1, 47-70. Penglis, P. S. , Cleland, L. G.,. Demasi, M., Caughey, G. E. and James, M.J. 2000. Differential regulation of prostaglandin E2 and thromboxane A2 production in human monocytes: implications for the use of COX inhibitors. J. Immunol. 165, 1605-11. Vaino, H. 2001. Is Cox inhibition a panacea for cáncer prevention. Int. J. Cáncer 94,613- 614.

Claims (18)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la fórmula general (I) : caracterizado porque Rir P FU , Rs / far 7 y e son independientemente hidrógeno, hidroxi, OR9, OC(0)H, OC(0)R9, OS(0)R9, OSi(Ri0)3, C (O) Ra, C02Ri2í alquilo, haloalquilo, arilo, arilalquilo, tio, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino, nitro o halo, o cualquiera de dos de los sustituyentes R2, R3 y R4 junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos forman una estructura alquilo cíclico, heteroalquilo cíclico, arilo o heteroarilo, R9 es alquilo, haloalquilo, arilo, arilalquilo o alquilarilo, Rio es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, Ru es hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo, arilalquilo o un amino ácido, y R12 es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, arilo, arilaquilo o alquilarilo, X es O, R12 o S, Z es R13, NR14Ri5, NRi3CONRi4Ri5, N=CR16 i7 o OR13, Ri3 R14 y R15 son independientemente hidrógeno, amino, tio, nitro, ciano; o alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente sustituidos, o los sustituyentes R14 y R15 junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman una estructura heteroaromática o un heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido, y Ríe y Rn son independientemente hidrógeno, amino, tio, nitro, ciano; o alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente sustituidos, o los sustituyentes R16 y R17 tomados juntos con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isoflavonoide opcionalmente sustituido, o cuando X es NR12, el sustituyente Ri2 puede ser un enlace tal que Rg y X junto con los átomos de carbono a los cuales están unidos forman una de las siguientes estructuras: en donde Y es: y en donde i, R2, R3, R4, R5, RE, RT, S y Z son como antes se definieron, y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un enlace doble y cuando es un enlace sencillo, el dibuj representa )—N / H los cuales compuestos incluyen sales y derivados farmacéuticamente aceptables de los mismos, con la condición de que los compuestos de la fórmula en donde X es F o Cl, Y es H o F, y Z es Cl, Br o CF3 están específicamente excluidas, y con la condición de que los siguientes compuestos 3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-amina N- (3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-il) -a-fenil-bencenacetamida N- [3, 4-dihidro-3- (4-hidroxifenil) -2H-l-benzopiran-4-il] -ocieni 1-bencenacetamida 2, 3-dihidro-3-fenil-4H-l-benzopiran-4-ona oxima 2, 3-dihidro-3-fenil-4H-l-benzopiran-l-ona O-acetiloxima N- [3- (3, 4-dimetoxifenil) -3, 4-dihidro-7, 8-dimetoxi-2H-l-benzopiran-4-il ] -formamida 2.3-dihidro-2, 3-difenil-4H-l-benzopiran-4-ona hidrazona 4 7 -dimetoxi-isoflavanona oxima 3.4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-amina N- (3-fenil-4-cromanil ) -acetamida N- (7-metoxi-3-fenil-4-cromanil) -acetamida 4 ' , 7-dimetoxi-4-isoflavanamina N- [7-metoxi-3- (p-metoxifenil ) -4-cromanil] acetamida 7 -metoxi- 3-isoflavanamina 2' -Hidroxi-isoflavanona (2, 4-dinitrofenil ) hidrazona 7-metoxi-isoflavanona oxima 7-metoxi-3' , 4' - (metilendioxi ) -isoflavanona (2, 4-dinitrofenil ) hidrazona 7-metoxi-isoflavanona fenilhidrazona 5, 7 -dimetoxi-isoflavanona (2 , 4-dinitrofenil) hidrazona 2 , 3-dihidro-3-fenil-4H-l-benzopiran-4-ona oxima Isoflavanona (2, -dinitrofenil ) hidrazona 6-hidroxi-isoflavanona (2, 4-dinitrofenil ) hidrazona 7 -hidroxi-isoflavanona (2, 4-dinitrofenil ) hidrazona Isoflavanona semicarbazona 7-metoxi-3' , 4' - (metilendioxi ) isoflavanona (2, 4- dinitrofenil ) hidrazona 7-hidroxi-3' , 4' -metilendioxi) isoflavanona (2, 4- dinitrofenil) hidrazona 7-metoxi-isoflavanona (2, 4-dinitrofenil ) hidrazona 7-hidroxi-4' -metoxi-isoflavanona (2, -dinitrofenil ) hidrazona 5, 7 -dimetoxi-isoflavanona (2, -dinitrofenil) hidrazona 6-rnetoxi-isoflavanona (2, 4-dinitrofenil ) hidrazona 4 ' , 5 , 7-trimetoxi-isoflavanona (2, 4 -dinitrofenil) hidrazona 7-metoxi-2-metil-isoflavanona (2, 4 -dinitrofenil ) hidrazona 2- (hidroximetil ) -7-metoxi-isoflavanona (2, -dinitrofenil ) hidrazona y sales de clorhidrato de las mismas están específicamente excluidas .
2. 2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, representado por una de las fórmulas generales (II) -(VIII): ; caracterizado porque Rir R2Í R3; R4» R5 Rer R7 y Re son independientemente hidrógeno, hidroxi, OR,, OC(0)Rc,, OS(0)R9, alquilo, arilo, arilalquilo, tío, alquiltio, bromo, cloro o fluoro, R9 es alquilo, fluoroalquilo o arilquilo, R13, Ri y R15 son independientemente hidrógeno, amino, ciano, tio, nitro; o alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente sustituidos o los sustituyentes Ri4 y Ri5 junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman una estructura heteroaromática o un heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido, y Ri6 y R17 son independientemente hidrógeno, amino, ciano, tio, nitro; o alquilo, haloalquilo, acilo, arilo, arilalquilo o alquilarilo opcionalmente sustituidos, o los sustituyentes Rig y R17 tomados junto con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isoflavonoide opcionalmente sustituido, y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un enlace doble.
3. 3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque Ri es hidrógeno R2, R3, R5, R6 y R8 son independientemente hidrógeno, hidroxi, 0R9, OC(0)R9, alquilo, arilo o arilalquilo, R y R7 son independientemente hidroxi, 0R9 o OC(0)R9, Rg es metilo, etilo, propilo, isopropilo o trif luorometilo, y i3r 1 y R15 son independientemente hidrógeno, metilo, etilo, propilo, isopropilo, trif luorometilo; o fenilo, naftilo o bencilo opcionalmente sustituidos, o los sustituyentes Ri 4 y R15 juntos con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman una estructura heteroaromática o un heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido, Ri y Rn son independientemente hidrógeno, metilo, etilo, propilo, isopropilo, trifluorometilo; o fenilo, naftilo o bencilo opcionalmente sustituidos o los sustituyentes Ríe y tomados junto con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isoflavonoide opcionalmente sustituido, y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un enlace doble.
4. 4. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque Ri es hidrógeno í½ , R3, R5, RÓ y s son independientemente hidrógeno, hidroxi, ORg , OC(0) R9 o metilo, R4 y 7 son independientemente hidroxi, ORg o OC(0) Rg Rg es metilo, R13 es hidrógeno, metilo, etilo, trifluorometilo, fenilo, clorofenilo, nitrofenilo, toluilo, naftilo, bencilo, clorobencilo, nitrobencilo, o metilbencilo, R14 es hidrógeno y Ri 5 es hidrógeno, metilo, etilo, trifluorometilo, fenilo, clorofenilo, nitrofenilo, toluilo, naftilo, bencilo, clorobencilo, nitrobencilo, o metilbencilo, o los sustituyentes R14 y Ri¾ junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman una estructura heteroaromática o un heteroalquilo cíclico opcionalmente sustituido, Ri6 y R17 son independientemente hidrógeno, metilo, etilo, trifluorometilo, fenilo, clorofenilo, nitrofenilo, toluilo, naftilo, bencilo, clorobencilo, nitrobencilo, o metilbencilo, o los sustituyentes R16 y Ri7 tomados junto con el átomo de carbono al cual están unidos forman un sistema de anillo isoflavonoide opcionalmente sustituido, y el dibujo " " representa un enlace sencillo.
5. 5. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4 seleccionado a partir de los compuestos (1) a (14): 4' , 7-Dihidroxiisoflavanona (fenil) idrazona (1) , 4' , 7-Dihidroxiisoflavanona (4-nitrofenil) hidrazona (2), 4 ' , 7-Dihidroxiisoflavanona ( 4-metilfenil) hidrazona ( 3) , 4 ' , 7-Dihidroxiisoflavanona (bencil ) hidrazona ( 4 ) , 4' , -Dihidroxiisoflavanona (4' , 7-dihidroxiisoflavanona ) hidrazona ( 5) , 7-Dihidroxiisoflavanona (2-clorofenil) hidrazona (6), 4' , 7-Dihidroxiisoflavanona (3-clorofenil) hidrazona (7) , 4' , 7-Dihidroxiisoflavanon (4-clorofenil) hidrazona (8) , ' , 7-Dihidroxiisoflavanona (2-piridil) hidrazona ( 9) , 4 ' , 7-Dihidroxiisoflavanona ( 4-cianofenil ) hidrazona ( 10 ) , ' , 7-Dihidroxi-4-metilimino-isoflavan (11), 4 ' , 7-Dihidroxiisoflavanona oxima (12), 4-Amino-3' , 4' -dimetoxi-7-hidroxi-8-metilisoflavan (13) , N- [3' , 4' -dimetoxi-7-hidroxi-8-metil-4-cromanil ] -acetamida ( 14 ) , los cuales compuestos incluyen sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
6. 6. Un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula (I) de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque comprende la etapa de hacer reaccionar el grupo 4-ceto de un compuesto de la fórmula (X) : en donde Rir ¾( R4/ R5, R-er Ri, e y X son como se definieron en la reivindicación 1, y el dibujo " " representa ya sea un enlace sencillo o un doble enlace, con un agente de aminación.
7. 7. Un método para el tratamiento, profilaxis o alivio de una enfermedad o padecimiento, que incluye la etapa de administrar una cantidad efectiva terapéuticamente de uno o más compuestos de la fórmula (I) o una sal o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo a un sujeto, con la condición de que los compuestos y las sales aceptables farmacéuticamente de 3, -dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-amina N- (3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-il) -a-fenil-bencen-acetamida, y N- [3, -dihidro-3- (4-hidroxifenil) -2H-l-benzopiran-4-il] -a-fenil-bencenacetamida, no sean reclamados para el tratamiento, profilaxis o alivio de la ateroesclerosis .
8. 8. Un método para el tratamiento, prevención o alivio de una enfermedad asociada con la supervivencia de células aberrantes, proliferación de células aberrantes, migración celular anormal, angiogénesis anormal, equilibrio anormal de estrógenos /andrógenos , génesis de esteroides anormal o disfuncional, degeneración que incluye cambios degenerativos dentro de las paredes de los vasos sanguíneos, inflamación, y desequilibrio inmunológico, el cual comprende administrar a un sujeto uno o más compuestos de la fórmula (I) o una sal o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo opcionalmente en asociación con un portador y/o excipiente, con la condición de que los compuestos y las sales farmacéuticamente aceptables de 3 , 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4 -amina N- (3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-il) -a-fenil-bencen-acetamida, y N- [3, 4-dihidro-3- ( -hidroxifenil) -2H-l-benzopiran-4-il] -a-fenil-bencenacetamida, no sean reclamados para el tratamiento, profilaxis o alivio de la ateroesclerosis .
9. 9. Un método para inducir apoptósis en células que expresan el fenotipo de la pro-supervivencia anormal, que comprenden poner en contacto las células con uno o más compuestos de la fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente en asociación con un portador o excipiente.
10. 10. Un método para inhibir la migración de células que tienen un fenotipo de migración celular anormal, que comprende poner en contacto las células con un compuesto de la fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo opcionalmente en asociación con un portador o excipiente.
11. 11. Un método para inhibir la angiogénesis en un tejido que expresa fenotipo angiogénico aberrante, que comprende poner en contacto el tejido con un compuesto de la fórmula (I) o un derivado o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente en asociación con un portador o excipiente, con la condición de que los compuestos y las sales aceptables farmacéuticamente de 3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-amina N- (3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-il ) -oc-fenil-bencen-acetamida, y N- [3, 4-dihidro-3- ( 4 -hidroxifenil ) -2H-l-benzopiran-4-il] -a-fenil-bencenacetamida, no sean reclamados para el tratamiento, profilaxis o alivio de la ateroesclerosis .
12. 12. Un método para el tratamiento, prevención o alivio de cáncer en un mamífero, que comprende la etapa de llevar un compuesto de la fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo en contacto con tejido canceroso en una mamífero que está sufriendo de un tumor, de manera que el desarrollo neoplásico en dicho tejido canceroso sea retrasado o detenido.
13. 13. Uso de uno o más compuestos de fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o padecimiento, con la condición de que los compuestos y las sales farmacéuticamente aceptables de 3 , 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-amina N- (3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-il) - -fenil-bencen-acetamida, y N- [3, 4-dihidro-3- ( 4-hidroxifenil ) -2H-l-ber.zopiran-4-il ] -cc-fenil-bencenacetamida, no sean reclamados para el uso en la preparación de un medicamento para el tratamiento, profilaxis o alivio de ateroesclerosis.
14. 14. Uso de un compuesto de fórmula (I) o un derivado o sal farmacéuticamente aceptable del mismo como un agente anti-inflamatorio .
15. 15. Un agente para el tratamiento, profilaxis o alivio de una enfermedad o padecimiento, el agente comprende uno o más compuestos de fórmula de fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que los compuestos y las sales farmacéuticamente aceptables de 3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4 -amina N- (3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-il) -a-fenil-bencen-acetamida, y N- [3, -dihidro-3- (4-hidroxifenil) -2H-l-benzopiran-4-il ] -a-fenil-bencenacetamida, no sean reclamados para el tratamiento, profilaxis o alivio de la ateroesclerosis .
16. 16. Una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo en asociación con uno o más portadores, excipientes, auxiliares y/o diluyentes farmacéuticos, con la condición de que los compuestos y las sales farmacéuticamente aceptables de 3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-amina N- (3, 4-dihidro-3-fenil-2H-l-benzopiran-4-il) -oc-fenil-bencenacetamida, y N- [3, 4-dihidro-3- (4-hidroxifenil) -2H-l-benzopiran- -il ] -a-fenil-bencenacetamida, no sean reclamados.
17. 17. Una bebida o alimento, que contiene uno o más compuestos de fórmula (I) o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo.
18. 18. Un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se describe en la presente con referencia a los Ejemplos y/o los dibujos que se acompañan .