MXPA04006502A - Composiciones para la conservacion de frutas y vegetales. - Google Patents

Composiciones para la conservacion de frutas y vegetales.

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Abstract

La invencion describe composiciones para la conservacion de frutas, vegetales, productos parcialmente procesados, otros frutos y flores. Las composiciones comprenden al menos un inhibidor de fosfolipasa D, al menos un compuesto que comprende una subunidad de isopreno, al menos un componente de la ruta biosintetica de flavonoides en un medio adecuado. La composicion de la presente invencion puede comprender adicionalmente uno o mas reguladores del crecimiento vegetal del tipo citosina, uno o mas antioxidantes, un agente estabilizador de membrana, un agente tensioactivo, o cualquier combinacion de los mismos. La composicion se puede aplicar para producir una aspersion, pocion, inmersion, o un vapor, y en ya sea la etapa de prerrecoleccion o de pos-recoleccion.

Description

COMPOSICIONES PARA LA CONSERVACIÓN DE FRUTAS Y VEGETALES La invención se refiere a composiciones, y al uso de composiciones para mejorar la calidad de vida en anaquel de frutas, vegetales, productos parcialmente procesados, otros frutos y flores.
Antecedentes de la Invención La producción de frutos en Norteamérica es una industria multimillonaria . En consecuencia, la mejora y conservación de la calidad de los frutos, vegetales y otros tipos de frutos en término de su color, sabor, sazón y vida en almacenamiento son de importancia superior a los cultivadores, compañías de procesamiento de frutos e industria alimenticia en general. Desdichadamente, la ventana de tiempo donde la mayoría de las frutas, vegetales y frutos exhiben la máxima calidad es relativamente estrecha, y después de esta ventana de tiempo, la calidad de los frutos tiende a disminuir rápidamente. La quemadura superficial (o quemadura) es un trastorno fisiológico que afecta ciertas variedades de manzana durante o después del almacenamiento de pos-recolección, disminuyendo varias veces su valor en el mercado. Las variedades afectadas incluyen Roja Deliciosa, Mclntosh, Cortland, Granny Smith y otras. De forma colectiva, estas variedades comprenden más de 60% de las manzanas producidas en Canadá y los Estados Unidos de América. Además de afectar a las manzanas, la quemadura superficial también afecta ciertas variedades de peras. La quemadura superficial se caracteriza principalmente por daño a la superficie de las frutas. Frecuentemente, la quemadura se manifiesta como amorenamiento desigual en la superficie de la fruta. Este síntoma puede progresar a daño interno y contribuir a otros trastornos patológicos. El desarrollo de la quemadura superficial en manzanas y peras es una forma de senectud buscada, donde las capas de células hipodérmicas (3-4 capas celulares por debajo de la cutícula) sufren daño y deterioro. En la actualidad, la causa de la quemadura superficial es desconocida, pero se han implicado rutas metabólicas vegetales específicas en su desarrollo. También, las condiciones ambientales tal como el tiempo seco-caliente, disponibilidad de nutrientes y carencia de condiciones de enfriamiento apropiadas durante la maduración pueden contribuir al desarrollo de la quemadura superficial (Blanpeid et al., 1991; Patterson y Workamn 1962). Una teoría con respecto al mecanismo del desarrollo de la quemadura propone que el componente a-farnesceno, presente en las capas celulares superficiales de la fruta sufre per-oxidación a través de un mecanismo aún desconocido y los productos per-oxidados provocan de cierta forma daño al tejido y amorenamiento (Anet y Coggiola, 1974) . Soportando el argumento que los radicales libres pueden estar comprendidos en el desarrollo del trastorno, la aplicación de antioxidantes tal como a-tocoferol a frutas sensibles a quemadura puede anular el desarrollo de la quemadura superficial (Barden y Bramlage, 1994) . El desarrollo de la quemadura se puede inhibir al tratar manzanas susceptibles a quemadura con difenilamina (DPA) o etoxiquina. Sin embargo, algunas manzanas tal como la variedad "Dorada Deliciosa" pueden desarrollar una decoloración azul-gris en las mejillas y resaltos de la fruta después del tratamiento con DPA (Pierson y Schomer, 1968). Además, aunque la aplicación de DPA y etoxiquina inhibe el desarrollo de la quemadura en muchas variedades de manzanas, estos químicos se pueden degradar en compuestos que pueden incluir carcinógenos potenciales . Esto ha dado por resultado la prohibición de la aplicación ' de DPA y etoxiquina a fruta en varios países europeos. También se han implicado otras rutas bioquímicas en el mecanismo de desarrollo de quemadura en manzanas, y en el deterioro de frutos diferentes de manzanas. Por ejemplo, se ha sugerido que el deterioro de las membranas durante la senectud y tensión puede comprender la acción de fosfolipasa-D. La fosfolipasa D (PLD) es una enzima ubicua que cataliza la hidroliza la hidrólisis de los fosfolípidos de membrana. Sin embargo, se ha propuesto que la maduración normal y el maderamiento de muchos tipos de frutas y vegetales puede ser debido a una descomposición catabólica de las estructuras celulares tal como la membrana y la pared celular, y que la fosfolipasa D puede estar comprendida directamente en este proceso. También, la destrucción prematura de la integridad celular de los frutos, puesto que frecuentemente ocurre durante el procesamiento (corte, laceración, mezclado, etc.) o almacenamiento (lesión debida a enfriamiento) , puede conducir a destrucción acelerada de las estructuras celulares, dando por resultado una pérdida de calidad del producto propuesto . Ha habido mucha investigación con respecto a composiciones que pueden reemplazar la difenilamina para inhibir el desarrollo de quemadura en manzanas, así como composiciones que pueden ser efectivas en la mejora o extensión de la calidad alimenticia de otros frutos tal como frutas y vegetales. La US 6,054,160 describe composiciones de complejos y procesos para tratar piezas de manzana cortadas en fresco, como un reemplazo para el tratamiento con sulfito. La composición consiste de un antioxidante o componente reductor tal como cisteína, un osmolito tal como sorbitol y un agente mej orador de la integridad de membrana tal como cloruro de calcio. Se puede adicionar un quemador tal como hexametafosfato de sodio para mejorar el compromiso del agente. Las composiciones se administran al sumergir las piezas en una solución acuosa que protege las piezas del deterioro debido a la actividad enzimática incrementada, reacciones de oxidación, migración de agua y microbios. En tanto que la composición puede mejorar los atributos sensoriales frescos de manzanas recién cortadas, la composición no se puede aplicar a manzanas pre-recolectadas . Además, no hay la descripción en cuanto a si las composiciones tienen efecto en la quemadura, o si las composiciones son efectivas en la mejora de la calidad alimenticia de otras frutas y vegetales. La US 5,858,436 describe una composición del tratamiento acuoso que comprende un antioxidante tipo polifenol solo o en combinación con un compuesto terpénico en un vehículo acuoso para tratamiento de frutas o vegetales después de la recolección. La composición se debe calentar a una temperatura de 40-60°C y subsiguientemente las frutas o vegetales se ponen en contacto con la composición del tratamiento líquido a la temperatura elevada durante un periodo de menos de o igual a 10 minutos. La composición no es adecuada para el rociado en frutas y vegetales y la composición se debe aplicar después de la recolección. La US 5,376,391 y US 5,198,254 describen composiciones de revestimiento que pueden incrementar la estabilidad de las frutas, vegetales u hongos. Las composiciones comprenden al menos un polímero de polisacárido, un conservador y un acidulante. Las composiciones también pueden incluir al menos un emulsionador, un plastificante , una resina o colofonia, una proteína, un agente de firmeza o secuestrante, un antioxidante y un regulador de crecimiento vegetal y un protector de lesión de enfriamiento. Se sugiere en las patentes que los revestimientos de la invención pueden actuar como una barrera parcial a vapor de agua, oxígeno, dióxido de carbono y posiblemente compuestos volátiles de sabor, que provocan de este modo una alteración en los procesos metabólicos dentro de la fruta. No se inhiben por estas composiciones procesos o rutas metabólicas especificas, y pueden inhibir tanto procesos metabólicos benéficos como perjudiciales dentro de las frutas. Además, algunas de las composiciones contempladas comprenden componentes que normalmente no están asociados con las frutas, vegetales y hongos, o que se encuentran normalmente en esos frutos pero en menos cantidades. La inclusión de muchos componentes no naturales puede ser indeseable al consumidor. También, se desconoce si las composiciones descritas pueden inhibir el desarrollo de la quemadura superficial en manzanas y peras.
La US 5,126,155 enseña el uso de lisofosfatidiletanolamina para el tratamiento de aplicaciones de pre-recolección y pos-recolección. La US 4,988,522 proporciona composiciones útiles en el tratamiento de partes vegetales cortadas para mejorar su calidad y estabilidad en el almacenamiento contra los defectos de oxidación, termo-oxidación, ataque enzimático, microbiano o de iones metálicos. Las composiciones incluyen un antioxidante, un inhibidor de enzimas, un acidulante y un secuestrante único de iones metálicos que es compatible con el acidulante. Además, la patente enseña que el antioxidante puede comprender ácido ascorbico y que se puede incluir una fuente -de iones cloruro. Las composiciones conservadoras de alimento descritas se limitan a inmersiones y al tratamiento de superficies cortadas de partes de plantas comestibles. No hay descripción de si las composiciones pueden ser útiles para el tratamiento de la quemadura superficial y otros trastornos de los frutos no procesados. La US 3,526,520 describe el tratamiento y control de la quemadura en el almacenamiento de manzanas con composiciones que comprenden difenilamina , un emulsionador , y un solvente orgánico. La difenilamina es un material que se puede degradar en compuestos potencialmente tóxicos . De esta manera, se prefiere que se desarrollen nuevas composiciones que evaden el uso de difenilamina para controlar la quemadura en manzanas y otras frutas. La O 91/05479 enseña una preparación para el tratamiento de manzanas, peras y otros vegetales para protegerlos contra la quemadura y daño por frío. La composición comprende una solución acuosa de ésteres de sacarosa y al menos un antioxidante seleccionado de agentes naturales y sintéticos que incluye tocoferóles, ácido ascórbico, ésteres de ácido gálico, vitamina E, hidroxi-tolueno butilado (BHT) , hidroxianisol butilado (BHA) , y ácido O-palmitoil -L-ascórbico . Una desventaja de las composiciones descritas es que emplean antoxidantes que son no específicos en su funcionamiento, como lo opuesto a emplear compuestos que pueden inhibir directamente las rutas metabólicas específicas que se activan como resultado del desarrollo de la quemadura o daño por frío. Además, se debe hacer la aplicación después de la recolección. La fumigación de pos-recolección de manzanas con etanol y alcoholes de cadena larga tal como hexanol ha mostrado que los alcoholes superiores son menos efectivos que el etanol en el control de la quemadura superficial (Ghahramani et al., 1999). Existe la necesidad en la técnica de composiciones que se consideren en general como seguras (GRAS) y que sean capaces se inhibir la quemadura superficial en manzanas y peras y conserven otros frutos tal como de manera enunciativa y sin limitación frutas, vegetales y porciones de los mismos. Además, hay necesidad de la técnica de composiciones que conserven frutas, vegetales, otros frutos y flores, en donde la composición se puede aplicar por rociado, poción o por inmersión. También, existe la necesidad en la técnica de composiciones que se pueden usar para conservar frutos no procesados, parcialmente procesados o parcialmente procesados. Además, existe la necesidad en la técnica de composiciones que se pueden aplicar ya sea antes de la recolección (pre-recolección) o después de la recolección (pos-recolección) , para la conservación de frutas, vegetales, otros frutos y flores, en donde las composiciones comprendan componentes que inhiban las rutas metabólicas específicas y de esta manera proporcionen tanto un control de daño buscado como preventivo. Es un objeto de la presente invención superar las desventajas de la técnica anterior. El objeto anterior se encuentra por una combinación de las características de las reivindicaciones principales. Las reivindicaciones secundarias describen modalidades ventajosas adicionales de la invención.
Breve Descripción de la Invención La invención se refiere a composiciones, y al uso de las composiciones para mejorar la calidad de vida en anaquel de fruta, vegetales, productos parcialmente procesados, otros frutos y flores. De acuerdo con la presente invención, se proporciona una composición para la conservación de frutos, que comprende : a) al menos un inhibidor de fosfolipasa D; b) al menos un compuesto que comprende una sub-unidad de isopreno; y c) al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides, en un medio adecuado. El por lo menos un inhibidor de fosfolipasa D se puede seleccionar del grupo que consiste de hexanal , hexenol, hexenal , geraniol, o una combinación de los mismos; al menos un compuesto que comprende una subunidad de isopreno se puede seleccionar del grupo que consiste de geraniol, acetato de geranilo, neral, nerol, citronellal, citronellol, o una combinación de los mismos; y al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides se puede seleccionar del grupo que consiste de ácido para-cumárico, ácido trans-cinámico, ácido cafeico, o una combinación de los mismos. Funcionalmente, la composición como se define anteriormente puede comprender adicionalmente al menos un regulador del crecimiento vegetal, o del crecimiento de planta, en donde el regulador de crecimiento es una citocina . La presente invención también se refiere a la composición como se define anteriormente, que comprende además un antioxidante, un agente estabilizador de la membrana/pared celular, un agente tensioactivo, o una combinación de los mismos. El antioxidante se puede seleccionar del grupo que consiste de ácido ascórbico, palmitato de ascorbato, alf -tocoferol , acetato de alfa-tocoferol, y una combinación de los mismos, y el agente estabilizador de membrana/pared celular es cloruro de calcio . La presente invención proporciona un método para conservar frutos que comprenden la aplicación de una cantidad efectiva de una composición que comprende, al menos un inhibidor de fosfolipasa T, al menos un compuesto que comprende una subunidad de isopreno, y al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides, en un medio adecuado. La composición puede comprender adicionalmente un antioxidante, un agente estabilizador de membrana, un agente tensioactivo, o una combinación de los mismos . La presente invención también se refiere al método anterior, en donde el paso de aplicación comprende rociado, inmersión, o almacenamiento en un medio que comprende la composición. Además, la presente invención se refiere a una matriz revestida o impregnada con la composición como se define anteriormente. La presente invención también proporciona una composición de antioxidante para la conservación de frutos y flores que comprende al menos un antioxidante seleccionado del grupo que consiste de ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, alfa-tocoferol , acetato de alfa-tocoferol , y una combinación de los mismos, en un medio adecuado. La composición como se define anteriormente también puede comprender un agente estabilizador de membrana/pared celular . La presente invención también abarca un método para prevenir la quemadura solar o quemadura superficial en los frutos, o para mejorar la vida en anaquel de flores, el cual comprende la aplicación a los frutos de una cantidad efectiva de la composición de antioxidante como se define anteriormente . La presente invención se refiere a un método para mejorar: - el nivel de antocianina en la fruta; - la firmeza, dulzura, vida en anaquel, calidad de la fruta o una combinación de los mismos en la fruta, - niveles de proteínas e isoflavonoides en soya, - nivel de azúcar de remolachas o caña de azúcar, o - vida en anaquel de flores cortadas, que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de antioxidante como se define anteriormente a la fruta, soya, remolachas, caña de azúcar, o flores cortadas como pueda ser el caso. La presente invención también se refiere a una composición moduladora de la actividad enzimática para la conservación de frutos, que comprende geraniol , acetato de geranilo, hexanal y ácido cumárico en un medio adecuado. La presente invención también proporciona un método para conservar frutas que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición moduladora de la actividad enzimática como se define anteriormente a los frutos . De acuerdo a la presente invención, se proporciona una composición para la conservación de frutos, la composición que comprende al menos un inhibidor de fosfolipasa D, uno o más de un compuesto que comprende una sub-unidad de isopreno, uno o más de un componente de la ruta biosintetica de flavonoides, en un medio adecuado. La composición de la presente invención puede comprender adicionalmente uno o más del regulador de crecimiento vegetal o crecimiento de planta, uno o más de un antioxidante, un agente estabilizador de membrana, un agente tensioactivo, o cualquier combinación de los mismos.
También de acuerdo con la presente invención está el uso de la composición de la presente invención como se define anteriormente para la conservación de frutos tal como frutas y vegetales. Además, los frutos pueden ser frutos procesados, no procesados o parcialmente procesados, y para mejorar la vida en anaquel de flores cortadas. También de acuerdo con la presente invención, se proporciona un método para la conservación de frutos, el cual comprende: aplicar una cantidad efectiva de una composición a los frutos, en donde la composición comprende al menos un inhibidor de fosfolipasa D, al menos un compuesto que comprende una subunidad de isopreno, al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides y al menos un regulador de crecimiento vegetal en un medio adecuado. La composición de la presente invención puede comprender adicionalmente uno o más antioxidantes, un agente estabilizador de membrana, un agente tensioactivo, o cualquier combinación de los mismos. Además, se puede aplicar una cantidad efectiva de la composición por rociado, empapamiento, inmersión o evaporación. Este resumen no describe necesariamente todas las características necesarias de la invención sino que la invención también puede residir en una sub-combinación de las características descritas.
Descripción de la Modalidad Preferida La invención se refiere a composiciones, y el uso de composiciones para mejorar la calidad de vida en anaquel de frutas, vegetales, productos parcialmente procesados, y otros frutos. La siguiente descripción es una modalidad preferida a manera de ejemplo únicamente y sin limitación a la combinación de características necesarias para llevar a efecto la invención. La composición de la presente invención se puede usar para anular el desarrollo de, pero no se limita a, quemadura superficial, quemadura solar, para mantener o incrementar los niveles de antocianina, y para inhibir otros trastornos fisiológicos que puedan desarrollarse durante el periodo de pre-recolección o durante el almacenamiento de pos-recolección. También, las composiciones de la presente invención pueden mejorar, mantener o incrementar el color, firmeza, dulzura, sabor, vida en anaquel, tolerancia a enfriamiento, peso, nivel de nutracéuticos y el nivel de citoquímicos de los frutos procesados, no procesados o parcialmente procesados. La aplicación de una o más de las formulaciones descritas en la presente se puede hacer ya sea de antes de la recolección, en tanto que el producto aún está unido a la planta o árbol, o después de la recolección. Frutos no procesados se refiere a frutos, vegetales u otros frutos recolectados o no recolectados que sustancialmente no son diferentes en apariencia de su estado natural. Por ejemplo, las manzanas recolectadas de árboles o lechugas recolectadas del suelo son ejemplos representativos de frutos no procesados. Frutos parcialmente procesados se refiere a frutos que se han sometido a al menos un proceso mecánico, químico o físico que altera el estado natural o apariencia de los frutos. Los ejemplos representativos de frutos parcialmente procesados incluyen, de manera enunciativa y sin limitación, frutos que están cortados, picados, descascarados, troqueados en cubitos, en puré, estrujados, parcialmente procesados, etc. Frutos completamente procesados se refiere a frutos que se han sometido a múltiples procesos mecánicos, químicos o físicos. De acuerdo a la presente invención se proporciona una composición para la conservación de frutos que comprende al menos un inhibidor de fosfolipasa D, al menos un compuesto que comprende una subunidad de isopreno, y al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides en un medio adecuado. Opcionalmente, la composición también puede incluir al menos un regulador del crecimiento vegetal del tipo de citocina, un antioxidante, un agente estabilizador de membrana, un agente tensioactivo, o una combinación de los mismos.
Por el término "conservación" se quiere decir mejora, mantenimiento o extensión del tiempo de vida de las cualidades organolépticas de los frutos, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación, color, dulzura, sabor, sazón, tiempo de vida en almacenamiento, calidad nutricional o combinaciones de los mismos. Estas cualidades se pueden determinar usando pruebas de sabor estándar o inspección visual como se conocerá por una persona experta en la técnica . Por el término "inhibidor de fosfolipasa D" , se quiere decir un compuesto que es capaz de inhibir la actividad de fosfolipasa D. De manera preferente, el inhibidor de fosfolipasa inhibe la actividad inhibitoria hacia la fosfolipasa D a concentraciones micromolares o más diluidas y reduce la actividad de fosfolipasa D o al menos aproximadamente 10% en comparación a la actividad de fosfolipasa D observada en la ausencia del inhibidor de fosfolipasa D. Hay muchos ensayos conocidos en la técnica que se pueden usar para medir la actividad de fosfolipasa D, por ejemplo de manera enunciativa y sin limitación, un ensayo descrito por Pinhero et al., (1998; que se incorpora en la presente como referencia) . Sin que se desee que se una a alguna teoría, la fosfolipasa D puede estar comprendida en el desarrollo de quemadura superficial (una forma de senectud buscada, donde las capas celulares hipodérmicas sufren daño y deterioro) y otros procesos senescentes . Los inhibidores de fosfolipasa D incluyen, de manera enunciativa y sin limitación, hexenal, hexanal, hexenol , hexanol , y combinaciones de los miemos. Algunos expertos en la técnica señalarán que los inhibidores de fosfolipasa D mencionados anteriormente comprenden compuestos que tienen seis átomos de carbono (compuestos C6) . La presente invención también contempla inhibidores de fosfolipasa D que tienen más de seis átomos de carbono, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación geraniol, o menos de seis átomos de carbono. De manera preferente, los componentes de C6 se emplean en la composición de la presente invención, puesto que estos componentes están naturalmente presentes en frutas y en vegetales como componentes de sabor. Se puede usar otros inhibidores de fosfolipasa D, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación, lisofosfatidiletanolamina (US 5,126,155, que se incorpora en la presente como referencia) . Un ejemplo no limitante de inhibidor de fosfolipasa D es hexenal. Sin que se desee que se una por teoría, el hexanal, se puede reducir a hexanol a través de la acción de la reducción mediada por alcohol -deshidrogenasa . ' Los alcoholes se pueden someter a esterificación por alcohol : acil -CoA acil -transferasa , produciendo productos volátiles de éster, que son componentes integrales del sabor de manzanas y peras. Son comunes en las manzanas los ésteres que contienen componentes de C6 (hexanol, ácido hexanoico) . Los lados de las manzanas que desarrollan quemaduras producen menores cantidades de estos ésteres que los lados normales (Paliyath et al., 1997, Food, Res. Internacional, 30:95-103). De esta manera, también puede tener un efecto protector el suministro de hexanal a través de una composición de la presente invención. Las composiciones de la presente invención comprenden al menos un compuesto que comprende una unidad de isopreno (1, 3 -butadieno) de la fórmula: en donde Ri y R2 pueden ser cualquier sustituyente químico adecuado. Los compuestos que comprenden una subunidad de isopreno pueden comprender menos de aproximadamente 20 carbonos, o menos de aproximadamente 15 carbonos. En un ejemplo no limitante, el compuesto que comprende una subunidad de isopreno comprende menos de o aproximadamente 10 átomos de carbono. Sin embargo, las mezclas de compuestos que comprenden subunidades de isopreno con diferentes números de átomos de carbono se contemplan por la presente invención. Los compuestos que comprenden unidades de isopreno incluyen, de manera enunciativa y sin limitación, compuestos terpénicos o monoterpénicos, por ejemplo, pero no deseando que sea limitante, compuestos monoterpénicos con una estructura de CIO, por ejemplo, geraniol, acetato de geranilo, neral, nerol, citronellal y citronellol . Por el término "componente de la ruta biosintética de flavonoides" se quiere decir cualquier compuesto, compuesto intermedio derivado del mismo que se puede usar en la biosíntesis de flavonoides. Los componentes de la ruta biosintética de flavonoides incluyen de manera enunciativa y sin limitación ácido cumárico, ácido para-cumárico, ácido trans-cinámico, ácido cafeico, fenilalanina, acetil-CoA y malonil-CoA. El componente de la ruta biosintética de flavonoides puede ser ácido para-cumárico, ácido trans-cinámico, ácido cafeico, o una combinación de los mismos. Por ejemplo, sin que se desee que sea limitante, el componente de la ruta biosintética de flavonoides es ácido para-cumárico . Sin que se desee que se una por alguna teoría, mediante la adición de uno o más componentes de la ruta biosintética de flavonoides, esto puede mejorar o prolongar las cualidades organolépticas de los frutos al promover la biosíntesis de flavonoides dentro de la fruta o vegetal tratado, que puede conducir a su vez a la biosíntesis de antocianinas . Por ejemplo, el ácido cumárico se puede convertir a cumaril-CoA por la fruta y la combinación de cumaril-CoA con 3 -malonil -CoA produce el calcona, la estructura básica de los flavonoides. La biosíntesis de flavonoides se incrementa durante la maduración de " las frutas, y esto puede conducir a la biosíntesis de antocianinas que proporcionan color a la fruta. Las composiciones de la presente invención también pueden comprender un "regulador de crecimiento vegetal" seleccionado del grupo que consiste de citocininas, compuestos tipos citocinina, o compuestos que exhiben una acción similar a la citocininas. De manera preferente, el regulador de crecimiento vegetal tiene la capacidad de rejuvenecer tejidos envejecidos. Los reguladores de crecimiento vegetal pueden incluir adicionalmente , de manera enunciativa y sin limitación, bencil-adenina, cinetina, isopentenil-adenina, zeatina, poliaminas, y aminoácidos policatiónico, por ejemplo, polilisina. Sin que se desee que se una por teoría, uno o más reguladores del crecimiento vegetal, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación, citocinas, pueden mejorar la función antioxidante al inducir la biosíntesis de peroxidasas que son importantes en la desintoxicación de especies de oxígeno reactivo. Se ha asociado el desarrollo de quemadura superficial con un nivel mejorado de generación de oxígeno activo de una deficiencia en la función de las enzimas antioxidantes. Sin que se desee que se una por teoría, la bencil-adenina, poliaminas o aminoácidos policatiónicos pueden mejorar los niveles de peroxidasa dentro de las capas celulares epidérmicas e hipodérmicas de variedades vegetales de manzana susceptibles a quemadura (por ejemplo, Mclntosh, Roja Deliciosa, Cortland, etc.) que hacen que estas variedades vegetales sean más resistentes al desarrollo de la quemadura superficial. Por el término "medio adecuado" se quiere decir un solvente que es capaz de dispersar, disolver o de dispersar y disolver, los componentes de la composición. Un medio adecuado puede incluir, de manera enunciativa y sin limitación etanol, o una combinación de etanol y agua. Como se entenderá por un experto en la técnica, un medio adecuado no debe ser dañino a los niveles en que se aplique a los frutos. Además, el medio debe ser no tóxico a la concentración que se ingeriría después de aplicar una cantidad efectiva de la composición de la presente invención a los frutos, y consumir subsecuentemente los frutos revestidos con la composición. Las composiciones de la presente invención también pueden comprender un antioxidante tal como de manera enunciativa y sin limitación, ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, alfa-tocoferol , acetato de alfa-tocoferilo, acetato de alfa- ocoferol , o combinaciones de los mismos. Las composiciones de la presente invención también pueden comprender un agente estabilizador de membrana. Por el término "agente estabilizador de membrana/poder celular" se quiere decir un compuesto que mejora la membrana celular, o la integridad de la pared celular. Los agentes estabilizadores de membrana/poder celular incluyen de manera enunciativa y sin limitación poliaminas, tal como espermina, espermidina y similares, polímeros tal como de manera enunciativa y sin limitación quitina, y quitosan, tales tal como de manera enunciativa y sin limitación, cloruro de calcio. Un agente estabilizador de membrana/pared celular, preferido, es cloruro de calcio, sin embargo, se pueden usar otros compuestos, si están fácilmente disponibles o si están disponibles a un costo razonable. Sin que se desee que se una por teoría, los agentes estabilizadores de membrana tal como cloruro de calcio pueden actuar como un componente regulador importante de varios procesos bioquímicos en la célula, y mejorar la función del sistema de enzimas antioxidantes y la integridad de la pared celular. La composición de la presente invención también puede comprender uno o más agentes tensioactivos . Por el término "agente tensioactivo" se quiere decir un compuesto que comprende tanto una porción relativamente polar como una porción relativamente apolar y que es capaz de reducir la tensión superficial del agua. Los agentes tensioactivos incluyen de manera enunciativa y sin limitación, agentes tensioactivos grado alimento y detergentes conocidos por aquellos expertos en la técnica, que incluyen AGB 2045, TWEENMR 20 y TWEENMR 40. De manera preferente, el agente tensioactivo es un agente tensioactivo grado alimento. Para conservar frutas, vegetales, otros frutos y flores, la composición de la presente invención se aplica en cantidades efectivas a la fruta, vegetal, fruto o flores. Esta cantidad efectiva se puede determinar fácilmente siguiendo el procedimiento resumido en la presente. De acuerdo a un aspecto de la presente invención, se proporciona una composición que comprende: - al menos un inhibidor de fosfolipasa D, uno o más compuestos que comprenden una subunidad de isopreno, - uno o más compuestos de la ruta biosintética de flavonoides , - uno o más compuestos antioxidantes. Esta composición, ya sea sola, o en combinación con otros componentes, es efectiva en la reducción o eliminación de la quemadura, en la reducción del ablandamiento, mantenimiento del color, y mantenimiento o incremento del contenido de sólidos solubles en la fruta (ver Tablas 1-3C y 4-12B) . De acuerdo a un aspecto de la presente invención, se proporciona una composición modificadora de la actividad enzimática (EAM) que comprende: - al menos un inhibidor de fosfolipasa D, uno o más compuestos que comprenden una subunidad de isopreno, - uno o más compuestos de la ruta biosintética de flavonoides . Esta composición, ya sea sola, o en combinación con otros componentes, es efectiva en la reducción o eliminación de la quemadura, en la reducción del ablandamiento y en el mantenimiento o incremento del contenido de sólidos solubles en la fruta (ver Tablas 3D-9 en Ejemplos 3 y 4, respectivamente) . Adicionalmente, los componentes de la formulación de EAM son activos en el mantenimiento de la firmeza o el incremento del contenido de sólidos solubles de la fruta (ver Tabla 9, Ejemplo 4) . La formulación de EAM, o un componente de la misma, se puede preparar como una solución concentrada, que comprende : al menos un inhibidor de fosfolipasa D, de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 500 mM, de manera preferente de aproximadamente 40 mM a aproximadamente 100 mM; uno o más compuestos que comprenden una subunidad de isopreno, de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 500 mM, de manera preferente de aproximadamente 50 mM a aproximadamente 100 mM; y - uno o más compuestos de la ruta biosintética de flavonoides, de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 500 mM, de manera preferente de aproximadamente 30 mM a aproximadamente 100 mM, y se diluye antes del uso. Los compuestos que se pueden incluir opcionalmente en las composiciones de la presente invención incluyen: - al menos un regulador del crecimiento vegetal, de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 50 mM, de manera preferente de aproximadamente 4 mm a aproximadamente 10 mM, - uno o más antioxidantes, de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 500 mM, de manera preferente de aproximadamente 50 mM a aproximadamente 100 mM; - uno o más agentes estabilizadores de membrana de aproximadamente 0.5 mM a aproximadamente 100 mM, de manera preferente de aproximadamente 10 mM a aproximadamente 70 mM en la solución final; y - un agente tensioactivo de aproximadamente 0.001% a aproximadamente 0.2%, de manera preferente de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 0.1% (p/P) en la solución final . Una solución que se puede aplicar a los frutos se puede obtener al diluir la solución concentrada en agua por aproximadamente 100 a aproximadamente 1,000 veces.
También se proporciona dentro de la presente invención una composición de antioxidante (AOX) que comprende ascorbato, palmitato de ascorbato, alf -tocoferol y acetato de alfa-tocoferol . Esta composición también es efectiva en la reducción de quemadura y en el mantenimiento de la firmaza en la fruta (ver Tabla 3E, Ejemplo 3), así como en el incremento de la vida en anaquel de flores cortadas (ver Tabla 13, Ejemplo 8). La composición de AOX comprende de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 500 mM de antioxidantes, una cantidad entre estas, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 100 mM, o una cantidad entre éstas. Los compuestos que se pueden incluir opcionalmente en las composiciones de la presente invención incluyen.- - al menos un regulador de crecimiento vegetal, de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 50 mM, de manera preferente de aproximadamente 4 mM a aproximadamente 10 mM; - uno o más agentes estabilizadores de membrana de aproximadamente 0.5 mM a aproximadamente 100 mM, de manera preferente de aproximadamente 10 mM a aproximadamente 70 mM de la solución final; y - un agente tensioactivo de aproximadamente 0.001% a aproximadamente 0.2%, de manera preferente de 0.01% a aproximadamente 0.1% (p/p) en la solución final. Una solución que se puede aplicar a los frutos se puede obtener al diluir la producción concentrada en agua por aproximadamente 100 a aproximadamente 1,000 veces. La presente invención también contempla composiciones que pueden comprender dos o más inhibidores de fosfolipasa D, compuestos que comprenden una subunidad de isopreno, componentes de la ruta biosintética de flavonoides, y opcionalmente dos (o más) reguladores del crecimiento vegetal, antioxidantes, agentes estabilizadores de membrana, agentes tensioactivos , o combinaciones de los mismos. Los componentes de cada grupo pueden diferir en la hidrofobicidad, tal que uno de los componentes pueda dividirse de manera preferente en una membrana en tanto que el otro componente pueda permanecer en un ambiente más hidrófilo. Sin que se desee que se una por teoría, el componente más hidrófobo puede proporcionar protección contra los procesos perjudiciales que se originan en un compartimiento de membrana, en tanto que el componente más hidrófilo puede proporcionar protección contra procesos perjudiciales que se originan en un compartimiento hidrófilo. Por ejemplo, sin que se desee que sea limitante, la composición de la presente invención puede comprender acetato de geranilo y geraniol como compuestos que comprenden una unidad de isopreno. Sin que se desee que se una por teoría, el acetato de geranilo, que es más lipófilo que el geraniol. Una vez dentro de la célula, la acción de la esterasa endógena puede liberar el geraniol del acetato de geranilo. Las composiciones de la presente invención también pueden comprender uno o más antioxidantes tal como de manera enunciativa y sin limitación ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, a-tocoferol, acetato de ot-tocoferilo, acetato de a-tocoferol, o combinaciones de los mismos. Los antioxidantes reducen el nivel de especies de oxígeno activas que pueden ser un contribuyente principal al desarrollo de quemadura y putrefacción de frutos. Sin que se desee que se una por teoría, el palmitato de ascorbilo, acetato de tocoferilo o acetato de a-tocoferol son más hidrófobos que el ácido ascórbico y tocoferol, respectivamente, y de esta manera, estos componentes más hidrófobos pueden proporcionar mejor protección dentro de las membranas celulares. La reducción del nivel de especies de oxígeno activas en los frutos tal como de manera enunciativa y sin limitación, fruta, vegetales y flores pueden mejorar y extender su vida en anaquel y mantener su calidad nutricional . La presente invención también contempla composiciones en donde los componentes individuales pueden tener múltiples funciones. Por ejemplo, sin que se desee que sea limitante, el geraniol, un análogo superior de hexanol, es un compuesto que comprende una subunidad de isopreno, y este compuesto también puede ser capaz de inhibir la actividad de fosfolipasa D. Las composiciones de la presente invención se pueden aplicar a frutas, vegetales y flores pre- recolectadas, pos -recolectadas, o ambas. Además, la aplicación de la composición de la presente invención se puede realizar usando cualquier método conocido en la técnica. Por ejemplo, sin desear que sea limitante, la composición de la presente invención se puede aplicar a los frutos como una aspersión, poción, inmersión, un vapor o cualquier combinación de los mismos. Se puede preferir el tratamiento por rociado en casos tal como la aplicación de pre¡-recolección (donde no pueda ser factible la inmersión o empapamiento) . Además, el tratamiento por rociado puede reducir la labor asociada con tratamientos por inmersión, por ejemplo, sin que se limite a los costos de operación de almacenamiento y también puede eliminar la eliminación de desperdicio puesto que se pueden preparar cantidades exactas de la composición y aplicar a los frutos. Se puede usar tratamiento con vapor en las aplicaciones de posrecolección, y pueden mejorar la adición de la composición como se describe en la presente a cualquier matriz adecuada, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación, a papeles impregnados, ropa o láminas de polímero sintético, materiales de medios de empaque y la matriz encriptada colocada en la vecindad de los frutos recolectados. Las composiciones de la presente invención, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación, las composiciones de AOX, aplicadas a una matriz exhiben actividad conservadora (por ejemplo, para flores de brócoli: contenido de proteína en día 0: 3.03 mg/100 mg de FW, y después de 12 días en el control: 1.78 mg/100 mg de FW; v. tratamiento con AOX después de 12 días: 2.39 mg/100 mg de FW. Por lo tanto, la presente invención también proporciona una composición que comprende un material de matriz revestido o impregnado con al menos un inhibidor de fosfolipasa D, uno o más compuestos que comprenden una sub-unidad de isopreno, uno o más compuestos de la ruta biosintética de flavonoides, y opcionalmente uno o más compuestos antioxidantes, un regulador del crecimiento vegetal, uno o más agentes estabilizadores de membrana, un agente tensioactivo, o una combinación de los mismos. Las composiciones de la presente invención evaden las cuestiones asociadas con la eliminación de difenilamina (DPA) . Por ejemplo, la DPA no se puede descargar a las corrientes de agua, sino que se debe diluir y rociar en suelo de huerto. También se contempla que las composiciones de la presente invención se pueden usar para el almacenamiento de frutos no procesados, parcialmente procesados o completamente procesados. Los ejemplos de esta modalidad incluyen de manera enunciativa y sin limitación, productos en botes o en vinagre . La aplicación de la composición de la presente invención a frutos puede mejorar el desarrollo del color, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación, como en manzanas y peras. De esta manera, la composición de la presente invención se puede aplicar a frutos para mejorar potencialmente la dulzura, color (antocianinas) , sabor y para mantener la calidad de las frutas. Además, la presente invención contempla composiciones que se pueden aplicar a uvas para mejorar o mantener su calidad nutracéutica , así como vinos elaborados de las mismas. Las composiciones de la presente invención también se pueden usar en muchos tipos de frutos, por ejemplo de manera enunciativa y sin limitación, monocotiledoneas, dicotiledóneas, leguminosas y hongos. Los ejemplos específicos incluyen de manera enunciativa y sin limitación manzanas, peras, cerezas, duraznos, nectarinas, uvas, chabacanos, ciruelas, ciruelas pasa, soya, frutas cítricas tal como de manera enunciativa y sin limitación naranja, toronja y mandarinas, apio, zanahorias, brócoli, repollo, coles de brusela, espinaca y otros vegetales frondosos, cultivos de bayas tal como de manera enunciativa y sin limitación moras azules, arándanos, grosellas, lechuga, pepinos, tomates, pimientos, hiervas y bananas. La composición de la presente invención se puede aplicar como un rociado de pre-recolección a soyas para mejorar potencialmente los niveles de proteínas e isoflavonoides , a remolachas y caña de azúcar para mejorar los niveles de azúcar, a cultivos de cereales para mejorar el nivel de proteína en las semillas. Además, se pueden rociar o sumergir flores en la composición de la presente invención. En esta modalidad, las composiciones pueden mejorar la longevidad y extender la vida en anaquel de las flores. La descripción anterior no se propone para limitar la invención reivindicada de ninguna manera, además, la combinación analizada de características no puede ser absolutamente necesaria para la solución inventiva . Todas las referencias en la presente se incorporan como referencia. La presente invención se ilustrará adicionalmente en los siguientes ejemplos. Sin embargo, se va a entender que estos ejemplos son sólo para propósitos ilustrativos, y no se deben usar para limitar el alcance de la presente invención de ningún modo.
EJEMPLO 1 : Un ejemplo Representativo de una Composición para la Conservación de Frutas, Vegetales y otros Frutos. Un ejemplo de soluciones concentradas que se puede usar para el tratamiento de frutos se proporciona a continuación, sin embargo, se va entender que estas condiciones se proporcionan como ejemplos únicamente y no se van a considerar como limitantes de ninguna manera. La Solución Concentrada A comprende: Hexanal 83 mM Geraniol 57 mM Acetato de Geranilo 44 mM Ácido cumárico 30 mM Bencil-adenina 8.8 mM La Solución Concentrada B comprende: Ácido L-ascórbico 56 mM Palmitato de ascorbilo 24 mM -tocoferol 15 mM acetato de a-tocoferol 2 mM La Solución C comprende CaCl2, a una concentración final de 1% en la solución aplicada a frutas, vegetales o frutos. La solución A y la Solución B se elaboran en etanol absoluto. 5-10 mL de Solución A se mezclan con 5-10 mL de Solución B, y la solución resultante se diluye en agua a 1 litro. Opcionalmente , se pueden incluir cloruro de calcio (1% p/v) y un agente tensioactivo (0.01 % p/v) en la solución final de 1 litro. La formulación de puede aplicar a frutas, vegetales, frutos o flores procesados o no procesados, como una aspersión o inmersión de pre-recolección o de pos-recolección. De manera alternativa, la formulación se puede aplicar a un líquido que circunda los vegetales, frutos o flores, se aplica usando un atomizador, o se aplica a una matriz para el uso como un tratamiento con vapor de los frutos .
EJEMPLO 2 : Efecto de Composiciones Conservadoras de la Presente Invención en el Desarrollo de Quemadura en Manzanas A) Efectos de Rociado o Aspersión de Composiciones de la Presente Invención en Desarrollo de Quemadura en Manzanas Se examinó el efecto de las composiciones de la presente invención en el desarrollo de quemaduras. Aproximadamente 4 celemines de manzanas se dividen en aproximadamente 4 conjuntos ' de aproximadamente 50-60 manzanas cada uno. Un conjunto de manzanas se sumerge en una solución de control de agua que comprende 10 mL/L de etanol y 1 mL/L de detergente (ABG 7045; o Sylgard 309, Dow Corning) en tanto que el otro conjunto se sumerge en una composición de la presente invención preparada de acuerdo al Ejemplo 1 que comprende las Soluciones A, B y C. A las manzanas se les deja secar y se transfieren subsecuentemente a una atmósfera de aire (0°C) o una atmósfera controlada que comprende 3% de 02, 2.5% de C02 a 0°C. Se examinan las manzanas almacenadas en aire después de aproximadamente 18-19 semanas, en tanto que las manzanas almacenadas en la atmósfera controlada se sacan después de aproximadamente 20-21 semanas. SE evalúan las manzanas para la quemadura después de aproximadamente una semana después del almacenamiento a temperatura ambiente. Las manzanas que muestran algún descoloramiento (amorenamiento) se consideran manzanas quemadas. El porcentaje de quemadura representa el número de manzanas que exhiben quemadura dividido por el número de total de manzanas en la muestra multiplicado por 100%. En los Ensayos 1 y 3, las manzanas se ponen a temperatura ambiente después del almacenamiento. En los Ensayos 2 y 4, las manzanas se evalúan después de una semana de almacenamiento a temperatura ambiente. Los resultados se ilustran en la Tabla 1.
Tabla 1: Efecto de Composiciones de la Presente Invención en el Desarrollo de Quemadura en Manzanas Mclntosh Manzanas Almacenadas en Aire aSEM: error estándar de la media: Los ensayos 1 y 3 representan los datos obtenidos cuando las manzanas se ponen a temperatura ambiente. Los ensayos 3 y 4 representan los datos obtenidos cuando las manzanas se evalúan después de una semana a temperatura ambiente.
Como se muestra en la tabla 1, la composición de la presente invención reduce el desarrollo de quemadura en manzanas. Además, se observa una reducción en el desarrollo de quemadura a pesar de si las manzanas se almacenaron en aire o bajo condiciones de atmósfera controlada.
B) Efectos de Aspersión o Rociado de Composiciones de la Presente Invención en el Desarrollo de Quemadura en Manzanas Se usan tres árboles como controles y dos árboles se usan para el tratamiento usando una composición preparada de acuerdo al Ejemplo 1 que comprende las soluciones A, B y C. Aproximadamente dos semanas después del rociado con la composición de la presente invención, aproximadamente la mitad de las manzanas en cada árbol se recolectaron (Hl) y los árboles se rociaron nuevamente. El resto de las manzanas se recolectó aproximadamente 1 semana más tarde (H2) . Las manzanas recolectadas se almacenan en aire o bajo una atmósfera controlada (3% de 02/ 2.5% de C02 a 0°C) durante aproximadamente 4 semanas. Después del almacenamiento, las manzanas se evalúan para la quemadura. Se evalúala quemadura como se describe en el Ejemplo 1.
Tabla 2 : Efectos de Rociado de Composiciones de la Presente Invención en el Desarrollo de Quemadura en Manzanas Mclntosh Manzanas almacenadas en Aire Conjunto % quemadura (±SEM) % quemadura (±SEM) Experimental Ensayo 1 Ensayo 2 Control Hl 32.0 ± 4.0 65.0 ± 3.0 Hl + Composición 11.0 ± 1.7 - Conjunto % quemadura (+SEM) % quemadura (±SEM) Experimental Ensayo 3 Ensayo 4 Control Hl 8.0 + 1.7 71.0 ± 1.7 Hl + Composición 6.0 + 2.6 19 Manzanas Almacenadas en Atmósfera Controlada Conjunto % quemadura (±SEM) % quemadura (±SEM) Experimental Ensayo 1 Ensayo 2 Control H2 7.5 ± 4.0 51.0 ± 5.5 H2 + Composición 2.5 ± 1.4 25.0 ± 2.8 Conjunto % quemadura (±SEM) % quemadura (±SEM) Experimental Ensayo 1 Ensayo 2 Control H2 5.0 ± 2.0 54.0 ± 4.0 H2 + Composición 2.5 ± 1.4 17.5 Como se muestra en la tabla 2, las composiciones de la presente invención se pueden rociar sobre manzanas para reducir el desarrollo de la quemadura. Además, se observa una reducción en el desarrollo de la quemadura a pesar de si las manzanas se almacenaron en aire o bajo condiciones de atmósfera controlada. Con referencia ahora a la Tabla 3A, se muestra el efecto de la composición preparada de acuerdo al Ejemplo 1 de la presente invención en el desarrollo de la quemadura en varias variedades de manzana. La composición de la presente invención se aplica como se describe anteriormente.
Tabla 3A: El Efecto de las Composiciones de la Presente Invención en el desarrollo de Quemadura en Varias Variedades de Manzana CA se refiere a la atmósfera controlada como se describe en el Ej emplo 2.
Las composiciones de la presente invención son útiles para inhibir el desarrollo de quemadura en muchas variedades de manzanas. Como se muestra en la tabla 3A, las composiciones de la presente invención reducen el desarrollo de quemadura en variedades de manzanas tal como de manera enunciativa y sin limitación, orspur Mclntosh, Marshall Mclntosh, Cortland, y Roja Deliciosa. El efecto de la composición de la presente invención de las manzanas Empire, que son resistentes a quemaduras se usa como un control . Los resultados sugieren que la formulación de la presente invención no daña la fruta. Además, se observa una reducción en el desarrollo de la quemadura en la mayoría de las manzanas a pesar de si las manzanas se almacenaron en aire o bajo condiciones de atmósfera controlada.
C) Efecto de la composición de la presente invención en el desarrollo de quemadura superficial en manzanas Se recolectaron manzanas a la madurez óptima como se indica por una prueba de almidón como se conoce por aquellos expertos en la técnica. Se sumergieron las manzanas (50-60) en la formulación del Ejemplo 1 (diluida a 10 ml/litro) durante un periodo de 5 minutos, y se dejó secar a temperatura ambiente. Las manzanas sumergidas, junto con los controles no tratados se almacenaron en aire a 0°C durante un periodo de seis meses antes del análisis. Las manzanas se pusieron a temperatura ambiente, se recolectaron veinte manzanas representativas al azar de cada réplica y se dejaron a temperatura ambiente durante un periodo de una semana antes de estimar la quemadura. Los resultados se presentan en la Tabla 3B.
Tabla 3B: El Efecto de las Composiciones de la Presente Invención en el desarrollo de Quemadura en Varias Variedades de Manzana *almacenadas en atmósfera controlada: 3% de 02, 2.5% de C02 D) Efecto de la composición, y los componentes de la composición, de la presente invención en el desarrollo de quemadura superficial y ablandamiento en manzanas Se investigaron los efectos de la formulación de antioxidante de la presente invención, y los sub-grupos de componentes químicos en las calidades de pos-recolección en las manzanas Cortland. Se sumergieron las manzanas en: 1) la formulación completa (preparada como se resume en el Ejemplo 1) , estos resultados se muestran en la Tabla 3C; 2) un subgrupo que comprende moduladores de la actividad enzimática (EAM) , estos resultados se muestran en la Tabla 3D; 3) otro subgrupo que contiene antioxidantes (AOX) , estos resultados se presentan en la Tabla 3E; 4) 1500 ppm de difenilamina (DPA; el presente método de control de quemadura, los resultado en cada una de las Tablas 3C-3E) ; o 5) se dejan sin tratar (control, resultados presentados en cada una de las Tablas 3C-3E) . En la Tabla 3C se presenta el efecto de la duración del tratamiento por inmersión de manzanas Cortland usando la formulación de antioxidante (Ejemplo 1, Solución B) . Diez mi de la formulación se diluyeron a un litro. La solución también contuvo 1% de cloruro de calcio (p/v final) y 0.1 % (v/v final) de agente tensioactivo . Se sumergieron dos celemines de manzanas en 40 litros de la formulación durante 10 segundos, hasta 5 minutos como se indica en la Tabla 3C, se deja secar durante la noche y se almacena bajo atmósfera controlada (2.5% de oxígeno, 3% de dióxido de carbono, 3°C) en una operación de almacenamiento comercial durante 9 meses antes de la evaluación. Se removieron veinte manzanas seleccionadas al azar de cada uno de los tratamientos y se mantuvieron a temperatura ambiente durante una semana antes de que se llevaran a cabo las evaluaciones.
Tabla 3C: El Efecto de la Composición de la Presente Invención (Ejemplo 1) en el desarrollo de Quemadura en manzanas Cortland. El número de manzanas que muestran quemadura o ablandamiento se expresa como un porcentaje del número total de manzanas evaluadas. Los valores son la media de dos evaluaciones independientes Duración del Tratamiento % de Quemadura % de superficial Ablandamiento Control No Tratado 67.5 65 10 segundos 12.5 60 1 minuto 27.5 57. 2.5 minutos 7.5 17. 5 minutos 17.5 50 tratada con DPA (1 minuto, 35 25 1500 ppm) Los resultados en la Tabla 3C demuestran que el uso de la formulación completa reduce tanto la quemadura superficial como el ablandamiento en la fruta. Además, la composición del Ejemplo 1 es tan o más efectiva que el tratamiento con DPA. El efecto de una formulación modificada del Ejemplo 1, que comprende moduladores de la actividad enzimática (formulación de EAM) , en el desarrollo de quemadura superficial y ablandamiento se presenta en la Tabla 3D. La formulación modificada comprende hexanal, geraniol , acetato de geranilo y ácido cumárico a la concentración originalmente presente en la formulación completa. No está presente bencil-adenina, ácido L- ascórbico, palmitato de ascorbilo, a-tocoferol, acetato de oc-tocoferol en la formulación de EAM. Diez mi del concentrado de la formulación de EAM se diluyó un litro para formar la solución final. La solución también contuvo cloruro de calcio (1% p/v, final) y • agente tensioactivo (0.1% v/v final) . Se sumergieron dos celemines de manzanas en 40 litros de solución durante cada periodo de tiempo y se sometieron a almacenamiento bajo atmósfera controlada como se define anteriormente. Las manzanas se sacaron después de 9 meses de almacenamiento . Se recolectaron al azar veinte manzanas de cada tratamiento de dos conjuntos independientes, y se dejaron a temperatura ambiente durante una semana antes de evaluar la quemadura y ablandamiento .
Tabla 3D: El Efecto de una Composición de EAM de la Presente Invención en el desarrollo de Quemadura en manzanas Cortland. El número de manzanas que muestran quemadura o ablandamiento se expresa como un porcentaje del número total de manzanas evaluadas. Los valores son la media de dos evaluaciones independientes Duración del % de Quemadura % de Ablandamiento Tratamiento superficial Control No Tratado 67.5 65 10 segundos . 25 40 1 minuto 32.5 42.5 2.5 minutos 55 7.5 5 minutos 42.5 17.5 tratada con DPA (1 35 25 minuto, 1500 ppm) Los resultados en la Tabla 3D demuestran que el uso de la formulación de EAM es efectivo- en la reducción de la quemadura superficial. Sin embargo, este tratamiento parece reducir considerablemente el ablandamiento, debido potencialmente a la reducción de la degradación de los fosfolípidos de la membrana. El efecto de una segunda formulación modificada de la presente invención, que comprende antioxidantes (formulación de AOX) en del desarrollo de la quemadura superficial y ablandamiento se presenta en la Tabla 3E. Los componentes de la formulación de AOX incluyen ascorbato, palmitato de ascorbato, -tocoferol y acetato de o¡-tocoferilo o acetato de oí-tocoferol) a la concentración originalmente presente en la formulación completa. No estuvieron presentes hexanal, geraniol, acetato de geranilo, ácido cumárico o bencil -adenina en la formulación de AOX. Se diluyeron diez mi del concentrado de la formulación de AOX a 1 L para formar la solución final. La solución también contuvo cloruro de calcio (1% p/v final) y agente tensioactivo (0.1% p/p, final) . Se sumergieron dos celemines de manzanas en 40 litros de solución para cada periodo de tiempo y se sometieron a almacenamiento en la atmósfera controlada como se define anteriormente. Las manzanas se sacaron después de 9 semanas de almacenamiento. Se recolectaron al azar veinte manzanas, para cada tratamiento, de dos conjuntos independientes, y se dejaron a temperatura ambiente durante una semana antes de evaluar la quemadura y ablandamiento. Los resultados se presentan en la Tabla 3E.
Tabla 3E: Efecto de una Composición de AOX de la presente invención en el desarrollo de quemadura en manzanas Cortland. El número de manzanas que muestran quemadura o ablandamiento se expresa como un porcentaje del número total de manzanas evaluadas. Los valores son la media de dos evaluaciones independientes Duración del % de Quemadura % de Tratamiento superficial Ablandamiento Control No Tratado 67.5 65 10 segundos 25 ¦49.5 1 minuto 52.5 50 2.5 minutos 52.5 42.5 minutos 20 12.5 tratada con DPA (1 35 25 minuto, 1500 ppm) Los resultados en la Tabla 3E demuestran que el uso de la formulación de AOX reduce tanto la quemadura superficial como el ablandamiento en la fruta. También se examinó (formulación de BA) el efecto de benciladenina (BA) en el desarrollo de quemadura superficial y ablandamiento. Se aplicó BA a la concentración originalmente presente en la formulación completa del Ejemplo 1. La formulación de BA no comprende nada de hexanal , geraniol , acetato de geranilo, ácido cumárico, ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, a-tocoferol, o acetato de tocoferol . Diez mi del concentrado se diluyeron a un litro para formar la solución final . La solución también contuvo cloruro de calcio (1% p/v final) de agente tensioactivo (0.1% p/v final). Se sumergieron dos celemines de manzanas en 40 litros de solución durante cada periodo de tiempo y se sometieron a almacenamiento en atmósfera controlada como se define anteriormente. Se sacaron las manzanas después de 9 meses de almacenamiento. Se recolectaron al azar veinte manzanas para cada tratamiento, de dos conjuntos independientes y se secaron a temperatura ambiente durante una semana antes de la evaluación de la quemadura y ablandamiento. Los resultados se presentan en la Tabla 3F.
Tabla 3F: El efecto de una formulación de BA de la presente invención en el desarrollo de quemadura en manzanas Cortland. El número de manzanas que muestran quemadura o ablandamiento se expresa como un porcentaje del número total de manzanas evaluadas. Los valores son la media de dos evaluaciones independientes Duración del % de Quemadura % de Tratamiento superficial Ablandamiento Control No Tratado 67.5 65 10 segundos 60 72.5 1 minuto 52.5 52.5 2.5 minutos 52.5 25 5 minutos 27.5 30 tratada con DPA (1 35 25 minuto, 1500 ppm) Los resultados · de la Tabla 3E demuestran que la aplicación de benciladenina es moderadamente efectiva en la reducción de la quemadura superficial y ablandamiento . De forma colectiva, los resultados de las Tablas 3A-3E demuestran que la composición del Ejemplo 1 es efectiva en la reducción o eliminación de quemadura superficial en fruta sin la reducción del ablandamiento en fruta. Además, los componentes de la composición del ejemplo 1, incluyendo moduladores de la actividad enzimática (formulación de EAM) , antioxidantes (formulación de AOX) , o benciladenina (formulación de BA) , en la ausencia de otros componentes, exhiben actividad en la reducción o eliminación de quemadura superficial y en la reducción de ablandamiento de la fruta .
EJEMPLO 3 : Efecto de aspersión o rociado de composiciones d acuerdo con la presente invención en melocotones Red Haven Firmeza y sólidos solubles Se prepara una formulación preparada de acuerdo al Ejemplo 1, que comprende las soluciones A, B y C, y se rocía en dos árboles (aproximadamente 4L/árbol) aproximadamente un mes antes de la recolección (+composición) . Se rocían dos árboles de control con una cantidad similar de una solución que comprende etanol absoluto (5 ml/L) y el detergente ABG 7047 (Sylgard 309, Dow Corning también se puede usar), 1 mL/L (control de rociado) y dos árboles no rociados se usan como controles (controles no rociados) . Todos los árboles son de aproximadamente la misma edad y todos poseen la misma cantidad de raíces. Los melocotones se recolectan y se analizan los parámetros de calidad aproximadamente 24 horas y una semana después de la recolección. Los resultados se describen en la Tabla 4.
Tabla 4 : Parámetros de Calidad de Fruta Después del Rociado con una Composición (Comp) de la Presente Invención. Se determinaron muestras 1 día y 7 días después de la recolección 1 Día Después de 7 Día Después de Recolección Recolección Parámetro de Muestra 1 Muestra 2 Muestra 1 Muestra 2 Calidad Firmeza (kg) Control no rociado 5.07±0.40 4.11±0.13 3.0,5+0.19 2.98±0.11 Control rociado ? .20±0.48 6.38+0.37 3.52+0.14 4.25+0.21 Rociado + conp 6. o 0±0.19 7.50+0.27 3.42+0.16 3.40±0.25 Sólidos Solubles* (%) Control no rociado 9.31+0.22 9.57+0.28 9.71+0.22 9.72+0.22 Control rociado 9.14+0.25 8.98+0.32 10.30±0.22 10.00±0.15 Rociado + comp 9.70±0.33 10.1±019 10.28±0.48 11.85±0.25 Peso de Fruta (kg; promedio de 15) Control no rociado 1.66 1.86 Control rociado 1.68 1.69 Rociado + comp 2.32 2.35 *Los sólidos solubles se estimaron al monitorizar el índice de refracción del producto con un ref ractómetro portátil como sería evidente para un experto en la técnica. Sin embargo, se pueden emplear otros métodos conocidos en la técnica para medir los sólidos solubles como será evidente para un experto en la técnica.
Como se muestra en la Tabla 4, la composición de la presente invención mejora la firmeza, mantiene los sólidos solubles, y mantiene o incrementa el peso promedio de frutos, sugiriendo que las composiciones de la presente invención son efectivas en la conservación de frutas, vegetales y otros frutos.
Desarrollo de color El efecto de las composiciones de la presente invención se valoró adicionalmente en el desarrollo del color de melocotones Red Haven. Un lote de diez árboles de melocotones o duraznos se seleccionaron al azar y se rociaron con la composición de la presente invención (Ejemplo 1) , el mismo número de árboles se dejó sin tratar como el control. Se recolectaron los melocotones a madurez óptima y se examinaron para el desarrollo de color después de cinco días. Los melocotones se almacenaron a una temperatura de 25°C para la maduración completa. Los valores de color de 15 melocotones seleccionados al azar de cada árbol (10 control, 10 rociado) se estimaron, variando desde 0 (nada o muy poco color) a un máximo de 8. La formulación se roció dos veces (2-4 L/árbol dependiendo del tamaño) un mes y quince días antes de la recolección. El resumen de los resultados se muestra en la Tabla 5.
Tabla 5; Valores de Color de Melocotón Los resultados mostrados en la Tabla 5 indican que la composición de la presente invención mejora y mantiene el desarrollo de color en los melocotones.
EJEMPLO 4. - Efectos de la composición de la presente invención en cerezas Cerezas Hedel La formulación de la presente invención, preparada de acuerdo al método resumido en el Ejemplo 1, que comprende 1% (p/v) de cloruro de calcio y 0.1% (v/v) de agente tensioactivo se aplicaron a un lado de un árbol de cerezas (4 litros por lado), el otro lado se dejó como un control. Se rociaron cuatro árboles separados de cereza de Hedel. Se recolectaron las cerezas 2 semanas después del rociado. Los resultados se muestran en la Tabla 6 a continuación.
Tabla 6: Parámetros de Calidad de Cerezas Hedel después del Rociado con una Composición de la Presente Invención Firmeza (kg) Sólidos Solubles* (%) Árbol # Lado no Lado Lado no Lado rociado rociado rociado rociado 1 2.29 . 2.94 15 15.2 2 2.95 3.58 15 15.5 3 2.54 2.88 14.8 16.4 4 3.03 3.06 16.4 16 *Se estimaron los sólidos solubles al monitorizar el índice de refracción del producto con un refraetómetro portátil .
Los resultados mostrados en la Tabla 6 demuestran que las composiciones de la presente invención se pueden emplear para mejorar la calidad de las cerezas. La intensidad de color de las cerezas también se determinó en cerezas rociadas y no rociadas. Se extrajeron muestras en etanol a 95% durante la noche y la intensidad del color extraído se determinó a 500 nm. Se observó un incremento en el OD en los extractos de etanol obtenidos de cereza que se han rociado (OD 0.64 y 0.77 control, a 0.69 y 0.82 tratado, respectivamente). En pruebas alternativas, la composición de la presente invención se aplicó a árboles de cereza como se describe anteriormente. Las cerezas se recolectaron de la mitad no rociada y de la rociada de los árboles. Todas las cerezas dentro de un segmento igual se recolectaron a pesar de sus condiciones y se separaron en grupos de buenas, dañadas y secas. "Dañadas" se caracterizó por ablandamiento excesivo, hendimiento o infección fungal . Los resultados se muestran en la Tabla 7.
Tabla 7: Parámetros de Calidad Adicionales de Cerezas Hedel después del Rociado con la Composición de la Presente Invención (Fwt : Peso fresco) Cerezas no rociadas (Fwt Cerezas rociadas (Fwt kg) kg) Árbol Bueno Dañado Seco Bueno Dañado Seco 1 6.85 1.3 0.11 7.26 2.03 0.14 2 6.19 2.03 0.12 7.64 2.02 0.19 3 4.58 4.03 0.41 5.42 2.86 0.27 4 4.3 3.34 0.77 6.15 2.76 0.26 Prom 21.92 10.7 1.41 26.47 9.67 0.86 Los resultados mostrados en la Tabla 7 indican que la composición de la presente invención protege y mejora la calidad de las cerezas.
Cereza Vista Se preparó de acuerdo al método resumido en el Ejemplo 1 una formulación modificada que comprende hexanal, geraniol, acetato geranilo, benciladenina , ascorbato y o-tocofero, 1% (p/v) de cloruro de calcio y 0.1% (v/v) de agente tensioactivo (ABG 7045; o Sylgard 309, Dow Corning) . La formulación modificada no comprendió ácido cumárico, palmitato y ascorbilo y acetato de tocoferol . La formulación modificada se aplicó a un lado de cerezas (4 litros por lado), el otro lado se dejó como un control. El tratamiento por rociado se repitió al menos 2 semanas antes de la recolección. Se rociaron tres árboles separados de cerezas Vista. Se recolectaron las cerezas dos semanas después del rociado y se almacenaron a 4°C en aire. Se evaluó la calidad de las cerezas cada 2 semanas durante un periodo de 8 semanas. Los resultados (media de 20 muestran independientes, tres estimaciones por muestra) se muestran en la Tabla 8.
Tabla 8 : Parámetros de Calidad de Cerezas Vista después del Rociado con una Composición de la Presente Invención Firmeza (kg) Sólidos Solubles* (%) Árbol # Lado no Lado Lado no Lado rociado rociado rociado rociado Propiedades iniciales 1 1.89 1.89 19.8 20.4 2 1.61 1.64 19.6 16 3 1.67 1.9 19.2 19.2 Después de dos semanas 1 1.18 1.21 16.93 17.43 2 1.23 1.25 15.5 14.8 3 1.24 1.26 16.66 17.8 Después de cuatro semanas 1 1.25 1 :34 16.37 16.6 2 1.14 1.24 15.4 5.08 3 1.08 1.29 15.97 16.1 Después de seis semanas 1 1.18 1.35 16.6 17 2 1.17 1.23 15.6 16 3 1.28 1.48 16.23 16.13 Los resultados mostrados en la Tabla 8 demuestran que las composiciones modificadas de la presente invención se pueden emplear para mejorar la calidad de las cerezas.
Efecto de compuestos individuales de las composiciones de la presente invención Se sumergieron cerezas Vista en la formulación de antioxidante como se describe anteriormente, así como el compuesto separado de la composición de la presente invención, para evaluar los efectos de los componentes individuales en la vida en anaquel y en la calidad. Las muestras se sumergieron durante 2.5 minutos en varios componentes elaborados en una solución acuosa que contiene 0.1% de agente tensioactivo (ABG 7045; Sylgard 309, Dow Corning también se puede usar), etanol , (10 ml/1) y la cantidad requerida de los componentes. Las muestras se dejaron secar a temperatura ambiente y se almacenaron a 4°C en aire. Se llevaron a cabo las evaluaciones dos semanas y cuatro semanas después del tratamiento. Los resultados dados son la media de los valores de veinte muestras. Los resultados se muestran en la Tabla 9.
Tabla 9: Efecto de inmersión después de recolección de varias composiciones, o componentes individuales de las composiciones como se describe en la presente en cerezas Vista Tratamiento Firmeza (kg) Sólidos Solubles (%) 2 4 2 4 semanas semanas semanas semanas Composición completa3 1.13 1.12 17.2 16.8 Composición 1* 1.25 1.16 16.2 16.8 Composición 2** 1.09 1.06 16 15.4 Control : Etanol 1.21 1.02 15.8 15 (10ml/l) Hexanal (lml/1) 1.24 1.16 16.4 15.8 Geraniol (lml/1) 1.01 1.24 16.8 17 Acetato de Geranilo 1.21 1.12 17 14.6 (lml/1) BA (200 mg/1) 1.24 1.14 13.8 16.4 CaCl2 (10 g/1) 1.26 1.09 16 15 Ácido Ascórbico 1.2 1.12 16.4 15 (lg/D a-tocoferol (1 ml.l) 1.21 1.12 16.1 16.7 a composición como se resumen en el Ejemplo 1 * Contienen: Geraniol, Acetato de Geranilo, Hexanal, BA, CaCl2 ** Contienen: Ácido Ascórbico, ct-tocoferol, CaCl2 Los resultados indican que el geraniol, acetato de geranilo, hexanal , CaCl2 y BA dan por resultado firmeza incrementada cuando se aplican a cerezas Vista ya sea solos o en combinación. El geraniol, acetato de geranilo, hexanal y a-tocoferol dan por resultado un incremento en los sólidos solubles. Además, las composiciones que comprenden geraniol, acetato de geranilo, hexanal, BA y CaCl2 exhiben buena firmeza y propiedades de sólidos solubles cuando se aplican a cerezas Vista.
Cerezas Bing La composición como se describe en el Ejemplo 1, que comprende hexanal, geraniol, acetato de geranilo, benciladenina, ascorbato y a-tocoferol, 1% (p/v) de cloruro de calcio y 0.1% (v/v) de agente tensioactivo se preparó y aplicó como una aspersión o rociado de pre-recolección a un lado de un árbol de cerezas (4 L por lado) , el otro lado se dejó como un control. El tratamiento por rociado se repitió al menos dos semanas antes de la recolección. Se rociaron tres árboles separados de cerezas Bing. Las cerezas se recolectaron dos semanas después del rociado y se almacenaron a 4°C en aire. Se evaluó la calidad de las cerezas cada 2 semanas durante un periodo de 8 semanas . Los resultados (media de 20 muestras independientes, tres estimaciones por muestra) se muestran en la Tabla 10.
Tabla 10 : Parámetros de Calidad de Cerezas Bing después del Rociado con una Composición de la Presente Invención Firmeza (kg) Sólidos Solubles* Árbol # Lado no Lado Lado no Lado rociado rociado rociado rociado Propiedades iniciales 1 2.26 2.38 17 18.4 2 2.33 2.38 18.6 17.4 3 2.15 2.18 17.2 18.8 Después de dos semanas 1 2.2 2.16 19.4 19 2 1.94 1.97 17.8 19 3 1.88 1.92 17.6 18.2 Después de cuatro semanas 1 1.65 1.83 18.4 19.03 2 1.76 1.9 18.43 18.87 3 171 1.76 18 18.6 Después de seis semanas 1 2.26 2.54 17 18 2 2.47 2.79 17.27 18.27 3 2.27 2.29 17.33 17.87 Los resultados mostrados en la Tabla 10 demuestran adicionalmente que las composiciones de la presente invención se pueden emplear para mejorar la calidad de las cerezas .
EJEMPLO 5- Efecto de la composición de la presente invención en uvas Se valoró en las uvas el efecto de la composición de la presente invención. Se rociaron vid de uvas Pinot Noir y Merlot con la formulación del Ejemplo 1, que comprende 1% de cloruro de calcio y 0.1% (v/v) de agente tensioactivo, dos veces (dos meses de un mes) antes de la recolección. Todos los racimos de las uvas rociadas y no rociadas se recolectaron. Los resultados se muestran en la Tabla 11.
Tabla 11: Efecto de la Composición de la Presente Invención en Uvas Característica medida Control Composición Aplicada Número de vid 5 4 Número de racimo 91 74 Peso total (g) 2922.7 4627.44 Peso promedio por racimo (g) 32.12 62.53 Los resultados mostrados en la Tabla 11 muestran que la aplicación de la formulación de la presente invención a uvas incrementa de manera significativa el peso de rendimiento de las uvas en comparación a las uvas que no se tratan con la formulación de la presente invención. Además al rendimiento mejorado de las uvas, las uvas tratadas exhibieron un mejor color y parecieron ser de mejor calidad que las uvas que no se trataron con la composición de la presente invención.
EJEMPLO 6. - Efectos de la composición de la presente invención en ciruelas. Se rociaron dos variedades de ciruelas azules "Valerie" y "Valour" con la composición. Se asignaron árboles alternados como control y para el tratamiento por aspersión dentro de la misma fila. La variedad "Valerie" recibió sólo una aspersión o rociado, puesto que estaba cercana a la maduración. "Valor" recibió dos rociados de la formulación, un mes y 15 días antes de la recolección. Se recolectaron las frutas a la madurez óptima y se almacenaron a 4°C en aire. Los datos a los valores de media de las mediciones de 10 ciruelas de cada árbol, con tres árboles de ¦ control no rociados y cuatro árboles rociados para formulación. Los datos se presentan en las Tablas 12A y 12B.
Tabla 12A: Parámetros de Calidad de ciruelas Valeire después del Rociado con Composición de la Presente Invenció. El peso promedio de las ciruelas de control fue de 848.67 g en tanto que las ciruelas rociadas fue de 846.50 g Firmeza (kg) Sólidos Solubles* (%) Árbol # Lado no Lado Lado no Lado rociado rociado rociado rociado Inicial 2.41 2.51 14.67 14.25 2 semanas 1.75 1.89 15.9 15.25 4 semanas 1.96 1.89 14.73 14.6 6 semanas 1.27 1.37 15.6 15.4 8 semanas 0.67 0.9 14.5 15.9 Tabla 12B: Parámetros de Calidad de ciruelas Valour después del Rociado con Composición de la Presente Invenció. El peso promedio de las ciruelas de control fue de 609.33 g en tanto que de aquel de las ciruelas rociadas fue de 675. 67 g Firmeza (kg) Sólidos Solubles* (%) Árbol # Lado no Lado Lado no Lado rociado rociado rociado rociado Inicial 2.8 3.18 24.13 20.53 2 semanas 3.12 3.37 23.93 21.87 4 semanas 2.02 2.03 24.13 21.53 Estos resultados demuestran que se mejora la firmeza con la aplicación de pre-recolección de las composiciones de la presente invención.
EJEMPLO 7 : Ensayo de enzima fosfolipasa D. La actividad de fosfolipasa D (PLD) se puede determinar como se describe por Pinhero et al., 1998 al medir la vibración de colina radiomarcada a partir de 1,2-dipalmitoil-L3-fosfatidil (N-metil-3H) colina a 23°C. La mezcla de ensayo básica contiene Tris-HCl 0.1 M (pH 7.5), EGTA 0.2 mM, proteína de membrana o citosol (2.5 mg) y aproximadamente 100,000 dpm de fosf tidilcolina marcada con colina en Tritón X-100 al 0.1% de (v/v) (0.01% final) para hacer un volumen total de 1 mL. Para estudiar la regulación de PLD por varios compuestos, el compuesto se adiciona a la mezcla de reacción básica. La reacción se termina después de 10 minutos al adicionar 100 mL de HC1 4N es seguido por 1 mL de cloroformo/metanol (2:1, v/v) y se deja durante la noche. La cantidad de [3 H] colina liberada durante la reacción se determina al mezclar una alícuota de 0.5 mL de la fase acuosa directamente en 5 mL de fluido de escintilación (Ecolume, ICN) y al determinar la cantidad de radiomarca usando un contador de escintilación Beckman LS 6800 (Beckman Instruments) . La estimación de la actividad de PLD al monitorizar la liberación de colina es un método rápido y conveniente, pero se puede realizar usando otros métodos conocidos en la técnica, por ejemplo, de manera enunciativa y sin limitación, estimando la actividad de PLD usando sustratos fluorescentes o al estimar la cantidad de fosfatidiletanol formado (Harris et al., 1995; Pinhero et al. , 1998) .
EJEMPLO 8. - Efectos de la composición de la presente invención en flores cortadas. Se valoró el efecto de la composición de antioxidante de la presente invención en flores cortadas. Se dividieron flores de clavel blanco miniatura en la etapa 1 (etapa de brote ajustado) en tres grupos de cuarenta. Un grupo se mantuvo como control, otro grupo de control se roció con una solución que contiene 0.1 mL de etanol absoluto y 0.1 mL de ABG 7045 (Sylgard 309, Dow Corning también se puede usar) . El tercer grupo se roció con una solución que comprende 0.025 mL del concentrado de la formulación de AOX (Ejemplo 1, Solución B) y 0.1 mL de ABG 7045 en 200 mL de agua destilada. Las flores se incubaron a temperatura ambiente bajo iluminación normal durante 10 días. Los resultados se muestran en la Tabla 13.
Tabla 13: Efecto de la Composición de la Presente Invención en Flores Cortadas Etapa 1-. Brote ajustado; Etapa 2.- parcialmente abierta con centro de color amarillo; Etapa 3.- flores blancas completamente abiertas; Etapa 4.- pétalos muestran marchitamiento en la punta; Etapa 5.- flores completamente marchitas Puesto que no hay diferencia en el patrón de senectud entre los controles no rociados y rociados, sólo se muestra en la Tabla 13 el control rociado. Los resultados mostrados en la Tabla 13 muestran que la aplicación de la formulación de AOX de la presente invención a flores cortadas disminuye de manera significativa la senectud, incrementando por lo tanto, la vida en anaquel de las flores en comparación a las flores que no se tratan con la formulación de la presente invención. Todas las referencias en la presente se incorporan como referencia.
Referencias Anet, E.F.L.G., y Coggiola, I.M. (1974) J. Sc . Food Agr. 25, 293-298. Barden, C.L., y Bramlage, W.J. (1994) Journal of Amer. Soc . Hort . Sci. 119, 264-269. Blanpeid, G.D., Bramlage, W.J., Chu, C.L., Ingle, M. , Kushad, M.M., Lau, O.L., y Lister, P.D. (1991) Can. J. Of Plant Sci. 71, 605-608. Ghahramani, F . , Scott, K, J., Buckle, K.A. y Patón, J.E. (1999) J. Hortic. Sci & Biotech 74, 87-93. Harris, W.E., Knutson, C. M . , y Stahl, W. L. (1995) Plant Physiol. Biochem. 33, 389-398. Patterson, M.E., y Workman M. (1962) Proc . Amer.
Soc. Hortic. Sci. 90, 130-136. Pierson, C.F., y Schomer, H.A. (1969) Hort Science 3,10. Pinhero, R.G., Paliyath, G. , Yada, R. Y., Murr, D.P. (1998) Plant. Physiol. Biochem. 36, 213-224.

Claims (38)

  1. REIVINDICACIONES 1. Una composición para la conservación de frutos, composición que comprende: a) al menos un inhibidor de fosfolipasa D; b) al menos un compuesto que comprende una subunidad de isopreno; y c) al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides, en un medio adecuado.
  2. 2. La composición según la reivindicación 1, en donde al menos un inhibidor de fosfolipasa D se selecciona del grupo que consiste de hexanal , hexenol, hexenal, geraniol, o una combinación de los mismos.
  3. 3. La composición según la reivindicación 1, en donde un compuesto que comprende una subunidad de isopreno que se selecciona del grupo que consiste de geraniol, acetato de geranilo, neral, nerol , citronellal citronellol, o una combinación de los mismos.
  4. 4. La composición según la reivindicación 1, en donde al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides se selecciona del grupo que consiste de ácido para-cumárico, ácido trans-cinámico, ácido cafeico o una combinación de los mismos.
  5. 5. La composición según la reivindicación 1, que comprende además al menos un regulador del crecimiento vegetal, en donde el regulador de crecimiento es una citocina .
  6. 6. La composición según la reivindicación 1, en donde el medio adecuado comprende etanol, metanol, agua, o una combinación de los mismos.
  7. 7. La composición según la reivindicación 6, en donde el medio adecuado comprende agua y etanol .
  8. 8. La composición según la reivindicación 1, en donde los frutos comprenden frutos procesados, frutos no procesados y frutos parcialmente procesados.
  9. 9. La composición según la reivindicación 1, que comprende además un antioxidante, un agente estabilizador de membrana/pared celular, un agente tensioactivo o una combinación de los mismos.
  10. 10. La composición según la reivindicación 8, en donde los frutos comprenden fruta, vegetales o una combinación de los mismos.
  11. 11. La composición según la reivindicación 9, en donde el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de ácido ascórbico, palmitato de ascorbato, a-tocoferol, acetato de a-tocoferol y una combinación de los mismos.
  12. 12. La composición según la reivindicación 9, en donde el agente estabilizador de membrana/pared celular es cloruro de calcio.
  13. 13. La composición según la reivindicación 9, en donde el agente tensioactivo comprende un agente tensioactivo grado alimento.
  14. 14. Un método para conservar frutos, que comprende, aplicar u7na cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 1 a los frutos.
  15. 15. El método según la reivindicación 14, en donde la composición comprende adicionalmente un antioxidante, un agente estabilizador de membrana, un agente tensioactivo, o una combinación de los mismos.
  16. 16. El método según la reivindicación 14, en donde el paso de aplicación comprende rociado.
  17. 17. El método según la reivindicación 16, en donde el rociado comprende rociado de pre-recolección.
  18. 18. El método según la reivindicación 14, en donde el paso de aplicación comprende la inmersión.
  19. 19. El método según la reivindicación 14, en donde el paso de aplicación comprende almacenamiento en un medio que comprende la composición.
  20. 20. Un método para prevenir quemadura solar en frutos que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 9 a los frutos.
  21. 21. Un método para prevenir quemadura superficial en frutos que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 9 a los frutos.
  22. 22. Un método para mejorar el nivel de antocianina en fruta, que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición en la reivindicación 9 a la fruta.
  23. 23. El método según la reivindicación 22, en donde la fruta se selecciona del grupo que consiste de manzanas, melocotones, nectarinas, uvas, cerezas, chabacanos, ciruelas, ciruelas pasas, peras, cultivos de bayas, y frutas cítricas .
  24. 24. Un método para mejorar la firmeza, dulzura, vida en anaquel, calidad de fruta o una combinación de los mismos en frutas que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición según la reivindicación 9 a la f uta.
  25. 25. El método según la reivindicación 24, en donde la fruta se selecciona del grupo que consiste de manzanas, melocotones, nectarinas, uvas, cerezas, chabacanos, ciruelas, ciruelas pasas, peras, cultivos de bayas, y frutas cítricas .
  26. 26. Un método para mejorar los niveles de proteína e isoflavonoides en soya, que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 9 a la soya.
  27. 27. Un método para mejorar el nivel de azúcar de remolachas o caña de azúcar que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 9 a las remolachas o caña de azúcar.
  28. 28. Un método para mejorar la vida en anaquel de flores cortadas, que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 9 a las flores cortadas.
  29. 29. Una composición para la conservación de frutos, composición que comprende al menos un antioxidante seleccionado del grupo que consiste de ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, a-tocoferol, acetato de oc-tocoferol, y una combinación de los mismos, en un medio adecuado.
  30. 30. La composición según la reivindicación 29, que comprende además, un agente estabilizador de membrana/pared celula .
  31. 31. Un método para conservar frutos que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 29 a los frutos.
  32. 32. Un método para mejorar la vida en anaquel de flores cortadas, que comprende aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 29 a las flores cortadas .
  33. 33. Una composición para la conservación de frutos que comprende geraniol, acetato de geranilo, hexanal y ácido cumárico en un medio adecuado.
  34. 34. Un método para conservar frutos que comprende, aplicar una cantidad efectiva de la composición de la reivindicación 32 a frutos.
  35. 35. Una matriz revestida o impregnada con la composición de la reivindicación 1.
  36. 36. Una matriz revestida o impregnada con la composición de la reivindicación 29.
  37. 37. Una matriz revestida o impregnada con la composición de la reivindicación 32.
  38. 38. Una composición para la conservación de frutos, composición que comprende: a) al menos un inhibidor de fosfolipasa D seleccionado del grupo que consiste de hexanal , hexenol , hexenal , geraniol , o una combinación de los mismos. b) al menos un compuesto que comprende una subunidad de isopreno selecciona del grupo que consiste de geraniol, acetato de geranilo, neral , nerol, citronellal citronellol, o una combinación de los mismos; c) al menos un componente de la ruta biosintética de flavonoides seleccionado del grupo que consiste de ácido para-cumárico, ácido trans -cinámico , ácido cafeico o una combinación de los mismos; d) al menos un regulador de crecimiento vegetal, en donde el regulador de crecimiento es citocina; e) un antioxidante seleccionado del grupo que consiste de ácido ascórbico, palmitato de ascorbato, a-tocoferol, acetato de a-tocoferol, y una combinación de los mismos ; f) CaCl2; y g) un agente tensioactivo, en un medio adecuado que comprende etanol , metanol agua o una combinación de los mismos.
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