MXPA02003898A - Derivados de benzopiranilguanidina, proceso para su preparacion y composiciones farmaceuticas que los contienen. - Google Patents

Derivados de benzopiranilguanidina, proceso para su preparacion y composiciones farmaceuticas que los contienen.

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Abstract

La presente invención se relaciona con derivados novedosos de benzopiranilguanidina de fórmula (I), en donde R1, R2, R3, R4, R5, R6, n y * se definen cada uno en la especificación, con procesos para preparación de los mismos y con el uso farmacéutico de los derivados de benzopiranilguanidina. Los derivados de benzopiranoguanina de la presente invención se pueden utilizar para proteger daño cardíaco, a células neuronales o cerebro, conservación deórganos y también los derivados de benzopiranilguanidina son farmacológicamenteútiles para inhibir la producción de NO, y para suprimir la peroxidación de lípidos, angiogénesis o restenos

Description

- - DERIVADOS DE BENZOPIRANILGUANIDINA, PROCESO PARA SU PREPARACIÓN Y COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS QUE LOS CONTIENEN ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN 1. Campo de la Invención La presente invención se relaciona con derivados novedosos de benzopiranilguanidina de fórmula 1. También se relaciona con procesos para preparar los compuestos novedosos y formulaciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuestos como un ingrediente activo. La presente invención también se relaciona con el uso farmacéutico de derivados de benzopiranilguanidina. En particular, la presente invención es farmacológicamente útil en la protección al daño cardíaco, a células neuronales o al cerebro, o la conservación de órganos, y también es farmacológicamente útil para inhibir la producción de NO, la peroxidación de lípidos, la angiogénesis o la restenosis.
REF: 138003 - - FÓRMULA I En donde Ri, R2, R3, R , R5, Rs, n y * se definen cada uno en la especificación. 2. Descripción de la Técnica Anterior Las cardiopatías isquémicas habitualmen e se presentan como resultado de isquemia miocárdica, cuando disminuye de manera significativa el suministro de oxígeno, en comparación con la demanda de oxígeno debido a un desequilibrio entre estos dos factores. En la mayor parte de los casos, se encuentra que existe un trastorno en la arteria coronaria como la causa principal de las cardiopatías isquémicas. Si se estrecha el diámetro interior de la arteria coronaria, se vuelve insuficiente la - - irrigación sanguínea, lo que resulta en insuficiencia en el suministro de oxígeno, lo que provoca angina de pecho, infarto al miocardio, cardiople ía aguda, arritmia y así sucesivamente (G.J. Grover, Can. J. Physiol. 75, 309 (1997); G. D. Lopashuk et al., Science & Medicine 42 (1997)) . Debido a que las cardiopatías isquémicas también son causadas por otros factores complejos además de los trastornos de la arteria coronaria, la farmacoterapia así como el método operacional tal como la angioplastia coronaria transluminal percutánea (PTCA) son necesarias para su tratamiento. Para este fin, se han utilizado diversos medicamentos que incluyen agentes antitrombóticos, sustancias curativas de la arteriosclerosis , especialmente bloqueante ß, nitrato, antagonistas de calcio tales como nifedipina, trombolíticos , aspirina e inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (ACE) . De una manera diferente a las sustancias que abren el canal de potasio, convencionales, el compuesto piranilguanidina (BMS-180448) representado por la siguiente fórmula 2, se ha informado que actúa selectivamente sobre los canales de potasio sensibles a ATP (KATP) que se localizan en el corazón (K. S. Atwal et al., J. Mde. Chem. 36, 3971 (1993) ; K. S. Atwal et al., J. Me. Chem. 38, 1966 (1995)) . Se ha encontrado que el compuesto BMS 180448 protege a corazones isquémicos sin disminución significativa - - de la presión sanguínea, lo que proporciona un aspecto promisorio para el desarrollo de medicamentos novedosos como cardioprotectores .
FÓRMULA 2 Las isquemias global y focal inician cambios celulares progresivos, que llevan a daño al cerebro isquémico (M.D. Ginsburg, Neuros Scientist 1, 95 (1995)) . Incluso después de que se restaura el flujo sanguíneo, el oxígeno puede aumentar las reacciones bioquímicas que general radicales libres, lo que puede generar que se produzca "daño por reperfusión" . Para evitar daño al cerebro causado por isquemia/reperfusión, se debe proteger al cerebro durante el período isquémico para evitar daño adicional y deben minimizarse los cambios celulares progresivos patológicos. Para este fin, se utilizan - - neuroprotectores tales como antagonistas de aminoácidos excitadores y antioxidantes. Se sabe que el daño o la muerte de neuronas es la causa principal de diversos trastornos neurológicos tales como apoplejía, trauma cerebral, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, asfixia en lactantes, glaucoma y neuropatía diabética, etc. (G. J. Zopp et al., Drugs 54, 9(1997) ; I. Sziraki et al., Neurosci . 85, 110 (1998)) . Las neuronas se dañan por diversos factores y habitualmente por incrementos en la concentración de hierro, especies reactivas de oxígeno y peroxidantes dentro de las neuronas (M. P. Mattson et al., Methods Cell Biol . 46, 187 (1995); Y. Goodman et al., Brain Res. 706, 328 (1996)) . Un incremento en la concentración de hierro en células neuronales induce la formación de radicales hidroxilo altamente reactivos. Un exceso de radicales libres de oxígeno facilita la peroxidación de lípidos, de manera que los peroxidantes se acumulan en las neuronas. Los radicales libres reactivos acumulados en las células se sabe que son los responsables de las enfermedades iflamatorias tales como artritis; aterosclerosis ; insuficiencia cardíaca y enfermedades neurodegenerativas tales como demencia así como daño agudo y crónico a tejidos y órganos, provocados por isquemia-reperfusión o por endotoxinas vía infección bacteriana.
- - Por lo tanto, se han buscado soluciones terapéuticas para minimizar el daño o muerte de neuronas, incluyendo la inhibición de peroxidación de lípidos, producción de NO y especies reactivas con oxígeno inducidas por endotoxinas. Hasta ahora, se ha informado que los antioxidantes disminuyen el daño neuronal y la muerte causada por un aumento en la concentración de hierro, dentro de las neuronas. Existe un gran esfuerzo en el desarrollo de medicamentos farmacéuticos que sean capaces de evitar daño neuronal por tensión oxidativa (Y. Zhang et al., J. Cereb. Blood Flow Metab. 13, 378 (1993)) . La asfixia en lactantes (IA, por sus siglas en inglés) , activada por deficiencia transtoria de suministro de oxígeno durante el parto, se ha informado que es causado por la reducción en la producción de energía, daño de la membrana celular debido a radicales libres de oxígeno, liberación de neurotransmisores excitadores, cambio de las concentraciones intracelulares de iones que incluyen calcio, zinc, etc. La IA es un problema principal en todo el mundo, debido a que, si la IA es grave, son altas las probabilidades de mortalidad (aproximadamente 1/3 de los casos) [C. F. Loid et al., Physiology and Behavior 68: 263-269 (2000)] . Además, puede producir secuelas a largo plazo tales como trastornos en el movimiento, incapacidad en el aprendizaje, epilepsia, distonia, retardo mental y - - espasticidad . Las enzimas antioxidantes, el halopurinol, las vitaminas C y E, los eliminadores de radicales libres, los inhibidores de neurotransmisores excitadores, los bloqueantes de canal de calcio tales como nimodipina y flunarizina, los inhibidores de la generación de NO, la terapia hiperglicémica e hipotérmica pueden ser benéficas para la protección de daño cerebral, pero su aplicación clínica aún es limitada. De esta manera, se requiere una investigación más intensa para tratar adecuadamente la asfixia en lactantes. El glaucoma, una de las causas principales de ceguera, se define como una neuropatía óptica relacionada con cambios característicos en el nervio óptico. En los humanos, el nervio óptico consiste de un millón de axones desde las neuronas cuya pericarion reside principalmente en la capa de células del ganglio y en menor grado, en la parte interior de la capa nuclear interna. La apariencia excavada de la cabeza del nervio óptico en el glaucoma se considera que es causada por la muerte y perdida subsecuente, de las células del ganglio y sus axones [N.N. Osborne, et. Al. Survey of Ophthalmology, 43; suppl . S102-128 (1999)] . Los agentes neuroprotectores en glaucoma pueden proteger de la muerte de las neuronas retínales, en particular las células del ganglio, directa o indirectamente. Se pueden utilizar - - diversos agentes tales como antagonista receptor de NMDA, bloqueante ß, antagonistas de calcio y antioxidantes, para evitar la muerte de neuronas retínales inducida por isquemia . Aunque no se ha establecido con claridad la patogénesis de la neuropatía diabética, se han propuesto para la misma dos hipótesis principales. Una es las anormalidades metabólicas y la otra se relaciona con deficiencia en el flujo sanguíneo en el nervio periférico [K. Naka et. Al Diabetes Research and Clinical Practice, 30: 153-162 (1995)] . Se encuentran bajo ensayos clínicos la acetil-L-carnitina (ALC) al estimular el metabolismo de lipidos y mejorar las respuestas nociceptivas dañadas de las neuronas, y Prosaptide al liberar factores neurotróficos . Además, memantina muestra buenos efectos sobre la demencia vascular mediante la regulación del receptor NMDA, y actualmente se encuentra bajo ensayo clínico. De esta manera, se pueden desarrollar agentes neuroprotectores que tengan diversos mecanismos de acción para tratar la neuropatía diabética. La relación de cáncer en enfermedades humanas aumenta gradualmente. Se reconoce la angiogénesis , formación de vasos sanguíneos nuevos, como el proceso fundamental para el crecimiento y metástasis de tumores sólidos (Folkma, J. et al., J. Biol . Chem. 267:10931-10934 (1992)) . La - - angiogenesis es controlada por inductores e inhibidores de angiogenesis. Cuando se rompe el equilibrio entre los mismos, esto es, cuando prevalecen los inductores de angiogenesis sobre los inhibidores de angiogénesis , se forma una gran cantidad de vasos sanguíneos nuevos. La angiogénesis se relaciona estrechamente con diversos fenómenos fisiológicos tales como desarrollo embriónico, sanado de heridas, inflamación crónica, hemangiomas, retinopatía diabética, artritis reumatoide, psoriasis, complicaciones en el SIDA y el crecimiento y metástasis de tumores malignos (Forkman, J. , Klagsbrun. M. Science 235: 442-447 (1987) ) . La angiogénesis incluye varios procesos tales como la migración, proliferación y diferenciación de células endoteliales y es un requisito importante para el crecimiento y metástasis de cáncer. Detalladamente, debido a que las células tumorales en crecimiento requieren la formación de vasos sanguíneos desde las células huéspedes, los promotores de angiogénesis derivados de tumores se estimulan para inducir la angiogénesis dentro de la masa tumoral . Después, los vasos sanguíneos que se forman alrededor de los tumores malignos facilitan la metástasis de las células tumorales a otros lugares. Por lo tanto, la inhibición de la angiogénesis induce la prevención del crecimiento de metástasis de cánceres. Como una de las áreas de investigación importantes para el desarrollo de - - medicamentos anticancerígenos, se a puesto mucha atención en el hallazgo de inductores de angiogénesis e inhibidores de angiogénesis y el esclarecimiento de sus mecanismos de trabajo . Hasta ahora, se ha encontrado que las proteínas tales como prostamina y factores necróticos tumorales, factores derivados de tejidos de cartílago y esteroides angioestáticos denominados de cortisona así como diversos derivados de esteroides son capaces de jugar papeles como inhibidores de angiogénesis. En particular, la hidrocortisona muestra actividad antiangiogenica al administrarse como tratamiento conjunto con heparina (Lee, A. et al., Science 221: 1185-1187 (1983); Crum, R. et al., Science 230: 1375-1378 (1985)) . Sin embargo, estos compuestos tienen el problema potencial de tratar cánceres efectivamente debido a su citotoxicidad. Las operaciones coronarias percutáneas (PCI, por sus siglas en inglés) juegan un papel importante en el manejo de la estenosis arterial coronaria, estrechamiento del lumen como resultado del crecimiento de una placa aterosclerótica en la íntima (recubrimiento interior) de los vasos, con una tasa de éxito mayor de 95%, pero esto se complica por estrechamiento importante de la arteria (restenosis) en 20-50% de pacientes en los siguientes 6 meses después de la operación (Bult, H. Tips, 21:274-279 - - (2000) ) . No se comprende completamente la biología de la restenosis, pero los mecanismos celulares predominantes que contribuyen a restenosis incluyen trombosis, migración y proliferación de célula de músculo liso vasculares y cicatrización accidental. A diferencia de la aterosclerosis , la restenosis no depende de la concentración o composición de lípidos en plasma aterogénico. Ha sido difícil encontrar terapias efectivas para restenosis debido a la compresión incompleta de la biología de la restenosis y la carencia de modelos animales adecuados. Algunas clases de medicamentos, antagonista de glicoproteína ilb/IIIa, antioxidante probucol, recientemente han mostrado beneficios potenciales en ensayos clínicos (Bult, H. Tips, 21; 274-279 (2000)) . Dado que la restenosis esta caracterizada por actividad proliferativa intensa, de esta manera se está buscando el desarrollo de medicamentos para reducir la proliferación de células de músculo liso vasculares . La extensa investigación en el desarrollo de compuestos con eficacias farmacológicas mencionadas antes y por parte de los inventores, encontraron derivados de benzopiranilguanidina representados por la fórmula 1 los cuales tienen actividad cardioprotectora y neuroprotectora superior, evitando el daño por isquemia-reperfusión y el daño epóxico. Los compuestos también muestran diversas - - eficacias farmacológicas que incluyen protección de neuronas, impedimento de peroxidación de lípidos y de formación de especies de oxígeno reactivas, protección de la retina isquémica, mejoramiento de respuestas nociceptiva dañada en ratas diabéticas, inhibición de la producción de NO y supresión de angiogénesis y restenosis. De esta manera, los compuestos de la presente invención pueden ser útiles en la prevención y tratamiento de diversas enfermedades relacionadas con el sistema cardiovascular tal como infarto cardíaco y fallo cardíaco congestivo; apoplejía; daño neuronal tal como asfixia en lactantes, glaucoma, neuropatía diabética y trauma cerebral; enfermedades relacionadas con radicales libres de oxígeno tales como enfermedades neurodegenera ivas y aterosclerosis ; angiogénesis tales como cánceres y retinopatía diabética, o restenosis, también se pueden utilizar en la protección de conservación de órganos tales como el corazón, ríñones, hígado y tejidos y en la protección de órganos en cirugía cardiovascular mayor.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Uno de los objetivos de la presente invención es proporcionar derivados novedosos de benzopiranilguanidina de fórmula . Otro objetivo de la presente invención es - - proporcionar un proceso para la preparación de derivados benzopiranilguanidina . Un objetivo adicional de la presente invención proporcionar un uso farmacéutico de los derivados de benzopiranilguanidina. En particular, la presente invención proporciona el uso de derivados de benzopiranilguanidina para la protección del cerebro y corazón de daño isquémico y por hipoxia, neuroprotección, inhibición de la producción de NO, peroxidación de lipidos y generación de especies de oxígeno reactivas, o supresión, y de la supresión de angiogénesis y de restenosis.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN presente invención proporciona derivados benzopiranilguanidina representados por la siguiente fórmula 1, y sus sales farmacéuticamente aceptables. FÓRMULA 1 - - en donde Rx representa H, halógeno, CF3, N02, CN, 0Ra, 0(C=0)Ra, COORa, NH2, NHS(0)raRa, NH (C=0) Ra o S(0)mRa; Ra representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono, o un grupo arilo; y m es un número entero de 0 a 2, R2 representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono, ORb O-^ R3 representa CH2ORa, . ( —< ) o. ( —? Z) ); Ra se define como en lo anterior; Rb y Rc son independientes entre si y representan un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono, respectivamente; y Z representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 5 átomos de carbono, R4 representa OH, H, halógeno, 0N02 o 0(C=0)Ra; y Ra es como se define en lo anterior; R5 y R6 son independientes entre si y cada uno representa H, halógeno, un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono, 0Ra, CX3, N02, C02Ra, -(C=0)Ra o S03Ra es como se define en lo anterior; y X representa halógeno, y n es un número entero de 0 a 2. Y * representa el centro quiral .
- - En la fórmula I, de manera más preferible, Ri representa N02, CN, H2 o S(0)mRa; Ra representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 2 átomos de carbono, o un grupo arilo; y m es un número entero de 0-2, R2 representa CH3, R3 representa Rb y Rc son independientes entre si y representan un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono, respectivamente, y Z representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 5 átomos de carcbono, R4 representa OH, H o 0(C=0)Ra; y Ra representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono; R5 y R6 son independientes entre si y representan H, halógeno, un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono, 0R , CX3 o N02 ; Ra representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono; y X representa halógeno, y n es un número entero de 0-2. La presente invención incluye todos los solvatos e hidratos los cuales se pueden preparar a partir de derivados de benzopiranilguanidina de fórmula 1, además de los - derivados de benzopiranilguanidina de fórmula 1 y sus sales farmacéuticamente aceptables. La presente invención incluye todos los isómeros estereoquímicos separados, es decir, compuestos diastereoméricamente puros o enantioméricamente puros, los cuales tienen uno o más centros quirales en las posiciones 2, 3 y 4, además de las mezclas racémicas o mezclas diastereoméricas de derivados de benzopiranilguanidina de fórmula 1. En caso de tener tres centros quirales en las posiciones 2, 3 y 4, los derivados de 3,4-dihidrobenzopirano, de acuerdo con la presente invención, están representados por los isómeros ópticos tales como (Ii) , (I2) , (I3) e (I4) (Véase la siguiente fórmula 3) .
FÓRMULA 3 - - En donde Ri, R2, R3, R4, R5 R6 y n son como se definen en lo anterior. En particular, los compuestos preferibles de la presente invención son: 1) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 - hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4- clorofenil) guanidina; 2) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- ( 6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 - hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4- clorofenil) guanidina; 3) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- ( 6 -nitro-3 , 4 -dihidro- 3 - hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3- clorofenil) guanidina; 4) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 - hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopíran-4-il) -N' - (3- clorofenil) guanidina; 5) (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- ( 6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 - - - hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-nitrofenil) guanidina; 6) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil) guanidina; 7) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil) guanidina; 8) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximeti.l-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxifenil) guanidina; 9) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxifenil) guanidina; 10) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- ( 6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 11) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- ( 6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 12) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-clorofenil) guanidina; 13) (2S( 3Sf 4R) -N"-ciano-N- ( 5-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' - (3- - - clorofenil ) guanidina; 14) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil ) guanidina; 15) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil) guanidina; 16) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxifenil) guanidina; 17) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran 4-il) -N' - (4-metoxifenil) guanidina; 18) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metilfenil) guanidina; 19) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metilfenil) guanidina; 20) (2.R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; 21) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; - - 22) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopíran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 23) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 24) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3f 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 25) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 26) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- ( 3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 27) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- ( 3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 28) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-hidroximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil ) guanidina ; 29) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-hidroximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil ) guanidina ; 30) (2R, 3Rr 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 - - hidroxi-2-metil-2-metoximetil-2H-benzopiran-4-il) -?' - (4-clorofenil) guanidina; 31) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-metoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 32) (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorofenil) guanidina; 33) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorofenil) guanidina; 34) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3, 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-trifluorometilfenil) guanidina; 35) (2S, 3S, 4R) -N"-eiano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-trifluorometilfenil) guanidina; 36) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorobencil ) guanidina; 37) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorobencil) guanidina; 38) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -acetoxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - - - bencilguanidina ; 39) (2S) -N" -ciano-N- (6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 40) (2S; 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 41) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-acetoxiamino-3 , 4 dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 42) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-metansulfonilamino-3 , 4 dihidro-3 -hidroxi-2-meti1-2-dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 43) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-ciano-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil ) guanidina; 44) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-ciano-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 45) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-ciano-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' -bencilguanidina; 46) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-ciano-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 47) (2?, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-bromo-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -?' -bencilguanidina ; 48) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3,4-dimetoxibencil) guanidina; 49) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3,4-dimetoxibencil ) guanidina ; 50) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; 51) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; 52) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-nitrobencil) guanidina; 53) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -M' - (3-trifluorometilbencil) guanidina; 54) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilbencil) guanidina; 55) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-metansulfoniloxi-3 , 4 dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4- - - il) - ' -bencilguanidina; 56) (2 , 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-metansulfoniloxi-3,4 dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4 -il) -N' -bencilguanidina; 57) (2S, 3R, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 58) (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 59) (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 60) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ( [1,3] dioxolan-2 - il ) -2H-benzopiran-4 -il) - N' -bencilguanidina; 61) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2 -metil-2- ([1,3] dioxolan-2-il) -2H-benzopiran-4 -il) -N' -bencilguanidina; 62) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil -2- ( [1,3] dioxa-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 63) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2 -metil -2- ( [1,3] dioxan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; - - 64) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ( [1,3] -5 , 5-dimetildioxan-2 -il) -2H-benzopiran-4 -il ) -N' -bencilguanidina; 65) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ([1,3] -5, 5-dimetildioxan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 66) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dietoximetil) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 67) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dietox metil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 68) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-metoxicarbonil-3 , dihidro-3 -hidroxi-2-metil -2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 69) (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-metoxicarbonil-3 , 4 dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 70) (3S, 4R) -N"-ciano-N- (8 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 71) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (8 -amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; y 72) (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (8-amino-3 , 4-dihidro-3 - - hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina Los compuestos más preferibles de la presente invención son: (2S, 3S, 4R) -N"ciano- (6-amino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi -2 -metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4 -il) -N" -bencilguanidina ; (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4 -il) -N" -bencilguanidina; y (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3-acetoxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N" -bencilguanidina . Los compuestos de fórmula 1 se pueden utilizar como sales farmacéuticamente aceptables derivadas de ácidos libres farmacéutica o fisiológicamente aceptables. Estas sales incluyen, pero no se limitan a las siguientes: sales con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfónico, ácido fosfórico, ácido estánico, etc., y ácidos orgánicos tales como ácido cítrico, ácido acético, ácido láctico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido metansulfónico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido 4 -toluensulfónico, ácido galacturónico, ácido embónico, ácido glutámico, ácido aspártico, etc.
- - Las sales de ácido de los compuestos de acuerdo con la presente invención se pueden preparar de la manera habitual, por ejemplo al disolver el compuesto de fórmula 1 en exceso de ácido acuoso y precipitar la sal con un solvente orgánico miscible en agua tal como metanol, etanol, acetona o acetonitrilo . También es posible preparar por calentamiento cantidades equivalentes del compuesto de fórmula 1 y un ácido, en agua o un alcohol, tal como glicolmonometiléter, y después evaporar la mezcla a sequedad o separar por filtración la sal precipitada, con succión. Además, los compuestos de fórmula 1 pueden estar en forma de sales de amonio, de metales alcalinos o de metales alcalinotérreos, farmacéuticamente aceptables. Las sales de metal alcalino o de metal alcalinotérreo del compuesto de fórmula 1 se pueden obtener, por ejemplo, al disolver el compuesto de fórmula 1 en una cantidad equimolar de una solución de hidróxido de metal alcalino o de metal alcalinotérreo, filtrar a partir de los materiales no disueltos y evaporar el filtrado a sequedad. Las sales de sodio, potasio o calcio son farmacéuticamente adecuadas. Se obtienen la sales de plata correspondientes por la reacción con una sal de metal alcalino o de metal alcalinotérreo con una sal de plata adecuada, tal como nitrato de plata. Además, la presente invención proporciona procesos para la elaboración de derivados de benzopiranolguanidina de - - fórmula 1. En particular, la presente invención proporciona procesos para la preparación de derivados de benzopiranolguanidina de fórmula 1 representado por el siguiente Esquema de Reacción 1, (Método de Preparación I) .
ESQUEMA DE REACCIÓN 1 En donde R1( R2 , R3, R4, R5, R6 y n son cada uno como se definen en lo anterior. La presente invención también proporciona procesos para la preparación de derivados de benzopiranilguanidina de fórmula 1, representados por el siguiente Esquema de Reacción 2 (Método de Preparación II) .
ESQUEMA DE REACCIÓN 2 (?') En donde cada Rlf R2/ R3, R4, R5, R6 y n son cada uno como se definen en lo anterior. Además, la presente invención proporciona procesos para la preparación de los derivados de benzopiranilguanidina de fórmula 1 mediante la utilización del compuesto (I1) preparado en el Esquema de Reacción 1 o Esquema de Reacción 2, representado por el siguiente Esquema de Reacción 3.
- - ESQUEMA DE REACCIÓN 3 (?') (I) En donde Ri, R2, R3, R4, R5, R6 y n son cada uno como se definen en lo anterior. Los sustituyentes de R1# R2, R3, R4, R5, R6 se pueden modificar, o se puede formar un enlace doble 3, 4 vía la reacción representada por el Esquema de Reacción 3 anterior. Los derivados de fórmula 1 se pueden preparar por separado como un isómero ópticamente activo mediante la utilización del isómero óptico correspondiente como un material inicial. En caso de utilizar una mezcla racémica como un material inicial, los derivados de fórmula 1 se preparan como una mezcla racémica y después la mezcla racémica se separa en cada isómero óptico. Los isómeros ópticos se pueden separar por cromatografía en columna quiral común o recristalización. Los compuestos de fórmula 1 se pueden sintetizar - - utilizando las reacciones y técnicas descritas en la presente posteriormente. Las reacciones se realizan en un solvente apropiado para los reactivos y materiales utilizados, y adecuados para la transformación que se lleva a cabo . I. Preparación- de Materiales Iniciales Los compuestos aminoalcohol (III) los cuales se utilizan como un material inicial en el Esquema de Reacción 1 o Esquema de Reacción 2, se pueden preparar por la reacción representada por el siguiente Esquema de Reacción 4. ESQUEMA DE REACCIÓN 4 ( II) ( III) - - En donde R1# R2 y R3 se definen cada uno como en lo anterior, (OZ) representa un grupo saliente y Hal representa un átomo de halógeno. El método para la preparación del compuesto epóxido (II) representado por el esquema de reacción 4 anterior se describe en la patente de E.U.A. número 5,236,935 y la patente KR número 096,546, las cuales se adquirieron por los presentes inventores, con detalle. Además, el compuesto epóxido (II) se puede preparar a partir de derivados de propaziléter (J. Med. Chem. 26, 1582 (1983) ) .
Preparación de compuestos de olefina (VI Los compuestos de olefina (VIII) existen como enantiómeros (VIIIj. y VIII2) tales como en la fórmula 4.
- - FÓRMULA 4 (VlIIi) (VIII2) En donde Ri, R2 y R3 se definen cada uno como en lo anterior. Los compuestos de olefina (VIII) se pueden obtener por separado como un compuesto de olefina ópticamente activo (VIIIi) y un compuesto de olefina (VII I2) de fórmula 4, respectivamente. El compuesto de olefina (VIII) se puede preparar por el método descrito en la solicitud de patente KR Número 96-7399, de acuerdo con los presentes inventores. El siguiente esquema de reacción 5 muestra el proceso con detalle para la preparación del compuesto de olefina (VIII) a partir de un compuesto alcohol (VII) .
- - ESQUEMA DE REACCIÓN 5 1) Separación de isómeros ópticos 2) Hidrólisis - - En donde Ri, R2 y R3 se definen cada uno como en lo anterior . (2) Preparación de compuestos de epóxido (II) Los compuestos de epóxido (IIi) y los compuestos de epóxido (II2) se pueden preparar a partir del compuesto (VIIIi) y los compuestos de epóxido (II3) y los compuestos de epóxido (II4) se pueden preparar a partir del compuesto (VIII2) como se representa por el siguiente esquema de reacción 6, mediante la utilización del compuesto (?????) y del compuesto (VIII2) preparado en el esquema de reacción 5 cómo el material inicial, respec ivamente.
ESQUEMA DE REACCIÓN 6 - - En donde R , 2 y R3 se definen cada uno como se define en lo anterior. Los compuestos epóxido (IIi) y (II2) se pueden separar a cada isómero óptico, y la totalidad de los compuestos de epóxido separados o la mezcla de los mismos se puede utilizar en la siguiente etapa. Además, los compuestos de epóxido (II3) y (II4) se pueden separar, y la totalidad de los compuestos de epóxido separados o la mezcla de los mismos se puede utilizar en la siguiente etapa. Los compuestos epóxido (IIi) y (II2) y los compuestos de epóxido (II3) y (II,) se pueden preparar a a partir de compuestos de olefina (VIIIi) y (VIII2) , respectivamente, por el método de preparación descrito en la patente de E.U.A. número 5,236,935 y la patente KR número 096,546, la cual fue adquirida por los presentes inventores. También es posible preparar isómeros ópticos (IIi) , (II2) , (II3) y (II4) de compuestos de epóxido, respectivamente, a partir de compuestos de olefina (VIIIi) u (VIII3) , mediante la utilización de catalizadores de epoxidación de sales de Mn(III) (E. N. Jacobsen et al., Tetrahedron Lett. , 38, 5055 (1991)). En caso de utilizar catalizador de sales de (R, R) -Mn ( III ) , los compuestos de epóxido (IIi) se pueden preparar a partir de compuestos de olefina (VIIIi) , y los compuestos de epóxido (II3) a' partir de los compuestos de olefina (VIII2) . En caso de utilizar un - - catalizador de sales (S, S)-Mn(III), los compuestos de epóxido (II2) se pueden preparar a partir de los compuestos de olefina (VIIIÍ) , y los compuestos de epóxido (II4) a partir de los compuestos de olefina (VIII2) . Esta reacción de epoxidación se realiza en mezcla con cloruro de metileno y agua mediante la utilización de NaOCl como un agente oxidante . (3) Preparación de los compuestos de aminoalcohol (III) Los compuestos de aminoalcohol (III) se preparan por la reacción del compuesto de epóxido (II) con gas amoníaco (NH3) o hidróxido de amonio (NHOH) en presencia de un solvente adecuado, en el esquema de reacción 4 anterior. Los solventes preferidos son alcoholes tal como metanol, etanol, isopropanol, etc. La temperatura de reacción puede variar de 5°C al punto de ebullición del solvente utilizado. En caso de utilizar cada compuesto epóxido (IIi) , (II2) # (H3) y (H ) como un material inicial, se pueden obtener los compuestos de aminoalcohol (lili) , (III2) / (HI3) y (II4) , respectivamente. En caso de utilizar una mezcla de compuesto epoxi (III) y (II2) como el material inicial, se obtiene una mezcla de compuestos de aminoalcohol (lili) y (III2) · Y en caso de utilizar una mezcla de compuesto de - - epóxido (II3) y (II4) como el material inicial se obtiene una mezcla de compuestos de aminoalcohol (III3) y (III4) .
En donde Rif R2 y R3 son cada uno como se definen en lo anterior.
FÓRMULA 6 (IH3) III4) - - En donde Ri, R2 y R3 son cada uno como se definen en lo anterior.
II. Método de Preparación I El método para la preparación de los compuestos de fórmula 1 comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de aminoalcohol (III) y un compuesto de tiourea (IV) en presencia de un agente de condensación adecuado y un solvente adecuado. El compuesto (I1) el cual es un compuesto de fórmula 1 con R4 = OH, se prepara por esta reacción. Los ejemplos de tales agentes de condensación incluyen agentes de condensación de tipo carbodiimida tales como clorhidrato de 1- (3 - (dimetilamino) propil] -3 -etilcarbodiimida y ?,?' -diciclohexilcarbodiimida, etc. De manera más preferible, se utilizan agentes de condensación de tipo carbodiimida hidrosolubles. Son preferibles de uno a tres equivalentes del agente de condensación, respecto al compuesto de aminoalcohol (III) . Además, son preferibles uno o dos equivalentes del compuesto tiourea (IV) respecto al compuesto aminoalcohol (III) . Los solventes preferidos son cloruro de metileno, cloroformo, dimetilformamida, sulfóxido de dimetilo, tetrahidrofurano, 1 , 2 -dicloroetano, dioxano, etc.
- - La temperatura de reacción puede variar de 5°C a 40°C. En caso de utilizar cada estereoisómero del compuesto de amxnoalcohol (III) como un material inicial, se obtiene el producto con la misma configuración respecto al material inicial, respectivamente. Esto es, los compuestos (11) , (I2) , (I3) y (I4) de la fórmula 1 se pueden preparar a partir de los compuestos de aminoalcohol (lili) , (III2) , (III3) y (III4) / respectivamente, En caso de utilizar una mezcla de compuestos de aminoalcohol (lili) y (III2) como el material inicial, se obtiene una mezcla de compuestos (Ix) y (12) . Y en caso de utilizar una mezcla de compuestos de aminoalcohol (III3) y (III4) como el material inicial, se obtiene una mezcla d elos compuestos (I3) y (I4) . Una mezcla de los compuestos de fórmula 1 se puede separar para proporcionar los isómeros ópticos separados. Los isómeros ópticos se pueden separar por cromatografía en columna común o recristalización. El compuesto de tiourea (IV) utilizado en la reacción anterior se puede preparar por la reacción de un compuesto isocianato (IX) con cianamida de sodio (NaH CN) en etanol, como se representa por el siguiente esquema de reacción 7.
- - ESQUEMA DE REACCION 7 (IV) (IX) En donde R5, R6 y n son cada uno como se define en lo anterior.
III. Método de Preparación II Otro método para la preparación de los compuestos de fórmula 1 comprende 1) hacer reaccionar un compuesto de aminoalcohol (III) con difenilcianocarbonimidato (X) en presencia de una base para preparar el compuesto (V) (etapa 1) ; y 2) hacer reaccionar el compuesto (V) con un compuesto de amina apropiado (VI) en un solvente adeucado para preparar el compuesto (?') (etapa 2) . El compuesto (I1) el cual es un compuesto de fórmula 1 con R4 = OH, se prepara por esta reacción. En la etapa 1, se pueden utilizar diversas bases - - inorgánicas y orgánicas. Los ejemplos de tales bases inorgánicas incluyen CaC03, NaOH, KOH, Na2C03, NaHC03, etc. Los ejemplos de tales bases orgánicas incluyen sales de metal de alcoholes tales como metóxido de sodio (CH3ONa) , etóxido de sodio (CH3CH2ONa) etc.; acetato de sodio (CH3COONa) ; sales metálicas de amoníaco; aminas bicíclicas tales como 1 , 8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno (DBU) , 1,5-diazabiciclo [4.3.0] ???-5-eno (DBM) ; etc.; trietilamina, N,N-diisopropiletilamina; piridina; lutidina; N,N-dimetilanilina; 4 - (dimetilamino) piridina ; 1 , 4-diazabiciclo, [2.2.2] octano (DABCO) , etc. De manera más preferible se utilizan aminas terciarias tales como trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, piridina, 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-6-eno, 4- (dimetilamino) -piridina, etc. Es preferible de uno a tres equivalentes de la base, respecto al compuesto aminoalcohol (III) . Y uno a dos equivalentes de cianocarbonimidato de difenilo (X) es lo preferible, respecto al compuesto aminoalcohol (III) . Los solventes preferidos son alcoholes tales como etanol, isopropanol, etc., dimetilformamida (DMF) , sulfóxido de dimetilo (D SO) , cloroformo, etc. La temperatura de reacción preferiblemente se mantiene de 5°C hasta la temperatura de ebullición del solvente utilizado.
- - En la etapa 2, son preferibles de uno a cinco equivalentes del compuesto amina (VI) , respecto al compuesto aminoalcohol (III) . Los ejemplos de solvente de reacción son alcoholes tales como etanol, isopropanol, etc., dimetilformamida, sulfóxido de dimetilo, cloroformo, cloruro de metileno, tetrahidrofurano (THF) . La temperatura de reacción preferiblemente se mantiene de 5°C a la temperatura de ebillición del solvente que se utilice. Además, la reacción de la etapa 2 se puede llevar a cabo en presencia de una base, los ejemplos de tales bases se mencionan en lo anterior. En caso de utilizar un isómero óptico de un compuesto de aminoalcohol (III) como el material inicial, se obtiene el producto (I1) con la misma configuración del material inicial, respectivamente. En caso de utilizar una mezcla de compuestos de aminoalcohol (????) y (III2) como el material inicial, se obtiene una mezcla de compuestos (Ii) y (I2) . En caso de utilizar una mezcla de compuestos de aminoalcohol (III3) y (??4) como el material inicial, se obtiene una mezcla de compuestos (I3) y (I ) . Se puede separar una mezcla de isómeros ópticos para proporcionar los isómeros ópticos separados de los compuestos (?') . Los isómeros ópticos se pueden separar por cromatografía en columna común o recristalización.
- - IV. Preparación de los compuestos (I) a partir de los compuestos (I1) .
Se pueden modificar los sustituyentes Ri, R2, R3, R , R5, o R6 a otros grupos funcionales y se puede formar un doble enlace en la posición 3, 4 por la reacción del esquema de reacción 3. En esta reacción, se utilizan los compuestos (?') como el material inicial, el cual se ha preparado por el esquema de reacción 1 o esquema de reacción 2. Un material inicial, los reactivos y las condiciones de reacción se determinan de acuerdo con la estructura del producto, esto es, cual de los sustituyentes Ri, R2, R3, 4; Rs o R6 son y si existe un doble enlace en la posición 3, 4. Por lo tanto, la presente invención incluye la totalidad de los tipos de reacción, reactivos y condiciones de reacción mediante las cuales es posible preparar el compuesto de fórmula 1. Se describen en lo siguiente con detalle varios procesos para la preparación de los compuestos de fórmula 1 con el esquema de reacción 3. Sin embargo, la descripción de los procesos no se debe entender como limitante de la presente invención. - - (1) Introducción del grupo acetoxi en R4 Se puede introducir el grupo acetoxi en R al hacer reaccionar el compuesto (I1) con anhídrido acético en un solvente adecuado, en presencia de un catalizador adecuado, representado por el siguiente esquema de reacción VIII.
ESQUEMA DE REACCIÓN 8 (?') En donde R1# R2> R3, R4, R5, R5 y n son cada uno como se definen en lo anterior. Las bases preferidas se mencionan como en lo anterior. De manera más preferible, se utiliza trietilamina, piridina o N( N-diisopropiletilamina . El catalizador preferido es 4- (dimetilamino) - piridina.
- - Son preferibles uno a tres equivalentes de la base, respecto al compuesto (?'). Y son preferibles 0.05-0.5 equivalentes del catalizador respecto al del compuesto (I1). Los solventes preferidos son cloruro de metileno, cloroformo, tetrahidrofurano, acetonitrilo, etc. La temperatura de reacción preferiblemente es 0-40°C.
Introducción del doble enlace en la posición 3,4 R4 se sustituye con un átomo de hidrógeno y se forma un doble enlace en la posición 3,4 al hacer reaccionar un compuesto de acetato (Ia) preparado en el esquema de reacción 8 anterior, con una base adecuada en un solvente adecuado, representado por el siguiente esquema de reacción ESQUEMA DE REACCIÓN 9 (Ia) (Ib) - - En donde Ri, R2, R3, R4, R5, Re y n están definidos cada uno, como en lo anterior. Las bases preferidas se mencionan como en lo anterior. De manera más preferible, se utiliza 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7 -eno, 1 , 5 -diazabiciclo [4.3.0] non-5-eno o 1 , 4-diazabiciclo [2.2.2] octano. Son preferibles uno a tres equivalentes de la base, respecto al compuesto (Ia) ¦ Los solventes preferidos son tolueno, benceno, xileno, dioxano, etc. La temperatura de reacción preferiblemente es de 5°C hasta el punto de ebullición del solvente . (3) Introducción del grupo NH2 en Rx Se puede preparar el compuesto (Id) de la fórmula 1, en el cual Rx es NH2, por la introducción del compuesto (Ic) con Ri = N02 representado por el siguiente esquema de reacción 10.
- - ESQUEMA DE REACCIÓN 10 En donde R2, R3, R5, y R6 y n se definen cada uno como en lo anterior. El grupo N02 se puede reducir al grupo NH2 por hidrogenación utilizando un catalizador metálico tal como platino, paladio, paladio en carbón (Pd/C) , níquel Raney, etc., en un solvente adecuado. Los solventes preferidos son alcoholes tales como metanol, etanol, etc., y acetato de etilo . Además, la reducción del grupo N02 al grupo NH2 se puede llevar a cabo utilizando un agente reductor tal como NaBH4 en presencia de CuS04, Cu(OAc)2, CoCl, SnCl2 o NiCl2. En este momento, el solvente preferido es una mezcla de agua y metanol y la temperatura de reacción preferida es la temperatura ambiente. - - (4) Introducción de NH(C=0)Ra en Rx .
Se puede preparar el compuesto de fórmula 1 con Ri = NH(C=0)Ra por la reacción del compuesto (Id) preparado en el esquema de reacción 10 anterior con cloruro de acilo o anhídrido de ácido, en presencia de una base. Las bases preferidas se mencionan como en lo anterior. De manera más preferible, se utilizan bases como trietilamina, ?,?-diisopropiletilamina, piridina o 4- (dimetilamino) piridina . Los solventes preferidos son cloruro de metileno, cloroformo, sulfóxido de dimetilo, dimetilformamida, tetrahidrofurano y dioxano. (5) Introducción de -NHS (O) mRa en R].
Se puede preparar el compuesto de fórmula 1 con Ri = -NHS(0)mRa por la reacción del compuesto (Id) preparado en el esquema de reacción 10 anterior, con cloruro de alquilsulfonilo o cloruro de arilsulfonilo, en presencia de una base. Las bases preferidas se mencionan como en lo anterior. De manera más preferible se utilizan bases como trietilamina, ?,?-diisopropiletilamina, piridina y 4-(dimetilamino) piridina . Los solventes preferidos son cloruro de metileno, cloroformo, sulfóxido de dimetilo, - - dimetilformamida, tetrahidrofurano y dioxano. Además, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas las cuales contienen los derivados de benzopiranolguanidina de la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables como un ingrediente activo. En .particular, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas para proteger al corazón, proteger células neuronales o proteger daños al cerebro, o para proteger órganos preservados, inhibir la producción de NO y la peroxidacion de lípidos o suprimir la angiogénesis y la restenosis. En los experimentos utilizando aorta de rata aislada, los compuestos de la presente invención muestran actividad vasorelajante notablemente baja, en comparación con los abridores de KATF de referencia tales como Cromakalin y BMS-180448. Aunque los abridores de KATP tienen propiedades cardioprotectoras al ejercer sus efectos en el corazón, también tienen propiedades vasorelajantes al actuar sobre K¾TP que se localiza en músculo liso. El efecto de vasodilatación es innecesario, y probablemente está contraindicado para isquemia, debido a que, bajo perfusión del tejido, ya se encuentra en riesgo. En otras palabras, el efecto vasorelaj ante de estos compuestos puede limitar su utilidad al tratar isquemia al miocardio. Como se ha mencionado antes, los compuestos de la presente invención - - necesariamente carecen de actividad vasorelaj ante, y por lo tanto su selectividad cardíaca puede ofrecer un margen más alto de seguridad como cardioprotectores. En consecuencia, se confirma que los compuestos de la presente invención tienen actividad antiisquémica con mejoría significativa en la selectividad cardíaca. En los modelos de daño isquémico al miocardio de ratas anestesiadas, los compuestos de la presente invención muestran una actividad antiisquémica igual o superior, en comparación con BMS-180448. Además, en contraste con BMS-180448, los compuestos de la presente invención tienen una actividad vasorelajante notablemente baja y por lo tanto son muy superiores a los medicamentos convencionales como cardioprotectores selectivos cardíacos. Además, en los modelos de daño al miocardio isquémico de perros mestizos anestesiados, los compuestos de la presente invención reducen considerablemente del tamaño de la zona de infarto como un porcentaje de área en riesgo (%IZ/AAR) , el cual es superior respecto a la referencia BMS-180448. Como se ha descrito en lo anterior, los compuestos de la presente invención casi no muestran actividad de vasodilatación, pero ejercen excelente actividad antiisquémica sobre diversos animales, de manera que se pueden utilizar para prevención o tratamiento de enfermedades relacionadas con isquemia al miocardio, tales como - - disfunción contráctil postisquémica así como cardioprotección en infarto al miocardio, angina de pecho y fallo cardíaco congestivo. Además, los compuestos de la presente invención tienen la capacidad de proteger neuronas. Detalladamente, los compuestos de la presente invención protegen a las neuronas de daño oxidativo mediante la dependencia a la dosis de hierro. Además, los compuestos de la presente invención protegen la muerte de células de la retina impidiendo el daño isquémico dependiente de la dosis, y representan efectos neuroprotectores al mejorar la M CV dañada (velocidad de conducción del nervio motor) y las respuestas nociceptivas utilizando placas calientes, en ratas diabéticas. Además, los compuestos de la presente invención protegen contra daño a cerebro epóxico en ratas recién nacidas al disminuir el valor de lípido/NAA (aspartato de N-acetilo) y lípido/Cr (creatina) en MRS (espectroscopia de resonancia magnética) de protón. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como neuroprotectores y también se pueden aplicar para el tratamiento de trastornos neurodegenerativos causados por la apoptosis o necrosis de neuronas, tales como apoplejía, demencia cerebral, asfixia en lactantes, glaucoma, neuropatía diabética ? trauma cerebral. Además, los compuestos de la presente invención - - inhiben la peroxidación de lipidos inducida por hierro o cobre y la oxidación de LDL (lipoproteína de baja densidad) en A7R5 (célula de músculo liso aórtica de rata) , cuyo efecto antioxidante es más significativo cuando se agrega H202. Además, los compuestos de la presente invención inhiben ROS (especies reactivas de oxígeno) inducidas por H202 tanto en células A7R5 como en HUVEC, y eliminan radicales de oxígeno en la prueba ORAC (capacidad de absorbancia de radical oxígeno) utilizando AAPH (diclorhidrato de 2,2'-azobis (2-aminopropano) ) como un generador de radical a. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como un antioxidante contra la peroxidación de lipidos y pueden aplicarse efectivamente para el tratamiento médico de trastornos neurológicos causados por la acumulación de especies de radicales libres dentro de las neuronas, tales como enfermedades neurodegenerativas (apoplejía y demencia), aterosclerosis e inflamación. Además, los compuestos de la presente invención inhiben la formación de NO (óxido nítrico) inducida por endotoxinas tales como lipopolisacáridos (LPS) , de manera dependiente de la dosis. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como inhibidores contra la producción de NO y pueden ser aplicados efectivamente para el tratamiento de enfermedades inflamatorias tales como artritis, infarto cardíaco, - - arteriesclerosis y demencia, los cuales son causadas por daño de tejidos u órganos como un resultado de la apoptosis o muerte celular necrótica debido a la acumulación de NO dentro de las células. Además, los compuestos de la presente invención protegen de manera efectiva al cerebro del daño por isquemia-reperfusión. Los compuestos de la presente invención tienen una ventaja sobre el compuesto de referencia K801. Mientras las ratas tratadas con MK 801 muestran motilidad disminuida como un efecto colateral, las ratas tratadas con los compuestos de la presente invención no muestran ningún efecto colateral significativo tal como cambio en el comportamiento. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como un agente neuroprotector contra el daño por isquemia-reperfusión en el cerebro y se pueden aplicar efectivamente para el tratamiento de diversas enfermedades causadas por daño isquémico en el cerebro tal como oclusión vascular cerebral isquémica inducida por trombos. En el experimento de la formación de vassos sanguíneos nuevos inducida por angiotensina II, los compuestos de la presente invención inhiben de manera efectiva la angiogénesis . En particular, los compuestos de la presente invención son capaces de evitar casi por completo la formación de vasos sanguíneos nuevos, de una - - manera dependiente de la dosis. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como un inhibidor de angiogénesis y se pueden aplicar de manera útil para el tratamiento médico de diversas enfermedades inducidas por angiogénesis, tales como artritis reumatoide, psoriasis, complicaciones por SIDA y cánceres. Además, los compuestos de la presente invención suprimen de manera significativa la proliferacióbn de células de músculo liso vascular por inhibición de síntesis de ADN, en experimentos de incorporación de [3H] -timidina. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para evitar o tratar restenosis, que se presenta con frecuencia después de cirugía coronaria percutánea . Además, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para protección de conservación de órganos tales como corazón, riñon, hígado y tejidos y para la protección de órganos en cirugía cardiovascular mayor. La presente invención incluye formulaciones farmacéuticas las cuales contienen, además de aditivos farmacéuticamente adecuados inertes y no tóxicos, uno o más de los ingredientes activos de acuerdo con la presente invención, y procesos para la preparación de estas formulaciones .
- - La presente invención también incluye formulaciones farmacéuticas en unidades de dosificación. La unidad de dosificación de cada una de las formulaciones, por ejemplo tabletas, tabletas recubiertas, cápsulas, pildoras, supositorios y ampolletas, contienen más de uno de los ingredientes activos que corresponden a una fracción o una dosis múltiple o individual. Por ejemplo, las unidades de dosificación pueden contener 1, 2, 3 ó 4 veces, o 1/2, 1/3 o 1/4 ingredientes activos de una dosis individual. Una unidad de dosificación preferiblemente contiene la cantidad de ingredientes activos los cuales se administran en una aplicación o los cuales habitualmente corresponden a la totalidad, la mitad, un tercio o un' cuarto de una dosis diaria . El vehículo inerte no tóxico y farmacéuticamente adecuado incluye diluyentes sólidos, semisólidos o líquidos, materiales de relleno y aditivos de formulación de todo tipo . Las formulaciones farmacéuticas preferidas son tabletas, tabletas recubiertas, cápsulas, pildoras, granulos, supositorios, soluciones, suspensiones y emulsiones, pastas, ungüentos, geles, cremas, lociones, polvos finos y aspersiones. Las tabletas, tabletas recubiertas, cápsulas, pildoras y gránulos pueden contener más de un aditivo, además del ingrediente o ingredientes activos tales como: (a) materiales de relleno y diluyentes, por ejemplo almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y ácido silícico, (b) aglutinantes, por ejemplo carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina y polivinilpirrolidona, (c) humectantes, por ejemplo glicerol, (d) desintegrantes, por ejemplo agar, carbonato de calcio y carbonato de sodio, (e) retardantes de solución, por ejemplo, parafina, y (f) aceleradores de absorción, por ejemplo compuestos de amonio cuaternarios, (g) agentes humectantes, por ejemplo alcohol cetílico y monoestearato de glicerol, (h) adsorbentes, por ejemplo caolín y bentonita, y (i) lubricantes, por ejemplo talco, estearato de calcio, estearato de magnesio y polietilenglicoles sólidos, o mezclas de las sustancias que se incluyen en los incisos (a) a (i) . Las tabletas, tabletas recubiertas, cápsulas, pildoras y gránulos se pueden proporcionar con los recubrimientos habituales y cubiertas, que opcionalmente contienen agentes opacificantes , y también puede ser una composición de manera tal que liberen el ingrediente o ingredientes activos solo o de manera preferencial en cierta parte del tracto intestinal, si es apropiado de una manera retardada, los ejemplos de composiciones embebidas las cuales se pueden utilizar son sustancias poliméricas y - - ceras . Si es apropiado, el ingrediente o ingredientes activos también pueden estar presentes en forma microencapsulada con uno o más de los excipientes mencionados antes. Los supositorios pueden contener, además del ingrediente o ingredientes activos, los excipientes habituales hidrosolubles o hidroinsolubles , por ejemplo polietilenglicoles , grasas, por ejemplo grasa de cacao, y ásteres superiores (por ejemplo alcohol de Ci4 con ácido graso de d6) o mezclas de estas sustancias. Los ungüentos, pastas, cremas y geles pueden contener, además del ingrediente o ingredientes activos, los excipientes habituales, por ejemplo grasas animales y vegetales, ceras, parafinas, almidón, tragacanto, derivados de celulosa, polietilenglicoles, siliconas, bentonitas, ácido silícico, talco y óxido de zinc, o mezclas de estas sustancias . Los polvos finos y aspersiones pueden contener, además del ingrediente o ingredientes activos, los excipientes habituales, por ejemplo lactosa, talco, ácido silícico, hidróxido de aluminio, silicato de calcio y polvo de poliamida, o mezclas de estas sustancias. Las aspersiones pueden contener adicionalmente los propelentes habituales, por ejemplo clorofluorohidrocarburos .
- - Las soluciones y emulsiones pueden contener, además del ingrediente o ingredientes activos, los excipientes habituales tales como solventes, agentes solubilizantes y emulsificantes , por ejemplo, agua, alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol , 1 , 3-butilenglicol , dimetilformamida, aceites, en particular aceite de semilla de algodón, aceite de nuez, aceite de germen de maíz, aceite de oliva, aceite de ricino y aceite de ajonjolí, glicerol, glicerolformal , alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y esteres de ácido graso de sorbitano, o mezclas de estas sustancias. Para administración parenteral, las soluciones y emulsiones también pueden estar en una forma estéril la cual es isotónica para la sangre. Las suspensiones pueden contener, además del ingrediente o ingredientes activos, los excipientes habituales tales como diluyentes líquidos, por ejemplo agua, alcohol etílico y propilenglicol, y agentes que mejoran la suspensión, por ejemplo, alcoholes isoestearílicos etoxilados, ésteres de polioxietilensorbitol y sorbitano, celulosa microcristalina , metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, o mezclas de estas sustancias .
- - Las formas de formulación mencionadas también pueden contener agentes de coloración, conservadores y aditivos los cuales mejoren el aroma y el sabor, por ejemplo, aceite de menta y aceite de eucalipto, y edulcorantes, por ejemplo sacarina. Los ingredientes terapéuticamente activos preferiblemente están presentes en las formulaciones farmacéuticas mencionadas antes en una concentración de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 99.5, de manera preferible de aproximadamente 0.5 a 95% en peso de la mezcla total . Las formulaciones farmacéuticas mencionadas antes también pueden contener otros compuestos activos farmacéuticos además de los compuestos de acuerdo con la presente invención. Las formulaciones farmacéuticas mencionadas en lo anterior se preparan de la manera habitual por métodos conocidos, por ejemplo al mezclar el ingrediente o ingredientes activos, con vehículos. Las formulaciones mencionadas se pueden utilizar en humanos o animales por vía oral, rectal, parenteral (intravenosa, intramuscular o subcutánea) intracisternal , intravaginal , intraperitoneal o local (polvos finos, ungüento, gotas) y para la terapia de infecciones en espacios huecos y cavidades corporales . Las posibles - - formulaciones adecuadas son soluciones para inyección, soluciones y suspensiones para terapia oral y geles, formulaciones para infusión, emulsiones, ungüentos o gotas, formulaciones oftalmológicas y dermatológicas, sales de plata y otras sales, gotas óticas, ungüentos oculares, polvos finos o soluciones que se pueden utilizar para terapia local. En el caso de animales, la ingestión también pueden ser en formulaciones adecuadas vía el alimento o el agua para beber. Los geles, polvos, polvos finos, tabletas, tabletas de liberación retardadas, premezclas, concentrados, gránulos, granalla, bolos, cápsulas, aerosoles, aspersiones e inhalantes pueden utilizarse adicionalmente en humanos y animales. Los compuestos de acuerdo con la presente invención además se pueden incorporar en materiales portadores tales como, por ejemplo, plásticos (cadena de plástico para terapia local), colágeno o cemento óseo. En general, se ha demostrado que es ventajoso en la medicina humana administrar el ingrediente o ingredientes activos de acuerdo con la presente invención en cantidades totales de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 100, de manera preferible 0.1 a 20 mg/kg de peso corporal cada 24 horas, si es apropiado en forma de varias dosis individuales, para obtener los resultados deseados. Sin embargo, puede ser necesario desviarse de las dosificaciones - - mencionadas, y en particular hacer esto como una función de la naturaleza del peso corporal y el objetivo que se desee, la naturaleza y gravedad de la enfermedad, la naturaleza de la formulación y la administración del medicamento así comió el período o intervalo dentro del cual se lleva a cabo la administració . Por lo tanto, en algunos casos puede ser suficiente administrar menos de la cantidad mencionada antes de ingrediente activo, mientras que en otros casos, se debe exceder de la cantidad mencionada antes de ingrediente activo. La dosificación óptima particular y el modo de administración necesarios para el ingrediente activo se pueden determinar por cualquier experto, en base en el conocimiento del experto. La estructura molecular de los compuestos de acuerdo con la presente invención se identifica por espectroscopia IR, espectroscopia UV, espectroscopia de RMN, espectroscopia de masas, cromatografía líquida, difracción de rayos X, análisis de rotación óptica y análisis elemental .
EJEMPLOS DE PREPARACIÓN materiales iniciales (III) del esquema de reacción 1 esquema de reacción 2 se preparan por los - - siguientes ejemplos de preparación. <EJE PLO DE PREPARACIÓN 1> Preparación de (2R, 3S, 4S)-6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-3 -hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano y (2R, 3S, 4R) -6-nitro-2 -metil -2 -dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano (Etapa 1) Preparación de (2R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil -3 , 4-epoxi-3 , -dihidro-2H- 1 -benzopirano .
A una solución de 75 g (0.28 moles) de (2R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano en 1 1 de acetona se agrega 1 1 de agua. A la mezcla se le agregan 84 g (0.99 moles) de carbonato ácido de sodio y la mezcla se agita durante 10 min. A la mezcla se le agregan 174 g (0.28 moles) de OxoneMR, y la mezcla se agita fuertemente. Se agregan carbonato ácido de sodio y oxone a la mezcla tres veces más, cada 15 min. La mezcla de reacción se filtra, se extrae la acetona bajo presión reducida y el residuo se extrae con acetato de etilo (500 mi X 2) . La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra, se concentra y purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 4:1) para proporcionar 76 g (rendimiento: 95%) del compuesto deseado como un sólido blanco.
- - (Etapa 2) Preparación de (2R, 3R, 4S) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano y (2R, 3S, 4R) - 6-nitro-2 -metil-2 -dimetoximetil -3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano.
Se disuelven 8.8 g del compuesto epóxido preparado en la etapa 1, en 250 mi de amoníaco saturado en etanol, y la mezcla de reacción se agita durante 7 días a temperatura ambiente. Se extrae el solvente y el residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para recuperar 2.58 g del material inicial y proporcionar 5.6 g (rendimiento: 60%) del compuesto deseado como una mezcla racémica. <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 2> Preparación de (2S, 3R, 4S) -6-nitro-2 -metil-2 -dimetoxime il -3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano y (2S, 3S, 4R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4 -dihidro-2H-l-benzopirano .
(Etapa 1) Preparación de (2S) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-3 , 4 -epoxi-3 , 4 -dihidro-2H-l-benzopirano . una solución de 5 g (19 mmoles) de (2R) -6-nitro - - 2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano en 100 mi de acetona se agregan 100 mi de agua. A la mezcla se le agregan 5.6 g (66 mmoles) de carbonato ácido de sodio y la mezcla se agita durante 10 min. A la mezcla se le agregan 11.6 g (19 mmoles) de OxoneMR y la mezcla se agita fuertemente. Se agregan carbonato ácido de sodio y OxoneMR a la mezcla, tres veces más, cada 15 min. La mezcla de reacción se filtra, se separa la acetona bajo presión reducida y el residuo se extrae con acetato de etilo (100 mi X 2) . La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra, se concentra bajo presión reducida y se purifica en cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 4:1) para proporcionar 5.1 g (rendimiento : 97%) del compuesto deseado, como un sólido blanco, como una mezcla racémica.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3R, 4S) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3, 4 -dihidro-4 -amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano y (2S, 3S, 4R) -6-nitro-2-metil-2 -dimetoximeti1 -3 -hidroxi-4 -amino-3,4-dihidro-4 -amino-3,4-dihidro-2H-l-benzopirano.
Se disuelven 5.1 g del compuesto epóxido que se prepara en la etapa 1, en 100 mi de amoníaco saturado en etanol, y la mezcla de reacción se agita durante 7 días a temperatura ambiente. El solvente se elimina y el residuo se purifica por cromatografía de columna en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 4.4 g (rendimiento : 80%) del compuesto deseado como una mezcla racémica. <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 3> Preparación de (2R, 3R, 4S)-2-metil-2-dimetoximetil-3 -hidroxi-4 -amino-3, 4 -dihidro-2H- 1-benzopirano y (2R, 3S, 4R) -2 -metil -2 -dimetoximetil -3 -hidroxi -4 -amino-3 , -dihidro-2H-l-benzopirano.
(Etapa 1) Preparación de (2R) -2-metil-2-dimetoximetil-3 , 4 -epoxi-3 , -dihidro-2H-l-benzopirano .
A una solución de 400 mg (1.82 mmoles) de (2R)-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano se disuelve en 1 mi de DMSO se agregan 82 µ? de agua destilada. Se permite que la mezcla de reacción se enfríe a 0°C, y a la mezcla se le agrega 647 mg de N-bromosuccinimida, lentamente. Después de 30 min, se agrega 1 mi de agua a la mezcla y la mezcla se extrae con acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se disuelve en 1 mi de dioxano-agua (3:1) y se agregan a la mezcla 146 mg de NaOH. La mezcla de reacción se agita durante 24 min a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 10 : 1) para proporcionar 358 mg (rendimiento : 83%) del compuesto deseado como una mezcla racémica.
(Etapa 2) Preparación de (2R, 3R, 4S) -2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidroxi-2H-l-benzopirano y (2R, 3S, 4R) -2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , -dihidro-2H-l-benzopirano .
Se disuelven 560 mg (2.37 mmoles) del compuesto epóxido que se prepara en la etapa 1, en 20 mi de amoníaco saturado en etanol , y la mezcla de reacción se agita durante 7 días a temperatura ambiente . El solvente se separa y el residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 340 mg (rendimiento: 57%) del compuesto deseado como una mezcla racémica. <EJEMPLO DE PREPARCIÓN 4> Preparación de (2R, 3R, 4S) -6-nitro-2-metil-2-hidroximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-benzopirano y (2R, 3S, 4R) -2-metil-2-hidroximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano .
- - (Etapa 1) Preparación de (2R) -6-nitro-2 -metil -2 -hidroximetil-3 , 4-epoxi-3 , 4-dihidro-2H- 1-benzopirano.
La reacción con 708 mg (3.20 moles) de (2R) -6-nitro-2-metil-2-hidroximetil-2H-l-benzopirano en lugar de (2R) -6-nitro-2 -metil -2 -dimetoximetil -2H- 1 -benzopirano como un material inicial, se realiza por el mismo método que la etapa 1 de la preparación del ejemplo 1. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 2:1) para proporcionar 625 mg (rendimiento : 82%) del compuesto deseado como una mezcla racémica .
(Etapa 2) Preparación de (2R, 3R, 4S) -6-nitro-2-metil-2 -hidroximetil -3 -hidroxi-4 -amino-3 , 4-dihidro-2H-benzopirano y (2R, 3S, 4R) -2 -metil -2 -hidroximetil-3 -hidroxi-4 -amino-3 , 4-dihidro-2H-1-benzopirano .
Se disuelven 625 mg (2.63 mmoles) del compuesto epóxido preparado en la etapa 1, en 10 mi de amoníaco saturado en etanol, y la mezcla se agita durante 7 días a temperatura ambiente. El solvente se prepara y el residuo se purifica en cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:5) para proporcionar 328 mg (rendimiento : 49%) del compuesto deseado como una mezcla racémica . <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 5> Preparación de (2R, 3R, 4S) -6-nitro-2-metil-2-metoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro- 2H-1-benzopirano y (2R, 3S, 4R) -2-metil-2-metoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4 -dihidro-2H- 1 -benzopirano .
(Etapa 1) Preparación de (2R) -6-nitro-2-metil-2-metoximetil-3 , 4-epoxi-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano .
La reacción con 580 mi g (2.47 mmoles) de (2R) -6-nitro-2-metil-2-metoximetil-2H-l-benzopirano en lugar de (2R) -S-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano como material inicial, se realiza por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 1 de preparación. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 2:1) para proporcionar 607 mg (rendimiento : 98) del compuesto deseado como una mezcla racémica.
(Etapa 2) Preparación de (2R, 3R, 4S) -6-nitro-2-metil-2-metoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano y de (2R, 3S, 4R) -2-metil-2-metoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano .
- - Se disuelven 607 mg (2.42 mmoles) del compuesto epóxido preparado en la etapa 1, en 10 mi de amoníaco saturado en etanol, y la mezcla de reacción se agita durante 7 días a temperatura ambiente. El solvente se separa y el residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 345 mg (rendimiento : 53%) del compuesto deseado como una mezcla racémica. <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 6> Preparación de (2S; 3S, 4R) -6-ciano-2 -meti1 -2 -dimetoximeti1 - 3 -hidroxi -4 -amino-3,4 -dihidro-2H- 1 -benzopirano .
La reacción con 1.2 g (4.90 mmoles) de (2S) -6-ciano-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano en lugar de (2R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano como un material inicial, se realiza por el mismo método de la etapa 1 y la etapa 2 de la preparación del ejemplo 1. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 4:1) para proporcionar 0.65 g (rendimiento: 48%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . - - <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 7> Prepaación de (2S, 3R, 4S) -6-ciano-2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-1-benzopirano .
La reacción se realiza por el mismo método que el ejemplo de preparación 6. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo 4:1) para proporcionar 0.30 (rendimiento : 22%) del compuesto deseado de la estereoquímica (2S, 3R, 4S) . <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 8> Preparación de (2S, 3S, 4R) -6-bromo-2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H- 1-benzo irano .
La reacción con 1.6 g (5.35 mmoles) de (2S) -6-bromo-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano en lugar de (2R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano como un material inicial, se realiza por el mismo método que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo de preparación 1. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 1.28 g (rendimiento : 72%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . - - <EJE PLO DE PREPARACIÓN 9> Preparación de (2S, 3S, 4R)-4-amino-6-metansulfoniloxi-3, 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H- 1-benzopirano .
La reacción con 2.52 g (8.45 mmoles) de (2S) -6-metansulfoniloxi-2 -metil -2 -dimetoximetil-2H- 1-benzopirano en lugar de (2R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano como el material inicial, se realiza por el mismo método que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo de preparación 1. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:5) para proporcionar 1.74 g (rendimiento : 62%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . <EJE PLO DE PREPARACIÓN 10> Preparación de (2R, 3S, 4R)-4-amino-6-metansulfoniloxi-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil -2H- l-benzopirano .
La reacción con 0.79 g (2.65 mmoles) de (2R)-6-metansulfoniloxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano en lugar de (2R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano como el material inicial, se realiza por el mismo método que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo de preparación 1. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:5) - - para proporcionar 0.60 g (rendimiento : 68%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . <EJEMPL0 DE PREPARACIÓN 11> Preparación de (2S, 3S, 4R)-2-metil-2- ( [1,3] dioxolan-2 -il) -6-nitro-3-hidroxi-4-amino-3 , 4 -dihidro-2H-l-benzopirano .
(Etapa 1) Preparación de (2S) -2-metil-2- ( [1,3] dioxolan-2 -il) -6-nitro-2H-l-benzopirano.
Se disuelven 1 g (3.77 mmoles) de (2S) -2 -metil -2 -dimetoximetil-6-nitro-2H-l-benzopirano, 0.63 mi (11.31 mmoles) de etilenglicol y 71.7 mg (0.377 mmoles) de ácido p-toluensulfónico, en 20 mi de tolueno, y la mezcla de reacción se somete a reflujo durante 5 horas. La mezcla de reacción se lava con una solución acuosa saturada de NaHC03 y se extrae con agua y acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 6:1) para proporcionar 0.93 g (rendimiento : 93%) del compuesto deseado. RMN ?? (CDC13, 200 MHz) d 1.48 (s, 3H) , 3.91-3.97 (m, 4H) , 4.95 (s, 1H) , 5.73 (d, 1H) , 6.49 (d, 1H) , 6.83 (d, 1H) , 7.86 (d, 1H) , 8.01 (dd, 1H) .
- - (Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -2 -metil -2 - ( [1,3] dioxolan-2-il) -6-nitro-3 , 4 -epoxi -3 , 4 -dihidro-2H-l-benzopirano .
En un matraz de un cuello de 100 mi se vierten 25.6 mi (14.08 mmoles) de una solución de NaOCl acuoso de 0.55M y 9.6 mi de Na2HP04 0.05M, y se permite que la mezcla se enfríe a 0°C. A la mezcla se le agregan 0.93 g (3.52 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 y 96.22 mg (0.176 mmoles) de catalizador de Jacobsen (S, S) en 7 mi de cloruro de metileno. La mezcla de reacción se agita durante 8 horas a temperatura ambiente y se filtra sobre una almohadilla de CeliteMR para eliminar el catalizador de Jacobsen. Se lava la capa de cloruro de metileno con salmuera, se seca sobre Na2S04, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 4:1) para proporcionar 470 mg (rendimiento : 48%) del compuesto deseado. RMN XH (CDC13 , 200 MHz) d 1.57 (s, 3H) , 3.73 (d, 1H) , 3.80-3.90 (m, 4H) , 4.02 (d, 1H) , 4.96 (s, 1H) , 6.88 (d, 1H) , 8.13 (dd, 1H) , 8.29 (d, 1H) .
(Etapa 3) Preparación de (2S, 3S, 4R) -2-metil-2- ( [1, 3] dioxolan-2-il) -6-nitro-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H- 1 -benzopirano .
A una solución de 470 mg (1.68 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 2 disuelto en 15 mi de etanol se agregan 2.36 mi (16.3 mmoles) de una solución de NH40H 25%, y la mezcla de reacción se agita durante 5 días a 25°C. Se elimina el etanol bajo presión reducida. El residuo se extrae con acetato de etilo, se lava con salmuera, se seca sobre Na2S04, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 400 mg (rendimiento : 80%) del compuesto deseado. <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 12> Preparación de (2S, 3S, 4R)-2-metil-2 - ) [1 , 3-dioxan-2 -il) -6 -nitro- 3 -hidroxi-4 -amino-3 , 4-dihidro-2H- 1 -benzopirano (Etapa 1) Preparación de (2S) -2-metil-2- ( [1 , 3-dioxan-2-il) -6-nitro-2H-l -benzopirano . La reacción de 1 g (3.77 mmoles) de (2S) -2 -metil-2-dimetoximetil-6-nitro-2H-l-benzopirano con 2.73 mi de 1,3-propanodiol se realiza por el mismo método que la etapa 1 - - del ejemplo de preparación 11. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 6:1) para proporcionar 1 g (rendimiento : 96%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4S) -2-metil-2- ( [1 , 3-dioxan-2- il) -6-nitro-3 , 4-epoxi-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano .
La reacción se realiza por el mismo método de la etapa 2 del ejemplo de preparación 11 excepto que se utiliza el compuesto preparado en la etapa 1 anterior, como material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 4:1) para proporcionar 0.57 g (rendimiento : 54%) del compuesto deseado .
(Etapa 3) Preparación de (2S, 3S, 4R) -2-metil-2- ( [1, 3-dioxan-2-il) -6-nitro-3 -hidroxi-4-amino-3 , 4 -dihidro-2H-1 -benzopirano .
La reacción se realiza por el mismo método de la etapa 3 del ejemplo de preparación 11, excepto que se utiliza el compuesto preparado en la etapa 2 anterior como el material inicial. El residuo se purifica por - - cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 0.46 g (rendimiento : 76%) del compuesto deseado. <EJEMPL0 DE PREPARACIÓN 13> Preparación de (2S, 3S, 4R)-2-metil-2- ( [1, 3] -5, 5-dimetildioxan-2 -il) -6-nitro-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano .
(Etapa 1) Preparación de (2S) -2-metil-2- ( [1, 3-] -5 , 5-dime ildioxan-2-il) -6-nitro-2H-l-benzopirano La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo de preparación 11, excepto que se utiliza 1 g (3.77 mmoles) de (2S) -2 -metil -2 -dimetoximetil - 6 -nitro-2H-l-benzopirano y 2.80 mi de 2 , 2 -dimetil- 1 , 3 -propanodiol como un material inicial . El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 6:1) para proporcionar 1.01 g (rendimiento : 88%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4S) -2-metil-2-( [1,3] -5, 5-dimetildioxan-2-il) -6-nitro-3 , 4-epoxi-3 , 4 -dihidro-2H-l-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método - - que la etapa 2 del ejemplo de preparación 11, excepto que se utiliza el compuesto preparado en la etapa 1 anterior, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 4:1) para proporcionar 0.62 g (rendimiento : 58%) del compuesto deseado.
(Etapa 3) Preparación de (2S, 3S, 4R) -2-metil-2- ( [1, 3] -5, 5-dimetildioxan-2 -il) -6-nitro-3-hidroxi-4-amino~ 3, 4-dihidro-2H-l-benzopirano.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 3 del ejemplo de preparación 11, excepto que se utiliza el compuesto preparado en la etapa 2 anterior, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 0.53 g (rendimiento : 82%) del compuesto deseado. <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 14> Preparación de (2S, 3S, 4R)-2-metil-2 -dietoximetil -6 -nitro-3 -hidroxi - -amino-3 , 4 -dihidro-2H- 1 -benzopirano . (Etapa 1) Preparación de (2S) -2-metil-2-dietoximetil -6-nitro-2H-1 -benzopirano .
- - La reacción se realiza por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo de preparación 11, excepto que se utiliza 1 g (3.77 mmoles) de (2S) -2-metil-2-dimetoximetil-6-nitro-2H-l-benzopirano y 3.0 mi de etanol como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 6:1) para proporcionar 1.01 g (rendimiento : 91%) del compuesto deseado .
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4S) -2-metil-2-dietoximetil-6-nitro-3 , 4 -epoxi-3 , 4 -dihidro-2H-1-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo de preparación 11, excepto que se utiliza el compuesto preparado en la etapa 1 anterior, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 4:1) para proporcionar 0.71 g (rendimiento : 67%) del compuesto deseado.
(Etapa 3) Preparación de (2S, 3S, 4R) -2 -metil -2 -dietoximetil-6-nitro-3-hidroxi-4-amino-3 , 4 -dihidro-2H-1-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 3 del ejemplo de preparación 11, excepto que se utiliza el compuesto preparado en la etapa 2 anterior, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 0.65 g (rendimiento : 86%) del compuesto deseado. <EJE PLO DE PREPARACIÓN 15> Preparación de (2S, 3S, 4R)-2-metil-2 -dimetoximetil -6-metoxicarbonil -3 -hidroxi-4 -amino-3 ,4-dihidro-2H-l-benzopirano.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo de preparación 1, excepto que se utilizan 1.41 g (5.32 mmoles) de (2S) -2-metil-2-dimetoximetil-6-metoxicarbonil-2H-l-benzopirano como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 0.86 g (rendimiento : 52%) del compuesto deseado. <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 16> Preparación de (2R, 3S, 4R)-2-metil -2 -dimetoximetil -6-metoxicarbonil -3 -hidroxi -4 -amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano. reacción se lleva a cabo por el mismo método - - que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo de preparación 1, excepto que se utilizan 1.27 g (4.79 mmoles) de (2R)-2-metil -2 -dimetoximetil -6-metoxicarbonil -2H-l-benzopirano como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 0.85 g (rendimiento : 57%) del compuesto deseado. <EJEMPLO DE PREPARACIÓN 17> Preparación de (3S, 4R) -2-metil -2 -dimetoximetil -8 -NITR0-3-hidroxi -4 -amino-3, 4 -dihidro-2H-l-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo de preparación 1, excepto que se utilizan 1.82 g (6.86 mmoles) de (2S) -2-metil-2-dimetoximetil-8-nitro-2H-l-benzopirano como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 1.31 g (rendimiento : 64%) del compuesto deseado.
EJEMPLOS Los compuestos de fórmula 1 se preparan por los - - siguientes ejemplos. <EJEMPLO 1> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina .
A una solución de 508 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (4-clorofenil) tiourea y 500 mg (1.68 mmoles) del compuesto aminoalchol preparado en el ejemplo de preparación 1 disuelto en 5 mi de DMF se agregan 418 mg de clorhidrato de 1- [3- (dimetilamino) propil] -2-etilcarbodiimida. La mezcla de reacción se agita durante 5 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo (30 mi X 2) después de acidificar la mezcla al agregar 10 mi de HC1 1N. La capa orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 260 mg (rendimiento : 33%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN 1H (DMSO-d6/ 300 MHz) d 1.35 (s, 3H) , 3.36 (d, 6H) , 3.85 (t, 1H) , 4.59 (s, 1H) , 5.10 (t, 1H) , 5.97 (s, 1H) , 6.93 (d, <EJEMPLO 2> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-M- (6- - - nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -?' - (4 -clorofenil ) guanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 1. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 200 mg (rendimiento : 25%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . R N *H (DMSO-dg, 300 Hz) d 1.23 (s, 3H) , 3.42 (d, 6H) , 4.07 (t, 1H) , 4.48 (s, 1H) , 4.99 (t, 1H) , 5.80 (s, 1H) , 6.96 (1H) , 7.36 (dd, 4H) , 7.76 (s, 1H) , 8.03 (s, 2H) , 9.48 (S, 1H) . <EJE PLO 3> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 - ( 3 -clorofenil) guanidina A una solución de 508 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (4 -clorofenil ) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 1 disuelto en 5 mi de DMF se agregan 418 mg de clorhidrato de 1- [3- (dimetilamino) propil] -2 -etilcarbodiimida. La mezcla de reacción se agita durante 6 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo (30 mi X 2) después de acidificar la mezcla al agregar 10 mi de HCl 1N. La capa - - orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 230 mg (rendimiento : 29%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) .
R N ¾ (DMS0-deí 300 MHz) d 1.35 (s, 3H) , 3.38 (d, 6H) , 3.88 (s, 3H) , 4.59 (s, 1H) , 5.11 (s, 1H) , 5.97 (s, 1H) , 6.94 (d, 1H) , 7.28 (ra, 4H) , 7.79 (d, 1H) , 8.04 (m, 2H) , 9.49 (S, 1H) . <EJEMPL0 4> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- ( 6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2 -metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3 -clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 3. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 200 mg (rendimiento : 25%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN ¾ (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.23 (s, 3H) , 3.42 (d, 5H) , 4.08 (t, 1H) , 4.49 (s, 1H) , 4.99 (t, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.30 (m, 4H) , 7.91 (d, 1H) , 8.04 (d, 2H) , 9.6 (s, 1H) . <EJEMPLO 5> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 - (4 -nitrofenil) guanidina A una solución de 532 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (4-nitrofenil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 1 disuelto en 5 mi de DMF se agregan 418 mg de clorhidrato de 1- [3- (dimetilamino) propil] -2-etilcarbodiimida. La mezcla de reacción se agita durante 5 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo (30 mi X 2) después de acidificar la mezcla al agregar 10 mi de HCl 1N. La capa orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 210 mg (rendimiento : 26%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) .
RMN JH (DMS0-d6í 300 MHz) d 1.36 (s, 3H) , 3.38 (d, 6H) , 3.88 (t, 1H) , 4.60 (s, 1H) , 5.12 (t, 1H) , 6.2 (a, 1H) , 6.97 (d, 1H) , 7.48 (d, 1H) , 8.04 (dd, 1H) , 8.11 (s, 1H) , 8.20 (d, 2H) , 8.33 (d, 1H) , 10.07 (s, 1H) . <EJE PL0 6> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2-metil -2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil) guanidina .
A una solución de 500 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (4-trifluorometilfenil) iourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 1 disuelto en 5 mi de DMF se agregan 418 mg de clorhidrato de 1- [3 - (dimetilamino) propil] -2 -etilcarbodiimida . La mezcla de reacción se agita durante 5 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo (30 mi X 2) después de acidificar la mezcla al agregar 10 mi de HCl 1N. La capa orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 250 mg (rendimiento : 29%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN ¾ (DMSO-d6 300 MHz) d 1.34 (s, 3H) , 3.38 (d, 6H) , 3.38 (t, 1H) , 4.59 (s, 1H) , 5.10 (t, 1H) , 6.0 (s, 1H) , 6.94 (d, 1H), 7.52 (d, 1H) ; 7.57 (m, 3H) , 7.86 (d, 1H) , 8.02 (dd, 1H) , 8.09 (s, 1H) . <EJEMPLO 7> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H- benzopiran-4-il) -?· - (3-trifluorometilfenil) guanidina.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 6. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 200 mg (rendimiento : 23%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN *H (DMS0-d6, 300 MHz) d 1.23 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 4.08 (t, 1H) , 4.49 (s, 1H) , 5.01 (t, 1H) , 5.85 (s, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.49 (d, 1H) , 7.60 (m, 3H) , 8.03(m, 3H) , 9.7 (s, 1H) . <EJEMPLO 8> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro- 3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -N' - (4 -metoxifenil) guanidina A una solución de 500 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (4-metoxifenil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 1 disuelto en 5 mi de DMF se agregan 418 mg de clorhidrato de 1- [3- (dimetilamino) propil] -2 -etilcarbodiimida . La mezcla de reacción se agita durante 5 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo (30 mi X 2) después de acidificar la mezcla al agregar 10 mi de HC1 1N. La capa orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentra bajo presión reducida. El - - residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 49 mg (rendimiento : 6%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN 2H (DMSO-de, 300 MHz) d 1.24 (s, 3H) , 3.35 (d, 6H) , 3.70 (s, 3H) , 4.08 (t, 1H) , 4.45 (s, 1H) , 5.64 (d, 1H) , 5.78 (t, 1H) , 6.93 (m, 3H) , 7.24 (d, 2H) , 8.02 (d, 2H) , 8.17 (s, 1H) , 9.59 (s, 1H) . <EJEMPLO 9> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-diraetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxifenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 8. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 190 mg (rendimiento : 24%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN ? (DMSO-d6/ 300 MHz) d 1.33 (s, 3H) , 3.38 (d, 6H) , 3.72 (s, 3H) , 3.87 (t, 1H) , 4.58 (s, 1H) , 5.10 (t, 1H) , 5.10 (t, 1H) , 5.88 (s, 1H) , 6.91 (d, 3H) , 7.20 (d, 3H) , 7.97 (s, 1H) , 9.14 (s, 1H) . <EJEMPLO 10> Preparación de (2S, 3R, 4£) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H- - - benzopiran-4-il) -?' - (4 -clorofenil ) guanidina A una solución de 508 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (4 -clorofenil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación clorhidrato. La mezcla de reacción se agita durante 5 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo (30 mi X 2) después de acidificar la mezcla al agregar 10 mi de HC1 1N. La capa orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 260 mg (rendimiento : 33%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3R, 4S) . RMN XH (DMSO-de, 300 Hz) d 1.35 (s, 3H) , 3.37 (d, 6H) , 3.85 (t, 1H) , 4.59 (s, 1H) , 5.11 (t, 1H) , 5.97 (s, 1H) , 6.93 (d, 1H) , 7.35 (dd, 4H) , 7.63 (d, 1H) , 8.01 (d, 2H) , 9.44 (s, 1H) . <EJEMPLO 11> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N ' - (4-clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 10. El residuo se purifica por cromatografía - - en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 200 mg (rendimiento : 25%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . R N XH (D SO-d6, 300 Hz) d 1.23 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 4.05 (t, 1H) , 4.48 (s, 1H) , 4.99 (t, 1H) , 5.81 (s, 1H) , 6.97 (d, 1H) , 7.37 (dd, 4H) , 7.76 (s, 1H) , 8.03 (s, 2H) , 9.49 (s, 1H) . <EJEMPL0 12> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4 -il ) - ' - (3 -clorofenil) guanidina La reacción se realiza por el mismo método que el ejemplo 10. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 188 mg (rendimiento : 24%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3R, 4S) . RMN XH (DMSO-d6> 300 MHz) d 1.35 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 3.88 (t, 1H) , 4.60 (s, 1H9, 5.11 (t, 1H) , 5.97 (s, 1H) , 6.95 (d, 1H) , 7.17 (d, 1H) , 7.25 (d, 1H) , 7.34 (d, 2H) , 7.79 (d, 1H) , 8.03 (m, 2H) , 9.49 (s, 1H) . <EJEMPL0 13> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-clorofenil) guanidina - - La reacción se realiza por el mismo método que el ejemplo 12. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 270 mg (rendimiento : 34%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . R H (DMS0-d6, 300 Hz) d 1.18 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 4.09 (t, 1H) , 4.49 (s, 1H) , 5.00 )t, 1H) , 5.85 (s, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.29 (d, 1H) , 7.37 (d, 1H) , 7.40 (m, 2H) , 7.91 (d, 1H) , 8.05 (m, 2H) . <EJEMPLO 14> Preparación de (2Sf 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran- -il) -N' - (3 -trifluorometilfenil ) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 10, excepto que se utilizan 582 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (3-trifluorometilfenil ) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 2. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 220 mg (rendimiento ·. 26%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3R, 4S) . RMN XH (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.34 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 3.88 (t, 1H) , 4.60 (s, 1H) , 5.11 (t, 1H) , 5.95 (s, 1H) , 6.95 (d, 1H) , 7.45 (d, 1H) , 7.57 (m, 3H) , 7.88 (d, 1H) , 8.03 - - (dd, 1H) , 8.10 (s, 1H) , 9.62 (s, 1H) <EJEMPLO 15> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro- 3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2-meti1 -2 -dime oximetil -2H-benzopiran-4-il) -N 1 - (3-trifluorometilfenil ) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 14. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 320 mg (rendimiento : 37%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . RMN ¾ (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.24 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 4.08 (t, 1H) , 4.49 (s, 1H) , 5.01 (t, 1H) , 5.82 (s, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.47 (d, 1H) , 7.57 (m, 3H) , 7.98 (d, 1H) , 8.03 (m, 2H) , 9.67 (s, 1H) . <EJEMPLO 16> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 - (4 -metoxifenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 10, excepto que se utilizan 500 mg de la sal de sodio de N-ciano-N1 - (4-metoxifenil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 2. El residuo se purifica por cromatografía en - - gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 170 mg (rendimiento : 21%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3R, 4S) . RM XH (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.33 (s, 3H) , 3.36 (d, 6H) , 3.72 (s, 3H) , 3.86 (t, 1H) , 4.58 (s, 1H) , 5.09 (t, 1H) , 5.88 (s, 1H) , 6.91 (d, 3H) , 7.20 (d, 3H) , 7.97 (s, 1H) , 8.00 (d, 1H) <EJEMPLO 17> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -N1 - (4 -metoxifenil ) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 16. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 270 mg (rendimiento : 34%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . RMN ¾ (DMSO-dg, 300 MHz) d 1.22 (s, 3H) , 3.38 (d, 6H) , 3.72 (s, 3H) , 4.06 (t, 1H) , 4.45 (s, 1H) , 4.99 (t, 1H) , 5.57 (s, 1H) , 6.93 (t, 3H) , 7.20 (d, 2H) , 7.35 (a, 1H) , 8.01 (s, 1H) , 8.03 (d, 1H) , 9.19 (s, 1H) . <EJEMPLO 18> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil -2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - 1 - (4-metilfenil) guanidina - - La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 1, excepto que se utilizan 465 mg de la sal de sodio de N-ciano-N ' - (4-metilfenil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 2. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 158 mg (rendimiento : 21%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN ¾ (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.34 (s, 3H) , 2.26 (s, 3H) , 3.37 (d, 6H) , 3.87 (s, 1H) , 4.59 (s, 1H) , 5.11 (t, 1H) , 5.93 (s, 1H) , 6.92 (d, 1H) , 7.16 (s, 3H) , 7.38 (d, 1H) , 8.00 (1H, 2H) , 9.24 (s, 1H) . <EJEMPLO 19> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N ' - (4-metilfenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 18. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 250 mg (rendimiento : 33%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN H (DMSO-d6f 300 Hz) d 1.22 (s, 3H) , 2.26 (s, 3H) , 3.38 (d, 6H) , 4.06 (t, 1H) , 4.46 (s, 1H) , 4.99 (t, 1H) , 5.74 (s, 1H) , 6.95 (d, 1H) , 7.16 (s, 3H) , 7.53 (s, 1H) , 8.02 (d, 2H) , 9.28 (s, 1H) . <EJEMPLO 20> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N ' - (4 -metoxibencil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 1, excepto que se utilizan 530 mg de la sal de sodio de N-ciano-N ' - (4 -metoxibencil ) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 1. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 134 mg (rendimiento : 16%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RM XH (CDC13, 300 MHz) d 1.47 (s, 3H) , 3.51 (d, 6H) , 3.77 (s, 3H) , 3.80 (d, 2H) , 4.44 (t, 1H) , 4.56 (s, 1H) , 5.32 (m, 1H) , 6.06 (s, 1H) , 6.40 (d, 1H) , 6.90 (m, 3H) , 7.12 (m, 2H) , 7.30 (d, 1H) , 8.00 (dd, 1H) , 8.03 (s, 1H) <EJEMPLO 21> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2 -metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método - - que el ejemplo 20. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 140 mg (rendimiento : 17%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . R XH (CDC13, 300 MHz) d ? 1.32 (s, 3H) , 3.49 (s, 6H) , 3.58 (t, 1H) , 3.77 (s, 3H) , 4.04 (d, 1H) , 4.41 (s, 1H) , 4.65 (s, 2H) , 6.35 (s, 1H) , 6.88 (dd, 4H) , 7.26 (d, 2H) , 8.04 (dd, 1H) , 8.08 (s, 1H) <EJEMPLO 22> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 1, excepto que se utilizan 465 mg de la sal de sodio de N-ciano-N 1 -benciltiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 1. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 260 mg (rendimiento .· 34%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN ¾ (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.24 (s, 3H) , 3.41 (m, 1H) , 3.44 (d, 6H) , 4.04 (m, 1H) , 4.51 (s, 1H) , 4.76 (s, 2H) , 5.70 (s, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.32 (m, 4H) , 8.03 (m, 2H) , 8.16 (s, 1H) . - - <EJEMPLO 23> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - 1 -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 22. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 200 mg (rendimiento : 26%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN ¾ (DMSO-dg, 300 MHz) d 1.26 (s, 3H) , 3.36 (d, 6H) , 3.44 (d, 1H) , 3.87 (t, 1H) , 4.44 (d, 2H) , 4.56 (s, 1H) , 5.02 (t, 1H) , 5.86 (s, 1H) , 6.94 (d, 1H) , 7.29 (m, 4H) , 7.75 (t, 1H) , 7.93 (s, 1H) , 7.99 (dd, 1H) . <EJEMPLO 24> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N ' -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el. mismo método que el ejemplo 10, excepto que se utilizan 508 mg de la sal de sodio de N-ciano-N 1 -benciltiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 2. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 170 mg (rendimiento .- 22%) del compuesto deseado de estereoquímica - - (2S, 3R, 4S) . RMN XK (CDCI3, 300 MHz) d 1.27 (s, 3H) , 3.48 (d, 6H) , 3.5 (m, 1H) , 4.02 (d, 1H) , 4.48 (s, 1H) , 4.75 (s, 2H) , 6.0 (s, 1H) , 6.72 (s, 1H) , 6.87 (d, 1H) , 7.30 (m, 5H) , 8.0 (d, 1H) , 8.02 (s, 1H) . <EJEMPLO 25> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' -bencilguanidina.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 24. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 190 mg (rendimiento : 25%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . RMN XH (CDCI3 , 300 MHz) d 1.31 (s, 3H) , 3.44 (d, 6H) , 3.5 (m, 1H) , 3.71 (d, 1H) , 4.47 (s, 1H) , 5.14 (m, 2H) , 5.69 (s, 1H) , 6.70 (a, 1H) , 6.58 (d, 1H) , 7.25 (m, 5H) , 8.0 (d, 1H) , 8.02 (s, 1H) . <EJEMPLO 26> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 -metil -2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4 -il) -N' - (4-clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método - - que el ejemplo 1, excepto que se utilizan 500 mg de la sal de sodio de N-ciano-N ' - (4 -clorofenil ) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 3. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 170 mg (rendimiento : 23%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN XH (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.25 (s, 3H) , 3.37 (d, 6H) , 3,82 (t, 1H) , 4.52 (s, 1H) , 5.00 (t, 1H) , 5.45 (s, 1H) , 6.71 (d, 1H) , 6.90 (t, 1H) , 7.10 (ra, 2H) , 7.24 (d, 2H) , 7.38 (d, 2H) , 7.54 (d, 1H) , 9.24 (s, 1H) . <EJEMPL0 27> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2 -metil -2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4 -il) -N1 - (4-clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 26. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 190 mg (rendimiento : 26%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN ¾ (DMS0-d6, 300 MHz) d 1.16 (s, 3H) , 3.40 (d, 6H) , 4.01 (t, 1H) , 4.43 (s, 1H) , 4.92 (t, 1H) , 5.48 (s, 1H) , 6.72 (d, 1H) , 6.90 (t, 1H) , 7.15 (m, 3H) , 7.31 (m, 4H) , 7.67 (s, 1H) , 9.29 (s, 1H) . <EJE PLO 28> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-hidroximetil -2H-benzopiran-4-il) -N ' - (4-clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 1, excepto que se utilizan 289 mg de la sal de sodio de N-ciano-N ' - (4 -clorofenil ) tiourea y 210 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 4. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 40 mg (rendimiento : 11%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN R (D SO-d6, 300 MHz ) d), 1.35 (s, 3H) , 3.5 (m, 1H) , 3.75 (m( 1H) , 4.95 (t, 1H) , 5.2 (t, 1H) , 6.0 (s, 1H) , 6.97 (d, 1H) , 7.4 (m, 4H) , 7.7 (d, 1H) , 8.0 (m, 2H) , 9.51 (s, 1H) . <EJEMPLO 29> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-hidroximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 - (4-clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 28. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 40 mg (rendimiento : 11%) del compuesto deseado - - de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN XH (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.2 (s, 3H) , 3.65 (m, 2H) , 4.11 (t, 1H) , 5.08 (t, 1H) , 5.85 (s, 1H) , 7.01 (d, 1H) , 7.4 (m, 4H) , 7.9 (d, 1H) , 8.1 (d, 2H) , 9.58 (s, 1H) <EJEMPLO 30> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2 -metoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 1, excepto que se utilizan 800 mg de la sal de sodio de N-ciano-N1 - (4-clorofenil) tiourea y 200 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 5. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 108 mg (rendimiento : 32%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3R, 4S) . RMN ¾ (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.4 (s, 3H) , 3.15 (s, 3H) , 3.45 (d, 1H) , 3.64 (d, 1H) , 3.8 (t, 1H) , 5.08 (t, 1H) , 6.09 (s, 1H) , 6.94 (d, 1H) , 7.34 (dd, 4H) , 7.64 (s, 1H) , 8.01 (d, 2H) , 9.5 (s, 1H) . <EJE PLO 31> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-metoximetil-2H-benzopiran-4-il) - 1 - (4 -clorofenil) guanidina - - La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 30. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 107 mg (rendimiento : 32%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RM XH (DMSO-d6í 300 MHz) d 1.15 (s, 3H) , 3.3 (s, 3H) , 3.45 (d, 1H) , 3.6 (d, 1H) , 4.06 (t, 1H) , 5.00 (t, 1H) , 5.9 (s, 1H) , 6.96 (d, 1H) , 7.34 (dd, 4H) , 7.8 (s, 1H) , 8.0 (m, 2H) , 7.48 (s, 1H) <EJEMPLO 32> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N ' - (2 -clorofenil ) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 10, excepto que se utilizan 508 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (2-clorofenil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 2. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 188 mg (rendimiento : 24%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3R, 4S) . RMN ?? (DMSO-ds, 300 MHz) d 1.35 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 3.88 (t, 1H) , 4.60 (s, 1H) , 5.11 (t, 1H) . 5.97 (s, 1H) , - - 6.95 (d, 1H) , 7.17 (d, 1H) , 7.25 (d, 1H) , 7.34 (d, 2H) , 7.79 (d, 1H) , 8.03 (m, 2H) , 9.49 (s, 1H) . <EJEMPLO 33> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) - 1 - (2 -clorofenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 32. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 270 mg (rendimiento : 34%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . RMN XH (DMSO-d6/ 300 Hz) d 1.24 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 4.10 (t, 1H) , 4.49 (s, 1H) , 5.00 (s, 1H) , 5.85 (s, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.19 (d, 1H) , 7.28 (d, 1H) , 7.35 (m, 2H) , 7.90 (d, 1H) , 8.05 (d, 1H) , 9.53 (s, 1H) . <EJEMPLO 34> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - 1 - (2-trifluorometilfenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 10, excepto que se utilizan 582 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (2-trifluotrometilfenil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de - - preparación 2. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 220 mg (rendimiento : 26%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3R, 4S) . RMN XK (DMS0-d6, 300 MHz) d 1.34 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 3.88 (t, 1H) , 4.60 (s, 1H) , 5.11 (t, 1H) , 5.97 (s, 1H) , 6.95 (d, 1H) , 7.45 (d, 1H) , 7.60 (ra, 3H) , 7.87 (d, 1H) , 8.03 (dd, 1H) , 8.10 (S, 1H) , 9.62 (s, 1H) <EJEMPL0 35> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 -me il -2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) - 1 - (2-trifluorometilfenil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 34. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 320 mg (rendimiento : 37%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . RMN XH (DMSO-d6í 300 MHz) d 1.24 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 4.08 (t, 1H) , 4.49 (s, 1H) , 5.00 (s, 1H) , 5.82 (s, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.47 (d, 1H) , 7.61 (dd, 3H) , 8.03 (m, 3H) , 9.67 (s, 1H) <EJEMPLO 36> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro- 3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 -metil -2 -dimetoximetil -2H- - 5 - benzopiran-4-il) -?' - (2 -clorobencil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 10, excepto que se utilizan 540 mg de la sal de sodio de N-ciano- ' - (2-clorobencil) tiourea y 500 mg del compuesto de aminoalcohol preparado en el ejemplo de preparación 2. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 73 mg (rendimiento : 9%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3R, 4S) . RMN ¾ (DMSO-ds, 300 MHz) d 1.36 (s, 3H) , 3.47 (d, 6H) , 3.68 (s, 1H) , 4.13 (m, 1H) , 4.39 (s, 1H) , 4.52 (s, 2H) , 5.57 (s, 1H) , 6.6 (s, 1H) , 6.88 (m, 1H) , 7.25 (m, 6H) , 8.01 (d, 1H) , 8.16 (s, 1H) . <EJEMPLO 37> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-díhidro-3-hidroxi -2 -metil -2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorobencil) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 36. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 100 mg (rendimiento : 12%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . RMN XH (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.28 (s, 3H) , 3.5 (d, 6H) , 3.6 (s, 1?) , 3.98 (d, 1H) , 4.53 (ra, 3H) , 5.61 (d, 1?) , 5.89 (t, 1H) , 6.88 (d, 1H) , 7.25 (m, 3H) , 7.40 (d, 1H) , 8.02 (m, 2H) , 8.14 (s, 1H) <EJEMPLO 38> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-acetoxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N ' -bencilguanidina A una solución de 68 mg (0.15 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 25, disuelto en 3 mi de cloruro de metileno, se agregan 21 µ? de anhídrido acético, 42 'µ? de trietilamina y 2 mg de DMAP (4- (dimetilamino) piridina) . La mezcla de reacción se agita durante 5 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo (10 mi X 2) después de agregar 5 mi de agua. La capa orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 67 mg (rendimiento : 90%) del compuesto deseado. RMN XH (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.3 (s, 3H) , 1.25 (s, 1H) , 2.1 (s, 3H) , 3.3 (s, 3H) , 3.5 (s, 3H) , 4.35 (s, 1H) , 4.52 (s, 2H) , 5.25 (m, 1H) , 5.32 (s, 1H) , 6.98 (d, 2H) , 7.38 (s, 5H) , 8.15 (d, 2H) . <EJEMPLO 39> Preparación de (2S) -N"-ciano-N- (6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 -bencilguanidina A una solución de 54 tng (0.11 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 38 disuelto en 2 mi de tolueno se agregan 24 µ? (0.1628 moles) de DBU. La mezcla de reacción se agita durante 24 horas a temperatura ambiente y se extrae con acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 31 mg (rendimiento : 64%) del compuesto deseado. RMN XH (DMSO-d6, 300 MHz) d 1.43 (s, 3H) , 3.29 (s, 3H) , 3.39 (s, 3H) , 4.21 (s, 1H) , 4.59 (d, 2H) , 5.45 (s, 1H) , 7.02 (d, 1H) , 7.36 (m, 5H) , 8.29 (dd, 2H) , 8.82 (d, 1H) . <EJEMPLO 40> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3-hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil ^Il-benzopiran- - il ) - ' -bencilguanidina A una solución de 1.11 g del compuesto que se prepara en el ejemplo 24, disuelto en 20 mi de metanol, se agregan 10 mi de una solución saturada de acetato cúprico. A esta mezcla se agregan 276 mg de borohidruro de sodio, lentamente. La mezcla de reacción se agita durante 3 horas a temperatura ambiente y se extrae con 100 mi de acetato de etilo después de agregar 50 mi de agua. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 576 mg (rendimiento : 56%) del compuesto deseado. RMN ¾ (CDCI3, 300 MHz) d 1.21 (s, 3H) , 3.58 (s, 3H) , 3.59 (s, 3H) , 4.14 (d, 1H) , 4.30 (s, 1H) , 4.45 (d, 1H) , 4.47 (d, 1H) , 5.46 (d, 1H) , 6.60-6.66 (m, 3H) , 7.32-7.36 (m, 5H) . <EJEMPLO 41> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-acetoxiamino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina A una solución de 50 mg del compuesto preparado en el ejemplo 40, disuelto en 2 mi de cloruro de metileno, se agregan 25 µ? de trietilamina y 10 µ? de cloruro de acetilo. La mezcla de reacción se agita durante 1 hora a temperatura ambiente y se extrae con 10 mi de agua y 20 mi de acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 51 mg (rendimiento : 92%) del compuesto deseado. RMN XH (DMSO-d6, 200 MHz) d 1.15 (s, 3H) , 1.96 (s, 3H) , 3.38 (s, 3H) , 3.51 (s, 3H) , 3.98 (m, 2H) , 4.30 (s, 1H) , 4.38-4.49 (m, 2H) , 5.22 (s amplio, 1H) , 5.48 (s amplio, 1H) , 6.64 (d, 1H) , 7.31 (s amplio, 5H) , 7.61 (s amplio, 1H) , 7.94 (s, 1H) , 9.76 (s, 1H) . <EJEMPLO 42> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-metansulfonilamino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 -bencilguanidina A una solución de 91 mg del compuesto que se prepara en el ejemplo 40 disuelto en 2 mi de cloruro de metileno se agregan 45 µ? de trietilamina y 20 µ? de cloruro de metansulfonilo . La mezcla de reacción se agita durante 2 horas a temperatura ambiente y se extrae con 10 mi de agua y 20 mi de acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en columna de gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 90 mg (rendimiento : 85%) del compuesto deseado. RMN XH (CDC13, 200 MHz) d 1.25 (s, 3H) , 2.90 (s, 3H) , 3.57 (s, 6H) , 4.10 (d, 1H) , 4.25 (d, 1H) , 4.34 (s, 1H) , 4.43 (d, 1H) , 4.50 (d, 1H) , 4.61 (t, 1H) , 5.83 (d, 1H) , 6.78 (d, 1H) , 7.20-7.38 (m, 7H) , 8.18 (s amplio, 1H) <EJEMPLO 43> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-ciano-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 - (4-clorofenil) guanidina A una solución de 100 mg de (2S, 3S, 4R) -6-ciano-2-metil-2-dimetoximetil-3 -hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano preparado en el ejemplo de preparación 6, disuelto en 3 mi de DMF se agregan 92 mg de la sal de sodio de N-ciano-N' - (4-clorofenil) tiourea y 89 mg de clorhidrato de 1- [3- (dimetilamino)propil] -2 -etilcarbodiimida . La mezcla de reacción se agita durante 6 horas a temperatura ambiente, y se extrae con 30 mi de acetato de etilo después de acidificar la mezcla al agregar 5 mi de HCl 1N. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 70 mg (rendimiento : 43%) del compuesto deseado de estereoquíca (2S, 3R, 4S) . R XH (CDC13, 200 MHz) d 1.36 (s, 3H) , 3.49 (s, 3H), 3.53 (s, 3H) , 3.58 (t, 1H) , 4.34 (s, 1H) , 4.99 (t, 1H) , 5.62 (s, 1H) , 6.86 (d, 1H) , 7.25-7.55 (m, 5H) , 7.69 (s, 1H) . <EJEMPLO 44> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-ciano-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina Se lleva a cabo la reacción por el mismo método que el ejemplo 43, excepto que se utilizan 99 mg (0.35 mmoles) de (2S, 3R, 4S) -6-ciano-2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4 -dihidro-2H-l-benzopirano preparado en el ejemplo de preparación 7, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 68 mg (rendimiento : 42%) del compuesto deseado. RMN XH (CDC13, 200 MHz) d 1.50 (s, 3H) , 3.44 (s, 3H) , 3.48 (s, 3H) , 3.66 (t, 1H) , 4.43 (s, 1H) , 5.24 (d, 2H) , 6.84 (d, 1H) , 7.27-7.44 (m, 4H) , 7.55 (s, 1H) , 8.53 (s, 1H) . <EJEMPLO 45> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-ciano-3 , -dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - 1 -bencilguanidina .
(Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R) -4 - [ [ (ciano-imino) fenoximetil] amino] -3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-6-carbonitrilo A una solución de 150 mg de (2S, 3S, 4R) -6-ciano- - - 2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano preparado en el ejemplo de preparación 6, disuelto en 3 mi de isopropanol-DMF (2:1) se agregan 141 mg de cianocarbonimidato de difenilo y 97 µ? de trietilamina . La mezcla de reacción se agita durante 18 horas a temperatura ambiente y se extrae con 10 mi de agua y 30 mi de acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 182 mg (rendimiento : 80%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-ciano-3 , 4 -dihidro-3-hidroxi-2 -metil -2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) - 1 -bencilguanidina A una solución de 182 mg del compuesto que se prepara en la etapa 1 anterior, disuelto en 2 mi de DMF se agregan 0.42 mi de bencilamina. La mezcla de reacción se agita durante 12 horas a temperatura ambiente y se extrae con 20 mi de agua y 50 mi de acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 163 mg (rendimiento: 68%) del compuesto deseado. RMN ½ (CDCI3, 200 MHz) d 1.29 (s, 3H) , 3.45 (s, 3H) , 3.52 (s, 3H), 4.09 (t, 1H) , 4.35 (s, 2H) , 4.43 (d, 1H) , 4.81 (t, 1H) , 5.94 (s, 1H) , 6.83 (d, 1H) , 7.28-7.40 (m, 7H) <EJEMPLO 46> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-ciano-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo 45, excepto que se utilizan 150 mg de (2S, 3R, 4S) -6-ciano-2-metil-2-dimetoximetil-3 -hidroxi-4 -amino-3 , 4 -dihidro-2H- 1 -benzopirano preparado en el ejemplo de preparación 7, como el material inicial . El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 160 mg (rendimiento : 69%) del compuesto deseado. RMN XH (CDCI3, 200 MHz) d 1.35 (s, 3H) , 3.43 (s, 3H) , 3.44 (s, 3H) , 3.75 (t, 1H) , 3.82 (s, 2H) , 4.47 (s, 1H) , 5.05 (t, 1H) , 5.60 (s, 1H) , 6.81 (d, 1H) , 7.20-7.40 (m, 7H) . <EJEMPLO 47> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-bromo-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 -bencilguanidina. <EJEMPLO 47> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-bromo-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -?' -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 y la etapa 2 del ejemplo 45, excepto que se utilizan 98 mg de (2S, 3S, 4R) -6-bromo-2-metil-2-dimetoximetil-3-hidroxi-4-amino-3 , 4-dihidro-2H-l-benzopirano preparado en el ejemplo de preparación 8, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 86 mg (rendimiento : 83%) del compuesto deseado. RMN XH (CDC13) d 1.21 (s, 3H) , 3.39 (s, 3H) , 3.42 (s, 3H) , 4.10 (d, 1H) , 4.29 (s, 1H) , 4.42 (dd, 2H) , 4.65 (m, 2H) , 5.61 (d, 1H) , 7.20-7.40 (m, 4H) . <EJEMPLO 48> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' - (3 , 4-dimetoxibencil) guanidina (Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R)-4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -6 -nitro-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi- 2 -metil - 2 -dimeroximetil-2H-benzopirano Se prepara el compuesto preparado en el ejemplo de preparación 2, por cromatogarfía en gel de sílice (n-hexano : etilo 4R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopirano A una solución de 400 mg (1.34 mmoles) de (2S, 3S, 4R) -6-nitro-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopirano disuelto en 3 mi de DMF se agregan 352 mg (1.48 mmoles) de cianocarbonimidato de difenilo y 243 µ? (1.74 mmoles) de trietilamina . La mezcla de reacción se agita durante 12 horas a temperatura ambiente y se extrae con 20 mi de agua y 30 mi de acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 498 mg (rendimiento : 84%) del compuesto deseado : (Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 - (3 , 4-dimetoxibencil) guanidina A una solución de 327 mg (0.74 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior disuelto en 3 mi de DMF se agregan 371 mg (2.22 mmoles, 3 equivalentes) de (3 , 4-dimetoxibencil) amina . La mezcla de reacción se agita durante 12 horas a temperatura ambiente y se extrae con 20 mi de agua y 30 mi de acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 338 mg (rendimiento : 89%) del compuesto deseado. RMN ¾ (CDC13, 200 MHz) d 1.33 (s, 3H) , 3.53 (s, 3H) , 3.57 (s, 3H) , 3.86 (s, 3H) , 3.87 (s, 3H) , 4.14 (d, 1H) , 4.38 (s, 1H) , 4.24-4.50 (m, 2H) , 4.82 (t am plio, 1H) , 6.15 (s, 1H) , 6.61 (t, 1H) , 6.84 (m, 3H) , 6.92 (d, 1H) , 8.08 (dd, 1H) , 8.35 (s, 1H) . <EJEMPLO 49> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 - (3 , 4-dimetoxibencil ) guanidina A una solución de 209 mg (0.41 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 48 disuelto en 5 mi de metanol , se agregan 0.5 mi (0.2 mmoles, 0.5 equivalentes) de una soluciona cuosa de Cu(0Ac)2 0.4M. A esta mezcla se le agregan 155 mg (4.1 mmoles, 10 equivalentes) de borohidruro de sodio, lentamente, durante 30 min. La mezcla de reacción se agita durante 1 hora a temperatura ambiente, se extrae con 10 mi de acetato de etilo y se filtra para eliminar un sólido negro precipitado. La solución filtrada se extrae con 30 mi de acetato de etilo después de agregar 10 mi de una - - solución de NaHC02 acuoso saturado. La capa orgánica se lava con salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 9:1) para proporcionar 169 mg (rendimiento : 85%) del compuesto deseado. RM ¾ (CDC13, 200 MHz) d 1.20 (s, 3H) , 3.57 (s, 6H) , 3.87 (s, 6H) , 4.29 (s, 1H) , 4.04-4.12 (m, 2H) , 4.32-4.58 (m, 2H) , 5.46 (d, 1H) , 6.50-6.69 (m, 3H) , 6.84 (m, 3H) , 7.26 (s amplio, 1H) . <EJEMPLO 50> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N" - (4-metoxibencil ) guanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 360 mg del compuesto preparado en la etapa 1 del ejemplo 48 como el material inicial y 333 mg (2.43 mmoles) de 4-metoxibencilamina en lugar de (3 , 4 -dimetoxibencil ) amina . El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 343 mg (rendimiento : 87%) del compuesto deseado. RMN ¾ (CDCI3, 200 Hz) d 1.47 (s, 3H) , 3.51 (d, 6H) , 3.77 (s, 3H) , 3.80 (d, 2H) , 4.44 (t, 1H) , 4.56 (s, 1H) , 5.32 (m, 1H) , 6.06 (s, 1H) , 6.40 (d, 1H) , 6.90 (m, 3H) , 7.12 (m, 2H) , 7.30 (d, 1H) , 8.00 (dd, 1H) , 8.03 (s, 1H) . <EJEMPLO 51> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 -metil -2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -?' - (4-metoxibencil) guanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 304 mg (0.62 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 50 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 241 mg (rendimiento : 85%) del compuesto deseado . RM XH (CDC13, 200 MHz) d 1.21 (s, 3H) , 3.58 (s, 6H) , 3.81 (s, 3H) , 4.15 (d, 1H) , 4.17 (d, 1H) , 4.30 (s, 1H) , 4.36-4.54 (m, 3H) , 5.48 (d, 1H) , 6.52-6.71 (m, 3H) , 6.88 (d, 2H) , 7.09 (s amplio, 1H) , 7.24 (d, 2H) . <EJEMPLO 52> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 - (3 -nitrobencil) guanidina .
- - La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 358 mg (0.81 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 del ejemplo 48 como el material inicial y 458 mg (2.43 mmoles) de la sal clorhidrato de 3 -nitrobencilamina en lugar de (3 , 4-dimetoxibencil) amina. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 302 mg (rendimiento : 74%) del compuesto deseado.
RMN XH (CDC13, 200 MHz) d 1.18 (s, 3H), 3.43 (d, 6H) , 4.09 (t, 1H) , 4.49 (s, 1H) , 5.00 (t, 1H) , 5.85 (s, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.29 (d, 1H) , 7.37 (d, 1H) , 7.40 (m, 2H) , 7.91 (d, 1H) , 8.05 (m, 2H) . <EJEMPLO 53> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3 -trifluorometilbencil) guanidina.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 443 mg (1.0 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 del ejemplo 48 como el material inicial y 525 mg (3.0 mmoles) de (3 -trifluorometil ) bencilamina en lugar de (3,4-dimetoxibencil) amina . El residuo se purifica por - - cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 497 mg (rendimiento : 95%) del compuesto deseado.
RMN 1H (CDC13, 200 MHz) d 1.33 (s, 3H) , 3.55 (s, 3H) , 3.59 (s, 3H) , 4.19 (d, 1H) , 4.38 (s, 1H) , 4.40 (m, 1H) , 4.54 (d, 1H) , 4.78 (ra, 1H) , 6.48 (s amplio, 1H) , 6.84 (s amplio, 1H) , 6.94 (d, 1H) , 7.53 (m, 5H) , 8.09 (dd, 1H) , 8.56 (S, 1H) . <EJEMPLO 54> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- ( 6 -amino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 -trifluorometilbencil ) guanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 278 mg (0.53 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 53 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 192 mg (rendimiento : 73%) del compuesto deseado .
RMN lH (CDC13, 200 MHz) d 1.23 (s, 3H) , 3.59 (s, 6H) , 4.16 (d, 1H) , 4.31 (s, 1H) , 4.40-4.67 (m, 3H) , 5.53 (d, 1H) , 6.57-6.74 (m, 3H) , 7.31 (t amplio, 1H) , 7.46-7.59 (m, 5H) . <EJEMPLO 55> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-metansulfoniloxi-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2 -metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina .
(Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R) -4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -6-metansulfoniloxi-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopirano.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 58 mg (0.18 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 9 como el material . El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 64 mg (rendimiento : 74%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N-(6-metansulfoniloxi-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2 -metil -2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 64 mg (0.13 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior y 28 µ? (0.26 mmoles). El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 32 mg (rendimiento : 49%) del compuesto deseado .
RMN lH (CDC13, 200 Hz) d 1.28 (s, 1H) , 3.21 (s, 3H) , 3.58 (s, 3H) , 3.59 (s, 3H) , 4.15 (ra, 1H) , 4.35 (s, 1H) , 4.52 (m, 1H) , 4.63 (ra, 1H) , 5.45 (d, 1H) , 6.87 (d, 1H) , 6.92 (s amplio, 1H) , 7.20-7.42 (m, 6H) . <EJEMPLO 56> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-metansulfoniloxi-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N 1 -bencilguanidina (Etapa 1) Preparación de (2R, 3S, 4R) -4-[ [cianoimino) fenoximetil] amino] -6-metansulfoniloxi-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-1 -benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 55, excepto que se utilizan 63 mg (0.19 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 10, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano = acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 75 mg (rendimiento : 79%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- ( 6 -metansul foniloxi -3,4-dihidro- 3 -hidroxi - 2 -metil - 2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 55, excepto que se utilizan 75 mg (0.15 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior y 28 µ? (0.26 mmoles) . El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano = acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 57 mg (rendimiento : 74%) del compuesto deseado. RM ?? (CDC13( 200 MHz) d 1.26 (s, 3H) , 3.16 (s, 3H) , 3.41 (s, 3H) , 3.47 (s, 3H) , 3.72 (d, 1H) , 4.43 (s, 1H) , 4.46 (d, 1H) , 5.02 (t, 1H) , 5.25 (d, 1H) , 6.59 (t, 1H) , 6.84 (d, 1H) , 7.02-7.20 (m, 2H) , 7.22-7.40 (m, 4H) . <EJEMPLO 57> Preparación de (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4 -il ) - ' -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 884 mg (1.94 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 24 como un material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano = acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 313 mg (rendimiento : 38%) del compuesto deseado . RM XH (CDC13, 500 MHz) d 1.41 (s, 3H) , 1.75 (s amplio, 1H) , 3.39 (s, 3H) , 3.45 (s, 3H) , 3.46 (d, 1H) , 3.72 (d, 1H) , 4.40 (s, 1H) , 4.46 (d, 2H) , 4.78 (d, 1H) , 5.22 (m, 1H) , 6.41 (m, 1H) , 6.50 (m, 1H) , 6.59 (d, 1H) , 6.73 (m, 1H) , 7.30-7.37 (m, 4H) . <EJEMPLO 58> Preparación de (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil -2 -dimetoximetÍ1-2H-benzopiran-4 - il ) - ' -bencilguanidina.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 1.2 g (2.7 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 22 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano = acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 547 mg (rendimiento : 48%) del compuesto deseado . RMN ?? (CDC13, 500 MHz) d 1.21 (s, 3H) , 1.80 (s amplio, 2H) , 3.57 (s, 3H) , 3.58 (s, 3H) , 4.10-4.13 (m, 1H) , 4.20-4.38 (m, 1H) , 4.31 (s, 1H) , 4.48 (dd, 1H) , 4.50 (dd, 1H) , 5.60 (s, 1H) , 6.58-6.79 (m, 2H) , 7.28-7.37 (m, 6H) . <EJEMPLO 59> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4 - il ) -N' -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 1.07 g (2.3 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 23 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano = acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 589 mg (rendimiento : 60%) del compuesto deseado. RMN XH (CDC13, 500 MHz) d 1.41 (s, 3H) , 1.75 (s amplio, 1H) , 3.39 (s, 3H) , 3.45 (s, 3H) , 3.46 (d, 1H) , 3.72 (d, 1H) , 4.40 (s, 1H) , 4.46 (d, 2H) , 4.78 (d, 1H) , 5.22 (m, 1H) , 6.41 (m, 1H) , 6.50 (m, 1H) , 6.59 (d, 1H) , 6.73 (m, 1H) , 7.30-7.37 (m, 4H) . <EJEMPLO 60> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ( [1, 3] dioxolan-2-il) ) -2H-benzopiran- -il) -N' -bencilguanidina .
(Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R) -4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ( [1, 3] dioxolan-2 -il) -2H-l-benzopirano La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 400 mg (1.35 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 11 como un material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 400 mg (rendimiento : 67%) del compuesto deseado. RMN ¾ (CDC13, 200 MHz) d 1.40 (s, 3H) , 3.2 (d, 1H) , 3.81-3.92 (m, 4H) , 4.69 (s, 1H) , 5.15 (t, 1H) , 6.98 (d, 1H) , 7.15-7.42 (ra, 5H) , 8.12 (dd, 1H) , 8.30 (d, 1H) .
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N [ (ciano-N- (6 -nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ( [1,3] dioxolan-2 -il) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 400 mg (0.1 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior como un material inicial y 0.3 mi (2.7 mmoles) de bencilamina en lugar de (3 , 4 -dimetoxibencil) amina . El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 350 mg (rendimiento : 85%) del compuesto deseado. RMN 1H (CDC13, 200 MHz) d 1.35 (s, 3H) , 3.95-4.15 (m, 4H) , 4.49 (dd, 2H) , 4.91 (t, 1H) , 5.05 (s, 1H) , 5.62 (s, 1H) , 6.61 (t, 1H) , 6.95 (d, 1H) , 7.29-7.41 (m, 5H) , 8.12 (dd, 1H) , 8.21 (d, 1H) . <EJEMPLO 61> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ( [1, 3] dioxolan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N ' -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 200 mg (0.44 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 60 como el material inicial . El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 90 mg (rendimiento : 48%) del compuesto deseado . RMN XH (CDCI3, 200 MHz) d 1.24 (s, 3H) , 3.92.4.14 (m, 4H) , 4.45 (dd, 2H) , 4.97 (s, 1H) , 5.51 (d, 1H) , 6.45-6.80 (m, 3H) , 7.12 (s, 1H) , 7.25-7.42 (m, 3H) - - <EJEMPLO 62> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ( [1,3] dioxan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina .
(Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R) -4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ( [1,3] dioxan-2-il) -2H-l-benzopirano.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 60, excepto que se utilizan 700 mg (2.26 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 12 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:1) para proporcionar 840 mg (rendimiento : 83%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil -2- ( [1,3] dioxan-2-il) -2H-l-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 840 mg (1.85 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior como el material inicial y 0.61 mi (5.56 mmoles) de bencilamina en lugar de (3 , 4 -dimetoxibencil) amina. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 750 mg (rendimiento : 87%) del compuesto deseado. RMN 1H (CDC13, 200 MHz) d 1.31 (s, 3H) , 1.4-1.52 (m, 1H) , 2.13-2.26 (m, 1H) , 3.80-3.98 (m, 2H) , 4.18-4.31 (m, 3H) , 4.45 (dd, 2H) , 4.75 (s, 1H) , 4.18 (t, 1H) , 5.81 (s, 1H) , 6.75 (t, 1H) , 6.96 (d, 1H) , 7.28-7.40 (m, 5H) , 8.1 (dd, 1H) , 8.35 (d, 1H) . <EJEMPLO 63> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ( [1, 3] dioxan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N1 -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 350 mg (0.75 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 62 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 278 mg (rendimiento : 85%) del compuesto deseado. RMN ?? (CDC13, 200 Hz) d 1.23 (s, 3H) , 1.40-1.50 (m, 1H) , 2.12-2.22 (m, 1H) , 3.8-3.96 (m, 2H) , 4.15-4.32 (m, 3H) , 4.48 (dd, 2H) , 4.70 (s, 1H) , 5.41 (d, lHh) , 6.52-6.71 (m, 3H) , 7.15 (s, 1H) , 7.30-7.39 (m, 5H) . <EJEMPLO 64> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3, 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2- ([1,3] -5, 5-dimetildioxan-2-il) -2H-benzopiran-4 -il ) -N ' -bencilguanidina .
(Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R)-4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -6-nitro-3, 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2- ( [1, 3] -5, 5-dimetildioxan-2-il) -2H-1-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 60, excepto que se utilizan 1.1 g (3.60 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 13 como un material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 1 g (rendimiento : 86%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3, 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 -metil -2- ( [1,3] -5,5-dimetildioxan-2-il) -2H- 1-benzopiran-4- il ) -N' -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 1 g (2.1 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 900 mg (rendimiento : 87%) del compuesto deseado. RMN H (CDC13, 200 MHz) d 0.78 (s, 3H) , 1.21 (s, 3H) , 1.34 (s, 3H) , 3.54 (dd, 2H) , 3.76 (d, 2H) , 4.20 (d, 2H) , 4.44 (dd, 2H) , 4.65 (s, 1H) , 4.81 (t, 1H) , 5.82 (s, 1H) , 6.72 (t, 1H) , 6.96 (d, 1H) , 7.29-7.41 (m, 5H) , 8.11 (dd, 1H) , 8.38 (d, 1H) <EJEMPLO 65> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N-amino-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2 - ( [1,3] -5,5-dimetildioxan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N ' -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 400 mg (0.81 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 64 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 350 mg (rendimiento : 93%) del compuesto deseado. RMN ¾ (CDC13, 200 MHz) d 0.79 (s, 3H) , 1.21 (s, 3H) , 1.27 (s, 3H) , 3.51 (dd, 2H) , 3.74 (d, 2H) , 4.2 (d, 1H) , 4.35 (d, 1H) , 4.51 (dd, 2H) , 4.61 (s, 1H) , 4.73 (s, 1H) , 5.44 (dd, 1H) , 6.52-6.75 (m, 3H) , 7.16 (s, 1H) , 7.28-7.41 (m, 5H) <EJEMPLO 66> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 -metil-2 -dietoximetil -2H-benzopiran- -il) - 1 -bencilguanidina.
(Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R)-4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -6-nitro-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2 -metil-2- (dietoximetil) -2H-l-benzopirano.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 234 mg (0.72 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 14 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 237 mg (rendimiento : 70%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil -2 -dietoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 217 mg (0.46 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 - - anterior, como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 200 mg (rendimiento : 90%) del compuesto deseado. RMN ¾ (CDC13, 200 MHz) d 1.29 (m, 9H) , 3.74 (m, 5H) , 4.20 (d, 1H) , 4.50 (m, 3H) , 4.83 (s amplio, 1H) , 5.92 (m, 1H) , 6.52 ( , 1H) , 6.90 (d, 1H) , 7.34 (m, 5H) , 8.11 (dd, 1H) , 8.30 (s, 1H) . <EJEMPL0 67> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2 -metil-2-dietoximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' -bencilguanidina La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 122 mg (0.25 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo 66 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:3) para proporcionar 91 mg (rendimiento : 80%) del compuesto deseado. RMN E (CDCI3, 200 MHz) d 1.25 (m, 9H) , 3.78 (m, 4H) ( 4.18 (d, 1H) , 4.30 (m, 4H) , 5.53 (d, 1H) , 6.68 (m, 3H) , 7.18 (amplio, 1H) , 7.36 (m, 5H) . <EJEMPL0 68> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6- - - metoxicarbonil-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -(dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina (Etapa 1) Preparación de (2S, 3S, 4R) -4- [ t (cianoimino) fenoximetil] amino] -6-metoxicarbonil -3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-l-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 399 mg (1.28 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 15 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 397 mg (rendimiento : 68%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- ( 6 -metoxicarbonil-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil -2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina.
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 397 mg (0.93 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior y 0.21 mi (1.98 mmoles) de bencilamina como el material inicial . El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 270 mg (rendimiento : 67%) del compuesto deseado . RM 1H (CDC13, 200 MHz) d 1.21 (s, 3H) , 3.55 (d, 6H) , 3.86 (s, 3H) , 4.13 (d, 1H) , 4.17 (s, 1H) , 4.48 (m, 2H) , 5.77 (d, 1H) , 6.83 (m, 1H) , 6.85 (d, 1H) , 7.33 (ra, 4H) , 7.93 (dd, 1H) , 7.99 (s, 1H) . <EJEMPLO 69> Preparación de (2S, 3R, 4R) -N" -ciano-N- (6-metoxicarbonil-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N1 -bencilguanidina .
(Etapa 1) Preparación de (2R, 3S, 4R)-4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -6-metoxicarbonil -3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H- 1-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 121 mg (0.39 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 16 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 131 mg (rendimiento : 74%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-metoxicrbonil-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2-dimetoximetil-2H-l-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina . La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 131 mg (0.31 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior y 60 µ? (0.61 mmoles) de bencilamina como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 107 mg (rendimiento : 79%) del compuesto deseado . RMN XH (CDC13, 200 ??) d 1.26 (s, 3H) , 3.43 (d, 6H) , 3.82 (d, 1H) , 3.77 (s, 3H) , 4.45 (s, 1H) , 4.48 (m, 2H) , 5.64 (d, 1H) , 6.81 (m, 1H) , 6.83 (d, 1H) , 7.29 (m, 4H) , 7.80 (dd, 1H) , 7.84 (S, 1H) . <EJEMPL0 70> Preparación de (3S, 4R) -N" -ciano-N- (8-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi -2 -metil -2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) - ' -bencilguanidina.
(Etapa 1) Preparación de (3S, 4R) -4- [ [ (cianoimino) fenoximetil] amino] -8-nitro- , 4-dihidro-3-hidroxi-2 -metil-2-dimetoximetil -2H-l-benzopirano .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que la etapa 1 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 0.97 g (3.24 mmoles) del compuesto preparado en el ejemplo de preparación 17 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 1.16 g (rendimiento : 81%) del compuesto deseado.
(Etapa 2) Preparación de (3S, 4R) -N" -ciano-N- (8-nitro-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2 -dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método de la etapa 2 del ejemplo 48, excepto que se utilizan 1.16 g (2.6 mmoles) del compuesto preparado en la etapa 1 anterior y 0.85 mi (7.8 mmoles) de bencilamina como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:2) para proporcionar 0.94mg (rendimiento : 79%) del compuesto deseado como una mezcla racémica de (2S, 3S, 4R) - y (2R, 3S, 4R) . R N 1H (CDC13, 200 MHz) d 1.23 (s, 3H) , 1.32 (s, 3H) , 3.37-3.40 (s, 3H) , 3.48 (s, 3H) , 3.84-3.87 (d, 1H) , 4.17-4.21 (d, 1H) , 4.36-4.38 (d, 1H) , 4.41-4.45 (d, 1H) , 4.8 (t, 1H) , 5.04 (t, 1H) , 5.82 (d, 1H) , 6.09 (d, 1H) , 6.82-6.96 (m, 2H) , 7.27 (s, 5H) , 7.57-7.69 (c, 1H) . <EJEMPL0 71> Preparación de (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (8-amino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4 -il) -?' -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 298 mg (0.66 mmoles) de la mezcla racémica preparado en el ejemplo 70 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo 1:4) para proporcionar 117 mg (rendimiento : 42%) del compuesto deseado de estereoquímica (2S, 3S, 4R) . RMN ¾ (CDCl3í 200 ???) d 1.25 (s, 3H) , 3.58 (s, 3H) , 3.8 (s, 1H) , 4.39-4.47 (m, 4H) , 5.62 (d, 1H) , 6.58-6.61 (d, 1H) , 6.74-6.78 (d, 1H) , 7.12 (s, 1H) , 7.27-7.34 (m, 5H) . <EJEMPLO 72> Preparación de (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (8-amino-3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4 -il ) -N ' -bencilguanidina .
La reacción se lleva a cabo por el mismo método que el ejemplo 49, excepto que se utilizan 298 mg (0.66 mmoles) de la mezcla racémica preparada en el ejemplo 70 como el material inicial. El residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice (n-hexano : acetato de etilo = 1:4) para proporcionar 106 mg (rendimiento : 38%) del compuesto deseado de estereoquímica (2R, 3S, 4R) . RMN XH (CDC13 , 200 MHz) d 1.46 (s, 3H) , 3.41 (s, - - 3H) , 3.46 (s, 3?) , 3.73-3.81 (m, 2?) , 4.44 (s, 1?) , 4.46 (s, 1H) , 4.87 (m, 1H) , 5.2 (m, 1H) , 6.59-6.60 (d, 1H) , 6.63-6.76 (t, 2H) , 7.26-7.36 (m, 5H) .
Los compuestos preparados en los ejemplos anteriores se incluyen en la tabla 1.
Tabla 1 - Ri R2 Ra R4 R5 Re n Estereoquímica Sa S P S P S02CH3 6 CH3 OH H - H - 1 2S,3S,4R S02CH3 6 CH3 OMe OH H - H - 1 2R,3S,4R NH2 6 CH3 -< OH H - H - 1 2S, 3R,4S OMe NH2 6 CH3 OH H - H - 1 2R, 3R, 4S NH2 6 CH3 OH H - H - 1 2R, 3S, 4R N02 6 CH3 OH H - H - 1 2S,3S,4R NH2 6 CH3 OH H H 1 2S, 3S,4R N02 6 CH3 OH H - H - 1 2S, 3S,4R NH2 6 CH3 OH H H 1 2S, 3S, 4R N02 6 CH3 OH H - H - 1 2S, 3S,4R NH2 6 CH3 OH H H 1 2S, 3S,4R N02 6 CH3 OEt OH H - H - 1 2S, 3S,4R NH2 6 CH3 -< OH H H 1 2S, 3S,4R OEt C02CH3 6 CH3 OH H - H - 1 2S, 3S,4R C02CH3 6 CH3 OMe OH H - H - 1 2R, 3S,4R N02 8 CH3 -< OH H - H - 1 3S,4R OMe NH2 8 CH3 OH H - H - 1 2S, 3S,4R NH2 8 CH3 OH H - H - 1 2S, 3S,4R - - EJEMPLOS EXPERIMENTALES Se realizaron los siguientes experimentos con los compuestos de la fórmula 1 para investigar sus acciones farmacológicas . <EJEMPLO EXPERIMENTAL 1> Efectos de Vasodilatación en Vasos Sanguíneos Aislados de Ratas Se lleva a cabo el siguiente experimento para examinarse si los compuestos de la fórmula 1 dilatan los vasos sanguíneos. Se dejan inconscientes ratas macho Sprague-Dawley (350-450 g, que se obtienen de Experimental Animal Team of the Korea Research Institute Technology) al golpear la región occipital, se sacrifican por dislocación cervical y se realiza toracotomía. Después de ser extraída rápidamente, a la aorta torácica se le retira el tejido adiposo y se cortan anillos aórticos con una anchura de 3 mm. La aorta se frota ligeramente con un amortiguador de Krebs Henseleit modificado (Physiological Salt Solution, PSS) , un palillo de algodón humedecido para eliminar la capa epitelial interior del mismo. Mientras se suspende en un baño de órgano que contiene amortiguador fisiológico, se permite que el tejido vascular se equilibre bajo una tensión en reposo de 2 g y - - después, se deja reposar durante 1 hora a 37°C para estabilización con un suministro de un carbógeno que consiste de 95% de 02 y 5% de C02. Posteriormente, se restringe el tejido vascular con fenilefrina 10"5M y se lava varias veces con PSS y se repite este procedimiento nuevamente para asegurar la reactividad estable del músculo liso vascular a constricción/dilatación repetida. Además, se utiliza metoxamina 3 x 10"6M para inducir una constricción intensa en el músculo liso vascular. Cuando se alcanza la vasoconstricción inducida por la metoxamina y se mantiene en un máximo, los compuestos de prueba y los testigos se agregan de manera acumulativa a los baños de órgano en concentraciones de 1, 3, 10 y 30 uM de manera que inducen vasodilatación. Respecto a los testigos, se sabe que Cromakalim y BMS-180448 (los compuestos de la fórmula química 2), son activadores de KATP de la primera generación con efectos potentes de vasodilatación y cardioprotección. Después de la adición de los medicamentos, se calcula el cambio en la constricción máxima inducida por metoxamina para graficar una curva de concentración-respuesta de dilatación. Mediante un análisis de regresión lineal, se obtiene la CI50 de la concentración de medicamento la cual se dilata en 50% en tejido vascular, para cada medicamento. Los resultados se proporcionan en la tabla 2 - - siguiente .
TABLA 2 Vasodilatación y efecto antiisquémico (efecto cardioprotector) de los compuestos de fórmula 1 (%) (%) (%) Vehículo 39.75 60.78 37.61 52.39 Cromakalin 0.067 BMS-180448 1.38 38.83 39.14 37.73 38.02 Ejemplo 15 14.07 Ejemplo 24 9.78 37.92 48.48 35.33 28.03 Ejemplo 25 >30 36..88 48 ,.55 Ej emplo 32 3.57 42 , .49 44 , .72 Ejemplo 38 24.48 38 , .26 51. .13 Ejemplo 41 >30 33 , .59 30. ,25 Ejemplo 41 >30 Cromakalin tiene un CI50 de 0.067 uM y muestra un potente efecto de dilatación sobre la aorta de rata aislada sometida a constricción con metoxamina 3 µ?, mientras que B S-180448 tiene un CI50 de 1.38 µ?, lo que muestra una actividad de vasodilatación de veinte veces más débil que la de Cromakalin. Por otra parte, los compuestos de la presente invención varían en CI50 de 9.78 µ? a más de 30 µ?, de manera que sus efectos de vasodilatación son muy pequeños, e incluso menores que los de los controles, Cromakalin y BMS-180448. Cuando ejercen sus acciones sobre el KATP presente en el corazón, los compuestos de acuerdo con la presente invención desarrollan un papel de cardioprotección. Por otra parte, los derivados de benzopiranilguanidina que actúan sobre KATP presentes en vasos sanguíneos periféricos dilatan los vasos sanguíneos, lo que disminuye la presión sanguínea. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención tienen efectos cardioprotectores más eficientes en virtud de su baja actividad de vasodilatación.
Como se ilustra en lo anterior, los compuestos de la presente invención también son muy lentos en la actividad de dilatación de los vasos sanguíneos de manera que mejoran la selectividad por la protección cardioprotectora. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 2> Actividad Cardioprotectora en Modelos de Corazón Isquémico en Ratas Para determinar si los compuestos de la fórmula 1 son protectores para corazones isquémicos, se llevan a cabo experimentos para determinar los efectos antiisquémicos de los compuestos en ratas, como sigue. Se anestesian ratas macho (350-450 g, que se obtienen de Experimental Animal Team of the Korea Research Institute of Chemical Technology) por inyección intraperitoneal de pentobarbital a una dosis de 75 mg/kg.
Después de traqueotomía, se hace que las ratas respiren artificialmente a un ritmo de 60/min con un volumen de carrera de 10 ml/kg. Se insertan cánulas en la vena femoral y en la arteria femoral y se utilizan para administración del medicamento y medición de la presión sanguínea, respectivamente . En los modelos de daño miocárdico isquémico, la temperatura corporal es un factor importante en los resultados. Para evitar el cambio en la temperatura - - corporal, se inserta una sonda que determina la temperatura corporal en el recto de cada rata y se mantiene la temperatura corporal constante a 37°C con la ayuda de una unidad de control de mantilla homeotermica. Posteriormente, durante la prueba, se realiza una medición continua de la presión arterial sanguínea media y la frecuencia cardíaca de las ratas. Para la medición de la presión sanguínea, se utiliza un transductor de presión, tal como el fabricado por Grass Ins., MA, E.U.A. , identificado como modelo Statham P23XL. La frecuencia cardíaca se mide con un tacómetro tal como el fabricado por Gould Inc., OH, E.U.A. , identificado como Biotachometer. Además, todos los cambios que se producen se registran continuamente a través de un registro de diagrama Gould 2000, fabricado por Gould Inc. Se ocluye la arteria coronaria izquierda de acuerdo con el método de Selye H. como sigue. Las ratas experimentan cirugía de toracotomía izquierda para abrir parcialmente el tórax y se presuriza el tórax del lado derecho mediante el dedo medio de la mano izquierda para empujar el corazón hacia afuera. Inmediatamente después de que la arteria coronaria descendente anterior izquierda a continuación denominada como LAD se somete a estructura cuidadosa utilizando una aguja de sutura con ligadora de cera 5-0, el corazón se vuelve a colocar en la cavidad - - torácica mientras ambos extremos de la ligadura se sitúan en el exterior. Los extremos opuestos de la ligadura se hacen pasar a través de un tubo PE (PE100, 2.5 cm) y se permite que reposen sueltos durante 20 min, para estabilización. Por medio de la cánula que se inserta en la vena femoral, se administran los vehículos o medicamentos en las ratas, los cuales se dejan reposar durante 30 min con el fin de inducir suficientemente la eficacia de los medicamentos. Se utiliza BMS-180448 como un medicamento control y la dosis de administración i.v. es de 0.3 mg/kg para todos los medicamentos de prueba de interés y el medicamento control . Después, el tubo PE el cual tiene las hebras dobladas de la ligadura se pasan a través del mismo y se empujan hacia el corazón y después, se ajustan verticalmente al jalar firmemente las regiones de extremo de la ligadura con una pinza hemostática mientras se presiona la arteria coronaria. Se permite que el tubo PE repose durante 45 min para la oclusión de la arteria coronaria, seguido por la separación de la pinza hemostática y después por reperfusión durante 90 min. Después de la reoclusión de la arteria coronaria de acuerdo con el procedimiento anterior, a las ratas se les administra 2 mi de azul de Evans 1% por vía intravenosa. Posteriormente, se inyecta por vía intravenosa un exceso de pentobarbital para matar a las ratas, después de lo cual se - - extirpa el corazón y después se separa del ventrículo izquierdo y ambas aurículas. El ventrículo izquierdo se corta horizontalmente hacia el vértice del corazón en 5 ó 6 cortes los cuales se pesan. Desde la superficie de cada corte, se introducen imágenes con la ayuda de un equipo Hi-scope en una computadora que se instala con un programa de análisis de imagen (Image Pro Plus) . A partir de las imágenes que se introducen en la computadora, se miden el área de la región de tejido de corriente sanguínea normal el cual aparece de color azul en el monitor de la computadora, y el área la cual aparece incolora. Los porcentajes de área incolora resuelto al área total de cada corte se calculan y multiplican por el peso de cada corte para determinar el área en riesgo (AAR por sus siglas en inglés) en cada corte. El AAR que se obtiene de cada corte se suma para todos los cortes y el AAR total se divide entre el peso total del ventrículo izquierdo para proporcionar el % de AAR, como se muestra en la siguiente fórmula matemática 1: [Fórmula matemática 1] ^ de AAR de cada corte % AAR = Peso del ventrículo izquierdo total - - Además, los cortes de corazón se incuban durante 15 min con amortiguador de fosfato y cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC) (pH 7.4) a 37°C y se fija durante 20-24 horas en una solución de formalina 10%. Durante esta fijación, se reduce el cloruro de 2 , 3 , 5-trifeniltetrazolio en colorante de formazano por la deshidrogenasa miocárdica y su cofactor NADH, de manera que las regiones normales del tejido se tiñen de color rojo ladrillo. En contraste, las zonas de infarto del tejido son deficientes en la deshidrogenasa y su cofactor, de manera que no se presenta una reducción en el 2 , 3 , 5-trifeniltetrazolio, lo que permite que el color permanezca sin cambio. De acuerdo a si las regiones de tejido se tiñen con 2 , 3 , 5-trifeniltetrazolio, se realiza una medición de las áreas en la zona normal y de infarto en cada corte de ventrículo. El área de la zona de infarto de cada corte se suma para todos los cortes y el área de la zona de infarto sumada resultante se divide entre el peso total de AAR o el peso de ventrículo izquierdo total para proporcionar % IZ, como se muestra en la siguiente fórmula matemática 2 : - - [Fórmula Matemática 2] del área de región de infarto de cada corte IZ (%) = Peso del ventrículo total V total AAR modelo experimental, parte de los compuestos de prueba se determinan como con una actividad antiisquémica más potente puesto que el % de IZ es menor. Los resultados se proporcionan en la tabla 2 anterior. En el modelo de daño a miocardio isquémico de ratas anestesiadas, como se observa en la tabla 2, al grupo al que se le administró vehículo muestra una tasa de infarto al miocardio en el área en riesgo (IZ/AAR) de 60.78%, lo que indica un daño grave en el músculo miocárdico. Al medirse como 39.14% en la tasa de infarto al miocardio, BMS-180448 muestra una actividad antiisquémica notable. Cuando se compara únicamente con la tasa de infarto al miocardio, los compuestos de la presente invención son similares o superiores a BMS-180448. Sin embargo, debido a que los compuestos de la presente invención son notablemente menores en su actividad de vasodilatación en comparación con BMS 180448, son muy superiores al medicamento convencional en cuanto a actividad antiisquémica selectiva del corazón. Especialmente el compuesto del ejemplo 40 es de una - - actividad de vasodilatación muy baja (CI50 > 30 µ?) con una tasa de infarto al miocardio tan baja como 30.25%, de manera que muestra una selectividad cardíaca mucho mejor ante la vasodilatación en comparación con BMS 180448. Además, el compuesto de la presente invención no actúa para reducir la presión sanguínea. En consecuencia, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como un agente para el tratamiento de enfermedades cardíacas isquémicas en virtud de su excelente actividad protectora contra las enfermedades cardiovasculares isquémicas. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 3> Actividad Protectora Cardíaca en Modelos de Corazón Isquémico de Perros Mestizos.
Para determinar si los compuestos de la fórmula 1 son protectores para los corazones isquémicos de animales más grandes, se llevan a cabo como sigue experimentos que determinan los efectos ant iisquémicos de los compuestos en perros mestizos. Los experimentos en perros mestizos seguidos por el método de Grover et al. (G. J. Grover et al., J. Cardiovasc. Pharmacol . 25, 40 (1995)) . Después de ser anestesiados por inyección intravenosa de pentobarbital a una dosis de 35 mg/kg, se someten a infusión adicional a perros mestizo macho de 35 mg/kg (8-12 kg) con infusión de pentobarbital de sodio a una - - dosis de 3-4 mg/kg a través de la vena cefálica derecha en todo el experimento, de manera que se obtiene constante la anestesia. Para mantener la respiración durante el experimento, se inserta un catéter traquial dentro del tracto respiratorio de cada perro mestizo, después de lo cual se permite que respire con la ayuda de un respirador tal como el fabricado por CWE Inc., PA, E.U.A., identificado como modelo SAR-830, mientras se mantiene la pC02 a 30-35 mmHg mediante el uso de aire ambiente y oxígeno suministrado. Se toman 0.5 mi de sangre a través de un catéter que se inserta dentro de la arteria femoral cada hora, y se utiliza para medir la concentración de oxígeno en sangre con la ayuda de un aparato, tal como el fabricado por Ciba-Corning, MA, E.U.A., identificado como Blood Gas Analyzer 280. Mientras se vigila la temperatura obtenida en los rectos, la temperatura corporal de los animales experimentales se mantiene constante (al controlar la temperatura de las mesas de laboratorio sobre las cuales se tienden a los animales) . Con el objetivo de medir la presión sanguínea y la frecuencia cardíaca, se inserta un catéter heparinizado dentro de la arteria femoral derecha. A este respecto, se utiliza un transductor de presión, tal como el fabricado por Grass Ins., MA, E.U.A., identificado como Modelo Statham P23XL, para medir la presión sanguínea. Se mide la frecuencia por un tacómetro, tal como el fabricado - - por Gould Inc., OH, E.U.A., identificado por Biotachometer . Además, la totalidad de los cambios que se producen durante el experimento se registran de manera continua a través de un registro de carta Gould 2000, fabricado por Gould Inc. Se hace una incisión en el quinto espacio intercostal para abrir el tórax y se separan los LAD del tejido circundante. Se cuelga una ligadura de cera alrededor del LAD para ocluir el LAD posteriormente. La parte de LAD corriente arriba de la ligadura de seda se aisla de los tejidos adyacentes y se mide cuantitativamente el flujo sanguíneo. A este respecto, un registro de carta, tal como el fabricado por MFE Ins., MA, E.U.A., identificado como 1400 Thermal Chart Recorder es el que se utiliza. Utilizando un polígrafo tal como Grass Model 7E, se mide el electrocardiograma y se lee (terminal II) . Para someter a infusión a perros mestizos con el medicamento de interés, se inserta un catéter dentro de la vena cefálica izquierda y se fija. Después de la operación, cuando todos los parámetros se mantienen estables, los compuestos y vehículos se administran por vía intravenosa. Antes de la oclusión de LAD, los animales experimentales se dividen en un grupo control (PEG 400) y un grupo al que se le administra medicamento de prueba (KR-31372, 50 pg/kg/min) . Diez minutos antes de la oclusión de LAD, se comienzan a administrar por infusión los - - medicamentos de prueba por vía intravenosa. La infusión de los medicamentos de prueba y el vehículo dura 40 min (dosis total 2 mg/kg, volumen de PEG400 total de 4 mi o menos) . Diez minutos después del inicio de la infusión, se ocluyen por completo LAD y después de un período de 90 min, se lleva a cabo la reperfusión para mantener el flujo coronario durante 5 horas. Después de 5 horas, se cánula LAD por perfusión con solución de inger a la misma presión de la presión sanguínea. Se inyecta una solución decolorante azul violeta (1 mg/kg, 10 mg/ml) dentro de la aurícula izquierda, después de lo cual el corazón se coloca para recibir un choque eléctrico y se extirpa. La sepración de ambas aurículas, los ventrículos se cortan transversalmente en un intervalo de 0.5 cm. Se toman fotografías de las secciones transversales de los cortes de ventrículo resultantes por medio de una cámara digital. Para la medición de IZ, los cortes de tejido se incuban a 37°C durante 30 min en un amortiguador de fosfato de cloruro de 2 , 3-trifeniltetrazolio 1%, seguido por toma de fotografías de los cortes transversales con la cámara digital. Utilizando un programa de análisis de imagen (Image-Pro Plus ver. 3.0.1, Media Cybernetics, Maryland, E.U.A.), se miden y analizan AAR e IZ. Se expresa IZ como el porcentaje de AAR (véase la fórmula matemática 2) . Los valores de IZ menores significan efectos más potentes de los - - medicamentos de prueba en este modelo de perro mestizo. Los resultados se proporcionan en la tabla 2 anterior. En los modelos de daño al miocardio isquémico de perros mestizos anestesiados, como se indica en la tabla 2, los compuestos de la presente invención también muestran valores disminuidos considerablemente para la tasa de infarto al miocardio en el área en riesgo (AAR) . De manera detallada, el grupo de solvente muestra una tasa de infarto al miocardio en el área en riesgo (IZ/AAR) de 52.39%, lo que indica un daño grave en el músculo del miocardio. Al ser medido es de 38.02% en la tasa de infarto al miocardio, BMS-180448 muestra una buena actividad antiisquémica. Por otra parte, cuando los compuestos de la presente invención se administran, la tasa de infarto al miocardio disminuye hasta ser tan baja como 28.03% (compuesto del ejemplo 24). Por supuesto, no se encuentra una reducción significativa de la presión sanguínea ante la administración de los compuestos de la presente invención. Como se describe en lo anterior, los compuestos de la presente invención ejercen excelente acción antiisquémica en el perro mestizo con superioridad en la actividad antiisquémica respecto al control BMS-180448. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como agentes para la prevención o curación contra enfermedades relacionadas con la enfermedad cardíaca isquémica . <EJEMPLO EXPERIMENTAL 4> Actividad Protectora para Neuronas Para determinar si los compuestos de la fórmula 1 suprimen la muerte neuronal inducida por hierro, se llevan a cabo experimentos como sigue . De los cerebros de embriones de rata de 17-18 días de edad, se aislan las neuronas corticales cerebrales y después se cultivan a 37°C durante 7-9 días en un incubador con C02 5%. Los cultivos de células corticales se lavan dos veces con medio esencial mínimo (MEM) para reducir la concentración de suero a 0.2% y se tratan previamente durante 30 min con 10 µ? y 30 µ? de cada uno de los compuestos de prueba. Para los experimentos, los compuestos de prueba se disuelven en DMSO y se diluyen en un medio. En este momento, no se permite que la concentración final de DMSO exceda de 0.2%. Para un grupo testigo, únicamente se aplica vehículo. Después del tratamiento previo con los compuestos de prueba o con el vehículo, se administra FeS04 hasta una concentración final de 50 µ?, y los cultivos se mantienen durante 24 horas en un incubador de C02. Durante la incubación, se libera lactato deshidrogenasa (LDH) al medio ante la muerte neuronal por la toxicidad oxidativa de - - hierro. El grado de daño neuronal se determina al medir la cantidad de LDH secretado al medio. Se evalúa el efecto protector de los compuestos de interés sobre las neuronas al calcular la tasa de reducción de LDH del grupo de tratamiento en comparación con el grupo control. Los resultados se proporcionan en la tabla 3 abajo.
TABLA 3 Efecto Protector de los Compuestos de Fórmula 1 en las Neuronas Compuestos Concentración (µ ) % de Protección Ejemplo 24 30 47 10 29 Ejemplo 25 30 69 10 Ejemplo 38 30 78 10 56 Ejemplo 40 30 97 10 45 Como se puede ver en la tabla 3 , los compuestos de la presente invención protegen a las neuronas impidiendo que - - se dañen por hierro, de una manera dependiente de la dosis. El compuesto del ejemplo 38 protege contra muerte neuronal hasta en un 56% incluso a 10 µ?. Además, el compuesto del ejemplo 40 muestra una protección tan alta como 97%, lo que demuestra que el compuesto tiene una actividad protectora muy potente contra el daño inducido por hierro a las neuronas . Dado que los compuestos de la presente invención muestran excelentes efectos protectores a las neuronas, se pueden utilizar como agentes preventivos o curativos para el tratamiento médico de los trastornos neurológicos causados por el daño o la muerte de neuronas tales como ataque cerebral y demencia así como por el tratamiento médico de enfermedades inflamatorias tales como artritis, infarto cardíaco y daño al tejido agudo/crónico. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 5> Actividad Inhibidora Contra Peroxidación de Lípidos (1) Efecto inhibidor de la peroxidación de lípidos inducida por hierro.
Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 suprimen la peroxidación de lípidos inducida por hierro, se llevan a cabo experimentos, como sigue.
Se homogeneiza cerebro de rata en amortiguador Krebs (HEPES 15 mM, glucosa 10 mM, NaCl 140 mM, KC1 3.6 mM, CaCl2 1.5 mM, KH2P04 1.4 mM, MgCl2 0.7 mM, pH 7.4) y el sobrenadante se separa por centrifugación a 12,000 rpm durante 10 min y se utiliza para experimentos adicionales. Se agrega FeCl2 hasta una concentración final de 400 µ? en el homogeneizado de cerebro el cual después se permite reposar a 37°C durante 30 min, para facilitar la oxidación. Cada uno de los compuestos de prueba se agrega a una concentración de 100 µ? y se utiliza el vehículo como un control. El hierro facilita la oxidación del homogeneizado de cerebro para producir malondialdehído (MDA) , un producto de peroxidación de lípidos. Por lo tanto, se determina la peroxidación de lípidos por cuantificación de MDA. Se evalúa el efecto inhibidor de los compuestos de prueba contra la peroxidación de lípidos al calcular la tasa de reducción de MDA en los compuestos de prueba en comparación con los del grupo testigo. Habitualmente, la cuantificación de MDA se lleva a cabo al hacer reaccionar muestras con ácido 2 -tiobarbitúrico (TBA) y al medir la absorbancia a 530 nm. Sin embargo, este método no es adecuado para tratar las muestras a gran escala debido a la etapa de ebullición. Por lo tanto, en este experimento se utilizó N-metil -2 -fenilindol en vez de TBA. En este caso, una molécula de MDA reacciona con dos moléculas de N-metil-2 -fenilindol para formar un cromógeno el cual muestra una absorbancia máxima a 586 nm y no requiere etapas de ebullición. Se utiliza el equipo BioxytechMR LPO-586 para cuantificación de MDA. Los resultados se proporcionan en la tabla 4a, a continuación.
Tabla 4a Efecto Inhibidor de los Compuestos de Fórmula 1 sobre la Peroxidación de Lípidos por Hierro Compuestos Concentración % de Inhibición (µ?) Ejemplo 7 100 70 Ejemplo 24 100 12 Ejemplo 25 100 2 Ejemplo 32 100 86 Ejemplo 38 100 4 Ejemplo 40 100 79 Como se observa en la tabla 4a, los compuestos de la presente invención suprimen la peroxidación de lípidos inducida por hierro. En particular, los compuestos de los ejemplos 7, 32 y 40 muestran una actividad inhibidora muy potente contra la peroxidación de lípidos inducida por hierro con un efecto inhibidor de 70%, 86% y 79%, respectivamente . (2) Efecto inhibidor de oxidación de LDL inducido por cobre Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 suprimen la oxidación de LDL (lipoproteína de baja densidad) inducida por cobre, se llevan a cabo experimentos, como sigue . Se disuelve LDL humana (Sigma) en agua destilada a una concentración de 1 mg/ml . Se dializa LDL contra tres cambios de solución amortiguada con fosfato antes de la oxidación para eliminar EDTA (etilendiamino tetraacetato) a 4°C durante 18 h. Se incuba LDL sin EDTA (100 yg de proteína de LDL/ml) , en solución amortiguada con fosfato sin EDTA a 37°C durante 18 h en presencia de CuS04 10 µ? bajo tratamiento previo con los compuestos de prueba o tocoferol del cual las concentraciones finales son 10"9, 10"7 y 10~5 M. Se incuba un blanco sin CuS04, y se utiliza vehículo como un grupo de solvente. La oxidación se detiene a 4°C por la adición de EDTA 200 µ?. El cobre (Cu+2) facilita la oxidación de LDL para producir malondialdehído (MDA) , por lo tanto la peroxidación de lípido se determina por cuantificación de MDA igual que en el ejemplo 5 anterior (1) . La cuantificación de MDA se determina al hacer reaccionar muestras con ácido 2-tiobarbitúrico (TBA) y al medir la absorbancia a 530 nm. Se utiliza 1 , 1 , 3 , 3 -tetrametoxipropano (Sigma) como un agente estándar, y se calcula la cantidad de MDA como nmol de equivalentes de MDA por mg de proteína. Se evalúa el efecto inhibidor de los compuestos de prueba contra la peroxidacion de 1ípidos al calcular la reducción de MDA de los compuestos de prueba en comparación con la del grupo testigo. Los resultados se proporcionan en la tabla 4b a continuación.
Tabla 4b Efecto Inhibidor de los Compuestos de Fórmula 1 sobre la Peroxidacion de Lípidos inducida por cobre Compuestos Concentración (M) % de Inhibición Ejemplo 40 10"9 7.6 10"7 24.3 10"5 27.6 Tocoferol 10"9 18.5 10"7 21.3 10"5 29.7 - 5 - Como se observa en la tabla 4b, el compuesto del ejemplo 40 suprime de manera significativa la oxidación de LDL inducida por cobre a una concentración de 10"7 y 10"5 , lo cual es similar a la del tocoferol . (3) Efecto inhibidor de oxidación de LDL medida por A7r5 Para examinar si los compuestos de fórmula 1 suprimen la oxidación de LDL (lipoproteína de baja densidad) mediada por A7r5, se llevan a cabo experimentos, como sigue. Se cultivan células A7r5 (ATCC CRL-1444, músculos lisos, aorta torácica, rata BDIX) en placas de 24 pozos, utilizando medio de DME (medio de Eagle modificado por Dulbecco, suplementado con FBS (suero bovino fetal) inactivado por calor 10% y 1% de antibióticos. Las células A7r5 confluentes de las placas se lavan con solución amortiguada con fosfato y DMEM con FBS 10% y 1% de antibióticos, se agregan en un volumen total de 0.5 ml/pozo. Se preincuban las células (2 x 105 células/ml) son y con los compuestos de prueba (10~6-10"4M) o tocoferol ( 10~6- 10~4M) a 37°C durante 30 min. Después, las células A7r5 solas o A7r5 más H202 (10"v M) se exponen a 100 g/ml de LDL, durante 24 h. Se evalúa el efecto inhibidor de los compuestos de - - prueba contra la peroxidación de lípidos al calcular la tasa de reducción de MDA de los compuestos de prueba en comparación con la del grupo testigo igual que en el ejemplo 5 anterior (2) . Los resultados se proporcionan en la tabla 4c, abajo.
TABLA 4c Efecto Inhibidor de los Compuestos de Fórmula 1 en la Oxidación de LDL Mediada en Células A7r5 Compuestos Concentración % de inhibición (M) LDL LDL + H202 (10"7 ) Ejemplo 40 10 40.9 49.7 10"5 51.4 62.5 10"4 57.5 64.3 Tocoferol 10"6 41.1 43.2 10~5 57.0 53.0 10~4 73.7 63.9 Como se observa en la tabla 4c, el compuesto del ejemplo 40 y el tocoferol suprimen de manera significativa la oxidación de LDL mediada por A7r5 a todas las concentraciones probadas. Especialmente, el compuesto del ejemplo 40 representa una inhibición más significativa de la oxidación de LDL cuando se agrega H202. Con la excelente actividad inhibidora contra la peroxidación de lípidos como se observa en el ejemplo 5 experimental anterior, (1) , (2) y (3) , los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para la prevención y tratamiento de enfermedades neurodegenerativas tales como isquemia cerebral y demencia, enfermedades inflamatorias tales como artritis, infarto cardíaco y daño tisular agudo/crónico, los cuales pueden ser causados por peroxidación de lípidos y su acumulación en tejidos.
.¡EJEMPLO EXPERIMENTAL 6> Efecto inhibidor en la generación de NO Para examinar los compuestos de la fórmula 1 para inhibir la formación de óxido nítrico (NO) , se llevaron a cabo experimentos, como sigue. Utilizando medio RPMI1640 suplementado con suero bovino fetal (FBS, por sus siglas en inglés) 10%, se cultivan células RAW 264.7 (obtenida de American Type Culture Collection) , una línea de células de macrófagos murinos, a 37°C en un incubador con C02 5%. Se cosechan las células RAW264.7 y se ajusta la densidad celular a 5 x 105/ml - - con medio RPMI suplementado con FBS 0.5% y se colocan en placas, a 5 x 104 células/pozo en placas de 96 pozos, las cuales después se cultivan durante 20 h en un incubador de C02. Después de la remoción del medio, las células se tratan previamente durante 1 hora con medio fresco que contiene compuestos de prueba en concentraciones 33 µ? y 100 µ?. Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO y se diluyen a la concentración respectiva en el medio. Para reducir al mínimo el efecto de DMSO en la formación de óxido nítrico por las células RA 264.7, se permite que los medios contengan DMSO a una concentración de 0.1% o menos. Después de completar el tratamiento previo de una hora, se agrega lipopolisacárido (LPS, E. coli serotipo 055 :B5) para activar las células, las cuales después se mantiene durante 24 horas en un incubador de C02 como un resultado de la activación de células RAW264.7 con LPS, se forma NO. El NO liberado al medio está en forma de nitrito N02~, y se mide cuantitativamente por el reactivo de Griess. Un control se trata únicamente con vehículo en vez de los compuestos de prueba. La utilización del patrón de nitrito, se demuestra que los medicamentos de prueba en sí mismos no impiden la cuantificación de NO. Se determinaron los efectos inhibidores de los compuestos de prueba para impedir la formación de NO, como una reducción de la cantidad de NO, comparado con el grupo testigo. Los resultados se proporcionan en la tabla 5, a continuación .
TABLA 5 Efecto inhibidor de los compuestos de fórmula 1 en la producción de NO Compuestos Concentración (µ?) % de inhibición Ejemplo 7 100 88 Ejemplo 24 100 48 33 16 Ejemplo 25 100 54 33 39 Ejemplo 32 100 83 Ejemplo 38 100 85 33 56 Ejemplo 40 100 26 Como se indica en la tabla 5, los compuestos de la presente invención muestran un comportamiento dependiente de la dosis para inhibir la inducción de producción de NO por endotoxinas tales como LPS. En particular, el compuesto del ejemplo 38 inhibe la generación de NO hasta en un 56%, incluso a una concentración tan baja como 33 µ?. Además, una concentración de 100 µ? de los compuestos de los ejemplos 7 y 32 tienen una inhibición tan alta como 88% y 83%, respectivamente, lo que demuestra que los compuestos de la presente invención ejercen una actividad inhibidora muy potente impidiendo la formación de NO inducida por LPS. Con una buena actividad inhibidora contra la formación de NO los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como agentes de prevención o curación para el tratamiento médico de trastornos neurológicos tales como apoplejía cerebral y demencia, los cuales pueden ser causados por daño neurona1 o muerte debido a una gran cantidad de NO liberado así como para el tratamiento médico de enfermedades inflamatorias tales como artritis, infarto cardíaco y daño tisular agudo/crónico . <EJEMPLO EXPERIMENTAL 7> Efecto preventivo en el daño cerebral inducido por Isquemia-Reperfusión a cerebro Para examinarse los compuestos de la fórmula 1 son protectores contra el daño cerebral por isquemia-reperfusión, se llevan a cabo experimentos, como sigue. Se anestesian ratas macho Sprague-Dawley (350+50 g, SamYook Experimental Animáis Co., Corea) con una inyección de pentobarbital de sodio a una dosis de 40 mg/kg, después de lo cual se coloca una canulación en la vena y arteria femorales con PE-10 mientras se expone la arteria carótida izquierda. Cinco min. antes de la operación se inyectan 20 µg/kg de sulfato de heparina en la cavidad peritoneal . Para le medición continua de la presión arterial con una inserción de un dispositivo que mide la presión sanguínea en la arteria femoral. Aproximadamente 10 mi de sangre se toman de la vena femoral para reducir la presión sanguínea por debajo de 30 mmHg. Si la presión sanguínea no se reduce a menos de 100 mmHg al retirar 7 mi de sangre, se considera que las ratas presentan hipertonicidad simpática. En tal caso, se excluyen a las ratas del experimento debido a que no se puede reducir la presión sanguínea a 30 mmHg o incluso después de tener éxito al reducir la presión sanguínea, las ratas muestran alta mortalidad después de la operación . Aunque la presión sanguínea se mantiene a 30 mmHg, se ocluye durante 20 min. la arteria carótida izquierda expuesta por un broche de aneurisma para provocar isquemia cerebral. Después se retiran los broches de la carótida y se vuelve a suministrar sangre extraída. Para minimizar la acidosis sistémica, se administra a las ratas 5 mi de solución salina que contiene bicarbonato de sodio 0.84% - - (solución salina con bicarbonato) . Durante los períodos de cirugía y restauración, se mantiene la temperatura ambiente a 37+0.5 °C con la ayuda de una frazada térmica y focos de luz incandescente. Durante el restablecimiento de la operación, se mantiene constante la temperatura corporal durante 2 horas o más . Después de que se recuperan por completo, las ratas se transfieren a un observatorio para animales, el cual se encuentra bajo una condición homeostática en cuanto a temperatura (27°C) , humedad (60%) y ciclo de iluminación (12-12 horas). 24 horas después de la operación, se sacrifica a las ratas en un patíbulo y se extirpa rápidamente el cerebro (3 min.). El cerebro extirpado, que se encuentra en hielo, se corta en seis partes coronales de 2 ram con la ayuda de una matriz cerebral. Los cortes se tiñen con una solución 2% de cloruro de 2 , 3 , 5-trifeniltetrazolio a 37°C durante 30 min. Posteriormente se toman fotografías de los cortes teñidos, se revelan y se imprimen, y se miden y analizan los porcentajes de áreas cerebrales infartadas respecto al cerebro total en un programa de análisis de imagen (Image-Pro Plus ver. 3.0.1). 30 min. antes de la operación y a las 2, 4 y 16 horas después de la oclusión de la arteria carótida, los compuestos de prueba se inyectan peritonealmente en ratas a una dosis de 30 mg/kg. Para el testigo, se inyecta vehículo.
Para el compuesto de referencia, se administra MK801 (RBI, maleato ácido de (SR, IOS) - (+) -5-metil-10 , ll-dih£dro-5H-dibenzo[a, djciclo -heptano-5, 10-imina) a 3 mg/kg, con los mismos intervalos. Los efectos protectores de los compuestos de prueba en el daño cerebral causado por isquemia-reperfusión cerebral se expresan como reducción en los porcentajes de áreas cerebrales infartadas, en comparación con el grupo testigo. Los resultados se proporcionan en la Tabla 6, a continuación.
TABLA 6 Extracto protector de los compuestos de fórmula 1 en el daño cerebral inducido por isquemia-reperfusión cerebral Medicamento Dosis Área de infarto No. de prueba (mg/kg) Media+S . D . Reducción (%) (%) Vehículo 0 39.7 + 1.6 10 MK801 3 29.8 + 1.5 24.8* 7 Ejemplo 40 30 23.0 + 3.3 42.0* 11 *P<0.01, en comparación con el grupo testigo al que solo se - - le administra vehículo.
El grupo comparativo, en el cual a las ratas se les administra MK801 a una dosis de 3 mg/kg, tiene un área de infarto de 29.8%, la cual se reduce en 24.8% en comparación con la del grupo control. Por otra parte, en el grupo tratado con el compuesto del ejemplo 40, se mide el área de infarto, que es de 23.0%, la cual se reduce en 42.0% en comparación con la del grupo control. Por lo tanto, el compuesto del ejemplo 42 es dos veces más efectivo en actividad protectora contra el daño cerebral causado por isquemia-reperfusión cerebral, en comparación con el compuesto convencional MK801. En el grupo tratado con MK801, las ratas muestran un efecto secundario de poca motilidad en comparación al que se observa cuando se administra el compuesto del ejemplo 40, en donde las ratas no presentan ningún efecto secundario que incluye cambios en el comportamiento tales como movilidad. Dada la excelente actividad protectora contra el daño cerebral inducido por isquemia-reperfusión, los compuestos de esta invención se pueden utilizar como agentes para prevención o curación, para el tratamiento médico de trastornos neurológicos tales como apoplejía cerebral y demencia, las cuales pueden ser causadas por daño cerebral tal como oclusión vascular cerebral inducida por trombos. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 8> Efecto supresor contra angiogénesis Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 tienen un efecto inhibidor en la formación de vasos sanguíneos nuevos, se llevan a cabo experimentos como sigue. (1) Efecto en la depuración de 9mTc-DTPA Se utiliza una esponja de poliéster con un tamaño de 5 mm x 12 mm de diámetro como una matriz para el crecimiento de vasos sanguíneos. Dentro de cada esponja, se fija por un hilo un tubo de polietileno con una longitud de 5 mm. Se anestesian ratas Sprague-Dawley mediante inyección intraperitoneal de hidrato de clorar a una dosis de 300 mg/kg. El pelo de la rata en la región entre el cuello y el dorso se afeita y las regiones desnudas se someten a incisiones con una longitud de 10 mm para asegurar espacio subcutáneo suficientemente grande para albergar la esponja. Después de que se inserta en el espacio subcutáneo, la esponja se fija para que el tubo no oscile. Excepto cuando se administran los medicamentos, la totalidad del tubo se mantiene para evitar contaminación. Para inducir angiogénesis, se utiliza Angiotensina II. Para uso, se disuelve Angiotensina II en solución salina amortiguada con fosfato (PBS, por sus siglas en inglés) . Se inyectan 50 µ? de una solución 100 nmol . Respecto a los compuestos de la presente invención, se disuelven en PBS y se inyectan a dosis de 0.1, 0.3 y 1.0 mg/kg a través del tubo. En los grupos testigo, se inyecta el vehículo PBS o la angiotensina II sola, a las mismas dosis. El efecto supresor de los compuestos de prueba para impedir angiogénesis se mide 7 días después de la inyección. El grado de angiogénesis en la esponja insertada se examina por medición en la corriente sanguínea de depuración de 99mTc-DTPA (tecnesio-ácido dietilentriaminopentaacético) . Siete días después de la inyección de los compuestos de prueba, las ratas se anestesian nuevamente por inyección intraperitoneal de hidrato de cloral a una dosis de 30 mg/kg, seguido por inyección cuidadosa de 50 µ? de una solución de 99mTc-DTPA (0.5 mCi) en PBS esterilizada, a través del tubo. Se lleva a cabo una determinación cuantitativa de 99mTc-DTPA durante 60 min. Con la ayuda de un detector de centelleo ? mientras se activa una cámara ?, tal como la cámara ADAC VERTEX/SOLUS ?, equipada con un aparato de alta resolución y de baja energía, que funciona para tomar fotografías de la esponja a 60 cuadros, cada uno requiere 60 segundos para obtenerse. Las imágenes continuas que se obtienen de esta manera se introducen en una computadora para su análisis (Pegasys Sun Computer) . - 7 - Se calcula la depuración de 99mTc-DTPA de acuerdo con la siguiente fórmula matemática 3, y los resultados se proporcionan en la tabla 7a, a continuación. [Fórmula matemática 3] Depuración de 99mTc-DTPA (%) = Radioactividad inicial - radioactividad al sexto minuto x 100 Radioactividad inicial TABLA 7a supresor de los compuestos de fórmula 1 impidiendo angiogénesis Compuestos de Dosis Depuración de prueba (mg/kg/ (p.o) 99mTc (%) Control (PBS) - 30.3 Control de - 44.71 AII (100 nmol) Grupo de 0.1 26.90 prueba (AII (100 Ejemplo 24 0.3 18.22 nmol ) + Medicamento 1.0 3.38 de prueba p.o. = por vía oral Como es evidente de los datos de la tabla 7a, la Angiotensina II induce la formación de vasos sanguíneos nuevos al comparar la depuración de 99mTc-DTPA entre el grupo testigo al que se le administra PBS (30.3%) y el grupo testigo al que se le administra angiotensina II (44.71%). Cuando se administra a una dosis de 0.1 mg/kg, el compuesto del ejemplo 24 muestra una depuración de 99mTc-DTPA de 26.90%, lo que demuestra claramente el efecto supresor del compuesto, impidiendo angiogénesis . Además, la administración del compuesto del ejemplo 24 a dosis de 0.3 y 1.0 mg/kg induce depuraciones de 99mTc-DTPA de 18.22% y 3.38%, respectivamente, lo que muestra que el compuesto de la presente invención suprime la formación de vasos sanguíneos nuevos de una manera dependiente de la dosis. En particular, a una dosis de 1.0 mg/kg, el compuesto del ejemplo 24 muestra una supresión casi completa contra la angiogénesis inducida por Angiotensina II con la depuración de 99mTc-DTPA tan baja como 3.38%. (2) Efecto inhibidor sobre la formación de tubo HUVEC Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 tienen un efecto inhibidor en la formación de vasos sanguíneos nuevos a nivel celular, se llevan a cabo experimentos como sigue. Se cultivan células HUVEC (células endoteliales de vena umbilical humana, ATCC CRL-1730) y se induce tubulogénesis en células endoteliales vasculares al colocarlas en placa sobre una superficie de Matrigel, durante varias horas. Se comparan los efectos de la formación de tubo de los compuesto de prueba con los controles tratados con vehículo, y después se confirma indirectamente su efecto antiangiogénico in vitro. Los resultados se proporcionan en la tabla 7b.
TABLA 7b Efectos inhibidores de formación de tubo en HUVEC Efectos inhibidores en la formación de tubo Concentración 10 µ 100 µ? Ejemplo 2 + ++ Ejemplo 10 + ++ Ejemplo 16 +/- + /- Ejemplo 24 nd + Ejemplo 40 + ++ Ejemplo 52 +/- + + - - -; sin efecto, +/-; efecto débil +; efecto moderado, ++; efecto fuerte nd; no determinado Como se puede ver en la tabla 7b, se inhibe la formación de tubo en HUVEC a una concentración de 10 µ?, y se inhibe fuertemente a una concentración de 100 µ? en los compuestos del ejemplo 2, 10, 40 y 52, de una manera dependiente de la dosis. Con tal actividad supresora excelente contra angiogénesis , los compuestos de la presente invención se pueden aplicar de manera útil para el tratamiento médico de diversas enfermedades inducidas por angiongénesis tales como artritis reumatoide, psoriasis, complicaciones por SIDA, cánceres, retinopatía diabética, etcétera. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 9> Efecto inhibidor sobre ROS intracelular inducido por peróxido de hidrógeno Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 suprimen la formación de ROS intracelular inducido por H202, se llevan a cabo experimentos, como sigue. Se determina la medición de ROS (Especies de Oxígeno Reactivas) intracelulares utilizando H2DCFDA (diacetato de 2 ', 7 ' -diclorodihidrofluoresceina, Molecular Probes, Eugene, OR, E.U.A.). H2DCFDA es un compuesto no polar que difunde fácilmente células, en donde se hidroliza por esterasa intracelular al derivado polar H2DCF (2 ',7'-diclorodihidrofluoresceina) el cual no puede atravesar la membrana celular, y por lo tanto queda atrapado dentro de la célula. H2DCF es poco fluorescente, pero se convierte a DCF altamente fluorescente (2 ' , 7 ' -diclorofluorescenia) por ROS intracelular. Por lo tanto, se puede determinar la formación intracelular de ROS a partir de la cantidad de DCF convertido. Se utilizan células HUVEC (células endoteliales vasculares umbilicales humanas) o A7r5 (células de músculo liso de aorta torácica de rata) . Se cultiva HUVEC en medio F12K de Kaighn suplementado con FBS 10%, inactivado por calor, 0.1 mg/ml de heparina de sodio, 0.03-0.05 mg/ml de ECGS (suplemento de crecimiento celular endotelial) y 1% de antibióticos, y se cultiva A7r5 en DMEM suplementado con FBS inactivado por calor 10% y 1% de antiobióticos . Para medir ROS intracelular, se preincuban HUVEC o A7r5 durante 30 min. en presencia de los compuestos de prueba (10~7-10~5 M) . Posteriormente, las células se estimulan con H202 (10"e y 10"5 M, durante 10 min.), y después se incuban en la oscuridad durante 2 h a 37°C en amortiguador de fosfato 50 mM (pH 7.4) que contiene H2DCFDA 5 µ?. Se mide la cantidad de fluorescencia de DCF (excitación a 485 nm, emisión a 530 nm) mediante un lector de placa de fluorescencia (FL600, Biotek Instruments) . Los resultados se proporcionan en la Tabla 8.
TABLA 8 Efectos inhibidores contra ROS intracelular inducidos por H202 Célula Compuestos Concentración % de inhibición (M) H202 H202 (10"6M) (10"5M) HUVEC Tocoferol 10 13.8 8.8 10 43.2 30.7 Ej emplo 10 17.6 12.0 40 10 46.1 25.8 A7r5 Probucol 10 -7 72.0 10 184.1 10 185.3 Ejemplo 10 72.0 24 10 110.7 10 185.3 Como se puede ver en la Tabla 8, el compuesto del ejemplo 40 inhibe ROS inducida por H202 en células HUVEC, lo cual es similar o un poco superior al de tocoferol . El compuesto del ejemplo 24 inhibe por completo ROS, a una concentración de 10"8 y 10"5 M. Con los excelentes efectos antioxidantes para inhibir la formación de ROS intracelular , los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para prevención y tratamiento de enfermedades neurodegenerativas tales como apoplejía cerebral y demencia; enfermedades inflamatorias tales como artritis; ateroesclerosis ; infarto cardíaco y daño tisular agudo/crónico, los cuales pueden ser causados por ROS. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 10> Ensayo ORAC Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 eliminan el radical oxígeno, se llevan a cabo experimentos como sigue. El ensayo ORAC (capacidad de absorción de radical oxígeno) en un método in vitro capaz de determinar la capacidad de absorción de radical de un medicamento en un ambiente acuoso. El método utiliza ß-?? (ß-ficoeritrina) como proteína indicadora, y AAPH (diclorhidrato de 2 , 2 ' -azobis (2-amidinopropano) ) como generador de radical peroxi . Las - - mezclas de reacción consisten de compuestos de prueba (10"6M y 10"4M) , ß-?? (1.76 x 1CT8M) y AAPH (3 x 10"3M) en amortiguador de fosfato 75 mM (pH 7.0). Se utiliza un volumen final de 2 mi en las placas de 24 pozos. Los compuestos de prueba se disuelven primero en acetona y después se agregan a la mezcla de reacción. Una vez que se agrega AAPH, la reacción se inicia a 37°C y se mide la fluorescencia (exitación a 485 nm, emisión a 590 nm) cada 5 minutos utilizando un lector de fluorescencia (FL600, Biotek Instrument) . Se calculan las unidades ORAC con base en el área bajo la curva de fluorescencia de ß-??, en presencia del compuesto de prueba, en comparación con el área generada por Trolox 1 µ?. 1 unidad de ORAC representa la protección neta proporcionada por Trolox 1 µ?. Los resultados se proporcionan en la tabla 9. TABLA 9 Ensayo ORAC Compuesto Concentración Unidades ORAC M Tocoferol 10"6 1.0 10"4 1.568 Probucol 10"6 1.327 10"4 1.566 Ejemplo 40 10"6 2.047 10"6 3.250 - 5 - Como se puede ver en la tabla 9, el compuesto del ejemplo 40 muestra aproximadamente 2 veces más unidades ORAC en comparación con el de tocoferol y probucol a una concentración de 1CT8 y 10~4 M, lo que muestra una excelente capacidad de absorción de radicales. Con los excelentes efectos antioxidantes para eliminar radicales de oxígeno, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para la prevención y tratamiento de enfermedades neurodegenerativas tales como apoplegía cerebral y demencia; enfermedades inflamatorias tales como artritis; aterosclerosis ; infarto cardíaco y daño tisular agudo/crónico, el cual puede ser causado por radicales libres. <EJEMPL0 EXPERIMENTAL 11> Efecto de protección sobre células retínales isquémicas Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 protegen a las células retínales isquémicas, se lleva a cabo experimentos como sigue.
Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO para preparar una solución concentrada (100 mM) , la cual se diluye con solución salina fisiológica hasta la concentración de 100, 50 y 30 µ?. Los compuestos de prueba se administran por inyección al humor vitreo antes de 30 min. de isquemia. Se anestesia a ratas adultas por inyección ip (intraperitoneal) de hidrato de cloral (400 mg/kg) , y después el ojo derecho se trata con tropicamida 1% para dilatar la pupila. Se incrementa la presión intraocular (IOP, por sus siglas en inglés) a 160-180 mmHg, mayor que la presión sanguínea normal (140 mmHg) , por canulación de la cámara anterior conectada al dispositivo de presión hidrostática . Se confirma la interrupción del flujo sanguíneo oftalmoscópicamente , se mantiene la IOP elevada durante 30 min. Después de 30 min. de isquemia, se extirpan ambos ojos y se separa la retina, después de lo cual se observa el daño celular. Se realiza una cuenta del número de células en la capa de células del ganglio (250 x 25 µp?) y la capa nuclear interior (150 x 25 µp?) y después se calcula como % de células vivas, en comparación con los ojos del lado izquierdo no sometidos a operación respecto al control normal. Los resultados se proporcionan en la tabla 10.
TABLA 10 Efectos protectores en células retínales isquémicas Células vivas (%) Capas de células Capas nucle del ganglio interior Control normal 100 100 Isquemia 34.5 51.7 Ejemplo 40 30 µ? 40.7 54.8 50 µ? 60.2 69.8 100 µ? 77.9 82.6 Como se puede ver en la tabla 10, el compuesto del ejemplo 40 protege a las neuronas en las capas tanto del ganglio como nuclear interior después de isquemia retinal, de una manera dependiente de la dosis. Con excelente efecto protector para inhibir la muerte de células neuronales isquémicas en las capas de ganglio y nuclear interior de la retina, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para el tratamiento de glaucoma, neuropatía óptica, los cuales pueden ser causados por isquemia. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 12> Efecto en la MNCV (velocidad de conducción de nervio motor) en ratas diabéticas Para examinar si en los compuestos de la fórmula 1 mejoran la MNCV dañada en ratas diabéticas, se llevan a cabo experimentos, como sigue. Se induce diabetes por inyección i.p. (intraperitoneal) de 65 mg/kg de estreptozocina en ratas, y después los compuestos de prueba se disuelven en 2 mi de medio (solución salina fisiológica: etanol : tween 80 8:1:1), y se administran oralmente, una vez al día. Se anestesia a las ratas con halotano, y después se expone el nervio ciático para medir MNCV. Se estimula el nervio en dos puntos. El electrodo del primer estímulo se inserta en el extremo proximal y el electrodo del segundo estímulo se inserta en el nodulo ciático. El electrodo de la aguja coaxial se inserta dentro del músculo interdigital, y después se induce potencial de acción al músculo por estimulación en dos puntos. Se calcula la velocidad de conducción al dividir la distancia entre los dos puntos de estímulo por la diferencia de latencia. Se utilizan 100 mg/kg de ácido lipoico con el compuesto de fórmula 1 en la recuperación de la MNCV dañada en ratas diabéticas. Se calcula la recuperación (%) de MNCV, de acuerdo con la siguiente fórmula matemática 4. Los resultados se proporcionan en la tabla 11.
[Fórmula matemática 4] Recuperación (%) = MNCV del grupo tratado - MNCV de ratas diabéticas x 100 MNCV del control normal = MNCV de ratas diabéticas TABLA 11 Efectos en la MNCV en ratas diabéticas MNCV (segundos) Recuperación (%) Testigo normal 51.937 100 Rata diabética 40.647 - Ácido lipoico 56.070 136.6 (100 mg/kg) Ejemplo 40 47.756 63.0 (30 mg/kg) Como se puede ver en la tabla 11, la MNCV de ratas diabéticas disminuye de manera significativa en comparación con el control normal. El tratamiento con 100 mg/kg de ácido lipoico recupera por completo la MNCV dañada en ratas diabéticas. La administración del ejemplo 40 (30 mg/kg) - - mejora de manera significativa la MNCV en ratas diabéticas. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 13> Prueba nociceptiva (prueba de placa caliente) en ratas diabéticas Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 mejoran las respuestas nociceptivas dañadas en ratas diabéticas, se llevan a cabo experimentos como sigue. Los efectos de las respuestas nociceptivas de los compuestos de prueba en ratas se examinan utilizando una placa caliente. Se aplican los mismos métodos para la inducción de diabetes y el tratamiento del compuesto de prueba, en ratas. Se coloca a las ratas en una placa caliente a 50°C, y después se determinan los períodos de latencia de la acción nociceptiva tales como lamerse las patas. La recuperación (%) de las respuestas nociceptivas en ratas diabéticas se calcula de acuerdo con la siguiente fórmula matemática 4. Los resultados se proporcionan en la tabla 12.
- - [Fórmula matemática 5] Recuperación (%) = Respuesta en el srupo tratado - respuesta en el control diabético x 100 Respuesta en el testigo normal - respuesta en el testigo diabético TABLA 12 Efectos en la respuestas nociceptivas en ratas diabéticas Respuesta Recuperación (%) nociceptiva (segundos) Control normal 4.698 100 Control diabético 3.986 - Ácido lipoico 4.371 60.2 Ejemplo 40 4.791 106.5 Como se observa en la tabla 12, el ácido lipoico mejora de manera significativa las respuestas nociceptivas dañadas en ratas diabéticas. Por el contrario, el compuesto del ejemplo 40 recupera por completo las respuestas nociceptivas dañadas de ratas diabéticas en la prueba de - - placa caliente. Con excelente actividad mejoraáa contra M CV dañada y respuestas nociceptivas de ratas diabéticas como se observa en el ejemplo 12 y 13 experimental anterior, así como los efectos de proliferación de células antioxidantes y neuronales, se pueden utilizar los compuestos de la presente invención para prevención y tratamiento de neuropatía diabética y alteraciones periféricas diabéticas. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 14> Efectos de protección sobre el daño cerebral hipóxico Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 protegen contra daño cerebral hipóxico en ratas recién nacidas, se llevan a cabo experimentos como sigue, utilizando MRS (espectro de resonancia magnética) . El modelo de daño de cerebro hipóxico focal en ratas recién nacidas se utiliza con mucha frecuencia para estudiar la asfixia en lactantes, debido a que la madurez del cerebro es similar a la de un lactante humano, y es fácil de obtener una cantidad suficiente de animales necesarios para determinar los efectos. Se ha informado que el pico lipídico aumenta en MRS (espectroscopia de resonancia magnética) por daño celular neuronal isquémico debido a la destrucción de la membrana celular que incluye barrera hematoencefálica [A. Bizzi et . al., Magnetic Resonance I agin 14 581-592 (1996)], y también la concentración de lípidos y apoptosis, que se correlacionan estrechamente con apoptosis [Van der A. Toorn et al., Magnetic Resonance in Medicine, 36, 914-922 (1996)]. Los marcadores de células neuronales son N-acetilaspartato (NAA) y creatina (Cr) . Después se confirma que los valores de lípidos/NAA (N-acetilaspartato) y lípido/Cr (creatina) se relacionan con el cambio morfológico y la gravedad de apoptosis en el daño cerebral hipóxico. Se colocan ratas recién nacidas (de 7 días de edad 10-15 g) en una cámara hipóxica durante 2 h para inducir hipoxia, y los compuestos de prueba se inyectan intraperitonealmente antes de 1 h de hipoxia. Se obtiene la MRS de protón al 1 día después de daño cerebral, y después se determina el valor de lípido/NAA y lípido/Cr.
TABLA 13 Efectos protectores en daño cerebral hipóxico Lí ido/NAA Lípido/Cr Control hipóx 4.63 4.11 Ejemplo 40 2.51 2.33 (50 mg/kg) Como se puede ver en la tabla 13, el compuesto del ejemplo 40 reduce el valor de lípido/NAA y lípido/Cr de manera significativa, lo que representa un efecto de protección en el daño cerebral . Con excelente efecto de protección en el daño de cerebro hipóxico en ratas recién nacidas, se pueden utilizar los compuestos de la presente invención para prevención y tratamiento de asfixia en lactantes . <EJEMPLO EXPERIMENTAL 15> Efectos inhibidores en la proliferación de células de músculo liso vascular Para examinar si los compuestos de la fórmula 1 inhibe la proliferación de células de músculo liso vascular, se llevan a cabo experimentos como sigue. Se evalúan los efectos inhibidores sobre la proliferación celular al medir la incorporación de [3H]-timidina en ADN. Se hacen crecer célula de músculo liso aórticas de rata en placas de 24 pozos durante 3 días hasta casi confluencia en DNEM que contiene FBS 10%, y después se elimina por lavado FBS que contiene DMEM. Las células se cultivan nuevamente en DMEM sin suero durante 48 h hasta la quiescencia. Se agregan los compuestos de prueba 15 min. antes de la adición de angiotensina II (10-7M) , lo que estimula la proliferación celular, y después las células se incuban durante 72 h. Durante las últimas 4 h de incubación - - se agrega [3H]-timidina (1 µ??/????) . Se separa el medio radioactivo y las células se lavan 3 veces con DMEM (3 x 1 mi) para eliminar los isótopos no incorporados, y se tratan con una solución acuosa de ácido tricloroacético (TCA, por sus siglas en inglés) 15% durante por lo menos 2 h, seguido por la adición de una solución acuosa de 0.25 mi de NaOH 0.2 N, durante 30 min. Las muestras se filtran a través de un filtro de microfibra de vidrio (GF/B. hatmann) bajo vacío. Después de lavar los filtros 3 veces, con 2 mi de solución acuosa de TCA 5%, se realiza una cuenta de la radioactividad incorporada al ADN mediante un contador de centelleo líquido (Packard, TRI-CARB, 2100TR) , y después se calcula el % de incorporación de [3H]-timidina . Los resultados se proporcionan en la tabla 14.
TABLA 14 Efectos de incorporación de [3H]-timidina (%) en ADN Compuestos (%) de incorporación Angiotensina II 100 Ejemplo 7 37.8 Ejemplo 5 53.6 Ejemplo 2 59.0 Ejemplo 14 60.0 Ejemplo 22 64.0 Como se puede ver en tabla 14, los compuestos de los ejemplos 2, 5 y 7 inhiben de manera significativa la síntesis de ADN, lo que representa menos de 60% de incorporación de [3H]-timidina . Especialmente, el compuesto del ejemplo 7 representa 37.8% de incorporación baja %. Con los excelentes efectos inhibidores en la proliferación de células de músculo liso vasculares, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para la prevención y tratamiento de restenosis que se presenta después de intervenciones coronarias percutaneas de oclusión de la arteria coronaria. <EJEMPLO EXPERIMENTAL 16> Prueba de toxicidad oral aguda en ratas La prueba es para confirmar la toxicidad de los compuestos de fórmula 1 , y se lleva a cabo como sigue. En esta prueba se utilizan ratas de 6 semanas de edad SPF SD en donde se asignan a cada grupo dos ratas . Los compuestos de los ejemplos 1, 2, 3, 5, 7, 8, 9, 10, 13, 14, 15, 19, 22, 23, 24, 25, 26, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 44, 46, 47, 48, 49, 51, 52, 57, 58, 60, 62, 64, 67, 68, 69, 71 y 72 se suspenden en metilcelulosa 0.5%, respectivamente, y se administran oralmente a una sola dosis de 1 g/kg utilizando una aguja con la punta esférica. El volumen de dosificación es de 10 ml/kg. Después de la administración, se observa a los animales para determinar signos clínicos de toxicidad o mortalidad, y se miden los cambios en el peso corporal. Todos los sobrevivientes al final del período de observación experimentan laparotomía bajo anestesia con éter y se toman muestras sanguíneas de la aorta abdominal para realizar pruebas hematológicas y análisis bioquímico. Después de sacrificar a los animales se realiza autopsia para realizar observación macroscópica de los órganos y tejidos. Las muestras de tejido de los órganos vitales de la lesión macroscópica se extirpan y fijan en solución de formalina amortiguada neutra 10%, y después se procesan por procedimientos habituales de histopatología y se examinan al microscopio óptico. No hay cambios significativos en los síntomas clínicos, peso corporal y mortandad. Además, en las pruebas hematológicas, los parámetros de la química sérica y la observación macroscópica no se observaron cambios relacionados con el medicamento. Como un resultado, todos los compuestos probados no muestran toxicidad en ratas hasta una dosis de 1 g/kg, y se determinó que la dosis mortal (LD50) para administración oral es superior a 1 g/kg en ratas . La presente invención se ha descrito de una manera ilustrativa, y se debe entender que la terminología - - utilizada se propone para que concuerde con la naturaleza de la descripción en vez de ser una limitante. Son posibles muchas modificaciones y variaciones de la presente invención a la luz de las enseñanzas anteriores. Por lo tanto, debe entenderse que, dentro del alcance de las reivindicaciones anexas, la invención se puede llevar a la práctica de una manera diferente a la descrita específicamente. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por el solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (17)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :
1. Derivados de benzopiranilguanidina, caracterizados porque están representados por la siguiente fórmula 1, sus isómeros estereoquímicos y sus sales farmacéuticamente aceptables;
FÓRMULA I en donde Ri representa H, halógeno, CF3, N02, CN, 0Ra, 0(C=0)Ra, C00Ra, NH2 , NHS (0) mRa, NH(C=0)Ra O S(0)mRa; Ra representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono, o un grupo arilo; y m es un número entero de 0 a 2, R2 representa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada de 1 a 4 átomos de carbono, representa CH20Ra,
Ra se define como en lo anterior; Rb y Rc son independientes entre si y representan un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono, respectivamente; y Z representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 5 átomos de carbono, R4 representa OH, H, halógeno, ON02 o 0(C=0)Ra; y Ra es como se define en lo anterior; R5 y R6 son independientes entre si y cada uno representa H, halógeno, un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono, 0Ra, CX3, N02, C02Ra, -C(=0)Ra o S03Ra es como se define en lo anterior; y X representa halógeno, y n es un número entero de 0 a 2. 2. Los derivados de benzopiranilguanidina, sus isómeros estereoquímicos y sus sales farmacéuticamente aceptables, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizados porque: Ri representa N02, CN, NH2 o S(0)mRa; Ra representa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificado de 1 a 2 átomos de carbono, o un grupo arilo; y m es un número entero de 0-2, R2 representa CH3,
R3 representa 1 ~<
Rb y Rc son independientes entre si y representan un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono, respectivamente, y Z representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 5 átomos de carbono, R4 representa OH, H o 0(C=0)Ra; y Ra representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono; R5 y R6 son independientes entre si y representan H, halógeno, un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono, ' ORa, CX3 o N02 ; Ra representa un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono; y X representa halógeno, y n es un número entero de 0-2. 3. Los derivados de benzopiranilguanidina , sus isómeros estereoquímicos y sus sales farmacéuticamente aceptables, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizados porque el compuesto de fórmula 1 se selecciona del grupo que consiste de: 1) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-'3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 2) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 3) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-clorofenil) guanidina; 4) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-clorofenil) guanidina; 5) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3, 4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-nitrofenil ) guanidin ; 6) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil) guanidina; 7) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil ) guanidina ; 8) (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -M' - (4-metoxifenil) guanidina; 9) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxifenil) guanidina; 10) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 11) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 12) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-clorofenil) guanidina; 13) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- ( 6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-clorofenil ) guanidin ; 14) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- ( 6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil) guanidina; 15) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilfenil) guanidina; 16) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxifenil ) guanidina; 17) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxifenil ) guanidina ; 18) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metilfenil ) guanidina; 19) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metilfenil) guanidina; 20) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; 21) (2R, 3Sr 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; 22) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 23) (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2 -metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) - ' -bencilguanidina; 24) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 25) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina 26) (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (3 , 4-dihidro-3-hidroxi-2 metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 27) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2 metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 28) (2R, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-hidroximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 29) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (G-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-hidroximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' - (4-clorofenil ) guanidina; 30) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-metoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 31) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-metoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil ) guanidina ; 32) (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- ( 6 -nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorofenil ) guanidina ; 33) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) - ' - (2-clorofenil) guanidina; 34) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-trifluorometilfenil) guanidina; 35) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-trifluorometilfenil) guanidina; 36) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-nitro-3, 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorobencil ) guanidina; 37) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3, 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (2-clorobencil) guanidina; 38) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3, 4-dihidro-3 acetoxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 39) (2S) -N"-ciano-N- (6-nitro-2 -metil -2 -dimetoximetil - 2H-benzopiran-4 -il) -N' -bencilguanidina; 40) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 41) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-acetoxiamino-3 , 4 dihidro-3 -hidroxi-2 -metil-2 -dimetoxime il -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 42) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- ( 6-metansulfonilamino-3 , 4 dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 43) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-ciano-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 44) (2S, 3R, 4S) -N" -ciano-N- (6-ciano-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-clorofenil) guanidina; 45) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-ciano-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 46) (2S, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-ciano-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 47) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-bromo-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 48) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3,4-dimetoxibencil) guanidina; 49) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3,4-dimetoxibencil ) guanidina; 50) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- ( 6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-diraetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; 51) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (4-metoxibencil) guanidina; 52) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-nitrobencil) guanidina; 53) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilbencil) guanidina; 54) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' - (3-trifluorometilbencil) guanidina; 55) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-metansulfoniloxi -3 , 4 dihidro-3 -hidroxi-2-metil -2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4 -il) -N' -bencilguanidina; 56) (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-metansulfoniloxi-3 , 4 dihidro-3 -hidroxi-2 -metil -2 -dimetoximetil -2H-benzopiran-4 -il) -N' -bencilguanidina,- 57) (2S, 3R, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 58) (2R, 3R, 4S) -N"-ciano-N- (6-amino-3, 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 59) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- ( 6-amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 60) (2S, 3S; 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ( [1, 3] dioxolan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 61) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2 -metil -2 - ( [1,3] dioxolan-2-il) -2H-benzopiran-4 -il ) -N' -bencilguanidina; 62) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-nitro-3 , 4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ( [1 , 3] dioxa-2 -il) -2H-benzopiran-4 -il) - ' -bencilguanidina; 63) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- ( 6 -amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ( [1 , 3] dioxan-2 -il) -2H-benzopiran-4 -il) -N' -bencilguanidina; 64) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ([1,3] -5 , 5-dimetildioxan-2 -il ) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 65) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 hidroxi-2-metil-2- ( [1,3] -5, 5-dimetildioxan-2-il) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 66) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-nitro-3,4-dihidro-3 hidroxi-2-metil-2-dietoximetil) -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 67) (2S, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-amino-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dietoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina ; 68) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (6-metoxicarbonil-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil -2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 69) (2R, 3S, 4R) -N"-ciano-N- (6-metoxicarbonil-3 , 4-dihidro-3 -hidroxi-2-metil -2-dimetoximetil -2H-benzopiran-4 -il) -N' -bencilguanidina; 70) (3S, 4R) -N" -ciano-N- ( 8-nitro-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; 71) (2S, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (8 -amino-3 , 4 -dihidro-3 -hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina; y 72) (2R, 3S, 4R) -N" -ciano-N- (8-amino-3,4-dihidro-3-hidroxi-2-metil-2-dimetoximetil-2H-benzopiran-4-il) -N' -bencilguanidina . 4. Un procedimiento para preparar los derivados de benzopiranilguanidina, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto (III) de aminoalcohol y un compuesto (IV) de tiourea en presencia de un agente de condensación, para obtener un compuesto (?') .
ESQUEMA DE REACCIÓN 1 en donde R1# R2/ R3/ R4, Rs, Rs y n son cada uno como se definen en lo anterior. 5. El procedimiento, de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el agente de condensación se selecciona del grupo que consiste de agentes de condensación de tipo carbodiimida hidrosolubles que comprenden clorhidrato de 1- [3 - (dimetilamino) propil] -3 - etilcarbodiimida y N, N ' -diciclohexilcarbodiimida . 6. El procedimiento, de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el solvente de reacción se selecciona del grupo que consiste de cloruro de metileno, cloroformo, dimetilformamida y sulfóxido de dimetilo . 7. Un procedimiento, para la preparación de derivados de benzopiranilguanidina, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende las etapas de: i) hacer reaccioanr un compuesto (III) de aminoalcohol y difenilcianocarbonimidato (X) en presencia de una base para preparar un compuesto (V) (etapa 1) ; y ii) hacer reaccionar el compuesto (V) y un compuesto (VI) de amina, para preparar el compuesto (I1) (etapa 2)
ESQUEMA DE REACCIÓN 2 en donde cada Ri; R2, R3, R4 , R5, R6 y n son cada uno como se definen en lo anterior.
8. El procedimiento, de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la base de la etapa 1 se selecciona de aminas terciarias, que comprenden trietilamina, N, -diisopropiletilamina, piridina, 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno y 4- (dimetilamino) piridina .
9. El procedimiento, de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el solvente de reacción de la etapa 1 o la etapa 2 se selecciona del grupo que consiste de alcoholes que comprenden etanol e isopropanol; dimetilformamida; sulfóxido de dimetilo y cloroformo.
10. Las composiciones farmacéuticas para proteger al corazón, las cuales son farmacológicamente útiles para prevención y tratamiento de infarto al miocardio y fallo cardíaco congestivo y angina de pecho, caracterizadas porque contienen derivados de benzopiranilguanidina de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables, como un ingrediente activo.
11. Composiciones f rmacéuticas para suprimir la peroxidación de lípidos, caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina, de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables, como un ingrediente activo.
12. Composiciones farmacéuticas, farmacológicamente útiles para inhibir la producción de NO, caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables, como un ingrediente activo.
13. Composiciones farmacéuticas para proteger de daño cerebral debido a isquemia-reperfusión cerebral, caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina, de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables, como un ingrediente activo.
14. Composiciones farmacéuticas, farmacológicamente útiles para el tratamiento de cáncer y retinopatía diabética al suprimir angiogénesis , caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables, como un ingrediente activo.
15. Composiciones farmacéuticas, f rmacológica-mente útiles para prevención y tratamiento de enfermedades neurodegenerativas que incluyen enfermedad de Alzheimer y demencia senil y aterosclerosis al suprimir la peroxidación de lípidos y las especies de oxígeno reactivas, caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables , como un ingrediente activo.
16. Composiciones farmacéuticas, farmacológicamente útiles para la prevención y tratamiento de asfixia en lactantes, glaucoma, neuropatía diabética y trauma cerebral, al proteger a las células neuronales, caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables, como un ingrediente activo.
17. Composiciones farmacéuticas, farmacológicamente útiles para la prevención o tratamiento de restenosis al suprimir la proliferación celular, caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables, como un ingrediente activo. Composiciones farmacéut para proteger órganos preservados que incluyen corazón, riñon, hígado y tejidos y para proteger órganos en cirugía cardiovascular mayor, caracterizadas porque contienen los derivados de benzopiranilguanidina, de conformidad con la reivindicación 1 o sus sales farmacéuticamente aceptables como un ingrediente activo.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100492252B1 (ko) * 2002-08-09 2005-05-30 한국화학연구원 이미다졸을 포함하는 이차아민으로 치환된 벤조피란유도체 및 그의 제조방법
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EP2487171A1 (en) * 2011-02-08 2012-08-15 Université de Liège Dihydrobenzopyran, thiochroman, tetrahydroquinoleine and tetrahydronaphthalene derivatives and their use in anti-cancer therapy
CN104540814A (zh) * 2012-06-28 2015-04-22 艾伯维公司 氰基胍及其作为抗病毒剂的用途

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02172984A (ja) * 1988-12-23 1990-07-04 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd クロマン誘導体
CA2015296C (en) * 1989-05-31 2001-08-07 Karnail Atwal Pyranyl cyanoguanidine derivatives
US5140031A (en) * 1989-05-31 1992-08-18 E. R. Squibb & Sons, Inc. Pyranyl cyanoguanidine derivatives
JPH05186458A (ja) * 1991-04-26 1993-07-27 Japan Tobacco Inc 新規なベンゾピラン誘導体

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