MXPA02001215A

MXPA02001215A - Derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima utiles como antagonistas del receptor nmda.

Info

Publication number: MXPA02001215A
Application number: MXPA02001215A
Authority: MX
Inventors: Michael Przewosny
Original assignee: Gruenenthal Chemie
Priority date: 1999-08-06
Filing date: 2000-07-25
Publication date: 2002-07-02
Also published as: BR0013313A; US20030027852A1; NO20020578D0; PT1200400E; WO2001010831A1; ZA200201789B; JP2003506436A; ATE277901T1; DE50008020D1; EP1200400A1; US6716872B2; PL353875A1; CN1378531A; DE19936521A1; IL147978A0; HK1046404A1; AU779187B2; HUP0202433A3; NO20020578L; CA2380973A1

Abstract

La invencion se refiere a derivados sustituidos de pirrolidin-2,3,4-trion-3-oxima de formula general (I), a metodos para su produccion asi como a el uso de estos compuestos para la preparacion de medicamentos para el tratamiento de dolores.

Description

DERIVADOS SUSTITUIDOS DE PIRROLIDIN-2 , 3 , 4-TRION-3-OXIMA ÚTILES COMO ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR NMDA DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima, a métodos para producirlos, a medicamentos que contienen estos compuestos y al uso de estas sustancias para producir medicamentos. El tratamiento de estados de dolor crónicos y no crónicos tiene una gran importancia en la medicina. Existe una necesidad a nivel mundial de terapias analgésicas efectivas. La urgente demanda de acción orientada a tratamientos de estados de dolor crónicos y no crónicos satisfactorios para el paciente y orientados a resultados, siendo que por esto se debe entender el tratamiento del dolor exitoso y satisfactorio para el paciente esta documentada por la gran cantidad de trabajos científicos que han aparecido a últimas fechas en el campo de la analgesia aplicada y respectivamente el estudio de los fundamentos de la nocicepción. Los opioides clásicos como, por ejemplo, la morfina, son efectivos en la terapia de dolores fuertes a intensos. Sin embargo, su aplicación se ve limitada debido a los conocidos efectos secundarios, por ejemplo sofocación, vómito, sedación, estreñimiento, adicción, dependencia y desarrollo de tolerancia. Por lo mismo solo se pueden administrar por periodos de tiempo más prolongados o en dosificaciones mas altas con medidas especiales de cuidado como, por ejemplo, recetas de prescripción especial (Goodman, Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, Pergamon Press, New York, 1990) . Además, son menos efectivos en el caso de ciertos estados de algesia, en particular en el caso de dolores neuropáticos o fortuitos. Los opioides desarrollan su actividad analgésica mediante unión a receptores localizados en las membranas que pertenecen a la familia de los asi denominados receptores acoplados a la proteína G. Además existen otros receptores y canales de iones que participan de manera esencial en el s_ tema del origen del dolor y la transmisión del dolor como, por ejemplo, el canal de iones N-metil-D-aspartato (NMDA) , a través del cual se desarrolla una parte esencial de la comunicación de sinapsis y mediante el cual se controla el intercambio de iones de calcio entre la célula neuronal y su entorno. Los conocimientos sobre el significado fisiológico de las sustancias selectivas del canal de iones se obtuvieron mediante el desarrollo de la técnica patch- clamp, con la cual se puede comprobar el efecto de los antagonista de NMDA sobre el metabolismo del calcio en el interior de la célula. j-fa Jl Uno de los objetos en que se funda la invención consistió en proporcionar nuevos compuestos adecuados para la terapia del dolor o la ansiedad. Además, estos compuestos debían exhibir el mínimo posible de los efectos secundarios de los analgésicos opioides como, por ejemplo, náusea, vómito, dependencia, sofocación o estreñimiento. Otros objetos consistían en proporcionar nuevos principios activos para el tratamiento de reacciones inflamatorias y/o alérgicas, depresiones, adicción a las drogas y/o el alcohol, gastritis, diarrea, incontinencia urinaria, enfermedades cardiovasculares, enfermedades de las vias respiratorias, tos, enfermedades anímicas, epilepsia, esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, isquemias cerebrales, infartos cerebrales, sicosis condicionadas por nivel incrementado de aminoácido, apoplejías, edemas cerebrales, hipoxia, anoxia, demencia por SIDA, encefalomielitis , síndrome de Tourette o asfixia perinatal. Se descubrió ahora que los derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3-oxima de la siguiente fórmula general I, como antagonistas de NMDA, atacan selectivamente el sitio de unión de la glicina y son adecuados para el tratamiento de reacciones inflamatorias y/o alérgicas, depresiones, adicción a las drogas y/o el alcohol, gastritis, diarrea, incontinencia urinaria, enfermedades '- ÉÜt jriii Br— ir ir • . ... . «- „_. ^^t^Áiv??i* .*»^*^*^^ cardiovasculares, enfermedades de las vías respiratorias, tos, enfermedades anímicas, epilepsia, esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, isquemias cerebrales, infartos cerebrales, sicosis condicionadas por nivel incrementado de aminoácido, apoplejías, edemas cerebrales, hipoxia, anoxia, demencia por SIDA, encefalomielitis, síndrome de Tourette ó asfixia perinatal, y que además exhiben una marcada activiad analgésica y anxiolítica. Por consiguiente son objeto de la invención los compuestos de fórmula general I en la que representan el radical R1 H, OR8, COR5, CSR5, NR6R7, COOR5, CONR6R7, CSNR6R7, un radical alquilo-Ci-io, preferiblemente un radical alqu?lo-C?-6, un radical arilo, un radical leteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-Sf preferiblemente a través de un grupo alquileno-Ci-3, los radicales R2, R3, iguales o diferentes H, F, Cl, Br, CF3, OR8, SR8, un radical alquilo-C?-?0, preferibl" ente un radical alquilo-C?-6, un radical arilo, un radical heteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-6/ preferiblemente a través de un grupo alquileno-C1-3, el radical R4 H, OH, OR8, SR8, COR5, COOR5, COCOR5, CONR6R7, CSNR6R7, preferiblemente OH u OR8, un radical alquilo-C?-10, preferiblemente un radical alquilo-C?-6, un radical arilo, un radical heteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-6, preferiblemente a través de un grupo alquileno-C?-3, el radical R5 H, un radical alquilo-C?-?0, preferiblemente un radical alquilo-C?-6, un radical arilo, un radical heteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-6, preferiblemente a través de un grupo alquileno-C?-3, los radicales R6, R7, iguales o diferentes H, OR8, COR5, COOR5, un radical alquilo-C?-?o, preferiblemente un radical alquilo-C?-6, un radical arilo, un radical heteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C!-6, preferiblemente a través de un grupo alquileno-C?-3, el radical R8 un radical alquilo-C?-?o, preferiblemente un radical alquilo-C?-6, un radical arilo, un radical __á___l. heteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-6r preferiblemente a través de un grupo alquileno-C1-3, en forma de sus racematos, enantiómeros, diaestereómeros o una base respectiva o una respectiva sal fisioloógicamente tolerable . Por radicales alquilo se entienden también hidrocarburos ramificados, no ramificados o cíclicos, insubstituidos o al menos monosustituidos, preferiblemente con F, Cl, Br, CN, N02, CHO, S02-alquilo-C?-6, S02CF3, OR5, NR6R7, COR5, COOR5, COCOR5, C0NRßR7, CSNR6R7, siendo que los radicales R5 a R7 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I. Si estos radicales alquilo contienen más de un sustituto, entonces estos pueden ser iguales o diferentes. Los radicales alquilo son de preferencia metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, ter-butilo, neopentilo, n-hexilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciciohexilo. Por un radical arilo también se entienden radicales fenilo insustituidos o al menos monosustituidos con OH, F, Cl, Br, CF3, CN, N02, CHO, S02-alquilo-C?-6, S02CF3, OR5, NR6R7, COR5, COOR5, COCOR5, C0NRdR7, CSNR6R7, un radical alquilo-C?-6, un radical alcoxi-C?-6, un radical alquileno-C2-6, un radical heterociclilo y/o un radical fenilo, siendo que los radicales R5 R' tienen el ^-foI-i - i..^.^^^- ^,.,..„ .-^..^.^ significado de acuerdo a la fórmula general I. La expresión también puede significar un radical naftilo opcionalmente sustituido. Los radicales fenilo también pueden estar condensados con otros anillos. Por un radical heteroarilo también se entienden los compuestos heterocíclicos insaturados de 5 o 6 miembros, opcionalmente provistos con un radical arilo condensado, los cuales contienen a lo menos un heteroátomo, preferiblemente nitrógeno y/u oxígeno y/o azufre. El radical heteroarilo es de preferencia furano, tiofeno, pirrol, piridina, pirimidina, quinolma, isoquinolina, ftalazina o quinazolina. Se prefieren particularmente los derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima siguientes: 5- (metoxifenilmetilen) -pirrolidin-2 , 3, 4-tr?on-3- oxima, 5- (bromofenilmetilen) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3- oxima, 5-benciliden-pirrolidin-2, 3, 4-tpon-3-oxima, 5- (2-clorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3- oxima, 5- ( 4-clorobenciliden) -pirrol?din-2 , 3, 4-trion-3- oxima, 5- (2, 3-diclorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-tr?on- 3-oxima, 5- (2, 4-diclorobenciliden) -pirrolidin-2 , 3, 4-tr?on- 3-oxima, 5- (2, b-diclorobenciliden) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion- 3-oxima, y 5- (3-clorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3- oxima . • Otro objeto de la presente invención son los métodos para la producción de los derivados sustituidos de 10 pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3-oxima de fórmula general I, en los que los ácidos tetrámicos de fórmula general II 11 20 • en la cual los radicales R1 a R3 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I se hacen reaccionar en solución enfriada por hielo, de preferencia en solución de ácido acético glacial enfriada por hielo, con una solución 25 acuosa de nitrito de sodio para obtener compuestos de .,kA?.? - üiiin fl mM^-*^******* ^*'1*'***'**'-'-- — *•*- "-lAm- fórmula general I en la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I, y estos preferiblemente se purifican y aislan mediante recristalización, preferiblemente con 5 etanol. La síntesis de los compuestos de partida, los ácidos tetrámicos de fórmula general II se puede llevar a • cabo según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 1998, Vol. 331, páginas 389-394) y Stachel et 10 al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195-1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692-1696) y los pasajes de literatura citados en ellos. Diciendo esto se introducen como referencia y por consiguiente se consideran como parte • de la revelación. 15 Los compuestos de fórmula general I en los que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I se hacen reaccionar preferiblemente en disolventes absolutos, de preferencia en éteres de cadena abierta y/o cíclicos, a 20 bajas temperaturas, en presencia de bases fuertes, preferiblemente hidróxidos alcalinos y/o hidróxidos alcalinotérreos y/o bases metalorgánicas, con haluros de alquilo-C?-?o, de preferencia haluros de alquilo-C?_6, con haluros de arilo, hal ros de heteroarilo o con haluros de 25 arilalquilo-C?-6, de preferencia haluros de arilalquilo-C?_3, para obtener compuestos de fórmula general I en los que el radical R4 representa OR8 y los radicales R1 a R3 y R8 tienen el significado conforme a la fórmula general I. Los compuestos de fórmula general I en los que el radical R4 representa OR8 y los radicales R1 a R3 y R8 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I se pueden seguir derivando haciéndolos reaccionar, preferiblemente bajo atmósfera de gas protector en un disolvente absoluto, preferiblemente en éteres de cadena abierta y/o cíclicos, con cloruros de ácidos de fórmula general R5- (C=0) -Cl y/o bromuros de ácidos de fórmula general R5-(C=0)-Br o esteres del ácido clorofórmico de fórmula general Cl- (C=0) -0-R5 o respectivamente esteres del ácido fluorofórmico de fórmula general F-(C=0)-0-R5 o con carbonatos de cadena abierta de fórmula general R5-0- (C=0) -0-R5 o con carbonatos cíclicos correspondientemente sustituidos, preferiblemente con carbonatos cíclicos correspondientemente sustituidos que tienen 5 ó 6 átomos en el anillo, en los que R5 en cada caso tiene el significado de acuerdo a la fórmula general I, para obtener compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa COR5 y COOR5, y los radicales R1 a R3 y el radical R5 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I, que se purifican y aislan según métodos convencionales . Los compuestos de fórmula general I en los que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I también se pueden hacer reaccionar con isocianatos o isotiocianatos alifáticos, aromáticos o respectivamente heteroaromáticos, a bajas temperaturas en disolventes polares apróticos, para obtener compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa CONR6R7 ó CSNR6R7, el radical R6 ó R7 significa H, y los radicales R1 a R3 así como R6 ó R7 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I, que se purifican y aislan según métodos convencionales. La producción de los compuestos de fórmula general I en los que R4 representa un radical alquilo-C?-?o, un radical arilo, un radical heteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-6 se puede llevar a cabo de acuerdo al método indicado en Maruoka y Yamamoto, Angew. Chem., Vol. 97, páginas 670-683, 1985, Maruoka et al. J. Am. Chem. Soc., Vol. 105, página 2831, 1985 o respectivamente Maruoka et al. Org. Synth., Vol. 66, pági .a 185. Diciendo esto se introducen como referencia las revelaciones respectivas. La producción de los compuestos de fórmula general I en los que el radical R4 representa H, SR8 ó COCOR5 y los radicales R5 y R8 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I se puede llevar a cabo de acuerdo a diversos métodos conocidos por el experto. La producción de los compuestos de fórmula general I en los que el radical R4 representa CONR6R7 ó CSNR6R7, y los radicales R6 y R7 o bien significan respectivamente H o respectivamente tienen el significado de la fórmula general 5 I pero sin ser iguales a H también se puede efectuar según diversos métodos conocidos por el experto. Los análisis mediante espectroscopia de RMN XH demuestran que los derivados de pirrolidin-2 , 3 , 4-trion-3- oxima de fórmula general I obtenidos mediante los métodos 10 previamente mencionados pueden existir como mezcla de isómeros sin y anti, los cuales ya no se pudieron separar más . • Los compuestos de conformidad con la invención se pueden convertir de manera en sí conocida a las 15 correspondientes sales fisiológicamente tolerables con ácidos como, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido metanosulfónico, ácido fórmico, ácido acético, ácido oxálico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido 20 láctico, ácido cítrico, ácido glutámico, ácido aspártico o • una mezcla de a lo menos dos de estos ácidos. La formación de la sal se lleva a cabo de preferencia en un solvente como, por ejemplo, éter dietílico, éter diisopropílico, éster alquilacético, acetona, 2-butanona o una mezcla de a 25 lo menos dos de estos solventes. Para la producción de los clorhidratos correspondientes resulta adecuado, además, el trimetilclorosilano en solución acuosa. Los derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- trion-3-oxima de fórmula general I de conformidad con la 5 invención son toxicológicamente inocuos, y por consiguiente constituyen principios activos farmacéuticos adecuados. Otro objeto de la invención son por consiguiente los medicamentos que contienen como sustancia activa a lo menos un derivado sustituido de pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3- 10 oxima de fórmula general I y/o una base correspondiente y/o una respectiva sal fisiológicamente tolerable, así como opcionalmente otras sustancias activas y/o auxiliares. El flB medicamento también puede contener una mezcla de a lo menos dos enantiómeros y/o las bases correspondientes y/o las 15 respectivas sales fisiológicamente tolerables de un compuesto de fórmula general I de conformidad con la invención, siendo que los enantiómeros no existen en cantidades equimolares. Los medicamentos de preferencia se usan para 20 tratar/combatir dolores, reacciones inflamatorias y/o alérgicas, depresiones, adicción a las drogas y/o el alcohol, gastritis, diarrea, incontinencia urinaria, enfermedades cardiovasculares, enfermedades de las vías respiratorias, tos, enfermedades anímicas, enfermedades 25 neurodegenerativas, epilepsia, esquizofrenia, enfermedad de l??*A±á áu.i **~ jg^Ü^ ..«-i. »MJ-«..«. . ^-~ k**á ^..*^*A* .??.k ?J Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, isquemias cerebrales, infartos cerebrales, sicosis condicionadas por nivel incrementado de aminoácido, apoplejías, edemas cerebrales, estados de subabastecimiento 5 del sistema nervioso central, hipoxia, anoxia, demencia por SIDA, encefalomielitis, síndrome de Tourette, asfixia perinatal o para anxiolísis. Otro objeto de la invención es también el uso de a lo menos un derivado sustituido de pirrolidin-2 , 3 , 4- 10 trion-3-oxima de fórmula general I y/o de una base correspondiente y/o una respectiva sal fisiológicamente tolerable para la preparación de un medicamento para • tratar/combatir dolores, reacciones inflamatorias y/o alérgicas, depresiones, adicción a las drogas y/o el 15 alcohol, gastritis, diarrea, incontinencia urinaria, enfermedades cardiovasculares, enfermedades de las vías respiratorias, tos, enfermedades anímicas, enfermedades neurodegenerativas, epilepsia, esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de 20 Parkinson, isquemias cerebrales, infartos cerebrales, • sicosis condicionadas por nivel incrementado de aminoácido, apoplejías, edemas cerebrales, estados de subabastecimiento del sistema nervioso central, hipoxia, anoxia, demencia por SIDA, encefalomielitis, síndrome de Tourette, asfixia 25 perinatal o para la anxiolísis.

Para la preparación de las formulaciones farmacéuticas correspondientes, además del a lo menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3 , 4-trion-3-oxima de fórmula general I se usan por lo general adicionalmente 5 coadyuvantes como, por ejemplo, vehículos, sustancias de relleno, solventes, diluyentes, colorantes o aglutinantes. La elección de los coadyuvantes así como las cantidades de • estos a ser usadas depende del tipo de aplicación como, por ejemplo, oral, intravenosa, ( / . Uintraperitoneal, intradérmica, 10 intramuscular, intranasal, bucal o local, por ejemplo sobre infecciones de la piel, de las mucosas y en los ojos, y es conocida por el experto. Para la aplicación oral son • adecuadas, por ejemplo, las preparaciones en forma de tabletas, grageas, cápsulas, granulados, gotas, jugos y 15 jarabes así como las preparaciones multiparticulares, por ejemplo aglomerados o granulados que opcionalmente también pueden estar llenados en cápsulas o comprimidos a tabletas, para la aplicación parenteral, tópica y de inhalación son adecuadas, por ejemplo, las soluciones, suspensiones, 20 preparaciones anhidras de fácil reconstitución así como los • aerosoles. Los compuestos de fórmula I de conformidad con la invención en un depósito, en forma disuelta o en ^ i parche, opcionalmente con la adición de agentes que promueven la penetración de la piel son adecuadas 25 preparaciones de aplicación percutánea. Las formas de preparación de uso oral o percutáneo también pueden liberar en forma retardada los compuestos de fórmula general I de conformidad con la invención. La cantidad de principio activo a ser administrada al paciente varía en función del peso del paciente, de la forma de aplicación, de la indicación y de la gravedad de la enfermedad. Usualmente se aplican de 2 a 500 mg/kg de peso corporal del paciente de al menos un derivado de pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima de fórmula general I. Estudios farmacológicos a) Análisis sobre la afinidad al receptor: Los análisis para determinar la afinidad de los derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima de fórmula general I de conformidad con la invención al sitio de unión de la glicina del canal receptor de NMDA se llevaron a cabo en homogeneizados de membranas cerebrales (homogeneizado del área de la corteza y el hipocampo del cerebro de ratas macho, especie Wistar, Charles River, WIGA GmbH, Sulzbach, Alemania) según Barón B.M. et al. J. Pharmacol. Exp. Ther., Vol. 279, páginas 62-68 (1996). Para este propósito se aislaron la corteza y el hipocampo de cerebros de rata recién extraídos y se homogenizaron enfriados por hielo en 5 mmol/l de regulador de acetato TRIS, 0.32 mol/1 de sacarosa pH 7.4 (10 ml/g de n tt ni nti tom ?tí m ém ? ^ peso fresco) con un homogenizador Potter (de la compañía Braun, Melsungen, Alemania, 10 carreras de émbolo a 500 revoluciones por minuto (rpm)), y a continuación se centrifugaron durante 10 minutos a 1,000 g y 4°C. Se recolectó el primer sobrenadante, y el sedimento nuevamente se homogenizó enfriado por hielo con 5 mmol/l de regulador de acetato TRIS, 0.32 mol/1 de sacarosa pH 7.4 (5 ml/g del peso neto fresco original de corteza e hipocampo de cerebro de rata) con el homogenizador Potter (10 carreras de émbolo a 500 rpm), y se centrifugaron durante 10 minutos a 1,000 g y 4°C. El sobrenadante resultante se reunió con el sobrenadante de la primera centrifugación y se centrifugó a 17,000 g durante 20 minutos a 4°C. El sobrenadante resultante después de esta centrifugación se desechó y el sedimento de membrana se asimiló con 5 mmol/l de regulador de acetato de TRIS pH 8.0 (20 ml/g de peso fresco original) y se homogenizó con 10 carreras de émbolo a 500 rpm. A continuación el homogeneizado de membrana se incubó durante 1 hora a 4°C y se centrifugó durante 30 minutos a 50,000 g y 4°C. El sobrenadante se desechó y el tubito del centrifugado con =? sedimento de membrana se cerró con parafina y se congeló durante 24 horas a -20°C. A continuación se descongeló el sedimento de membrana y se asimiló con 5 mmol/l de regulador de acetato de TRIS glacial, 0.1 % de saponina (peso/volumen) pH 7.0 (10 ml/g ^fc^M del peso neto fresco original) y se homogenizó con 10 carreras de émbolo a 500 rpm y a continuación se centrifugó durante 20 minutos a 50,000 g y 4°C. El sobrenadante resultante se desechó y el sedimento se asmimiló en un 5 volumen pequeño con 5 mmol/l de regulador de acetato de TRIS pH 7.0 (aproximadamente 2 ml/g del peso original fresco) , y nuevamente se homogenizó con 10 carreras de • émbolo a 500 rpm. Después de determinar el contenido de proteína el homoge-.eizado de membrana se ajusto con 5 10 mmol/l de regulador de acetato de TRIS pH 7.0 a una concentración de proteína de 10 mg de proetína/ml y se congeló en alícuotas hasta la ejecución del examen.

• Para el ensayo de la unión al receptor se descongelaron las alícuotas, se diluyeron :10 con 5 mmol/l 15 de regulador de acetato de TRIS pH 7.0, se homogenizaron enfriadas por hielo con 10 carreras de émbolo a 500 rpm con el homogenizador Potter, y se centrifugaron durante 60 minutos a 55,000 g a 4°C. El sobrenadante se decantó y el homogeneizado de membrana se ajusto con 50 mmol/l de 20 regulador de acetato de TRIS pH 7.0 glacial a una concentración de proteína de 1 mg/ml y se volvió a homogenizar con 10 carreras de émbolo a 500 rpm y se mantuvo en suspensión en baño de hielo mediante agitación sobre un agitador magnético. De este homogeneizado de 25 membrana se usaron respectivamente 10 µl por 1 ml de J^¡¡¿^j i u^ ^^| rta^giÜJÜMlMKHjM preparación en el ensayo de la unión al receptor (0.1 mg de proteína/ml en la preparación final). En el ensayo de afinidad se usaron como regulador 50 mmol/l de regulador de acetato de TRIS pH 7.0 y como ligando radioactivo 1 nmol/1 de (3H)-MDL 105.519 (Barón B.M. et al. Pharmacol. Exp. Ther., Vol. 279, páginas 62-68 (1996)). La proporción de unión no específica se determinó en presencia de 1 mmol/l de glicina. En otras preparaciones se adicionaron los compuestos de conformidad con la invención en series de concentración y se determinó la expulsión del ligando radioactivo de su liga específica al sitio de unión de la glicina del canal receptor de NMDA. Las respectivas preparaciones por triplicado se incubaron durante 120 minutos a 4°C y a continuación, para determinar el ligando radioactivo ligado al homogeneizado de membrana se recolectaron mediante filtración a través de esteras filtrantes de fibra de vidrio (tipo Whatman GF/B, compañía Adi Hassel, Munich, Alemania) . La radioactividad retenida sobre los filtros de fibra de vidrio se midió en el contador ß (Packard TRI-CARB Liquid Szintillation Analyzer 2000CA, compañía Packard Instrument, Meriden, CT 06450, E.U.A.) después de la adición de escintilador (Ready Protein, compañía Beckmann Coulter GmbH, Krefeld, Alemania ) . t á isA La afinidad de los compuestos de conformidad con la invención al sitio de unión de la glicina del canal receptor de NMDA se calculó como CI50 (concentración con 50% de expulsión del ligando radioactivo de su unión 5 específica) según la ley de acción de las masas mediante regresión no lineal, y después de la conversión (según la ecuación de Cheng-Prussoff (Y. Cheng, W.H. Prissoff, 1973, Biochem. Pharmacol. Vol. 22, páginas 3099-3108)) se especificó como valor Ki (constante de inhibición) . 10 b) Flujos de iones inducidos por NMDA/glicina en oocitos Xenopus inyectados con RNA El examen para determinar cambios de función del fl canal receptor de NMDA mediante los compuestos de fórmula general I de conformidad con la invención se llevó a cabo 15 con oocitos del sapo con garras africano, Xenopus laevis. Para este propósito se formaron canales receptores de NMDA neuronales en oocitos después de inyectar RNA de cerebros de ratón, y se midieron los flujos de iones desencadenados mediante la aplicación conjunta de NMDA y glicina. 20 Los oocitos Xenopus de las fases V y VI (Dumont, J.N., J. Morphol., Vol. 136, páginas 153-180 (1972)) se microinyectaron (100-130 ng/célula) con RNA completo de tejido cerebral de ratones adultos, y se conservaron hasta 10 días en medio de cultivo (composición: 88.0 mmol/l de 25 NaCl, 1.0 mmol/l de KCl, 1.5 mmol/l de CaCl2, 0.8 mmol/l de MgS04, 2.4 mmol/l de NaHC03, 5 mmol/l de HEPES, 100 IU/ml de penicilina, 100 µg/ml de estreptomicina, pH 7.4) a 20°C. Los flujos de iones transmembranosos se registraron con el auxilio de la técnica convencional de bornes de potencial de dos electrodos con un potencial tenedor de -70 mV (Bloms-Funke P. et al., (1996) Neurosci. Lett. 205, páginas 115-118 (1996)). Para el registro de los datos y el control del aparato de ensayo se usaron la interfaz OTC y el soporte lógico Cellworks (compañía npi, República Federal de Alemania) . Los compuestos de conformidad con la invención se adicionaron a un medio nominalmente exento de Mg2+ (composición: 89.0 mmol/l de NaCl, 1.0 mmol/l de KCl, 1.8 mmol/l de CaCl2, 2.4 mmol/l de NaHC03, 5 mmol/l de HEPES, pH 7.4) y se aplicaron en forma sistémica con el auxilio de clamps de concentración (compañía npi, República Federal de Alemania) . Para probar los efectos de la sustancia que son mediados a través del sitio de unión de glicina B del canal receptor de NMDA se registró la curva de actividad de dosis de glicina con y sin el respectivo compuesto de conformidad con la invención. Para este propósito se aplicaron conjuntamente NMDA en una concentración fija de 100 µmol/1 con glicina en concentraciones cumulativas (0-100 µmol/1) . A continuación se llevó a cabo el experimento de la misma manera con una concentración fija del compuesto de conformidad con la invención. Las amplitudes de corriente se normalizaron a las de la respuesta de control a la aplicación conjunta de NMDA (100 µmol/l) con glicina (µmol/1). El análisis de los datos se llevó a cabo con el soporte lógico Igor-Pro 5 (versión 3.1, WaveMetrics, E.U.A.). Todos los resultados se especificaron como valor medio de a lo menos 3 experimentos con diversos oocitos de al menos dos sapos. La importancia • de las magnitudes de medición no apareadas se determina con el auxilio de la prueba U de Mann-Whitney y para las 10 magnitudes de medición apareadas mediante la Prueba de Wilcox (Sysstat, SPSS Inc., E.U.A.). Los valores CE50 se calcularon de acuerdo a la fórmula siguiente: Y = Y + (Ymax Ymxn) / (1 + (X/CE50) -p> 15 (Ymm = valor de prueba mínimo, Ymax = valor de prueba máximo, Y - amplitud relativa de corriente, X = concentración de las sustancia de prueba, p = factor de inclinación) . En el caso del desplazamiento hacía la 20 derecha de la curva de actividad de dosis de glicina se • determinó gráficamente mediante una regresión Schild el valor pA2 del compuesto de conformidad con la invención. Las relaciones de concentración se calcularon en base a los valores CE50 que se calcularon independientemente para cada 25 curva de actividad de dosis.

M ? i it ? Um • - --*-- • |1,fl, ^-a--a---A---. c) Prueba de formalina en el ratón Los análisis para determinar la actividad antinociceptiva de los compuestos de conformidad con la invención se llevaron a cabo con la prueba de la formalma 5 en ratones Albino macho (NMRI, 25 - 35 g, Iffa Credo, Bélgica) . En la prueba de la formalina se diferencian la • fase primera (temprana) (0 - 15 minutos después de la inyección de formalina) y la fase segunda (tardía) (15 - 60 10 minutos después de la inyección de formalina) (D. Dubuisson et al., Pain, Vol. 4, páginas 161 - 174 (1977)). La fase temprana constituye un patrón de dolor agudo como reacción ^P directa a la inyección de formalina, en tanto que la fase tardía se considera como patrón de dolor persistente 15 (crónico) (T. J. Coderre et al., Pain, Vol. 52, páginas 259-285 (1993) ) . Los compuestos de conformidad con la invención se analizaron en la segunda fase de la prueba de formalina, con el fin de obtener datos sobre las actividades de los 20 compuestos de conformidad con la invención en el caso del • dolor crónico/inflamatorio. Mediante una única inyección subcutánea de formalina (20 µl, solución acuosa al 1%) en la parte dorsal de la pata trasera derecha se indujo una reacción 25 nociceptiva en animales de ensayo con libertad de -i-i-i-A?-tftt-M-i É? --L.J-A-i» movimiento, la cual se exterioriza notablemente con lamidos y mordidas de la pata afectada. Durante el intervalo de tiempo del análisis en la segunda fase (tardía) de la prueba de formalma se captó 5 continuamente el comportamiento nociceptivo de los animales mediante observación. La cuantificación del comportamiento al dolor se efectuó mediante la suma de los segundos • durante los cuales los animales mostraron lamer y morder la pata afectada dentro del intervalo del examen. Después de 10 la inyección de compuestos que son antinociceptivamente activos en la prueba de la formalina se reducen e incluso eventualmente suprimen las reacciones de comportamiento de los animales que se describieron. Proporcionalmente a los experimentos en los que a los animales se les inyectaron 15 los compuestos de conformidad con la invención previamente a la aplicación de la formalina, a los animales del control se les inyecto vehículo, es decir, disolvente (por ejemplo, solución de NaCl al 0.9%) antes de la aplicación de la formalina. El comportamiento de las ratas después de la 20 administración de sustancia (10 ratones por dosificación de • sustancia) se comparó con un grupo de control (10 ratones) . En base a la cuantificación del comportamiento al dolor se determinó en por ciento la actividad de la sustancia en la prueba de la formalina como variación 25 respecto al control. Los cálculos de DE50 se efectuaron ^ t miáiiáiáMá mediante análisis de regresión. El momento de la aplicación previo a la inyección de formalina se eligió en función de la forma de aplicación de los compuestos de conformidad con la invención (intraperitoneal: 15 minutos, intravenosa: 5 5 minutos) . d) Prueba de Writhing en ratones El análisis sobre la actividad analgésica también • se llevó a cabo de acuerdo al writhing inducido en ratones mediante la fenilquinona (modificado según I.C. Hendershot 10 et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. Vol. 125, páginas 237 - 240). Para éste propósito se emplearan ratones macho NMRI con un peso de 25 a 30 g (Iffa, Credo, Bélgica) . 10 minutos • después de la administración intravenosa del compuesto respectivo, a grupos de 10 animales por dosis de sustancia 15 se les aplicó intraperitonealmente 0.3 ml/ratón de una solución acuosa al 0.02% de la fenilquinona (fenilbenzoquinona, Cia. Sigma, Deisenhofen; preparación de la solución mediante la adición de 5% de etanol y conservación en baño de agua a 45°C) . Los animales se 20 colocaron en jaulas de observación individuales. Mediante • un contador de teclado se contaron el número de movimientos de extensión inducidos por dolor (así denominadas reacciones de Writhing = tender el cuerpo con extensión de las extremidades posteriores) de 5 a 20 minutos después de 25 la administración de la fenilquinona. Como control se emplearon animales a los que solo se les había administrado solución de cloruro de sodio fisiológica. Todas las sustancias se ensayaron en la dosificación estándar de 10 mg/kg de peso corporal del ratón. La inhibición porcentual (% de inhibición) de la reacción de writhing mediante una sustancia se calculó de acuerdo a la fórmula siguiente: reacciones de writhing de los animales tratados * 100 de inhibición = 100 reacciones de writhing de los animales de control En base a la disminución de las reacciones de writhing en función de la dosis en comparación con grupos de control de fenilquinona examinados en paralelo, para algunos de los compuestos de conformidad con la invención se calculó mediante análisis de regresión (programa de evaluación Martens EDV-Service, Eckental) los valores DE50 con gama de confiabilidad del 95 % de la reacción de writhing.

Los ejemplos siguientes sirven para explicar la invención, más no limitan la idea general de la invención. ..?í . átáÁ, Ejemplos Los rendimientos de los compuestos producidos no se optimizaron. Los puntos de fusión determinados no están corregidos. Ejemplo 1 5- (metoxifenilmetilen) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3- oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 4- hidroxi-5- (metoxifenil-metilen) -1, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 - 1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 ml de á ido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recristalizando con etanol. El rendimiento de 5- (metoxifenilmetilen) - pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3-oxima fue de 60 % con un punto de fusión de 174°C. El análisis de estos compuestos mediante espectroscopia de RMN 1H dió por resultado las señales siguientes: x< (d6-DMS0, d en ppm): 11.95 (s, 1 H) ; 10.74 (s, 0.66 H) ; 10.71 (s, 0.33 H) ; 7.46 (m, 5 H) ; 3.42 (s, 1 H) ; 3.41 (s, 2 H) . Ejemplo 2 5 5- (bromofenilmetilen) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3- oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- (bromofenil-metilen) -4-hidroxi-l, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. 10 Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 - 1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de 15 sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recristalizando con etanol. El rendimiento de 5- (bromofenilmetilen) -pirrolidin- 2 , 3, 4-trion-3-oxima fue de 65 % con un punto de fusión de 20 158 °C. El análisis de estos compuestos mediante espectroscopia de RMN XH dió por resultado las señales siguientes : (d6-DMSO, d en ppm): 14.46 (s, 1 H) ; 11.06 (s, 25 0.70 H) ; 11.00 (s, 0.30 H) ; 7.40-7.26 (m, 5 H) .

Ejemplo 3 5-benciliden-pirrolidin-2, " 4-trion-3-oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- benciliden-4-hidroxi-l, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 - 1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recristalizando con etanol. El rendimiento de 5-benciliden-pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3-oxima fue de 65 % con un punto de fusión de 205°C. El análisis de estos compuestos mediante espectroscopia de RMN 1H dió por resultado las señales siguientes : (d6-DMSO, d en ppm): 14.66 (s, 1 H) ; 11.25 (s, 0.66 H) ; 11.18 (s, 0.33 H) ; 7.64-7.31 (m, 5 H) ; 6.42 (s, 0.33 H) ; 6.36 (s, 0.66 H) . Ejemplo 4 5- (2-clorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3- oxi a A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- (2-clorobenciliden) -4-hidroxi-l, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 - 1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recpstalizando con etanol. El rendimiento de 5- (2-clorobenciliden) -pirrolidin- 2, 3, 4-trion-3-oxima fue de 60 % con un punto de fusión de 176°C. El análisis de estos compuestos mediante espectroscopia de RMN 1H dió por resultado las señales siguientes : (dd-DMSO, d en ppm): 11.40 (s, 0.66 H) ; 11.34 (s, 0.33 H) ; 7.46-7.21 (m, 4H) ; 6.52 (s, 0.33 H) ; 6.47 (s, 0.66 H) . Ejemplo 5 5- (4-clorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3- oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- ( 4 -clorobenciliden-4-hidroxi-1, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm.

Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 -1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696) ) en 5 ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recri?" alizando con etanol. El rendimiento de 5- (4-clorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima fue de 50 % con un punto de fusión de 190°C. El análisis de estos compuestos mediante espectroscopia de RMN 1H arrojo las señales siguientes: (d6-DMSO, d en ppm): 11.35 (s, 0.66 H) ; 11.28 (s, 0.33 H) ; 7.67-7.64 (m, 2 H) ; 7.45-7.35 (m, 2 H) ; 6.40 (s, 0.33 H) ; 6.35 (s, 0.66 H) Ejemplo 6 5- (2, 3-diclorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- (2, 3-diclorobenciliden) -4-hidroxi-l, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 -1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 l^^ü^^Hl — -1" J>-^-*hhi-mt i\ nriiiif Ürtil-H ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró 5 al vacío. El residuo se purifica recristalizando con etanol. El rendimiento de 5- (2, 4-diclorobenciliden) - pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima fue de 55 % con un punto de fusión de 180°C. El análisis de estos compuestos mediante 10 espectroscopia RMN 1H arrojo las señales siguientes: (d6-DMSO, d en ppm): 11.43 (s, 0.66 H) ; 11.37 (s, 0.33 H) ; 7.63-7.37 (m, 3 H) ; 6.50 (s, 0.33 H) ; 6.45 (s, • 0.66 H) Ejemplo 7 15 5- (2, 4-diclorobenciliden) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion- 3-oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- (2, 4-diclorobenciliden) -4-hidroxi-l, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. 20 Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et • al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 - 1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de 25 sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recristalizando con etanol. El rendimiento de 5- (2 , 4-diclorobenciliden) - pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima fue de 55 % con un punto de 5 fusión de 180°C. El análisis de estos compuestos mediante espectroscopia de RMN 1H arrojo las señales siguientes: • (d6-DMSO, d en ppm): 11.38 (s, 0.66 H) ; 11.32 (s, 0.33 H) ; 7.68-7.65 (m, 2 H) ; 7.45-7.43 (m, 1 H) ; 6.42 (s, 10 0.33 H) ; 6.36 (s, 0.66 H) Ejemplo 8 5- (2, 6-diclorobenciliden) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion- • 3-oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- 15 (2, 6-diclorobenciliden) -4-hidroxi-l, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 - 1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 20 ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recpstalizando con 25 etanol . El rendimiento de 5- (2, 6-diclorobenciliden/ - pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima fue de 65 % con un punto de fusión de 232°C. El análisis de estos compuestos mediante espectroscopia de RMN 1H arrojo las señales siguientes: (d6-DMS0, d en ppm): 11.12 (s, 0.66 H) ; 11.08 (s, 0.33 H) ; 7.50-7.48 (m, 2 H) ; 7.39-7.35 (m, 1 H) ; 6.27 (s, 0.33 H) ; 6.22 (s, 0.66 H) Ejemplo 9 5- (3-clorobenciliden) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3-oxima A una solución enfriada por hielo de 2 mmol de 5- (3-clorobenciliden) -4-hidroxi-l, 5-dihidropirrol-2-ona (preparada según H. Poschenrieder et al. (Arch. Pharm.

Pharm. Med. Chem. 1998, 331, 389 - 394) y H.-D. Stachel et al. (J. Heterocycl. Chem. 1980, Vol. 17, páginas 1195 - 1199 y Liebigs Ann. Chem. 1985, páginas 1692 - 1696)) en 5 ml de ácido acético se adicionó gota a gota con agitación una solución acuosa de 1.1 mmol (0.075 g) de nitrito de sodio. La solución resultante se agitó a continuación durante 30 minutos a la temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purifica recristalizando con etanol. El rendimiento de 5- (3-clorobenciliden) -pirrolidin- 2, 3, 4-trion-3-oxima fue de 50 % con un punto de fusión de 185°C. El análisis de estos compuestos mediante -i triiifr-t GTII -iirti-üilíit'Tfri i •jr*fa6jtalt-AA*« T». fe. espectroscopia de RMN 1H arrojo las señales siguientes: (d6-DMS0, d en ppm): 14.69 (s, 0.66 H) ; 14.53 (s, 0.33 H) ; 11.47 (s, 0.66 H) ; 11.40 (s, 0.33 H) ; 7.27-7.20 (m, 4 H); 6.38 (s, 0.33 H) ; 6.33 (s, 0.66 H) Análisis farmacológicos a) Análisis respecto a la unión al receptor Los análisis para determinar la afinidad de los compuestos de conformidad con la invención según ejemplo 1 y 2 al sitio de unión de la glicina del canal receptor de 10 NMDA se llevaron a cabo como se describió en lo precedente. La afinidad al sitio de unión de la glicina del canal receptor de NMDA se calculó como CI50 (concentración con 50% de expulsión del ligando radioactivo de su unión específica) según la ley de acción de las masas mediante 15 regresión no lineal, y se indica en la tabla 1 siguiente, como valor Ki (constante de inhibición) después de la conversión (según la ecuación de Cheng-Prussoff (Y. Cheng, W.H. Prissoff, 1973, Biochem. Pharmacol. Vol. 22, páginas 3099-3108) ) . 20 b) Flujos de iones inducidos por NMDA/glicina en oocitos Xenopus inyectados con RNA El análisis para determinar las variaciones de función del canal receptor de NMDA debido al compuesto de conformidad con la invención según el ejemplo 1 se llevó a cabo como se describió en lo precedente. El resultado del análisis con respecto a la actividad del compuesto de conformidad con la invención según el ejemplo 1 sobre los flujos de iones desencadenados 10 por NMDA/glicina en los oocitos inyectados con RNA se indica en la tabla 2 siguiente. • • 15 De los experimentos se deriva la actividad antagonista del compuesto conforme al ejemplo 1.

Wk á*á.. uAzA Í Atatii-^ c) Prueba de formalina en ratones Los análisis para determinar el efecto antinociceptivo de los compuestos de conformidad con la invención se llevó a cabo como se describió en lo precedente . Los resultados correspondientes de la prueba de la formalina en ratones se compilan en la tabla 3 siguiente : Tabla 3 d) Prueba de writhing en ratones El análisis con respecto a la actividad analgésica se llevó a cabo según el writhing inducido por fenilquinona en ratones, tal y como se describió en lo precedente. Todos los compuestos de conformidad con la invención analizados mostraron una marcada actividad analgésica. Los resultados se recopilan en la tabla 4 siguiente: ^?,ñ ^ fÁtJ^^ej ?ta,* Tabla 4 • *.^.-*.«AÉ».-i^-a» á^^

Claims

REIVINDICACIONES 1. Derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- triona de fórmula general I I en la que representan el radical R1 H, OR8 , COR5 , CSR5, NR6R7 , COOR5, C0NR6R7 , CSNR6R7 , un radical alquilo-C?-?o o un radical feni lo insustituido, los radicales R2, R3, iguales o diferentes H, F, Cl, Br, CF3, OR8, SR8, un radical alquilo-C?-?0, un radical arilo, un radical heteroarilo o un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-6, el radical R4 H, OH, OR8, SR8, COR5, COOR5, COCOR5, CONR6R7, CSNR6R7 ó un rad al alquilo-C?-?0, el radical R5 H o un radical alquilo-C?-?o, los radicales R6, R7, iguales o diferentes H, OR8, COR5, COOR5 o un radical alquilo-C?-?o, el radical R8 un radical alquilo-C?-?o, en forma de sus racematos, enantiómeros, diaestereómeros o una base respectiva o una respectiva sal fisioloógicamente tolerable . 2. Derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- triona según la reivindicación 1, caracterizados porque el radical R1 representa un radical alquilo-C?-6 y los radicales R2 a R8 restantes tienen el significado según la fórmula general I. 3. Derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- triona según la reivindicación 1 ó 2, caracterizados porque el radical R2 y/o R3 representa un radical alquilo-C?-6 y los radicales R4 a R8 restantes y opcionalmente R2 ó R3 tienen el significado según la fórmula general I. 4. Derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, - triona según la reivindicación 1 ó 2, caracterizados porque el radical R2 y/o R3 representa un radical arilo ligado a través de un grupo alquileno-C?-3 y los radicales R4 a R8 restantes y opcionalmente R2 ó R3 tienen el significado según la fórmula general I. 5. Derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- triona según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizados porque el radical R4 representa OH y los radicales R5 a R8 restantes tienen el significado según la fórmula general I. 6. Derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- triona según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizados porque el radical R4 representa OR8 y los radicales R5 a R8 restantes tienen el significado según la fórmula general I . 7. Derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- triona según una de las reivindicaciones 1 a 4, • caracterizados porque el radical R4 representa un radical alquilo-C?-6 y los radicales R5 a R8 restantes tienen el 10 significado según la fórmula general I. 8. Derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4- triona según una de las reivindicaciones 1 a 7, • caracterizados porque el radical R5 representa un radical alquilo-C?-6 y los radicales R6 a R8 restantes tienen el 15 significado según la fórmula general I. 9. Derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4- triona según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizados porque el radical R6 y/o R7 representa un radical alquilo-C?-6 y el radical R8 y opcionalmente R6 o R7 20 tiene el significado según la fórmula general I. 10. Derivados sustituidos de pirrolid?n-2 , 3, 4- triona según una de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizados porque el radical R8 representa un radical alquilo-Ci-g. 25 11. Derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4- triona según la reivindicación 1 5- (metoxifenilmetilen) -pirrolidin-2 , 3, 4-tr?on-3- oxima, 5 5- (bromofenilmetilen) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3- oxima, 5-benciliden-pirrolidin-2, 3, 4-trion-3-oxima, • 5- (2-clorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3- oxima, 10 5- (4-clorobenciliden) -pirrolidin-2 , 3, 4-trion-3- oxima, 5- (2, 3-diclorobenc?liden) -pirrolidm-2, 3, 4-tr?on- • 3-oxima, 5- (2, -diclorobenciliden) -pirrolidin-2 , 3, -trion- 15 3-oxima, 5- (2, 6-diclorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion- 3-oxima, y 5- (3-clorobenciliden) -pirrolidin-2, 3, 4-trion-3- 20 oxima . 12. Método para la producción de derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1, caracterizado porque los ácidos tetrámicos de fórmula general II 25 Ll en la cual los radicales R1 a R3 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I se hacen reaccionar en solución enfriada por hielo con una solución acuosa de nitrito de sodio para obtener compuestos de fórmula general I en la que R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I, y estos se purifican y aislan. 13. Método para la producción de derivados sustituidos de pirrolidin-2 , 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1, caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado según la fórmula general I se hacen reaccionar en disolventes absolutos a bajas temperaturas, en presencia de bases fuertes, con haluros de alquilo-C?-?o para obtener compuestos de fórmula general I en los que el radical R4 frA-».- | fd ?....a ?«.-i--fft|-, ._ .-__«*> ^ »i^-«.¿-a-fci__¡__iB___ -__,^ft1_?ife-^^ ?j^ representa OR8 y los radicales R1 a R3 y R8 tienen el significado conforme a la fórmula general I. 14. Método para la producción de derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1, caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa OR8 y los radicales R1 a R3 y R8 tienen el significado según la fórmula general I, se hacen reaccionar en un disolvente absoluto con cloruros de ácidos de fórmula general R5-(C=0)-C1 y/o bromuros de ácidos de fórmula general R5- (C=0) -Br o esteres del ácido clorofórmico de fórmula general Cl- (C=0) -O-R" esteres del ácido fluorofórmico de fórmula general F-(C=0)-0-R con carbonatos de cadena abierta de fórmula general R5-0-(C=0)-O-R5 o con carbonatos cíclicos correspondientemente sustituidos, preferiblemente con carbonatos cíclicos correspondientemente sustituidos, en los que R5 en cada caso tiene el significado de acuerdo a la fórmula general I, para obtener compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa COR5 o COOR5, y los radicales R1 a R3 y R5 tienen el significado de acuerdo a la fórmula general I, que se purifican y aislan según métodos convencionales . 15. Método para la producción de derivados sustituidos de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1, caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado según la fórmula general I, se hacen reaccionar a bajas 5 temperaturas con isocianatos o isotiocianatos alifáticos en disolventes apróticos polares, para obtener compuestos de fórmula general I en la que R4 representa CONR6R7 ó CSNR6R7, • el radical R6 ó R7 significa H, y los radicales R1 a R3 así como Rd ó R7 tienen el significado de acuerdo a la fórmula 10 general I, los cuales se purifican y aislan según métodos convencionales . 16. Método según la reivindicación 12, ^^ caracterizado porque los ácidos tetrámicos de fórmula general II se hacen reaccionar en una solución enfriada por 15 hielo de ácido acético con una solución acuosa de nitrito de sodio. 17. Método según la reivindicación 12 ó 16, caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 20 tienen el significado según la fórmula general I se purifican y aislan mediante recristalización, de preferencia mediante recristalización con etanol. 18. Método según la reivindicación 13, caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en 25 la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado según la fórmula general I se hacen reaccionar bajo atmósfera de gas protector. 19. Método según la reivindicación 13 ó 18, caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en 5 la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado según la fórmula general I se hacen reaccionar en éteres de cadena abierta y/o cíclicos. 20. Método según una de las reivindicaciones 13, 18 ó 19, caracterizado porque los compuestos de fórmula 10 general I en la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado según la fórmula general I se hacen reaccionar en presencia de hidróxidos • alcalinos y/o hidróxidos alcalinotérreos y/o bases metalorgánicas . 15 21. Método según una de las reivindicaciones 13 o 18 a 20, caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa OH y los radicales R1 a R3 tienen el significado según la fórmula general I se hacen reaccionar con haluros de alquilo-C?_6. 20 22. Método según la reivindicación 14, • caracterizado porque los compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa OR8 y los radicales R1 a R3 y R8 tienen el significado según la fórmula general I se hacen reaccionar bajo atmósfera de gas protector. 25 23. Método según la reivindicación 14 ó 22, caracterizado porque -.os compuestos de fórmula general I en la que el radical R4 representa ^R8 y los radicales R1 a R3 y R8 tienen el significado según la fórmula general I se hacen reaccionar en éteres de cadena abierta y/o cíclicos. 24. Método según una de las reivindicaciones 14, 22 23, caracterizado porque los carbonatos cíclicos utilizados contienen 5 ó 6 átomos en el anillo. 25. Medicamento que contiene como sustancia activa farmacéutica a lo menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o una base correspondiente y/o una respectiva sal fisiológicamente tolerable, y opcionalmente otras sustancias activas y/o coadyuvantes. 26. Medicamento según la reivindicación 25 para tratar/combatir dolores, reacciones inflamatorias y/o alérgicas, depresiones, adicción a las drogas y/o el alcohol, gastritis, diarrea, incontinencia urinaria, enfermedades cardiovasculares, enfermedades de las vías respiratorias, tos, enfermedades anímicas o epilepsia. 27. Medicamento según la reivindicación 25 para el tratamiento/profilaxis de esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, isquemias cerebrales, infartos cerebrales, sicosis condicionadas por nivel incrementado de aminoácido, apoplejías, edemas cerebrales, hipoxia, anoxia, demencia por SIDA, encefalomielitis, síndrome de Tourette, asfixia perinatal o para la anxiolísis. 28. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para combatir los dolores. 29. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2 , 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de reacciones inflamatorias . 30. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidm-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de reacciones alérgicas. 31. Uso de al menos un derivado sustituido de p?rrolidin-2 , 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o c' una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de depresiones. 32. Uso de ai menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, -triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la adicción a las drogas y/o el alcohol. 33. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2 , 3, -triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la gastritis. 34. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la diarrea. 35. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para tratar la incontinencia urinaria. 36. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2 , 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un mediacmento para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares. 37. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un 5 medicamento para el tratamiento de enfermedades de las vías respiratorias . 38. Uso de al menos un derivado sustituido de • pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una 10 respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratam. _o de la tos. 39. Uso de al menos un derivado sustituido de • pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una 15 respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de enfermedades anímicas. 40. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una 20 respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la epilepsia. 41. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una 25 respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar an ¿a ... __. L medicamento para el tratamiento de la esquizofrenia. 42. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una 5 respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer . w 43. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la 10 reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de ™ Huntington . 44. Uso de al menos un derivado sustituido de 15 pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson . 20 45. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2 , 3, -triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de isquemias cerebrales. 25 46. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de infartos cerebrales. 47. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de sicosis condicionadas por incremento del nivel de aminoácido. 48. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para la profilaxis en el caso de apoplejías. 49. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de edemas cerebrales. 50. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la hipoxia. 51. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la anoxia. 52. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2 , 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de demencia por SIDA. 53. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la encefalomielitis . 54. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerab_ para preparar un medicamento para el tratamiento del síndrome de Tourette. 55. Uso de al menos un derivado sustituido de pirrolidin-2, 3, 4-triona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento de la asfixia perinatal. 56. Uso de al menos un derivado sustituido de p?rrol?d?n-2, 3, 4-tr?ona de fórmula general I según la reivindicación 1 y/o de una base correspondiente y/o de una respectiva sal fisiológicamente tolerable para preparar un medicamento para el tratamiento anxiolítico.