MXPA01005905A - Ligandos selectivos de receptores de 5-ht6. - Google Patents

Abstract

Se han identificado compuestos que exhiben afinidad y selectividad incrementadas por receptores de 5-HT6; estos compuestos se pueden usar terapeuticamente en el tratamiento de trastornos mentales mediante la administracion en una via de suministro farmacologicamente aceptable a un paciente que necesita de los mismos, o se pueden usar para identificar antagonistas de receptores de 5-HT6 mediante metodologias de estudio bien conocidas que se podrian usar en el tratamiento de trastornos mentales.

Description

LIGANDOS SELECTIVOS DE RECEPTORES DE 5-HTR Esta invención se descubrió en la realización de la investigación apoyada por el gobierno de E.U.A. bajo las garantías NIMH KO2MH01366 y w 5 NCEMS GM52213, y el gobierno de E.U.A. tiene ciertos derechos sobre la invención.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN 10 CAMPO DE LA INVENCIÓN • La presente invención se refiere a la síntesis de ligandos selectivos novedosos para un subgrupo de receptores de serotonina (5-HT). Aunque existen 7 grupos de receptores de 5-HT, esta invención es selectiva 15 para el subgrupo 5-HTß. Esta invención también se refiere a la síntesis de ligandos selectivos novedosos del receptor del subgrupo 5-HT6 que actúa como agonista de los ligandos naturales para este receptor. La invención • también se refiere a la creación de ligandos novedosos que actúan como antagonistas del receptor de 5-HT6. La invención, además, se refiere al uso de 20 dichos compuestos para tratar mamíferos afectados de manera adversa por condiciones mediadas por el receptor de 5-HT6.

DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA ANTERIOR Los receptores de serotonina se han dividido en varias familias y subfamilias (5-HT?-5-HT7) y aproximadamente 14 poblaciones se han clonado. Una de las poblaciones identificadas más recientemente es el subgrupo 5-HT6. Se ha observado que varios agentes psicotrópicos tricíclicos (neurolépticos, antidepresivos y agentes neurolépticos atípicos) se unen al receptor de 5-HT6 con afinidades nanomolares (Roth et al. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1994, 268, 1403-1410). Un receptor de 5-HT6 de rata se clonó por primera vez en 1993 y, más recientemente, el mismo grupo describió la clonación de un receptor de 5-HTT humano. Los receptores de serotonina 5-HT6 son miembros de la superfamilia de G-proteína, están acoplados positivamente a un sistema de segundo mensajero adenilato ciclasa, y se encuentran principalmente en el sistema nervioso central. La unión de la serotonina al subgrupo del receptor de 5-HTß ocasiona una activación de la enzima adenilato ciclasa, con niveles incrementados concomitantes de cAMP intracelular. Aunque la función fisiológica y la importancia clínica exacta del subgrupo del receptor de 5-HTß no se conoce, como se observó anteriormente, varios agentes antipsicóticos se unen a estos receptores con alta afinidad. También, en ratas que no expresan para receptores de 5-HT6, los animales se comportan en una manera que aparentemente involucra un incremento en la función colinérgica, sugiriendo que los ligandos específicos de 5-HT6 deben ser de un valor importante en el tratamiento de los trastornos relacionados con la ansiedad y déficit de memoria. A la unión a los receptores celulares, los ligandos pueden actuar como agonistas o antagonistas con respecto a la función endógena receptor-ligando. Se ha descubierto, en el caso del receptor de 5-HT6, que diversos ligandos específicos actúan como antagonistas específicos de 5-HT6, no obstante, antes de la presente invención no se había descubierto ligandos selectivos que actúan como agonistas al receptor de 5-HTß.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Es un objetivo de la presente invención crear derivados de serotonina (5-HT) que específicamente se unen al subgrupo de receptor de 5-HT6 de la familia de receptor de serotonina. Otro objetivo de la presente invención es crear ligandos selectivos de 5-HT6 que actúen como agonistas al unirse al receptor de 5-HT6. Un objetivo adicional de la presente invención es crear ligandos selectivos de 5-HT6 que actúan como antagonistas cuando están unidos al receptor de 5-HT6. Adicionalmente, los compuestos de la presente invención que poseen actividad antagonista son derivados de triptamina y estructuralmente no están relacionados con los antagonistas de 5-HT6 descritos anteriormente. Otro objetivo de la presente invención es administrar ligandos selectivos de 5-HT6 a animales para determinar los efectos fisiológicos y bioquímicos de la activación e inhibición específica de la t í«L .¿-; ,i....¿--.t^-...-- función del receptor de 5-HT6. Finalmente, es un objetivo de la presente invención tratar trastornos mentales mediados por la función de 5-HT6 administrando a los sujetos en tratamiento los compuestos agonistas y antagonistas selectivos de 5-HTT descritos en la presente. 5 Se ha observado que varias indolalquilaminas, incluyendo serotonina (5-HT) y 5-metoxitriptamina, se unen al receptor de 5-HTß con alta afinidad y producen un incremento potente dependiendo de la dosis en niveles de cAMP. Sin embargo, estas triptaminas, no son selectivas si se unen a múltiples familias de receptores de 5-HT. De conformidad con la invención, se 10 han elaborado varias modificaciones de 5-HT para generar ligandos con • selectividad por el receptor de 5-HT6. Un análogo de 5-HT con un sustituyente 2-metil introducido (2-metili-5-HT) se une al receptor de 5-HT6 con una afinidad equivalente a la del compuesto origen. El análogo anterior es selectivo para los receptores de 5-HTe y 5-HT3 y se unen en el subgrupo de 5- 15 HTß con una afinidad 20 veces mayor que los receptores de 5-HT3. Un análogo de 2-metilo de 5-metoxitriptamina, 5-metox¡-2- metiltriptamina, se une al receptor de 5-HT6 con una afinidad comparable a 2- metil-5-HT. Sin embargo, 5-metoxi-2-metiltriptamina no tiene afinidad por los receptores de 5-HT3. De esta manera, 5-metoxi-2-metiltriptamina presenta un 20 ligando con especificidad por el subgrupo de receptor de 5-HT6. En la presente invención, el compuesto 5-metoxi-2-metiltriptamina se ha modificado y varios de sus derivados alquilo se unen con afinidad comparable y activan la actividad de adenilato ciclasa en niveles comparables a la serotonina.

Además, un derivado, 5-metoxi-2-fenilotriptamina, se une al receptor de 5-HT6 con una alta afinidad, pero la adición de fenilo convierte el compuesto a un antagonista a la actividad de adenilato ciclasa estimulada por 5-HT. € 5 BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Los objetivos, ventajas y aspectos mencionados entre otros se comprenderán mejor a partir de la siguiente descripción detallada de las modalidades preferidas de la invención con referencia a los dibujos, en donde: 10 La figura 1 es una gráfica que muestra la actividad de adenilato • ciclasa observada con diversos compuestos de la invención.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS DE LA INVENCIÓN 15 La invención provee compuestos novedosos derivados de triptamina con selectividad por el subgrupo de receptores de 5-HT6. Para el objetivo de la presente, un agente se llama selectivo cuando muestra una afinidad por los receptores de 5-HT6 10 veces mayor que las afinidades que 20 muestra por otras poblaciones de receptores relacionados. La invención, además, provee un método que usa dichos compuestos para el subtipo de receptor 5-HTß como agonistas, o como antagonistas a la serotonina. Los compuestos de la invención pueden usarse, ya sea como la base libre o como la sal de adición acida farmacéuticamente aceptable, por ejemplo clorhidrato, bromhidrato, tartrato y maleato. Pueden usarse en preparaciones farmacéuticas orales o inyectables como profiláctico y tratamientos de fase aguda para el alivio e inversión de los síntomas regulados por la serotonina. Pueden usarse solos o combinados entre sí o con otros medicamentos. Finalmente, dichos compuestos pueden usarse como se mencionó anteriormente para determinar la función del receptor de 5-HT6. La serotonina (5-hidroxitriptamina o 5-HT) es un producto de metabolismo de triptófano y es un derivado de la triptamina que es un potente neurotransmisor. La serotonina es un derivado de triptamina bien caracterizado que regula los canales de ion calcio en la superficie de las células nerviosas y musculares. Varios trastornos mentales en los humanos están asociados con las fluctuaciones en los niveles de serotonina y se tratan de manera efectiva con fármacos que interactuan específicamente con receptores de serotonina o que bloquean la reabsorción de la serotonina en las terminales de axón presinápticas, sugiriendo que la desregulación de serotonina puede estar involucrada en diversos trastornos mentales. Algunos ligandos de receptor de serotonina están aprobados clínicamente como fármacos para el tratamiento de migraña, depresión, presión sanguínea alta y psicosis. Generalmente, los derivados de triptamina no son selectivos y se unen a múltiples subgrupos de receptor de 5-HT. La serotonina no es la excepción y se une a las diversas subfamilias del receptor de 5-HT, incluyendo el subgrupo 5-HT6 en donde es un potente activador de la actividad de la enzima de adenilato ciclasa. Las serotonina tiene la fórmula química: Algunas modificaciones de la serotonina dan como resultado la pérdida de afinidad por diversos subgrupos de receptor de 5-HT. 10 Anteriormente se había pensado que la introducción de un sustituyente de 2- • metilo a 5-HT no era tolerado por ninguno de los receptores de 5-HT, sólo por el subgrupo 5-HT3. De esta manera, antes de la identificación del receptor de 5-HT6, la 2°-metilación de 5-HT se creyó que proporcionaba el producto selectivo por el subgrupo de 5-HT3. Se ha descubierto que dos derivados de 15 metilo de 5-HT, 2-metilo-5-HT tienen una alta afinidad por el receptor de 5- HTe De hecho, 2-metilo-5-HT se une al receptor de 5-HTß con una afinidad 20 veces mayor sobre los receptores de 5-HT3. El ligando selectivo de 5-HT6 2- metilo-5-metoxitriptamina contiene una amina primaria, presentando un obstáculo al compuesto que cruza la barrera del flujo sanguíneo al cerebro y 20 también hace al compuesto vulnerable para un metabolismo rápido debido a la desminación oxidante. El descubrimiento de que un substituyente de metilo en la posición 2 fuese tolerado por el receptor de 5-HT6, junto con la observación anterior de que O°-metilación de 5-HT evita la afinidad por el receptor de 5-HT3, llevó a la presente invención. Para dirigir las limitantes mencionadas de 2-metil-5- metoxitriptamina, varios compuestos derivados se sintetizaron, estos eran • lipófilos y también podían tener una menor tendencia al metabolismo rápido. Se añadieron sustituyentes N, N-dimetilo a 2-metiltriptamina para crear 2- metil-N, N-dimetiltriptamina (Ki=308 nM). La reintroducción del grupo metoxi a este compuesto, para formar 2-metil-5-metoxi-N, N-dimetiltriptamina dio como resultado un compuesto (compuesto A) con una afinidad por el receptor de 5- 10 HT6 de Ki=60 nM. La homologación del sustituyente 2-metilo del compuesto • anterior para formar 2-etil-5-metoxi-N, N-dimetiltriptamina dio como resultado un ligando con una afinidad incrementada por 5-HT6 de Ki=16 nM (compuesto B). Para determinar si pudieran añadirse o no mayores adiciones en volumen en lugar de un grupo metilo o etilo, se generó el derivado de 2-fenol de 2- 15 metil-5-metoxi-N, N-dimetiltriptamina. Este compuesto D se une al receptor de 5-HT6 con Ki=20 nM. Estos derivados fueron de la fórmula general I En donde Ri y R2=H o CH3, R3=H, OH, OCH3, o un alquilo sustituido o no sustituido, R =H, CH2-fenil, SO2-fenil, o CH2 como parte de un anillo alquilo sustituido o no sustituido que conecta R y R5, R5=H,CH3, o CH2 como parte de un anillo alquilo sustituido o no sustituido que conecta a R5, ya sea con R o R6, R6=H, CH3 o CH, como parte de un anillo alquilo sustituido o no sustituido que conecta a Re y R5. Los compuestos de la invención y las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la presente invención pueden usarse en forma de preparaciones farmacéuticas. Las preparaciones pueden administrarse oralmente, por ejemplo en forma de tabletas, tabletas revestidas, grageas, cápsulas de gelatina suave o dura, soluciones, emulsiones o suspensiones. La administración puede realizarse rectalmente, por ejemplo en forma de supositorios, o parenteralmente, por ejemplo en forma de soluciones para inyección. Los compuestos de la invención pueden procesarse con vehículos inertes farmacéuticamente, orgánicos o inorgánicos para la producción de preparaciones farmacéuticas y de investigación. Las preparaciones pueden contener conservadores, solubilizantes, agentes humectantes, emulsificantes, endulzantes, colorantes, edulcorantes, sales para variar la presión osmótica, reguladores de pH, agentes enmascaradores o antioxidantes. También pueden contener otras sustancias importantes terapéuticamente.

Los compuestos de la presente invención también pueden radiomarcarse y usarse para identificar otros ligandos de 5-HTß usando técnicas comunes en la técnica. Esto puede lograrse mediante la incubación del receptor en presencia de una candidato de ligando más una cantidad # 5 equimolar de compuestos radiomarcados de la invención. Los ligandos selectivos para 5-HT6 entonces se muestran como aquéllos que no son desplazados de manera importante por los compuestos de la presente invención. Otra modalidad de la invención puede ser la administración de 10 los compuestos de la invención a animales en pruebas de discriminación de fármacos. En el paradigma de discriminación de un fármaco, los animales (usualmente ratas) pueden estar adiestrados para reconocer los efectos de un agente dado. Una vez adiestrados, estos animales pueden usarse en pruebas de generalización de estímulos para identificar otros agentes que producen 15 efectos similares (es decir, agonistas), o los animales pueden usarse en pruebas de antagonismo del estímulo para identificar a los agentes que bloquean o antagonizan (es decir, antagonistas) los efectos del fármaco para el que fue adiestrado. Por lo tanto, el procedimiento puede usarse para identificar agonistas que producen un efecto común para el fármaco de 20 adiestramiento, más antagonistas que pueden bloquear los efectos del fármaco de adiestramiento. Específicamente, con un agonista selectivo de 5- HTT como el fármaco de adiestramiento, los animales pueden usarse para identificar otros agonistas de 5-HT6.

Una familia de compuestos contemplados para usarse en la presente invención está representado por la fórmula 2 en donde R2 se selecciona del grupo que consiste de alquilos pequeños (es decir, metilo, etilo, n-propilo), arilo (por ejemplo fenilo) y arilalquilos. Otra familia de compuestos para usarse en la presente invención está representada por la fórmula 3 en donde R-i se selecciona del grupo que consiste en alquilos inferiores como etilo y propilo, metilo e hidrógeno y pueden ser iguales o diferentes en cada ubicación, y R4 es del grupo que comprende H, CH2-fenilo, o S?2-fenilo. Otra familia de compuestos para usarse en la presente invención está representado por la fórmula 4 en donde X se selecciona del grupo que consiste en oxígeno o 2H y Ri es H o alquilos inferiores como metilo, etilo, o propilo. Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención más detalladamente. Sin embargo, no se crearon para limitar su alcance de manera alguna.

EJEMPLO 1 Síntesis de maleato de 2 -etil-5-metoxi-N, N-dimetiltriptamina (Compuesto B Una solución de 2.5M de nBuLi (1.75 ml, 4.38 mmoles) se añadió gota a gota a una solución agitada de 2-metil-5-metoxi-N, N-dimetiltriptamina (compuesto A en los ejemplos a continuación) de base libre (1.00 g, 4.33 mmoles) en THF (7 ml) a -78°C bajo N2. Después de agitar la mezcla de reacción durante cinco minutos, el baño de enfriamiento se retiró y se hizo pasar gas CO2 en la solución durante 10 minutos. El solvente se retiró a 0°C bajo presión reducida para dar un sólido transparente. El matraz se limpió con N2 y se añadió THF seco (7 ml). Se eliminó el gas de la mezcla de reacción a -150°C bajo presión reducida de 1 mm de Hg, después se permitió calentar a -78°C; se añadió gota a gota tNuLi de 1.7M (2.8 ml, 4.8 mmoles). La solución se mantuvo a -78°C durante tres horas. Se aseguró que la reacción estuviera acidificada con una solución etérea saturada de HCl. Se añadió Et2O anhidro a la sustancia resultante y el supernadante se decantó. El residuo se calentó a 100°C bajo presión reducida durante 20 minutos. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (CH2CI2/MeOH; 12:1 ) para dar 0.17 g de un aceite amarillo brillante (16%). 1H-RMN (CDCI3) d 8.06 (s, 1 H, J=8.67 HZ), 6.98 (s, 1 H), 6.76 (dd, 1 H, J=2.34, 8.73 HZ), 3.84 (s, 3H) 2.91-2.87 (m, 2H), 2.71 (q, 2H, J=7.38 HZ), 2.57-2.52 (m, 2H), 2.38 (s, 6HJ), 1.25 (t, 3H, J=7.38 HZ). La sal de maleato se preparó y se recristalizó a partir de una mezcla de EtOAc/Et2O; pf 123°C.

EJEMPLO 2 Cambios de magnesio y NH4CI se añadieron a una solución del ejemplo 11 , mencionado posteriormente (1-Bencenesulfonil-5-metoxi-2-n-propil-N, N-dimetiltriptamina de base libre, (259 mg, 0.65 mmol) en MeOH (17 ml) y se permitió que la mezcla se agitará a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió una solución de NH CI y la mezcla de reacción se extrajo con CH2CI2 la porción orgánica se secó (MgSO4) y los solventes se retiraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (CH CI2/MeOH; 9:1 ) para dar 75 mg de un aceite amarillo brillante. 1H-RMN (CDCI3) ü 7.71 (brs, 1 H), 2.89-2.83 (m, 2H), 2.69 (t, 2H, J=7.56 Hz), 2.53-2.47 (m, 2H), 2.36 (s, 6H), 1.68 (tq, 2H, J=7.28, 7.56 HZ), 0.98 (t, 3H, J=7.28 HZ). La sal se preparó y se recristalizó a partir de acetona; pf 146-147°C. EJEMPLO 3 Oxalato de 5-metoxi-2-fenil-N, N-dimetiltriptamina (compuesto D).

Se añadió 5-metoxi-2-fenilindol (3 g, 13.44 mmoles) a una solución enfriada con hielo, agitada de 1-dimetilamino-2-nitroetilen (1.56 g, 14.33 mmoles) en ácido trifluoroacético (8 ml). La mezcla resultante se permitió agitar bajo N2 a temperatura ambiente durante 30 minutos y entonces cuando se vertió en hielo/agua. La solución se extrajo con EtOAc y la porción orgánica se lavó consecutivamente con una solución de NaHCO3 saturada, H2O, y después salmuera. La porción orgánica se secó (MgSO ) y se retiró el solvente bajo presión reducida. El residuo se recristalizó a partir de C^Cb/hexano para dar 2:36 g (60%) de un polvo rojo. 1H-RMN (acetona-d6) d 8.82 (brs, 1 H), 3.92 (s, 3H), IR (Kbr) 1601 , 1475, 1251 cm"1. Una solución de este material (2 g, 6.75 mmoles) en THF seco se añadió gota a gota a una suspensión enfriada a 0°C de LiALH4 (1.54 g, 40.5 mmoles) en THF seco bajo N2. La mezcla de reacción se calentó a reflujo - -'P*^-^«--. durante una hora y posteriormente se permitió que reposara a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla resultante se extinguió con H2O después una solución de NaOH al 15%. Se añadió Celite y la solución se filtró. El solvente se retiró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante 5 cromatografía instantánea sobre gel de sílice (C^C /MeOH; 9:1 ) para dar 1 g (55%) de la amina primaria como un aceite. 1H-RMN (CDCI3) d 8.19 (brs, 1 H, J = 2.37 Hz), 6.88 (dd, 1 H, J = 2.24, 8.75 HZ), 3.89 (s, 3H), 3.04 (brs, 4H). IR (KBr) 3397, 3347 crn"1. Se añadió cianoborohidruro sódico (510 mg, 8.12 mmoles) a una 10 solución de amina primaria (700 mg, 2.63 mmoles) y CH2O acuoso al 37% en • MeCN (10 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se ajustó a un pH 5 con HOAc y se permitió agitar a temperatura ambiente durante la noche. Una solución de NaOH al 15% se añadió para neutralizar la mezcla y la mezcla se extrajo con CH2CI2. La porción orgánica combinada se lavó con una 15 solución de NaHCOa saturada y salmuera. La porción orgánica se secó (MgSO4) y el solvente se retiró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (C^C /MeOH; 9:1 ) • para dar 195 mg de 5-metoxi-2-fenil-dimetiltriptamina base libre como un polvo blanco. 20 1HRMN (CDCb d 8.05 (brs, 1 h), 7.56-7.53 (m, 2H), 7.49-7.44 (m, 2H), 7.39-7.34 (m, 1 H), 7.29, 7.25 (m, 1 H), 7.11 (d, 1 H, J = 2.25 HZ), 6.87 (dd, 1 H, J = 2.52, 8.73 HZ), 3.89 (s, 3H), 3.13-3.08 (m, 2H), 2.72-2.66 (m, 2H), 2.39 (s, 6H).

Aunque la sal de HCl ya se ha informado, dificultades en la purificación de ésta produjeron el aislamiento del producto como su sal, después de la recristalización a partir de acetona.

EJEMPLO 4 Clorhidrato de 4-dimetilaminometil-9-bencil-6-metoxi-1.2.3.4- tetrahldrocarbazol (compuesto E) Una mezcla de 4-metoxifenil-bencilamina (42 g, 0.2 moles) y carboxilato de etilo 6-bromociclohexano (J. Org. Chem. 1961 , 26, 22) (24.9 g, 0.1 mol) se calentaron a reflujo en benceno seco (250 ml) durante 24 horas.

La mezcla de reacción se enfrió y se precipitó, se separó bromhidruro de (4-metoxifenil)bencilamina mediante filtración. El extracto de benceno se concentró y se añadió cloruro de zinc fundido (40 g) en reflujo en etanol absoluto (125 ml) durante seis horas. La mezcla enfriada se convirtió en suspensión en H2O (250 ml) y se extrajo con (EÍ2?; 4 x 200 ml). Los extractos de éter combinados se lavaron con HCl al 5% (100 ml) seguido por una solución de salmuera y secado con MgSO4. El extracto de éter se evaporó bajo presión reducida para dar éster etílico crudo, el compuesto del título que se trató con una solución de KOH (50 g) en H20 (150 ml) y CH3OH (150 ml) a una temperatura de reflujo durante tres horas, la solución se evaporó hasta la sequedad bajo presión reducida, el residuo resultante se disolvió en H2O (250 ml) y la solución acuosa se extrajo con Et2O y se acidificó con HCl al 10%. El sólido resultante se secó para dar 22 g (33%) del compuesto del título y se recristalizó a partir de 1s.PrOH-H2), Pf 212-214°C. A una mezcla de hidruro de sodio (0.96 g, 0.04 mol) en benceno seco (200 ml) se añadió por porciones ácido 9-bencil-6-metoxi-1 ,2,3,4-tetrahidro-4-carboxílico (14.00 g, 0.04 mol) y la mezcla se agitó durante una hora. Cloruro de tionilo (3.00 ml, 0.04 mol) se añadió lentamente y la agitación continuó durante 30 minutos. La solución resultante se vertió en una solución de dimetilamina acuosa (40%) (36.50 ml) con un baño de enfriamiento en hielo. La mezcla se dividió en tres durante una hora, se lavó con 100 ml de H2O, NaHCO3, (50 ml) y una solución de salmuera saturada (50 ml), y se secó con MgSO , se diluyó con n-pentano (200 ml) y se enfrió para dar 4-dimetilaminocarbonil-9-bencil-6-metoxi-1 , 2,3,4-tetrahidrocarbozol (9.10 g, 60%) pf 153-355°C. A una solución agitada de LialH4 (4.71 g, 94.2 mmoles) en THF se añadió por porciones 4-dimetilaminocarbonil-9-bencil-6-metoxi-1 , 2, 3, 4-tetrahidrocarbazol (9.00 g, 24.8 mmoles) y la mezcla se calentó bajo reflujo durante 5 horas la mezcla de reacción se enfrió con agua (5.0 ml), una solución de NaOH (5.0 ml) se añadió y se filtró. El filtrado se evaporó hasta secar para dar 4-dimetilamino-9-benzil-6-metoxi-1 ,2,3,4-tetrahidrocarbazol (8g, 92%). La base libre se disolvió y convirtió a la sal usando clorhidrato etéreo y se recristalizó a partir de una mezcla de EtOH y Et2O. Pf 238-240°C.

EJEMPLO 5 El compuesto F se conoce y se preparó de conformidad con el siguiente procedimiento de patente 4-aminometil-9-bencil-1 ,2,3,4- tetrahidrocarbazolas, Patente de E.U.A. No. 3,939,177, del 17 de febrero de 1976.

EJEMPLO 6 El compuesto G de metal de sodio se añadió por porciones durante un periodo de 30 minutos a una solución agitada de 4- (dimetilaminometil)-9-bencil-1 ,2,3,4-tetrahidrocarbazol (4 g, 0.01 mol) en NH3 líquido (300 ml), se añadió NH CI(3.0 g) hasta que se disipó el collar azul de la mezcla. Se evaporó NH3, se añadió agua (50 ml) en la mezcla y se extrajo con CH2CL3. La porción orgánica combinada se lavó con agua (50 ml), salmuera (50 ml), se secó (MgSO4) se evaporó para dar un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía de columna (CHCLa/MeOH; 9:1 ) y se convirtió a una sal de oxalato. La sal se recristalizó a partir de Et2? anhidro/EtOH absoluto para dar 1.8 g del objetivo deseado como un polvo blanco. 1H-RMN (CDCb, base libre) d 8.10 (s, 1 H, NH), 7.20 (t, 1 H, ArH), 6.90 (d, 1 H, ArH), 6.70 (dd, 1 H, ArH), 3.80 (s, 3H, OCH3), 3.40 (t, 1 H, CH), 3.15 (d, 1 H, CH), 3.0 (t, 1 H, CH), 3.00 (t, 1 H, Ch), 2.82 (s, 6H, 2XCH3), 2.63- 2.73 (m, 2H, CH2), 2.23 (m, 1 H, CH) 1.8-2.0 (m, 3H, CH2-CH).

EJEMPLO 7 Una mezcla del compuesto G como base libre (0.5 g, 1.94 mmoles) e hidruro de sodio (60%) (0.085 g, 3.54 mmoles) se calentó a 100°C bajo nitrógeno hasta que la evolución del gas H2 se detuvo. El resultado se disolvió en DMF anhidro y cloruro de bencenesulfonilo (0.30 ml, 2.35 mmoles) se añadió gota a gota a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió una solución de NaHCOa saturada y se extrajo con CH2CI2 (3x25 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4 y el solvente se retiró bajo presión. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna (C^C /MeOH; 9:1 ) como eluyente para de un aceite (0.60 g, 76%) y se convirtió a sal de clorhidrato. La sal de clorhidrato se recristalizó a partir de etanol y éter anhidro; pf 259-261 °C.

EJEMPLO 8 Oxalato de 6.7,8.9-tetrahidro-2-metoxi-10-(N.N- dimetilaminoetil)piridoiri ,2-a1¡ndol-9-ona (I).

Una mezcla de 5-metoxi-N, N-dimetiltriptamina (base libre) (2.00 g, 9.17 mmoles) y NaH al 60% (0.41 g, 10.1 mmoles) se calentó a 100°C bajo N2 hasta que se detuvo la evolución del gas. La masa resultante se disolvió en DMF anhidro (25 ml) y g-butriolactona anhidra (1.4 ml, 18.2 mmoles) se añadió gota a gota a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 20 horas, se enfrió a 0°C, se acidificó mediante la adición de una sal etérea de HCl. Se añadió Et2O adicional a la suspensión resultante y el sobrenadante se decantó. El residuo se disolvió en PPE (52.5 ml) y CHCI3 5 (100 ml) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 3 horas bajo N2. La mezcla resultante se neutralizó mediante la adición de una solución de NaOH al 15% en una temperatura de baño de hielo, y se extrajo con CH2CI2. La porción orgánica se secó (MgSO4) y el solvente se retiró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel 10 de sílice (CH2CI2/MeOH; 20:1 ) para dar 0.52 g (20%) de 6,7,8,9-tetrahidro-2- metoxi-10-(N,N-dimetilaminoetil)piridol[1 ,2-a]indole-9-ona de base libre como un aceite amarillo. 1H-RMN (DMSO-de)D 7.35 (d, 1 H, J=8.79 Hz) 7.18 (s, 1 H), 6.88 (d, 1 H, J=8.85 Hz), 4.06 (t, 2H, J=6.60 Hz), 3.80 (s, 3H), 3.42-3.36 (m, 2H), 15 3.17-3.12 (m, 2H), 2.85 (s, 6H), 2.66-2.62 (m, 2H0.IR (CHCb) 1648a"-1. Una pequeña muestra se convirtió a la sal de oxalato; pf 191-192 °C EJEMPLO 9 Oxalato de 6.7.8.9-tetrahidro-2-metoxi-10-(N.N- 20 dimetilaminoetiPpiridoiri ,2-alindol (J).

Una solución de borano del .0 M/THF (2 ml, 2 mmoles) se añadió gota a gota bajo N2 a oxalato de 6,7,8,9,-tetrahidro-2-metoxi-10-(N,N- dimetílaminoetil)piridol[1 ,2-a]indol-9-ona (290 mg, 1.01 mmoles) enfriado en un baño de hielo. La mezcla de reacción se permitió agitar a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió acetona (3 ml), y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora para extinguir el reactivo de borano que no reaccionó. El solvente se retiró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (hexano/EtOAc; 4:1 ) para dar 207 mg (75%) de un aceite amarillo. 1H-RMN (DMSO-de) D 7.34 (d, 1 H, J=8.85 Hz), 7.21 (s, 1 H), 4.08 (t, 2H, J=6.65 Hz), 3.79 (s, 3H), 3.40-3.35 (m, 2H), 3.30-3.25 (m, 2H), 3.06-3.01 (m, 2H), 2.83 (s, 6H), 1.76-1.69 (m, 2H), 1.40-1.31 (m, 2H). Una pequeña porción se convirtió a su sal de oxalato; pf 114-115°C.

EJEMPLO 10 Oxalato de 1-Bencensulfonil-5-metoxi-N,N.-dimetiltriptamina Una mezcla de 5-metoxi-N, N-dimetiltriptamina (base libre) (4.35 g, 19.93 mmoles) y NaH al 60% (0.87 g, 21.75 mmoles) se calentó a 100°C bajo N2 hasta que se detuvo la evolución del gas H2. La masa resultante se disolvió en DMF anhidro (21 ml) y cloruro bencensulfonilo (2.4 ml, 21.94 mmoles) y NaH al 60% (0.87 g, 21.75 mmoles) se añadió gota a gota a 0°C. La mezcla de reacción se permitió agitar a temperatura ambiente durante la noche. Una solución de NaHCOa saturada se añadió y la mezcla se extrajo con CH2CI2. La porción orgánica se secó (MgSO ) y el solvente se retiró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (CH2CI2/MeOH; 9:1 ) para dar 4.39 g de un aceite (61%). 1H-RMN (CDCb) ü 7.89-7.87 (m, 1 H), 7.83 (d, 2H, J=8.0 Hz), 7.51 (t, 1 H, J=7.8 Hz), 7.34 (s, 1 H), 6.93-6.92 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.80 (t, 2H, J=7.8 Hz), 2.59 (t, 2H, J=7.8 Hz), 2.33 (s, 6H). IR CHCI3, 1357, 1115cm'1. La sal de oxalato se preparó y recristalizó a partir de una mezcla de acetona/Et2O; pf 224-226°C.

EJEMPL0 11 Triptamina de 1 -benzenesulfonil-5-metoxi-2-n-propil-N,N-dimetilo Una solución de 2.5 M de nBuLi (1.4 ml, 3.5 mmoles) se añadió gota a gota a una solución agitada de oxalato de 1-bencensulfonil-5-metoxi- N, N-dimetiltriptamina (base libre) (1.00 g, 2.79 mmoles) en DME (4 ml) a una temperatura de -10°C, bajo N2. Se permitió la agitación de la solución resultante durante 10 minutos adicionales a -10°C, y después se añadió nPrl (0.35 ml, 3.59 mmoles). La mezcla de reacción se permitió agitar durante una hora a -10°C. Se añadió una solución saturada de NaHCO3 y la mezcla de reacción se extrajo con CHC . La porción orgánica se lavó con salmuera y se secó (MgSO4); el solvente se retiró bajo presión reducida y el residuo se mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (CH2CI2/MeOH; 30:1 ). Para dar 0.19 g de un aceite amarillo brillante. 1H-RMN (CDCb) D 8.06 (d, 1 H, J=8.79 Hz), 7.62 (d, 2H, J=8.22 Hz), 7.51-7.46 (m, 1 H), 6.89-6.85 (m, 1 H), 3.85 (s, 3H), 2.96-2.89 (m, 4H), 2.63-2.57 (m, 2H), 2.48 (s, 6H), 6.87, 1.73 (q, 2H, J=7.51 Hz), 1.00 (t, 3H, J=7.51 Hz). IR CHCb, 1355 cm"1.

EJEMPLO 12 Unión del derivado de 5-HT al receptor de 5-HTfi La prueba de unión empleó 5-HT6 humano transfectado de manera estable a células HKE 293 embriónicas humanas de riñon con dietilamida de ácido lisérgico [3H] (70 Ci/mmoles; Dupont NEN) como radioligando. El radioligando se diluyó en un regulador de pH de incubación en frascos de vidrio de borosilicato y se protegieron de la luz. Se disolvieron agentes competitivos (una solución madre de 1 mM) en DMSO o solución salina y se almacenaron a -20°C. Las diluciones de los compuestos se realizaron usando un regulador de pH de incubación en placas de 96 cavidades y se mezclaron por pipeteo de canales múltiples. Las diluciones en serie (1 en 4) iniciaron con una concentración final de 10,000 nM. Las concentraciones finales >10,000 nM se prepararon de manera individual a partir de una solución madre de 1 mM. No se definió unión específica mediante el sulfato de criatinina-serotonina de 100mM (Research Biochemicals) recién preparado en un regulador de pH de incubación al momento de cada incubación, y se protegió de la luz. Los volúmenes de reacción fueron como se indican a continuación: 200 ml de regulador de pH de incubación (tris de 50 mM, EDTA de 0.5mM, MgCI2 de 10 mM), pH 7.4 a 22 °C, 100 ml de un agente de prueba o serotonina (100 mM) o regulador de pH, 100 ml de dietilamida de ácido lisérgico [3H] (concentración final de 2nM) y 100 ml de una preparación de membrana (15 mg de proteína). La incubación inició para la adición por un homogenado de membrana y las placas en vórtex. Las placas se incubaron con protección de la luz, con agitación a 37°C durante 60 minutos. La reacción de unión se detuvo por filtración. Las muestras se filtraron bajo vacío sobre 96 filtros de fibra de vidrio de 96 cavidades, se pre-enjuagaron en PEÍ al 0.3% en regulador de pH tris de 50 mM (pH 7.4) durante por lo menos 1 hora y después se lavaron 6 veces con 1 ml de tris de 50 mM frío (4°C, pH 7.4) usando un cultivador Packard Filtermate. Las placas de un solo filtro se secaron durante la noche a 37°C en un incubador seco. Los fondos de un solo filtro se sellaron y se añadió 35 ml de Packard MicroScint. Se permitió que las placas se equilibraran durante 1 hora y entonces se sellaron usando Packard TopSeal P con Packard Píate Micromate 496. Las placas se contaron mediante escintilación líquida de espectrometría. Cada cavidad se contó durante 3 minutos. Los compuestos inicialmente se probaron en 1000 y 100 nM. Si un compuesto ocasionó por lo menos 80% de inhibición de la unión de dietilamida de ácido lisérgico [3H] a 1000 nM, se realizaron más prueba y se determinó un Ki. El margen de concentraciones elegido fue tal que la concentración media produciría aproximadamente una inhibición del 50%.

CUADRO 1 El cuadro 1 muestra la afinidad por los receptores de 5-HTß de los compuestos reclamados derivados a partir de la fórmula general en la fórmula 2 anterior.

CUADRO 2 El cuadro 2 muestra los resultados de afinidad para los receptores de 5-HTT de los compuestos reclamados derivados de la fórmula general en la fórmula 3 mencionada en párrafos anteriores.

CUADRO 3 El cuadro 3 muestra los resultados de afinidad de los receptores de 5-HT6 de los compuestos reclamados derivados de la fórmula general de la fórmula 4 mencionada en párrafos anteriores.

EJEMPLO 13 Caracterización de la selectividad por 5HTg Los compuestos seleccionados se examinaron para determinar su especificidad de unión al receptor de 5-HTß. Los compuestos se examinaron en más de 30 poblaciones de receptor. Las pruebas para los siguientes receptores se realizaron como lo indica el programa de clasificación de fármacos psicoactivos de NIMH (Psychoactive Drug Screening Program). Los compuestos fallaron en el desplazamiento del radioligando (es decir, un desplazamiento <50%) en una concentración de 10,000 nM en la mayoría de los receptores. En donde se observa más del 50% de desplazamiento, los valores de Ki se determinaron y los datos se reportaron en el siguiente cuadro. Puede observarse que los compuestos son selectivos para los receptores de 5-HT6.

CUADRO 4 El cuadro 4 muestra la selectivilidad-5 de diversos compuestos de la invención 10 15 • Los compuestos mostraron los valores Ki de >10,000 nM en las 20 siguientes poblaciones de receptores: receptores de histamina, NMDA, PCP, acetilcolina, opiato, y vasopresina. Los valores de Ki fueron >10,000 nM para los compuestos A y B en los receptores de hD1 , rD2, rD3, rD4, y hD5, y 10,000 nM para D en los receptores hD1 , rD2 y rD4. El compuesto D produjo ?i^* una inhibición del 70% en los receptores rD3 y hD5. NET y SERT representan los transportadores de norepinefrina y serotonina. Los valores Ki para los tres compuestos fueron >10,000 en el transportador de dopamina. 5 EJEMPL0 14 Pruebas de activación de cAMP.

Los receptores de 5-HTT humano expresados de manera estable en las células 293 HEK se hicieron crecer en placas de 24 cavidades en casi 10 la confluencia y 18 horas antes de la prueba el medio se reemplazó con DMEM que contiene suero de ternera fetal díalizado al 10%. Para la prueba, el medio se aspiró y se reemplazó con DMEM fresco sin suero y se incubó a varias concentraciones de compuesto de la invención en un volumen total de 0.5 ml durante 15 minutos. La prueba terminó por aspiración y la adición de 15 ácido tricloroacético al 10% (TCA). El extracto de TCA se usó para la determinación de cAMP (los datos representan la media de N=4 determinaciones separadas). Los resultados de la activación de cAMP por diversos compuestos de la invención se muestran en la figura 1 anexa. Aunque la invención se ha descrito en términos de sus 20 modalidades preferidas, los expertos en la técnica reconocerán que la invención puede practicarse con modificaciones dentro del espíritu y alcance de las reivindicaciones anexas. De esta manera, la presente invención no debe estar limitada a las modalidades que se describieron anteriormente, debe incluir todas las modificaciones y equivalentes de la misma dentro del espíritu y alcance de la descripción provista en el presente documento.

Claims (1)

1. i- - NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 1.- Un compuesto que tiene la fórmula en donde, Ri se selecciona que consiste en hidrógeno, metilo y alquilos inferiores diferentes a metilo y puede ser diferente en cada ubicación, R2 se selecciona del grupo que consiste en etilo, propilo y arilos y R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, etilo, metoxi y alquilos menores. 15 2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 es etilo. ula en donde, R-i se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, y metilo y alquilos menores diferentes a metilo y pueden ser iguales o diferentes en cada ubicación; R se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilos menores, arilos, siempre y cuando R4 sea diferente a CH2-fenilo y heteroarilos; y R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, metoxi y aiquilos menores. 4.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque * se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y S?2-fenilo. 10 5.- Un compuesto que tiene la fórmula • en donde, R-i se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo y alquilos menores diferentes a metilo y puede ser iguales o diferentes en cada ubicación; R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, 20 metoxi, y alquilos menores, X se selecciona del grupo que consiste en oxígeno y 2H. 6.- Una composición efectiva terapéuticamente para tratar una condición mediada por el receptor de 5-HT6, que comprende un vehículo aceptable farmacéuticamente y un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: - y en donde X se selecciona del grupo que consiste en oxígeno y 2H; Ri se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, alquilos menores 20 diferentes a metilo y pueden ser iguales o diferentes en cada ubicación; R2 se selecciona del grupo que consiste en etilo, propilo, arilos y alcarilos; R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, metoxi alquilos menores; y R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilos menores, arilos, siempre y cuando R sea diferente a CH2-fenilo, y heteroarilos. 7.- La composición de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada además porque R-t se selecciona del grupo que consiste en S?2-fenilo e hidrógeno. 8.- El uso de un compuesto seleccionado del grupo que consiste en donde X se selecciona del grupo que consiste en oxígeno y 2H; R-i se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, alquilos menores y es diferente a metilo y puede ser igual o diferente en cada ubicación; R2 se selecciona del grupo que consiste en etilo, propilo y arilos; R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, metoxi y alquilos menores; y R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilos menores, arilos, • siempre y cuando R sea diferente a CH2-fenilo, y heteroarilos, en combinación con un vehículo aceptable farmacéuticamente para la elaboración de una composición farmacéutica para el tratamiento de una condición medida por el receptor de 5-HT6. 9.- Un método para probar antagonistas y antagonistas con 10 selectividad por el receptor de 5-HT6 que comprende: administrar a un animal experimental un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: ¡MiiillfíiitÉÍ i i-i i lilir --. „^^^.t^á-iJj--M, en donde X se selecciona del grupo que consiste en oxígeno y 2H; Ri se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo y alquilos menores diferentes a metilo y pueden ser iguales o diferentes en cada ubicación; R2 se i ^ selecciona del grupo que consiste en etilo, propilo, arilos; R3 se selecciona del 5 grupo que consiste en hidrógeno, metilo, metoxi y alquilos menores; y F se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilos menores, arilos siempre y cuando R* sea diferente a CH2-fenilo, y heteroarilos; observar las respuestas de dicho animal experimental; comparar dichas respuestas de dicho animal experimental con una respuesta de control de un animal de --Á 10 control; y administrar un compuesto de actividad desconocida a dicho animal experimental. 10.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 , 3 y 5 caracterizado además porque comprende una radiomarca. 15 11.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Ri es metilo, R2 se selecciona del grupo que consiste en metilo y fenilo y R3 es metoxi. 12.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , seleccionado del grupo que consiste en maleato de 2-etilo-5-metoxi-N,N- 20 dimetiltriptaminay oxalato de 5-metoxi-2-fenil-N, N-dimetiltriptamina. 13.- Una composición farmacéutica que comprende un vehículo aceptable farmacéuticamente y un compuesto de conformidad con la reivindicación 12. 14.- El uso de una composición farmacéutica como se reclama en la reivindicación 13 para la elaboración de un medicamento para tratar a un paciente para el cual un antagonista receptor de 5-HT6 se indica. • •