MX2015001188A - Formulacion farmaceutica para reducir la frecuencia de miccion y metodo de uso de la misma. - Google Patents

Abstract

Se describen métodos y composiciones para reducir la frecuencia de micción. Un método comprende administrar a un sujeto en necesidad de lo mismo una cantidad efectiva de una composición farmacéutica que comprende uno o más agentes analgésicos.

Description

FORMULACIÓN FARMACÉUTICA PARA REDUCIR LA FRECUENCIA DE CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente solicitud se refiere en general a métodos y composiciones para inhibir los músculos lisos de la vejiga urinaria y en particular, a métodos y composiciones para reducir la frecuencia de micción.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El músculo detrusor es una capa de la pared de la vejiga urinaria elaborado de fibras de músculo liso arregladas en fajos espirales, longitudinales y circulares. Cuando la vejiga se extiende, esto da la señal al sistema nervioso parasimpático de contraer el músculo detrusor. Esto alienta a la vejiga a expulsar la orina a través de la uretra.

Para que la orina salga de la vejiga, tanto el esfínter interno controlado de manera autonómica como el esfínter externo controlado de manera voluntaria se deben abrir. Los problemas con estos músculos pueden conducir a incontinencia. Si la cantidad de orina alcanza 100% de la capacidad absoluta de la vejiga urinaria, el esfínter voluntario llega a ser involuntario y se expulsará instantáneamente la orina.

La vejiga urinaria del adulto humano retiene usualmente cerca de 300-350 mi de orina (el volumen de trabajo), pero una vejiga llena de un adulto puede retener hasta aproximadamente 1000 mi (el volumen absoluto), variando entre los individuos. Conforme se acumula la orina, los rebordes producidos por el pliegue de la pared de la vejiga (rugosidades) se aplanan y la pared de la vejiga se adelgaza conforme se estira, permitiendo que la vejiga almacene mayores cantidades de orina sin un aumento significativo de la presión interna.

En la mayoría de los individuos, el deseo de orinar inicia usualmente cuando el volumen de la orina en la vejiga alcanza alrededor de 200 mi. En esta etapa, es fácil para el sujeto, si desea, resistir el deseo de orinar. Conforme la vejiga continúa llenándose, llega a ser más fuerte el deseo de orinar y es más difícil de ignorar. Eventualmente, la vejiga se llenará al punto donde el deseo de orinar llega a ser abrumador, y el sujeto no será capaz por más tiempo de ignorarlo. En algunos individuos, este deseo de orinar empieza cuando la vejiga está a menos de 100% de llenado completo con relación a su volumen de trabajo. Este deseo incrementado de orinar puede interferir con las actividades normales, incluyendo la capacidad para dormir períodos ininterrumpidos suficientes de descanso. En algunos casos, este deseo incrementado de orinar se puede asociar con condiciones médicas tal como hiperplasia prostética benigna o cáncer de próstata en hombres, o embarazo en mujeres. Sin embargo, el deseo incrementado de orinar también se presenta en individuos, tanto varones como mujeres, gue no están afectados por otra condición médica.

Por consiguiente, existe la necesidad de composiciones y métodos para el tratamiento de varones y mujeres quienes padecen de un deseo de orinar cuando la vejiga está a menos de 100% completa de orina con relación a su volumen de trabajo. Estas composiciones y métodos se necesitan para la inhibición de la contracción muscular a fin de permitir en los sujetos que el deseo de orinar inicie cuando el volumen de la orina en la vejiga excede alrededor de 100% su volumen de trabajo.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Un aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de micción en un sujeto. El método comprende administrar a un sujeto en necesidad de lo mismo una cantidad efectiva de uno o más agentes analgésicos y una cantidad efectiva de tadalafilo.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de micción en un sujeto. El método comprende administrar a un sujeto en necesidad de lo mismo una composición farmacéutica que comprende un principio activo que comprende uno o más agentes analgésicos en una cantidad de 1-2000 mg por agente, y un inhibidor de fosfodiesterasa tipo 5 (inhibidor de PDE 5), en donde el uno o más agentes analgésicos se seleccionan del grupo que consiste de aspirina, ibuprofeno, naproxeno, naproxeno sódico, indometacina, nabumetona, y acetaminofeno.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de micción en un sujeto. El método comprende administrar a un sujeto en necesidad de lo mismo una composición farmacéutica que comprende un primer principio activo que comprende uno o más agentes analgésicos y tadalafilo, y un segundo principio activo que comprende uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste de agentes analgésicos, agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espasmoliticos, inhibidores de PDE 5 y zolpidem, en donde el primer principio activo se formula para liberación inmediata y en donde el segundo principio activo se formula para liberación prolongada.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a una composición farmacéutica que comprende uno o más agentes analgésicos, un inhibidor de PDE 5 y un portador farmacéuticamente aceptable.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Las Figuras 1A y IB son diagramas que muestran que los analgésicos regulan la expresión de moléculas coestimuladoras por células macrófagas Raw 264 en la ausencia (figura 1A) o presencia (figura IB) de LPS. Las células fueron cultivos durante 24 horas en la presencia de analgésico solo o junto con LPS de Salmonella typhimurium (0.05 yg/ml). Los resultados son % relativo medio de células CD40+CD80+.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La siguiente descripción detallada se presenta para permitir que cualquier persona experta en la téenica haga y use la invención. Para propósitos de explicación, se expone nomenclatura especifica para proporcionar un entendimiento completo de la presente invención. Sin embargo, será evidente para un experto en la técnica que no se requieren estos detalles específicos para practicar la invención. Las descripciones de solicitudes específicas se proporcionan solo como ejemplos representativos. Se propone que la presente invención se limite a las modalidades mostradas, pero se va a conceder el alcance más amplio posible consistente con los principios y características descritas en la presente.

Como se usa en la presente, el término "una cantidad efectiva" significa una cantidad necesaria para lograr un resultado deseado.

Como se usa en la presente, el término "analgésico" se refiere a agentes, compuestos o fármacos usados para aliviar dolor e inclusive compuestos anti inflamatorios. Los agentes, compuestos o fármacos anti inflamatorios y/o analgésicos de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, fármacos anti-inflamatorios no esferoidales (NSAID), salicilatos, aspirina, ácido salicilico, salicilato de metilo, diflunisal, salsalato, olsalazina, sulfasalazina, derivados de para-aminofenol, acetanilida, acetaminofen, fenacetina, fenamatos, ácido mefenámico, meclofenamato, meclofenamato sódico, derivados de ácido heteroaril-acético, tolmetina, ketorolaco, diclofenaco, derivados de ácido propiónico, ibuprofeno, naproxeno sódico, naproxeno, fenoprofeno, cetoprofeno, flurbiprofeno, oxaprozina; ácidos enólicos, derivados de oxicam, piroxicam, meloxicam, tenoxicam, ampiroxicam, droxicam, pivoxicam, derivados de pirazolon, fenilbutazona, oxifenbutazona, antipirina, aminopirina, dipirona, coxibs, celecoxib, rofecoxib, nabumetona, apazona, indometacina, sulindac, etodolac, ácido isobutilfenil-propiónico, lumiracoxib, etoricoxib, parecoxib, valdecoxib, tiracoxib, etodolaco, darbufelona, dexcetoprofeno, aceclofenaco, licofelona, bromfenaco, loxoprofeno, pranoprofeno, piroxicam, nimesulida, cizolirina, 3-formilamino-7-metilsulfonilamino-6-fenoxi-4H-1-benzopiran-4-ona, meloxicam, lornoxicam, indobufeno-d, mofezolaco, amtolmetina, pranoprofeno, ácido tolfenámico, suprofeno, oxaprozina, zaltoprofeno, alminoprofeno, flurbiprofeno, ácido tiaprofénico, sales farmacológicas de estos, hidratos de los mismos y solvatos de los mismos.

Como se usa en la presente, el término "coxib" se refiere a una composición de compuestos que es capaz de inhibir la actividad o expresión de enzimas de C0X2 o es capaz de inhibir o reducir la severidad, incluyendo dolor e hinchazón de una respuesta inflamatoria severa.

Como se usa en la presente, el término "derivado" se refiere a un compuesto químicamente modificado donde la modificación se considera de rutina por un químico experto en la téenica, tal como un éster o una amida de un ácido, o grupos protectores tal como un grupo bencilo para un alcohol o tiol, o un grupo ter-butoxicarbonilo para una amina.

Como se usa en la presente, el término "análogo" se refiere a un compuesto que comprende una forma químicamente modificada de un compuesto específico o clase de este y que mantiene las actividades farmacéuticas y/o farmacológicas características del compuesto o clase.

Como se usa en la presente, el término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos descritos en donde el compuesto de origen se modifica al producir sales ácidas o básicas de estos. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de ácidos orgánicos o minerales de residuos básicos tal como aminas, sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos tal como ácidos carboxilicos, y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales convencionales no tóxicas o las sales de amonio cuaternario del compuesto de origen formado, por ejemplo, de ácidos orgánicos o inorgánicos no tóxicos. Por ejemplo, estas sales no tóxicas convencionales incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfámico, ácido fosfórico, ácido nítrico, y similares y las sales preparadas de ácidos orgánicos tal como ácido acético, ácido propiónico, ácido succínico, ácido glicólico, ácido esteárico, ácido láctico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido pamoico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, ácido fenilacético, ácido glutámico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, ácido fumárico, ácido toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido disulfónico, ácido oxálico, ácido isetiónico, y similares.

Como se usa en la presente, la frase "farmacéuticamente aceptable" se usa con referencia a compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosis que son, dentro del alcance del alcance del juicio médico razonable, adecuados para el uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica, u otros problemas o complicaciones proporcionados con una relación razonable de beneficio/riesgo.

Como se usa en la presente, el término "liberación prolongada", también conocida como liberación sostenida (SR), acción sostenida (SA), liberación en tiempo (CR), liberación controlada (CR), liberación modificada (MR), o liberación continua (CR), se refiere a un mecanismo usado en tabletas o cápsulas de medicina para disolver lentamente y liberar el principio activo con el paso del tiempo. Las ventajas de las tabletas o cápsulas de liberación prolongada son que pueden ser tomadas frecuentemente de forma menos frecuente que las formulaciones de liberación inmediata del mismo fármaco y que pueden mantener niveles más estables del fármaco en el torrente sanguíneo, extendiendo de este modo la duración de la acción del fármaco y disminuyendo la cantidad pico de fármaco en el torrente sanguíneo.

Como se usa en la presente, el término "liberación retrasada" se refiere a un perfil de liberación de fármaco, de modo que la liberación de los principios activos de una composición farmacéutica se retrasa o pospone durante un período dado de tiempo (por ejemplo, el período de retraso) después de la administración de la composición farmacéutica.

El término "liberación inmediata" se usa en la presente con referencia a una formulación de fármaco que no contiene un material de control en la velocidad de disolución. No hay sustancialmente retraso en la liberación de los agentes activos después de la administración de una formulación de liberación inmediata. Un revestimiento de liberación inmediata puede incluir materiales adecuados que se disuelven inmediatamente después de la administración para liberar en el mismo los contenidos del fármaco. En algunas modalidades, el término "liberación inmediata" se usa con referencia a una formulación de fármaco que libera el principio activo dentro de un período de dos horas de administración.

Un aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de micción al administrar a una persona en necesidad de esto una composición farmacéutica. La composición farmacéutica comprende uno o más agentes analgésicos, uno o más inhibidores de fosfodiesterasa tipo 5 (inhibidores PDE 5) y, opcionalmente, uno o más agentes antiuscarínicos, uno o más antidiuréticos y/o uno o más espasmolíticos. La composición farmacéutica se puede formular para liberación inmediata, liberación prolongada, liberación retrasada, o combinaciones de esto.

En una modalidad, la composición farmacéutica se formula para liberación prolongada al incrustar el principio activo en una matriz de sustancias insolubles, tal como acrilicos o quitina. Una forma de liberación prolongada se diseña para liberar el compuesto analgésico a una velocidad predeterminada al mantener un nivel constante de fármaco durante un periodo específico de tiempo. Esto se puede lograr a través de una variedad de formulaciones, incluyendo, pero no limitado a, liposomas y conjugados de fármaco-polímero, tal como hidrogeles.

Una formulación de liberación prolongada se puede diseñar para liberar los agentes activos a una velocidad predeterminada para mantener un nivel constante de fármaco durante un período especificado, prolongado de tiempo, tal como hasta aproximadamente 12 horas, aproximadamente 11 horas, aproximadamente 10 horas, aproximadamente 9 horas, aproximadamente 8 horas, aproximadamente 7 horas, aproximadamente 6 horas, aproximadamente 5 horas, aproximadamente 4 horas, aproximadamente 3 horas, aproximadamente 2 horas o aproximadamente 1 hora después de la administración, o después de un período de retraso asociado con una liberación retrasada del fármaco.

En ciertas modalidades, los agentes activos se liberan durante un intervalo de tiempo de entre aproximadamente 2 a aproximadamente 12 horas. De manera alternativa, los agentes activos se pueden liberar durante aproximadamente 3, aproximadamente 4, aproximadamente 5, aproximadamente 6, aproximadamente 7, aproximadamente 8, aproximadamente 9, aproximadamente 10 horas, aproximadamente 11 horas, o aproximadamente 12 horas. En aun otras modalidades, los agentes activos se liberan durante un periodo de tiempo de entre aproximadamente 5 a aproximadamente 8 horas después de la administración.

En algunas modalidades, la formulación de liberación prolongada comprende un núcleo activo comprendido de una o más partículas inertes, cada una en la forma de una cuenta, gránulo, píldora, partícula granular, microcápsula, microesfera, microgránulo, nanocápsula, o nanoesfera revestida en sus superficies con fármacos en la forma de, por ejemplo, un revestimiento que contiene fármaco o composición formadora de película usando, por ejemplo, téenicas de lecho fluido u otras metodologías conocidas por aquellos expertos en la técnica. La partícula inerte puede ser de varios tamaños, en tanto que sea suficientemente grande para permanecer pobremente disuelta. De manera alternativa, el núcleo activo se puede preparar al granular y moler y/o por extrusión y esferonización de una composición de polímero que contiene la sustancia de fármaco.

Los agentes activos se pueden introducir al portador inerte por téenicas conocidas por aquellos expertos en la técnica, tal como estratificación de fármaco, revestimiento en polvo, extrusión/esferonización, granulación o compactación con rodillo. La cantidad de fármaco en el núcleo dependerá de la dosis que se requiera y varía típicamente de aproximadamente 5 a 90% en peso. En general, el revestimiento polimérico en el núcleo activo será de aproximadamente 1 a 50% en base al peso de la partícula revestida, dependiendo el tiempo de retraso requerido y/o de los polímeros y solventes de revestimiento, elegidos. Aquellos expertos en la técnica serán capaces de seleccionar una cantidad apropiada de fármaco para revestimiento sobre o incorporación en el núcleo para lograr la dosis deseada. En una modalidad, el núcleo inactivo puede ser una esfera de azúcar o un cristal de amortiguador o un cristal de amortiguador encapsulado, tal como carbonato de calcio, bicarbonato de sodio, ácido fumárico, ácido tartárico, etcétera, lo que altera el microambiente del fármaco para facilitar su liberación.

Las formulaciones de liberación prolongada pueden utilizar una variedad de revestimientos de liberación prolongada o mecanismos que facilitan la liberación gradual de los agentes activos con el paso del tiempo. En algunas modalidades, el agente de liberación prolongada comprende un polímero que controla la liberación por liberación controlada por disolución. En una modalidad particular, los agentes activos se incorporan en una matriz que comprende un polímero insoluble y partículas o gránulos de fármaco revestidos con materiales poliméricos de espesor variable. El material polimérico puede comprender una barrera de lípido que comprende un material ceroso, tal como cera de carnauba, cera de abeja, cera de esperma de ballena, cera de candelilla, cera de goma laca, manteca de cacao, alcohol cetoestearílico, aceites vegetales parcialmente hidrogenados, ceresina, cera parafina, ceresina, alcohol miristílico, alcohol estearílico, alcohol cetílico, y ácido esteárico, junto con agentes tensioactivos, tal como monooleato de polioxietilen-sorbitán. Cuando se pone en contacto con un medio acuoso, tal como fluidos biológicos, el revestimiento de polímero se emulsiona o se erosiona después de un tiempo predeterminado de retraso dependiendo del espesor del revestimiento de polímero. El tiempo de retraso es independiente de la motilidad gastrointestinal, pH, o residencia gástrica.

En otras modalidades, el agente de liberación prolongada comprende una matriz polimérica que efectúa la liberación controlada por difusión. La matriz puede comprender uno o más polímeros formadores de matriz, hidrófilos y/o hinchables con agua, polímeros dependientes de pH y/o polímeros independientes del pH.

En una modalidad, la formulación de liberación prolongada comprende un polímero formador de matriz soluble en agua o hinchable con agua, que contiene opcionalmente uno o más agentes mejoradores de solubilidad y/o agentes promotores de liberación. En la solubilización del polímero soluble en agua, los agentes activos se disuelven (si son solubles) y se difunden gradualmente a través de la porción hidratada de la matriz. La capa de gel crece con el tiempo conforme más agua se permea en el núcleo de la matriz, incrementado el espesor de la capa de gel y proporcionando una barrera de difusión para liberación de fármaco. Conforme la capa exterior se llega a hidratar completamente, las cadenas de polímero se llegan a relajar completamente y no pueden mantener por más tiempo la integridad de la capa de gel, conduciendo al desenmarañamiento y erosión del polímero hidratado exterior en la superficie de la matriz. El agua continua penetrando hacia el núcleo a través de la capa de gel, hasta que ha erosionado completamente. En tanto que se liberan los fármacos solubles por esta combinación de mecanismos de difusión y erosión, la erosión es el mecanismo predominante para fármacos insolubles, a pesar de la dosis.

De manera similar, los polímeros hinchables con agua se hidratan e hinchan típicamente en fluidos biológicos formando una estructura de matriz homogénea que mantiene su forma durante la liberación del fármaco y sirve como un portador para el fármaco, mejoradores de solubilidad y/o promotores de liberación. La fase inicial de hidratación del polímero de matriz da por resultado una liberación lenta del fármaco (fase de retraso). Una vez que el polímero hinchable con agua se hidrata e hincha completamente, el agua dentro de la matriz puede disolver de manera similar la sustancia de fármaco y permitir su difusión a través del revestimiento de matriz.

Adicionalmente, la porosidad de la matriz se puede incrementar debido a la lixiviación de promotores de liberación dependientes del pH para liberar el fármaco a una velocidad más rápida. La velocidad de liberación del fármaco entonces llega a ser constante y es una función de la difusión del fármaco a través del gel de polímero hidratado. La velocidad de liberación de la matriz es dependiente de varios factores, incluyendo nivel y tipo de polímero, solubilidad y dosis de fármaco, relación de polímero a fármaco, nivel y tipo de agente relleno, relación de polímero a agente de relleno, tamaño de partícula de fármaco y polímero, y porosidad y forma de la matriz.

Los polímeros formadores de matriz, hidrófilos y/o hinchables con agua de ejemplo, incluyen, pero no se limitan a, polímeros celulósicos, incluyendo hidroxialquil-celulosas y carboxialquil-celulosas tal como hidroxipropilmetil-celulosa (HPMC), hidroxipropil-celulosa (HPC), hidroxietil-celulosa (HEC), metilcelulosa (MC), carboximetil-celulosa (CMC); celulosa en polvo tal como celulosa microcristalina, acetato de celulosa, etilcelulosa, sales de estos, y combinaciones de los mismos; alginatos; gomas incluyendo gomas de heteropolisacárido y gomas de homopolisacárido tal como xantano, goma de chantano, de tragacanto, pectina, de acacia, de karaya, alginatos, agar, guar, hidroxipropil-guar, Veegum, carragenina, goma de semilla de algarroba, goma de gellan, y derivados de estos mismos; resinas acrílicas incluyendo polímeros y copolímeros de ácido acrílico, ácido metacrílico, acrilato de metilo y metacrilato de metilo; y derivados reticulados de ácido poliacrílico, tal como carbómeros (por ejemplo, CARB0P0LMR, incluyendo CARBOPOLMR 71G NF, que está disponible en varios grados de peso molecular de Noveon, Inc., Cincinnati, OH); carragenina; acetato de polivinilo (por ejemplo, KollidonMR SR.); y polivinil pirrolidona y sus derivados, tal como crospovidona, óxidos de polietileno, y el alcohol polivinílico. Los polímeros hinchables con agua e hidrófilos preferidos incluyen los polímeros celulósicos, especialmente HPMC.

La formulación de liberación prolongada puede comprender además al menos un aglutinante que es capaz de reticular el compuesto hidrófilo para formar una matriz de polímero hidrófilo (es decir, una matriz de gel) en un medio acuoso, incluyendo fluidos biológicos.

Los aglutinantes de ejemplo incluyen homopolisacáridos tal como gomas de galactomanano, goma de guar, goma de hidroxipropil-guar, hidroxipropilcelulosa (HPC; por ejemplo, Klucel EXF), y goma de semillas de algarroba. En otras modalidades, el aglutinante es un derivado de ácido algínico, HPC o celulosa microcristalizada (MCC). Otros aglutinantes incluyen, pero no se limitan a, almidones, celulosa microcristalina, hidroxipropil celulosa, hidroxietil celulosa, hidroxipropilmetil celulosa, y polivinilpirrolidona.

En una modalidad, el método de introducción es estratificación de fármaco al rociar una suspensión de agentes activos y un aglutinante en el portador inerte.

El aglutinante puede estar presente en la formulación de la cuenta en una cantidad de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 15% en peso y de manera preferente de aproximadamente 0.2% a aproximadamente 10% en peso.

En algunas modalidades, la matriz de polímero hidrófilo puede incluir además un polímero iónico, un polímero no iónico, o polímero hidrófobo insoluble en agua para proporcionar una capa de gel más fuerte y/o para reducir la cantidad y dimensiones de poros en la matriz para desacelerar las velocidades de difusión y erosión y liberación concomitante de los agentes activos. Esto puede suprimir adicionalmente el efecto inicial de ráfaga y producir una "liberación de orden cero" más estable de los agentes activos.

Los polímeros iónicos de ejemplo para desacelerar la velocidad de disolución incluyen polímeros tanto aniónicos como catiónicos. Los polímeros aniónicos de ejemplo incluyen, por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica (Na CMC); alginato de sodio; polímeros de ácido acrílico o carbómeros (por ejemplo, CARB0P0LMR 934, 940, 974P NF); polímeros entéricos tal como ftalato de acetato de polivinilo (PVAP), copolímeros de ácido metacrílico (por ejemplo, EUDRAGITMR® L100, L 30D 55, A, y FS 30D), y succinato de acetato de hipromelosa (Aquat HPMCAS); y goma de xantano. Los polímeros catiónicos de ejemplo incluyen, por ejemplo, copolímero de metacrilato de dimetilaminoetilo (por ejemplo, EUDRAGITMR E100). La incorporación de polímeros aniónicos, particularmente polímeros entéricos, es útil para desarrollar un perfil de liberación independiente del pH para fármacos débilmente básicos en comparación al polímero hidrófilo solo.

Los polímeros no iióónniiccooss ddee ejemplo para desacelerar la velocidad de disolución, incluyen, por ejemplo, hidroxipropilcelulosa (HPC) y óxido de polietileno (PEO) (por ejemplo, P0LY0XMR).

Los polímeros hidrófobos de ejemplo incluyen etilcelulosa (por ejemplo, ETHOCEL1®, SureleaseMR), acetato de celulosa, copolímeros de ácido metacrílico (por ejemplo, EUDRAGITMR NE 30D), copolímeros de amonio-metacrilato (por ejemplo, Eudragit RL-100 o RS PO100), acetato de polivinilo, monoestearato de glicerilo, ácidos grasos tal como citrato de acetil-tributilo, y combinaciones y derivados de estos.

El polímero hinchable se puede incorporar en la formulación en una proporción de 1% a 50% en peso, de manera preferente de 5% a 40% en peso, de manera más preferente de 5% a 20% en peso. Los polímeros hinchables y aglutinantes se pueden incorporar en la formulación ya sea antes o después de la granulación. Los polímeros también se pueden dispersar en solventes orgánicos o hidro-alcoholes y rociar durante la granulación.

Los agentes promotores de liberación de ejemplo incluyen polímeros entéricos dependientes del pH que permanecen intactos a valor de pH menor de aproximadamente 4.0 y se disuelven a valores de pH superiores a 4.0, de manera preferente superiores a 5.0, de manera mucho más preferente cerca de 6.0, se consideran útiles como agentes promotores de liberación para esta invención. Los polímeros dependientes del pH de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, copolímeros de ácido metacrílico; copolí eros de ácido metacrílico-metacrilato de metilo (por ejemplo, EUDRAGITMR L100 (Tipo A), EUDRAGITMR S100 (Tipo B), Rohm GmbH, Alemania); copolímeros de ácido metacrílico-acrilato de metilo (por ejemplo, EUDRAGITMR L100-55 (Tipo C) y EUDRAGITMR L30D-55 dispersión de copolímeros, Rohm GmbH, Alemania); copolímeros de ácido metacrílico-metacrilato de metilo y metacrilato de metilo (EUDRAGITMR FS); terpolímeros de ácido metacrílico, metacrilato y acrilato de etilo; ftalatos de acetato de celulosa (CAP); ftalato de hidroxipropil-metilcelulosa (HPMCP) (por ejemplo, HP-55, HP-50, HP-55S, Shinetsu Chemical, Japón); ftalatos de acetato de polivinilo (PVAP) (por ejemplo, COATERICMR, OPADRYMR entérico blanco OY-P-7171); acetato de polivinilbutirato; succinatos de acetato de celulosa (CAS); succinato de acetato de hidroxipropil-metilcelulosa (HPMCAS) (por ejemplo, HPMCAS Grado LF, Grado MF y Grado HF, incluyendo AQOATMR LF y MF AQOATMR, Shin-Etsu Chemical, Japón); goma laca (por ejemplo, MARCOATMR 125 y MARCOATMR 125N); copolímero de acetato de vinilo-anhídrido maleico; copolímero de estireno-monoéster maleico; carboximetil-etilcelulosa (CMEC, Freund Corporation, Japón); ftalatos de acetato de celulosa (CAP) (por ejemplo, AquatericMR); trimelitatos de acetato de celulosa (CAT); y mezclas de dos o más de los mismos, en relaciones en peso de entre aproximadamente 2:1 a aproximadamente 5:1, tal como una mezcla de EUDRAGITMR L 100-55 y EUDRAGITMR S 100 a una proporción en peso de aproximadamente 3:1 a aproximadamente 2:1 o una mezcla de EUDRAGITMRL 30 D-55 y EUDRAGITMRFS a una proporción en peso de aproximadamente 3:1 a aproximadamente 5:1.

Estos polímeros se pueden usar ya sea solos o en combinación, o conjuntamente con polímeros diferentes de aquellos mencionados anteriormente. Los polímeros entéricos dependientes del pH, preferidos son los copolímeros de ácidos metacrílicos farmacéuticamente aceptables. Estos copolímeros son polímeros aniónicos a base de ácido metacrílico y metacrilato de metilo y, de manera preferente, tienen un peso molecular promedio de aproximadamente 135,000. Una relación de grupos carboxilo libres a grupos carboxilo esterificados con metilo en estos copolímeros puede variar, por ejemplo, de 1:1 a 1:3, por ejemplo, 1:1 o 1:2. Estos polímeros se venden bajo el nombre comercial EudragitMR tal como la serie Eudragit L, por ejemplo, Eudragit L 12.5MR, Eudragit L 12.5PMR, Eudragit L100MR, Eudragit L 100-55MR, Eudragit L-30DMR, Eudragit L-30 D-55MR, la serie por ejemplo Eudragit SMR, Eudragit S 12.5MR, Eudragit S 12.5PMR, Eudragit SI 00MR. Estos promotores de liberación no se limitan a polímeros dependientes del pH. Otras moléculas hidrófilas que pueden disolverse rápidamente y lixiviarse de la forma de dosis dejando rápidamente una estructura de poro también se pueden usar para el mismo propósito.

En algunas modalidades, la matriz puede incluir una combinación de promotores de liberación y agentes mejoradores de solubilidad. Los agentes mejoradores de solubilidad pueden ser agentes tensioactivos iónicos y no iónicos, agentes formadores de complejos, polímeros hidrófilos, y modificadores del pH, tal como agentes acidificadores y agentes alcalinizantes, así como moléculas que incrementan al solubilidad del fármaco pobremente soluble a través de atrapamiento molecular. Se pueden utilizar simultáneamente varios agentes mejoradores de solubilidad.

Los agentes mejoradores de la solubilidad pueden incluir agentes activos en la superficie, tal como docusato de sodio; lauril-sulfato de sodio; estearil-fumarato de sodio; TweensMR y Spancs (monoésteres de sorbitán modificados con PEO y ésteres de sorbitán de ácidos grasos); copolímeros de bloque de poli(óxido de etileno)-óxido de polipropileno-poli(óxido de etileno) (aka PLURONICSMR); los agentes formadores de complejos tal como polivinilpirrolidona de bajo peso molecular e hidroxipropil-metil-celulosa de bajo peso molecular; moléculas que ayudan a la solubilidad por atrapamiento molecular tal como ciclodextrina y agentes modificadores del pH, incluyendo agentes acidificadores tal como ácido cítrico, ácido fumárico, ácido tartárico, y ácido clorhídrico; y agentes alcalinizantes tal como meglumina e hidróxido de sodio.

Los agentes mejoradores de la solubilidad constituyen típicamente de 1% a 80% en peso, de manera preferente de 1% a 60%, de manera más preferente de 1% a 50%, de la forma de dosis y se pueden incorporar en una variedad de maneras. Se pueden incorporar en la formulación antes de la granulación en forma húmeda o seca. También se pueden adicionar a la formulación después de que el resto de los materiales se granulan o procesan de otro modo. Durante la granulación, los agentes mejoradores de la solubilidad se pueden rociar como soluciones con o sin un aglutinante.

En una modalidad, la formulación de liberación prolongada comprende una matriz o revestimiento polimérico permeable a agua insoluble en agua que comprende uno o más formadores de película permeables en agua e insolubles en agua sobre el núcleo activo. El revestimiento puede incluir adicionalmente uno o más polímeros solubles en agua y/o uno o más plastificantes. El revestimiento de polímero insoluble en agua comprende un revestimiento de barrera para liberación de agentes activos en el núcleo, en donde los grados de bajo peso molecular (viscosidad) exhiben más rápidas velocidades de liberación en comparación a los grados de mayor viscosidad.

En algunas modalidades, los polímeros formadores de película insolubles en agua incluyen uno o más éteres de alguil-celulosa, tal como etil-celulosas y mezclas de las mismas, (por ejemplo, etil-celulosa grados PR100, PR45, PR20, PR10, y PR7; ETH0CELMR , Dow).

En algunas modalidades, el polímero insoluble en agua proporciona propiedades adecuadas (por ejemplo, características de liberación prolongada, propiedades mecánicas, y propiedades de revestimiento) sin la necesidad de un plastificante. Por ejemplo, se pueden aplicar sin plastificante los revestimientos que comprenden acetato de polivinilo (PVA), copolímeros neutrales de ásteres de acrilato/metacrilato tal como Eudragit NE30D comercialmente disponible de Evonik Industries; etil-celulosa en combinación con hidroxipropilcelulosa, ceras, etcétera.

En aun otra modalidad, la matriz de polímero insoluble en agua puede incluir además un plastificante. La cantidad de plastificante requerida depende del plastificante, las propiedades del polímero insoluble en agua y de las propiedades finales deseadas del revestimiento. Los niveles adecuados del plastificante varían de aproximadamente 1% a aproximadamente 20%, de aproximadamente 3% a aproximadamente 20%, de aproximadamente 3% a aproximadamente 5%, de aproximadamente 7% a aproximadamente 10%, de aproximadamente 12% a aproximadamente 15%, de aproximadamente 17% a aproximadamente 20%, o de aproximadamente 1%, aproximadamente 2%, de aproximadamente 3%, aproximadamente 4%, de aproximadamente 5%, aproximadamente 6%, de aproximadamente 7%, aproximadamente 8%, aproximadamente 9%, aproximadamente 10%, de aproximadamente 15%, o aproximadamente 20% en peso con respecto al peso total del revestimiento, incluyendo todos los intervalos y sub intervalos entre estos.

Los plastificantes de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, triacetina, monoglicérido acetilado, aceites (aceite de ricino, aceite de ricino hidrogenado, aceite de semilla de uva, aceite de ajonjolí, aceite de oliva, y etcétera), ásteres de citrato, citrato de trietilo, citrato de acetiltrietilo citrato de acetiltributilo, citrato de tributilo, citrato de acetil-tri-n-butilo, ftalato de dietilo, ftalato de dibutilo, ftalato de dioctilo, metil-parabeno, propil-parabeno, propil-parabeno, butil-parabeno, sebacato de dietilo, sebacato de dibutilo, gliceroltributirato, triglicéridos y glicéridos sustituidos, y glicéridos monoacetilado y diacetilados (por ejemplo, MyvacetMR 9-45), monoestearato de glicerilo, tributirato de glicerol, polisorbato 80, polietilenglicol (tal como PEG-4000 y PEG-400), propilenglicol, 1,2-propilenglicol, glicerina, sorbitol, oxalato de dietilo, malato de dietilo, fumarato de dietilo, dietanol-malonato, succinato de dibutilo, ácidos grasos, glicerina, sorbitol, oxalato de dietilo, malato de dietilo, maleato de dietilo, fumarato de dietilo, succinato de dietilo, malonato de dietilo, ftalato de dioctilo, sebacato de dibutilo, y mezclas de estos. El plastificante puede tener propiedades de agente tensioactivo, tal que puede actuar como un modificador de liberación. Por ejemplo, se pueden usar detergentes no iónicos tal como Brij 58 (éter cetilico de polioxietileno (20)), y similares.

Los plastificantes pueden ser solventes orgánicos de alto punto de ebullición usados para impartir flexibilidad a materiales poliméricos de otro3 modo duros o frágiles y pueden afectar el perfil de liberación de los agentes activos. En general, los plastificantes provocan una reducción en las fuerzas intermoleculares cohesivas a lo largo de las cadenas de polímero dando por resultado varios cambios en las propiedades de polímero, incluyendo una reducción en la resistencia a la tracción y un incremento en el alargamiento y una reducción en la temperatura de ablandamiento o transición vitrea del polímero. La cantidad y elección del plastificante puede afectar la dureza de una tableta, por ejemplo, y pueden afectar aun sus características de disolución o desintegración, así como su estabilidad física y química. Ciertos plastificantes pueden incrementar la elasticidad y/o flexibilidad de un revestimiento, disminuyendo de este modo la fragilidad del revestimiento.

En otra modalidad, la formulación de liberación prolongada comprende una combinación de al menos dos polímeros formadores de gel, incluyendo al menos un polímero formador de gel no iónico y/o al menos un polímero formador de gel aniónico. El gel formado por la combinación de polímeros formadores de gel proporciona liberación controlada, tal que cuando la formulación se ingiere y entra en contacto con los fluidos gastrointestinales, los polímeros más cerca a la superficie se hidratan para formar una capa de gel viscoso. Debido a la alta viscosidad, la capa viscosa se disuelve solo gradualmente, exponiendo el material por debajo al mismo proceso. La masa se disuelve de este modo lentamente, liberando de este modo lentamente el principio activo en los fluidos gastrointestinales. La combinación de al menos dos polímeros formadores de gel permite que las propiedades del gel resultante, tal como la viscosidad, se manipulen a fin de proporcionar el perfil deseado de liberación.

En una modalidad particular, la formulación comprende al menos un polímero formador de gel no iónico y al menos un polímero formador de gel aniónico. En otra modalidad, la formulación comprende dos diferentes polímeros formadores de gel no iónicos. En aun otra modalidad, la formulación comprende una combinación de polímeros formadores de gel no iónicos con la misma química, pero solubilidades, viscosidades, y/o pesos moleculares (por ejemplo, una combinación de hidroxipropil-metilcelulosa de diferentes grados de viscosidad, tal como HPMC K100 y HPMC K15M o HPMC K100M).

Los polímeros formadores de gel aniónico de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, carboximetilcelulosa sódica (Na CMC), carboximetil-celulosa (CMC), polisacáridos aniónicos tal como alginato de sodio, ácido algínico, pectina, ácido poliglucurónico (ácido póli ce- y b-glucurónico), ácido poligalacturónico (ácido péctico), sulfato de condroitina, carragenina, furcelaran, gomas aniónicos tal como goma de xantano, polímeros de ácido acrílico o carbómeros (CarbopolMR 934, 940, 974P NF), copolímeros de CarbopolMR, un polímero PemulenMR, policarbofilo, y otros.

Los polímeros formadores de gel no iónicos de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, Povidona (PVP:polivinil-pirrolidona), alcohol polivinilico, copolimero de PVP y acetato de polivinilo, HPC (hidroxipropil-celulosa), HPMC (hidroxipropilmetilcelulosa), hidroxietilcelulosa, hidroximetilcelulosa, gelatina, óxido de polietileno, acacia, dextrina, almidón, polihidroxietil-metacrilato (PHEMA), polimetacrilatos no iónicos solubles en agua y sus copolimeros, celulosa modificada, polisacáridos modificados, gomas no iónicas, polisacáridos no iónicos, y/o mezclas de estos.

La formulación puede comprender opcionalmente un polímero entérico como se describe anteriormente y/o al menos un excipiente, tal como un agente de relleno, un aglutinante (como se describe anteriormente), un disgregante y/o una ayuda de flujo o deslizamiento.

Los agentes de relleno de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, lactosa; glucosa; fructosa; sacarosa; fosfato de dicalcio; alcoholes de azúcar también conocidos como "poliol de azúcar" tal como sorbitol, manitol, lactitol, xilitol, isomalt, eritritol, e hidrolizados de almidón hidrogenados (una mezcla de varios alcoholes de azúcar); almidón de maíz; almidón de patata; carboximetilcelulosa sódica; etilcelulosa y acetato de celulosa; polímeros entéricos; o una mezcla de los mismos.

Los aglutinantes de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, polímeros hidrófilos solubles en agua tal como povidona (PVP:polivinil-pirrolidona), copovidona (un copolímero de pirrolidona de polivinilo y acetato de polivinilo), HPC de bajo peso molecular (hidroxipropil celulosa), HPMC de bajo peso molecular (hidroxipropil-metilcelulosa), carboxi-metil-celulosa de bajo peso molecular, etilcelulosa, gelatina, óxido de polietileno, acacia, dextrina, silicato de aluminio y magnesio, y almidón y polimetacrilatos tal como Eudragit NE 30D, Eudragit RL, Eudragit RS, Eudragit E, acetato de polivinilo, polímeros entéricos, o mezclas de los mismos.

Los desintegrantes de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, carboximetilcelulosa sódica poco sustituida, crospovidona (polivinil-pirrolidona reticulada), carboximetil-almidón sódico (almidón-glicolato de sodio), carboximetil-celulosa sódica reticulada (croscarmelosa), almidón pregelatinizado (almidón 1500), celulosa microcristalina, almidón insoluble en agua, carboximetilcelulosa cálcica, hidroxipropil-celulosa poco sustituida, y silicato de magnesio o aluminio.

Los deslizantes de ejemplo incluyen pero no se limitan a, magnesio, dióxido de silicio, talco, almidón, dióxido de titanio, y similares.

En aun otra modalidad, la formulación de liberación prolongada se forma al revestir una partícula que contiene fármaco soluble/dispersable en agua, tal como una cuenta o una población de cuentas en el mismo (como se describe anteriormente), con un material de revestimiento y, opcionalmente, una formador de poros y otros excipientes. El material de revestimiento se selecciona preferentemente de un grupo que comprende polímeros celulósicos tal como etilcelulosa (por ejemplo, SURELEASEMR), metilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, acetato de celulosa, y ftalato de acetato de celulosa; alcohol polivinílico; polímeros acrílicos, tal como poliacrilatos, polimetacrilatos, y copolímeros de estos; y otros materiales de revestimiento a base de solvente o a base de agua. El revestimiento controlador de la liberación para una población dada de cuentas se puede controlar por al menos un parámetro del revestimiento controlador de liberación, tal como la naturaleza del revestimiento, nivel, tipo y concentración de revestimiento de un formador de poros, parámetros de proceso, y combinaciones de estos. De esta manera, cambiando un parámetro, tal como una concentración de formación de poro, o las condiciones de curación, se permiten cambios en la liberación de los agentes activos de cualquier población dada de cuentas, permitiendo de este modo el ajuste selectivo de la formulación a un perfil predeterminado de liberación.

Los formadores de poro adecuados para el uso en el revestimiento controlador de liberación en la presente pueden ser agentes orgánicos o inorgánicos e incluyen materiales que se pueden disolver, extraer o lixiviar del revestimiento en el ambiente de uso. Los agentes formadores de poros de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, compuestos orgánicos tal como mono-, oligo- y poli-sacáridos, incluyendo sacarosa, glucosa, fructosa, manitol, mañosa, galactosa, sorbitol, pululano y dextrano; polímeros solubles en el ambiente de uso, tal como polímeros hidrófilos solubles en agua, hidroxialquilcelulosas, carboxialquilcelulosas, hidroxipropilmetilcelulosa, éteres de celulosa, resinas acrílicas, polivinilpirrolidona, polivinilpirrolidona reticulada, óxido de polietileno, carboceras, Carbopol, y similares, dioles, polioles, alcoholes polihídricos, polialquilenglicoles, polietilenglicoles, polipropilenglicoles, o polímeros de bloque de los mismos, poliglicoles, y ro? (a-W)-alquilendioles; y compuestos inorgánicos tal como sales de metales alcalinos, carbonato de litio, cloruro de sodio, bromuro de sodio, cloruro de potasio, sulfato de potasio, fosfato de potasio, acetato de sodio, citrato de sodio, sales cálcicas adecuadas, combinación de estos, y similares.

La revestimiento controlador de liberación pueden comprender además otros aditivos conocidos en la téenica, tal como plastificantes, anti-adherentes, deslizantes (o ayudas de flujo), y antiespumas.

En algunas modalidades, las partículas o cuentas revestidas pueden incluir adicionalmente una "sobrecubierta", para proporcionar, por ejemplo, protección a humedad, reducción de carga estática, enmascaramiento de sabor, saborización, coloración y/o pulido u otra apariencia cosmética. Los materiales adecuados de revestimiento para esta sobrecubierta se conocen en la técnica e incluyen, pero no se limitan a, polímeros celulósicos tal como hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, y celulosa microcristalina o combinaciones de esto (por ejemplo, varios materiales de revestimiento 0padryMR).

Las partículas o cuentas revestidas pueden contener adicionalmente mejoradores que se pueden ejemplificar por, pero no se limitan a, mejoradores de solubilidad, mejoradores de disolución, mejoradores de absorción, mejoradores de permeabilidad, estabilizadores, agentes formadores de complejos, inhibidores enzimáticos, inhibidores de p-glucoproteína, e inhibidores de resistencia a múltiples fármacos. De manera alternativa, la formulación también puede comprender mejoradores que se separan de las partículas revestidas, por ejemplo, en una población separada de cuentas o como un polvo. En aun otra modalidad, los mejoradores pueden estar contenidos en una capa separada sobre partículas revestidas, ya sea abajo o por abajo del revestimiento controlador de liberación.

En otras modalidades, la formulación de liberación prolongada se formula para liberar los agentes activos por un mecanismo osmótico. A manera de ejemplo, se puede formular una cápsula con una unidad osmótica individual o puede comprender 2, 3, 4, 5, o 6 unidades de empujar-jalar encapsuladas dentro de una cápsula de gelatina dura, por lo que cada unidad de jalar-empujar bicapa contiene una capa osmótica de empuje y una capa de fármaco, ambas circundadas por una membrana semi-permeable. Se perforan uno o más orificios a través de la membrana cerca de la capa de fármaco. Esta membrana se puede cubrir adicionalmente con un revestimiento entérico dependiente del pH para impedir la liberación hasta después del vaciado gástrico. La cápsula de gelatina se disuelve inmediatamente después de la ingestión. Conforme la unidad de empuje-jale entra al intestino delgado, el revestimiento entérico se descompone, que entonces permite que el fluido fluya a través de la membrana semi-permeable, hinchando el compartimento osmótico de empuje para forzar a los fármacos a través de los orificios a una velocidad precisamente controlada por la velocidad de transporte de agua a través de la membrana semi-permeable. La liberación de los fármacos puede presentarse durante una velocidad constante durante hasta 24 horas o más.

La capa osmótica de empuje comprende uno o más agentes osmóticos que crean la fuerza de empuje para el transporte de agua a través de la membrana semi-permeable hasta el núcleo del vehículo de distribución. Una clase de agentes osmóticos incluye polímeros hidrófilos hinchables en agua, también referidos como "osmopolímeros" e "hidrogeles", incluyendo, pero no limitado a, polímeros acrílicos y de vinilo hidrófilos, polisacáridos tal como alginato de calcio, óxido de polietileno (PEO), polietilenglicol (PEG), polipropilenglicol (PPG), poli(metacrilato de 2-hidroxietilo), ácido poli(acrílico), ácido poli-(metacrílico), polivinilpirrolidona (PVP), PVP reticulada, alcohol polivinílico (PVA), copolímeros de PVA/PVP, copolímeros de PVA/PVP con monómeros hidrófobos tal como metacrilato de metilo y acetato de vinilo, poliuretanos hidrófilos que contienen bloques grandes de PEO, croscarmelosa sódica, carragenina, hidroxietilcelulosa (HEC), hidroxipropilcelulosa (HPC), hidroxipropil-metil-celulosa (HPMC), carboximetil-celulosa (CMC) y carboxietil-celulosa (CEC), alginato de sodio, policarbófilo, gelatina, goma de xantano, y almidón-glicolato de sodio.

Otra clase de agentes oossmmóóttiiccooss incluye osmógenos, que son capaces de embeber agua para efectuar un gradiente de presión osmótica a través de la membrana semi permeable. Los osmógenos de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, sales inorgánicas tal como sulfato de magnesio, cloruro de magnesio, cloruro de calcio, cloruro de sodio, cloruro de litio, sulfato de potasio, fosfatos de potasio, carbonato de sodio, sulfito de sodio, sulfato de litio, cloruro de potasio, y sulfato de sodio; azúcares tal como dextrosa, fructosa, glucosa, inositol, lactosa, maltosa, manitol, rafinosa, sorbitol, sacarosa, trehalosa, y xilitol; ácidos orgánicos tal como ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido fumárico, ácido cítrico, ácido maleico, ácido sebácico, ácido sórbico, ácido adípico, ácido edético, ácido glutámico, ácido p-toluenosulfónico, ácido succínico y ácido tartárico; urea; y mezclas de estos.

Los materiales útiles en la formación de la membrana semipermeable incluyen varios grados de acrílicos, vinilos, éteres, poliamidas, poliésteres, y derivados celulósicos que son permeables en agua e insolubles en agua a pH fisiológicamente pertinentes, o son susceptibles que se vuelvan insolubles en agua por alteración química, tal como reticulación.

En algunas modalidades, la formulación de liberación prolongada comprende un revestimiento de polisacárido que es resistente a la erosión tanto en el estómago como en el intestino. Estos polímeros solo se pueden degradar en el colon, que contiene una gran microflora que contiene enzimas biodegradables que descomponen, por ejemplo, los revestimientos de polisacáridos para liberar los contenidos de fármaco de una manera controlada y dependiente del tiempo. Los revestimientos de polisacárido de ejemplo incluyen, por ejemplo, amilosa, arabinogalactano, quitosan, sulfato de condroitina, ciclodextrina, dextrano, goma de guar, pectina, xilano, y combinaciones o derivados de los mismos.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica se formula para liberación prolongada, retrasada. Como se usa en la presente, el término "liberación prolongada retrasada" se usa con referencia a una formulación de fármaco que tiene un perfil de liberación en el cual hay un retraso predeterminado en la liberación del fármaco después de la administración y, una vez iniciada, el fármaco se libera de manera continua durante un período prolongado de tiempo. En algunas modalidades, la formulación de liberación prolongada retrasada incluye una formulación de liberación prolongada revestida con un revestimiento entérico, que es una barrera aplicada al medicamento oral que impide la liberación de medicamento antes de que alcance el intestino delgado. Las formulaciones de liberación retrasada, tal como los revestimientos entéricos, impiden que los fármacos que tienen un efecto irritante en el estómago, tal como aspirina, se disuelvan en el estómago. Estos revestimientos también se usan para proteger a los fármacos inestables a ácidos de la exposición ácida del estómago, distribuyéndolos en cambio a un ambiente de pH básico (pH 5.5 del intestino y superior) donde no se degradan y dan su acción deseada. El término "liberación pulsátil" es un tipo de liberación retrasada, que se usa en la presente con referencia a una formulación de fármaco que proporciona liberación rápida y transciente del fármaco dentro de un periodo corto de tiempo inmediatamente después de un periodo predeterminado de retraso, produciendo de este modo un "perfil de plasma de impulso" del fármaco después de la administración del fármaco. Se pueden diseñar formulaciones para proporcionar una liberación pulsátil individual o múltiples liberaciones pulsátiles en intervalos predeterminados de tiempo después de la administración, o una liberación pulsátil (por ejemplo, 20-60% del principio activo) seguida con liberación prolongada durante un periodo de tiempo (por ejemplo, una liberación continua del resto del principio activo). Una formulación de liberación prolongada o liberación pulsátil comprende en general uno o más elementos cubiertos con un revestimiento de barrera, que se disuelve, erosiona o se rompe después de una fase especifica de retraso.

Un revestimiento de barrera para la liberación prolongada puede consistir de una variedad de diferentes materiales, dependiendo del objetivo. Además, una formulación puede comprender una pluralidad de revestimientos de barrera para facilitar la liberación de una manera temporal. El revestimiento puede ser un revestimiento de azúcar, un revestimiento de película (por ejemplo, en base a hidroxipropilmetilcelulosa, metil-celulosa, metil-hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, carboximetilcelulosa, copolímeros de acrilato, polietilen-glicoles y/o polivinilpirrolidona) o un revestimiento a base de copolímero de ácido metacrílico, a ftalato de acetato de celulosa, ftalato de hidroxipropil metilcelulosa, succinato de acetato de hidroxipropil metilcelulosa, acetato-ftalato de polivinilo, goma laca, y/o etilcelulosa. Adicionalmente, la formulación puede incluir adicionalmente un material de retraso de tiempo tal como, por ejemplo, monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

En algunas modalidades, la formulación de liberación prolongada, retrasada incluye un revestimiento entérico comprendido de uno o más polímeros que facilitan la liberación de agentes activos en regiones próximas o distantes del tracto gastrointestinal. Como se usa en la presente, el término "revestimiento entérico" es un revestimiento que comprende uno o más polímeros que tienen un perfil de liberación independiente del pH o dependiente del pH. Una píldora revestida entérica no se disolverá en los jugos ácidos del estómago (pH ~3), sino que lo hará el ambiente alcalino (pH 7-9) presente en el intestino delgado o colon. Un revestimiento polimérico entérico resiste típicamente las liberaciones de los agentes activos hasta algún tiempo después de un período de retraso de vaciado gástrico de aproximadamente 3-4 horas después de la administración.

Los revestimientos entéricos dependientes del pH comprenden uno o más polímeros dependientes del pH o sensibles al pH que mantienen su integridad estructural a pH bajo, tal como en el estómago, pero se disuelven en ambientes de mayor pH en regiones más distantes del tracto gastrointestinal, tal como el intestino delgado, donde se liberan los contenidos del fármaco. Para los propósitos de la presente invención, "dependiente del pH" se define como que tienen características (por ejemplo, disolución) que varían de acuerdo al pH ambiental. Los polímeros dependientes del pH de ejemplo se han descrito anteriormente. Típicamente, los polímeros dependientes del pH exhiben un pH característico óptimo para disolución. En algunas modalidades, el polímero dependiente del pH exhibe un pH óptimo entre aproximadamente 5.0 y 5.5, entre aproximadamente 5.5 y 6.0, entre aproximadamente 6.0 y 6.5, o entre aproximadamente 6.5 y 7.0. En otras modalidades, el polímero dependiente del pH exhibe un pH óptimo de >5.0, de >5.5, de >6.0, de >6.5, o de >7.0.

En ciertas modalidades, la metodología de revestimiento emplea el mezclado de uno o más polímeros dependiente del pH y uno o más polímeros independientes del pH. El mezclado de los polímeros dependientes del pH e independientes del pH puede reducir la velocidad de liberación de los principios activos una vez que el polímero soluble ha alcanzado su pH óptimo de solubilización.

En algunas modalidades, se puede obtener un perfil de liberación "controlado en tiempo" "dependiente del tiempo" usando un cuerpo de cápsula insoluble en agua que contiene uno o más agentes activos, en donde el cuerpo de cápsula cerrado en un extremo con un tapón de hidrogel insoluble, pero permeable e hinchable. En el contacto con fluido gastrointestinal o medio de disolución, el tapón de hincha, empujándose fuera de cápsula y liberando los fármacos después de un tiempo predeterminado de retraso, que se puede controlar por, por ejemplo, la posición y dimensión del tapón. El cuerpo de cápsula se puede revestir adicionalmente con un revestimiento entérico exterior dependiente del pH que mantiene la cápsula intacta hasta que alcanza el intestino delgado. Los materiales de tapón adecuados incluyen, por ejemplo, polimetacrilatos, polímeros comprimidos erosionables (por ejemplo, HPMC, alcohol polivinílico) polímero fundidos congelados (por ejemplo, monooleato de glicerilo), y polímeros erosionables enzimáticamente controlados (por ejemplo, polisacáridos, tal como amilosa, arabinogalactano, quitosan, sulfato de condroitina, ciclodextrina, dextrano, goma de guar, pectina y xilan).

En otras modalidades, se pueden formular cápsulas o tabletas de dos capas para que contengan un núcleo que contiene fármaco, cubierto por una capa de hinchable y una membrana o revestimiento de polímero semipermeable pero insoluble, exterior. El tiempo de retraso antes de la ruptura se puede controlar por las propiedades mecánicas y permeación del revestimiento polimérico y el comportamiento de hinchazón de la hinchable. Típicamente, la capa hinchable comprende uno o más agentes hinchables, tal como polímeros hidrófilos hinchables que se hinchan y retienen agua en sus estructuras.

Los polímeros hinchables con agua de ejemplo que se van a usar en el revestimiento de liberación retrasada incluyen, pero no se limitan a, óxidos de polietileno (que tienen por ejemplo, un peso molecular promedio de entre 1,000,000 y 7,000,000, tal como POLYOXMR); metilcelulosa; hidroxipropilcelulosa; hidroxipropilmetilcelulosa; óxidos de polialquileno que tienen un peso molecular promedio en peso de 100,000 a 6,000,000, incluyendo, pero no limitado a, poli(óxido de metileno), poli(óxido de butileno), poli (metacrilato de hidroxialquilo) que tiene un peso molecular de 25,000 a 5,000,000, alcohol poli(vinilico) que tiene poco residuo acetal, que se retícula con glioxal, formaldehído, o glutaraldehído, y que tiene un grado de polimerización de 200 a 30,000; mezclas de metil-celulosa, agar reticulado y carboximetil-celulosa; copolímeros formadores de hidrogel producidos al formar una dispersión de un copolímero finamente dividido de anhídrido maleico con estireno, etileno, propileno, butileno, isobutileno reticulado con de 0.001 a 0.5 moles de agente reticulador saturado por mol de anhídrido maleico en el copolímero; polímeros de carboxi ácido CARBOPOLMR que tiene un peso molecular de 450,000 a 4,000,000; poliacrilamidas CYANAMERMRR; polímeros de anhidro indenomaleico hinchables con agua reticulados; ácido poliacrílico GOODRITEMR que tiene un peso molecular de 80,000 a 200,000; copolímeros de injerto de almidón; polisacáridos de polímero de acrilato AQUA-KEEPSMR compuestos de unidades condensadas de glucosa tal como poliglucano reticulado con diéster; carbómeros que tienen una viscosidad de 3,000 a 60,000 mPa como una solución acuosa al 0.5%-l% p/w; éteres de celulosa tal como hidroxipropilcelulosa que tiene una viscosidad de aproximadamente 1000-7000 mPa.s tal como una solución acuosa al 1% p/p (25°); hidroxipropil metilcelulosa tiene una viscosidad de aproximadamente 1,000 o superior, de manera preferente 2500 o superior a un máximo de 25000 mPa como una solución acuosa al 2% p/v; polivinilpirrolidona que tiene una viscosidad de aproximadamente 300-700 mPa como una solución acuosa al 10% p/w a 20°C; y combinaciones de esto.

De manera alternativa, el tiempo de liberación de los fármacos se puede controlar por un tiempo de retraso de desintegración dependiendo del balance entre la tolerabilidad y el espesor de una membrana de polímero insoluble en agua (tal como etil-celulosa, EC) que contiene microporos predefinidos en el fondo del cuerpo y la cantidad de un excipiente hinchable, tal como hidroxipropilcelulosa poca sustituida (L-HPC) y glicolato de sodio. Después de la administración oral, los fluidos de GI se permean a través de los microporos, provocando hinchazón los excipientes hinchables, lo que produce una presión interior que desintegra los componentes capsulares, incluyendo un primer cuerpo de cápsula que contiene los materiales hinchables, un segundo cuerpo de cápsula que contiene los fármacos, y una tapa exterior unida al primer cuerpo de cápsula.

La capa entérica puede comprender además agentes anti-pegajosidad, tal como talco o monoestearato de glicerilo y/o plastificantes. La capa entérica puede comprender además uno o más plastificantes, incluyendo, pero no limitado a, citrato de trietilo, citrato de acetil-trietilo, citrato de acetiltributilo, monoglicéridos acetilados de polietilenglicol, glicerina, triacetina, propilenglicol, ésteres de ftalato (por ejemplo, ftalato de dietilo, ftalato de dibutilo), dióxido de titanio, óxidos férricos, aceite de ricino, sorbitol, y sebacato de dibutilo.

En otra modalidad, la formulación de liberación retrasada emplea un revestimiento de película permeable en agua pero insoluble para encerrar el principio activo y un agente osmótico. Conforme el agua del intestino se difunde lentamente a través de la película en el núcleo, el núcleo se hincha hasta que estalla la película, liberando de este modo los principios activos. El revestimiento de película se puede ajustar para permitir varias velocidades de permeación de agua o tiempo de liberación.

En otra modalidad, la formulación de liberación retrasada emplea un revestimiento de tableta impermeable en agua por lo que el agua entra a través de una abertura controlada en el revestimiento hasta que estalla el núcleo. Cuando estalla la tableta, los contenidos de fármaco se liberan inmediatamente o durante un período mayor de tiempo. Estas y otras téenicas se pueden modificar para permitir que se inicie un período de retraso predeterminado antes de la liberación de los fármacos.

En otra modalidad, los agentes activos se distribuyen en una formulación para proporcionar tanto liberación retrasada como liberación prolongada (liberación prolongada y retrasada). El término "liberación prolongada y retrasada" se usa en la presente con referencia a una formulación de fármaco que proporciona liberación pulsátil de agentes activos en un período de retraso o tiempo predeterminado después de la administración, que entonces se sigue por liberación prolongada de agentes activos después de esto.

En algunas modalidades, las formulaciones de liberación inmediata, de liberación prolongada, de liberación retrasada, o de liberación prolongada y retrasada comprenden un núcleo activo comprendido de una o más partículas inertes, cada una en la forma de una cuenta, comprimido, píldora, partícula granular, microcápsula, microesfera, microgránulo, nanocápsula, nanoesfera revestidas en sus superficies con fármacos en la forma de, por ejemplo, una composición formadora de película que contiene fármaco usando, por ejemplo téenicas de lecho fluido u otras metodologías conocidas por aquellos expertos en la técnica. La partícula inerte puede ser de varios tamaños, en tanto que sea suficientemente grande para permanecer pobremente disuelta. De manera alternativa, el núcleo activo se puede preparar al granular y moler y/o por extrusión y esferonización de una composición de polímero que contiene la sustancia de fármaco.

La cantidad de fármaco en el núcleo dependerá de la dosis que se requiera y varía típicamente varía de entre 5 a 90% en peso. En general, el revestimiento polimérico en el núcleo activo será de aproximadamente 1 a 50% en base al peso de la partícula revestida, dependiendo del tiempo de retraso y tipo de perfil de liberación requerido y/o los polímeros y solventes de revestimiento elegidos. Aquellos expertos en la técnica serán capaces de seleccionar una cantidad apropiada de fármaco para revestir sobre o incorporar en el núcleo para lograr la dosis deseada. En una modalidad, el núcleo inactivo puede ser una esfera de azúcar o un cristal de amortiguador o un cristal de amortiguador encapsulado, como carbonato de calcio, bicarbonato de sodio, ácido fumárico, ácido tartárico, etcétera, que altera el microambiente del fármaco facilitar su liberación.

En algunas modalidades, por ejemplo, las composiciones de liberación retrasada o de liberación prolongada y retrasada pueden formarse al revestir una partícula que contiene fármaco, soluble/dispersable, tal como una cuenta, con una mezcla de un polímero insoluble en agua y un polímero entérico, en donde el polímero insoluble en agua y el polímero entérico pueden estar presentes a una relación en peso de 4:1 a 1:1, y el peso total de los revestimientos es 10 a 60% en peso en base al peso total de las cuentas revestidas. Las cuentas estratificadas de fármaco pueden incluir opcionalmente una membrana de etilcelulosa que controla la velocidad de disolución interior. La composición de la capa exterior, así como los pesos individuales de las capas interior y exterior de la membrana polimérica se optimizan para lograr perfiles deseados de liberación de ritmo circadiano para un principio activo dado, que se predicen en base a correlaciones in ví tro/in vivo.

En otras modalidades, las formulaciones pueden comprender una mezcla de partículas que contienen fármaco de liberación inmediata sin una membrana de polímero que controle la velocidad de disolución y cuentas de liberación prolongada y retrasada que exhiben, por ejemplo, un tiempo de retraso de 2-4 horas después de la administración oral, proporcionando de este modo un perfil de liberación de dos impulsos.

En algunas modalidades, el núcleo activo se reviste con una o más capas de polímeros que controlan la velocidad de disolución para obtener perfiles deseados de liberación con o sin un tiempo de retraso. Una membrana de capa interior puede controlar bastante la velocidad de liberación de fármaco después de la imbibición de agua o fluidos corporales en el núcleo, en tanto que la membrana de capa exterior puede proporcionar un tiempo deseado de retraso (el período de no o poca liberación de fármaco después de la imbibición de agua o fluidos corporales en el núcleo). La membrana de capa interior puede comprender un polímero insoluble en agua, o una mezcla de polímeros solubles en agua e insolubles en agua.

Los polímeros adecuados para la membrana exterior, que controlan ampliamente el tiempo de retraso de hasta 6 horas, pueden comprender un polímero entérico, como se describió anteriormente, y un polímero insoluble en agua en 10 a 50% en peso. La relación de polímero insoluble en agua a polímero entérico puede variar de 4:1 a 1:2, de manera preferente los polímeros están presentes en una relación de aproximadamente 1:1. El polímero insoluble en agua utilizado convencionalmente es etilcelulosa.

Los polímeros insolubles en agua de ejemplo incluyen etilcelulosa, acetato de polivinilo (Kollicoat SR#0D de BASF), copolímeros neutrales basados en acrilato de etilo y metil-metacrilato, copolímeros de ésteres de ácido acrilico y metacrílico con grupos de amonio cuaternario tal como EUDRAGITMR NE, RS y RS30D, RL o RL30D y similares. Los polímeros solubles en agua de ejemplo incluyen HPMC de bajo peso molecular, HPC, metilcelulosa, polietilenglicol (PEG de peso molecular >3000) en un grosor que varía de 1% en peso hasta 10% en peso dependiendo de la solubilidad del principio activo en agua y el solvente o suspensión del látex basada en la formulación de revestimiento utilizada. El polímero insoluble en agua al polímero soluble en agua puede variar convencionalmente de 95:5 a 60:40, de manera preferente de 80:20 a 65:35. En algunas modalidades, se utiliza resina AMBERLITEMR IRP69 como un portador de liberación extendida. AMBERLITEMR IRP69 es una de intercambio catiónico en forma de sodio, fuertemente ácida, insoluble que es adecuado como portador para sustancias catiónicas (básicas). En otras modalidades, se utiliza resina DU0LITEMR AP143/1093 como un portador de liberación extendida. DUOLITEMR AP143/1093 es una resina de intercambio aniónico, fuertemente básica, insoluble que es adecuada como un portador para sustancias aniónicas (ácidas). Cuando se utiliza como un portador de fármaco, la resina AMBERLITE IRP69 o/y DU0LITEMR AP143/1093 proporciona un medio para la unir agentes medicinales en una matriz polimérica insoluble. La liberación extendida se logra a través de la formación de complejos de fármacos-resina (resinatos de fármaco). El fármaco se libera a partir de la resina in vivo conforme el fármaco alcanza el equilibrio con las altas concentraciones de electrolitos, que son convencionales del tracto gastrointestinal. Por lo general más fármacos hidrófobos eluirán de la resina a una velocidad más baja, debido a interacciones hidrófobas con la estructura aromática del sistema de intercambio catiónico.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica se formula para administración oral. Las formas de dosis orales incluyen, por ejemplo, tabletas, cápsulas, y cápsulas y también pueden comprender una pluralidad de gránulos, perlas, polvos, o pildoras que pueden o no estar encapsuladas. Las tabletas y cápsulas representan las formas de dosis orales más convenientes, en cuyo caso se emplean portadores farmacéuticos sólidos.

En una formulación de liberación retrasada, se pueden aplicar uno o más revestimientos de barrera a pildoras, tabletas o cápsulas para facilitar la disolución lenta y liberación concomitante de fármacos en el intestino. Convencionalmente, el revestimiento de barrera contiene uno o más polímeros que revisten, rodean, o forman una capa o membrana alrededor de la composición terapéutica o núcleo activo. En algunas modalidades, los agentes activos se liberan en una formulación para proporcionar liberación retardada en un tiempo predeterminado después de la administración. El retraso puede ser hasta de aproximadamente 10 minutos, aproximadamente 20 minutos, aproximadamente 30 minutos, aproximadamente 1 hora, aproximadamente 2 horas, aproximadamente 3 horas, aproximadamente 4 horas, aproximadamente 5 horas, aproximadamente 6 horas o más.

Se pueden aplicar varias téenicas de revestimiento a gránulos, cuentas, polvos o pildoras, tabletas, cápsulas o combinaciones de los mismos que contienen agentes activos para producir diferentes y distintos perfiles de liberación. En algunas modalidades, la composición farmacéutica está en una forma de cápsula o tableta que contiene una sola capa de revestimiento. En otras modalidades, la composición farmacéutica está en una forma de tableta o cápsula que contiene múltiples capas de revestimiento. En algunas modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud se formula para liberación extendida o liberación extendida retardada de 100% del principio activo.

En otras modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud se formula para una liberación extendida de dos fases o liberación extendida de dos fases retardada caracterizada por un componente de "liberación inmediata" que se libera dentro de dos horas de administración y un componente de "liberación extendida", que se libera durante un periodo de 2-12 horas. En algunas modalidades, el componente de "liberación inmediata" proporciona aproximadamente 20-60% de la dosis total de los agentes activos y el componente de "liberación extendida" proporciona 40-80% de la dosis total de los agentes activos que se van a administrar por la formulación farmacéutica. Por ejemplo, el componente de liberación inmediata puede proporcionar aproximadamente 20-60%, o aproximadamente 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60% de la dosis total de los agentes activos que se van administrar por la formulación farmacéutica. El componente de liberación extendida proporciona aproximadamente 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75% o 80% de la dosis total de los agentes activos que se van a administrar por la formulación. En algunas modalidades, el componente de liberación inmediata y el componente de liberación extendida contienen el mismo principio activo. En otras modalidades, el componente de liberación inmediata y el componente de liberación extendida contienen diferentes principios activos (por ejemplo, un analgésico en un componente y un agente antimuscarinico en otro componente). En algunas modalidades, el componente de liberación inmediata y el componente de liberación extendida cada uno contiene un analgésico seleccionado del grupo gue consiste de aspirina, ibuprofeno, naproxeno sódico, indometacin, nabumetona, y acetaminofeno. En otras modalidades, el componente de liberación inmediata y/o el componente de liberación extendida comprenden además uno o más agentes activos adicionales seleccionados de los grupos que consisten de un agente antimuscarínico, un antidiurético, un espasmolitico, un inhibidor de fosfodiesterasa tipo (inhibidor de PDE 5) y zolpidem.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende una pluralidad de principios activos seleccionados del grupo que consiste de analgésicos, agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espas olíticos e inhibidores de PDE 5. Ejemplos de agentes antimuscarinicos incluyen, pero no se limitan a, oxibutinina, solifenacina, darifenacina, fesoterodina, tolterodina, trospium, atropina, y antidepresivos tricielicos. Ejemplos de antidiuréticos incluyen, pero no se limitan a, hormona antidiurética (ADH), angiotensina II, aldosterona, vasopresina, análogos de vasopresina (por ejemplo, hormona antidiurética desmopresina, lipresina, felipresina, ornipressina, terlipresina); antagonistas del receptor de vasopresina, (ANP) y antagonista del péptido natriurético tipo C (CNP) y péptido natureútico atrial (es decir, NPR1, NPR2, y NPR3) (por ejemplo, HS-142-1, isatina, [Asu7,23']b- ANP—(7—28)], anantina, un péptido cíclico de Streptomyces coerulescens, y anticuerpo monoclonal 3G12); antagonistas del receptor de somatostatina tipo 2 (por ejemplo, somatostatina), derivados farmacéuticamente aceptables, y análogos, sales, hidratos y solvatos de los mismos. Ejemplos de espasmolíticos incluyen, pero no se limitan a, carisoprodol, benzodiazepinas, baclofeno, ciclobenzaprina, metaxalona, metocarbamol, clonidina, análogo de clonidina, y dantroleno. Ejemplos de inhibidores de PDE 5 incluyen, pero no se limitan a, tadalafilo, sildenafilo y vardenafilo.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende uno o más analgésicos. En otras modalidades, la composición comprende farmacéutica (1) uno o más analgésicos, y (2) uno o más de otros principios activos seleccionados del grupo que consiste de agentes antimuscarínicos, antidiuréticos, espasmolíticos e inhibidores de PDE 5. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o más analgésicos y (2) uno o más agentes antimuscarínicos. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o más analgésicos y (2) uno o más antidiuréticos. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o más analgésicos y (2) uno o más espasmolíticos. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o más analgésicos y (2) uno o más inhibidores de PDE 5. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o dos analgésicos, (2) uno o dos agentes antimuscarinicos, y (3) uno o dos antidiuréticos. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o dos analgésicos, (2) uno o dos antimuscarinicos, y (3) uno o dos espasmoliticos. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o dos analgésicos, (2) uno o dos agentes antimuscarinicos, y (3) uno o dos inhibidores de PDE 5. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o más analgésicos, (2) uno o más antidiuréticos, y (3) uno o más espasmoliticos. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o más analgésicos, (2) uno o más antidiuréticos, y (3) uno o más inhibidores de PDE 5. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende (1) uno o más analgésicos, (2) uno o más espasmoliticos, y (3) uno o más inhibidores de PDE 5.

En una modalidad, la pluralidad de principios activos se formula para liberación inmediata. En otra modalidad, la pluralidad de principios activos se formula para liberación extendida. En otra modalidad, la pluralidad de principios activos se formula tanto para liberación inmediata como liberación extendida (por ejemplo, una primera porción de cada principio activo se formula para liberación inmediata y una segunda porción de cada principio activo se formula para liberación extendida). En aun otra modalidad, algo de la pluralidad de principios activos se formula para liberación inmediata y algo de la pluralidad de principios activos se formula para liberación extendida (por ejemplo, principios activos A, B, C se formulan para liberación inmediata y principios activos C y D se formulan para liberación extendida). En algunas otras modalidades, el componente de liberación inmediata y/o el componente de liberación extendida se revisten además con un revestimiento de liberación retardada, tal como un revestimiento entérico.

En ciertas modalidades, la composición farmacéutica comprende un componente de liberación inmediata y un componente de liberación extendida. El componente de liberación inmediata puede comprender uno o más principios activos seleccionados del grupo que consiste de analgésicos, agentes antimuscarínicos, antidiuréticos, espasmoliticos e inhibidores de PDE 5. El componente de liberación extendida puede comprender uno o más principios activos seleccionados del grupo que consiste de analgésicos, agentes antimuscarínicos, antidiuréticos, espasmoliticos, inhibidores de PDE 5 y zolpidem. En algunas modalidades, el componente de liberación inmediata y el componente de liberación extendida pueden tener exactamente los mismos principios activos. En otras modalidades, el componente de liberación inmediata y el componente de liberación extendida pueden tener diferentes principios activos. En aun otras modalidades, el componente de liberación inmediata y el componente de liberación extendida tienen uno o más principios activos comunes. En algunas otras modalidades, el componente de liberación inmediata y/o el componente de liberación extendida se revisten además con un revestimiento de liberación retardada, tal como un revestimiento entérico.

En una modalidad, la composición farmacéutica comprende dos o más principios activos (por ejemplo, dos o más agentes analgésicos o una mezcla de uno o más agentes analgésicos y uno o más agentes antimuscarinicos o antidiuréticos o espasmoliticos o inhibidores de PDE 5), formulados para liberación inmediata en aproximadamente el mismo tiempo. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende dos o más principios activos, formulados para liberación inmediata en aproximadamente el mismo tiempo. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende dos o más principios activos formulados como dos componentes de liberación extendida, cada uno gue proporciona un perfil de liberación extendida diferente. Por ejemplo, un primer componente de liberación extendida libera un primer principio activo a una primera velocidad de liberación y un segundo componente de liberación extendida libera un segundo principio activo a una segunda velocidad de liberación. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende dos o más principios activos, ambos formulados para liberación retardada.

En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende dos o más principios activos formulados para liberación retardada. En otra modalidad, la composición farmacéutica comprende dos o más principios activos formulados como dos componentes de liberación retardada, cada uno que proporciona un perfil de liberación retardada diferente. Por ejemplo, un primer componente de liberación retardada libera un primer principio activo en un primer punto de tiempo, y un segundo componente de liberación retardada libera un segundo principio activo en un segundo punto de tiempo.

En otras modalidades, la composición farmacéutica comprende dos principios activos (por ejemplo, dos agentes analgésicos, o una mezcla de un agente analgésico y un agente antimuscarinico o antidiurético o espasmolitico o un inhibidor de PDE 5 o zolpidem) formulados para liberación inmediata y (2) dos principios activos (por ejemplo, dos agentes analgésicos, o una mezcla de un agente analgésico y un agente antimuscarinico o antidiurético o espasmoliticos o inhibidores de PDE 5) formulados para liberación extendida. En otras modalidades, la composición farmacéutica comprende tres principios activos formulados para liberación inmediata y (2) tres principios activos formulados para liberación extendida. En otras modalidades, la composición farmacéutica comprende cuatro principios activos formulados para liberación inmediata y (2) cuatro principios activos formulados para liberación extendida. En estas modalidades, los principios activos en el componente de liberación inmediata pueden ser los mismos como, o diferentes de, los principios activos en el componente de liberación extendida. En algunas otras modalidades, el componente de liberación inmediata y/o el componente de liberación extendida se revisten además con un revestimiento de liberación retardada, tal como un revestimiento entérico.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende uno o más agentes analgésicos y un inhibidor de PDE 5, en donde los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación retardada y en donde el inhibidor de PDE 5 se formula para liberación inmediata. En otras modalidades, la composición farmacéutica comprende además un agente adicional seleccionado del grupo que consiste de agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espasmoliticos, inhibidores de PDE 5 y zolpidem, en donde el agente adicional se formula para liberación inmediata o liberación retardada. En algunas modalidades, la formulación de liberación retardada retrasa la liberación del principio activo (por ejemplo, el agente analgésico, agente antimuscarinico, antidiurético, espasmolitico, zolpidem y/o inhibidor de PDE 5) durante un periodo de 1, 2, 3, 4 o 5 horas.

Una composición de liberación inmediata puede comprender 100% de la dosis total de un agente activo dado administrado en una sola dosis unitaria. De manera alternativa, un componente de liberación inmediata puede estar incluido como un componente en una formulación de perfil de liberación combinada que puede proporcionar aproximadamente 1% a aproximadamente 60% de la dosis total de los agentes activos que se van a administrar por la formulación farmacéutica. Por ejemplo, el componente de liberación inmediata puede proporcionar aproximadamente 5%-60%, aproximadamente 10% a aproximadamente 60%, aproximadamente 10% a aproximadamente 50%, aproximadamente 10% a aproximadamente 40%, aproximadamente 10% a aproximadamente 30%, aproximadamente 10% a aproximadamente 20%, aproximadamente 20% a aproximadamente 60%, aproximadamente 20% a aproximadamente 50%, aproximadamente 20% a aproximadamente 30%, aproximadamente 30% a aproximadamente 60%, aproximadamente 30% a aproximadamente 50%, aproximadamente 40% a aproximadamente 60%, aproximadamente 40% a aproximadamente 50%, aproximadamente 45% a aproximadamente 60% o aproximadamente 45% a aproximadamente 50% de la dosis total de los agentes activos que se van a administrar por la formulación. En modalidades alternativas, el componente de liberación inmediata proporciona aproximadamente 2, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 o 60% de la dosis total de los agentes activos que se van a administrar por la formulación.

En algunas modalidades, la formulación de liberación inmediata o liberación retardada comprende un núcleo activo comprendido de una o más partículas inertes, cada una en la forma de una perla, comprimido, píldora, partícula granular, microcápsula, microesfera, microgránulo, nanocápsula o nanoesfera revestida en sus superficies con fármacos en la forma de, por ejemplo, una composición formadora de película que contiene fármaco usando,, por ejemplo, téenicas de lecho fluido u otras metodologías conocidas por aquellos expertos en la técnica. La partícula inherente puede ser de varios tamaños, siempre y cuando sea suficientemente grande para permanecer pobremente disuelta. De forma alternativa, el núcleo activo puede prepararse mediante granulación y molienda y/o por extrusión y esferonización de una composición de polímero que contiene la sustancia de fármaco.

La cantidad de fármaco en el núcleo dependerá de la dosis que se requiera y convencionalmente varia de aproximadamente 5 a 90% en peso. En general, el revestimiento polimérico en el núcleo activo será de aproximadamente 1 a 50% con base en el peso de la partícula revestida, dependiendo del tiempo de retraso y tipo de perfil de liberación requeridos y/o los polímeros y solventes de revestimiento elegidos. Aquellos expertos en la téenica serán capaces de seleccionar una cantidad apropiada de fármaco para revestirla o incorporarla en el núcleo para lograr la dosis deseada. En una modalidad, el núcleo inactivo puede ser una esfera de azúcar o un cristal amortiguador o un cristal amortiguador encapsulado, tal como carbonato de calcio, bicarbonato de sodio, ácido fumárico, ácido tartárico, etcétera, que altera el microambiente del fármaco para facilitar su liberación.

En algunas modalidades, la formulación de liberación retardada se forma al revestir una partícula que contiene fármaco soluble/dispersable en agua, tal como una perla, con una mezcla de un polímero insoluble en agua y un polímero entérico, en donde el polímero insoluble en agua y el polímero entérico pueden estar presentes en una relación en peso de 4:1 a 1:1, y el peso total de los revestimientos es 10 a 60% en peso con base en el peso total de las cuentas revestidas. Las cuentas marcadas con fármaco pueden incluir opcionalmente una membrana controladora de velocidad de disolución interior de etilcelulosa. La composición de la capa exterior, asi como los pesos individuales de las capas interior y exterior de la membrana polimérica se optimizan para lograr perfiles de liberación de ritmo circadiano deseados para un activo dado, que se predicen con base en correlaciones in vitro/ in vivo.

En otras modalidades, las formulaciones comprenden una mezcla de partículas que contienen fármaco de liberación inmediata y sin una membrana de polímero controladora velocidad de disolución y cuentas de liberación retardada que exhiben, por ejemplo, un tiempo de retraso de 2-4 horas después de administración oral, proporcionando por lo tanto un perfil de liberación de dos impulsos. En aun otras modalidades, las formulaciones comprenden una mezcla de dos tipos de perlas de liberación retardada: un primer tipo que exhibe un tiempo de retraso de 1-3 horas y un segundo tipo que exhibe un tiempo de retraso de 4-6 horas. En aun otras modalidades, las formulaciones comprenden una mezcla de dos tipos de perlas de liberación: un primer tipo que exhibe liberación inmediata y un segundo tipo que exhibe un tiempo de retraso de 1-4 horas, seguido con liberación extendida.

En otras modalidades, las formulaciones se diseñan con un perfil de liberación de tal forma que una fracción de la medicina (por ejemplo, 20-60%) se libera inmediatamente o dentro de dos horas de administración, y el resto se libera durante un periodo extendido de tiempo. La composición farmacéutica se puede administrar diariamente o se puede administrar en función de las necesidades. En ciertas modalidades, la composición farmacéutica se administra al sujeto antes de acostarse. En algunas modalidades, la composición farmacéutica se administra inmediatamente antes de ir a acostarse. En algunas modalidades, la composición farmacéutica se administra dentro de aproximadamente dos horas antes de acostarse, de manera preferente dentro de aproximadamente una hora antes de acostarse. En otra modalidad, la composición farmacéutica se administra aproximadamente dos horas antes de acostarse. En una modalidad adicional, la composición farmacéutica se administra al menos dos horas antes de acostarse. En otra modalidad, la composición farmacéutica se administra aproximadamente una hora antes de acostarse. En otra modalidad adicional, la composición farmacéutica se administra al menos una hora antes de acostarse. En aun otra modalidad, la composición farmacéutica se administra inmediatamente antes de acostarse. De manera preferente, la composición farmacéutica se administra de forma oral.

La dosis apropiada ("cantidad terapéuticamente efectiva") de los agentes activos en el componente de liberación inmediata, el componente de liberación extendida, el componente de liberación retardada o el componente de liberación extendida retardada dependerá, por ejemplo, de la gravedad y el curso de la condición, el modo de administración, la biodisponibilidad de los agentes particulares, la edad y el peso del paciente, la historia clínica del paciente y la respuesta a los agentes activos, discreción del médico, etcétera.

Como propuesta general, la cantidad terapéuticamente efectiva de los agentes analgésicos en el componente de liberación inmediata, el componente de liberación retardada, el componente de liberación extendida o el componente de liberación extendida, retardada se administra en el intervalo de aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/día ya sea por una o más administraciones. En algunas modalidades, el intervalo de cada agente activo administrado de forma diaria en una sola dosis o múltiples dosis es de aproximadamente 10 pg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/día, 10 pg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal/día, 10 pg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal/día, 10 pg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 3 mg/kg de peso corporal/día, 10 mg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal/día, 10 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 300 pg/kg de peso corporal/dia, 10 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 pg/kg de peso corporal/dia, 10 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 30 pg/kg de peso corporal/dia, 30 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/dia, 30 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal/dia, 30 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal/dia, 30 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 3 mg/kg de peso corporal/dia, 30 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal/dia, 30 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 300 pg/kg de peso corporal/dia, 30 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 pg/kg de peso corporal/dia, 100 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/dia, 100 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal/dia, 100 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal/dia, 100 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 3 mg/kg de peso corporal/dia, 100 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal/día, 100 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 300 pg/kg de peso corporal/dia, 300 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/dia, 300 pg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal/dia, 300 pg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal/dia, 300 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 3 mg/kg de peso corporal/dia, 300 pg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal/dia, 1 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/dia, 1 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal/dia, 1 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal/día, 1 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 3 mg/kg de peso corporal/dia, 3 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/dia, 3 mg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal/dia, 3 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal/dia, 10 mg/kg de peso corporal/día a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/dia, 10 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal/dia o 30 mg/kg de peso corporal/dia a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/dia.

Los agentes analgésicos descritos en la presente puede estar incluidos en un componente de liberación inmediata o un componente de liberación extendida, un componente de liberación retardada, un componente de liberación extendida o retardada combinaciones de los mismos para administración oral diaria en una sola dosis o intervalos de dosis combinadas de 1 g a 2000 mg, 1 mg a 1000 mg, 1 mg a 300 mg, 1 mg a 100 mg, 1 mg a 30 mg, 1 mg a 10 mg, 1 mg a 3 mg, 3 mg a 2,000 mg, 3 mg a 1000 mg, 3 mg a 300 mg, 3 mg a 100 mg, 3 mg a 30 mg, 3 mg a 10 mg, 10 mg a 2000 mg, 10 mg a 1000 mg, 10 mg a 300 mg, 10 mg a 100 mg, 10 mg a 30 mg, 30 mg a 2000 mg, 30 mg a 1000 mg, 30 mg a 300 mg, 30 mg a 100 mg, 100 mg a 2000 mg, 100 mg a 1000 mg, 100 mg a 300 mg, 300 mg a 2000 mg, 300 mg a 1000 mg o 1000 mg a 2000 mg. Como se espera, la dosis dependerá de la condición, tamaño, edad y condición del paciente.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende un solo agente analgésico. En una modalidad, el agente analgésico individual es aspirina. En otra modalidad, el agente analgésico individual es ibuprofeno. En otra modalidad, el agente analgésico individual es naproxeno o naproxeno sódico. En otra modalidad, el agente analgésico individual es indometacina. En otra modalidad, el agente analgésico individual es nabumetona. En otra modalidad, el agente analgésico es acetaminofeno.

En otras modalidades, la composición farmacéutica comprende un par de agentes analgésicos. Ejemplos de estos agentes analgésicos en pares incluyen, pero no se limitan a, ácido acetilsalicílico e ibuprofeno, ácido acetilsalicílico y naproxeno sódico, ácido acetilsalicílico y nabumetona, ácido acetilsalicílico y acetaminofeno, ácido acetilsalicílico e indometancina, ibuprofeno y naproxeno sódico, ibuprofeno y nabumetona, ibuprofeno y acetaminofeno, ibuprofeno e indometancina, naproxeno, naproxeno sódico y nabumetona, naproxeno sódico y acetaminofeno, naproxeno sódico e indometancina, nabumetona y acetaminofeno, nabumetona e indometancina, y acetaminofeno e indometancina. Los agentes analgésicos en pares se mezclaron a una relación de peso en el intervalo de 0.1:1 a 10:1, 0.2:1 a 5:1 o 0.3:1 a 3:1. En una modalidad, los agentes analgésicos en pares se mezclan a una relación en peso de 1:1.

En algunas otras modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud comprende además uno o más agentes antimuscarínicos. Ejemplos de los agentes antimuscarínicos incluyen, pero no se limitan a, oxibutinina, solifenacina, darifenacina, fesoterodina, tolterodina, trospin, atropina, y antidepresívos tricíclicos. La dosis diaria de agente antimuscarínico está en el intervalo de 1 mg a 300 mg, 1 pg a 100 mg, 1 pg a 30 mg; 1 pg a 10 mg, 1 pg a 3 mg, 1 pg a 1 mg, 1 pg a 300 pg, 1 pg a 100 mg, 1 pg a 30 pg, 1 pg a 10 pg, 1 pg a 3 pg, 3 pg a 100 mg, 3 pg a 100 mg, 3 pg a 30 mg; 3 pg a 10 mg, 3 pg a 3 mg, 3 pg a 1 mg, 3 pg a 300 pg, 3 pg a 100 pg, 3 pg a 30 pg, 3 pg a 10 pg, 10 pg a 300 mg, 10 pg a 100 mg, 10 pg a 30 mg; 10 pg a 10 mg, 10 pg a 3 mg, 10 pg a 1 mg, 10 pg a 300 pg, 10 pg a 100 pg, 10 pg a 30 pg, 30 pg a 300 mg, 30 pg a 100 mg, 30 pg a 30 mg; 30 pg a 10 mg, 30 pg a 3 mg, 30 pg a 1 mg, 30 pg a 300 pg, 30 pg a 100 pg, 100 pg a 300 mg, 100 pg a 100 mg, 100 pg a 30 mg; 100 pg a 10 mg, 100 pg a 3 mg, 100 pg a 1 mg, 100 pg a 300 pg, 300 pg a 300 mg, 300 pg a 100 mg, 300 pg a 30 mg; 300 pg a 10 mg, 300 pg a 3 mg, 300 pg a 1 mg, 1 mg a 300 mg, 1 mg a 100 mg, 1 mg a 30 mg, 1 mg a 3 mg, 3 mg a 300 mg, 3 mg a 100 mg, 3 mg a 30 mg, 3 mg a 10 mg, 10 mg a 300 mg, 10 mg a 100 mg, 1 O mg a 30 mg, 30 mg a 300 mg, 30 mg a 100 mg o 100 mg a 300 mg.

En algunas otras modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud incluye además uno o más antidiuréticos. Ejemplos de los antidiuréticos incluyen, pero no se limitan a, hormona antidiurética (ADH), angiotensina II, aldosterona, vasopresina, análogos de vasopresina (por ejemplo, hormona antidiurética desmopresina, lipresina, felipresina, ornipresina, y terlipresina), agonistas del receptor de vasopresina, antagonistas del receptor (es decir, NPR1, NPR2 y NPR3) de péptido natriurético de tipo C (CNP) y péptido natriurético atrial (ANP) (por ejemplo, HS-142-1, isatina, [Asu7,23']b-ANP-(7-28)], anantina, un péptido cíclico de Streptomyces coerulescens, y el anticuerpo monoclonal 3G12), antagonistas del receptor de somatostatina tipo 2 (por ejemplo, somatostatina), derivados farmacéuticamente aceptables, y análogos, sales, hidratos y solvatos de los mismos. En algunas modalidades, los uno o más antidiuréticos comprenden desmopresina . En otras modalidades, los uno o más antidiuréticos son desmopresina. La dosis diaria de antidiurético está en el intervalo de 1 pg a 300 mg, 1 mg a 100 mg, 1 pg a 30 mg; 1 g a 10 mg, 1 pg a 3 mg, 1 m§ to 1 mg, 1 pg a 300 mg, 1 pg a 100 pg, 1 pg a 30 p 1 pg a 10 pg, 1 pg a 3 pg, 3 pg a 100 mg, 3 pg a 100 mg, 3 pg a 30 mg; 3 pg a 10 mg, 3 pg a 3 mg, 3 pg a 1 mg, 3 pg a 300 pg, 3 pg a 100 pg, 3 pg a 30 pg, 3 pg a 10 pg, 10 pg a 300 mg, 10 pg a 100 mg, 10 pg a 30 mg; 10 pg a 10 mg, 10 pg a 3 mg, 10 pg a 1 mg, 10 pg a 300 pg, 10 pg a 100 pg, 10 pg a 30 pg, 30 pg a 300 mg, 30 pg a 100 mg, 30 pg a 30 mg; 30 pg a 10 mg, 30 pg a 3 mg, 30 pg a 1 mg, 30 pg a 300 pg, 30 pg a 100 pg, 100 pg a 300 mg, 100 pg a 100 mg, 100 pg a 30 mg; 100 pg a 10 mg, 100 pg a 3 mg, 100 pg a 1 mg, 100 pg a 300 pg, 300 pg a 300 mg, 300 pg a 100 mg, 300 pg a 30 mg; 300 pg a 10 mg, 300 pg a 3 mg, 300 pg a 1 mg, 1 mg a 300 mg, 1 mg a 100 mg, 1 mg a 30 mg, 1 mg a 3 mg, 3 mg a 300 mg, 3 mg a 100 mg, 3 mg a 30 mg, 3 mg a 10 mg, 10 mg a 300 mg, 10 mg a 100 mg, 10 mg a 30 mg, 30 mg a 300 mg, 30 mg a 100 mg o 100 mg a 300 mg.

En otras modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud comprende además uno o más espasmoliticos. Ejemplos de espasmoliticos incluyen, pero no se limitan a, carisoprodol, benzodiazepinas, baclofeno, ciclobenzaprina, metaxalona, metocarbamol, clonidina, análogo de clonidina, y dantroleno. En algunas modalidades, los espasmoliticos se utiliza en una dosis diaria de 0.1 mg a 1000 mg, 0.1 mg a 300 mg, 0.1 mg a 100 mg, 0.1 mg a 30 mg, 0.1 mg a 10 mg, 0.1 mg a 3 mg, 0.1 mg a 1 mg, 0.1 mg a 0.3 mg, 0.3 mg a 1000 mg, 0.3 mg a 300 mg, 0.3 mg a 100 mg, 0.3 mg a 30 mg, 0.3 mg a 10 mg, 0.3 mg a 3 mg, 0.3 mg a 1 mg, 1 mg a 1000 mg, 1 mg a 300 mg, 1 mg a 100 mg, 1 mg a 30 mg, 1 mg a 10 mg, 1 mg a 3 mg, 3 mg a 1000 mg, 3 mg a 300 mg, 3 mg a 100 mg, 3 mg a 30 mg, 3 ng a 10 mg, 10 mg a 1000 mg, 10 mg a 300 mg, 10 mg a 100 mg, 10 mg a 30 mg, 30 mg a 1000 mg, 30 mg a 300 mg, 30 mg a 100 mg, 100 mg a 1000 mg, 100 mg a 300 mg, o 300 mg a 1000 mg.

En otras modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud comprende además uno o más inhibidores de PDE 5. Ejemplos de inhibidores de PDE 5 incluyen, pero no se limitan a, tadalafilo, sildenafilo y vardenafilo. En algunas modalidades, uno o más inhibidores de PDE 5 comprenden tadalafilo. En otras modalidades, los uno o más inhibidores de PDE 5 son tadalafilo. En algunas modalidades, el inhibidor de PDE 5 se utiliza en una dosis diaria de 0.1 mg a 1000 mg, 0.1 mg a 300 mg, 0.1 g a 100 mg, 0.1 mg a 30 mg, 0.1 mg a 10 mg, 0.1 mg a 3 mg, 0.1 mg a 1 mg, 0.1 mg a 0.3 mg, 0.3 mg a 1000 mg, 0.3 mg a 300 mg, 0.3 mg a 100 mg, 0.3 mg a 30 mg, 0.3 mg a 10 mg, 0.3 mg a 3 mg, 0.3 mg a 1 mg, 1 mg a 1000 mg, 1 mg a 300 mg, 1 mg a 100 mg, 1 mg a 30 mg, 1 mg a 10 mg, 1 mg a 3 mg, 3 mg a 1000 mg, 3 mg a 300 mg, 3 mg a 100 mg, 3 mg a 30 mg, 3 mg a 10 mg, 10 mg a 1000 mg, 10 mg a 300 mg, 10 mg a 100 mg, 10 mg a 30 mg, 30 mg a 1000 mg, 30 mg a 300 mg, 30 mg a 100 mg, 100 mg a 1000 mg, 100 mg a 300 mg, o 300 mg a 1000 mg.

En algunas otras modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud comprende además zolpidem. La dosis diaria de zolpidem está en el intervalo de 100 mg a 100 mg, 100 pg a 30 mg, 100 pg a 10 mg, 100 pg a 3 mg, 100 pg a 1 mg, 100 pg a 300 mg, 300 pg a 100 mg, 300 pg a 30 mg, 300 pg a 10 mg, 300 g a 3 mg, 300 pg a 1 mg, 1 mg a 100 mg, 1 mg a 30 mg, 1 mg a 10 mg, 1 mg a 3 mg, 10 mg a 100 mg, 10 mg a 30 mg, o 30 mg a 100 mg.

Los agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espasmoliticos, zolpidem y/o inhibidores de PDE 5 se pueden formular, de forma separada junto con otros principios activos en la composición farmacéutica, para liberación inmediata, liberación extendida, liberación retardada, liberación extendida, retardada o combinaciones de las mismas.

En ciertas modalidades, la composición farmacéutica se formula para liberación extendida y comprende (1) un agente analgésico seleccionado del grupo que consiste de ácido acetilsalicílico, ibuprofeno, naproxeno, naproxeno sódico, nabumetona, acetaminofeno, e indometancina y (2) un inhibidor de PDE 5, tal como tadalafilo.

La composición farmacéutica se puede formular en una forma de tableta, cápsula, gragea, polvo, granulada, liquida, gel o emulsión. El liquido, gel o emulsión se puede ingerir por el sujeto en forma simple o contenida dentro de una cápsula.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende un solo agente analgésico y un solo inhibidor de PDE 5. En una modalidad, el agente analgésico individual es aspirina. En otra modalidad, el agente analgésico individual es ibuprofeno. En otra modalidad, el agente analgésico individual es naproxeno o naproxeno sódico. En otra modalidad, el agente analgésico individual es indometacina. En otra modalidad, el agente analgésico individual es nabumetona. En otra modalidad, el agente analgésico individual es acetaminofeno. En otra modalidad, el inhibidor de PDE 5 individual es tadalafilo. El agente analgésico e inhibidor de PDE se pueden dar en dosis en los intervalos descritos anteriormente.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende uno o más agentes analgésicos, individualmente o en combinación, en una cantidad entre 10-1000 mg, 10-800 mg, 10-600 mg, 10-500 mg, 10-400 mg , 10-300 mg, 10-250 mg, 10-200 mg, 10-150 mg, 10-100 mg 30-1000 mg, 30-800 mg, 30-600 mg, 30-500 mg, 30-400 mg, 30-300 mg, 30-250 mg, 30-200 mg, 30-150 mg, 30-100 mg, 100-1000 mg, 100-800 mg, 100-600 mg, 100-400 mg, 100-250 mg, 300-1000 mg, 300-800 mg, 300-600 mg, 300-400 mg, 400-1000 mg, 400-800 mg, 400-600 mg, 600-1000 mg, 600-800 mg o 800-1000 mg, en donde composición se formula para liberación extendida con un perfil de liberación en el cual los uno o más agentes analgésicos se liberan de forma continua durante un periodo de 2-12 horas o 5-8 horas.

En algunas modalidades, la composición se formula para liberación prolongada con un perfil de liberación en el cual se liberan de manera continua al menos 90 % del uno o más agentes analgésicos durante un periodo de 2-12 horas o 5-8 horas.

En algunas modalidades, la composición se formula para liberación extendida con un perfil de liberación en el cual los uno o más agentes analgésicos se liberan de forma continua durante un periodo de 5, 6, 7, 8, 10 o 12 horas. En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende además un agente antimuscarinico, un antidiurético, un espasmolitico, zolpidem o un inhibidor de PDE 5.

En otras modalidades, la composición se formula para liberación extendida con un perfil de liberación en el cual el agente analgésico se libera a una velocidad constante durante un periodo de 2-12 horas o 5-8 horas. En otras modalidades, la composición se formula para liberación extendida con un perfil de liberación en el cual el agente analgésico se libera a una velocidad constante durante un periodo de 5, 6, 7, 8, 10 o 12 horas. Como se usa en la presente, "una velocidad constante durante un periodo de tiempo" se define como un perfil de liberación en el cual la velocidad de liberación en cualguier punto durante un periodo de tiempo dado está dentro de 30%-300% de la velocidad de liberación promedio durante ese período dado de tiempo. Por ejemplo, si se liberan 80 mg de aspirina a una velocidad constante durante un período de 8 horas, la velocidad de liberación promedio es 10 mg/hr durante este período de tiempo y la velocidad de liberación real en cualquier momento durante este periodo está dentro del intervalo de 3 mg/hr a 30 mg/hr (es decir, dentro de 30%-300% de la velocidad de liberación promedio de 10 g/hr durante el periodo de 8 horas). En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende además un agente antimuscarinico, un antidiurético un espasmolitico, zolpidem o un inhibidor de PDE 5.

En algunas modalidades, el agente analgésico se selecciona del grupo que consiste de aspirina, ibuprofeno, naproxeno sódico, naproxeno, indometacina, nabumetona y acetaminofeno. En una modalidad, el agente analgésico es acetaminofeno. La composición farmacéutica se formula para proporcionar una liberación constante de pequeña cantidad del agente analgésico para mantener una concentración de fármaco efectiva en la sangre de tal forma que la cantidad total de fármaco en una sola dosis se reduce en comparación a la formulación de liberación inmediata.

En algunas otras modalidades, la composición farmacéutica comprende uno o más agentes analgésicos, de forma individual o en combinación, en una cantidad de entre 10-1000 mg, 10-800 mg, 10-600 mg, 10-500 mg, 10-400 mg, 10-300 mg, 10-250 mg, 10-200 mg, 10-150 mg, 10-100 mg 30-1000 mg, 30-800 mg, 30-600 mg, 30-500 mg, 30 -400 mg, 30-300 mg, 30-250 mg, 30-200 mg, 30-150 mg, 30-100 mg, 100-1000 mg, 100-800 mg, 100-600 mg, 100-400 mg, 100 -250 mg, 300-1000 mg, 300-800 mg, 300-600 mg, 300-400 mg, 400-1000 mg, 400-800 mg, 400-600 mg, 600-1000 mg, 600-800 mg o 800 -1000 mg, donde los agentes analgésicos se formulan para liberación extendida, caracterizados por un perfil de liberación de dos fases en el cual 20-60% de los agentes analgésicos se liberan dentro de 2 horas de administración y el resto se libera de forma continua, o a una velocidad constante, durante un período de 2-12 horas o 5-8 horas. En aun otra modalidad, los agentes analgésicos se formula para liberación extendida con un perfil de liberación de dos fases en el cual 20, 30, 40, 50 o 60% de los agentes analgésicos se liberan dentro de 2 horas de administración y el resto se libera de forma continua, o a una velocidad constante, durante un periodo de 2-12 horas o 5-8 horas. En una modalidad, los agentes analgésicos se seleccionan del grupo que consiste de aspirina, ibuprofeno, naproxeno sódico, naproxeno, indometacina, nabumetona, y acetaminofeno. En una modalidad, el agente analgésico es acetaminofeno. En otra modalidad, el agente analgésico es acetaminofeno. En algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende además un agente antimuscarínico, un antidiurético, un espasmolítico, zolpidem y/o un inhibidor de PDE 5. En algunas modalidades, el agente antimuscarínico, antidiurético, espasmolítico, zolpidem y/o inhibidor de PDE 5 se formulan para liberación inmediata.

Otro aspecto de la presente solicitud se relaciona a un método para reducir frecuencia de la micción al administrar a un sujeto en necesidad de la misma, dos o más agentes analgésicos, de forma alternativa para impedir el desarrollo de resistencia al fármaco. En una modalidad, el método comprende administrar un primer agente analgésico durante un primer periodo de tiempo y después administrar un segundo agente analgésico durante un segundo periodo de tiempo. En otra modalidad, el método comprende además administrar un tercer agente analgésico durante un tercer periodo de tiempo. El primer, segundo, y tercer agente analgésico son diferentes uno del otro y al menos uno de los cuales se formula para liberación extendida o liberación extendida, retardada. En una modalidad, el primer agente analgésico es acetaminofeno, el segundo agente analgésico es ibuprofeno, y tercer agente analgésico es naproxeno sódico. La duración de cada periodo puede variar dependiendo de la respuesta del sujeto a cada agente analgésico. En algunas modalidades, cada periodo dura de 3 dias a tres semanas. En otra modalidad, el primer, segundo, y tercer analgésico se formulan todos para liberación extendida o liberación extendida, retardada.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de la micción al administrar a un sujeto en necesidad de los mismos, dos o más agentes analgésicos, de forma alternativa, para impedir el desarrollo de resistencia al fármaco. En una modalidad, el método comprende administrar un primer agente analgésico durante un primer periodo de tiempo y entonces administrar un segundo agente analgésico durante un segundo periodo de tiempo. En otra modalidad, el método comprende además administrar un tercer agente analgésico durante un tercer periodo de tiempo. El primer, segundo y tercer agentes analgésicos son diferentes del uno del otro y al menos uno de los cuales se formula para liberación extendida o liberación extendida, retardada. En una modalidad, el primer agente analgésico es acetaminofeno, el segundo agente analgésico es ibuprofeno y el tercer agente analgésico es naproxeno sódico. La duración de cada periodo puede variar dependiendo de la respuesta del sujeto a cada agente analgésico. En algunas modalidades, cada periodo dura de 3 dias a tres semanas. En otra modalidad, el primer, segundo y tercer analgésico se formulan todos para liberación extendida o liberación extendida, retardada.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para tratar nicturia al administrar a una persona en necesidad del mismo un diurético, seguido con la composición farmacéutica de la presente solicitud. El diurético se dosifica y formula para tener un efecto diurético dentro de 6 horas de administración y se administra al menos 8 o 7 horas antes de acostarse. La composición farmacéutica de la presente solicitud se formula para liberación extendida o liberación extendida, retardada, y se administra dentro de 2 horas antes de acostarse.

Ejemplos de diuréticos incluyen, pero no se limitan a, sales acidificantes, tal como CaCl2 y NH4C1; antagonistas del receptor de vasopresina-arginina 2, tal como anfotericina B y citrato de litio; acuaréticos, como Goldenrod y Junipe; antagonistas del intercambiador Na-H, como dopamina; inhibidores de anhidrasa carbónica, como la acetazolamida y dorzolamida; diuréticos de asa, como bumetanida, ácido etacrinico, furosemida y torsemida; diuréticos osmóticos, tal como glucosa y manitol; diuréticos ahorradores de potasio, como amilorida, espironolactona, triamtereno, canrenoato de potasio; tiazidas, como bendroflumetiazida y hidroclorotiazida; y xantinas, como cafeína, teofilina y teobromina.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de la micción, que comprende administrar a un sujeto en necesidad de la misma una cantidad efectiva de toxina botulínica, en donde la toxina botulínica se administra por inyección en un músculo de la vejiga; y administrar de forma oral al sujeto la composición farmacéutica de la presente solicitud. En algunas modalidades, el paso de inyección comprende inyección de 10-200 unidades de toxina botulínica en 5-20 sitios en el músculo de la vejiga con una dosis de inyección de 2-10 unidades por sitio. En una modalidad, el paso de inyección comprende la inyección de toxina botulinica en 5 sitios en el músculo de la vejiga con una dosis de inyección de 2-10 unidades por sitio. En otra modalidad, el paso de inyección comprende la inyección de toxina botulinica en 10 sitios en el músculo de la vejiga en una dosis de inyección de 2-10 unidades por sitio. En otra modalidad, el paso de inyección comprende la inyección de toxina botulinica en 15 sitios en el músculo de la vejiga en una dosis de inyección de 2-10 unidades por sitio. En aun otra modalidad, el paso de inyección comprende la inyección de toxina botulinica en 20 sitios en el músculo de la vejiga en una dosis de inyección de 2-10 unidades por sitio. En algunas modalidades, el paso de inyección se repite cada 3, 4, 6, 8, 10 o 12 meses y el paso de administración oral se repite de forma diaria.

En algunas modalidades, la composición farmacéutica de la presente solicitud comprende un principio activo que comprende uno o más agentes analgésicos en una cantidad de 50-400 mg por agente, en donde los uno o más agentes analgésicos se seleccionan del grupo que consiste de aspirina, ibuprofeno, naproxeno, naproxeno sódico, indometacina, nabumetona, y acetaminofeno, y en donde la composición farmacéutica se formula para liberación extendida. En otras modalidades, la toxina botulinica se administra cada 3 o 4 meses y la composición farmacéutica de la presente solicitud se administra de forma diaria. El método se puede utilizar para el tratamiento de nicturia o vejiga hiperactiva.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de la micción en un sujeto. El método comprende administrar a un sujeto en necesidad de la misma una cantidad efectiva de uno o más agentes analgésicos y una cantidad efectiva de tadalafilo.

En una modalidad, los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación extendida y el tadalafilo se formula para liberación inmediata.

En otra modalidad, los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación retardada y tadalafilo se formula para liberación inmediata.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de la micción en un sujeto. El método comprende administrar a un sujeto en necesidad de la misma una composición farmacéutica que comprende un principio activo que comprende uno o más agentes analgésicos en una cantidad de 1-2000 mg por agente; y un inhibidor de PDE 5, en donde los uno o más agentes analgésicos se seleccionan del grupo que consiste de aspirina, ibuprofeno, naproxeno, naproxeno sódico, indometacina, nabumetona, y acetaminofeno.

En una modalidad, la composición farmacéutica se reviste con un revestimiento entérico.

En otra modalidad, la composición farmacéutica se formula para liberación extendida, caracterizada por un perfil de liberación de dos fases en el cual 20-60% del principio activo se libera dentro de dos horas de administración y el resto del principio activo se libera de forma continua durante un periodo de 2-12 horas. En una modalidad relacionada, la composición farmacéutica se reviste con un revestimiento entérico.

En otra modalidad, uno o más agentes analgésicos comprenden acetaminofeno.

En otra modalidad, el principio activo comprende además un agente adicional seleccionado del grupo que consiste de agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espasmoliticos y zolpidem.

En otra modalidad, el inhibidor de PDE 5 es tadalafilo.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a un método para reducir la frecuencia de micción en un sujeto. El método comprende administrar a un sujeto en necesidad de la misma una composición farmacéutica y que comprende: un primer principio activo que comprende uno o más agentes analgésicos y tadalafilo; y un segundo principio activo que comprende uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste de agentes analgésicos, agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espasmoliticos, inhibidores de PDE 5 y zolpidem, en donde el primer principio activo se formula para liberación inmediata y en donde el segundo principio activo se formula de liberación extendida.

En una modalidad, la composición farmacéutica se reviste además con un revestimiento entérico.

En otra modalidad, el primer principio activo comprende acetaminofeno.

En otra modalidad, el primer principio activo comprende además un agente antimuscarinico, un antidiurético, un espasmolitico o zolpidem.

Otro aspecto de la presente solicitud se refiere a una composición farmacéutica, que comprende uno o más agentes analgésicos, un inhibidor de PDE 5 y un portador farmacéuticamente aceptable.

En una modalidad, los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación extendida del inhibidor de PDE 5 se formula para liberación inmediata.

En otra modalidad, los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación retardada y el inhibidor de PDE 5 se formula para liberación inmediata.

En otra modalidad, los uno o más agentes analgésicos y el inhibidor de PDE 5 se formulan para liberación extendida durante un periodo de 2-12 horas.

En otra modalidad, el inhibidor de PDE 5 y 20-60% de cada uno de los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación inmediata, y en donde el resto de cada uno de los uno o más agentes analgésicos se formula para liberación extendida. En una modalidad relacionada, la composición farmacéutica se reviste además con un revestimiento entérico.

La presente invención se ilustra además por el siguiente ejemplo que no se debe considerar como limitante. Los contenidos de todas las referencias, patentes y solicitudes de patentes publicadas citadas a lo largo de esta solicitud se incorporan en la presente como referencia.

Ejemplo 1: Inhibición de la necesidad de orinar Veinte sujetos voluntarios, tanto masculinos como femeninos se inscribieron, cada uno de los cuales experimentaron impulso o deseo prematuro de orinar, que interfiere con su capacidad de dormir durante un periodo suficiente de tiempo para sentirse adecuadamente descansado. Cada sujeto ingirió 400-800 mg de ibuprofeno como una sola dosis antes de acostarse. Al menos 14 sujetos reportaron que fueron capaces de dormir mejor debido a que no se despertaron tan frecuentemente por la urgencia de orinar.

Muchos sujetos reportaron que después de varias semanas de uso nocturno de ibuprofeno, ya no se estaba llevando a cabo el beneficio de menos impulsos frecuentes de orinar. Sin embargo, todos estos sujetos reportaron además el regreso del beneficio después de abstenerse de tomar las dosis. Las pruebas más recientes han confirmado resultados similares que se pueden lograr en dosis mucho más bajas sin ninguna disminución posterior de los beneficios.

Ejemplo 2: Efecto de agentes analgésicos, neurotoxina botulínica y agentes antimuscarinicos en respuestas de macrófagos a estímulos inflamatorios y no inflamatorios Diseño experimental Este estudio se diseñó para determinar la dosis y eficacia in vitro de agente analgésicos y antimuscarinicos en el control de la respuesta de macrófagos a estímulos inflamatorios y no inflamatorios mediados por C0X2 y prostaglandinas (PGE, PGH, etcétera). Se establece en respuestas de referencia (dosis y cinética) a efectores inflamatorios y no inflamatorios en células de vejiga. Brevemente, las células cultivadas se exponen a agentes analgésicos y/o agentes antimuscarinicos en la ausencia o presencia de varios efectores.

Los efectores incluyen: lipopolisacárido (LPS), un agente inflamatorio, e inductor Cox2 como estimulante inflamatorio; carbacol o acetilcolina, estimulantes de la contracción del músculo liso como estimulante no inflamatorio; neurotoxina botulinica A, un inhibidor conocido de liberación de acetilcolina, como control positivo; y ácido araquidónico (AA), ácido gamma-linolénico (DGLA), o ácido eicosapentaenoico (EPA) como precursores de prostaglandinas, que se producen después de la oxidación secuencial de AA, DGLA, o EPA dentro de la célula por ciclooxigenasas (COX1 y COX2) y sintasas de prostaglandina terminales.

Los agentes analgésicos incluyen: salicilatos tal como aspirina; derivado de ácido iso-butil-propanoico-fenólico (ibuprofeno) tal como Advil, Motrin, Nuprin, y Medipren; naproxeno sódico tal como Aleve, Anaprox, Antalgin, Feminax Ultra, Flanax, Inza, Alivio Extended Midol, Nalgesin, Naposin, Naprelan, Naprogesic, Naprosin, Naprosin en suspensión, EC-Naprosin, Narocin, Proxen, Synflex y Xenobid; derivado de ácido acético tal como indometacina (Indocin); derivado de ácido 1-naftalenacético tal como nabumetona o relafen; derivado de N-acetil-para-aminofenol (APAP) tal como acetaminofeno o paracetamol (Tylenol); y Celecoxib.

Los agentes antimuscarinicos incluyen: oxibutinina, solifenacina, darifenacina, y atropina.

Los macrófagos se someten a simulación de corto plazo (1-2 horas) o de largo plazo (24 a 48 horas) con: (1) Cada agente analgésico solo en varias dosis. (2) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de LPS. (3) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (4) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (5) Neurotoxina botulínica A sola en varias dosis. (6) Neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de LPS. (7) Neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (8) Neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (9) Cada agente antimuscarínico solo en varias dosis. (10) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de LPS. (11) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (12) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA Las células entonces se analizan para la liberación de PGH2; PGE; PGE2; Prostacidina; Tromboxano; IL-1 b; IL-6; TNF-a; actividad de C0X2; la producción de cAMP y cGMP; la producción de IL-Ib, IL-6, TNF-a, y ARNm de C0X2; y expresión superficial de CD80, CD86 y moléculas de MHC de clase II.

Materiales y métodos Células macrófaqas Se utilizaron células macrófagas murinas RAW264.7 o J774 (obtenidas de ATCC) en este estudio. Las células se mantuvieron en un medio de cultivo que contiene RPMI 1640 complementado con suero bovino fetal al 10% (FBS), HEPES 15 mM, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, y 100 mg/ml de estreptomicina. Las células se cultivaron a 37°C en una atmósfera de CO2 al 5% y dividieron (conductos) una vez por semana.

Tratamiento in vitro de células macrófagas con analgésicos Se sembraron células macrófagas RAW264.7 en placas de 96 concavidades a una densidad celular de 1.5xl05 células por concavidad en 100 ml del medio de cultivo. Las células se trataron con (1) varias concentraciones de analgésicos (acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno o naproxeno), (2) varias concentraciones de lipopolisacárido (LPS), que es un efector de estímulos inflamatorios a las células macrófagas, (3) varias concentraciones de carbacol o acetilcolina, que son efectores de estímulos no inflamatorios, (4) analgésico y LPS o (5) analgésico y carbacol o acetilcolina. Brevemente, los analgésicos se disolvieron en medio de cultivo libre de FBS (es decir, RPMI 1640 complementado con HEPES 15 mM, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, y 100 mg/ml de estreptomicina) y se diluyeron a las concentraciones deseadas mediante dilución en serie con el mismo medio. Para las células tratadas con analgésico en la ausencia de LPS, se añadieron 50 ml de solución de analgésico y 50 ml medio de cultivo libre de FBS a cada concavidad. Para células tratadas con analgésico en la presencia de LPS, también se añadieron a cada concavidad 50 m? de solución de analgésico y 50 m? de LPS (de Salmonella typhimurium) en medio de cultivo libre de FBS. Todas las condiciones se probaron por duplicado.

Después de 24 o 48 horas de cultivo, se recolectaron 150 m? sobrenadantes de cultivo, se centrifugaron durante 2 minutos a 8000 rpm a 4°C para remover células y desechos y se almacenaron a -70°C para análisis de respuestas de citoquinas mediante ELISA. Las células se recolectaron y lavaron por centrifugación (5 min a 1500 rpm a 4°C) en 500 m? de amortiguador de fosfato (PBS). La mitad de las células entonces se congelaron instantáneamente en nitrógeno líquido y se almacenaron a -70°C. Las células restantes se tiñeron con anticuerpos monoclonales fluorescentes y se analizaron por citometría de flujo.

Análisis por citometría de flujo de la expresión de moleculas co-estimuladoras Para análisis por citometría de flujo, se diluyeron macrófagos en 100 ml de amortiguador de FACS (solución salina amortiguada con fosfato (PBS) con albúmina de suero bovino al 2% (BSA) y NaN3 al 0.01%) y se tiñeron 30 min a 4°C por la adición de anti-CD40 conjugado con FITC, anti-CD80 conjugado con PE, anticuerpo anti-CD86 conjugado con PE, anti-MHC clase II (I-Ad) (BD Bioscience). Las células entonces se lavaron por centrifugación (5 min a 1500 rpm a 4°C) en 300 ml de amortiguador FACS. Después de un segundo lavado, las células entonces se resuspendieron en 200 m? de amortiguador de FACS y el porcentaje de las células que expresan un marcador dado (solo positivo), o una combinación de marcadores (doble positivo) se analizaron con la ayuda de un citómetro de flujo Accuri C6 (BD Biosciences).

Análisis de respuestas de citoquinas por ELISA Los sobrenadantes de cultivo se sometieron a ELISA específico de citoquinas para determinar respuestas de IL-Ib, IL-6, y TNF-a en cultivos de macrófagos tratados con analgésicos, LPS solo o en combinación de LPS y analgésico. Los ensayos se llevaron a cabo en inmunoplacas (Nunc) Nunc MaxiSorp revestidas durante la noche con 100 ml de IL-6 anti-ratón, mAbs de TNF-alfa (BD Biosciences) o mAb de IL-Ib (Sistemas R & D) en 0.1 M de amortiguador de bicarbonato de sodio (pH 9.5). Después de dos lavadas con PBS (200 ml por concavidad), se añadieron 200 m? de BSA al 3% de PBS en cada concavidad (bloqueando) y las placas se incubaron durante 2 horas a temperatura ambiente. Las placas se lavaron de nuevo dos veces por la adición de 200 m?] por concavidad, 100 m? de diluciones en serie y normales de citoquina de sobrenadantes del cultivo se añadieron por duplicado, y las placas se incubaron durante la noche a 4°C. Finalmente, las placas se lavaron dos veces y se incubaron con 100 m? de IL-6 anti-ratón biotinilado secundario, mAbs de TNFa (BD Biosciences), o IL-Ib (Sistemas R & D), seguido por mAb de anti-biotina de cabra marcada con peroxidasa (Vector Laboratories). La reacción colorimétrica se reveló por la adición de substrato de ácido 2,2'-azino-bis (3)-etilbenciltiazolina-6-sulfónico (ABTS) y H2O2 (Sigma) y la absorbancia medida a 415 nm con un lector de placas multietiqueta VictorMR V(PerkinElmer).

Determinación de actividad de COX2 y la producción de cAMP y cGMP La actividad de COX2 en los macrófagos cultivados se determina por ELISA competitivo secuencial (Sistemas R & D). La producción de cAMP y cGMP se determina por el ensayo de cAMP y ensayo de cGMP. Los ensayos se realizan de forma rutinaria en la téenica.

Resultados La Tabla 1 resume los experimentos realizados con linea de células macrófagas Raw 264 y hallazgos principales en términos de los efectos de analgésicos en expresión de la superficie celular de moléculas co-estimuladoras CD40 y CD80. La expresión de estas moléculas se estimula por señales de C0X2 e inflamatorias y, por tanto, se evaluaron para determinar consecuencias funcionales de inhibición de C0X2.

Como se muestra en la tabla 2, acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno y naproxeno inhiben la expresión basal de moléculas co-estimuladoras CD40 y CD80 por macrófagos en todas las dosis probadas (es decir, 5xl05 nM, 5x 104 nM, 5x 103 nM, 5x 102 nM, 50 nM, y 5 nM), excepto por la dosis más alta (es decir, 5x 106 nM), que parece mejorar, en lugar de inhibir, la expresión de moléculas co-estimuladoras. Como se muestra en las figuras 1A y IB, este efecto inhibidor en la expresión de CD40 y CD50 se observó en dosis analgésicas tan bajo como 0.05 nM (es decir, 0.00005 mM). Este hallazgo apoya la idea de que una liberación controlada de pequeñas dosis de analgésico puede ser preferible para administración aguda de grandes dosis. El experimento también reveló que acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno y naproxeno tienen un efecto inhibidor similar en la expresión inducida por LPS de CD40 y CD80.

Tabla 1. Resumen de experimentos Tabla 2: Resumen de hallazgos principales *ND: no realizado (toxicidad) La tabla 3 resume los resultados de varios estudios que midieron niveles séricos de analgésico después de dosis terapéuticas orales en humanos adultos. Como se muestra en la tabla 3, los niveles séricos máximos de analgésicos después de una dosis terapéutica oral están en el intervalo de 104 a 105 nM. Por lo tanto, las dosis de analgésicos probados in vitro en la tabla 2 cubren el intervalo de concentraciones logrables in vivo en humanos.

Tabla 3. Niveles séricos de analgésico en sangre humana después de dosis terapéuticas orales - - - Ejemplo 3: Efecto de agentes analgésicos, neurotoxina botulínica y agentes antimuscarinicos en respuestas de células del músculo liso de vejiga de ratón a estímulos inflamatorios y no inflamatorios Diseño experimental Este estudio se diseñó para caracterizar como las dosis óptimas de analgésicos determinados en el ejemplo 2 afectan las células del músculo liso de la vejiga en cultivo celular o cultivos de tejidos, y para abordar si clases diferentes de analgésicos pueden sinergizar para inhibir más eficientemente respuestas de C0X2 y PGE2.

Los efectores, agentes analgésicos y agentes antimuscarinicos se describen en el ejemplo 2.

El cultivo primario de células de músculo liso de vejiga de ratón se someten a simulación de corto plazo (1-2 horas) o de largo plazo (24 a 48 horas) con: (1) Cada agente analgésico sólo en varias dosis. (2) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de LPS. (3) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (4) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (5) Neurotoxina botulínica A sola en varias dosis. (6) Neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de LPS. (7) Neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (8) Neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (9) Cada agente antimuscarínico solo en varias dosis. (10) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de LPS. (11) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (12) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA.

Las células entonces se analizan para liberación de PGH2; PGE; PGE2; Prostacidina; Tromboxano; IL-Ib; IL-6; TNF-a; la actividad de COX2; la producción de cAMP y cGMP; la producción de IL-Ib, IL-6, TNF-OÍ, y RNAm de COX2; y expresión superficial de CD80, CD86 y moléculas de MHC de clase II.

Materiales y métodos Aislamiento y purificación de células de vejiga de ratón Las células de vejiga se removieron de animales sometidos a eutanasia ratones C57BL/6 (8-12 semanas de edad), y las células se aislaron por digestión enzimática seguido por purificación en un gradiente Percoll. Brevemente, las vejigas de 10 ratones se picaron con tijeras a suspensión espesa fina en 10 mi de amortiguador de digestión (RPMI 1640, suero bovino fetal al 2%, 0.5 mg/ml de colagenasa, 30 mg/ml de DNasa). Las suspensiones espesas de vejiga se digirieron enzimáticamente durante 30 minutos a 37°C. Los fragmentos no digeridos se dispersaron de forma adicional a través de un preparador celular. La suspensión celular se sedimentó y se añadió a un gradiente de Percoll al 20%, 40% y 75% discontinuo para purificación en células mononucleares. Cada experimento utilizó 50-60 vejigas.

Después de lavados en RPMI 1640, las células de vejiga se resuspendieron en RPMI 1640 complementado con suero fetal bovino al 10%, HEPES 15 mM, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, y 100 mg/ml de estreptomicina y se sembraron en placas de microcultivo de cultivo celular de 96 concavidades negras de fondo claro en una densidad celular de 3xl04 células por concavidad en 100 ml. Las células se cultivaron a 37°C en una atmósfera de CO2 al 5%. Tratamiento in vitro de células con analgésicos Las células de vejiga se trataron con soluciones analgésicas (50 ml/concavidad) ya sea solas o juntas con carbacol (10-Molar, 50 m?/concavidad), como un ejemplo de estímulos no inflamatorios, o lipopolisacárido (LPS) de Salmonella typhimurium (1 mg/ml, 50 ml/concavidad), como un ejemplo de estímulos no inflamatorios. Cuando no se añadieron otros efectores de las células, se añadieron 50 ml de RPMI 1640 sin suero bovino fetal a las concavidades para ajustar el volumen final a 200 m?.

Después de 24 horas de cultivo, se recolectaron 150 m? de sobrenadantes de cultivo, se centrifugaron durante 2 minutos a 8000 rpm a 4°C para remover células y desechos, y se almacenaron a -70°C para análisis de respuestas a la prostaglandina E2 (PGE2) por ELISA. Las células se fijaron, permeabilizaron, y se bloquearon para detección de ciclooxigenasa-2 (COX2) utilizando un substrato fluorogénico. En células experimentales seleccionadas se estimularon durante 12 horas in vítro para análisis de respuestas a COX2.

Análisis de respuestas a COX2 Las respuestas a COX2 se analizaron por un ELISA basado en células utilizando inmunoensayo de COX2 total de humano/ratón (Sistemas R & D), siguiendo las instrucciones del fabricante. Brevemente, después de la fijación y permeabilización de las células, se añadieron un anti-COX2 total de ratón y un anti-GAPDH total de conejo a las concavidades de las placas de microcultivo de cultivo de celular de 96 concavidades negras de fondo claro. Después de incubación y lavados, un anti-IgG conjugado con HRP y un anti-IgG de conejo conjugado co AP se añadieron a las concavidades. Después de otra incubación y conjunto de lavados, los sustratos fluorogénicos AP y HRP se añadieron. Finalmente, se utilizó un lector de placas multietigueta VictorMR V (PerkinElmer) para leer la fluorescencia emitida a 600 nm (fluorescencia de COX2) y 450 nm (fluorescencia de GAPDH). Los resultados se expresan como niveles relativos de COX2 total como se determina por unidad de fluorescencia relativa (RFU) y normalizada a la GAPDH de proteínas de mantenimiento.

Análisis de respuestas a PGE2 Las respuestas a la prostaglandina E2 se analizaron por un ELISA competitivo secuencial (Sistemas R & D). Más específicamente, se añadieron sobrenadantes de cultivo o fuentes estándar de PGE2 a las concavidades de una microplaca de poliestireno de 96 concavidades revestidas con un anticuerpo policlonal de anti-ratón de cabra. Después de una hora de incubación en un agitador de microplacas, un PGE2 conjugado con HRP se añadió y las placas se incubaron durante unas dos horas adicionales a temperatura ambiente. Las placas entonces se lavaron y la solución de substrato de HRP se añadió a cada concavidad. Se permitió revelar el color durante 30 minutos, y la reacción se detuvo por la adición de ácido sulfúrico antes de la lectura de la placa a 450 nm con corrección de longitud de onda a 570 nm. Los resultados se expresaron pg/ml promedio de PGE2.

Otros ensayos La liberación de PGH2; PGE, Prostacidina; Tromboxano; IL-Ib; IL-6; y TNF-OÍ; la producción de cAMP y cGMP; la producción de IL-Ib, IL-6, TNFa, y ARNm de COX2; y expresión en superficie de CD80, CD86 y moléculas de MHC de clase II se determinaron como se describe en el ejemplo 2.

Resultados Los analgésicos inhiben las respuestas a COX2 de células de vejiga del ratón a un estimulo inflamatorio Diversos analgésicos (acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno y naproxeno) se probaron en células de vejiga de ratón en la concentración de 5 mM o 50 mM para determinar si los analgésicos pueden inducir respuestas a COX2. Los análisis de cultivos de 24 horas mostraron que ninguno de los analgésicos probados indujo respuestas a COX2 en células de vejiga de ratón in vitro.

También se probó el efecto de estos analgésicos en las respuestas a COX2 de células de vejiga de ratón a carbacol o estimulación de LPS in vitro. Como se indicó en la tabla 1, la dosis de carbacol probado no tiene efecto significativo en niveles de COX2 en células de vejiga de ratón. Por otra parte, el LPS incrementó de manera significativa los niveles de C0X2 totales. De forma interesante, el acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno, y naproxeno todos pudieron suprimir el efecto de LPS en niveles de C0X2. El efecto supresor del analgésico se observó cuando estos fármacos se probaron ya sea 5 mM o 50 mM (tabla 4).

Tabla 4. Expresión de COX2 por células de vejiga de ratón después de estimulación y tratamiento in vitro con analgésicos Los analgesicos inhiben las respuestas de PGE2 de células de vejiga de ratón a un estimulo inflamatorio Se midió la secreción de PGE2 en sobrenadantes de cultivo de células de vejiga de ratón para determinar el significado biológico de la alteración de niveles de COX2 de célula de vejiga de ratón por analgésicos. Como se muestra en la tabla 5, el PGE2 no se detectó en los sobrenadantes de cultivo de células de vejiga de ratón o células de vejiga cultivadas en la presencia de carbacol. Consistente con las respuestas de COX2 descritas anteriormente, la estimulación de células de vejiga de ratón con LPS indujeron la secreción de altos niveles de PGE2. Además los analgésicos acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno, y naproxeno suprimieron el efecto de LPS en secreción de PGE2, y no se observó diferencia entre las respuestas de células tratadas con la dosis de 5 o 50 mM de analgésico.

Tabla 5. Secreción de PGE2 por células de vejiga de ratón después de estimulación y tratamiento in vitro con analgésico.

En resumen, estos datos muestran que los analgésicos solos en 5 mM o 50 mM no inducen respuestas de C0X2 y PGE2 en células de vejiga de ratón. Los analgésicos en 5 mM o 50 mM, sin embargo, inhiben de manera significativa las respuestas de C0X2 y PGE2 de células de vejiga de ratón estimuladas in vitro con LPS (1 pg/ml). No se observó efecto significativo de analgésicos en respuestas de COX2 y PGE2 de células de vejiga de ratón estimuladas con carbacol (1 mM).

Ejemplo 4: Efecto de agentes analgésicos, neurotoxina botulinica y agentes antimuscarínicos en contracción de células del músculo liso de la vejiga de ratón.

Diseño experimental Las células de músculo liso de vejiga de rata o ratón cultivadas y el tejido de músculo liso de vejiga de rata o ratón se expusieron a estímulos inflamatorios y estímulos no inflamatorias en la presencia de agente analgésico y/o agente antimuscarínico en varias concentraciones. La contracción del músculo inducida por estímulos se mide para evaluar el efecto inhibidor del agente analgésico y/o agente antimuscarínico.

Los efectores, agentes analgésicos y agentes antimuscarínicos se describen en el ejemplo 2.

Los cultivos primarios de células de músculo liso de vejiga de ratón se sometieron a estimulación de corto plazo (1-2 horas) o de largo plazo (24 a 48 horas) con: (1) Cada agente analgésico solo en varias dosis. (2) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de LPS. (3) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (4) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (5) Neurotoxina botulinica A sola en varias dosis. (6) Neurotoxina botulinica A en varias dosis en la presencia de LPS. (7) Neurotoxina botulinica A en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (8) Neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (9) Cada agente antimuscarínico solo en varias dosis. (10) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de LPS. (11) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (12) Cada agente antimuscarínico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA.

Materiales y metodos Las células de vejiga de ratón primarias se aislaron como se describe en el ejemplo 3. En los experimentos seleccionados, se utilizaron cultivos de tejido de vejiga. Las contracciones de células de músculo liso de vejiga se grabaron con un polígrafo Grass (Quincy Misa, EUA).

Ejemplo 5: Efecto de agentes analgésicos orales y agentes antimuscarínicos en respuestas de COX2 Y PGE2 de células de músculo liso de vejiga de ratón.

Diseño experimental: Se dan dosis orales a ratones y ratones normales con síndrome de vejiga hiperactiva de aspirina, naproxeno sódico, ibuprofeno, indocina, nabumetona, Tylenol, celecoxib, oxibutinina, solifenacina, darifenacina, atropina, y combinaciones de los mismos. Los grupos de control incluyen ratones normales no tratados y ratones OAB no tratados con síndrome de vejiga hiperactiva. Después de treinta minutos (30) de las últimas dosis, las vejigas se recolectaron y estimularon ex vivo con carbacol o acetilcolina. En experimentos seleccionados, las vejigas se trataron con neurotoxina botulínica A antes de la estimulación con carbacol. Los animales se mantuvieron en jaulas metabólicas y se evalúan la frecuencia (y volumen) de la micción. Las salidas de la vejiga se determinan al monitorear la ingesta de agua y peso de la camilla de jaula. PGH2 sérica, PGE, PGE2, Prostacidina, Tromboxano, IL-1b, TNF-a, niveles de cAMP y cGMP se determinan por ELISA.

CD80, CD86, expresión de MHC de clase II en la totalidad de las células sanguíneas se determina por criometría de flujo.

Al final se sometieron a eutanasia, y se grabaron las contracciones de la vejiga ex vivo con un polígrafo Grass. Las porciones de las vejigas se fijaron en formalina, y las respuestas de C0S2 se analizaron por inmunohistoquímica.

Ejemplo 6: Efecto de agentes analgésicos, neurotoxina botulínica y agentes antimuscarínicos en respuestas de células de músculo liso de vejiga de ratón a estímulos inflamatorios yyno inflamatorios Diseño experimental Este estudio se diseñó para caracterizar cómo las dosis óptimas de analgésico determinado en los Ejemplos 1-5 afectan las células de músculo liso de vejiga humana en cultivo celular o cultivos de tejidos y para abordar si clases diferentes de analgésicos pueden sinergizar para inhibir de forma más eficiente las respuestas de COX2 y PGE2.

Los efectores, agentes analgésicos, y agentes antimuscarínicos se describen en el Ejemplo 2.

Las células del músculo liso de vejiga humana se sometieron a estimulación de corto plazo (1-2 horas) de largo plazo (24-48 horas) con: (1) Cada agente analgésico solo en varias dosis. (2) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de LPS. (3) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (4) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (5) Cada neurotoxina botulinica A en varias dosis. (6) Cada neurotoxina botulinica A en varias dosis en la presencia de LPS. (7) Cada neurotoxina botulinica A en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (8) Cada neurotoxina botulínica A en varias dosis en la presencia de A, DGLA, o EPA. (9) Cada agente antimuscarinico solo en varias dosis. (10) Cada agente antimuscarinico solo en varias dosis en la presencia de LPS. (11) Cada agente antimuscarinico solo en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (12) Cada agente antimuscarinico solo en varias dosis en la presencia de AA, DGLA o EPA.

Las células entonces se analizan para liberación de PGH2, PGE; PGE2; prostacidina; tromboxano; IL-Ib; IL-6; TNF-a; la actividad de COX2, la producción de cAMP y cGMP; la producción de IL-Ib; IL-6; TNF-a; ARNm de COX2; y expresión de superficie de CD80, CD86, y moléculas de MHC de clase II.

Ejemplo 7: Efecto de agentes analgésicos, neurotoxina botulínica y agentes antimuscarinicos en la contracción de células del músculo liso de vejiga humana Diseño Experimental Las células del músculo liso de vejiga humana cultivadas se expusieron a estímulos inflamatorios y a estímulos no inflamatorios en la presencia de un agente analgésico y/o agente antimuscarinico en varias concentraciones. La contracción del músculo inducida por estímulos se midió para evaluar el efecto inhibidor del agente analgésico y/o agente antimuscarínico.

Los efectos, agentes analgésicos, y agente antimuscarínicos se describen en el ejemplo 2.

Las células del músculo liso de vejiga humana se sometieron a estimulación de corto plazo (1-2 horas) o estimulación de largo plazo (24-48 horas) con: (1) Cada agente analgésico solo en varias dosis. (2) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de LPS. (3) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (4) Cada agente analgésico en varias dosis en la presencia de AA, DGLA, o EPA. (5) Cada neurotoxina botulinica A en varias dosis. (6) Cada neurotoxina botulinica A en varias dosis en la presencia de LPS. (7) Cada neurotoxina botulinica A en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (8) Cada neurotoxina botulinica A en varias dosis en la presencia de A, DGLA, o EPA. (9) Cada agente antimuscarínico solo en varias dosis. (10) Cada agente antimuscarinico solo en varias dosis en la presencia de LPS. (11) Cada agente antimuscarinico solo en varias dosis en la presencia de carbacol o acetilcolina. (12) Cada agente antimuscarinico solo en varias dosis en la presencia de AA, DGLA o EPA.

Las concentraciones de células del músculo liso de vejiga se grabaron con un polígrafo Grass (Quincy Mass, EU).

Ejemplo 8: Efecto de agentes analgésicos en respuestas de células del músculo liso de vejiga humana a señales inflamatorias y no inflamatorias Diseño Experimental Cultivo de células del músculo liso de vejiga humana normales Las células del músculo liso de vejiga humana normales se aislaron por digestión enzimática de piezas macroscópicamente normales de vejiga humana. Las células se consumieron in vitro por cultivo a 37°C en una atmósfera de CO2 al 5% en RPMI 1640 complementado con suero bovino fetal al 10%, HEPES 15 mM, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina, y 10 mg/ml de estreptomicina y pasadas una vez por semana por tratamiento con tripsina para separar las células, seguido por resiembra en un nuevo frasco de cultivo. La primera semana de cultivo, el medio de cultivo se complementó con 0.5 ng/ml de factor de crecimiento, 2 ng/ml de factor de crecimiento de fibroblastos, y 5 mg/ml de insulina.

Tratamiento de celulas del músculo liso de vejiga humana normales con analgésico in vi tro Las células del músculo liso de vejiga con tripsina y sembradas en placas de microcultivo a una densidad celular de 3xl04 células por concavidad en 100 ml se trataron con soluciones analgésicas (50 ml/concavidad) ya sea solas o juntas con carbacol (10-Molar, 50 m?/concavidad), como un ejemplo de estímulos no inflamatorios, o lipopolisacárido (LPS) de Salmonella typhirmurium (1 pg/ml, 50 m?/cavidad), como un ejemplo de estímulos no inflamatorios. Cuando no se añadieron otros efectores a las células, se añadieron 50 m? de RPMI 1640 sin suero bovino fetal a las concavidades para ajustar el volumen final a 200 m?.

Después de 24 horas de cultivo, se recolectaron 150 m? de sobrenadantes de cultivo, se centrifugaron durante 2 minutos a 8,000 rpm a 4°C para remover células y desechos, y se almacenaron a -70°C para análisis de respuestas a Prostaglandina E2 (PEG2) por ELISA. Las células se fijaron, permeabilizaron y bloquearon para detección de COX2 utilizando un sustrato fluorogénico. En experimentos seleccionados, las células se estimularon durante 12 horas in vitro para análisis de respuestas de C0X2, PGE2 y citoquina.

Análisis de respuestas de C0X2, PGE2, y citoquina Las respuestas de C0X2 y PGE2 se analizaron como se describe en el Ejemplo 3. Las respuestas de citoquina se analizaron como se describe en el Ejemplo 2.

Resultados Los analgésicos inhiben las respuestas de C0X2 de células del músculo liso de vejiga humana a estímulos inflamatorios y no inflamatorios - Los análisis de las células y sobrenadantes de cultivo después de 24 horas de cultivos mostraron que ninguno de los analgésicos probados solos indujeron respuestas de C0X2 en células del músculo liso de vejiga humana normales. Sin embargo, como se resume en la Tabla 6, el carbacol indujo bajas respuestas de C0X2, pero significativas en células del músculo liso de vejiga humana normales. Por otra parte, el tratamiento de LPS dio por resultado mayores niveles de respuestas de C0X2 en células del músculo liso de vejiga humana normales. El acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno, y naproxeno todos pudieron suprimir el efecto de carbacol y LPS en niveles de C0X2. El efecto supresor de los analgésicos se observó en respuestas de LPS inducido cuando estos fármacos se probaron a ya sea 5 mM o 50 mM.

Tabla 6. Expresión de C0X2 por celulas del músculo liso de vejiga humana normales después de estimulación in vitro con estímulos inflamatorios y no inflamatorios y tratamiento con analgésico.

#Los datos se expresan como la media de duplicados Los analgésicos inhiben las respuestas de PGE2 de células del músculo liso de vejiga humana normales a estímulos inflamatorios y no inflamatorios - Consistente con la inducción de respuestas de COX2 descritas anteriormente, tanto el carbacol como LPS indujeron la producción de PGE2 por células del músculo liso de vejiga humana normales. Acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno, y naproxeno también se encontraron que suprimen las respuestas de PGE2 inducidas por LPS ya sea a 5 mM o 50 mM (Tabla 7).

Tabla 7. Secreción de PGE2 por células del músculo liso de vejiga humana normales después de estimulación in vitro con estímulos inflamatorios y no inflamatorios y tratamiento con analgésico #Los datos se expresan como la media de duplicados Los analgésicos inhiben las respuestas de citoquina de células del músculo liso de vejiga humana normales a estímulos inflamatorios - Los análisis de las células y sobrenadantes de cultivo después de 24 horas de cultivo mostraron que ninguno de los analgésicos probados solos indujeron secreción de IL-6 o TNF-a en células del músculo liso de vejiga humana normales. Como se muestra en las Tablas 8 y 9, las dosis de carbacol probadas indujeron respuestas bajas de TNF-a y IL-b pero significativas en células del músculo liso de vejiga humana normales. Por otra parte, el tratamiento de LPS dio por resultado inducción masiva de estas citoquinas pro inflamatorias. Acetaminofeno, aspirina, ibuprofeno y naproxeno suprimen el efecto de carbacol y LPS en respuestas de TNFa y IL-6. El efecto supresor de los analgésicos en respuestas inducidas por LPS se observó cuando estos fármacos se probaron en ya sea 5 mM o 50 mM.

Tabla 8. Secreción de TNFa por celulas del músculo liso de vejiga humana normales después de estimulación in vitro con estímulos inflamatorios y no inflamatorios y tratamiento con analgésico Tabla 9. Secreción de IL-6 por celulas del músculo liso de vejiga humana normales después de estimulación in vitro con estímulos inflamatorios y no inflamatorios y tratamiento con analgésico #Los datos se expresan como la media de duplicados Las células del músculo liso de vejiga humana normales principales se aislaron, se cultivaron y evaluaron para sus respuestas a analgésicos en la presencia de estímulos no inflamatorios (carbacol) e inflamatorios (LPS). El objetivo de este estudio era determinar si las células del músculo liso de vejiga humana normales recapitulaban o no las observaciones hechas previamente con células de vejiga murinas.

El experimento descrito anteriormente se repetirá con agentes analgésicos y/o agentes antimuscarinicos en formulación de liberación retardada, o de liberación extendida, o formulaciones de liberación extendida y retardada.

La descripción anterior es para el propósito de enseñar a una persona experta en la téenica como poner en práctica la presente invención, y no se propone detallar todas aquellas modificaciones y variaciones obvias de la misma que llegarán a ser evidentes para aquellos expertos en la técnica tras la lectura de la descripción. Se propone, sin embargo, que todas estas modificaciones y variaciones obvias están incluidas dentro del alcance de la presente invención, que se define por las siguientes reivindicaciones. Se propone que las reivindicaciones cubran los componentes y pasos reivindicados en cualquier secuencia que es efectiva para cumplir los objetivos propuestos, a menos que el contexto indique específicamente lo contrario.

Claims (20)

REIVINDICACIONES

1. Uso de una composición farmacéutica para reducir la frecuencia de micción en un sujeto en necesidad de la misma, la composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de uno o más agentes analgésicos y una cantidad efectiva de tadalafilo.

2. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde la composición farmacéutica se formula para liberación inmediata, liberación retardada, liberación extendida o combinaciones de las mismas.

3. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación extendida y en donde el tadalafilo se formula para liberación inmediata.

4. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde dichos uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación retardada y en donde el tadalafilo se formula para liberación inmediata.

5. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde los uno o más agentes analgésicos comprenden acetaminofeno.

6. El uso de conformidad con la reivindicación 5, en donde los uno o más agentes analgésicos comprenden acetaminofeno en una cantidad de 1-2000 mg.

7. El uso de conformidad con cualquiera de una de las reivindicaciones 1 a 6, en donde la composición farmacéutica comprende además un agente adicional seleccionado del grupo que consiste de agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espasmoliticos y zolpidem.

8. Uso de una composición farmacéutica para reducir la frecuencia de micción en un sujeto en necesidad de la misma, la composición farmacéutica que comprende: un principio activo que comprende: uno o más agentes analgésicos en una cantidad de 1-2000 mg por agente; y un inhibidor de fosfodiesterasa tipo 5 (inhibidor de PDE 5), en donde los uno o más agentes analgésicos se seleccionan del grupo que consiste de aspirina, ibuprofeno, naproxeno, naproxeno sódico, indometacina, nabumetona, y acetaminofeno.

9. El uso de conformidad con la reivindicación 8, en donde la composición farmacéutica se formula para liberación inmediata, liberación retardada, liberación extendida o combinaciones de las mismas.

10. El uso de conformidad con la reivindicación 8, en donde la composición farmacéutica se formula para liberación retardada.

11. El uso de conformidad con la reivindicación 8, en donde la composición farmacéutica se formula para liberación extendida.

12. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11, en donde los uno o más agentes analgésicos comprenden acetaminofeno.

13. El uso de conformidad con una de las reivindicaciones 8 a 12, en donde el principio activo comprende además un agente adicional seleccionado del grupo que consiste de agentes antimuscarinicos, antidiuréticos, espasmoliticos y zolpidem.

14. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 13, en donde el inhibidor de PDE 5 es tadalafilo.

15. Una composición farmacéutica para reducir frecuencia de micción, caracterizada porque comprende: uno o más agentes analgésicos; un inhibidor de PDE 5; y un portador farmacéuticamente aceptable, en donde la composición farmacéutica se formula de una manera seleccionada del grupo que consiste de: a) los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación extendida y en donde el inhibidor de PDE 5 se formula para liberación inmediata, b) los unos o más agentes analgésicos se formulan para liberación retardada y en donde el inhibidor de PDE 5 se formula para liberación inmediata, c) los uno o más agentes analgésicos y el inhibidor de PDE 5 se formulan para liberación extendida durante un periodo de 2 a 12 horas, y d) el inhibidor de PDE 5 y 20 a 60% de cada uno de los uno o más agentes analgésicos se formula para liberación inmediata, y en donde el resto de cada uno de los uno o más agentes analgésicos se formula para liberación extendida.

16. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada además porque los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación extendida y en donde el inhibidor de PDE 5 se formula para liberación inmediata.

17. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada además porque los uno o más agentes analgésicos se formulan para liberación retardada y en donde el inhibidor de PDE 5 se formula para liberación inmediata.

18. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada además porque los uno o más agentes analgésicos y el inhibidor de PDE 5 se formulan para liberación extendida durante un periodo de 2 a 12 horas.

19. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada además porque el inhibidor de PDE 5 y 20 a 60% de cada uno de los uno o más agentes analgésicos se formula para liberación inmediata, y en donde el resto de cada uno de los uno más agentes analgésicos se formula para liberación extendida.

20. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada además porque la composición farmacéutica se reviste además con un revestimiento entérico.