MX2014011059A - Formulacion que comprende un silicato de calcio en particulas y clonostachys rosea para el tratamiento de plantas. - Google Patents
Formulacion que comprende un silicato de calcio en particulas y clonostachys rosea para el tratamiento de plantas.Info
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Abstract
Se describe una formulación en polvo para el tratamiento de plantas para aplicarse a plantas a través de vectorización abeja que comprende un silicato de calcio en partículas, clonostachys rosea, un agente de absorción de humedad para absorber la humedad de la formulación, un agente atrayente para atraer la formulación a las plantas, y un diluyente.
Description
FORMULACION QUE COMPRENDE UN SILICATO DE CALCIO EN
PARTICULAS Y CLONOSTACHYS ROSEA PARA EL TRATAMIENTO DE
PLANTAS
Campo de la invención
La descripción se refiere a una formulación para tratamiento de plantas. Específicamente, la descripción se refiere a una formulación para tratamiento de plantas, la cual puede ser diseminada a plantas mediante vectorización de insectos, tal como vectorización de abeja.
Antecedentes
La patente estadounidense no. 5,348,51 1 (Gross et al.) pretende describir agentes de biocontrol que son diseminados para el control de plagas por Apis mellifera L. usando un dispositivo insertado en un súper modificado reducido en tamaño, el cual es integrado como una subestructura de una colmena comercial, convencional. El dispositivo proporciona rutas de entrada y salida separadas, lo cual permite que las abejas que salen estén contaminadas en la superficie con el agente de biocontrol conforme salen de la colmena.
La patente estadounidense no. 5, 189,100 (Kovach) pretende describir un dispositivo o dispensador de diseminación que no es destructivo para la colmena, es fácil de insertar, rellenar y remover, e incluye un cartucho insertable en un alojamiento. El dispositivo es designado para ser usado por un apicultor no profesional, tal como un cultivador. Es insertado en la entrada de la colmena estándar con
mínima ruptura a la colmena o colonia. Cuando las abejas salen de la colmena, caminan por una rampa a través de una suspensión de control biológico seca y dejan la colmena, portando y depositando el agente de control biológico sobre las flores conforme polinizan la cosecha. Cuando el agente de control biológico se agota, material adicional es adicionado fácilmente al levantar una tapa engoznada o reemplazando el viejo cartucho con uno lleno. La tapa también proporciona algo de protección de humedad para mantener el agente biológico seco, facilitando así la inoculación de abejas. El dispensador es removido al simplemente jalarlo de la entrada de la colmena cuando las actividades de polinización son completadas. La remoción no es destructiva y no destruye la integridad de la colmena. Cuando el dispositivo es insertado, rellenado o removido en la noche, se requiere mínima ropa protectora para el usuario.
La publicación de solicitud de patente de PCT no. WO 2010/136599 (Put et al.) pretende describir la diseminación de agente de control biológico u otras substancias a través del uso de abejas, en particular abejorros. Un dispositivo diseminador es instaladle en o en conexión con la colmena y contiene agentes de control biológicos u otras substancias las cuales son recolectadas, portadas y diseminadas por las abejas cuando dejan la colmena.
Breve descripción de la invención
La siguiente síntesis pretende introducir al lector a los diversos aspectos de la enseñanza de los solicitantes, pero no definir alguna
invención.
De acuerdo con un aspecto, una formulación para tratamiento de plantas comprende un silicato de calcio particulado, y un agente para tratamiento de plantas combinado con el silicato de calcio particulado.
De acuerdo con otro aspecto, una formulación de polvo de biocontrol para aplicación a plantas mediante vectorización de insectos comprende: un agente para tratamiento de plantas; un agente estabilizante unido al agente para tratamiento de plantas para estabilizar el agente para tratamiento de plantas; un agente de absorción de humedad para absorber humedad a partir de la formulación; un agente atrayente para atraer la formulación a las plantas; y un diluyente.
De acuerdo con otro aspecto, una formulación en polvo para tratamiento de plantas comprende un agente para tratamiento de plantas comprendiendo esporas de clonostachys rosea. La formulación comprende entre aproximadamente 2 x 108 y aproximadamente 4 x 108 esporas por gramo de formulación.
De acuerdo con otro aspecto, un método para preparar una formulación para tratamiento de plantas comprende: proporcionar una suspensión de un agente para tratamiento de plantas en un líquido; proporcionar silicato de calcio particulado; y unir la suspensión al silicato de calcio.
De acuerdo con otro aspecto, un método para preparar una formulación para tratamiento de plantas comprende: unir esporas de clonostachys rosea a un agente estabilizante particulado para producir
partículas de tratamiento de plantas estabilizadas; combinar las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas con al menos un aditivo para producir una mezcla de las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas y el aditivo; y adicionar un agente estabilizante libre a la mezcla para ajustar la concentración de las esporas en la formulación de entre aproximadamente 2 x 108 y aproximadamente 4 x 108 esporas por gramo de formulación.
De acuerdo con otro aspecto, una formulación para el tratamiento de plantas mediante vectorización de insectos comprende un agente para tratamiento de plantas y un agente de absorción de humedad particulado para absorber humedad de la formulación. El agente de absorción de humedad tiene un tamaño de partícula seleccionado para ser demasiado grande para ser vectorizado por insectos. En algunos ejemplos, el tamaño de partícula de absorción de humedad puede ser mayor que el tamaño de las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas. En algunos ejemplos, las partículas de absorción de humedad pueden tener un tamaño desde aproximadamente 15 hasta aproximadamente 90 veces más que el tamaño de las partículas de tratamiento de plantas estabilizadas.
De acuerdo con otro aspecto, la clonostachys rosea es usada para tratar botrytis cinerea en cañóla.
De acuerdo con otro aspecto, la clonostachys rosea es usada para tratar sclerotinia sclerotiorum en cañóla.
En algunos ejemplos, el agente para tratamiento de plantas puede unirse a al menos algo del silicato de calcio para formar partículas de
tratamiento de plantas estabilizadas. La formulación puede comprender entre aproximadamente 5% en peso y 15% en peso de partículas para tratamiento de plantas estabilizadas, más específicamente entre aproximadamente 7% en peso y 8% en peso de partículas para tratamiento de plantas estabilizadas.
En algunos ejemplos, al menos algo del silicato de calcio puede ser silicato de calcio libre. La formulación puede comprender entre aproximadamente 10% en peso y 25% en peso de silicato de calcio libre, más específicamente entre aproximadamente 17% en peso y 18% en peso de silicato de calcio libre.
En algunos ejemplos, el agente para tratamiento de plantas puede comprender un agente microbiano. Por ejemplo, el agente para tratamiento de plantas puede comprender una espora fúngica, tal como clonostachys rosea. Para ejemplo adicional, el agente para tratamiento de plantas puede comprender beauveria bassiana.
En algunos ejemplos, el agente para tratamiento de plantas puede comprender una espora fúngica, y la espora fúngica puede unirse a al menos algo del silicato de calcio. El agente para tratamiento de plantas puede tener una densidad de entre aproximadamente 1 x 109 y 4 x 109 esporas por gramo de silicato de calcio al cual se une, más específicamente aproximadamente 2 x 109 esporas por gramo de silicato de calcio al cual se une.
En algunos ejemplos, la formulación puede comprender entre aproximadamente 2 x 108 y aproximadamente 4 x 108 esporas por gramo de formulación.
En algunos ejemplos, el silicato de calcio particulado puede comprender partículas teniendo una designación de tamiz de entre aproximadamente 45 mieras y aproximadamente 75 mieras, más específicamente aproximadamente 45 mieras.
En algunos ejemplos, un agente de absorción de humedad puede mezclarse con el silicato de calcio particulado y agente para tratamiento de plantas. El agente de absorción de humedad puede comprender gel de sílice. El gel de sílice puede comprender partículas teniendo una designación de tamiz de entre aproximadamente 700 mieras y 4000 mieras, más específicamente aproximadamente 840 mieras. La formulación puede comprender entre aproximadamente 0.5% en peso y 5% en peso de agente de absorción de humedad, más específicamente aproximadamente 1 % en peso de agente de absorción de humedad.
En algunos ejemplos, la formulación puede comprender además un agente atrayente mezclado con el silicato de calcio particulado y agente para tratamiento de plantas, para atraer la formulación a plantas y/o insectos vectorizantes. El agente atrayente puede tener una carga electrostática positiva neta. El agente atrayente puede comprender una mezcla de minerales. La formulación puede comprender entre aproximadamente 5% en peso y aproximadamente 20% en peso de agente atrayente, más específicamente aproximadamente 10% en peso de agente atrayente el agente atrayente puede tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 35 mieras y aproximadamente 75 mieras, más específicamente aproximadamente 45 mieras.
En algunos ejemplos, la formulación puede comprender además un
diluyente mezclado con el silicato de calcio particulado y agente para tratamiento de plantas. El diluyente puede comprender una harina, tal como al menos una harina de centeno, harina de trigo, harina de escanda, harina de arroz y harina de maíz. En un ejemplo particular, el diluyente comprende harina de maíz. La formulación puede comprender entre aproximadamente 50% en peso y 75% en peso de diluyente, más específicamente aproximadamente 64% en peso de diluyente el diluyente puede tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 75 mieras y aproximadamente 250 mieras, más específicamente aproximadamente 125 mieras.
En algunos ejemplos, la formulación puede comprender además un agente anti-torta. El agente anti-torta puede comprender óxido de magnesio. La formulación puede comprender entre aproximadamente 0.75% en peso a 5.0% en peso de óxido de magnesio, más específicamente ente aproximadamente 1 % en peso y aproximadamente 1.5% en peso de óxido de magnesio. El agente anti-torta puede tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 75 mieras y aproximadamente 150 mieras, más específicamente aproximadamente 125 mieras.
En algunos ejemplos, la formulación puede ser usada para tratar al menos uno de selerotinia selerotiorum, botrytis cinerea y Monilinia vacciniicorymbosi en una planta.
En algunos ejemplos, la formulación puede ser usada para tratar una enfermedad en al menos una de plantas de cañóla y plantas de girasol.
En algunos ejemplos, la formulación puede ser usada para aumentar la velocidad de germinación en una cosecha.
En algunos ejemplos, la formulación puede ser usada como un agente vectorizante de abeja.
Descripción detallada
Varios aparatos, procesos y/o formulaciones serán descritos a continuación para proporcionar un ejemplo de una modalidad de cada invención reclamada. Ninguna modalidad descrita a continuación limita alguna invención reclamada y ninguna invención reclama puede cubrir aparatos, procesos y/o formulaciones que difieran de aquéllas descritas más adelante. Las invenciones reclamadas no están limitadas a aparatos, procesos y/o formulaciones teniendo todas las características de cualquier aparato, proceso y/o formulación descrito más adelante, o características comunes para múltiples o todos los aparatos, procesos y/o formulaciones descritas más adelante. Es posible que un aparato, proceso y/o formulación descrito más adelante no sea una modalidad de cualquier derecho exclusivo otorgado por emisión de esta solicitud de patente. Cualquier invención descrita en un aparato, proceso y/o formulación descrito más adelante y para el cual un derecho exclusivo no es otorgado por emisión de esta solicitud de patente, puede ser la materia en cuestión de otro instrumento protector, por ejemplo, una solicitud de patente de continuación, y los solicitantes, inventores o poseedores no pretenden abandonar, renunciar o dedicar al público nada de tal invención mediante su descripción en este documento.
Las formulaciones para tratamiento de plantas ejemplares incluyen un agente para tratamiento de plantas (es decir, un agente que es benéfico para una cosecha), y uno o más aditivos. Por ejemplo, un agente para tratamiento de plantas puede promover el crecimiento, vigor y productividad de plantas; intensificar las velocidades de germinación y/o calidad de semilla en una cosecha; intensificar la resistencia a enfermedades, plagas y/o tensiones ambientales, tales como clima adverso o condiciones de suelo; controlar o actuar contra enfermedad o plagas; o promover la recuperación de plantas de lesión y/o infección.
En algunos ejemplos, el agente para tratamiento de plantas puede incluir uno o más microbios, tales como una bacteria, un virus, o un hongo o espora fúngica. Un ejemplo de una espora fúngica adecuada incluye clonostachys rosea, la cual puede controlar patógenos tales como sclerotinia sclerotioru, monolinia vacciniicorymbosi, y/o botrytis cinérea en varias cosechas, incluyendo cañóla, girasol, frambuesa, mora azul, fresa, manzana, pera, kiwi, sandía, café, mango, aguacate, cereza, ciruela, almendra, durazno, anacardo, guayaba, alfalfa, trigo sarraceno, clavo, frijol, chícharo, cebolla, soya, algodón, mostaza, zarzamora, grosella espinosa, pimiento, berenjena y grosella. Otro ejemplo de una espora fúngica adecuada incluye beauveria bassiana, la cual puede controlar el gusano de arándano en cosechas de arándano. Un ejemplo de una bacteria adecuada es Bacillus Thuringiensis, la cual puede controlar plagas de insecto en varias cosechas.
La concentración de agente para tratamiento de plantas en la formulación puede variar dependiendo de, por ejemplo, la naturaleza del
agente para tratamiento de plantas, y/o las condiciones en las cuales la formulación va a ser usada (por ejemplo, clima, planta objetivo, etc.). En un ejemplo particular, e donde el agente para tratamiento de plantas incluye esporas de clonostachys rosea, la formulación puede incluir entre aproximadamente 2 x 108 y 4 x 108 esporas por gramo de formulación.
La formulación puede incluir varios aditivos combinados con el agente para tratamiento de plantas en algunos ejemplos, los aditivos incluyen uno o más de un agente estabilizante, un agente de absorción de humedad, un agente atrayente, un diluyente y/o un agente anti-torta, como será descrito con mayor detalle más adelante.
Agentes estabilizantes pueden generalmente servir para prevenir o minimizar el decaimiento, descomposición o activación del agente para tratamiento de plantas antes de la entrega del agente para tratamiento de plantas a la planta objetivo. Por ejemplo, en casos en donde el agente para tratamiento de plantas es una espora fúngica, el agente estabilizante puede absorber agua para mantener la espora fúngica relativamente seca, y por ello estabilizar las esporas en un estado durmiente y prevenir o minimizar la germinación de las esporas antes de la entrega de las esporas a una planta.
Un ejemplo de un agente estabilizante es silicato de calcio particulado (vendido bajo el nombre comercial Micro-cel®). Las partículas de silicato de calcio pueden tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 45 mieras (aproximadamente malla 325) y aproximadamente 75 mieras (aproximadamente malla 200). En un
ejemplo particular, las partículas de silicato de calcio tienen una designación de aproximadamente 45 mieras (malla 325).
En algunos ejemplos, el agente para tratamiento de plantas puede unirse al menos a algo del agente estabilizante, para producir partículas para tratamiento de plantas estabilizadas. Por ejemplo, una suspensión de esporas fúngicas en agua puede ser atomizada sobre partículas de silicato de calcio, de manera que las esporas fúngicas generalmente se adhieren a las partículas de silicato de calcio. La suspensión de esporas fúngicas puede ser preparada como se describe en la publicación de solicitud de patente estadounidense no. US 2012/002106 (Sutton et al.), incorporada en la presente por referencia en su totalidad. Las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas pueden tener una densidad de esporas de entre aproximadamente 1 x 109 y aproximadamente 4 x 109 esporas por gramo de silicato de calcio al cual se unen las esporas. En un ejemplo particular, las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas tienen una densidad de espora de aproximadamente 2 x 10® esporas por gramo de silicato de calcio al cual se unen las esporas.
En algunos ejemplos la formulación puede incluir entre aproximadamente 5% y aproximadamente 15% en peso de partículas para tratamiento de plantas estabilizadas, más específicamente entre aproximadamente 7% en peso y aproximadamente 8% en peso de partículas para tratamiento de plantas estabilizadas. En un ejemplo particular, la formulación puede incluir 7.5% en peso de partículas para tratamiento de plantas estabilizadas.
En algunos ejemplos, al menos algo del agente estabilizante puede mezclarse en la formulación sin estar unido al agente para tratamiento de plantas. Tal agente estabilizante puede ser referido como agente estabilizante libre. La cantidad de agente estabilizante libre en la formulación puede ser seleccionado opcionalmente para producir una formulación teniendo una concentración particular de agente para tratamiento de plantas. Por ejemplo, los componentes de la formulación pueden mezclarse juntos, y entonces el agente estabilizante libre puede ser adicionado a la formulación hasta que la concentración de esporas en la formulación alcanza una concentración de entre aproximadamente 2 x 108 y 4 x 108 esporas por gramo de formulación. En tales ejemplos, la formulación puede incluir entre aproximadamente 10% en peso y aproximadamente 25% en peso de agente estabilizante libre, más específicamente entre aproximadamente 17% en peso y aproximadamente 18% en peso de agente estabilizante libre. En un ejemplo particular, la formulación puede incluir aproximadamente 17.5% de agente estabilizante libre.
El agente de absorción de humedad puede absorber humedad de la formulación, con el fin de mantener la formulación relativamente seca y prevenir formación de torta o grumos de la formulación. Ejemplos de agentes de absorción de humedad incluyen desecantes, tales como partículas o perlas de gel de sílice, y polímeros superabsorbentes, tales como poliacrilato de sodio. Ejemplos adicionales de agentes de absorción de humedad incluyen virutas de madera y bolas de arcilla. En algunos ejemplos, la formulación puede incluir entre aproximadamente
0.5% en peso 5% en peso de agente de absorción de humedad. En un ejemplo particular, la formulación puede incluir aproximadamente 1 % en peso de agente de absorción de humedad.
En ejemplos en donde la formulación va a ser entregada por vectorización de insectos, el tamaño de partícula del agente de absorción de humedad puede ser seleccionado de manera que sea demasiado grande para ser portado por insectos, y por lo tanto, generalmente permanecerá en el diseminador, con el fin de continuar absorbiendo humedad de la formulación. Por ejemplo, las partículas pueden tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 700 mieras (malla 25) y aproximadamente 4000 mieras (malla 5). En un ejemplo particular, el gel de sílice puede estar en la forma de partículas teniendo una designación de tamiz de aproximadamente 840 (malla 20).
El agente atrayente puede ayudar a atraer la formulación a plantas y/o insectos de vectorización. Por ejemplo, el agente atrayente puede tener una carga electrostática positiva neta, de manera que sea electrostáticamente atraída a plantas y/o insectos de vectorización, los cuales tienen una carga electrostática negativa neta. En algunos ejemplos, el agente atrayente puede incluir un mineral, o una mezcla de minerales. En un ejemplo particular, el agente atrayente puede incluir una mezcla mineral vendida por Agri-Dynamics (Martins Creek, PA) bajo el nombre DYNA-MI NM R, la cual incluye los siguientes minerales: dióxido de silicio, óxido de aluminio, calcio, hierro, magnesio, potasio, sodio, fósforo, titanio, manganeso, estroncio, circonio, litio, rubidio, boro, cinc, vanadio, cromo, cobre, itrio, níquel, cobalto, galio, cesio, escandio,
estaño, molibdeno y elementos en trazas adicionales. En otro ejemplo, el agente atrayente puede incluir piedra caliza de calcio.
En algunos ejemplos, la formulación puede incluir entre aproximadamente 5% en peso y aproximadamente 20% en peso de agente atrayente. En un ejemplo particular, la formulación puede incluir aproximadamente 10% en peso de agente atrayente. En algunos ejemplos, el agente atrayente puede tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 35 mieras (aproximadamente malla 350) y aproximadamente 75 mieras (aproximadamente malla 200). En un ejemplo particular, el agente atrayente puede tener una designación de tamiz de aproximadamente 45 mieras (aproximadamente malla 325).
El diluyente puede ser un almidón o harina adecuado. En ejemplos en donde la formulación va a ser entregada por vectorización de insectos, el diluyente puede ser seleccionado de manera que no irrite o dañe los insectos, y no sea comido por los insectos. El diluyente puede ser seleccionado así de manera que no absorba cantidades significativas de humead, de manera que el diluyente no forme grumos. Ejemplos de diluyentes que pueden serán adecuados para vectorización de insectos incluyen harina de maíz, y harinas de granos, tales como centeno, trigo, harina de arroz y harina de escanda. En ejemplos alternativos, el diluyente puede ser caolín. En otros ejemplos, el diluyente puede comprender leche en polvo o talco. Estos pueden ser particularmente útiles en ejemplos en donde la formulación es entregada en una manera diferente de vectorizado de insecto, tal como por atomización.
En algunos ejemplos, la formulación puede incluir entre aproximadamente 50% en peso y aproximadamente 75% en peso de diluyente. En un ejemplo particular, la formulación puede comprender aproximadamente 64% en peso de diluyente. En algunos ejemplos, el diluyente puede tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 75 mieras (aproximadamente malla 200) y aproximadamente 250 mieras (aproximadamente malla 60). En un ejemplo particular, el diluyente puede tener una designación de tamiz de aproximadamente 125 mieras (aproximadamente malla 125).
La formulación puede incluir cualquier agente anti-torta. Un ejemplo particular de un agente anti-torta es óxido de magnesio. La formulación puede incluir entre aproximadamente 0.75% en peso ya aproximadamente 5.0% en peso de agente anti-torta, y más específicamente, entre aproximadamente 1 % en peso y aproximadamente 1.5% en peso de agente anti-torta. En un ejemplo particular, la formulación puede incluir 1.25% en peso de agente anti torta. En algunos ejemplos, el agente anti-torta puede tener una designación de tamiz de entre aproximadamente 75 mieras (aproximadamente malla 200) y aproximadamente 150 mieras (aproximadamente malla 100). En un ejemplo particular, el agente anti torta tiene una designación de tamiz de aproximadamente 125 mieras (aproximadamente malla 125).
La formulación para tratamiento de plantas puede ser preparada por una variedad de métodos. En un ejemplo, las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas son preparadas como se describe
antes, al unir un agente para tratamiento de plantas, tal como una espora fúngica a un agente estabilizante. Las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas pueden combinarse entonces con los aditivos, tales como uno o más del agente de absorción de humedad, el agente atrayente, el diluyente y el agente anti-torta. Por ejemplo, el o los aditivos pueden mezclarse con las partículas para tratamiento de plantas estabilizadas. Opcionalmente, el agente estabilizante libre adicional puede ser adicionado entonces a la mezcla, para ajustar la concentración de esporas a un valor deseado. Por ejemplo, el agente estabilizante libre puede ser adicionado para ajustar la concentración de esporas a entre aproximadamente 2 x 108 y aproximadamente 4 x 108 esporas por gramo de formulación.
En algunos ejemplos, despues de que la formulación es colocada en un diseminador o hecha disponible de otra manera a insectos para vectorización de insectos, la vida de anaquel de la formulación puede ser 4 a 5 días. En ejemplos alternativos, la vida de anaquel puede ser más larga, por ejemplo, hasta 10 días. La vida de anaquel de la formulación puede variar dependiendo de varios factores, incluyendo humedad ambiente y temperatura, por ejemplo.
La formulación descrita antes puede ser particularmente útil para vectorización de insectos. Sin embargo, la formulación puede ser diseminada en otras formas, tal como mediante atomización.
Aunque la descripción anterior proporciona ejemplos de uno o más procesos, formulaciones o aparatos, se apreciará que otros procesos, formulaciones o aparatos pueden estar dentro del alcance de las
reivindicaciones acompañantes.
Ejemplos
Ejemplo 1 : Preparación de formulación para tratamiento de plantas
Se preparó una formulación para tratamiento de plantas de la siguiente composición:
7.5% en peso de partículas para tratamiento de plantas estabilizadas de clonostachys rosea unidas a Microcel® (malla 325, 44 mieras) a una densidad de 2 x 109 esporas por gramo de microcelda;
17.5% en peso de Microcel® libre (malla 325, 44 mieras);
1.25% en peso de óxido de magnesio (malla 125, 125 mieras);
10% en peso de Dyna-minMR (malla 325, 44 mieras);
64% de harina de maíz (malla 125, 125 mieras);
1 % en peso de gel de sílice (aproximadamente malla 20, 700 a 1000 mieras).
La formulación fue preparada al atomizar una suspensión de clonostachys rosea sobre partículas de Microcel®. Las partículas resultantes fueron mezcladas con el óxido de magnesio, dyna-minMR, harina de maíz y gel de sílice. El Microcel® libre fue adicionado entonces para ajustar la concentración de esporas a aproximadamente 3 x 108 esporas por gramo de formulación.
Ejemplo 2: Adquisición de agente para tratamiento de plantas mediante abejorros cuando salen de las colmenas vía dispensadores
Las colmenas de abejorros, cada una con una colonia de abejorros
(Bombus impatiens), fueron equipadas con un dispensador a través del cual las abejas fueron dirigidas a viajar cuando salen de la colmena.
Las colmenas fueron posicionadas en una banca en un invernadero de investigación. Las abejas fueron confinadas dentro de grandes jaulas de malla. Las nuevas colonias se dejaron aclimatar solas y se acostumbraron a su nuevo entorno durante 24 horas. Después del periodo de 24 horas, el dispensador fue llenado con la formulación descrita en el Ejemplo 1 , de manera que las abejas serían dirigidas a caminar a través de un lecho de la formulación cuando salen de la colmena.
Los abejorros individuales fueron capturados conforme salieron de la colmena. Cada abejorro fue colocado dentro de un tubo de microcentrífuga de 1.5 mi (“microfuga") y la tapa adjunta fue cerrada. Los tubos con las abejas capturadas fueron almacenados en un refrigerador durante unas cuantas horas (2-12 horas) y entonces se procesaron para estimar el número de esporas que se adhirieron a cada abeja.
Cada abeja fue lavada en un volumen conocido de agua (incluyendo un lavado de la pared interior del tubo de microfuga) conteniendo un surfactante (0.01 % Tritón X-100 v/v), y se agitaron vigorosamente cinco veces (aproximadamente 5 segundos cada vez) en un Vortex (Fisher Genie 2). Se permitió que el agua y la abeja reposaran durante 10 minutos antes de que el “agua de lavado” fuera diluida serialmente.
Las alícuotas de 0.5 mi del “agua de lavado” fueron diluidas
serialmente (diluciones de 10 veces) y 0.1 mi de cada dilución se esparció sobre PDTSA (medio de agar de dextrosa de papa modificado con Tritón X-100 (0.01 % o aproximadamente 8 gotas/l) para reducir la velocidad de crecimiento de colonia (y para separar las colonias para conteo) y sulfato de estreptomicina a 100 ppm para mantener bajas las bacterias) en placas de Petri. Para cada abeja, se realizaron 3 diluciones seriales y tres alícuotas de 0.1 mi de cada dilución fueron platinadas sobre PDTSA. Las placas de Petri fueron incubadas durante 4-5 días a aproximadamente 22-24 C (70-74F o temperatura ambiente) tiempo durante el cual las colonias de Clonostachys rosea se habían desarrollado y las colonias fueron contadas. Las cuentas de colonias fueron multiplicadas por el factor de dilución relevante, se multiplicaron por 10 (debido a que solo se platino 0.1 mi) y se ajustó para el volumen total de agua usada para lavar la abeja. Esto dio el número estimado de unidades (de formación de colonias) viables de Clonostachys rosea por abeja. Como se muestra en la tabla 1 , las abejas en estas pruebas generalmente portaron aproximadamente 100,000 a 125,000 esporas viables de Clonostachys rosea cada vez que salieron del dispensador en su camino fuera de la colmena.
Tabla 1
El examen microscópico de abejas reveló que las partículas del polvo estuvieron especialmente en las patas y superficies inferiores de las abejas (todas éstas son peludas).
Ejemplo 3: Valoración de girasoles tratados con Clonostachys rosea y Bacillus Thuringiensis vectorizados con abejorros
Campo 1 :
Un primer sitio de prueba incluyó un campo de girasoles de 20 acres (campo 1 ), que fue de 200 m de ancho y que corría desde el camino del campo a lo largo del lado este del campo. Cinco grupos de cuatro domicilios de abejorros (escuadrones) fueron puestos en el campo en julio de 2011. Los domicilios fueron posicionados a intervalos regulares al lado del camino en el borde del área con girasoles, y así estaban fácilmente accesibles. Cada domicilio fue equipado para recibir una charola conteniendo una formulación de tratamiento de planta en polvo en una ruta de salida del domicilio. Las charolas conteniendo una formulación de tratamiento de planta fueron insertadas en los domicilios. La formulación fue preparada como se describió en el ejemplo 1 , pero incluyó adicionalmente Bacillus Thuringiensis (2 x 108 esporas por gramo de formulación). Las charolas fueron insertadas en los domicilios en julio de 2011 , y se reemplazaron aproximadamente cada 3 días hasta agosto de 201 1.
Se observó que el periodo de floración de las girasoles plantados temprano en el campo fueron acortados por el clima caliente (máximas diarias de 35-38°C) en la segunda mitad de julio.
Las charolas fueron examinadas el 10 de agosto de 201 1. Se observó que la formulación para tratamiento de plantas en polvo estaba seca y no había formación de grumos.
Las muestras de los girasoles fueron tomadas el 10 de agosto de 2011. Se observó que aproximadamente 75-80% de las flores habían perdido los pétalos periféricos grandes. Algo de lluvia había ocurrido durante los 1 -3 días precedentes (la tierra de la superficie estaba húmeda).
Muestreo:
Las cabezas de girasoles fueron muestreadas en relación al cuadrángulo #2 (es decir, el segundo del camino) y el cuadrángulo #4 (es decir, el cuarto del camino). Las cabezas fueron recolectadas a cinco distancias (a 3 m, 40 m, 80 m, 120 m y 160 m) desde el cuadrángulo en un transecto hecho a través del campo en ángulos rectos al camino. Cuatro cabezas fueron tomadas en cada distancia de muestreo, colocadas en bolsas parchadas de plástico y transportadas a un laboratorio.
Procesamiento de las muestras:
La incidencia de Clonostachys rosea en floretes de las cabezas de girasol recolectadas fue estimada al colocar floretes sobre el agar de
cloranfenicol Paraquat (PCA) y examinando después la esporulación del hongo, de acuerdo con el siguiente procedimiento:
Un total de aproximadamente 160-200 floretes fueron desplumados usando fórceps repetidamente esterilizados desde aproximadamente 12-15 áreas aleatorias de cada cabeza de girasol. Cada área estuvo en la zona con semillas en desarrollo (es decir, no del centro de las cabezas) y aproximadamente 1.0 - 1.5 cm a través. Aproximadamente la mitad de los floretes de cada cabeza fueron diseminados (de manera separada tan lejos como fuera práctico) sobre PCA en cada una de las cajas de Petri. Las cajas de Petri con los floretes fueron colocadas en cajas de plástico translúcidas y se incubaron lejos de la luz solar directa. Los floretes fueron un tanto esponjosos y no hicieron buen contacto con el medio de agar, pero no obstante envejecieron y se volvieron de color café pálido de manera uniforme (“en conjunto”).
Las cabezas de girasol a partir délas cuales se removieron los floretes fueron colocadas en una ambiente frío.
Los floretes platinados fueron checados visualmente por esporulación de Clonostachys rosea después de 5 y 7 días de incubación y se valoraron microscópicamente después de 8 días y nuevamente después de otros 18 días. En cada momento de valoración, los floretes en cada plato fueron calificados colectivamente por incidencia de esporulación de Clonostachys rosea usando la siguiente escala de incrementos iguales: 0 = sin esporulación; 1 = 1 -10% de floretes con esporulación; 2 = 1 1 -20%; 3 = 21 -30% ... 10 = 91 -100%. En
las tablas 2 y 3 a continuación, estos valores son presentados en columnas para cajas de Petri A y B para cada una de las cuatro cabezas de girasol. Los puntos medios de los rangos (es decir, 0%, 5%, 15%, 25% ... 95%) en la escala fueron usados para dar % valores estimados. Los % valores promedio por cabeza fueron derivados de los valores medios para las calificaciones en las columnas A y B. Los valores de % promedio para las cuatro cabezas recolectadas a distancias dadas de los domicilios proporcionaron un % promedio estimado global de floretes sobre los cuales esporuló Clonostachys rosea (valores en negritas en la columna de la derecha de cada tabla).
Resultados y discusión - 8 días despues del platinado:
Las Tablas 2 y 3 a continuación muestran los resultados para valoraciones a 8 días después del platinado. Estas tablas muestran una estimación para el porcentaje promedio de floretes con Clonstachys rosea, que es una medida del éxito en la vectorización del agente para tratamiento de plantas para las flores.
Tabla 2: Transecto 1 (para cuadrángulo #2)
Tabla 3: Transecto 2 (para cuadrángulo #4). *Esta placa estuvo claramente contaminada con C. rosea cuando estaba en el laboratorio y se descartó. Los datos por lo tanto no fueron incluidos en los estimados.
Se encontró que Clonostachys rosea esporula en varias partes (o todas) de los floretes.
Se encontró poco crecimiento (es decir, micelio y/o esporulación) de otros hongos en floretes con esporulación de Clonostachys rosea. Esto está en contraste con floretes sin Clonostachys rosea. Esto fue
claro para floretes en una caja de Petri en la cual el agar estaba presumiblemente contaminado con esporas de Clonostachys rosea antes de usarse. En esta circunstancia, el Clonostachys rosea esporuló fuertemente en todos los floretes, pero casi no hubo otro crecimiento fúngico. El hallazgo de que otros hongos estuvieras escasos o ausentes de floretes con esporulación de Clonostachys rosea sugiere que el Clonostachys rosea estuvo primero generalmente para establecer (presumiblemente de manera endofítica) en los floretes y evitó establecimiento y crecimiento subsecuente de otros. Esto tambien indicó que Clonostachys rosea ecológicamente está muy adaptado para colonización de floretes de girasol.
Los floretes sobre los cuales no esporuló el Clonostachys rosea fueron cubiertos con masas de micelio y esporulación de otros hongos cuando se valoraron en el día 8 (y antes). Estos hongos son especies que son muy comunes en varias clases de tejidos de plantas senescentes e incluyeron: Alternaría alternata (abundante);
Cladosporium spp. (abundante); Penicillium spp y Aspergillus spp. (ambos comunes); Epicoccum sp. (baja frecuencia); Fusarium spp. (baja frecuencia); y Rhizopus (no frecuente). Estos hongos estuvieron probablemente presentes como esporas (u otros propágulos) sobre las superficies de los floretes cuando los girasoles fueron tomados en el campo y cuando los floretes fueron platinados sobre PCA. No son considerados endófitos. El Rhizopus puede provocar putrefacción de cabeza y cuello del girasol (se encontró una cabeza en un campo adyacente con putrefacción de cuello y cabeza que resultó ser
provocada por Rhizopus cuando se platinó en el laboratorio).
Se presume que el Clonostachys rosea recuperado de los floretes ha sido vectorizado a las cabezas de girasoles por los abejorros. La incidencia de cabezas de girasol a partir de las cuales se recuperó Clonostachys rosea fue 35% para el transecto #1 y 55% para el transecto #2. La incidencia de floretes (incluyendo aquellos a partir de cabezas sin Clonostachys rosea detectado) fue generalmente baja (aproximadamente 2-6% para transecto 1 y 0-11 % para transecto 2).
El Clonstachys fue vectorizado durante al menos 160 m en el transecto 1 y 120 m en el transecto 2.
No hubo buena evidencia de que existieron gradientes consistentes en los transectos de vectorización (tal como como la disminución con distancia desde las cajas de colonias de abejorros). Los datos de incidencia sugieren que la vectorización fue bastante uniforme.
Resultados y discusión - 18 días después del platinado:
Las Tablas 4 y 5 a continuación muestran los resultados para valoraciones a los 18 días después del platinado. Estas tablas muestran una estimación para el porcentaje promedio de floretes con Clonostachys rosea, lo cual es una medida del éxito en el vectorizado del agente para tratamiento de plantas a las flores.
Tabla 4: Transecto 1 (para cuadrángulo #2).
Tabla 5: Transecto 2 (para cuadrángulo #4).
La esporulación de Clonostachys rosea fue mucho más abundante
a 18 días que después de 8 días de incubación.
Los no patógenos (Cladosporium y Alternaría) habían crecido para cubrir muchos de los floretes. La Clonostachys rosea estuvo creciendo frecuentemente sobre el micelio de los no patógenos y aparentemente como un parásito (es decir, como un micoparásito “devorador” de los otros hongos).
Botrytis cinérea (moho gris) fue encontrado en unos cuantos floretes (eso puede ser un patógeno de putrefacción de cabeza en clima húmedo).
Excrementos de insectos (piezas cilindricas relativamente grandes) estuvieron presentes y abundantes en varias placas. Muchos floretes en estas placas fueron comidos parcialmente y parecían muy húmedos. No se encontraron larvas de insectos.
El mayor % de incidencia de Clonostachys rosea en los floretes después de 18 días de incubación comparado con 8 días probablemente indica que los floretes requieren más de 8 días en PCA para envejecer lo suficiente para que Clonostachys rosea alcanza una incidencia de esporulación completa. Se tuvo cuidado de esparcir Clonostachys rosea entre los floretes durante la incubación.
La incidencia de esporulación de Clonostachys rosea en los dos transectos aumentó varias veces sobre los valores durante 8 días de incubación. A partir de estos datos, 8 días de incubación fueron insuficientes para capturar el grado completo de esporulación (y la colonización de florete implicada) por Clonostachys rosea. Para muchas clases de tejidos de plantas, tales como piezas planas de hojas que
hacen el mayor contacto con el medio Paraquat, 8 días es suficiente. Pero los floretes “peludos” tienden a hacer solo contacto limitado, al menos inicialmente, y así puede tomar más tiempo la senescencia.
La incidencia promedio de esporulación de Clonostachys rosea en floretes de cabezas de girasol en el transecto 2 fue aproximadamente 33% comparado con solo 14% para el transecto 1.
Al menos unos cuantos floretes con Clonostachys rosea fueron encontrados en las cabezas de girasol de transecto 2, pero 10% de las cabezas carecían de Clonostachys rosea en el transecto 1.
Hubo poca indicación de algún gradiente en incidencia de Clonstachys rosea en los floretes (y así el éxito de vectorización) en el transecto 1 , pero una disminución en la incidencia fue evidente después de 80 m en el transecto 2.
Campo 2
Un segundo sitio de prueba incluyó un campo de girasol (campo 2) que consistió de 6 acres que fueron una continuación del campo 1 , pero que fueron plantados después del campo 1 en consideración a las condiciones de suelo húmedo. El 10 de agosto de 2011 se observó que la floración estaba justo empezando. Se movió un cuadrángulo de abejorros del campo 1 al campo 2 más tarde en el día 10 de agosto de 2011.
Aproximadamente 6 flores del campo 2 fueron inoculadas artificialmente con la formulación para tratamiento de plantas descrita en el ejemplo 1 el 10 de agosto de 2011.
El 26 de agosto de 201 1 , las flores fueron recolectadas a partir de un transecto en el campo 2 (las mismas distancias del cuadrángulo como en el campo 1 ). Las flores inoculadas con la formulación de polvo a mano tambien fueron recolectadas.
Las cabezas y follaje en el Campo #2 fueron inspeccionados por enfermedades, mohos e insectos y se tomaron muestras para el laboratorio para diagnóstico.
Floretes de las flores muestreados fueron platinados en PCA el 27 de agosto de 201 1 , como se describe antes con respecto al campo 1. Las cabezas sub-muestreadas fueron mantenidas en bolsas parchadas abiertas para para examinación posterior.
Resultados y discusión - 9 días después del platinado
La Tabla 6 a continuación muestra los resultados para valoraciones a 9 días después del platinado. Esta tabla muestra una estimación para el porcentaje promedio de floretes con Clonostachys rosea.
Tabla 6: Transecto 1 (Nota: año por insecto (polilla de girasol) fue observado en aproximadamente 20% de las cabezas. Hubo un cuadrángulo más cerca del transecto, pero las abejas de otros cuadrángulos posiblemente participaron. El cuadrángulo fue encontrado dañado por un animal el 26 de agosto de 2011 ).
Resultados y discusión - 15 días después del platinado:
La Tabla 7 a continuación muestra los resultados para valoraciones a 15 días después del platinado. Esta tabla muestra una estimación para el porcentaje promedio de floretes con Clonostachys rosea.
Tabla 7: Transecto 1 (Nota: se observó daño por insectos (polilla de girasol) en muchas cabezas. Hubo un cuadrángulo de colmena de abejorros más cerca del transecto, pero las abejas de otros cuadrángulos posiblemente participaron. El cuadrángulo fue encontrado dañado (por un animal) el 26 de agosto de 2011 ).
Resultados y discusión - cabezas inoculadas a mano
En el campo 2:
La Tabla 8 muestra los resultados de cabezas de girasoles inoculadas a mano. Esta tabla muestra una estimación para el porcentaje promedio de floretes con Clonostachys rosea.
Tabla 8
Campo 3
Un tercer sitio de prueba incluyó un campo de girasol consistiendo de aproximadamente 9 acres. El campo 3 estuvo a aproximadamente media floración. Un cuadrángulos como se describió con respecto al campo 1 fue colocado en un camino que bifurca el campo y adyacente a girasoles en una mitad del campo. Las flores fueron recolectadas del transecto en el Campo 3 de acuerdo con los mismos procedimientos y distancias de muestreo del cuadrángulo como en los campos 1 y 2.
Las cabezas y follaje en el Campo #3 fueron inspeccionados por enfermedades, mohos e insectos y muestras fueron tomadas para el laboratorio para diagnóstico.
Los floretes de las flores muestreadas fueron platinados en PCA el 29 de agosto de 201 1 , como se describe antes.
Resultados y discusión - 7 días después del platinado:
La Tabla 9 a continuación muestra los resultados para valoraciones a 7 días después del platinado. Esta tabla muestra una
estimación para el porcentaje promedio de floretes con Clonostachys rosea.
Tabla 9: Transecto 2 (para cuadrángulo #4). *Esta placa estuvo claramente contaminada con C. rosea cuando estaba en el laboratorio y se descartó. Los datos por lo tanto no fueron incluidos en los estimados.
Resultados y discusión - 13 días después del platinado:
La Tabla 10 a continuación muestra los resultados para valoraciones a 15 días después del platinado. Esta tabla muestra una estimación para el porcentaje promedio de floretes con Clonostachys rosea.
Tabla 10: Transecto 2 (para cuadrángulo #4). ‘Esta placa estuvo claramente contaminada con C. rosea cuando estaba en el laboratorio y se descartó. Los datos por lo tanto no fueron incluidos en los estimados.
Tanto para el campo 2 como el campo 3, las cabezas fueron mantenidas en las bolsas parchadas usadas para muestreo (bolsas abiertas) después de que los floretes han sido removidos. Cuando se examinaron a 9 días, algo de esporulación de Clonostachys rosea fue encontrada en varias partes de algunas cabezas, incluyendo en algunos casos la porción central sin semillas. La esporulación fue más pesada (como se esperada dado la carga de polvo aplicada), pero irregular, en las cabezas inoculadas a mano. Otros ciertos hongos (Cladosporium) estuvieron esporulando fuertemente; estos pueden tener cargas de inóculos extraordinarias con el fin de obtener un “inicio de cabeza”. Una
semilla inmadura platinada comcidentalmente con una flor colonizada estuvo absolutamente cubierta con esporulación.
Ejemplo 4: Valoración de semillas de girasol tratadas con Clonostachys rosea más Bacillus thuringiensis vectorizadas por abejas y girasoles de control no tratados.
Las muestras de semilla del campo 1 , descritas en el ejemplo 3 y de girasoles no tratados fueron objetivos. Las sub-muestras de cada grupo de las semillas fueron platinadas en un medio de agar para probar: la capacidad de las semillas a germinar apropiadamente; la presencia / ausencia de Clonostachys rosea; la presencia de otros hongos en las semillas, incluyendo patógenos que provocan enfermedad.
Qumce submuestras cada una de 40-50 semillas de cada grupo (es decir, campo #1 y campo de control) fueron platinadas sobre el medio de PCA en cajas Petri. El medio contenido Paraquat para acelerar la senescencia de tejido y recuperación de Clonostachys rosea, cloranfenicol (un antibiótico antibacteriano), pero sin nutrientes microbianos. La mayoría de las submuestras contenían unos pocos fragmentos negruzcos de otras partes de cabezas de girasol. Las placas fueron incubadas encajas de plástico y se examinaron en intervalos de 2 semanas usando un microscopio de disección y microscopio compuesto según fuera necesario.
Resultados:
Germinación de semilla: Girasoles de control - 70.7%; girasoles de Campo 1 -89.7%
De esta manera, la germinación de semillas del tratamiento vectorizado por abejas descrito antes fue aproximadamente 27% mayor que en los controles no tratados.
Los valores promedio incluyen solo esas semillas que produjeron buenos radicales saludables. Esas que no produjeron radicales o radicales que abortaron inmediatamente (por ejemplo, estuvieron cafés cuando surgieron) fueron calificadas como no germinadas.
Valores reales para no germinación:
Control: 10/48, 16/56, 10/42, 20/49, 14/38, 10/40, 14/44, 4/28, 16/40, 12/36, 8/30, 6/28, 12/39, 13/45, 12/41. 177/604 = 29.3%
Vectorizados por abejas: 4/342, 8/46, 10/54, 4/51 , 2/28, 4/48, 2/41 , 4/62, 6/44, 4/49, 9/50, 2/36, 2/35, 3/35, 4/49. 68/660 = 10.3%
Recuperación de Clonostachys rosea: el Clonstachys rosea no esporuló en ninguna de las semillas de girasol dentro del periodo de 14 días de observaciones. El Clonostachys rosea esporuló en unos cuantos de los fragmentos de tejido que se asumió que eran de las cabezas de girasol, pero solo en materiales vectorizados por abejas.
En este punto, parece que el Clonostahcys no se estableció en las semillas de girasol, o si fue así, no crece fácilmente a partir de ellas.
Otros hongos: estuvo claro que los mohos fueron mucho más abundantes en las semillas del campo de control que en semillas del campo 1. En las semillas de control: Fusarium spp - muy común;
Penicillium spp - común; Botrytis cinérea - moderadamente común; otros mohos sin esporas (solo micelio, no fueron identificadas). En las semillas del campo 1 : Fusarium spp, Penicillum spp y algunos Rhizopus, pero todos mucho menos frecuentes que en los controles. No se encontró Botrytis.
En ambas muestras, algunas semillas parecieron abortar en respuesta a uno o más de estos hongos.
Cladosporium y Alternaría fueron comunes en las testas de semilla (“hollejos” o “cáscaras”) de ambos lotes de semillas pero no parecen provocar problema alguno.
Los hallazgos indican que el tratamiento descrito en la presente intensificó la germinación de las semillas de girasol por 27% y redujo enormemente el nivel de hongos (mohos) presentes.
Claims (47)
1. Una formulación para tratamiento de plantas, comprendiendo la formulación: a) un silicato de calcio particulado; y b) un agente para tratamiento de plantas combinado con el silicato de calcio particulado.
2. La formulación de la reivindicación 1 , en donde el agente para tratamiento de plantas es unido a al menos algo del silicato de calcio para formar partículas para tratamiento de plantas estabilizadas.
3. La formulación de la reivindicación 2, que comprende entre aproximadamente 5% en peso y 15% en peso de partículas para tratamiento de plantas esterilizadas.
4. La formulación de la reivindicación 3, que comprende entre aproximadamente 7% en peso y 8% en peso de partículas para tratamiento de plantas estabilizadas.
5. La formulación de la reivindicación 2, en donde al menos algo del silicato de calcio es silicato de calcio libre, y la formulación comprende entre aproximadamente 10% en peso y 25% en peso de silicato de calcio libre.
6. La formulación de la reivindicación 5, en donde la formulación comprende entre aproximadamente 17% en peso y 18% en peso de silicato de calcio libre.
7. La formulación de la reivindicación 1 , en donde el agente para tratamiento de plantas comprende un agente microbiano.
8. La formulación de la reivindicación 7, en donde el agente para tratamiento de plantas comprende una espora fúngica.
9. La formulación de la reivindicación 8, en donde el agente para tratamiento de plantas comprende clonostachys rosea.
10. La formulación de la reivindicación 7, en donde el agente para tratamiento de plantas comprende beauveria bassiana.
1 1. La formulación de la reivindicación 1 , en donde: a) el agente para tratamiento de plantas comprende una espora fúngica; b) la espora fúngica es unida a al menos algo del silicato de calcio; y c) el agente para tratamiento de planta tiene una densidad de entre aproximadamente 1 x 109 y 4 x 109 esporas por gramo de silicato de calcio al cual se une.
12. La formulación de la reivindicación 11 , que comprende aproximadamente 2 x 109 esporas por gramo de silicato de calcio al cual se une.
13. La formulación de la reivindicación 1 1 , que comprende entre aproximadamente 2 x 108 y aproximadamente 4 x 108 de esporas por gramo de formulación.
14. La formulación de la reivindicación 1 , en donde el silicato de calcio particulado comprende partículas teniendo una designación de tamiz de entre aproximadamente 45 mieras y aproximadamente 75 mieras.
15. La formulación de la reivindicación 14, en donde el silicato de calcio particulado comprende partículas teniendo una designación de tamiz de aproximadamente 45 mieras.
16. La formulación de la reivindicación 1 , que comprende además un agente de absorción de humedad mezclado con el silicato de calcio particulado y agente para tratamiento de plantas.
17. La formulación de la reivindicación 16, en donde el agente de absorción de humedad comprende gel de sílice.
18. La formulación de la reivindicación 17, en donde el gel de sílice comprende partículas teniendo una designación de tamiz de entre aproximadamente 700 mieras y 4000 mieras.
19. La formulación de la reivindicación 18, en donde el gel de sílice comprende partículas teniendo una designación de tamiz de aproximadamente 840 mieras.
20. La formulación de la reivindicación 16, en donde la formulación comprende entre aproximadamente 0.5% en peso y 5% en peso de agente de absorción de humedad.
21. La formulación de la reivindicación 20, en donde la formulación comprende aproximadamente 1 % en peso de agente de absorción de humedad.
22. La formulación de la reivindicación 1 , que comprende además un agente atrayente mezclado con el silicato de calcio particulado y agente para tratamiento de plantas, para atraer la formulación a plantas y/o insectos de vectorización.
23. La formulación de la reivindicación 22, en donde el agente atrayente tiene una carga electrostática positiva neta.
24. La formulación de la reivindicación 22, en donde el agente atrayente comprende una mezcla de minerales.
25. La formulación de la reivindicación 22, en donde la formulación comprende entre aproximadamente 5% en peso y aproximadamente 20% en peso de agente atrayente.
26. La formulación de la reivindicación 25, en donde la formulación comprende aproximadamente 10% en peso de agente atrayente.
27. La formulación de la reivindicación 22, en donde el agente atrayente tiene una designación de tamiz de entre aproximadamente 35 mieras y aproximadamente 75 mieras.
28. La formulación de la reivindicación 22, en donde el agente atrayente tiene una designación de tamiz de aproximadamente 45 mieras.
29. La formulación de la reivindicación 1 , en donde la formulación comprende además un diluyente mezclado con el silicato de calcio particulado y el agente para tratamiento de plantas.
30. La formulación de la reivindicación 29, en donde el diluyente comprende una harina.
31. La formulación de la reivindicación 30, en donde el diluyente comprende al menos una harina de centeno, harina de trigo, harina de escanda, harina de arroz y harina de maíz.
32. La formulación de reivindicación 31 , en donde el diluyente comprende harina de maíz.
33. La formulación de la reivindicación 29, en donde la formulación comprende entre aproximadamente 50% en peso y 75% en peso de diluyente.
34. La formulación de la reivindicación 33, en donde la formulación comprende aproximadamente 64% e peso de diluyente.
35. La formulación de la reivindicación 29, en donde el diluyente tiene una designación de tamiz de entre aproximadamente 75 miras y aproximadamente 250 mieras.
36. La formulación de la reivindicación 35, en donde el diluyente tiene una designación de tamiz de aproximadamente 125 mieras.
37. La formulación de la reivindicación 1 , que comprende además un agente anti-torta.
38. La formulación de la reivindicación 37, en donde el agente anti-torta comprende óxido de magnesio.
39. La formulación de la reivindicación 38, en donde la formulación comprende entre aproximadamente 0.75% en peso a 5.0% en peso de óxido de magnesio.
40. La formulación de la reivindicación 39, en donde la formulación comprende entre aproximadamente 1 % en peso y aproximadamente 1.5% en peso de óxido de magnesio.
41. La formulación de la reivindicación 37, en donde el agente anti-torta tiene una designación de tamiz de entre aproximadamente 75 mieras y aproximadamente 150 mieras.
42. La formulación de la reivindicación 41 , en donde el agente anti-torta tiene una designación de tamiz de aproximadamente 125 mieras.
43. El uso de la formulación de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 para tratar al menos uno de sclerotinia sclerotiorum, botrytis cinérea y Monilinia vacciniicorymbosi en una planta.
44. El uso de la formulación de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 para tratar una enfermedad en al menos una de plantas de cañóla y plantas de girasol.
45. El uso de la formulación de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 para aumentar la velocidad de germinación en una cosecha.
46. El uso de la formulación de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 42 como un agente de vectorización de abejas.
47. La formulación de cualquiera de las reivindicaciones 16 a 19, en donde el agente de absorción de humedad tiene un tamaño de partícula seleccionado para ser demasiado grande para ser portado por insectos.
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