MX2014009658A - Plantas de sandia triploides con un porte bush. - Google Patents
Plantas de sandia triploides con un porte bush.Info
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Abstract
La solicitud se refiere al campo del cultivo de plantas, en particular el cultivo de sandía. Se proporcionan plantas de sandía triploides de tipo bush (y semillas de las que pueden crecer estas plantas) y frutos de sandía sin semillas producidas por estas plantas. Además, se proporcionan plantas polinizadoras de tipo bush y plantas tetraploides de tipo bush y métodos para producir híbridos triploides que tienen un porte bush, así como métodos para producir frutos de sandía sin semillas de alta calidad.
Description
PLANTAS DE SANDÍA TRIPLOIDES CON UN PORTE BUSH
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere al campo de la cría de plantas y la mejora de plantas. Se proporcionan nuevas plantas de sandía híbridas y semillas de las que se pueden cultivar tales plantas, que son "bush" ("arbusto") en el porte (que comprenden el "gen bush" recesivo, designado ub') y tnploide (2n = 3x = 33) en su maquillaje cromosómico. Cuando estas plantas híbridas triploides se polinizan con polen diploide normal (2n = 2x = 22) (obtenible de polinizadores), estas plantas producen fruto triploide sin semillas de alta calidad. Como la planta híbrida triploide tiene un porte bush, con estolones de vida más corta (igual o inferior a 150 cm, con mayor preferencia, igual o inferior a 140 cm, en especial igual o inferior a 100 cm) y longitud internodal corta, esta planta se puede cultivar con una mayor densidad en el campo en comparación con híbridos de sandía triploides no bush, lo que lleva a un mayor rendimiento de frutos por hectárea en comparación con híbridos triploides con porte normal (con una longitud de estolones promedio más larga de más de 200 o más de 300 cm). El diámetro de planta promedio de una planta bush triploide de acuerdo con la invención es igual o inferior a 300 cm, con preferencia, de 280 cm, en especial igual o inferior a 200 cm, mientras que otras características, tales como tamaño de las hojas y tamaño de los frutos son similares a los de las plantas de sandía triploides de tipo de crecimiento normal. También se proporcionan plantas de sandía bush diploides endogámicas (bb) y plantas de sandía bush tetraploides endogámicas (2n = 4x = 44) (bbbb), que se usan como progenitor macho y hembra, respectivamente, a fin de producir las plantas de sandía híbridas bush triploides (bbb) de acuerdo con la invención. Además, se proporcionan frutos sin semilla triploides, obtenibles de las plantas bush triploides de acuerdo con la invención, ya que son semillas de las que pueden crecer las plantas bush triploides híbridas. Además, se proporcionan un método para criar híbridos bush triploides y métodos para cultivar híbridos bush triploides.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Se producen sandías sin semilla (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsum. And Nak.) usando polen de plantas parentales macho diploídes para fertilizar flores de plantas parentales maternales tetraploides. La polinización de las flores tetraploides con polen diploide lleva a semillas híbridas F1 que son triploides (Kihara, 1951 , Proceedings of American Society for Horticultural Science 58: 217-230; Eigsti 1971 , Hort Science 6: 1-2). Las plantas híbridas triploides crecidas de estas semillas F1 son autoinfértiles ya que producen polen estéril debido al desequilibrio cromosómico (Fehr, 1987). Los híbridos triploides, en consecuencia, necesitan ser polinizados por un polinizador diploide para producir el fruto de la sandía. En consecuencia, las plantas triploides son interplantadas con plantas polinizadoras para la producción de frutos. El fruto "sin semillas" producida después de la polinización en la planta híbrida triploide no están verdaderamente sin semillas, sino que a menudo contienen algunas semillas pálidas pequeñas sin desarrollar que son comestibles.
Para una fructificación óptima, se requiere suficiente polen viable. Las plantas se plantan en general en una relación de 1 polinizador cada 2-4 plantas triploides. Las plantas triploides y los polinizadores se plantan en filas separadas (por ejemplo, 1 fila de polinizador y 2-4 filas de triploides) o se interplantan dentro de filas (por ejemplo, se planta 1 planta polinizadora entre 2 a 3 plantas triploides en la misma fila) o se interplantan en filas estrechas entre filas de triploides (ver el documento US 2006/0168701 , tabla 2). El fruto producido en las plantas polinizadoras tiene preferentemente un patrón de cáscara diferente del fruto en los híbridos triploides, de modo que se pueden distinguir con facilidad.
Quedan algunos problemas en la producción de sandía sin semillas, como la producción de la línea madre tetraploide (duplicación cromosómica a través del tratamiento de plántulas con colchicinas), hallando compatibilidad entre polinizador diploide y plantas madre tetraploides y las semillas triploides a menudo tienen un recubrimiento de semillas más grueso que reduce su vigor y germinación. La calidad y la uniformidad de los frutos son a menudo un problema, como los altos costos de producción de semillas triploides debido a los requerimientos anteriores.
Hacer una línea madre endogámica tetraploide estable con los rasgos
deseados no es sencillo, ya que no es tan simple como la selección de un buen diploide y la duplicación de los cromosomas usando, por ejemplo, tratamiento con colchicinas. Después de obtener algunas células con cromosomas duplicados y regenerar una planta, se necesitan una cantidad de generaciones de autopolinización (endogamia) para estabilizar (fijar) el tetraploide y eliminar aberraciones cromosómicas no deseadas.
Las plantas polinizadoras diploides compactas (o enanas) que tienen estolones más cortos y/o internodos más cortos se usan a menudo para inducir fructificación sin semillas en progenitores femeninos triploides híbridos normales (no enanos) y/o para producir fruto que comprende semillas en la planta polinizadora propiamente dicha. Por ejemplo, la variedad Side Kick (Harris Morin) se usa como polinizador para triploides híbridos normales (sin semillas) y/o producción de polinizadores de frutos (sembrados). Side Kick es un polinizador diploide que comprende el alelo recesivo hmbn (documento US 7.314.979 B2) en forma homocigota, que lleva a más ramificaciones (multirramificaciones) y, así, plantas polinizadoras diploides más "compactas". Además, los frutos polinizadores diploides de plantas homocigotas hmbn hmbn son más pequeños que los frutos normales (1 ,6 kg en comparación con 8,98 kg de un diploide normal). Por otro lado, los frutos sin semilla triploides producidos cuando se poliniza un triploide híbrido normal con un polinizador como Side Kick son frutos grandes, sin semillas de 13-21 libras (5,8 - 9,5 kg). El tipo compacto HMBN (hmbn hmbn) no es tan compacto como los mutantes enanos diploides conocidos (dw-1 dw-1, como la variedad Bush Jubilee o dw-2 dw-2, como la variedad J86), sino que es más compacto que los tipos diploides estándar (por ejemplo, Allsweet), ver la Tabla 1 del documento US 7.314.979 y la Tabla 1 del documento US 8.034.999. El tipo compacto HMBN (hmbn hmbn) tiene muchas más ramificaciones secundarias (promedio 44,9) que un diploide normal (promedio 14,7) o que un diploide enano conocido (promedio 19,3 y 7,3), mientras que el largo intermodal es más largo (promedio 4,4 cm) que en los diploides enanos conocidos (promedio 3,4 y 4,1 cm), pero más corto que en los diploides de tipo normal (promedio 7,2 cm).
El documento US 7.164.059 describe un polinizador diploide de estolones
cortos y su uso para polinizar los híbridos triploides de porte normal (de tipo de crecimiento normal). El polinizador de estolones cortos se describe por tener un largo intermodal promedio de menos de 3 pulgadas (menos de 7,6 cm) y/o un diámetro de planta de menos de 1 ,8 metros. Al usar un polinizador de estolones cortos en combinación con triploides de hábitos normales, se establece que se pueden plantar más del 33 % al 50 % de triploides por acre (aproximadamente 2000 triploides por acre, más 400 a 1200 polinizadores diploides por acre; esto es igual a aproximadamente 4942 triploides por hectárea, más 988 a 2965 polinizadores diploides por hectárea).
El documento US 7.115.800 describe la producción de fruto de sandía sin semillas con un peso promedio de menos de 5,4 kg (3,6 a 4,0 kg). Las plantas de sandía triploides se producen usando tetraploides endogámicos "pequeños" y líneas parentales diploides endogámicas "pequeñas", donde "pequeño" se refiere al tamaño del fruto y no al tamaño de la planta. Las plantas híbridas triploides, que producen frutos pequeños, tienen un tipo de crecimiento normal, con largos de estolones de 320 cm o más y largos internodos de 8 o más cm.
Los documentos US 2008/0005814 y US 2008163388 describen el desarrollo de una planta de sandía tetraploide, que es apropiado como un progenitor femenino en una producción híbrida triploide con frutos pequeños sin semillas. La planta tetraploide tiene un porte vegetativo normal. Cuando se polinizan con un polinizador diploide, se producen frutos pequeños (de 1 ,5 a 2,5 kg).
El documento US2008/0244764 describe una línea de sandía tetraploide de tipo de crecimiento normal desarrollada del diploide Calsweet.
Los documentos US 2006/0168701 y US 2003/0172414 describen polinizadores diploides ("superpolinizadores") útiles para polinizar plantas triploides, iniciando así la fructificación de frutos sin semilla triploides. El polinizador tiene pequeñas hojas 5 a 12 veces menor que la superficie de un polinizador diploide típico como Sangría) y se puede cultivar en cercana proximidad del híbrido triploide de tipo normal. El polinizador es muy ramificado (estolones en forma de encaje o abiertos) y reduce el espacio, nutrientes y la necesidad de luz, dejando más espacio, nutrientes y luz para las plantas híbridas triploides. De acuerdo con la solicitud de patente, se
producen 25 % al 33 % más sandías sin semillas por acre usando este polinizados
El documento US 6.355.865 B1 describe una planta polinizadora que tiene al menos dos de las características seleccionadas de (a) fenotipo de fruto distinguido, (b) mayor cantidad de flores masculinas, (c) floración continua, (d) floración temprana y/o (e) morfología de planta modificada y porte, que tiene estolones más delgados. Como el polinizador diploide es más delgado y produce más flores, se puede plantar en una relación de 1 :3 a 1 :5 (polinizador : híbrido triploide), más que en la relación usual de 1 :2.
Además de la mutación hmbn (multirramificación) descrita con anterioridad, también se han descrito otros cuatro genes que llevan al hábito de plantas enanas / compactas en sandías diploides cuando el alelo mutante está presente en forma homocigota. Se denominan dw-1, dw-1s (alélico con dw-1), dw-2 y dw-3 (Guner y Wehner 2004, Hort Science 39(6): 1 75-1182). Muchos de estos mutantes se han usado para desarrollar polinizadores diploides enanos o de estolones cortos, como Bush Jubilee.
Sin embargo, hasta ahora no ha sido posible producir plantas bush triploides híbridas, que son capaces de producir frutos sin semillas de alta calidad.
Es un objeto de la invención proporcionar híbridos triploides que tienen un porte bush y producen frutos sin semillas de alta calidad. También es un objeto de la invención proporcionar métodos para producir tales plantas híbridas triploides y/o frutos triploides.
Las plantas triploides bush ocupan menos espacio en el campo y se pueden cultivar en proximidad más cercana entre sí y/o a los polinizadores en comparación con triploides de tipo normal, tales como Boston F1 o Fashion F1. Al menos 1 ,5 veces, 1 ,7 veces, 2 veces, 2,5 veces o incluso 3 veces las plantas triploides bush se pueden cultivar por hectárea en comparación con híbridos triploides de sandía no bush (porte normal), tales como Boston F1 o Fashion F1. Como las plantas triploides bush tienen un menor diámetro de planta pero sin afectar el tamaño de las hojas o el tamaño de los frutos, se pueden lograr mayores rendimientos de frutos triploides por hectárea. Usando los híbridos bush triploides de acuerdo con la invención, se producen al menos aproximadamente 1 ,25 veces, con preferencia al menos
aproximadamente 1 ,5 veces más frutos por hectárea en comparación con híbridos triploides de tipo normal.
En una forma de realización, también se proporciona un método para criar plantas de sandía triploides bush (bbb), así como un método para cultivar plantas de sandía triploides bush en producción comercial de frutos sin semillas.
También están comprendidas en la presente semillas de las que se pueden cultivar plantas bush híbridas triploides, como partes de planta, propagaciones in vitro, cultivos celulares o tisulares, frutos cosechados, etc.
En otra forma de realización, se proporcionan en la presente plantas bush tetraploides y semillas de las que se cultivan plantas bush tetraploides, así como partes de planta (células, polen, anteras, óvulos, flores, etc.) y propagaciones in vitro de tales plantas.
Definiciones Generales
El verbo "comprender" y sus conjugaciones se usan en su sentido no limitativo para significar que se incluyen los ítems después de la palabra, pero no se excluyen ítems no específicamente mencionados. Además, la referencia a un elemento por el artículo indefinido "un" o "una" no excluye la posibilidad de que más de uno de los elementos esté presente, a menos que el contexto requiera claramente que haya uno y sólo uno de los elementos. El artículo indefinido "un" o "una" usualmente significa así "al menos uno", por ejemplo, "una planta" se refiere también a varias células, plantas, etc. De modo similar, "un fruto" o "una planta" también se refiere a una pluralidad de frutos y plantas.
Como se usa en la presente, el término "planta" incluye la planta entera o cualquier parte o sus derivados, con preferencia, con el mismo maquillaje genético que la planta de la que se obtiene, como órganos de planta (por ejemplo, frutos cosechados o no cosechados, hojas, flores, anteras, etc.), células de plantas, protoplastos de plantas, cultivos tisulares de células de planta de los que se pueden regenerar plantas enteras, callos de plantas, grupos celulares de plantas, trasplantes de plantas, plántulas, células de plantas que están intactas en plantas, clones de plantas o micropropagaciones o partes de plantas, tales como cortes de planta,
embriones, polen, anteras, óvulos, frutos (por ejemplo, tejidos u órganos cosechados), flores, hojas, semillas, plantas clonalmente propagadas, raíces, tallos, ápices de raíces, injertos (vástagos y/o rizomas), y similares. Además, se incluye cualquier estadio de desarrollo, tales como plántulas, esquejes anteriores o posteriores a enraizamiento, etc.
Como se usa en la presente, el término "variedad" o "cultivar" significa un agrupamiento de plantas dentro de un taxón botánico simple del rango conocido más abajo, que se puede definir por medio de la expresión de las características resultantes de un genotipo dado o combinación de genotipos.
El término "alelo(s)" significa cualquiera de las una o varias formas alternativas de un gen en un locus particular, todos los cuales se refieren a un rasgo o característica en un locus específico. En una célula diploide de un organismo, los alelos de un gen dado se ubican en una ubicación o locus específicos (plural loci) en un cromosoma. Un alelo está presente en cada cromosoma del par de cromosomas homólogos. Una especie de planta diploide puede comprender una gran cantidad de diferentes alelos en un locus particular. Son alelos idénticos del gen (homocigota) o dos alelos diferentes (heterocigotas).
El término "locus" (plural loci) significa un lugar o lugares específicos o un sitio en un cromosoma donde se halla, por ejemplo, un gen o un marcador genético.
"Planta diploide" se refiere a una planta, partes de plantas vegetativas o semillas de las que se puede cultivar una planta diploide, que tiene dos grupos de cromosoma, designados en la presente como 2n.
"Planta triploide" se refiere a una planta, partes de plantas vegetativas o semillas de las que se puede cultivar una planta triploide, que tiene tres grupos de cromosoma, designados en la presente como 3n.
"Planta tetraploide" se refiere a una planta, partes de plantas vegetativas o semillas de las que se puede cultivar una planta tetraploide, que tiene cuatro grupos de cromosoma, designados en la presente como 4n.
"Planta polinizadora" o "polinizador" se refiere a la planta diploide (endogámica o híbrida) o sus partes (por ejemplo, su polen o vástago), apropiada como polinizador para inducir fructificación en plantas triploides. Así, una planta polinizadora es capaz
de llevar a una buena fructificación (y buen rendimiento de frutos triploides) de plantas triploides, produciendo una cantidad apropiada de polen durante el período diurno apropiado y durante un período de tiempo apropiado.
"Progenitor masculino" se refiere a la planta polinizadora usada como progenitor masculino para inducir la fructificación y la producción de semillas en un progenitor femenino tetraploide, que da como resultado en semillas triploides híbridas F1. Tanto el progenitor masculino como el progenitor femenino son endogámicos, de modo que cada progenitor es casi homocigoto y estable.
"Progenitor femenino" o "progenitor tetraploide" se refiere a la planta que se poliniza con polen del progenitor masculino, que lleva a la producción de frutos que contienen semillas triploides. El progenitor femenino es endogámico, de modo es casi homocigoto y estable.
"Planta triploide híbrida" o "triploide F1" es una planta triploide crecida de semillas triploides híbridas obtenidas de la fertilización cruzada de un progenitor diploide masculino con un progenitor tetraploide femenino.
"Fruto sin semillas" son frutos triploides que no contienen semillas maduras. El fruto puede contener uno o varios óvulos blancos, comestibles, pequeños.
"Interplantación" se refiere a la combinación de dos o varios tipos de semillas y/o trasplantes sembrados o trasplantados en el mismo campo, en especial la siembra y/o trasplante de polinizadores en el mismo campo que las plantas híbridas triploides (para la producción de frutos sin semillas en las plantas triploides y la producción de frutos diploides en las plantas polinizadoras). Por ejemplo, el polinizador se puede plantar en filas separadas o se puede interplantar con las plantas triploides en la misma fila (por ejemplo, en colinas dentro de cada fila). Los polinizadores también se pueden plantar entre filas de triploides. También se pueden mezclar semillas de polinizadores e híbridos triploides antes de la siembra, lo que da como resultado una siembra aleatoria. Los trasplantes de las plantas híbridas triploides y/o plantas polinizadoras también pueden comprender un rizoma de una planta diferente. Los rizomas apropiados se conocen en el arte. Las plantas de sandía con un rizoma diferente se mencionan como "injertadas".
"Plantación" o "plantado" se refieren a la siembra (siembra directa) o trasplante
de plántulas (plántulas) en un campo a máquina o a mano.
"Propagación vegetativa" se refiere a la propagación de plantas de tejido vegetativo, por ejemplo, por propagación in vitro o métodos de injerto (usando vástagos). La propagación in vitro implica cultivo de células o tejidos in vitro y regeneración de una planta entera del cultivo in vitro. El injerto implica la propagación de una planta original por injerto en el rizoma. Los clones (es decir, las propagaciones vegetativas genéticamente idénticas) de la planta original se pueden generar así ya sea por cultivo in vitro o injerto.
"Recesivo" se refiere a un alelo que expresa su fenotipo cuando ningún alelo dominante funcional está presente en el genoma. El alelo bush recesivo (b) de acuerdo con la invención, tal como se halla (y se puede obtener) en los números de acceso NCIMB proporcionados en la presente, da como resultado un porte bush cuando está presente en dos copias en una planta diploide (bb), en cuatro copias de una planta tetraploide (bbbb) o en tres copias en una planta triploide (bbb), donde un alelo dominante bush dominante funcional (B) está ausente en estas plantas. El alelo B es así esencialmente el alelo no mutado de tipo silvestre, hallado en plantas que carecen del alelo muíante o.
"Tipo bush" o "tipo de crecimiento bush" o "porte bush" o "hábito bush" se refiere al porte vegetativo heredable (genéticamente determinado por el alelo bush) de una línea de planta o variedad en la madurez que tiene un largo intermodal promedio de aproximadamente 7 cm o menos (pero al menos aproximadamente 4,7 cm, con preferencia, al menos aproximadamente 5,0 cm) y una longitud de estolones promedio más larga de aproximadamente 150 cm o menos, de aproximadamente 140 cm o menos, de aproximadamente 130 cm o menos, con preferencia, de aproximadamente 100 cm o menos (pero de al menos aproximadamente 70 cm). Además, el tamaño de hoja promedio no se reduce por el alelo bush y es de al menos aproximadamente 1 1 cm de largo y/o 15 cm de ancho o más. Un tipo de crecimiento "no bush" es cualquier otro tipo (que tiene un alelo S), como tipos de crecimiento triploides normales (por ejemplo, Fashion F1 o Boston F1) que producen estolones más largos promedio de significativamente más de 100 cm, por ejemplo, en general, de más de 200 cm o más de 300 cm (ver también los Ejemplos).
"Longitud de estolones más larga" o "longitud de estolones más larga promedio" se refiere a la longitud promedio de los estolones más largos de una pluralidad de plantas de una línea o variedad de sandía, cuando están completamente crecidas (en la madurez). El estolón más largo también puede ser mencionado en la presente como el tallo (así, "tallo" y "estolón más largo" se usan de modo indistinto en la presente).
"Diámetro de planta" se refiere al diámetro promedio de una pluralidad de plantas de una línea o variedad de sandía cuando está completamente crecida, es decir, el diámetro desde la punta del estolón más largo en un lado de la planta hasta la punta del estolón más largo en el otro lado de la planta.
"Longitud internodal" se refiere a la longitud promedio de los internodos en una estolón de una pluralidad de plantas de una línea o variedad específica.
"Número internodal" se refiere al número promedio de internodos en un estolones, por ejemplo, en el estolón más largo.
"Retrocruzamiento" es un proceso en donde la progenie híbrida, por ejemplo, un híbrido F1 , se cruza repetidamente en uno de los progenitores del híbrido. El retrocruzamiento se puede usar para introducir una o varias conversiones de locus simples de un antecedente a otro.
A lo largo de este documento, "promedio" y "medio" se usan de modo indistinto y se refieren a una media aritmética.
"Conversión génica simple" o "gen convertido simple" se refiere a plantas desarrolladas por retrocruzamiento, en donde esencialmente todas las características morfológicas y fisiológicas deseadas de una planta (por ejemplo, una endogámica) se retienen además de un gen simple transferido a la planta por medio de retrocruzamiento o ingeniería genética.
"Rendimiento" significa el peso total de todas los frutos de sandía cosechados por hectárea de una línea o variedad particular.
"Rendimiento de valor comercial" significa el peso total de todas los frutos de sandía de valor comercial, en especial frutos triploides sin semillas de al menos 2,5 kg, cosechadas por hectárea de una línea o variedad particular, es decir, frutos apropiados para ser vendidos para el consumo fresco, que tienen buen sabor (sin
malos sabores), de al menos 10 % brix y propiedades de color pulpa y ninguna deficiencia como corazón hueco.
"Ensayo de alelismo" se refiere a un ensayo genético, en donde se pueden ensayar si dos fenotipos vistos en dos plantas son determinados por el mismo gen o por diferentes genes. Por ejemplo, si una planta bush diploide homocigota (bb) se cruza con otra planta de sandía que es homocigota para un gen recesivo diferente, en un locus distinto (por ejemplo, el alelo hmbn que determina la multirramificación), la planta F1 no tendrá el tipo de crecimiento bush y no el fenotipo de multirramificación y la generación F2 segregará los dos fenotipos {bush y multirramificación) de modo independiente, en una relación de 9:3:3:1 , es decir, 9 (no bush I no multirramificación) : 3 (bush I no multirramificación) : 3 (no bush I multirramificación) :1 (bush I multirramificación).
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
En un aspecto de la invención, se proporciona (una semilla de) una planta de la especie Citrullus lanatus, en donde dicha planta es triploide y tiene un porte bush (como se definió en la presente). La planta que comprende tres copias de un alelo recesivo designado bush, en donde se ha depositado una muestra representativa de las semillas que contienen dicho alelo bajo los números de acceso NCIMB 41907 (y/o NCIMB 41905 y NCIMB 41906). La ploidía se puede determinar con facilidad por recuento de cromosomas o citometría de flujo u otros métodos conocidos (Sari et al. 1999, Scientia Horticulturae 82: 265 - 277, incorporados en la presente por referencia).
El híbrido triploide bush tiene, debido a la presencia del alelo bush recesivo "b" (y la ausencia del alelo B dominante), una longitud de estolón más largo de no más de aproximadamente 150 cm de largo, con preferencia, no más de aproximadamente 140 cm de largo, con mayor preferencia, no más de aproximadamente 100 cm de largo, en donde el diámetro promedio de la planta es de aproximadamente 300 cm o menos, 280 cm o menos o 200 cm o menos y una longitud internodal promedio en el estolón más largo de aproximadamente 7 cm o menos, pero de al menos aproximadamente 4,7 cm, con preferencia, de al menos aproximadamente 5,0, 5,5,
6,0, 6,5 o 7,0 cm. En especial, están comprendidas las plantas que tienen una longitud internodal promedio de 6,0 cm o 7,0 cm o de 6,0 a 7,0 cm. El alelo recesivo bush no afecta el tamaño de las hojas, de modo que la planta de acuerdo con la invención comprenda hojas de similar tamaño (promedio) como se halla en los híbridos triploides de tipo de crecimiento normal (como Boston F1 ), es decir, de al menos aproximadamente 1 1 , 12, 13, 14 ó 15 cm de largo y/o al menos aproximadamente 15 cm de ancho, que comprende longitudes promedio de hojas de al menos aproximadamente 1 1 , 12, 13, 14, 15, 16 ó 17 cm y/o anchos de hojas promedio de al menos aproximadamente 15, 16, 17, 18 ó 19 cm. En una forma de realización, el producto de longitud de hojas promedio multiplicado por el ancho de hojas promedio es, con preferencia, de al menos aproximadamente 140 ó 150, como de al menos aproximadamente 160, 170, 180, 190 ó 200 o incluso de al menos aproximadamente 225, 250, 300 o más.
En una forma de realización, la relación de la longitud de estolón más largo (promedio) a la cantidad (promedio) de internodos en el estolón más largo es de 7 o menos. En otro aspecto, el híbrido bush triploide tiene no más de (en promedio) 15 internodos en el estolón más largo. En especial, la cantidad de internodos en el estolón más largo es de aproximadamente el 50 % de la cantidad hallada en Boston F1 o Fashion F1.
Además, el diámetro de tallo (promedio), medido en el centro del estolón más largo, es mayor que en híbridos triploides normales tales como Boston F1 , por ejemplo, el diámetro de tallo promedio es de al menos aproximadamente 8 mm, con preferencia, de al menos aproximadamente 9 mm e incluso puede ser de al menos aproximadamente 10 mm, 1 1 mm o 12 mm. El diámetro de tallo promedio de un híbrido bush triploide de acuerdo con la invención es así, con preferencia, al menos 1 ,2 veces, 1 ,3 veces, 1 ,4 veces, 1 ,5 veces o 1 ,6 veces el diámetro de tallo promedio de un híbrido triploide no bush (tipo de crecimiento normal), que comprende el alelo B.
El alelo bush recesivo se puede transferir en otra planta de sandía, por ejemplo, haciendo cruzamientos con plantas crecidas de las semillas depositadas o regenerando plantas de cultivos tisulares o celulares de las plantas para las que se
han depositado semillas y haciendo cruzamientos con tales plantas regeneradas o identificando plantas de sandía diploides que comprenden el alelo bush (por ejemplo, plantas que pueden no mostrar el tipo de crecimiento bush porque también contienen el alelo 8). Las otras plantas de sandía en las que se puede transferir el alelo b son así, por ejemplo, plantas que carecen del alelo b recesivo. Así, para transferir el alelo bush, se cruza una planta de sandía que comprende el alelo bush con otra planta de sandía que carece, por ejemplo, del alelo b y F1 se autofecunda para producir F2 u otra generación. F2 u otra progenie de generación que contiene el alelo bush en forma homocigota en diploides (o en tres o cuatro copias en triploides o tetraploides) mostrará el porte bush y, así, se puede identificar con facilidad.
A fin de ensayar si otra planta de sandía tiene un alelo bush o no, se puede realizar un ensayo de alelismo.
Para determinar y/o seleccionar líneas de planta que tienen las características de crecimiento bush tal como se describió con anterioridad (por ejemplo, cuando se transfiere el alelo bush en otras plantas de sandía que carecen del alelo recesivo bush), se entiende que varias plantas de una línea se cultivan en una o varias ubicaciones en las mismas condiciones ambientales, incluyen variedades o líneas de control apropiadas y se llevan a cabo mediciones en una pluralidad de plantas de una línea (al menos 3, con preferencia, al menos 5 ó 10 o más plantas) a fin de poder calcular un valor promedio.
Las características de los frutos no se ven influidas por la presencia de tres copias del alelo bush (ausencia del alelo ß), de modo que se puedan producir híbridos triploides con cualquier tamaño de fruto, cualquier forma de fruto, color y patrón de cáscara del fruto cruzando el alelo bush en antecedentes genéticos que tienen diferentes características de frutos. El alelo bush se puede retrocruzar, por ejemplo, en diferentes antecedentes genéticos usando semillas depositadas dentro como una fuente del alelo bush, tal como se describe en otra parte en la presente. De modo alternativo, los genes que determinan diferentes características de frutos se pueden retrocruzar en plantas que comprenden el tipo de crecimiento bush. Así, el peso de fruto promedio de un híbrido triploide que comprende el tipo de crecimiento bush puede ser de al menos aproximadamente 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1 , 12, 13 ó 14 kg.
En otra forma de realización, el peso del fruto promedio de un híbrido triploide que comprende el tipo de crecimiento bush puede ser de menos de 5 kg, por ejemplo, 4, 3, 2, 1 ,5 ó 1 kg. Para producir triploides híbridos con tales frutos pequeños, se puede introducir, por ejemplo, el alelo bush en variedades tales como Liliput, Extazy o Fantazy (Hazera) o Valdoria F1 , Vanessa F1 , Pixie F1 o Bonny F1 (Nunhems) o, viceversa, genes que determinan el tamaño de fruto pequeño se pueden retrocruzar en plantas depositadas en la presente, que tienen un tipo de crecimiento bush.
Del mismo modo, cualquier otra característica del fruto ser puede combinar con el tipo de crecimiento bush por cría. Como se menciona, por ejemplo, por cría se pueden modificar el tamaño del fruto (por ejemplo, elongado, oval, en bloque, esférico o redondo), superficie del fruto (con surcos, suave), color pulpa (rojo escarlata, rojo coral, anaranjado, salmón, amarillo, amarillo canario o blanco), color de la cáscara (por ejemplo, verde claro; verde oscuro; verde a rayas con franjas angostas, medianas o anchas; tipos grises; con o sin manchas; amarillo dorado), espesor de la cáscara, dureza de la cáscara, patrón de la cáscara (por ejemplo, a rayado, no rayado, reticulado), grado brix (sólidos solubles totales), estructura de la pulpa / firmeza de la pulpa, mayor contenido de licopenos y/o vitaminas, diferentes relaciones de azúcar : ácido, muy buen sabor a fruto, etc. Ver Guner y Wehner 2004, Hort Science 39(6): 1 175-1 182, en particular páginas 1 180-1 181 que describen genes para las características del fruto. Los objetivos de cría importantes en general son madurez temprana, alto rendimiento de fruto, alta calidad de fruto interno (buen color uniforme, alto contenido de azúcar, apropiada relación de azúcar: ácido, buen sabor, alto contenido de vitaminas y licopeno, textura firme de la pulpa, textura no fibrosa de la pulpa, falta de defectos tales como corazón hueco, necrosis de la cáscara, podredumbre del extremo del capullo o punto de cruz y buenas características de la cáscara y resistencia al craqueo).
En una forma de realización de la invención, los frutos tampoco tienen, con preferencia, una "cáscara frágil" y/o una "cáscara explosiva" tal como se describe en el documento WO 03/075641 en la página 13 y 14, es decir, los frutos no se quiebran bajo presión en el intervalo de 90 a 140 g/mm2.
El alelo bush se puede introducir en otras plantas de sandía que carecen del
alelo bush usando métodos de cría conocidos. Los métodos de cría conocidos se pueden usar solos o combinados, tales como (pero sin limitación) selección recurrente, mejoramiento por pedigrí, cría por retrocruzamiento, desarrollo endogámico, ensayo de híbridos, cría asistida por marcadores, etc. La progenie se selecciona luego, la cual retiene el porte bush, que se puede identificar fenotípicamente con facilidad. Así, la selección de plantas de progenie que tienen el porte bush se puede realizar por selección fenotípica de las características del porte bush y por descarte de plantas que no tienen las características del porte bush, por ejemplo, que tienen estolones principales más largos, internodos más largos y hojas más pequeñas en comparación con una planta bush de acuerdo con la invención.
De esta manera, en un aspecto, se proporciona una planta de la especie Citrullus lanatus, en donde dicha planta es triploide y tiene un porte bush y comprende tres copias de un alelo recesivo designado bush, en donde el alelo bush es obtenible (se puede obtener) por cruzamiento de una planta de sandía de la que se depositaron semillas bajo el número de acceso NCIMB41906 o NCIMB41905 o progenie de cualquiera de estas plantas (por ejemplo, obtenidas por autofecundación y/o cruzamiento y cuya progenie retiene el alelo bush y/o el porte bush), con otra planta de sandía.
En un aspecto, la planta triploide que tiene un porte bush es obtenible por cruzamiento de una planta de sandía diploide bush con una planta de sandía tetraploide bush, en donde el alelo bush es obtenible (se puede obtener) por cruzamiento de una planta de sandía cuyas semillas se depositaron bajo el número de acceso NCIMB41906 o NCIMB41905 o progenie de cualquiera de estas plantas (por ejemplo, obtenidas por autofecundación y/o cruzamiento y cuya progenie retiene el alelo bush y/o el porte bush), con otra planta de sandía.
En un aspecto, se proporciona una planta de la especie Citrullus lanatus, en donde dicha planta es triploide y tiene un porte bush y comprende tres copias de un alelo recesivo designado bush, en donde la planta es obtenible (se puede obtener) por propagación vegetativa de células de plantas o tejido de plantas de una planta de sandía cuyas semillas se depositaron bajo el número de acceso NCIMB 41907.
Como el alelo b es recesivo, el porte bush sólo se ve si no está presente el
alelo B dominante. Cuando se transfiere el alelo b de un depósito de semillas diploides hecho en la presente (por ejemplo, NCIMB 41906 o su progenie) a otra planta de sandía que no contiene el alelo b recesivo, F1 será heterocigota y no desplegará el porte bush y el cultivador necesita en primer lugar autofecundar F1 para identificar las plantas que comprenden el porte bush. Del mismo modo, cuando se transfiere el alelo b de una planta de sandía tetraploide (bbbb), tal como se cultiva de semillas de NCIMB41905 o su progenie, a otra planta de sandía tetraploide que no comprende el alelo b recesivo, F1 será heterocigota y no despliega el porte bush y nuevamente el fenotipo bush no se verá en la generación F2. Una planta diploide bush también se puede regenerar de las células haploides de una planta tetraploide bush (por ejemplo, polen o cultivo de anteras y regeneración de una planta) y la planta bush diploide derivada se puede usar luego en otra cría y en la generación de plantas de sandía con un porte bush. Esto se puede mencionar como una planta tetraploide haploide con un porte bush. Estas plantas están comprendidas en la presente.
De modo alternativo, se pueden desarrollar marcadores moleculares que se ligan con el alelo b y luego se puede realizar la selección del porte bush seleccionando las plantas que tienen los marcadores moleculares ligados. Los marcadores ligados se pueden desarrollar usando un rango de técnicas tales como el análisis de segregantes a granel y un rango de marcadores, tales como marcadores AFLP, marcadores RFLP, marcadores SNP, marcadores mini- o microsatelitales, etc. Para el desarrollo de marcadores, se debería generar una población segregante, por ejemplo, por cruzamiento de una planta con un tipo de crecimiento bush (por ejemplo, un diploide bb) con una planta que tiene un tipo de crecimiento normal (por ejemplo, un diploide BB) y desarrollo de una población segregante a partir de ella (por ejemplo, una población F2 o F3 o población de retrocruzamiento). Luego se pueden identificar los marcadores que están íntimamente asociados (ligados) con el porte bush y el alelo bush, es decir, se cosegrega con el alelo b. Ver, por ejemplo, Wolukau et al. (HortScience, febrero de 2009 vol. 44 no. 1 32-34), el uso de análisis de segregante a granel en melón para identificar marcadores ligados a un gen resistente. Un marcador molecular es una secuencia de ADN o polimorfismo de
nucleótido simple (SNP) que se halla en el cromosoma cercano al alelo b (por ejemplo, dentro de una distancia genética de 5 cM o menos) y que es diferente de la secuencia de ADN o SNP hallada cerca del alelo B. De esta manera, en una forma de realización, el alelo b se puede introducir en otras plantas de sandía que carecen del alelo b por métodos de cría asistidos por marcadores, usando un marcador molecular ligado íntimamente al alelo b.
Para la producción de frutos sin semillas, el híbrido triploide bush de acuerdo con la invención se puede interplantar con un polinizador diploide apropiado tales como, por ejemplo, Jenny F1 (Nunhems) o Polimax F1 (Nunhems) u otros polinizadores, tales como SP-1 , SP-2, SP-3, SP-4 o SP-5 (Syngenta) o Sidekick. Los frutos luego se cosechan de las plantas triploides de la invención. Cuando las plantas triploides tienen un diámetro de planta más pequeño, es posible una densidad de siembra o plantación mayor en comparación con triploides de tipo de crecimiento normal (tales como plantas que tienen una longitud de estolón principal de más de 200, 250 ó 300 cm). Así, también se logra un rendimiento de fruto triploide mayor por hectárea.
En una forma de realización, se proporciona un método para producir frutos triploides sin semillas, que comprende:
a) interplantar plantas híbridas triploides bush y plantas polinizadoras diploides, en donde las plantas triploides están en una densidad que es al menos 1 ,5 veces la densidad de plantación de plantas híbridas triploides de tipo de crecimiento normal,
b) permitir que ocurra la polinización de las flores femeninas en las plantas bush triploides,
y
c) cosechar los frutos de las plantas híbridas triploides bush.
La densidad de las plantas bush triploides en la etapa a) depende de si las plantas se cultivan o no en el invernadero o en el campo abierto y de si los triploides se injertan o no en rizomas. De esta manera, la densidad de plantas bush triploides en el invernadero es, con preferencia, de al menos aproximadamente 7500 plantas por hectárea (triploides injertados) o 15000 plantas por hectárea (triploides no
¡njertados). La densidad de plantas bush triploides en el campo abierto es, con preferencia, de al menos aproximadamente 6000, 7000 u 8000 plantas por hectárea (triploides injertados) o de al menos aproximadamente 12000, 13000, 14000 ó 15000 plantas por hectárea (triploides no injertados).
El rendimiento de los frutos triploides en la etapa c) es al menos 1 ,25 veces el rendimiento del frutos triploides de triploides de tipo de crecimiento normal, tales como Boston F1 o Fashion F1. De esta manera, en el campo abierto (no injertadas), se cosechan al menos aproximadamente 75 toneladas de frutos triploides sin semillas (que comprenden tres copias del alelo b) por hectárea en la etapa c), con preferencia, incluso al menos aproximadamente 80, 85 ó 90 toneladas por hectárea. De esta manera, en una forma de realización, el método comprende la etapa d) de cosecha de al menos 75 toneladas por hectárea de frutos triploides. Luego se pueden clasificar, empaquetar en contenedores, etc. Los contenedores que comprenden o que consisten en frutos triploides, con preferencia, frutos comercializables, que comprenden el alelo b también son una forma de realización de la invención.
También se proporcionan en la presente las semillas de las que crecen plantas híbridas triploides con un tipo de crecimiento bush. De esta manera, en una forma de realización, se proporcionan semillas de sandía de las que puede crecer una planta triploide bush tal como se describió con anterioridad. Las semillas contienen tres copias del alelo b. En una forma de realización, se ha depositado una muestra representativa de semillas bajo el número de acceso NCIMB 41907. En una forma de realización, las semillas maduras son pequeñas, que comprenden un tamaño de semilla promedio igual o inferior a 5 mm de largo. Los envases (bolsas, recipientes, etc.) que comprenden una pluralidad de tales semillas están comprendidos en la presente.
Además, están comprendidos en la presente plántulas, vástagos y rizomas, así como células y tejidos y cultivos celulares y cultivos tisulares y propagaciones vegetativas de las plantas híbridas triploides que tienen un tipo de crecimiento bush. De esta manera, se proporcionan en la presente plantas enteras obtenidas de plántulas, vástagos y rizomas, así como células y tejidos, cultivos celulares y cultivos
tisulares y propagaciones vegetativas de las plantas híbridas triploides que retienen el tipo de crecimiento bush de acuerdo con la invención cuando se regenera en una planta y crece en las mismas condiciones ambientales.
Del mismo modo, están comprendidas frutos triploides sin semillas (bbb) cosechadas de una planta triploide bush de acuerdo con la invención. Los frutos se pueden cosechar para el consumo fresco o para procesar. Los recipientes que comprenden o que consisten en una pluralidad de tales frutos son otra forma de realización de la invención. Con preferencia, los recipientes comprenden frutos comercializables.
La planta híbrida triploide que tiene un tipo de crecimiento bush (bbb) es un híbrido de F1 producido de un cruce entre una línea parental masculina endogámica diploide, que tiene un porte bush y una línea parental endogámica tetraploide, que tiene un porte bush (ver la Figura 1 ). De esta manera, para producir semillas de plantas híbridas triploides con un tipo de crecimiento bush (bbb), se puede propagar vegetativamente la planta híbrida triploide o, de forma alternativa, se puede producir líneas parentales bush diploides endogámicas (bb) y tetraploides bush endogámicas (bbbb). El experto en la técnica puede introducir, así, diferentes características (como diversos tamaños de frutos, etc.) en un híbrido triploide bush generando primero progenitores masculinos y femeninos con diferentes características, pero reteniendo el tipo de crecimiento bush como se describe en la presente.
Un híbrido triploide vegetativamente propagado con un porte bush es también una forma de realización de la invención. En un aspecto, la planta de sandía tiene el alelo bush tal como se halla en las semillas depositadas bajo NCIMB41907, NCIMB41906 o NCIMB41905. En un aspecto, el híbrido vegetativamente propagado se obtiene (se puede obtener) de tejido de planta de NCIMB 41907.
Como se mencionó con anterioridad, el alelo b se puede transferir de depósitos de semillas proporcionados en la presente en otras plantas de sandía y, así, se pueden hacer otros diploides bush endogámicos y/u otros tetraploides bush endogámicos. En una forma de realización, se proporciona una planta bush diploide endogámica y/o una planta bush tetraploide endogámica que comprende el alelo b como se halla en las semillas depositadas bajo los números de acceso NCI B
41905, NCIMB 41906 y/o NCIMB 41907.
Cuando se hace referencia a una planta de sandía diploide o tetraploide con un porte bush, se entiende que se hace referencia a las mismas características del porte bush que las descritas con anterioridad para el híbrido triploide bush, es decir, la planta bush diploide o tetraploide tiene, debido a la presencia del alelo recesivo bush "/)" en dos o cuatro copias (y la ausencia del alelo dominante B), una longitud de estolón más largo de no más de aproximadamente 150 cm, 140 cm o 100 cm, en donde el diámetro de planta promedio es de aproximadamente 300 cm, 280 cm o 200 cm o menos y una longitud internodal promedio en el estolón más largo de aproximadamente 7 cm o menos, pero de al menos aproximadamente 4,7 cm, con preferencia, de al menos aproximadamente 5,0, 5,5, 6,0 o 6,5 cm. El alelo recesivo bush no afecta el tamaño de las hojas, de modo que la planta de acuerdo con la invención comprende hojas de tamaño similar como se halla en diploides de tipo de crecimiento normal (como variedad Milady) o tetraploides de tipo de crecimiento normal, es decir, de al menos aproximadamente 1 1 cm de largo y/o al menos aproximadamente 15 cm de ancho, que comprende longitudes de hojas de al menos aproximadamente 1 1 , 12, 13, 14, 15, 16 ó 17 cm y/o anchos de hojas de al menos aproximadamente 15, 16, 17, 18 ó 19 cm. De modo similar, la relación de la longitud de estolón (promedio) más larga a la cantidad (promedio) de internodos en el estolón más largo es de 7 o menos. En otro aspecto, el bush diploide o bush tetraploide tiene no más de (en promedio) 25, 21 ó 15 internodos en el estolón más largo. Además, el diámetro (promedio) del tallo, medido en el centro del estolón más largo, en un aspecto es más grande que en diploides o tetraploides de tipo de crecimiento normal, por ejemplo, el diámetro del tallo es de al menos aproximadamente 8 mm, con preferencia, de al menos aproximadamente 9 mm y puede ser incluso de al menos aproximadamente 10 mm, 1 1 mm o 12 mm. El diámetro de tallo promedio de una planta diploide o tetraploide bush de acuerdo con la invención es, así, con preferencia, al menos 1 ,2 veces, 1 ,3 veces, 1 ,4 veces, 1 ,5 veces o 1 ,6 veces el diámetro de tallo promedio de un diploide o tetraploide no bush, que comprende el alelo B. Las características de los frutos (por ejemplo, tamaño promedio del fruto, peso, etc.) en una forma de realización no son diferentes a los diploides o
tetraploides de tipo de crecimiento normal.
En una forma de realización, se puede hacer una línea endogámica bush diploide, en donde el alelo bush (£>) es derivable, por ejemplo, del depósito de semilla hecho bajo el número de acceso NCIMB 41906 o de su progenie, por ejemplo, progenie obtenida por autofecundación y/o cruza NCIMB41906 con otra planta de sandía. Esto se puede hacer, por ejemplo, por cría con NCIMB 41906 o su progenie y selección en las generaciones de progenie para el tipo de crecimiento bush, mientras se descartan plantas que no tienen el tipo de crecimiento bush. El alelo bush también se puede derivar de otras plantas o partes de plantas que comprenden el alelo bush, por ejemplo, polen u ovarios de una planta tetraploide bush, tales como semillas depositadas bajo NCIMB 41905.
De modo alternativo, se pueden hacer nuevas líneas endogámicas diploides bush al identificar variedades o líneas diploides que pueden comprender un alelo bush incluso a pesar de que pueden no tener un tipo de crecimiento bush (debido al alelo dominante ß que está presente). Por ejemplo, se pueden usar diploides de los que se sospecha que pueden contener un alelo b. Se puede realizar un ensayo de alelismo para determinar si está presente un alelo recesivo bush. Con preferencia, el diploide se autopoliniza para una o varias generaciones y un diploide que es homocigota para el alelo bush se identifica por selección de plantas de progenie con el tipo de crecimiento bush tal como se determina por el alelo bush en forma homocigota. Las variedades que pueden ser apropiadas son Garden Baby, Bush Charleston Gray y Bush Sugar Baby o Sugar Bush.
En una forma de realización, se puede hacer una línea endogámica bush tetraploide en donde el alelo bush es derivable, por ejemplo, del depósito de las semillas efectuado bajo el número de acceso NCIMB 41905 o NCIMB 41906 o de la progenie de cualquiera de ellas. Esto se puede realizar, por ejemplo, por cría con NCIMB 41905 y/o NCIMB 41906 o progenie de ellas y selección en las generaciones de progenie para el tipo de crecimiento bush, mientras se descartan las plantas que no tienen el tipo de crecimiento bush. Cuando se usan NCIMB 41906 o su progenie, se pueden usar técnicas de duplicación de cromosomas para generar tetraploides, seguido por la sección del porte bush en los tetraploides y en la progenie de los
tetraploides obtenida por autofecundación de tetraploides seleccionados y estabilización del porte bush en otras generaciones.
De modo alternativo, se pueden hacer nuevas líneas endogámicas bush tetraploides a partir de nuevas plantas bush diploides tal como se describió con anterioridad y procrear en la misma familia dichas plantas por varias generaciones, mientras se selecciona el tipo de crecimiento bush como se define en la presente y se duplica el cromosoma de un diploide bush endogámico seleccionado para generar una línea tetraploide bush. La línea tetraploide se cría luego para varias generaciones, seleccionando el tipo de crecimiento bush como se describe en la presente.
En un aspecto, la invención también proporciona una planta (o semilla) de la especie Citrullus lanatus, en donde dicha planta es tetraploide y tiene un porte bush. El porte bush se debe a la presencia del alelo b, así, se proporciona una planta tetraploide que tiene un porte bush y que comprende cuatro copias de un alelo recesivo designado bush, en donde una muestra representativa de semillas que contiene dicho alelo b fue depositada bajo el número de acceso NCIMB 41905. Además, están comprendidas en la presente cualquier parte de la planta y la progenie de una planta tetraploide bush, tales como propagaciones vegetativas, propagaciones de semillas (por ejemplo, autofecundaciones) y también cultivos celulares o tisulares in vitro, así como polen, ovarios, etc. De esta manera, en una forma de realización, la planta tetraploide bush o semillas de las que puede crecer la planta o el tejido o partes de la planta (polen, anteras, óvulos) comprende el alelo b como se halla en NCIMB 41905.
De esta manera, en un aspecto, se proporciona una planta de la especie Citrullus lanatus, en donde dicha planta es tetraploide y tiene un porte bush y comprende cuatro copias de un alelo recesivo designado bush, en donde el alelo bush es obtenible (se puede obtener) por cruzamiento de una planta de sandía cuyas semillas se depositaron bajo el número de acceso NCIMB41906 o NCIMB41905 o progenie de cualquiera de estas plantas (por ejemplo, obtenidas por autofecundación y/o cruzamiento), con otra planta de sandía.
En otro aspecto, se proporciona una planta de la especie Citrullus lanatus, en
donde dicha planta es tetraploide y tiene un porte bush y comprende cuatro copias de un alelo recesivo designado bush, en donde la planta se obtiene por autofecundación de una planta tetraploide cuya muestra representativa de semillas se depositó bajo el número de acceso NCIMB 41905.
Una planta de sandía tetraploide vegetativamente propagada que tiene un porte bush también es una forma de realización de la invención. En un aspecto, la planta de sandia tiene el alelo bush tal como se halla en las semillas depositadas bajo NCIMB41907, NCIMB41906 o NCIMB41905. En un aspecto, la planta de sandía vegetativamente propagada se obtiene (es obtenible) de células de plantas o tejido de planta de NCIMB 41905.
En un aspecto, se proporciona una planta de la especie Citrullus lanatus, en donde dicha planta es tetraploide y tiene un porte bush y comprende cuatro copias de un alelo recesivo designado bush, en donde la planta es obtenible (se puede obtener) por propagación vegetativa de células de plantas o tejido de una planta de sandía cuyas semillas se depositaron bajo el número de acceso NCIMB41905.
En otra forma de realización, la planta tetraploide bush comprende un alelo b identificado de otras fuentes diploides tal como se describió con anterioridad o como se halla en semillas depositadas bajo el número de acceso NCIMB 41906.
Se proporciona un método para generar una planta endogámica tetraploide que tiene un tipo de crecimiento bush, que comprende las etapas de:
a) suministro de una planta diploide que comprende el alelo b,
b) autofecundación de dicha planta diploide para varias generaciones para generar una línea endogámica con un tipo de crecimiento bush,
c) duplicación de los cromosomas de dicha línea endogámica para generar una línea tetraploide,
d) autofecundación de la línea tetraploide para varias generaciones.
De esta manera, en la etapa a) la planta diploide puede ser una planta derivada de las semillas depositadas bajo NCIMB 41906 o su progenie o puede ser una planta diploide a la que se transfirió el alelo b del depósito de semillas NCIMB 41906 por cruzamiento y selección del tipo de crecimiento bush. El diploide también puede ser una nueva planta diploide en la que se identificó el alelo b, por ejemplo,
usando un ensayo de alelismo y/o identificando un diploide que puede comprender el alelo b, autofecundación de dicha planta para una o varias generaciones y selección de una planta de progenie que tiene fenotípicamente el tipo de crecimiento bush. De modo alternativo, el diploide puede ser una planta haploide generada de semillas depositadas bajo NCIMB 41905.
Además, se proporciona el uso de la planta tetraploide bush de acuerdo con la invención como progenitor masculino o femenino, en donde la planta tetraploide bush se cruza con otra planta de sandía o se deja autofertilizar para producir la progenie. En una forma de realización, la planta tetraploide bush comprende un tipo de crecimiento bush, debido a la presencia de cuatro copias del alelo b, en donde la planta bush (y/o el alelo b) se puede obtener de semillas depositadas bajo NCI B 41905 o su progenie.
Se proporciona otro uso de la planta tetraploide bush como progenitor femenino, en especial como un progenitor femenino en la producción de semillas de sandía triploide híbrida (es decir, producción de semillas F1). De esta manera, en un aspecto, las flores femeninas de la planta tetraploide bush se polinizan (o se dejan polinizar) con polen de otra planta de sandía. La otra planta de sandía puede ser cualquier planta de sandía, por ejemplo, una planta de sandía diploide o tetraploide. En una forma de realización específica, la otra planta de sandía es una planta diploide, con preferencia, una planta diploide que comprende un tipo de crecimiento bush. La planta de sandía diploide que comprende un tipo de crecimiento bush puede ser cualquier planta bush diploide tal como se describió con anterioridad o una planta obtenible de semillas depositadas bajo NCIMB 41906 o su progenie.
También se proporciona un método para producir semillas de sandía híbridas triploides, en donde las plantas triploides crecidas de tales semillas tienen un porte bush, que comprende:
(a) proporcionar una planta de sandía diploide que tiene un porte bush y una planta tetraploide que tiene un porte bush,
(b) permitir la polinización de flores pistiladas de la planta tetraploide bush con polen de la planta diploide bush y
(c) cosechar semillas producidas en los frutos de la planta tetraploide bush y
opcionalmente
(d) secar las semillas cosechadas.
Opcionalmente, luego se envasan las semillas F1 secadas y cosechadas. También se pueden tratar antes de envasar. De esta manera, los envases o contenedores que comprenden o que consisten en semillas obtenidas por el método anterior son una forma de realización en la presente.
Este método también se ilustra en la Figura 1. La planta tetraploide bush y la planta diploide bush se pueden proporcionar tal como se describe en cualquier otra parte de la presente. Se pueden interplantar para permitir que ocurra la polinización. En la etapa a), en consecuencia, se plantan semillas o plántulas de ambas plantas y crecen próximas entre sí. Si la planta diploide bush y la planta tetraploide bush no florecen al mismo tiempo, la planta que florece más tarde puede ser plantada o sembrada más temprano, de modo que la floración es aproximadamente al mismo tiempo. Como tanto las plantas diploides como las plantas tetraploides tienen un porte bush, se pueden sembrar o plantar más plantas por hectárea en comparación con la producción de semillas híbridas triploides que implican tetraploides de tipo de crecimiento normal.
La polinización puede ser a mano o por insectos (por ejemplo, abejas) en bloques de aislamiento. Para asegurar la polinización de las flores femeninas tetraploides con polen del diploide masculino, se pueden usar diferentes métodos, como recolecta de flores masculinas a mano y polinización manual de flores femeninas, seguido de recubrimiento de la flor polinizada. De modo alternativo, todas las flores masculinas (estaminadas) que se desarrollan en las plantas tetraploides se pueden remover para asegurar la polinización de las flores pistiladas en las plantas tetraploides busto con polen diploide de las plantas diploides bush. Cuando los frutos en las plantas tetraploides están maduros, se cosechan y se recolectan las semillas híbridas triploides F1 (resultantes de la polinización cruzada). Luego se pueden clasificar (por ejemplo, por tamaño), secar, opcionalmente tratar y envasar para la venta. En una forma de realización, el progenitor femenino tetraploide bush (y/o el alelo b) se puede obtener de semillas depositadas bajo NCIMB 41905 o su progenie o sus propagaciones vegetativas. En otra forma de realización, el progenitor
masculino diploide bush (y/o el alelo b) se puede obtener de semillas depositadas bajo NCIMB 41906 o su progenie o sus propagaciones vegetativas.
En consecuencia, también se proporcionan semillas obtenidas por el método anterior, es decir, semillas de híbridos F1 que, cuando se cultivan, producen plantas triploides con un porte bush. Tales semillas se pueden envasar en bolsas, recipientes, y similares.
En una forma de realización, las semillas F1 son semillas de WH3451 , una muestra representativa de semillas fue depositada bajo el número de acceso NCIMB 41907. En otra forma de realización, el híbrido triploide bush (y/o el alelo b) se puede obtener de semillas depositadas bajo NCIMB 41907 o su progenie o sus propagaciones vegetativas.
La planta tetraploide bush usada en el método anterior comprende cuatro copias deel alelo bush (bbbb) en su genoma y tiene las siguientes características: una longitud de estolón más largo de no más de 150 cm, con preferencia, no más de 140 cm, 135 cm o no más de 100 cm, una longitud internodal promedio en el estolón más largo de 7 cm o menos, pero al menos 4,5 cm y produce hojas de al menos 1 1 cm de largo y/o al menos 15 cm de ancho.
También se proporciona un método para producir semillas de sandía tetraploides bush, que comprende a) cultivar una planta tetraploide bush de sandía de acuerdo con la presente invención, b) permitir la autopolinización de dicha planta de sandía tetraploide, c) obtener un fruto de una planta de la etapa b) y d) extraer semillas tetraploides de dicho fruto. Con preferencia, el método también comprende lavar y secar dichas semillas. En una forma de realización, la planta de sandía tetraploide de la etapa a) es una planta que comprende un tipo de crecimiento bush tal como se describe en la presente. La planta puede comprender en una forma de realización un alelo bush obtenible de semillas depositadas bajo los números de acceso NCIMB 41905, NCIMB 41906 o NCIMB 41907. La planta de la etapa a) se puede obtener de una planta o de una parte de planta, crecida bajo el número de depósito NCIMB 41905.
Como también se describió con anterioridad, es una forma de realización proporcionar un método para la producción de frutos de sandía triploides sin semillas,
que comprende:
1 . proporcionar un planta de sandía híbrida triploide (F1 ) que comprende un porte bush,
2. interplantar dichas plantas híbridas triploides con plantas polinizadoras diploides,
3. cosechar los frutos de sandía sin semillas producidos en las plantas triploides de (a).
La planta híbrida triploide de la etapa 1 , con preferencia, no se injerta en un rizoma diferente. El método se lleva a cabo, con preferencia, en el campo abierto.
El polinizador diploide en la etapa b) puede ser cualquier polinizador diploide, tales como un polinizador de tipo de crecimiento normal (no bush), se pueden usar polinizadores comerciales tales Jenny o Polimax o superpolinizadores (SP-1 , SP-2, SP-3, SP-4, SP-5), Sidekick, Escort-4, Companion u otros. Opcionalmente, el polinizador puede ser un polinizador de doble propósito tal como se describe en el documento WO 2012/069539 A1. El polinizador diploide deberá producir suficiente polen en el momento correcto del día y durante un período de tiempo apropiado para inducir la fructificación en híbridos triploides. Las plantas polinizadoras pueden ser diploides híbridos (diploides F1 ) o polinizadores polinizados abiertos (OP).
En este método, al menos 1 ,5 veces, con preferencia, al menos 2 veces, 2,5 veces o 3 veces más plantas bush triploides se pueden cultivar por hectárea a cuando se usa una planta híbrida triploide que comprende un porte normal (no bush), tales como Boston F1. Al menos el 15 %, con preferencia, al menos el 20 %, 30 %, 40 % o 50 % de frutos triploides más comercializables se producen por hectárea que cuando se usa una planta híbrida triploide que comprende un porte normal, como Boston F1 . El rendimiento total del fruto sin semillas cosechado de las plantas bush triploides híbridas es, con preferencia, de al menos aproximadamente 75 toneladas por hectárea (t/ha), con preferencia, de al menos 80 t/ha, con mayor preferencia, de al menos 90 t/ha.
El interplantado en un campo se puede hacer por siembra o por trasplante del polinizador y los triploides. Se pueden usar varios métodos de interplantación tal como se usa en la técnica y se pueden emplear diversas relaciones de polinizador :
híbrido triploide. Una fila de plantas polinizadoras puede estar presente, por ejemplo, en al menos cada 2, al menos cada 3 o al menos cada 4 filas de triploides, pero otros métodos de interplantación también pueden ser usados.
La polinización es realizada usualmente por abejas y colmenas de abejas pueden ser proporcionadas a los campos, a menos que estén naturalmente presentes suficiente cantidad de abejas salvajes. La polinización también se puede llevar a cabo por medios manuales o mecánicos. La cosecha a la madurez se puede realizar a mano o mecánicamente.
Los frutos triploides cosechados se pueden envasar para mercados de productos frescos o para procesamiento. Los frutos que comprenden tres alelos b obtenibles por el método anterior están comprendidos en la presente. Estas frutos se pueden distinguir de los frutos de híbridos triploides normales en que tienen la capacidad de producir plantas que tienen un tipo de crecimiento bush de acuerdo con la invención, es decir, tienen los determinantes genéticos que son responsables del tipo de crecimiento bush (el alelo b). Si se desarrollan marcadores moleculares ligados al alelo b tal como se describió con anterioridad, el análisis con marcadores puede distinguir fácilmente tales frutos. De modo alternativo, las células o tejidos de tales frutos (o de otras partes de la planta de la que se cosechan) se pueden cultivar vegetativamente y regenerar en plantas enteras, cuyas plantas regeneradas tienen el porte bush. De esta manera, en una forma de realización, se proporcionan frutos triploides cosechados (bbb), tales como frutos o partes de frutos enteros o envasados y/o frutos o partes de fruto procesados.
En otro aspecto de la invención, se proporciona un cultivo celular o un cultivo tisular de células regenerables de una planta que tiene un porte bush o que comprende un alelo bush, todos los cuales son como se describieron con anterioridad. Un cultivo celular o un cultivo tisular comprende células o protoplastos o tejido de planta de una parte de planta de una planta que comprende un alelo bush (tales como una planta tetraploide bush, diploide bush o triploide bush, las cuales son como se describen en la presente) seleccionado del grupo que consiste en: embriones, meristemos, cotiledones, polen, hojas, anteras, raíces, ápices de raíces, pistilos, flores, semillas, tallos. La parte de la planta puede estar seleccionada de un
vástago, fruto, polen, óvulo, tallo, cotiledón, hoja, embriones celulares, meristemos, anteras, raíces, ápices de raíces, pistilos, flores, semillas. También se proporciona una planta de sandía regenerada de tal cultivo celular o cultivo tisular, en donde la planta regenerada (o su progenie, por ejemplo, obtenida después de la autofecundación) comprende un porte bush. En consecuencia, en un aspecto, están comprendidas en la presente plantas de sandía vegetativamente propagadas obtenidas de tejido de planta de semillas o plantas crecidas de semillas depositadas bajo NCIMB 41907, NCIMB 41906 o NCIMB 41905.
Se entiende que también es un objeto de la invención proporcionar semillas de las que pueden crecer plantas bush diploides, triploides o tetraploides descritas en la presente. También están comprendidas en la presente plántulas, vástagos y rizomas, así como células y tejidos de plantas bush diploides, triploides o tetraploides. Tales partes de planta comprenden los determinantes genéticos para producir plantas bush de acuerdo con la invención. De esta manera, las plantas enteras obtenidas de plántulas, vástagos y rizomas, así como de células y tejidos de las plantas bush triploides o tetraploides, retienen todas las características fisiológicas y morfológicas de las plantas bush triploides o tetraploides de acuerdo con la invención cuando se cultivan en las mismas condiciones ambientales.
Además, se proporciona en la presente la progenie de cualquiera de las plantas de acuerdo con la invención, tales como las semillas obtenibles por cruzamiento de una planta que comprende el alelo bush (y que carece del alelo B) descrito en la presente con otra planta de sandía y/o por autofecundación de una planta de acuerdo con la invención para producir las semillas F1 y ulterior progenie de la generación (F2, F3, etc.). La presencia del alelo bush en la progenie se puede determinar por medio del tipo de crecimiento bush (por ejemplo, en líneas endogámicas) y/o análisis de marcadores.
En una forma de realización, se proporciona una planta tetraploide de sandía (y semillas de las que puede crecer una planta) que tiene un porte bush, en donde se proporciona una muestra representativa de semillas que contiene los elementos genéticos para dicho porte bush (es decir, que contiene el alelo b en cuatro copias y no contiene el alelo B), en donde una muestra representativa de semillas fue
depositada bajo el número de acceso NCIMB 41905.
En una forma de realización, se proporciona una planta de sandía triploide (y semillas de las que puede crecer tal planta) que tiene un porte bush, en donde se proporciona una muestra representativa de semillas que contiene los elementos genéticos para dicho porte bush (es decir, que contiene el alelo b en tres copias y no contiene el alelo B), en donde una muestra representativa de semillas fue depositada bajo el número de acceso NCIMB 41907.
En una forma de realización, se proporciona una planta de sandía diploide (y semillas de las que puede crecer tal planta) que tiene un porte bush, en donde se proporciona una muestra representativa de semillas que contiene los elementos genéticos para dicho porte bush (es decir, que contiene el alelo b en dos copias y no contiene el alelo B), en donde una muestra representativa de semillas fue depositada bajo el número de acceso NCIMB 41906.
Se proporcionan semillas de sandía que contienen el alelo recesivo designado ubush", en donde una muestra representativa de semillas que contiene dicho alelo "bush" fue depositada bajo los números de acceso NCIMB 41905, NCIMB 41906 y NCIMB 41907. En una forma de realización, las semillas tienen un pedigrí que incluye la línea endogámica WHAAOX o la línea endogámica WHAAPD como una de las líneas parentales. También se proporciona una planta de sandía producida por el cultivo de dichas semillas. También se proporcionan polen y óvulos de la planta producida por cultivo de dichas semillas.
Las plantas de sandía obtenidas (derivadas) u obtenibles (derivables) de plantas de acuerdo con la invención (por ejemplo, de plantas que comprenden un porte bush y/o que comprenden los determinantes genéticos, el alelo b, que confiere el porte bush) incluyen plantas obtenidas por métodos de cría, tales como autofecundación, cruzamiento, retrocruzamiento, selección recurrente, producción de haploide doble, selección asistida por marcadores, propagaciones clónales, transformantes, etc., en donde las plantas derivadas comprenden un porte bush y/o los determinantes genéticos (alelo b) que confiere el porte bush (cuando el alelo B está ausente) de acuerdo con la invención.
En un aspecto, se proporciona una planta de sandía, de la que se ha
depositado una cantidad representativa de semillas bajo los números de acceso NCIMB 41905, NCIMB 41906 y NCI B 41907 o progenie de cualquiera de tales plantas, por ejemplo, obtenidas por cruzamiento y/o autofecundación. En un aspecto, se proporcionan semillas de sandía, de las que se ha depositado una cantidad representativa de semillas bajo los números de acceso NCIMB 41905, NCIMB 41906 y NCIMB 41907.
Además, se proporcionan polen, un óvulo, células, tejidos, propagaciones vegetativas obtenidas de estas plantas o de su progenie. En un aspecto, la progenie retiene el alelo bush y el porte bush de las plantas cuyas semillas fueron depositadas bajo NCIMB 41905, NCIMB 41906 y NCIMB 41907.
Además, se proporcionan frutos de una planta de sandía, en donde el fruto se produce por autopolinización de la planta. Además, se proporcionan frutos triploides sin semillas, en donde el fruto se obtiene por polinización de una planta crecida de una planta de sandía de la que se ha depositado una cantidad representativa de semillas bajo el número de acceso NCIMB 41907.
Además, se proporciona una semilla híbrida triploide obtenida por cruzamiento de una planta de sandía diploide, de la que se ha depositado una cantidad representativa de semillas bajo el número de acceso NCIMB 41906, con una planta tetraploide de sandía, de la que se ha depositado una cantidad representativa de semillas bajo el número de acceso NCIMB 41905.
Además, se proporciona un método para la producción de fruto de sandía triploide sin semillas, que comprende el interplantado de semillas de una planta de sandía bush triploide, cuyas semillas representativas se depositaron bajo el número de acceso NCIMB 41907 u otro triploide bush de acuerdo con la invención, con una planta polinizadora diploide, que permite la polinización de dichas plantas de sandía triploides por polen de dicha planta polinizadora diploide para obtener frutos triploides sin semillas en la planta triploide.
Además, se proporciona un método de producción de una variedad de sandía triploide que tiene un tipo de crecimiento bush, que comprende a) proporcionar una línea de sandía endogámica bush diploide, b) proporcionar una línea de sandía endogámica bush tetraploide y c) cruzar las líneas bush diploides y tetraploides y
recolectar las semillas triploides de dicho cruzamiento. En un aspecto, la línea de sandía endogámica bush diploide son las semillas representativas de las plantas que fueron depositadas bajo el número de acceso NCIMB41906 o su progenie o sus propagaciones vegetativas. En otro aspecto, la línea de sandía endogámica bush tetraploide son las semillas representativas de plantas que fueron depositadas bajo el número de acceso NCIMB41905 o su progenie o sus propagaciones vegetativas.
BREVE DESCRIPCIÓN DE DE LA FIGURA
Figura 1
Diagrama esquemático de los métodos y plantas / frutos de acuerdo con la invención. Un bush masculino (bb) y un bush femenino (bbbb) se cruzan para producir semillas de híbridos bush triploides (bbb). Estas semillas F1 se pueden interplantar (en filas o entre filas) con cualquier polinizador diploide para producir frutos triploides sin semillas en las plantas bush híbridas triploides.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos no limitativos describen la producción de híbridos bush triploides de acuerdo con la invención. A menos que se establezca otra cosa en los ejemplos, se usan métodos para la cría convencional de sandía, tal como se describe, por ejemplo, en Maynard 2001 , Watermelons - Characteristics, Production and Marketing, ASHS Press; Mohr H.C. Watermelon Breeding en Mark J. Bassett (editor) 1986 Breeding Vegetable Crops, AVI Publishing Company.
Información Del Depósito
El solicitante ha depositado el híbrido WH3451 el primero de diciembre de
2011 en NCIMB bajo el número de acceso NCIMB 41907. Las semillas de WHAAPD y WHAAOX fueron depositadas por Nunhems B.V. el primero de diciembre de 2011 en NCIMB bajo los números de acceso NCIMB 41905 y NCIMB 41906, respectivamente. El acceso a los depósitos estará disponible durante la tramitación de esta solicitud a personas determinadas por el Encargado de Patentes y Marcas para tener derecho a ella a requerimiento.
Según 37 C.F.R. § 1 .808(b), todas las restricciones impuestas por el depositante a la disponibilidad al público de uno o varios depósitos se removerán irrevocablemente después del otorgamiento de la patente permitiendo el acceso a un depósito de al menos 2500 semillas con NCIMB Ltd., Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen AB21 9YA, Reino Unido. El depósito se mantendrá durante un período de 30 años o 5 años después del pedido más reciente o para la vida ejecutable de la patente que es más larga y será reemplazada si se llegara a volver no viable durante ese período. El solicitante no renuncia a ningún derecho conferido en virtud de esta patente a esta solicitud o según la Ley de Protección de Variedades de Plantas (7 USC 2321 et seq.).
Ejemplo 1 : Generación de híbridos bush triploides (bbb)
Se observó que una sandía diploide de un jardín casero tenía un tipo de crecimiento interesante. A partir de esta observación, se desarrolló un programa de reproducción a fin de determinar la heredabilidad de este tipo de crecimiento y a fin de fijar el tipo de crecimiento, para poder generar híbridos triploides que tienen este tipo de crecimiento. Se halló que el tipo de crecimiento era heredable como rasgo recesivo y se denominó "alelo bush" (b). Se halló que era responsable para la longitud de los estolones, sin embargo, sin afectar el tamaño de las hojas o el tamaño de los frutos.
A fin de generar un híbrido triploide bush, primero se generaron una línea parental masculina bush diploide endogámica y una línea femenina parental bush tetraploide endogámica (ver la Fig. 1).
La generación del progenitor masculino bush endogámico se realizó seleccionando un diploide que tiene el tipo de crecimiento observado, realizando una cantidad de cruzamientos con dichas líneas diploides y patentadas y cruzando la línea bush diploide derivada para nueve generaciones para fijar las características bush en la línea diploide.
La generación de la línea endogámica bush tetraploide femenina se llevó a cabo seleccionando una sandía diploide con el tipo de crecimiento observado, realizando una cantidad de cruzamientos con dichas líneas diploides y patentadas y
generando una línea endogámica diploide bush por autofecundación de una línea derivada para más de nueve generaciones para obtener una línea diploide bush uniforme (endogámica). La línea bush diploide endogámica generada se trató luego con colchicina para duplicación cromosómica. Después del tratamiento de colchicina, se seleccionó una línea tetraploide y la línea se autofecundó para varias generaciones para fijar las características bush en la línea tetraploide. En cada generación de semillas, se controló el aumento del nivel de ploidía de la línea tetraploide usando citometría de flujo.
Bush femenina endogámica tetraploide {bbbb), designada WHAAPD y bush masculina endogámica diploide {bb), designada WHAAOX, se polinizaron de forma cruzada para producir frutos con semillas triploides {bbb), designados WH3451. Las semillas del híbrido triploide WH3451 se cosecharon de los frutos y se depositaron por Nunhems B.V. el primero de diciembre de 201 1 en NICMB bajo el número de acceso NCIMB 41907. Las semillas de WHAAPD y WHAAOX fueron depositadas por Nunhems B.V. el primero de diciembre de 201 1 en NICMB bajo los números de acceso NCIMB 41905 y NCIMB 41906, respectivamente.
Las características fisiológicas y morfológicas del híbrido bush triploide WH3451 se analizaron en los siguientes ejemplos.
Ejemplo 2 - Comparación de híbridos bush triploides WH3451 con híbridos de la técnica anterior
2.1 - Materiales y métodos
Se realizó un ensayo en campo en Italia (Sant'Agata Bolognese-BO). Se sembraron semillas el 07/04/2010 y se trasplantaron en el campo el 20/05/2010 (100 cm dentro de la fila, 250 cm entre las filas). La parcela contenía 10 plantas por línea.
Se determinó el nivel de ploidía por médio de citometría de flujo.
Los valores medios se determinaron para las siguientes características:
- La longitud de las hojas y los anchos de las hojas se midieron para 1 hoja de 3 plantas por línea.
- Se contó la cantidad de flores estaminadas para 3 plantas por línea en la fecha de la floración. Se calculó la cantidad media de 3 plantas.
- Se midió el diámetro medio de los tallos en la mitad del tallo principal para 3 plantas y se calculó la media.
- Madurez: se determinó la cantidad de días desde la floración hasta la madurez registrando las fechas cuando el 50 % de las plantas de la parcela mostraba al menos 1 flor femenina y luego cuando el 50 % de las plantas de la parcela tenía frutos listos para recolectar.
- Tallo: cantidad promedio de internodos: la cantidad promedio de ¡nternodos en el estolón más largo medida en 3 plantas por línea.
- Tallo: longitud internodal promedio (cm): la longitud internodal promedio (cm) medida en el estolón más largo en 3 plantas por línea
- Tallo: longitud promedio del estolón más largo (cm): longitud promedio del estolón más largo (cm) medida en 3 plantas por línea
- Peso promedio del fruto (kg): media del peso de 3 frutos por línea recolectados aleatoriamente de 3 plantas en la madurez
- Longitud media del fruto (cm): media de la longitud de 3 frutos
- Diámetro medio del fruto en la sección media (cm): media del diámetro de 3 frutos
- Fruto: espesor de la cáscara (cm) en el extremo de los capullos y el espesor de la cáscara del lado del fruto se mide para 3 frutos. El espesor de la cáscara se mide desde el extremo externo del fruto hasta el límite entre el mesocarpio blanco y el endocarpio de color.
- Fruto: grado Brix: el valor es la media de 1 lectura para 3 frutos, recolectados entre el centro y la cáscara del fruto; expresado en grados Brix (°) usando el refractómetro portable K71901 mod. RLC ATC 0-18 % (OPTECH).
- Tamaño de las semillas de siembra: longitud (mm) y anchos (mm) medios de la medición de 5 semillas
- Color: evaluado usando la minicarta de colores de la Royal Horticultural Society (http://vvww.rhs.org.uk/Plants/RHS-Publications/RHS-colour-charts).
2.1 - Resultados
Tabla 1
Los progenitores masculinos (bb) y femeninos (bbbb) bush tienen esencialmente las mismas características de tipo de crecimiento bush tal como se indicó para el híbrido triploide WH3451 en la Tabla 1 anterior.
Eiemplo 3 - Espaciado reducido para híbridos bush triploides
Como los híbridos bush triploides son plantas pequeñas, sin embargo, in tener un tamaño reducido de fruto y rendimiento de fruto por hectárea y sin tener tamaños de hojas reducidos (es decir, tejido fotosintético), estas plantas se pueden usar para cultivar al menos aproximadamente 1 ,5 veces, con preferencia, al menos aproximadamente 2 veces o 2,5 veces, con preferencia, incluso aproximadamente 3 veces las plantas triploides por hectárea en comparación con híbridos triploides de tipo normal, tales como Fashion F1 y Boston F1 , aumentando así el rendimiento comercializable del fruto por hectárea. De esta manera, el rendimiento del fruto triploide por hectárea se puede incrementar de modo significativo usando las plantas bush triploides de acuerdo con la invención, es decir, el rendimiento del fruto de plantas bush triploides puede ser de al menos aproximadamente 1 ,25 veces o al menos aproximadamente 1 ,5 veces el rendimiento de un campo de producción triploide de tipo normal.
La siguiente Tabla 2 muestra la cantidad de plantas por hectárea para variedades de tipo de crecimiento normal triploide Fashion F1 y Boston F1 en comparación con las plantas bush triploides de acuerdo con la invención, como WH3451 :
Los rendimientos del fruto para Fashion F1 y Boston F1 son de aproximadamente 60 toneladas/hectárea (t/ha) en el campo abierto en comparación con aproximadamente 75-90 t/ha para el híbrido triploide bush.
Ejemplo 3
En 2012, se determinó el tipo de crecimiento vegetativo de los progenitores masculinos (bb) y femeninos (bbbb) bush, cuyos resultados se muestran en la Tabla 3.
Tabla 3
Claims (23)
1. Una planta de la especie Citrullus lanatus, caracterizada porque dicha planta es triploide y tiene un porte bush.
2. La planta de acuerdo con la reivindicación 1 caracterizada porque comprende tres copias de un alelo recesivo designado bush, en donde una muestra representativa de semillas que contienen dicho alelo ha sido depositada bajo el número de acceso NCIMB 41907.
3. La planta de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizada porque la planta es un híbrido F1 producido de un cruzamiento entre una línea parental masculina endogámica diploide, que tiene un porte bush y una línea parental endogámica tetraploide, que tiene un porte bush.
4. La planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la planta tiene una longitud máxima de estolón de no más de 100 cm.
5. La planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque dicha planta tiene no más de 15 internodos en el estolón más largo.
6. La planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque dicha planta tiene una longitud internodal promedio en el estolón más largo de 7 cm o menos, pero al menos de 4,7 cm.
7. La planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la relación de longitud de estolón más largo : cantidad de internodos en el estolón más largo es de 7 o menos.
8. La planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque dicha planta tiene un diámetro de tallo de al menos 8 mm.
9. La planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque dicha planta comprende hojas de al menos 10 cm de largo y de al menos 15 cm de ancho.
10. La planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque dicha planta produce frutos con un peso promedio de fruto de al menos 5 kg después de la polinización con polen diploide.
1 1. Semillas de las que puede crecer una planta tal como se definen en las reivindicaciones 1 a 10.
12. Una planta o semilla de la especie Citrullus ¡anatus caracterizada porque dicha planta es tetraploide y tiene un porte bush.
13. La planta de acuerdo con la reivindicación 12 caracterizada porque comprende cuatro copias de un alelo recesivo designado bush, en donde una muestra representativa de semillas que contienen dicho alelo fue depositada bajo el número de acceso NCIMB 41905.
14. Un cultivo tisular de células regenerables de una planta tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones anteriores.
15. Un cultivo tisular de acuerdo con la reivindicación 14, caracterizado porque comprende células o protoplastos o tejido vegetal de una parte de planta seleccionada del grupo que consiste en: embriones, meristemos, cotiledones, polen, óvulos, hojas, anteras, raíces, ápices de raíces, pistilos, flores, semillas, tallos.
16. Una parte de planta de la planta tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde dicha parte se selecciona de un vástago, fruto, polen, óvulo, tallo, cotiledón, hoja, embriones celulares, meristemos, anteras, raíces, ápices de raíces, pistilos, flores, semillas.
17. Una planta de sandía regenerada del cultivo tisular tal como se define en la reivindicación 14, caracterizada porque la planta regenerada es un triploide o un tetraploide y comprende un porte bush.
18. Un método para producir semillas de sandía híbridas triploides, en donde las plantas crecidas de tales semillas tienen un porte bush, dicho método estando caracterizado porque comprende: a) proporcionar una planta de sandía diploide que tiene un porte bush y una planta tetraploide que tiene un porte bush, b) permitir la polinización de flores de la planta tetraploide bush con polen de la planta diploide bush y c) cosechar las semillas producidas en los frutos de la planta tetraploide bush.
19. El método de acuerdo con la reivindicación 18, caracterizado porque dicha planta tetraploide comprende cuatro copias del alelo bush (bbbb) en su genoma.
20. El método de acuerdo con la reivindicación 18, caracterizado porque dicha planta tetraploide tiene las siguientes características: una longitud de estolón más largo de no más de 100 cm, una longitud internodal promedio en el estolón más largo de 7 cm o menos, pero de al menos 4,7 cm y produce hojas de al menos 10 cm de largo y de al menos 15 cm de ancho.
21. Un método para la producción de fruto de sandía triploide sin semillas, caracterizado porque comprende: (a) proporcionar una planta de sandía híbrida triploide que comprende un porte bush, (b) interplantar dichas plantas híbridas triploides con plantas polinizadoras diploides, (c) cosechar los frutos de sandía sin semillas producidas en las plantas triploides de (a).
22. El método de acuerdo con la reivindicación 21 , caracterizado porque al menos 1 ,5 veces más plantas bush triploides se cultivan por hectárea que cuando se usa una planta híbrida triploide que comprende un porte normal, como Boston F1.
23. El método de acuerdo con las reivindicaciones 21 ó 22, caracterizado porque se producen al menos un 15 % más de frutos triploides por hectárea que cuando se usa una planta híbrida triploide que comprende un porte normal, como Boston F1.
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