MX2014009322A - Terapia de combinacion para el tratamiento de la deficiencia androgenica. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una terapia de combinación para elevar los niveles de testosterona en mamíferos machos en los cuales un antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable se co-administra al mamífero con un agente terapéutico adicional seleccionado de un andrógeno y un inhibidor de la aromatasa. La invención también se dirige a una terapia de combinación para tratar hombres con hipogonadismo y trastornos relacionados con este, incluyendo la reducción de la masa muscular, limitación de la capacidad de rendimiento del cuerpo, reducción de la densidad ósea, reducción de la libido, reducción de potencia, reducción de la hiperplasia prostática benigna e infertilidad.

Description

TERAPIA DE COMBINACIÓN PARA EL TRATAMIENTO DE LA DEFICIENCIA ANDROGÉNICA REFERENCIA CRUZADA A LAS SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud Provisional de Estados Unidos No. 61/604,989, presentada el 29 de febrero del 2012, los contenidos de la cual se incorporan en la presente como referencia.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a una terapia de combinación en donde un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable se co-administra con un agente farmacéuticamente activo adicional seleccionado de un andrógeno y un inhibidor de la aromatasa para elevar los niveles de testosterona y/o para tratar los trastornos relacionados con la deficiencia de testosterona. La presente invención también se refiere a un kit que comprende un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable con testosterona exógena y/o uno o más inhibidores de la aromatasa .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La testosterona es el andrógeno masculino primario, jugando un papel vital en la salud masculina en general. La testosterona es esencial para el desarrollo y mantenimiento de los tejidos reproductivos específicos (testículos, próstata, epidídimo, vesícula seminal y pene) y las características sexuales secundarias masculinas. Juega un papel clave en la libido y la función eréctil y es necesaria para la iniciación y mantenimiento de la espermatogénesis. La testosterona también tiene funciones importantes no relacionadas con los tejidos reproductivos. Por ejemplo, afecta positivamente la composición corporal aumentando la retención de nitrógeno, la cual soporta la masa corporal magra, tamaño y fuerza muscular. También actúa sobre el hueso para estimular la formación de hueso.

La secreción de testosterona es el producto final de una serie de procesos hormonales. La hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) , la cual es secretada en el hipotálamo, controla la secreción pulsátil de la hormona luteinizante (LH) y hormona estimulante del folículo (FSH) , las cuales son secretadas por la pituitaria anterior. La LH, a su vez, regula la producción y secreción de testosterona en las células de Leydig de los testículos, mientras que la FSH contribuye a la inducción de la espermatogénesis.

La testosterona se mide con mayor frecuencia como "testosterona total." Esta medición incluye la testosterona que se une a la globulina fijadora de hormonas sexuales (SHBG) (-44%) y por lo tanto no es biodisponible y la testosterona la cual ya sea está libre (~2%) o débilmente unida a otras proteínas (no unida a SHBG) (-54%) .

Los resultados de un estudio de la OMS indican que la testosterona se secreta normalmente en un ritmo circadiano, con niveles mayores en la mañana y niveles de nadir que ocurren alrededor de las 8 a 10 pm. Ver FIG. 1. Esta variación en la secreción de testosterona durante todo el día llega a ser mucho menos pronunciada en los hombres de edad avanzada (la edad media es igual a 71 años) . La importancia de este ritmo no se conoce en este momento.

Las muestras se obtuvieron de pacientes tanto jóvenes como ancianos cada 10 minutos durante 24 horas a través de una cánula permanente . De acuerdo con Tenover (1987) los niveles medios totales de testosterona en suero de 24 hr en hombres jóvenes sanos (rango de edad de 22 años-35 años, media de 27.3 años) fueron 4.9 ± 0.3 (+ SEM) mg/ml (17.0 nmol/L) , mientras que en los hombres de edad avanzada (rango de 65 años-84 años, media de 70.7 años) tuvieron un nivel total medio de testosterona en suero significativamente menor de 4.1 ± 0.4 mg/ml. (P <0.5; 14.2 nmol/L).

Los niveles de testosterona totales en suero obtenidos de las muestras aleatorias únicas también fueron significativamente menores en los hombres de edad avanzada (4.0 ± 0.2 mg/ml [13.9 nmol/L]) en comparación con 4.8 ± 0.2 mg/ml [16.6 nmol/L] en hombres jóvenes sanos.

La deficiencia de testosterona puede resultar de la enfermedad subyacente o trastornos genéticos y también es frecuentemente una complicación del envejecimiento. Por ejemplo, el hipogonadismo primario resulta de la insuficiencia testicular primaria. En esta situación, los niveles de testosterona son bajos y los niveles de las gonadotropinas hipofisarias (LH y FSH) son elevados. El hipogonadismo secundario es debido a la secreción inadecuada de las gonadotropinas hipofisarias. Además de un nivel bajo de testosterona, los niveles de LH y FSH son bajos o bajos de lo normal. Algunas de las secuelas de la deficiencia de la testosterona en adultos incluyen una amplia variedad de síntomas que incluyen: pérdida de la libido, disfunción eréctil, oligospermia o azoospermia, ausencia o regresión de las características sexuales secundarias, disminución progresiva de la masa muscular, fatiga, ánimo deprimido y riesgo aumentado de la osteoporosis . Muchos de estos trastornos se denominan genéricamente como andropausia.

Varias formas de la terapia de testosterona están actualmente disponibles. Recientemente, las preparaciones transdérmicas han ganado aceptación en el mercado. Sin embargo, la administración exógena de andrógenos (por ejemplo testosterona) tiene el efecto de suprimir la secreción de gonadotropinas hipofisarias y, por lo tanto, puede reducir significativamente el conteo de espermatozoides. En particular, la administración exógena de testosterona conduce a una inhibición de la liberación endógena de testosterona a través de la inhibición por retroalimentación de la LH hipofisaria. Por la misma razón, la espermatogénesis también se puede suprimir a través de la inhibición por retroalimentación de la FSH hipofisaria. En consecuencia, hay una necesidad de una terapia la cual retenga los beneficios de la administración exógena de testosterona, mientras que reduce o incluso minimiza los efectos adversos en la fertilidad masculina.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona una terapia de combinación para lograr niveles terapéuticos de testosterona en un mamífero macho co-administrando un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable con un agente farmacéuticamente activo adicional seleccionado de un andrógeno y un inhibidor de la aromatasa. En varias modalidades, la presente invención proporciona un método para mantener o incluso mejorar los parámetros de fertilidad (por ejemplo, conteo de espermatozoides, morfología de los espermatozoides y/o motilidad de los espermatozoides) en un varón que se somete a terapia de reemplazo de andrógenos en la cual un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable se co-administra con un andrógeno, preferiblemente testosterona . En otras modalidades, el antiestrógeno o sal del mismo se coadministra con un inhibidor de la aromatasa a un mamífero macho para lograr niveles terapéuticos de testosterona. En una modalidad preferida, el trans-clomifeno es el antiestrógeno que se co-administra con el agente terapéutico adicional .

El antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable se puede administrar simultáneamente (separadamente o en la misma formulación) o secuencialmente con andrógeno exógeno o un inhibidor de la aromatasa al macho para lograr una concentración de andrógenos en la sangre farmacológicamente efectiva en el macho.

La terapia de combinación se puede administrar a cualquier macho con niveles de testosterona bajos o bajos de lo normal, incluyendo, pero no limitado a, machos diagnosticados con o identificados como propensos a desarrollar uno o más de los siguientes trastornos: hipogonadismo secundario, diabetes tipo 2, síndrome metabólico, infertilidad, u osteoporosis . En una modalidad preferida, la terapia de combinación se administra a un ser humano masculino con hipogonadismo secundario.

También se proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable y un andrógeno o un inhibidor de la aromatasa. También se proporciona un kit que comprende la composición farmacéutica e instrucciones de uso de acuerdo con cualquier método descrito en la presente.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La FIG. 1 es una gráfica representativa de los perfiles totales de testosterona en suero secretores normales en hombres sanos (jóvenes y viejos) .

La FIG. 2 muestra la estructura química del citrato de clomifeno.

La FIG. 3 es una demostración gráfica del transcurso del tiempo de los niveles de testosterona en suero con Clomid, Enclomid y Zuclomid.

La FIG. 4 es una demostración gráfica del transcurso del tiempo de los niveles de colesterol en machos babuinos tratados con Clomid, Enclomid y Zuclomid.

La FIG. 5 demuestra el efecto de Androxal™ o Androgel® en los niveles de testosterona.

La FIG. 6 demuestra el efecto de Androxal™ o Androgel® en los niveles de LH.

La FIG. 7 demuestra el efecto de Androxal™ o Androgel® en los niveles de FSH.

La FIG. 8 demuestra el efecto de Androxal o Androgel durante un período de 7 semanas (6 semanas de tratamiento + un semanas de seguimiento) en los niveles de testosterona .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN En un aspecto, la presente invención proporciona una terapia de combinación para aumentar los niveles de testosterona en mamíferos machos y para mejorar o prevenir los síntomas de niveles bajos de testosterona, mientras mantiene la fertilidad en el macho mediante superponiendo la administración de un antiestrógeno (o sal del mismo) en la terapia de reemplazo de andrógenos para mantener al menos un parámetro de la fertilidad en el macho durante la terapia. Los andrógenos (por ejemplo testosterona) , cuando se administran exógenamente , actúan para suprimir la secreción de las gonadotropinas LH y FSH hipofisarias , cerrando o disminuyendo en gran medida la producción endógena de testosterona y la espermatogénesis. Los antiestrógenos (por ejemplo, trans-clomifeno) por otra parte, ejercen su efecto bloqueando la retroalimentación negativa ejercida por los estrógenos normales en la pituitaria conduciendo a la secreción aumentada de estas gonadotropinas hipofisarias . Este aspecto de la presente invención se basa en el sorprendente descubrimiento de que la co-administración de un antiestrógeno con un andrógeno puede revertir la supresión de hormonas hipofisarias que ocurre con la terapia de reemplazo de andrógenos manteniendo de ese modo la FSH (y LH) endógena a niveles significativamente superiores a los que se producen en la ausencia del antiestrógeno. Por consiguiente, este aspecto de la presente invención proporciona un método para mantener la espermatogénesis durante la terapia de reemplazo de andrógenos y, posiblemente, lograr un mayor aumento en los niveles de testosterona que los que ocurren para cualquier agente solo. Preferiblemente, los conteos de espermatozoides se mantienen por encima de 20 millones/ml en el macho que se somete a la terapia de combinación durante una porción sustancial del período de co-administración.

En otro aspecto, la presente invención proporciona una terapia de combinación para aumentar los niveles de testosterona en mamíferos machos y para mejorar o prevenir los síntomas de niveles bajos de testosterona, por lo cual uno o más inhibidores de la aromatasa se co-administran con un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable. Sorprendentemente, se ha descubierto que las elevaciones significativas en el nivel de estrógeno de un subconjunto de mamíferos machos con hipogonadismo secundario, principalmente aquellos con un índice de masa corporal (BMI) de al menos 30, pueden ocurrir durante la terapia con antiestrógeno. Se observó una débil correlación positiva entre el grado de elevación de los estrógenos y el BMI . La aromatasa es un complejo de la enzima de citocromo P-450 que cataliza la etapa limitante de la velocidad en la conversión de andrógenos (por ejemplo testosterona) a estrógenos. Sin estar ligado por teoría, se cree que los hombres con un BMI de al menos 30 tienen un nivel mayor de la aromatasa y por lo tanto, como los niveles de testosterona aumentan durante la terapia con antiestrógeno, un mayor porcentaje de la testosterona recién sintetizado se convierte a estrógeno. Por consiguiente, la co-administración de un inhibidor de la aromatasa con un antiestrógeno proporciona un método para prevenir o mejorar el aumento de los niveles de estrógeno en mamíferos machos que puede acompañar a la terapia con antiestrógenos . En una modalidad preferida, el antiestrógeno o sal del mismo es trans-clomifeno y el mamífero macho es un macho con hipogonadismo secundario con un índice de masa corporal (BMI) de al menos 30.

"Co-administración" o "terapia de combinación" significa la administración de un antiestrógeno y un andrógeno o un inhibidor de la aromatasa de una manera secuencial, es decir, cada agente se administra en un momento diferente, así como la administración simultánea de estos agentes. La "co-administración" o "terapia de combinación" no tiene la intención de abarcar la superposición incidental de terapias separadas en donde cada agente se administra para un propósito distinto del otro. La administración simultánea se puede realizar, por ejemplo, administrando a un macho una o más formulaciones que comprenden ambos agentes o administrando una o más formulaciones separadas que comprenden cada una un agente único.

El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal preparada a partir de un ácido inorgánico u orgánico no tóxico farmacéuticamente aceptable. Los ácidos inorgánicos incluyen, pero no se limitan a, ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, nítrico, sulfúrico, y fosfórico. Los ácidos orgánicos incluyen, pero no se limitan a, ácidos orgánicos alifáticos, aromáticos, carboxílicos, y sulfónicos incluyendo, pero no limitados a, ácido fórmico, acético, propiónico, succínico, benzoico, canforsulfónico, cítrico, fumárico, glucónico, isetiónico, láctico, málico, múcico, tartárico, para-toluensulfónico, glicólico, glucurónico, maleico, furoico, glutámico, benzoico, antranílico, salicílico, fenilacético, mandélico, embónico (pamoico) , metansulfónico, etansulfónico, pantoténico, bencensulfónico, esteárico, sulfanílico, algínico, y galacturónico. Una sal preferida es la sal de citrato.

Antiestrógeno + Andrógeno Por consiguiente, en una modalidad, la presente invención proporciona un método para aumentar los niveles de testosterona en un macho por administración secuencial de un antiestrógeno (o sal del mismo) y un andrógeno. La co- administración secuencial del antiestrógeno (o sal del mismo) y el andrógeno puede comprender rondas alternas consecutivas de tratamiento en las cuales se administra un andrógeno (o un antiestrógeno) durante un período de tiempo después del cual se interrumpe la administración del andrógeno (o antiestrógeno) , seguido de la administración de un antiestrógeno (o andrógeno) durante un período de tiempo después del cual se interrumpe la administración del antiestrógeno (o andrógeno) y así sucesivamente. La supresión de las gonadotropinas hipofisarias puede persistir después de que se interrumpe la terapia de reemplazo de andrógenos y por lo tanto los niveles de testosterona pueden permanecer deprimidos por debajo de los niveles de pre-tratamiento durante un periodo de tiempo después del cese de la terapia de reemplazo de andrógenos. En un aspecto relacionado, la presente invención proporciona un método para aliviar los efectos del post-tratamiento de la terapia de reemplazo de andrógenos administrando un antiestrógeno (o sal del mismo) menos de una semana, menos de dos semanas, menos de tres semanas, menos de un mes, o menos de dos, tres, cuatro, cinco o seis meses después de la interrupción de la terapia de reemplazo de andrógenos .

En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para aumentar los niveles de testosterona en un macho por la administración simultánea de un antiestrógeno (o sal del mismo) y un andrógeno, en este caso el antiestrógeno y el andrógeno se pueden administrar en las mismas o en diferentes formulaciones.

La co-administración (secuencial o simultánea) de un antiestrógeno (o sal del mismo) y un andrógeno se puede realizar por cualquier ruta apropiada, incluyendo pero no limitado a la administración por inyección (preferiblemente intramuscular) , oral, transdérmica (por ejemplo, parches) , tópica (por ejemplo, geles y cremas) y transmucosal (por ejemplo bucal) . Un antiestrógeno (o sal del mismo) y la testosterona se pueden administrar por la misma o diferente ruta. Por ejemplo, el antiestrógeno se puede administrar oralmente y la testosterona se puede administrar transdérmicamente, transmucosalmente o por inyección intramuscular. Alternativamente, por ejemplo, el antiestrógeno y la testosterona pueden ser ambos administrados oral o tópicamente.

Los andrógenos se pueden administrar por cualquier ruta apropiada; sin embargo, la administración por inyección (preferiblemente intramuscular), oral, transdérmica (por ejemplo, parches) , tópica (por ejemplo, geles y cremas) y transmucosal (por ejemplo bucal) son rutas preferidas. Cuando se administra, el andrógeno está en una formulación farmacéuticamente aceptable y está presente en una cantidad farmacológicamente efectiva (es decir, la dosis de andrógeno es suficiente para elevar los niveles de testosterona en el macho a niveles terapéuticos de al menos 300 ng/dl, preferiblemente al menos 350 ng/dl, más preferiblemente al menos 400 ng/dl, . incluso más preferiblemente al menos 500 ng/dl) . Los andrógenos representativos para uso de acuerdo con los métodos de la invención incluyen testosterona, ésteres de testosterona (por ejemplo, enantato o cipionato) , y andrógenos 17-alquilados tales como fluoximesterona y metiltestosterona .

En una modalidad, el andrógeno es testosterona. La testosterona puede formularse como un gel para aplicación tópica. Los ejemplos de formulaciones tópicas de testosterona incluyen, sin limitación, geles tópicos tales como Androgel® (Solvay Pharmaceuticals , Inc., Marietta, GA, EUA) , Testim® (Auxilium Pharmaceuticals, Inc., Malvern, PA, EUA) y Fortesta® (Endo Pharmaceuticals, Chadds Ford, PA, EUA) . Cuando se administra en la forma de un gel tópico, la dosis de la testosterona es preferiblemente entre 10 mg y 100 mg y el gel se aplica diariamente a la piel, por ejemplo a una dosis de aproximadamente 50, 75 o 100 mg/día. Alternativamente, la testosterona se puede formular como un parche para la administración transdérmica tal como Androderm® (Watson Laboratories, Corona, CA, EUA) o Testoderm® (Alza Corp., Palo Alto, CA, EUA). Cuando se administra en la forma de un parche transdérmico, la dosificación de testosterona es preferiblemente entre 2 mg a 5 mg/día y el parche se aplica a la piel una o dos veces al día. La testosterona también puede estar en una formulación adecuada para, la administración bucal tal como Striant® (Actient Pharmaceuticals , Lake Forest, IL, EUA) . Las formulaciones bucales se administran preferiblemente en la encía superior a una dosificación de aproximadamente 30 mg aplicada dos veces al día. La testosterona también se puede formular como un gránulo para implantación subcutánea tal como Testopel® (Slate Pharmaceuticals, Durham, NC, EUA) que se administra a una dosificación de 150 a 450 mg de testosterona cada 3-6 meses. Alternativamente, la testosterona puede estar en una formulación adecuada para la administración oral (es decir, para ser ingerida) .

En otra modalidad, el andrógeno es un éster de testosterona, tales como, sin limitación, undecanoato de testosterona (por ejemplo Nebido®) , cipionato de testosterona (por ejemplo, Depo®-Testosterone) o enantato de testosterona (por ejemplo Delatestryl®) . El éster de testosterona también puede ser un éster de priopionato, fenilpropionato, isocaproato o decanoato, y se puede formular como una mezcla de todos (por ejemplo, Sustanon®) o un subconjunto de estos ésteres. Los ésteres de testosterona se proporcionan preferiblemente en aceite en una formulación adecuada para inyección intramuscular. Los regímenes de dosificación varían de acuerdo con el paciente individual, éster de testosterona y diagnóstico. Generalmente entre 50 a 400 mg del éster de testosterona se administran cada dos a cuatro semanas (o 10 a 21 días) ; sin embargo, los ésteres de testosterona de acción más prolongada (por ejemplo, el éster de undecanoato) se pueden administrar con menos frecuencia tal como cada tres meses. Los ésteres de testosterona también se pueden formular para administración oral (es decir, para ingestión) tal como Andriol® (undecanoato de testosterona) el cual se recomienda que sea administrado 2-5 veces al día a una dosificación de 80-200 mg/día o OriTex® (undecanoato de testosterona) .

En otra modalidad, el andrógeno es un andrógeno 17-alquilado tal como fluoximesterona (vendida bajo el nombre comercial Halotestin®) o metiltestosterona (vendida bajo el nombre comercial Android®) en este caso el andrógeno se administra preferiblemente por vía oral.

En una modalidad preferida, no se co-administran agentes terapéuticos adicionales con un antiestrógeno (o sal del mismo) y un andrógeno de acuerdo con los métodos descritos en la presente. En un aspecto, los inhibidores de la aromatasa no se co-administran con un antiestrógeno y un andrógeno en la práctica de los métodos.

El antiest ógeno, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, cuando se co-administra con un andrógeno, está presente en una cantidad suficiente para mejorar uno o más parámetros de fertilidad en un macho que se somete al remplazo de testosterona en relación con los mismos parámetros en la ausencia del antiestrógeno. Los machos que se someten a terapia de testosterona pueden exhibir niveles de LH y FSH de 0.5 U/L o menos. El antiestrógeno (o sal del mismo) se administra preferiblemente en una cantidad efectiva para elevar una o ambas de estas gonadotropinas a niveles de al menos 3 U/L, al menos 4 U/L, al menos 5 U/L, al menos 6 U/L, al menos 7 U/L, al menos 8 U/L, al menos 9 U/L, al menos 10 U/L, al menos 11 U/L, al menos 12 U/L, al menos 13 U/L, al menos 14 U/L, o incluso al menos 15 U/L. El antiestrógeno se puede co-administrar con un andrógeno durante la duración de la terapia de reemplazo de andrógenos o se puede coadministrar con el andrógeno durante una porción de la terapia de reemplazo de andrógenos.

Los mamíferos machos que pueden beneficiarse de la superposición de la administración de antiestrógenos en la terapia de reemplazo de andrógenos incluyen cualquier mamífero macho con una necesidad o deseo de elevar sus niveles de testosterona. Preferiblemente, el mamífero macho es un ser humano masculino. El macho puede o no puede ser virgen a la terapia de reemplazo de andrógenos antes de ser co-administrado con un andrógeno y un antiestrógeno. Por lo tanto, la co-administración de un antiestrógeno, preferiblemente trans-clomifeno, se puede superponer en la terapia de reemplazo de testosterona en un macho con niveles de testosterona en suero bajos (menos de -300 ng/dl) o bajos de lo normal (300-400 ng/dl) independientemente de la etiología subyacente. Los machos humanos con virus de inmunodeficiencia humana o síndrome de inmunodeficiencia adquirida pueden beneficiarse de la terapia de testosterona para tratar la pérdida de masa muscular, depresión y/o fatiga. Por consiguiente, en un aspecto relacionado de la invención, un ser humano masculino con el virus de inmunodeficiencia humana o síndrome de inmunodeficiencia adquirida es co-administrado con un antiestrógeno y un andrógeno para tratar la pérdida de masa muscular, depresión y/o fatiga.

Antiestrógeno + Inhibidor de la Aromatasa En varias modalidades, se proporciona una terapia de combinación que comprende la administración secuencial o simultánea de una cantidad efectiva de uno o más inhibidores de la aromatasa y un antiestrógeno o sal farmacéuticamente aceptable. Por "inhibidor de la aromatasa" se entiende compuestos no esteroideos y esteroideos que inhiben la enzima aromatasa evitando de este modo la conversión de andrógenos a estrógenos, preferiblemente los que inhiben la actividad de la aromatasa in vitro con un valor de IC50 menor que 10~5 M, así como sus sales farmacéuticamente aceptables. Los inhibidores de la aromatasa útiles en la terapia de combinación incluyen, sin limitación, anastrozol, letrozol, exemestano, vorozol, formestaño, fadrozol, aminoglutetimida, testolactona, 4-hidroxiandrostenodiona, 1, 4 , 6-androstatrien-3,17-diona y 4-androsten-3 , 6 , 17-triona . Los inhibidores de la aromatasa preferidos incluyen inhibidores selectivos tales como anastrozol, letrozol, y vorozol. Los inhibidores de la aromatasa para uso en la terapia de combinación se pueden formular, junto con un portador farmacéuticamente aceptable, en composiciones farmacéuticas las cuales se pueden administrar por cualquier método de suministro aceptable, tal como administración oral (es decir, ingestión) , transmucosal (por ejemplo bucal o rectal) , transdérmica o parenteral (por ejemplo intravenosa, subcutánea, intramuscular) . Una cantidad efectiva de un inhibidor de la aromatasa para uso en la terapia de combinación descrita en la presente se puede determinar por un médico en vista de la condición física del macho y el inhibidor de la aromatasa específico a ser utilizado, pero una dosis típica variará desde 1 mg a 100 mg, preferiblemente 1 a 50 mg, 1 a 30 o 1 a 15 mg por dosis. Las dosificaciones del inhibidor de la aromatasa se pueden administrar diariamente o se pueden administrar periódicamente, tal como cada dos días, cada tres días, semanalmente, cada dos semanas o mensualmente .

En una modalidad relacionada, se proporciona un método para prevenir o mejorar un aumento dependiente de antiestrégenos de los niveles de estrégenos en un mamífero macho con hipogonadismo secundario que comprende coadministrar una cantidad efectiva de uno o más inhibidores de la aromatasa con un antiestrógeno o una sal del mismo al mamífero macho. En una modalidad preferida, el mamífero macho es un ser humano masculino con un BMI de al menos 30, al menos 31, al menos 32, al menos 33, al menos 34, al menos 35, al menos 36, al menos 37, al menos 38, al menos 40, al menos 41, al menos 42, l menos 43, al menos 44, o incluso al menos 45.

El antiestrógeno, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y el inhibidor de la aromatasa están cada uno presente en una cantidad efectiva para elevar la testosterona en un mamífero macho al que se administra la combinación de agentes, preferiblemente a niveles de al menos 300 ng/dl, que se pueden determinar por cualquier método conocido para medir y monitorear los niveles de testosterona en un mamífero macho. En modalidades preferidas, las cantidades efectivas de inhibidor de la aromatasa y antiestrógeno son menores que la cantidad efectiva de cada agente cuando se administra separadamente. En otras modalidades preferidas, el efecto de la combinación de inhibidor de la aromatasa y antiestrógeno en el aumento de los niveles de testosterona es mayor que el efecto predicho de los agentes cuando se administran separadamente .

Antiestrógenos Los antiestrógenos para uso en las terapias de combinación descritas en la presente pueden estar en la forma de sólidos, tales como tabletas o cápsulas rellenas o líquidos tales como soluciones, suspensiones, emulsiones, elixires o cápsulas rellenas con los mismos, todos para uso oral . Las composiciones también pueden estar en la forma de soluciones o emulsiones inyectables estériles para uso parenteral (incluyendo subcutáneo) . Tales composiciones farmacéuticas y formas de dosificación unitarias de las mismas pueden comprender ingredientes en proporciones convencionales .

Se ha descubierto que los efectos terapéuticos pueden persistir después del cese de la administración de antiestrógenos, presumiblemente debido a una corrección/restablecimiento del eje hipotálamo-hipófisis-testicular; en consecuencia, el antiestrógeno (o sal del mismo) se puede administrar en una base diaria o se puede administrar de forma intermitente, tal como cada dos días, cada tercer día, semanal, quincenal o incluso mensualmente . Cuando el antiestrógeno se administra intermitentemente, un intervalo de 3-30 días o más puede estar presente entre las dosis consecutivas y estos intervalos pueden variar a lo largo del periodo de administración. Por ejemplo, el antiestrógeno se puede administrar en un régimen de dosificación de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 o más días entre las administraciones consecutivas. El antiestrógeno puede estar presente en cualquier dosis a la cual el antiestrógeno es terapéuticamente efectivo. En un aspecto, el antiestrógeno se administra a una dosis desde aproximadamente 1 a 200 mg, preferiblemente desde aproximadamente 5 a aproximadamente 100 mg (aunque la determinación de las dosificaciones óptimas es con el nivel de experiencia normal en la técnica) . La dosis de antiestrógeno también puede ser desde aproximadamente 12.5 a aproximadamente 50 mg (por ejemplo, 12.5, 25 o 50 mg) . Las dosificaciones de antiestrógenos son preferiblemente (pero no necesariamente) administradas como parte de un régimen de dosificación diseñado para preservar el patrón diurno de la secreción de gonadotropina, mientras aumenta la amplitud tanto de FSH como LH. Por ejemplo, de acuerdo con la FIG. 1 una dosificación de antiestrógeno se puede administrar en una formulación farmacéutica que causaría niveles de testosterona en suero pico a alrededor de las 8 a.m. Después de la administración de la composición, los niveles de testosterona en suero se pueden medir como se describe anteriormente y las dosificaciones se pueden alterar para lograr un aumento suficiente en los niveles de testosterona en suero para lograr los resultados fisiológicos deseados asociados con la testosterona normal descrita anteriormente .

Por "antiestrógeno" se entiende un compuesto que evita que los estrógenos expresen sus efectos en los tejidos objetivo dependientes de estrógenos antagonizando en consecuencia una variedad de procesos dependientes de estrógenos. En todos los casos, los antiestrógenos útiles en la práctica de la presente invención son aquellos capaces de bloquear la retroalimentación negativa ejercida por los estrógenos normales en la pituitaria conduciendo a aumentos de LH y FSH. En los hombres, estos niveles aumentados de gonadotropinas estimulan las células de Leydig de los testículos y resultan en la producción de niveles de testosterona mayores. Los antiestrógenos útiles en la práctica de la presente invención pueden ser antiestrógenos puros o pueden tener acción estrogénica parcial como en el caso de los moduladores selectivos del receptor estrogénico (SERMs) los cuales exhiben propiedades antiestrogénicos en algunos tejidos y tejidos estrogénicos en otros. El trans-clomifeno es un antiestrógeno preferido para uso en los métodos descritos en la presente, preferiblemente en una forma sustancialmente libre de cis-clomifeno (por ejemplo, en una composición que comprende aproximadamente 100% p/p de trans-clomifeno y aproximadamente 0% p/p de cis-clomifeno como agente activo) .

Los antiestrógenos puros de la invención incluyen, sin limitación: RU 58,688, descrito en Van de Velde et al, Ann. NY Acad. Sci., 761 (3): 164-175 (1995); 13 -metil-7- [9- (4,4,5,5, 5-pentafluoropentilsulfinil) nonil] - 7, 8, 9, 11, 12 , 13, 14, 15, 16, 17-decahidro-6H-ciclopenta [a] -fenantreno-3, 17-diol (ICI 182 , 780/fulvestrant) y otros compuestos descritos en EP 0138504; N-butil-11- [ (7R, 8S, 9S, 13S, 14S, 17S) -3 , 17-dihidroxi-13-metil-6, 7,8, 9, 11, 12, 14, 15, 16, 17-decahidrociclopena [a] fenantren-7-il] -N-metil-undecanamida (ICI 164,384), descrita en Wakeling and Bowler, J. Endocrin. , 112:R7-R110 (1987); (#) -7-pivaloiloxi-3- (4' pivaloiloxifenil) -4-metil-2- (4" (2"piperidinoetoxi) fenil) -2H-benzopirano (E -800/SCH 57050) y otros compuestos descritos en WO 96/26201; (2S) -3- (4 -hidroxifenil) -4-metil-2- [4- [2- (1-piperidil) etoxi] fenil] -2H-cromen-7-ol (E -652/SCH 57068) y similares.

Los SERMs útiles en los métodos de la invención incluyen, sin limitación, trifenilalquileños tales como trifeniletilenos , los cuales incluyen: 2- [4- (1, 2-difenil-l-enil) fenoxi] -?,?-dimetil-etanamina (tamoxifeno) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 4,536,516, incorporada en la presente como referencia; Trans- 4- (1- (4- (2-dimetilamino) etoxi) fenil) -2-fenil- 1-butenil) fenol (4 -hidroxitamoxifeno) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 4,623,660, incorporada en la presente como referencia; 1- [4' -dimetilaminoetoxi) fenil] -1- (3' -hidroxifenil) -2-fenilbut-l-eno (droloxifeno) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 5,047,431, incorporada en la presente como referencia; 2- [p- [ (Z) -4-cloro-l,2-difenil-l-butenil] fenoxi] -N,N-dimetiletilamina (toremifeno) y otros compuestos descritos en las Patentes de Estados Unidos Nos. 4,696,949, 5,491,173 y 4,996,225, cada una de las cuales se incorpora en la presente como referencia; (E) -1- (2- (4- (I- (4-yodo-fenil) -2-fenil -but- 1-enil) -fenoxi) -etil) -pirrolidinona (idoxifeno) y otros compuestos descritos en la patente de Estados Unidos No. 4,839,155, incorporada en la presente como referencia; clomifeno y sus isómeros; y los compuestos descritos en las Patentes de Estados Unidos Nos. 4,696,949 y 5,491,173 y 6,576,645, cada una de las cuales se incorpora en la presente como referencia.

Los SERMs útiles en los métodos de la invención también incluyen, sin limitación, derivados de benzotiofeno tales como: [6-hidroxi-2- (4-hidroxifenil) -benzotiofen-3-il-] - [4- [2- (1-piperidinil) etoxi) fenil] -metanona (raloxifeno) y otros compuestos descritos en las Patentes de Estados Unidos No. 4,418,068 y 5,393,763, ambas se incorporan en la presente como referencia; LY353381; y LY335563 y otros compuestos descritos en WO 98/45286, WO 98/45287 y WO 98/45288; derivados de benzopirano tales como: (#) -7-pivaloiloxi-3- (4' ivaloiloxifenil) -4-metil-2- (4"- (2"piperidinoetoxi) fenil) -2H-benzopirano (EM 800/SCH 57050) y otros compuestos descritos en WO 96/26201; (2S) -3- (4-hidroxifenil) -4-metil-2- [4- [2- (1-piperidil) etoxi] fenil] -2H-cromen-7-ol (EM 652); derivados de naftaleno tales como: Cis-6-fenil-5- [4- (2-pirrolidin-l-il-etoxi) -fenil] -5,6,7, 8-tetrahidronaftalen-2-ol (lasofoxifeno/CP 336,156) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 5,552,412; 3 , 4-dihidro-2- (p-metoxifenil) -1-naftil-p- [2- (1-prrolidinil) etoxi] fenil cetona (trioxifeno/LY133314) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 4,230,862, incorporada en la presente como referencia; y compuestos de l-(4-alcoxi sustituido) bencil) naftaleno, tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos No. 6,509,356, incorporada en la presente como referencia; crómanos tales como 3 , 4-trans-2 , 2-dimetil-3-fenil-4- [4- (2- (2- (pirrolidin-l-il) etoxi) fenil] -7-metoxicromano (levormeloxifeno) y otros compuestos descritos en WO 97/25034, WO 97/25035, WO 97/25037 y WO 97/25038; y 1-(2- ( (4 - ( -metoxi-2 , 2 , dimetil-3 -fenil -croman- -il) -fenoxi) -etil) -pirrolidina (centcromano) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 3,822,287, incorporada en la presente como referencia.

Otros SERMs de la invención incluyen, sin limitación, los compuestos descritos en las Patentes de Estados Unidos Nos. 6,387,920, 6,743,815, 6,750,213, 6,869,969, 6,927,224, 7,045,540, 7,138,426, 7,151,196, y 7,157,604, cada una de las cuales se incorpora en la presente como referencia.

Los antiestrógenos no limitantes adicionales de la invención incluyen: 6a-cloro-16o¡-metil-pregn-4-eno-3 , 20-diona (ciómeteroña) ; 6-cloro-17-hidroxipregna-l , 4 , 6-trieno-3 , 20-diona (delmadinona) ; 1- [2- [4- [1- (4-metoxifenil) -2-nitro-2-feniletenil] fenoxi] etil] -pirrolidina (nitromifeno/CN-55 , 945-27); y 1- [2 - [p- (3 , 4 -dihidro-6 -metoxi -2 - fenil - 1-naftil) fenoxi] etil] pirrolidina (nafoxideno) .

Los antiestrógenos no limitantes adicionales de la invención incluyen Índoles tales como los descritos en J. Med. Chem., 33:2635-2640 (1990), J. Med. Chem. , 30:131-136 (1987), WO 93/10741, WO 95/17383, WO 93/23374 y las Patentes de Estados Unidos Nos. 6,503,938 y 6,069,153, ambas se incorporan en la presente como referencia.

Los antiestrógenos no limitantes adicionales de la invención incluyen 2- [3- (1-ciano-l-metil-etil) -5- (1H-1, 2 , 4-triazol-l-ilmetil) fenil] -2-metil-propanonitrilo (anastrozol) y otros compuestos descritos en el documento EP 0296749; 6-metilenandrosta-l,4-dieno-3, 17-diona (exemestano) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 4,808,616, incorporada en la presente como referencia; 4-[(4-cianofenil) - (1, 2, 4-triazol-l-il)metil]benzonitrilo (letrozol) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 5,473,078, incorporada en la presente como referencia; 1- [4' -dimetilaminoetoxi) fenil] -1- (3' -hidroxifenil) -2-fenilbut-1-eno (droloxifeno) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos 5,047,431, incorporada en la presente como referencia; 2a, 3a-epitio-5a-androstan-17p-ol (epitiostanol) ; 2a, 3a-epitio-5a-androstan-17 -il-l-metoxiciclopentiloxi (mepitiostano) ; 4- [ (2Z,4Z) -4- (4-hidroxifenil) hexa-2 , 4-dien-3-il] fenol (cicladieno) y otros compuestos descritos en las Patentes de Estados Unidos Nos. 2,464,203 y 2,465,505, ambas se incorporan en la presente como referencia; CI-680 descrito en Unlisted Drugs, 28(10): 169(0) (1976); CI-628 descrito en Unlisted Drugs, 26(7): 106(1) (1974); 13-etil- 17a-etinil - 17p-hidroxigona-4 , 9 , 1-trien-3-ona (R2323) ; difenol hidrocriseno y eritiro-MEA ambos descritos en Geynet, et al., Gynecol . Invest . 3(1): 2 -29 (1972) ; 1- [l-cloro-2 , 2-bis (4-metoxifenil) etenil] -4-metoxi-benceno (clorotrianiseno) descrito en el índice Merck, ed. 101, #2149; 1- [4- (2 -dietilaminoetoxi ) fenil] -1-fenil-2- (p-anisil) etanol (etamoxitrifetol) descrito en el índice Merck, ed. 101, #3668; y 2-p-clorofenil-l- [p- (2-dietilaminoetoxi) fenil] -1-p-toliletanol (triparanol) y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 2,914,562, incorporada en la presente como referencia.

Todavía otros antiestrógenos de la invención incluyen, sin limitación: ácido (2e) -3- (4- ( (le) -1, 2-difenilbut-l-enil) fenil) acrílico (GW5638) , GW7604 y otros compuestos descrito en Wilson et al . , Endocrinology, 138 (9) :3901-3911 (1997) y WO 95/10513; l-[4-(2-dietilaminoetoxi) fenil] -2- (4 -metoxifenil) -1-fenil-etanol (MER-25) , clorhidrato de N, N-dietil-2 - [4- (5-metoxi-2-fenil-3H-inden-l-il) fenoxi] etanamina (U-11,555A), clorhidrato de 1- [2- [4- (6-metoxi-2-fenil-3,4-dihidronaftalen-l-il) fenoxi] etil] pirrolidina (U-II, 100A) , ICI-46,669, 2- [4- [ (Z) -1, 2-difenilbut-l-enil] fenoxi] -?,?-dimetil-etanamina; ácido 2-hidroxipropan-l, 2 , 3-tricarboxílico (ICI-46,474) y otros compuestos descritos en Terenius et al . , Gynec . Invest., 3:96-107 (1972); ácido 2-hidroxi-6-naftalenpropiónico (ácido alenólico) ; [4- [ (4-acetiloxifenil) -ciclohexiliden-metil] fenil] acetato (ciclofenil/lCI-48213 ) ; [6-hidroxi-2- (4-hidroxifenil) benzotiofen-3-il] - [4- [2- (1-piperidil) etoxi] fenil] metanona (ceoxifeno) ; 4- [ (Z) -1- [4- (2-dimetilaminoetoxi) fenil] -2- (4-propan-2-ilfenil) but-1-enil]fenol (DP-TAT-59/miproxifeno) ; (1RS, 2RS) -4,4' -diacetoxi-5 , 5' -difluoro- (l-etil-2-metilen) di-m-fenilendiacetato (acefluranol) ; 6 -hidroxi -2 - (p-hidroxifenil ) -benzo (b) tien-3-il [2- (1-pirrolidinil) -etoxifenil] cetona (LY-117018); y [6-hidroxi-2- (4-hidroxi-fenil) benzo (b) tien-3-il] -[4- (2- (1-piperidinil) -etoxi) fenil] metanona (LY-156758) .

Todavía otros antiestrógenos de la invención incluyen, sin limitación: ligandos del receptor estrogénico no esteroideos tales como los descritos en las Patentes de Estados Unidos Nos. 5,681,835, 5,877,219, 6,207,716, 6,340,774 y 6,599,921, cada una de las cuales se incorpora en la presente como referencia; derivados de esteroides, tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos No. 4,659,516, incorporada en la presente como referencia; 7a- 11-aminoalquil-estratrienos tales como los descritos en WO 98/07740; estratrienos ll- -halógeno-7a-sustituidos, tales como los descritos en WO 99/33855; 17a-3^??-17ß-???-estratrienos tales como los descritos en la Solicitud de Patente de Estados Unidos No. 10/305,418, incorporada en la presente como referencia; 2-fenil-l- [4- (2-aminoetoxi) -bencil] -Índoles tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos No. 7.132,417, incorporada en la presente como referencia; 4-fluoroalquil-2H-benzopiranos tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos No. 6,844,336, incorporada en la presente como referencia; (4- (2- (2-aza-biciclo [2.2.1] hept-2-il) -etoxi) -fenil) - (6-hidroxi-2- (4-hidroxi-fenil) -benzo [b] tiofen-3-il) -metanona y otros benzotiofenos descritos en WO 95/10513 y Patente de Estados Unidos No. 4,133,814, incorporada en la presente como referencia; 2-fenil-l- [4- (2-aminoetoxi) -bencil] -índoles tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos No. 5,998,402, incorporada en la presente como referencia; 3- [4- (2-fenil-indol-l-ilmetil) fenil] -acrilaraidas y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 5,985,910, incorporada en la presente como referencia; 2-fenil-1- [4- (amino-l-il-alqu-l-inil) -bencil] -lH-indol-5-oles y otros compuestos descritos en la Patente de Estados Unidos No. 5,780,497 y 5,880,137, ambas se incorporan en la presente como referencia; esteroides tales como los descritos en las Patentes de Estados Unidos Nos. 6,455,517, 6,548,491, 6,747,018 y 7,041,839, cada una de las cuales se incorpora en la presente como referencia; compuestos de di-(3'-hidroxifenil) -alcano tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos No. 4,094,994, incorporada en la presente como referencia; derivados de fenol tales como los descritos en la Patente de Estados Unidos No. 4,751,240, incorporada en la presente como referencia; análogos de 2 , 3-diaril-2H-l-benzopirano tales como los descritos en Saeed et al . , J. Med. Chem., 33:3210-3216 (1990) y Sharma et al., J. Med. Chem. 33:3216-3229 (1990); y análogos de benzofurano y triarilfurano tales como los descritos en Durani et al., J. Med. Chem. 32:1700-1707 (1989).

Suj etos Un antiestrógeno (o sal del mismo) se puede coadministrar con un andrógeno o inhibidor de la aromatasa a mamíferos machos con niveles de testosterona bajos o bajos de lo normal para tratar la deficiencia de testosterona per se (es decir, tratar el hipogonadismo primario o secundario) o tratar uno o más trastornos relacionados con el bajo nivel de testosterona. El hipogonadismo primario y secundario describen cada uno y se definen parcialmente por bajos niveles de testosterona; sin embargo, los niveles de LH son elevados en el caso del hipogonadismo primario y son bajos o bajos de lo normal en el caso del hipogonadismo secundario. Los ejemplos de trastornos relacionados con niveles bajos de testosterona los cuales se pueden tratar por las terapias de combinación descritas en la presente, incluyen, sin limitación, todos los aspectos del síndrome metabólico (por ejemplo, colesterol triglicéridos elevados) , diabetes mellitus tipo 2, lipodistrofia u osteoporosis . Por consiguiente, en varios aspectos, la presente invención proporciona un método para tratar un trastorno asociado con niveles bajos de testosterona seleccionado del grupo que consiste de síndrome metabólico o un síntoma del mismo, diabetes mellitus tipo 2, lipodistrofia y osteoporosis co-administrando un antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable y un androgeno o inhibidor de la aromatasa a un macho en necesidad de tal tratamiento. El bajo nivel de testosterona se asocia con una serie de síntomas fisiológicos incluyendo, sin limitación, libido disminuida, ánimo deprimido, disfunción eréctil, disminución de la masa muscular, y la reducción de la función cognitiva. Por consiguiente, en un aspecto de la invención, machos con hipogonadismo (por ejemplo, hipogonadismo secundario) con uno o más de estos síntomas son co-administrados con un antiestrógeno, preferiblemente trans-clomifeno, y un andrógeno o inhibidor de la aromatasa para aliviar los síntomas. Una asociación entre el índice de masa corporal (BMI) y el hipogonadismo secundario se ha identificado recientemente y el BMI alto parece ser una etiología subyacente primaria en el trastorno, particularmente en machos relativamente jóvenes. Además, los machos con un BMI alto e hipogonadismo secundario están en riesgo aumentado de desarrollar el síndrome metabólico y finalmente diabetes mellitus tipo 2. Por consiguiente, los machos con hipogonadismo secundario con un BMI de al menos 25, al menos 30, al menos 35 o al menos 40 (por ejemplo, BMI de 25-30, 30-35, 35-40) pueden ser co-administrados con un andrógeno o inhibidor de la aromatasa y un antiestrógeno para tratar el hipogonadismo secundario y/o para tratar o prevenir un trastorno asociado tal como el síndrome metabólico o diabetes mellitus tipo 2.

En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un andrógeno y un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable y al menos un portador farmacéuticamente aceptable. También se proporciona un kit que comprende un andrógeno y un antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable que se puede formular en las mismas o en diferentes composiciones, junto con instrucciones para uso de acuerdo con cualquier método descrito en la presente .

En una modalidad separada, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de la aromatasa y un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable y al menos un portador farmacéuticamente aceptable. También se proporciona un kit que comprende un inhibidor de la aromatasa y un antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable que se puede formular en las mismas o en diferentes composiciones, junto con instrucciones para uso de acuerdo con cualquier método descrito en la presente.

Todas las referencias descritas en la presente se incorporan como referencia en su totalidad.

Los siguientes ejemplos están destinados a ser ilustrativos de la invención y no están destinados a limitar el alcance de la invención como se describe en las reivindicaciones adjuntas.

EJEMPLO 1 Efectos de Clomids en el Colesterol y Testosterona en Suero en Machos Babuinos Babuinos adultos, machos fueron administrados con 1.5 mg/kg de Clomid, Enclomid (trans-Clomid) o Zuclomid (cis-Clomid) durante 12 días consecutivos. Las. muestras analizadas fueron sueros tomados en el día del primer tratamiento antes de ser administrados con el artículo de prueba (día 0) , después de 12 días de tratamiento (día 12), y 7 días después del último tratamiento (final o lavado) . 1. Efectos en el Peso Corporal y LH, FSH, PRL en Suero y Testosterona Hubo aumentos significativos de la testosterona en suero total en el grupo que recibió Enclomid. Ver Tabla 1. No hubo diferencias entre los grupos en el período de valor basal o en el día 0. Tampoco hubo diferencias entre los tres grupos 7 días después del tratamiento (el período de lavado) . Sin embargo, Enclomid produjo niveles mayores de testosterona en comparación con Clomid y Zuclomid en el día 6 (p = 0.03 y p = 0.00002, respectivamente) y en comparación con Zuclomid en el día 12 (p = 0.047) . Zuclomid claramente no eleva la testosterona en suero total a algún grado. En comparación con los animales que recibieron Enclomid, los animales que recibieron Clomid exhibieron niveles de testosterona totales más variables en el día 6 y más tarde a juzgar por sus coeficientes de variaciones. Cuando nos fijamos en el transcurso del tiempo de los efectos (FIG. 3) , se determinó que sólo el Enclomid significativa y estadísticamente elevó la testosterona en suero total en los días 6 y 12 en comparación con los valores ya sea de valor basal o día 0. Además, el cese del tratamiento con Enclomid, resultó en una caída significativa en el nivel de testosterona en suero total entre el día 12 y día 18 (lavado) . Esto indica que Enclomid se depura fácilmente de la circulación consistente con la depuración metabólica vista para Enclomid en los seres humanos. Enclomid fue claramente mejor y más consistente que el Clomid por sí mismo y el Zuclomid fue inefectivo.

Tabla 1- Niveles de Testosterona en Suero (ng/dl) valor basal 0 días 6 días 12 días Lavado Grupo ID 12/3/01 12/7/01 12/13/01 12/20/01 12/26/01 7500 79.01 76.15 940.97 891.5 150.9 CLO 9012 97.55 305.24 585.92 555.6 316.3 9097 158.06 102.94 151.12 318.9 143.6 media 111.5 161.4 559.3 588.7 203.6 SD 41.3 125.2 395.6 287.7 97.7 7223 64.57 74.96 1223.8 633.6 307.2 ENCLO 8021 166.86 133.59 1128.2 1466 399.2 8369 170.45 106.47 1081.1 1166 271 media 134.0 105.0 1144.4 1088.5 325.8 SD 60.1 29.3 72.7 421.6 66.1 7438 124.84 210.4 137.51 314.5 359.7 ZUCLO 8292 104.66 67.37 169.98 406.1 860.5 10098 282.29 904.82 227.95 353.0 274.1 media 170.6 394.2 178.5 357.9 498.1 j I SD I 97.3 I 448.0 | 45.8 | 46.0 | 316.8 A OVA p = 0.61 p = 0.43 p = 0.007 p = 0.57 p = 0.256 K-W p = 0.56 p = 0.84 p = 0.051 p = 0.079 p = 0.252 No hubo cambios de la LH o FSH en suero. La relación de testosterona en suero total a LH siguió el mismo patrón que la testosterona en suero total, sugiriendo una falta de dependencia (datos no mostrados) . Tampoco hubo cambios en el peso corporal durante el estudio de 12 días . Hubo una disminución de prolactina (PRL) en suero durante el estudio en el grupo que recibió Enclomid, sugiriendo un efecto de antiestrógeno que se ha descrito en parte (Ben- Jonathan and Hnasko, 2001) y esperado sobre la base del hecho que a medida que los hombres envejecen, la testosterona disminuye y la prolactina aumenta (Feldman et al., 2002). 2. Efectos en los Niveles de Colesterol El tratamiento con Enclomid tendió a disminuir el colesterol en suero y con Zuclomid tendió a aumentar el mismo parámetro. El análisis preliminar indicó que los cambios en los niveles de colesterol no fueron estadísticamente significativos y que los cambios estuvieron dentro del rango normal. Debido a la tendencia observada de los dos isómeros para demostrar efectos opuestos en los niveles de colesterol en un corto período de tiempo, se realizó un análisis adicional .

El análisis detallado indicó que Enclomid resultó en una disminución del 8% de los niveles de colesterol en suero. Por el contrario, el tratamiento con Zuclomid resultó en un aumento del 22% de los niveles de colesterol en suero. El tratamiento con Clomid resultó en un ligero aumento de los niveles de colesterol en suero. El efecto opuesto del Enclomid y Zuclomid en los niveles de colesterol en suero no es inesperado dado que los isómeros tienen, alternativamente, actividad agonista o antagonista estrogénica. Estos resultados indican que el Enclomid se puede utilizar para el tratamiento de pacientes con altos niveles de colesterol. Estos resultados también indican que el Enclomid puede ser más benigno que el Zuclomid en relación con el colesterol en suero si se utiliza crónicamente para aumentar los niveles de testosterona . 3. Efectos en los Parámetros de la Química Clínica Los valores medios para cada parámetro no difirieron entre los tres grupos para cualquier parámetro de prueba al inicio del estudio como se determinó por A OVA o por la prueba de Kruskal-Wallis . Todos los grupos exhibieron valores normales en cada parámetro excepto para (1) sodio en suero; un parámetro calculado relacionado, abertura aniónica, que fueron bajos para todos los nueve babuinos durante todo el ensayo; (2) glucosa en suero; y (3) BU que fueron altos en el día O para el grupo que sería tratado con Enclomid. En el día 12 del tratamiento y 7 días después del tratamiento (lavado) , no hubo diferencias entre los grupos para ningún parámetro excepto la abertura aniónica que mostró que los grupos de Clomid y Zuclomid tenían valores menores que el grupo de Enclomid. Los valores de sodio en suero y abertura aniónica parecen ser anomalías asociadas con este grupo de babuinos .

No hubo efectos sustantivos en la población de glóbulos rojos con el Enclomid y Zuclomid y en los hematocritos con el Zuclomid. Todos los compuestos disminuyeron la concentración media de hemoglobina celular (MCHC) , ya sea en el día 0 o en el criterio de valoración. Sin cambio en la hemoglobina celular media (MCH) y un aumento en el volumen celular medio (MCV) , la disminución de MCHC es predecible. Aunque podría esperarse que la testosterona eleve los hematocritos, solamente el tratamiento con Zuclomid, el cual no aumenta la testosterona en suero total, demostró una diferencia estadística. Claramente, los hombres en un ensayo clínico que utiliza Zuclomid deben ser monitoreados para las características de su población de glóbulos rojos. Se predice que el Enclomid tiene menos de un efecto.

Parece que hay un efecto claro del tratamiento con Enclomid de 12 días en las plaquetas, aunque los valores encontrados se mantuvieron dentro del rango normal. Una cosa a considerar aquí es el dimorfismo sexual en los conteos de plaquetas entre los babuinos machos y hembras (279 para los machos contra 348 para las hembras) . Esto es probable que sea debido a las hormonas . Puesto que el grupo de Enclomid demostró aumento de la testosterona, la disminución del conteo de plaquetas podría ser secundaria al cambio de la testosterona en este grupo. Además, el tratamiento con Enclomid impulsó el conteo de plaquetas a su nivel normal en machos desde un nivel de día 0 que fue el extremo alto del rango normal para este grupo. El Enclomid no necesariamente predeciría un efecto perjudicial en las plaquetas.

Todos los Clomids analizados tiene efectos en la población de glóbulos blancos (WBC) , el más notable fue el de Enclomid en la elevación de los conteos de linfocitos y eosinófilos. Los efectos no son tan directos como parecen ser. Parece existir un fuerte efecto del Enclonud en la disminución del porcentaje de granulocitos en la sangre. Los efectos son muy fuertes después del período de lavado de 7 días cuando se disminuyen los valores por debajo del rango normal. (Este transcurso de tiempo podría reflejar el tiempo relativamente largo necesario para afectar el cambio de la población de WBC) . Hay poco dimorfismo sexual en los babuinos con respecto a las poblaciones de glóbulos blancos, de modo que es más probable que los efectos sean debido al compuesto en sí que a los cambios en la testosterona. Sin embargo, cuando nos fijamos en el conteo calculado de granulocitos utilizando el conteo de WBC, no encontramos diferencias en el conteo de granulocitos debido a cualquier compuesto. Al mismo tiempo, es la historia de los linfocitos la que es más interesante. Tanto el conteo como el porcentaje de linfocitos en el aumento de la población con el tratamiento de Enclomid. Mientras que los valores medios del porcentaje de linfocitos permanezcan en el rango normal, dada la tendencia de un aumento en el conteo de WBC, el efecto neto es un aumento en el conteo de linfocitos con el Enclomid. Este resultado de eosinófilos es análogo. Hay una clara implicación en el tratamiento de hombres que tienen bajos linfocitos, tal como los hombres que son VIH-positivos . Puesto que es improbable que el Enclomid disminuya los linfocitos con base en este resultado, un caso podría ser usarlo en la población de hombres con SIDA. Estos individuos son a menudo tratados con agentes que están destinados a elevar la testosterona debido a los efectos de la enfermedad de emaciación. La baja toxicidad hepática y renal y efectos favorables en el colesterol y lípidos también son atributos altamente favorecidos para cualquier medicamento destinado al uso de los hombres con VIH-positivo que ya están comprometidos por su enfermedad.

El aumento de la glucosa en suero con Clomid o Zuclomid estuvo dentro del rango normal. En el caso del Enclomid, donde los valores medios de glucosa en suero fueron altos en el día 0, no hubo aumentos con el tratamiento. No hubo evidencia de que el Enclomid tendría un efecto perjudicial en la glucosa en sangre.

No son evidentes los efectos claramente adversos sobre la función hepática como se juzga por las enzimas AST y ALT. La tendencia de estos valores fue una disminución con el tratamiento. Un aumento en el nivel de enzimas en el suero indicaría daño hepático. La ALT/SGPT estuvo fuera del rango bajo al final del estudio para el grupo de Clomid aunque las diferencias durante el período de tratamiento no fueron estadísticamente significativas. Los cambios con Enclomid y Zuclomid estuvieron dentro del rango normal . La AST se deprimió en el embarazo; por lo tanto la acción de un agonista estrogénico tal como Zuclomid en la disminución del nivel de AST marginal podía ser racionalizada. La fosfatasa alcalina (ALP) también se encontró en el hígado y se elevó en diversos estados de la enfermedad. La disminución de ALP aduce adicionalmente contra el daño hepático. No hubo cambios en la albúmina en suero, también un producto hepático. Una fuerte represión de albúmina en suero durante un período de tiempo prolongado podría contribuir a niveles de hormonas esteroides en suero libres en seres humanos, aunque un papel más importante se juega por la globulina fijadora de hormonas sexuales. Como una línea de fondo, ninguno de los compuestos podía ser vinculado al daño hepático sobre la base de los parámetros sometidos a ensayo.

La actividad osteoblástica y enfermedades de los huesos son . acompañadas por altos valores de ALP en suero. La ALP no fue elevada después del tratamiento con Zuclomid y se disminuyó de valor después del tratamiento con Enclomid. Las tendencias predecirían un resultado más benigno para el uso de Enclomid en comparación con Zuclomid.

Aunque BUN y BUN/creatinina fueron alterados durante el estudio en los grupos de Clomid y Enclomid, la falta de un cambio definitivo en la creatinina argumenta en contra de la disfunción renal. Una pérdida de la capacidad de filtración glomerular resultaría en un aumento de BUN. La disminución de BUN ocurre en los seres humanos debido a la mala alimentación (no probable en un entorno controlado) , o alta ingesta de líquidos (presumiblemente acompañada de edema) . También, a pesar de un aumento de la testosterona en suero total entre el día 0 y el día 12 con Enclomid, no hubo diferencias entre los valores de creatinina en suero, argumentando en contra de un aumento de masa muscular durante este corto intervalo de tiempo.

Los niveles de sodio en suero fueron inferiores a los valores de referencia para todos los animales durante todo el estudio. El dióxido de carbono en suero fue mayor que los valores de referencia en el día 12 para los grupos de Clomid y Zuclomid. La abertura aniónica en suero fue menor para todos los animales durante todo el estudio, en paralelo con los resultados de sodio. El Enclomid elevó este parámetro hacia . los valores normales. Los desequilibrios de electrolitos detectados en los animales de prueba durante todos los períodos de tratamiento siguen siendo difíciles de alcanzar, pero podrían ser parte del mismo fenómeno de alteración de fluido sugerido por los resultados de BUN.

Los resultados anteriores indican que el Enclomid es más efectivo que el Clomid o Zuclomid en el aumento de la testosterona en suero total . El Zuclomid no es claramente efectivo y esta deficiencia limita cualquier uso del Clomid para el hipogonadismo, particularmente puesto que el Zuclomid componente de Clomid predominaría en la circulación durante el tiempo dada su vida media más larga.

El Enclomid pareció ser relativamente benigno en todos los aspectos en comparación con el Zuclomid y, a menudo, incluso el Clomid. Esto es particularmente cierto cuando se tiene en consideración la tendencia del Enclomid para disminuir el colesterol, y las enzimas hepáticas como lo opuesto a la tendencia del Zuclomid para elevar los mismos parámetros. La tendencia sorprendente del Enclomid para elevar el conteo de linfocitos puede ser útil para los hombres con SIDA, si se puede mostrar que la subpoblación de CD4+ de linfocitos no se disminuye o se aumenta.

EJEMPLO 2 Método para Aumentar el Nivel de Testosterona en Hombres que Usan Trans-clomifeno y Mezclas de Trans-clomifeno y Cis- clomifeno en Relaciones Mayores Que 1 Antes de la administración del trans-clomifeno, las muestras de sangre se tomaron de sujetos masculinos y los niveles de testosterona se midieron utilizando las metodologías descritas, por ejemplo, en Matsumoto, et al. Clin. Endocrinol. etab. 56; 720 (1983) (incorporado en la presente como referencia) . La globulina fijadora de hormonas sexuales (SHBG) , tanto libre como unida a la testosterona, también se puede medir como se describe, por ejemplo, en Tenover et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. 65:1118 (1987) que describen la medición de SHBG tanto por un análisis de saturación de [3H] dihidrotestosterona como por radioinmunoensayo. Los niveles de testosterona no unida a SHBG (testosterona biodisponible) también se midieron, por ejemplo, de acuerdo con Tenover et al. J. Clin. Endocrinol and Metab. 65:1118 (1987). Ver también Soderguard et al. J. Steroid Biochem 16:801 (1982) incorporado en la presente como referencia .

Los pacientes son administrados diariamente con dosificaciones de 1.5 mg/kg de clomifeno, en donde la relación de trans-clomifeno a cis-clomifeno es mayor que 1. Los pacientes son monitoreados para los niveles de testosterona de modo que la cantidad de dosificación y la frecuencia de dosificación se pueden ajustar para lograr los niveles terapéuticos de testosterona en el paciente.

EJEMPLO 3 Comparación de Androxal™ con Androgel® Un estudio de provocación controlado con placebo se realizó en el Centro de Investigación Clínica de Advanced Biological Research, Inc. (ABR) en Hackensack, Nueva Jersey para comparar el Androxal™ administrado oralmente (trans-clomifeno) con el Androgel® en hombres con hipogonadismo . El Androgel® (Solvay Pharmaceuticals , Inc.) consiste de una crema que administra testosterona exógena en una matriz transdérmica .

El estudio enroló a 62 hombres con hipogonadismo con niveles de testosterona menores que 300 ng/dl (normal 298-1034 ng/dl) que fueron aleatorizados en 6 grupos diferentes, tres dosis de Androxal™ (12.5 mg, 25 mg y 50 mg) , placebo y dosis tanto altas como bajas de AndroGel®. La mitad de los hombres en cada uno de los grupos de Androxal™ y placebo fueron aleatorizados en cohortes que se sometieron a sesiones en la clínica en los días 1 y 14 para determinar los parámetros farmacocinéticos del Androxal™, así como los cambios cíclicos en la testosterona . El placebo y dosis de Androxal™ se administraron en una forma de doble ciego. La crema Androgel® se administró en una forma abierta. La mitad de los pacientes con Androgel® se sometió a sesiones en la clínica similares a los otros pacientes en el estudio. Después de la exposición de dos semanas al fármaco los pacientes fueron seguidos durante unos siete a diez días adicionales para determinar el estado de sus niveles de testosterona. No hubo efectos secundarios observados ya sea en los grupos de Androxal™ o Androgel® del estudio que fueron diferentes que el placebo. 1. Efectos en los Niveles de Testosterona Todas las dosis de Androxal™ o Androgel® produjeron cambios estadísticamente significativos en la testosterona desde los niveles de testosterona básales (FIG. 5) . Las dosis bajas, medias y altas de Androxal™ lograron aumentos medios de 169, 247 y 294 ng/dl, respectivamente, mientras que las de Androgel® 5G, la dosis más baja aprobada, y Androgel® 10G, la dosis más alta aprobada, produjeron cambios desde el valor basal que fueron de 212 y 363 ng/dl. Estos valores fueron estadísticamente indistinguibles de los cambios logrados con Androxal™. Esta incapacidad para mostrar las diferencias entre el Androxal™ y Androgel® parece resultar de los resultados altamente variables encontrados cuando se utiliza Androgel®. Por ejemplo la dosis de 50 mg de Androxal™ elevó la testosterona total media a 589 ± 172 ng/dl después de 15 días, un coeficiente de variación (CV) de 29% y similar al del grupo de placebo (36%) . Por otra parte, el Androgel® 5G y 10G produjeron valores medios de testosterona total 473 ± 289 ng/dl y 608 ± 323 ng/dl, CV de 61% y 53% respectivamente.

Después de 14 días de terapia con Androxal™ todas las dosis estuvieron asociadas con un patrón diurno de testosterona total similar al grupo de placebo, es decir, un pico diurno, una depresión al medio día y una elevación durante la noche. Sin estar ligado por la teoría, este patrón puede ser debido al modo de acción del Androxal™, que parece ser mediado a través de efectos en el eje hipotálamo-hipófisis como se muestra a continuación. El patrón diurno para los hombres en Androgel® fue casi plano. Sin embargo, los picos de testosterona total para Androgel® estuvieron asociados con la dosificación y a menudo exceden el alto nivel normal de 1,034 ng/dl. Ciertos individuos en Androgel® 10G fueron capaces de lograr niveles pico de testosterona total de más de 2500 ng/dl.

Curiosamente, el nivel de testosterona en suero total en el período de seguimiento (es decir, 7-10 días después del cese del tratamiento oral diario) permaneció inesperadamente alto después del tratamiento con Androxal™.

Además, los niveles de testosterona en suero totales fueron significativamente mayores a la dosis más alta de Androxal™ en comparación con la alta dosis de AndroGel® 1% (p = 0.017, prueba t) . 2. Efectos en los Niveles de LH y FSH El tratamiento con Androxal™ produjo un aumento estadísticamente significativo de los niveles de LH en suero en los sujetos masculinos con hipogonadismo (FIG. 6) . Como en el caso de la testosterona en suero total hubo una continuación inesperada del nivel de LH en suero en el período de seguimiento (es decir, 7-10 días después del cese del tratamiento oral diario) donde esos niveles permanecieron altos para las tres dosis de Androxal™. En comparación, el tratamiento con AndroGel® disminuyó inicialmente la LH y después del cese hubo un aparente rebote hacia los niveles del pre-tratamiento .

El tratamiento con Androxal™ también produjo un aumento estadísticamente en los niveles en suero de FSH en los sujetos masculinos con hipogonadismo (FIG 7) . El patrón de aumento de la FSH es similar al visto en el caso de la LH, es decir, todas las dosis de Androxal™ impulsaron la FSH en suero que permanece alta durante el periodo de seguimiento, mientras que el AndroGel® suprime el nivel de FSH en suero y el cese del tratamiento permite que la FSH en suero rebote hacia concentraciones más similares a los niveles de pre-tratamiento. 3. Efectos en Otros Parámetros de Química Clínica También se midió el efecto en los niveles de dihidroxitestosterona en suero (DHT) . Los hombres en Androxal™ experimentaron un cambio favorable en su DHT a la testosterona total. Por ejemplo, los hombres en la dosis de 50 mg de Androxal™ experimentaron una relación de DHT/TT de 0.83 en comparación con la relación del grupo de placebo de 1.07. Por el contrario, la relación de DHT/TT para cualquiera de los grupos de Androgel® fue> 1.5. Los resultados indican que los hombres en Androgel® fueron ganando DHT más rápido que la testosterona total. Así, los niveles normales de DHT fueron interrumpidos con relación a la testosterona en los hombres en la terapia con Androgel®.

Los resultados de los parámetros de química clínica también indicaron, de forma inesperada, que los hombres en Androxal™ experimentaron una reducción de los triglicéridos no dependiente de la dosis. La reducción de los triglicéridos promedió una disminución de 19.1% después de dos semanas de terapia. Esta se comparó con una reducción de 5.9% para el grupo de placebo y aumentos de 0.3% y 22% para el Androgel® 5G y 10G, respectivamente. 4. Discusión Con base en este estudio se infiere un número de ventajas potenciales para el Androxal™ como una terapia potencial. El Androxal™ parece elevar la testosterona total en el rango normal de una manera altamente consistente sin picos anormalmente altos de testosterona en suero. Además, el uso de transclomifeno para tratar a hombres que sufren hipogonadismo secundario ofrece un nuevo procedimiento que potencialmente podría compensar uno de los principales efectos secundarios de las terapias exógenas tal como el Androgel®. Las terapias exógenas proporcionan retroalimentación negativa cerrando así la producción de FSH y LH. La FSH es una hormona reproductiva esencial y en los hombres estimula la espermatogénesis. La exposición a largo plazo a la testosterona exógena, como un resultado de sus efectos en la producción de FSH, causa una reducción de la síntesis de los espermatozoides, conduciendo al potencial de infertilidad temporal debido al bajo conteo de espermatozoides y, por lo tanto, una contracción resultante del testículo, puesto que el volumen de los testículos está relacionado con el nivel de la espermatogénesis dentro de los túbulos seminíferus. El aumento de los niveles de FSH también indica que el Androxal™ se puede usar para tratar la infertilidad en hombres, incluyendo los hombres con hipogonadismo. Además, los efectos extendidos de Androxal™ en la testosterona en suero, los niveles de FSH y LH indican que el Androxal™ se puede administrar con programación o dosificaciones alteradas, permitiendo quizás incluso el tratamiento no diario o episódico.

EJEMPLO 4 Comparación de Tres dosis de Androxal con Androgel Se realizó un ensayo clínico para comparar los efectos de tres dosis de trans-clomifeno (administradas oralmente una vez per diem) con los efectos de Androgel® utilizado según las instrucciones del fabricante. Sesenta hombres con niveles de testosterona que no exceden 350 ng/dl se enrolaron en el estudio y se aleatorizaron a uno de cuatro grupos paralelos: (i) 6.25 mg de Androxal, (ii) 12.5 mg de Androxal, (iii) 25 mg de Androxal o (iv) Androgel. La edad promedio de los hombres en el estudio fue de 53.1 (10.1) y su índice de masa corporal (BMI) promedio fue de 31.8 (6.1). Los hombres fueron dosificados durante 6 semanas y luego seguidos durante unos 7 días adicionales después del cese del tratamiento. Los sujetos en todos los grupos visitaron la clínica cada 2 semanas para las evaluaciones. Se hicieron evaluaciones de veinticuatro horas en el valor basal antes de comenzar la dosificación y después de 6 semanas de tratamiento, en este punto la testosterona y LH fueron evaluadas cada hora. Los resultados se proporcionan continuación en la Tabla 2: Tabla 2 Todos los grupos de Androxal exhibieron testosterona diurna mejorada en comparación con el valor basal después de los siete días de seguimiento y hubo una respuesta clara a la dosis en los grupos de Androxal. El efecto de legado observado con Androxal una semana después del cese del tratamiento fue bastante fuerte alcanzando diferencias de tratamiento estadísticamente significativas para las dosis altas y medias de Androxal en comparación con Androgel (p < 0.0001 para la dosis de 25 mg y p = 0.003 para la dosis de 12.5 mg) . La comparación con la dosis de 6.25 mg fue casi significativa, p = 0.056. Siete días después del cese del tratamiento, el fármaco ya no debe estar a bordo y la mejora continua puede relacionarse con un restablecimiento del eje hipotálamo-hipófisis-testículos . La Figura 8 exhibe la testosterona media total (TT) observada durante el transcurso del estudio, incluyendo el seguimiento de una semana después de que se ha detenido la dosificación.

El grupo de gel tópico exhibió niveles de testosterona diurna numéricamente peores que los valores básales, presumiblemente debido a los efectos supresores de la testosterona exógena en la función de la pituitaria. Como en los estudios anteriores, la testosterona tópica suprimió significativamente la FSH y LH, en muchos casos a niveles de castración.

EJEMPLO 5 Comparación de Androxal con Testim Se realizó un ensayo clínico controlado con placebo para comparar los efectos del trans-clomifeno (administrado oralmente una vez per diem) con los efectos de Testim® (gel tópico de testosterona al 1%, 5 g aplicados diariamente a una dosis de 50 mg de testosterona) en hombres con hipogonadismo secundario con disfunción moderada a severa después de un periodo de dosificación de tres meses. Para cumplir con los criterios del enrolamiento, se requirió a los hombres a exhibir una testosterona diurna de < 250 ng/dl en dos evaluaciones separadas durante al menos 10 días y deben haber sido vírgenes al tratamiento con testosterona. Más de 900 hombres fueron seleccionados para conseguir un total de 108 hombres que cumplieron con todos los criterios y fueron enrolados en el estudio. Todos los 108 hombres enrolados en el estudio cumplieron el requerimiento de al menos una dosis y una visita en la cual se podrían evaluar las medidas de eficacia. Los sujetos fueron aleatorizados en cuatro grupos: (i) placebo; (ii) 12.5 mg de Androxal; (iii) 25 mg de Androxal; y (iv) Testim. No hubo diferencia estadística entre los grupos en la testosterona en valor basal . Al final del período de dosificación de tres meses se observó un aumento estadísticamente significativo en los niveles medianos de testosterona diurna finales en todos los tres grupos activos. Ver Tabla 3, a continuación.

Tabla 3 : Datos Medianos de Testosterona Diurna No hubo diferencia estadística observada entre los grupos activos; todos los tres grupos activos fueron altamente de manera estadística diferentes que el grupo del placebo. Las medianas se utilizaron para el análisis estadístico debido a la distribución no estándar del grupo de Testim. Dos de los 28 hombres en el grupo de Testim excedieron el nivel máximo normal de testosterona (1100 ng/dl) , mientras que ningún hombre en los grupos de Androxal excedió el nivel máximo normal. En los grupos de Androxal 69.9% de los hombres estuvieron en el rango normal de los niveles de testosterona diurna (300-1100 ng/dl) contra el 57.1% de los hombres en el grupo de Testim.

Los conteos de espermatozoides fueron evaluados en el valor basal y después que se completó la dosificación. La espermatogénesis es aproximadamente un ciclo de 64 días y se esperaría la detección de cambios tempranos después de 3 meses de tratamiento. En el valor basal, los valores medianos de todos los cuatro brazos estuvieron por encima del nivel menor generalmente aceptado de conteos de espermatozoides de hombres normales (20 millones de espermatozoides por mi) . Al final del período de dosificación de tres meses no hubo cambios estadísticamente significativos en los conteos de espermatozoides de los dos grupos de Androxal y el grupo de placebo. El grupo de Testim exhibió una reducción estadísticamente significativa (p = 0.003) de los conteos medianos de espermatozoides a 6.2 millones de espermatozoides/ml, muy por debajo del rango normal y en un rango definido como oligospermia . El conteo mediano de espermatozoides de los hombres en los grupos de Androxal combinados fue 93.8 millones de espermatozoides/ml (valor p = 0.001 en comparación con Testim). Los hombres en el grupo de placebo exhibieron un conteo mediano de espermatozoides de 110.8 millones de espermatozoides/ml y también fue significativamente diferente de Testim (p = 0.005) . El fármaco fue generalmente bien tolerado a ambas dosis en comparación con el placebo. No ocurrieron efectos adversos serios relacionados con el fármaco que conducen a la interrupción.

EJEMPLO 6 Comparación de los Efectos de Androxal con Testim en la Espermatogénesis Se realizó un ensayo clínico para determinar los efectos del trans-clomifeno (administrado oralmente una vez per diem) en la espermatogénesis cuando se administra durante 6 meses a hombres con hipogonadismo secundario (testosterona < 300 ng di; LH < 15 IU/ml) que habían sido previamente tratados por entre 6 meses y 2 años con testosterona exógena tópica. La edad media de los sujetos fue de 46 años y el peso corporal medio fue de 233 libras (105.7 g) . 13 sujetos fueron aleatorizados en dos grupos de tratamiento que recibieron (i) Androxal 12.5 mg/día, o (ii) Testim aplicado diariamente de acuerdo con las sugerencias del fabricante, con 11 sujetos que terminaron el estudio. Se requirió a los sujetos que interrumpieran la testosterona exógena tópica durante al menos 30 días antes de recibir el medicamento del estudio. Los efectos del tratamiento en los parámetros de espermatozoides asociados con la fertilidad así como en los niveles de LH y FSH fueron evaluados después de 3 y 6 meses de terapia y un mes después del cese del tratamiento. El análisis del semen incluye el volumen de semen, conteo total de espermatozoides, concentración de espermatozoides, porcentaje de motilidad y porcentaje de morfología normal. Hubo 6 visitas al laboratorio, incluyendo una visita de selección (VI) , de valor basal (V2) y de post-primera dosis a 1 mes (V3) , 3 meses (V4) y 6 meses (V5) , así como una visita de seguimiento post-terapia al mes (V6) .

Después que los sujetos se lavaron de su tratamiento con testosterona anterior durante un período de tres semanas, los sujetos del estudio mostraron niveles medios de testosterona total diurna de 165 +/- 66 ng/dl . Después de 3 meses de tratamiento hubo una elevación estadísticamente significativa de la testosterona en suero media en hombres que recibieron Androxal y Testim que se mantuvo durante otros 3 meses con el tratamiento continuado. El Androxal también aumentó significativamente tanto la LH como FSH, mientras que los hombres en Testim tuvieron niveles significativamente menores de estas gonadotropinas.

El Androxal consistentemente elevó los conteos de espermatozoides en 7 de cada 7 hombres en Androxal a los 3 meses y 6 de cada 6 hombres en Androxal a los 6 meses con un rango de concentraciones de espermatozoides desde 75-334 millones/ml, dentro del rango normal, y las concentraciones de espermatozoides se mantuvieron dentro del rango normal en el seguimiento. Testim, por otra parte, resultó en conteos de espermatozoides por debajo de 20 millones (el nivel por debajo del cual un hombre sería considerado infértil) para todos los 5 hombres a los 3 meses. A los 6 meses, 3 de los 5 hombres tratados con Testim se mantuvieron por debajo del nivel de 20 millones. Tres de los cinco sujetos de Testim tuvieron conteos de espermatozoides de esencialmente cero para todas las visitas. La diferencia del conteo de espermatozoides fue significativa entre los grupos de Androxal y Testim en todos los puntos de tiempo.

El uso de Testim resultó en una concentración de espermatozoides móviles significativamente menor (concentración de espermatozoides X motilidad de espermatozoides) que el Androxal. El Androxal tendió a aumentar la concentración de espermatozoides móviles entre V2 y V4. El uso de Testim también resultó en conteos de espermatozoides móviles significativamente menores que el Androxal .

Los sujetos tratados con Androxal en comparación con Testim demostraron un aumento de la concentración de espermatozoides con diferencias significativas observadas en las Visitas 4, 5 y 6. No se observó tal aumento en el grupo de Testim. Además, los espermatozoides obtenidos de los sujetos en el grupo de Androxal fueron más morfológicamente normales que los espermatozoides obtenidos de los sujetos en el grupo de Testim y fueron significativamente diferentes en la Visita 5.

El uso de Testim eleva los niveles en suero de la testosterona total en rangos normales en hombres con hipogonadismo secundario y también produjo una retroalimentación negativa evidente en el eje de hipotálamo/hipófisis resultando en la producción de LH y FSH disminuidas. La disminución observada de los niveles de LH y FSH en sangre parece resultar en azoospermia u oligospermia las cuales conducirían a tasas de fertilidad disminuidas. El uso de Androxal también mantiene los niveles de testosterona totales en los rangos normales y también aumenta los niveles de LH y FSH resultando en la producción de espermatozoides renovada o continuada. Ambos fármacos fueron, bien tolerados por todos los sujetos durante los 6 meses de terapia con el fármaco .

Claims (29)

REIVINDICACIONES

1. Un método para elevar los niveles de testosterona en un mamífero macho en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende co-administrar al mamífero macho una cantidad efectiva de un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable y un agente terapéutico adicional seleccionado de un andrógeno y un inhibidor de la aromatasa .

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable y el agente terapéutico adicional se administran secuencialmente .

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable y el agente terapéutico adicional se administran simultáneamente.

4. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable y el agente terapéutico adicional se administran en formulaciones separadas.

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el agente terapéutico adicional es un andrógeno .

6. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el andrógeno es testosterona.

7. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el agente terapéutico adicional es un inhibidor de la aromatasa.

8. El método de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque el antiestrógeno es trans-clomifeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

9. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el trans-clomifeno se administra a una dosificación de 5-100 mg.

10. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque el trans-clomifeno se administra a una dosificación de 12.5 mg, 25 mg o 50 mg.

11. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el trans-clomifeno se administra diariamente .

12. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el trans-clomifeno se administra intermitentemente, tal como cada dos días, semanal, quincenal o mensual .

13. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el hombre es un hombre con hipogonadismo secundario.

14. Un método para tratar el hipogonadismo secundario o un síntoma del mismo en un mamífero macho en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende coadministrar al mamífero macho un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable y una cantidad efectiva de un agente terapéutico adicional seleccionado de un andrógeno y un inhibidor de la aromatasa.

15. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el síntoma a ser tratado es la reducción de la masa muscular.

16. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el síntoma a ser tratado es la limitación de la capacidad de rendimiento del cuerpo.

17. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el síntoma a ser tratado es la reducción de la densidad ósea.

18. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el síntoma a ser tratado es la reducción de la libido.

19. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el síntoma a ser tratado es la reducción de la potencia.

20. Un método para tratar un trastorno relacionado con el hipogonadismo secundario en un mamífero macho en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende co-administrar al mamífero macho un antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable y una cantidad efectiva de un agente terapéutico adicional seleccionado de un andrógeno y un inhibidor de la aromatasa, el trastorno se selecciona del grupo que consiste de: síndrome metabólico, diabetes tipo 2, osteoporosis, e infertilidad.

21. Un método para mantener la fertilidad en un ser humano masculino sometido a terapia de reemplazo de andrógenos, caracterizado porque comprende co-administrar al hombre de una cantidad efectiva de un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable con el andrógeno.

22. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la FSH y/o LH se mantienen a niveles de entre 3 y 15 U/L durante una porción sustancial del período de co-administración.

23. El método de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque el antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable se administra diariamente durante al menos siete días consecutivos después del cual el antiestrógeno se administra intermitentemente, tal como cada dos días, cada tercer día, semanal, quincenal o mensual.

24. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un andrógeno y un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, el andrógeno está presente en una cantidad efectiva para elevar la testosterona en un mamífero macho y el antiestrógeno está presente en una cantidad efectiva para elevar los niveles de gonadotropina en el mamífero macho con relación a los niveles de gonadotropina medidos cuando el andrógenp se administra en la ausencia del antiestrógeno .

25. Un kit, caracterizado porque comprende un andrógeno y un antiestrógeno o sal del mismo farmacéuticamente aceptable e instrucciones para uso de acuerdo con cualquier método descrito en la presente.

26. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un inhibidor de la aromatasa y un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable .

27. Un kit, caracterizado porque comprende un inhibidor de la aromatasa y un antiestrógeno o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable e instrucciones para uso de acuerdo con cualquier método descrito en la presente.

28. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-27, caracterizado porque el mamífero macho es un ser humano masculino.

29. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-28, caracterizado porque el antiestrógeno o sal del mismo es una sal de citrato.