MX2014009152A - Detergente liquido para lavar vajillas estable al almacenamiento que contiene proteasa y amilasa. - Google Patents

Abstract

El objetivo de la invención es mejorar la estabilidad durante el almacenamiento de un detergente líquido para lavar vajillas que comprende una proteasa y una amilasa. Dicho objetivo se logra mediante el uso de una proteasa que tiene una secuencia de aminoácidos que por lo menos es 70% idéntica a la secuencia de aminoácidos especificada en la SEC ID NO: 1 por toda la longitud de la secuencia de aminoácidos y tiene la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con por lo menos dos sustituciones de aminoácidos adicionales seleccionadas del grupo que comprende S3T, V41, V193M y V1991 en el conteo conforme a SEC ID NO: 1.

Description

DETERGENTE LÍQUIDO PARA LAVAR VAJILLAS ESTABLE AL ALMACENAMIENTO QUE CONTIENE PROTEASA Y AMILASA La invención está se refiere al campo de los detergentes para lavar vajillas líquidos. La invención se refiere particularmente a los detergentes para lavar vajillas que contienen enzimas líquidas que comprenden proteasas definidas en combinación con una amilasa, y propone también métodos en los que se emplean tales composiciones. La invención se refiere además a los usos de las proteasas definidos en los detergentes líquidos para lavar vajillas que comprenden una amilasa.

Para detergentes para lavar vajillas, se usan con preferencia proteasas del tipo de subtilisina. Las proteasas usadas en los detergentes para lavar vajillas conocidos de la técnica anterior se originan ya sea a partir de microorganismos, por ejemplo de los géneros Bacillus, Streptomyces , Humicola, Thermomyces o Pseudomonas, y/o son producidos por métodos de biotecnología conocidos per se a través de microorganismos adecuados, por ejemplo a través los huéspedes de expresión transgénicos del género Bacillus o a través de los hongos filamentosos.

Especialmente en los detergentes modernos para lavar vajillas, en particular nuevas enzimas están cada vez más presentes, incluyendo amilasas. Una amilasa es una enzima que cataliza la hidrólisis de enlaces glucosidicos , especialmente en polisacáridos tales como almidón. Entre las amilasas, a-amilasas, que hidrolizan los enlaces o(l-4)-glicósido de amilosa, a menudo se usan en los detergentes para lavar vajillas. En la clasificación EC de enzimas, el sistema de clasificación numérica de las enzimas, las a-amilasas tienen el número CE ("número de comisión de enzima ") 3.2.1.1 y en consecuencia forman parte de la tercera a la sexta clases de enzimas principales, las hidrolasas (E.C.3.-.-.-), entre estos de las glicolasas ( E . C .3.2. - . - ) , y entre éstos, a su vez de las glicosidasas (E.C. 3.2.1-.), Es decir, enzimas que hidrolizan O- y/o compuestos de S-glicósido. La degradación del almidón por -amilasas formas dextrinas y, de estos, maltosa, glucosa y ol igosacáridos ramificados. Las amilasas son en consecuencia activas, en particular, contra los residuos que contienen almidón en el lavado y catalizan la hidrólisis de los mismos.

Las solicitudes internacionales de patente WO 95/23221 y WO 92/21760 describen variantes de la proteasa alcalina de Bacillus lentus DSM 5483, que son adecuadas para su uso en composiciones de lavado o de limpieza, incluyendo detergentes para lavar vajillas, y composiciones de lavado o de limpieza que comprenden tales proteasas. Además, la solicitud de patente internacional WO 2011/032988 da a conocer composiciones de lavado o de limpieza que comprenden asimismo variantes de la proteasa alcalina de Bacillus lentus DSM 5483. Las variantes de proteasa descritas en estos documentos pueden, asi como en otras posiciones, ser modificados en las posiciones 3, 4, 193 y 199 en la numeración de la proteasa alcalina de Bacillus lentus DSM 5483 y tienen, por ejemplo, aminoácidos 3T, 41, 193M y 1991 en dichas posiciones. También se describe que las composiciones de lavado pueden comprender otros enzimas, incluyendo también una amilasa. Las composiciones de lavado pueden ser sólidas o liquidas. Sin embargo, estos documentos no directamente y sin ambigüedad, dan a conocer un detergente liquido para lavar vajillas que comprende una amilasa en combinación con una proteasa que tiene la combinación de estas modificaciones como se describe más adelante.

Una desventaja de los detergentes líquidos para lavar vajillas que contienen proteasa y amilasa de la técnica anterior es que no son suficientemente estables al almacenamiento y, en consecuencia pierden un grado considerable de actividad enzimática, especialmente amilolítica y/o proteolítica, después de sólo un corto período de tiempo. Con frecuencia, la presencia de proteasa conduce a la pérdida de la actividad amilolítica, ya que la proteasa inactiva la amilasa. El detergente para lavar vajillas ya no exhibe un rendimiento de limpieza óptimo.

Es un objeto de la presente invención superar la desventaja mencionada y para proporcionar la proteasa y detergentes para lavar vajillas líquidos que contiene amilasa que tienen suficiente estabilidad o mejorada de almacenamiento, especialmente en términos de la actividad enzimática y preferentemente amilolítica y/o proteolítica de los mismos.

Por consiguiente, la invención proporciona un detergente líquido para lavar vajillas que comprende (a) una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene identidad de por lo menos 70% más de su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con otros por lo menos dos sustituciones de aminoácidos seleccionados del grupo que consiste de S3T, V4I, V193M y V199I, y (b) una amilasa.

Se ha encontrado que, sorprendentemente, un detergente líquido para lavar vajillas que comprende la combinación de una proteasa tal con una amilasa es ventajosamente estable al almacenamiento. Más particularmente, se ha mejorado el rendimiento de limpieza, especialmente el rendimiento de limpieza amilolítico y/o proteolítico mejorado, después del almacenamiento en comparación con un detergente para lavar vajillas que difiere de la composición de la invención simplemente por la proteasa presente en la composición particular, la proteasa habiendo estado presente en la misma concentración de comienzo del almacenamiento en las composiciones a ser comparado, sobre la base de enzima activa. Una proteasa proporcionada en el contexto de la presente invención por lo tanto, conduce a una reducción de la inactivación de la amilasa y también muestra las pérdidas de rendimiento reducido por si mismos. Sin embargo, la reducción de la inactivación de la amilasa y/o proteasa por la proteasa proporcionada en el contexto de la presente invención no se basa en el rendimiento y/o actividad de la proteasa inadecuado. En las configuraciones preferidas de detergentes para lavar vajillas de la invención, la estabilidad de almacenamiento mejorada también descrita está presente a temperaturas relativamente altas, por ejemplo en 30°C, 35°C y/o aún 40°C.

En este sentido, y con preferencia, una composición de la invención tiene todavía buen rendimiento, especialmente ventajoso, de limpieza de manchas sensibles a la proteasa. Por lo tanto, tal composición permite la eliminación satisfactoria o mejorada de por lo menos uno, preferiblemente de más de uno, manchas sensibles a la proteasa sobre superficies duras, por ejemplo, vajilla, o las superficies de metal, por ejemplo cubiertos. En las configuraciones seleccionadas de la invención, tal rendimiento de limpieza con respecto a por lo menos una mancha sensible a la proteasa se produce especialmente también a temperaturas relativamente altas, especialmente entre 40°C y 70°C, entre 40°C y 60°C o entre 45°C y 55°C.

Con respecto a las solicitudes internacionales de patentes WO 95/23221, WO 92/21760 y O 2011/032988 mencionadas a modo de introducción, la presente invención es por lo tanto una selección particularmente ventajosa que conduce a la obtención de un detergente liquido de alto rendimiento y estable al almacenamiento para lavar vajillas, especialmente con respecto a rendimiento de limpieza proteolitico y/o amilolitico de la composición después del almacenamiento y/o con respecto a la actividad proteolitica y/o amilolítica de la composición después del almacenamiento.

El rendimiento de la limpieza describe la capacidad de un detergente para lavar vajillas, en especial de un detergente para lavar vajillas, para eliminar parcial o completamente una mancha presente desde la superficie dura de la vajilla. Ejemplos de manchas en la vajilla son leche, carne picada, yema de huevo, copos de avena y almidón. En el contexto de la invención, tanto el detergente para lavar vajillas que comprende la proteasa y la amilasa, o el licor de limpieza formado por esta composición, y la proteasa o la propia amilasa tiene un rendimiento de limpieza independiente. El rendimiento de la limpieza de las enzimas por lo tanto contribuye a la capacidad limpiadora de la composición o del licor de limpieza formado por la composición. El rendimiento de limpieza amilolitica se refiere al rendimiento de limpieza sobre manchas sensibles a amilasa. El rendimiento de limpieza proteolítica se refiere a la capacidad limpiadora de manchas sensibles a la proteasa. El rendimiento de la limpieza se determina de la manera habitual en la técnica, preferiblemente como se especifica a continuación .

El "licor de limpieza" se entiende que significa que la solución de uso que comprende el detergente para lavar vajillas y actúa sobre las superficies duras y por lo tanto entra en contacto con las manchas presentes en las superficies duras. Típicamente, las formas de licor de limpieza cuando comienza la operación de limpieza y el detergente para lavar vajillas se diluye con agua, por ejemplo, en una máquina lavadora de vajillas o en otro recipiente adecuado.

La estabilidad en el almacenamiento en el contexto de la invención está presente especialmente cuando un detergente para lavar vajillas de la invención, después del almacenamiento, tiene un rendimiento relativamente alto de limpieza en comparación con una composición de control que difiere del detergente para lavar vajillas de la invención sólo por la proteasa presente en la composición de control.

Las dos composiciones que deben compararse, por lo tanto, tienen la misma cantidad o concentración de amilasa y/o actividad amilolitica de partida en comienzo del almacenamiento. Además, en las dos composiciones, la proteasa está presente en la misma concentración en el comienzo del almacenamiento, sobre la base de enzima activa, y las dos composiciones se tratan de la misma manera, especialmente con respecto a las condiciones de almacenamiento y la determinación de la actividad enzimática. Con preferencia creciente, el almacenamiento se efectúa durante por lo menos 24 horas, 48 horas, 72 horas, 5 días, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas o 4 semanas. Más preferiblemente, el almacenamiento se efectúa a una temperatura de por lo menos 35°C, más preferiblemente a 40°C.

En este sentido, la actividad de la enzima se puede efectuar de una manera habitual en la técnica que coincide con el tipo de enzima en particular. Los métodos para determinar la Actividad son familiares para los expertos en la técnica en el campo de la tecnología de enzimas y se usan rutinariamente por tales personas expertas. Los métodos para determinar la actividad de proteasa se describen, por ejemplo, en Tenside, volumen 7 (1970), p. 125-132. La actividad proteolítica se puede determinar también por la liberación del cromóforo para-nitroanilina (pNA) del sustrato suc-L-Ala-L-Ala-L-Pro-L-Phe-p-nitroanilida ( suc-AAPF-pNA) .

Los proteasa separa el sustrato y libera pNA. La liberación de pNA causa un aumento en la absorbancia a 410 nm, y el curso de la absorbancia con el tiempo es una medida de la actividad enzimática (Ct. Del Mar et al., 1979). La medición se efectúa a una temperatura de 25°C, a un pH de 8.6 y una longitud de onda de 410 nm. El tiempo de medición es de 5 min con un intervalo de medición de 20 s a 60. La actividad de la proteasa se informa preferentemente en PE (unidades de proteasa) .

La actividad de amilasa se determina de una manera habitual en la técnica. Preferiblemente, la actividad de la amilasa se determina como se especifica a continuación. Las amilasas convertir el almidón en glucosa. Bajo condiciones de reacción definidas (la solución reguladora de pH de tris-maleato a pH 6.5, 50°C, 15 min), las muestras a analizar se incubaron con 0.67% de almidón (soluble, pretratada de acuerdo con Zulkowsky (tratados con glicerol a 190°C)). A través de la adición de ácido dinitrosalicílico y calentando a 100°C, este último se reduce por la glucosa y otros azúcares reductores en condiciones alcalinas para dar un colorante de color rojo anaranjado, que se determina fotométricamente a 540 nm después de que la reacción ha terminado. La cantidad de azúcar liberada, que corresponde al color, es una medida de la actividad de la enzima (véase Sumner et al., J. Biol. Chem. , 1921, 47 y 1924, 62).

Más preferiblemente, la presencia de estabilización de enzimas en el contexto de la presente invención se determina como se especifica anteriormente, usando un detergente liquido para lavar vajillas que contiene proteasa y amilasa que se almacena a una temperatura de 40°C durante cuatro semanas, la actividad proteolitica se determinó a través de la liberación del cromóforo para-nitroanilina (pNA) del sustrato suc-AAPF-pNA y la actividad amilolitica se determinó como se especifica anteriormente.

La proteasa presente en un detergente para lavar vajillas de la invención comprende una secuencia de aminoácidos que tiene identidad de por lo menos 70% en toda su longitud con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos en L211D en combinación con por lo menos otras dos sustituciones de aminoácidos seleccionados del grupo que consiste de S3T, V4I, V193M y V199I .

En una modalidad adicional de la invención, la proteasa comprende una secuencia de amino ácido que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% y 98.8% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con otros por lo menos dos sustituciones de aminoácidos seleccionados del grupo que consiste de S3T, V4I, V193M y V199I.

La SEC ID No. 1 es la secuencia de la proteasa alcalina madurada (madura) de Bacillus lentus DS 5483, que se describe en la solicitud de patente internacional WO 92/21760, y que se incorpora aquí expresamente por referencia.

Las proteasas de la invención particularmente preferidas son: Las proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% y 98.8% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especifica en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con la S3T y sustituciones de aminoácidos V4I, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con la S3T, V4I y sustituciones de aminoácidos Las proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% y 98.8% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con la S3T y sustituciones de aminoácidos V193M, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con la S3T, V193 y sustituciones de aminoácidos L211D.

Las proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98,5% y 98.8% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con la S3T y V199I sustituciones de aminoácidos, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con las sustituciones de aminoácidos S3T, V199I y L211D.

Las proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% y 98.8% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con el V4I y sustituciones de aminoácidos V193M, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con el V4I, V193M y sustituciones de aminoácidos L211D.

Las proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% y 98.8% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con la SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con el V4I y V199I sustituciones de aminoácidos, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con el V4I, V199I y sustituciones de aminoácidos L211D.

Las proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97,5%, 98%, 98.5% y 98.8% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con la SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con la V193M y V199I sustituciones de aminoácidos, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con la V193M sustituciones de aminoácidos, V199I y L211D.

En una modalidad adicional de la invención, la proteasa comprende una secuencia de amino ácido que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95,5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% y 98.5% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con por lo menos otras tres sustituciones de aminoácidos seleccionadas del grupo que consiste de S3T, V4I, V193 y V199I.

Las proteasas de la invencións particularmente preferidas en este sentido son: La proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% y 98.5% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con la SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con la S3T, V4I y sustituciones de aminoácidos V193M, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con la S3T, V4I, V193M y sustituciones de aminoácidos L211D.

Las proteasas que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% y 98.5% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con la S3T, V4I y V199I sustituciones de aminoácidos, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con la S3T, V4I, V199I y sustituciones de aminoácidos L211D.

La proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% y 98.5% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con el V4I, V193M y V199I sustituciones de aminoácidos, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con el V4I, V193M, V199I y sustituciones de aminoácidos L211D.

Otras modalidades particularmente preferidas de las proteasas de la invención son notables en que tienen la sustitución de aminoácido L211D en combinación con las otras cuatro sustituciones de aminoácidos S3T, V4I, V193 y V199I. Más en particular, muy especialmente preferentes en este sentido para las siguientes proteasas: Las proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% y 98.1% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con la S3T, V4I, V193M y V199I sustituciones de aminoácidos, especialmente una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 1 con la S3T, sustituciones de aminoácidos V4I, V193M, y V199I L211D. Una proteasa de este tipo se especifica en SEC ID No. 2 y es muy particularmente preferido.

Además las proteasas particularmente preferidas son las proteasas como se describe anteriormente que también tienen, en la posición 99 en la lista de acuerdo con SEC ID No. 1, el aminoácido arginina (R) y/o que también tienen, en la posición 188 en la lista de acuerdo con la SEC ID No. 1, el aminoácido alanina (A) .

Las posiciones de los aminoácidos se definen en el contexto de la presente invención por una alineación de la secuencia de aminoácidos de la proteasa para ser usada con la secuencia de aminoácidos de la proteasa de Bacillus lentus, tal como se especifica en SEC ID No. 1. Dado que la proteasa de Bacillus lentus en la técnica anterior es una molécula de referencia importante para la descripción de las proteasas y de modificaciones de aminoácidos, es ventajoso hacer referencia a la lista de la proteasa de Bacillus lentus (SEC ID No. 1) en la asignación de las posiciones de los aminoácidos. Por otra parte, la lista es guiada por la proteina madura (madura) . Esta asignación también que se emplea especialmente cuando la secuencia de aminoácidos de la proteasa a ser usada comprende un mayor número de residuos de aminoácidos de la proteasa de Bacillus lentus de acuerdo con SEC ID No. 1. Partiendo de las posiciones mencionadas en la secuencia de aminoácidos de la proteasa de Bacillus lentus, las posiciones de los aminoácidos en una proteasa para el uso de acuerdo con la invención son los que se asignan a precisamente estas posiciones en una alineación.

Las posiciones particularmente ventajosa además de la posición 211 están en consecuencia las posiciones 3, 4, 193 y 199, para ser asignadas a una alineación con la SEC ID No. 1 y por lo tanto en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1. En las posiciones mencionadas, los siguientes residuos de aminoácidos están presentes en la molécula de tipo salvaje de la proteasa de Bacillus lentus: S3, VA, V193, V199 y L211. Dependiendo del número de diferencias de secuencia presentes a partir de SEC ID No. 1, por lo tanto hay diferentes valores de identidad máximos que una proteasa para su uso de acuerdo con la invención puede tener de SEC ID No. 1, incluso si han de corresponder con la SEC ID No. 1 en todos los otros aminoácidos. Este hecho debe ser tomado en cuenta en cada caso individual para cualquier combinación posible de las modificaciones de la secuencia propuesta de conformidad con la invención, y también depende de la longitud de la secuencia de aminoácidos de la proteasa. Por ejemplo, la identidad máxima en el caso de tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o nueve modificaciones de secuencia es, respectivamente, 98.88%, 98.51%, 98.14%, 97.77%, 97.40%, 97.03% y 96.65% en una secuencia de aminoácidos de 269 aminoácidos de longitud, o, respectivamente, 98.91%, 98.55%, 98.18%, 97.82%, 97.45%, 97.09% y 96.73% en una secuencia de aminoácidos de 275 aminoácidos de longitud.

Se ha encontrado, de acuerdo con la invención, que la adición de una proteasa tal a un detergente liquido para lavar vajillas que comprende una amilasa da un detergente liquido para lavar vajillas particularmente estable al almacenamiento, especialmente en términos de rendimiento de limpieza restante del mismo después del almacenamiento, especialmente después de un tiempo de almacenamiento, con preferencia creciente, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 5 días, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas ó 4 semanas.

Una proteasa presente en un detergente para lavar vajillas de la invención tiene actividad proteolitica, lo que significa que es capaz de hidrolizar enlaces peptidicos de un polipéptido o proteina. Por lo tanto, es una enzima que cataliza la hidrólisis de enlaces peptidicos y por lo tanto es capaz de separar los péptidos o proteínas. Es especialmente una . subtilasa y más preferiblemente una subtilisina .

Una amilasa es una enzima tal como se describe a modo de introducción. Para amilasas, es posible usar términos sinónimos, por ejemplo, 1 , -alfa-D-glucano glucanohidrolasa o glicogenasa. Las amilasas que se pueden formular de acuerdo con la invención son preferiblemente A-amilasas. El factor crucial para si una enzima es una a-amilasa en el contexto de la invención es la capacidad de los mismos para hidrolizar un enlace ( 1-4 ) -glicósido en la amilosa del almidón.

Las amilasas que se pueden formular de acuerdo con la invención son, por ejemplo, las a-amilasas de Bacillus licheniformis , de Bacillus amyloliquefaciens o a partir de Bacillus stearothermophilus , y también, más particularmente, los desarrollos de los mismos que se han mejorado para uso en las composiciones de lavado o limpieza y detergentes para lavar vajillas. La enzima de Bacillus licheniformis se puede obtener bajo el nombre de Termamyl ® de Novozymes, y bajo el nombre Purastar ® ST de Danisco/Genencor . Los productos de desarrollo de esta a-amilasa se pueden obtener bajo la Duramyl ® y Termamyl ® ultra, nombres comerciales de Novozymes, bajo el nombre Purastar ® OxAm de Danisco y Genencor como Keistase ® de Daiwa Seiko Inc., Tokio, Japón. La a-amilasa de Bacillus amyloliquefaciens se vende bajo el nombre BAN ® por Novozymes, y variantes de la amilasa de Bacillus stearothermophilus un bajo los nombres BSG modificado ® y Novamyl ®, igualmente por Novozymes. Además, la a-amilasa de Bacillus sp. A 7-7 ( DSM 12368) y la ciclodextrina glucanotransferasa (CGTasa) de Bacillus agaradherens (DSM 9948), además, debe hacerse hincapié para este propósito. Del mismo modo se pueden usar los productos de fusión de todas las moléculas mencionadas. Además, son adecuados los desarrollos de la -amilasa de Aspergillus niger y A. oryzae obtenible bajo los nombres comerciales Fungamyl ® de Novozymes. Otros productos comerciales usables ventajosamente son, por ejemplo, la Amylase-LT ® y Stainzyme ® o Stainzyme ® Ultra o Stainzyme Plus ©, este último asimismo de Novozymes. También es posible de acuerdo con la invención el uso de variantes de estas enzimas que pueden obtenerse por mutaciones puntuales. Las amilasas particularmente preferidas se describen en las especificaciones publicadas internacionales WO 00160060, WO 031002711, WO 031054177 y WO W0071079938, la descripción, por lo tanto, de las cuales se denomina explícitamente, o el contenido de la descripción que, en este sentido, por lo tanto, se incorporan explícitamente en la presente solicitud de patente.

Particularmente adecuadas para su uso en las composiciones de la invención son las variantes de la oc-amilasa de la a-amilasa AA560 de acuerdo con SEC ID No. 3 Las siguientes variantes son particularmente ventajosas: (a) variante de -amilasa que, en comparación con la a-amilasa AA560 de acuerdo con SEC ID No. 3, cuenta con uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis de las siguientes modificaciones de la secuencia en el listado de la a-amilasa AA560: R118K, 0183 * (supresión), G184 * (supresión), N195F, R320K, R458 . Más preferiblemente, la variante de la a-amilasa tiene todas las seis de las modificaciones de la secuencia mencionadas. (b) una variante a-amilasa que, en comparación con la a-amilasa AA560 de acuerdo con SEC ID No. 3, cuenta con las siguientes modificaciones de la secuencia (en la lista de la a-amilasa AA560): (1) M9L / M2021, (2) M9L / M2021 / M323T, (3) M9L / M2021 / M323T / M382Y, (4) M9L / M2021 / Y295F / A339S, (5) 9L / M2021 / Y295F, (6) M9L / M2021 / A339S, (7) M9L / M2021 / Y295F / A339S, (8) M9L / M2021 / Y295F / A339S / E345R, (9) M9L / G149A / M2021 / Y295F / A339S / E345R, (10) M9L / M202L, (11) M9L / M202L / M323T, (12) M9L / M202L / M323T / M382Y, (13) M9L / M202L / Y295F / A339S, (14) M9L / M202L / Y295F, (15) M9L / M202L / A339S, (16) M9L / M202L / Y295F / A339S, (17) M9L / M202L / Y295F / A339S / E345R, (18) M9L / G149A / M202L / Y295F / A339S / E345R, (19) M9L / M202T, (20) M9L / M202T / M323T, (21) M9L / M202T / M323T / M382Y, (22) M9L / M202T / Y295F / A339S, (23) M9L / M202T / Y295F, (24) M9L / M202T / A339S, (25) M9L / M202T / Y295F / A339S, (26) M9L / M202T / Y295F / A339S / E345R, (27) 9L / G149A / M202T / Y295F / A339S / E345R, (28) M9L Me Me G149A M2021 / V214T / Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R, (29) M9L / G149A / M202L Me V2141 1 Y295F / M323T / A339S / E345R / M382Y, (30) M9L / G149A G186A / G182T / M2021 / V2141 / Y295F / N299Y / M323T / A339S, (31) M9L / G149A / G186A / G182T / M202L / T2571 1 Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R, (32) M9L / G149A / M202L / V214T / Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R, (33) M9L / G149A / M20211V2141 1Y295F / M323T / A339S / E345R / M382Y, (34) 9L / G149A / G186A / G182T / M202L / V2141 / Y295F / N299Y / M323T / A339S, (35) M9L / G149A G186A / G182T / / M2021 1T2571 1 Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R, (36) 9L / G149A / M2021 1 V214T / Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R / N471E, (37) M9L / G149A / M202L / V21411 Y295F / M323T / A339S / E345R / M382Y / N471E, (38) M9L / G149A / G186A / G182T / M2021 / V2141 / Y295F / N299Y / M323T / A339S / N471E, (39) 9L / G149A / G186A / G182T / M202L / T2571 / Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R / N471E, (40) M202L / M105F / M208F, (41) G133E / M202L / 0361E, (42) G133E / M202L / R444E, (43) M202L / Y295F, (44) M202L / A339S, (45) M202L / 323T, (46) M202L / M323T / 309L, (47) M202L Me Me M4301 M323T, (48) M202L / V214T / R444Y, (49) M202L / N283D Me 0361E, (50) M202L / M382Y / K383R, (51) 202L / K446R / N4840, (52) 2021 / Y295F, (53) 2021 / A339S, (54) 2021 / 105F / M208F, (55) G133E / M2021 / 0361E, (56) G133E / M2021 / R444E, (57) M2021 / 323T, (58) M2021 / M323T / M309L, (59) M2021 / M4301 / M323T, (60) M2021 / V214T / R444Y, (61) 2021 / N283D / 0361E, (62) M2021 / M382Y / K383R, (63) M2021 / K446R / N4840, (64) M202V / M105F / M208F, (65) G133E / M202V / 0361E, (66) G133E / M202V / R444E, (67) M202V / 323T, (68) M202V / M323T / M309L, (69) 202V / M4301 / M323T, (70) 202V / M323T / M9L, (71) M202V / V214T / R444Y, (72) M202V / N283D / 0361E, (73) M202V / M382Y / K383R, (74) M202V / K446R / N484Q, (75) M202T / 105F / M208F, (76) G133E / 0361E / M202T, (77) G133E / M202T / R444E, (78) M202T / Y295F, (79) M202T / A339S, (80) M202T / M323T, (81) M202T / 323T / M309L, (82) M202T / M4301 / M323T, (83) M202T / M323T / M9L, (84) M202T / V214T / R444Y, (85) M202T / N283D / Q361E, (86) M202T / A339S, (87) M202T / Y295F (88) M202T / N299F, Y, (89) M202T / M382Y / K383R o (90) M202T / K446R / N484Q Entre ellos, se da preferencia muy particular a las siguientes variantes de ot-amilasa: (10) M9L / M202L, (28) M9L / G149A / M2021 / V214T / Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R, (31) M9L / G149A / G186A / G182T / M202L / T2571 1 Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R, (35) 9L / G149A / G186A / G182T / M2021 1T2571 / Y295F / N299Y / M323T (38) M9L / G149A / G186A / G182T / M2021 1V2141 / Y295F / N299Y / M323T (39) M9L / G149A / G186A / G182T / M202L / T2571 / Y295F / N299Y / M323T / A339S / E345R / N471E, (45) M202L / M323T, (46) M202L / M323T / M309L, (62) M2021 / M382Y / K383R, (68) 202V / M323T / M309L, (73) M202V / M382Y / K383R (82) M202T / M323T / M4301 (84) M202T / V214T / R444Y c) la variante de a-amilasa de acuerdo con (b) , que, además, tiene las seis modificaciones de la secuencia mencionada en (a) , y entre éstos más preferiblemente variante 31 con las seis modificaciones de la secuencia mencionadas en (a) .

Muy particularmente se prefieren de acuerdo con la invención a la variante de la a-amilasa se ha mencionado anteriormente bajo (a) y a la variante de la a-amilasa 31 mencionada anteriormente en (c) con las seis modificaciones de la secuencia mencionadas en (a) .

La identidad de secuencias de ácidos nucleicos o de aminoácidos se determina por una alineación de secuencia. Tal alineación se efectúa mediante la asignación de secuencias similares en las secuencias de nucleótidos o secuencias de aminoácidos entre si. Esta secuencia de alineación se efectúa preferiblemente sobre la base del algoritmo BLAST, que se estableció en la técnica anterior y normalmente se usa (cf., por ejemplo, Altschul, SF, Gish, W. Mi11er, W., Myers, EW y Lipman, DJ (1990) "Basic local allignment search tool" J. Mol. Biol. 215:403-410, y Altschul, Stephan F. , Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaffer, Jinghui Zhang, Zhang Hheng, Webb Miller, y David J. Lipman (1997) : "Gapped BLAST y PSI-BLAST: a new generation of protein datábase search programs";. Nucleic Acids Res., 25, págs . 3389-3402), y se lleva a cabo, en principio, mediante la asignación de secuencias similares de nucleótidos o aminoácidos en el ácido nucleico o secuencias de aminoácidos entre si. Una asignación de tabla de las posiciones en cuestión se refiere como una alineación. Un algoritmo más disponible en la técnica anterior es el algoritmo FASTA. Las alineaciones de secuencia, especialmente múltiples alineamientos de secuencias, típicamente se producen con la computadora. Ejemplos de programas de los programas de computadora usados con frecuencia son la serie de Clustal (cf., por ejemplo, Chenna et al (2003) : alineación de secuencias múltiples de Clustal con la serie de programas de ácido nucleico de Investigación 31, 3497 a 3500.), T-Coffee (cf., por ejemplo, Notredame et al. (2000): T-Coffee: A novel method for múltiple sequence alignments. J. Mol. Biol. 302, 205-217), o programas basados en estos programas o algoritmos. En el contexto de la presente invención, la secuencia de alineaciones se producen preferentemente con el programa de computadora Vector NTI® Suite de 10.3 (Invitrogen Corporation, 1600 Faraday Avenue, Carlsbad, California, U.S.) con parámetros estándar preestablecidos (por defecto) .

Tal alineación permite una declaración en cuanto a la similitud de las secuencias que se comparan unos con otros. Se ha informado típicamente en porcentaje de identidad, es decir, la proporción de los nucleótidos idénticos o residuos de aminoácidos en las mismas posiciones o posiciones correspondientes entre sí en una alineación. El término más amplio de homología incluye los intercambios de aminoácidos conservados en las secuencias de aminoácidos en consideración, es decir, aminoácidos que tienen propiedades similares, ya que estos generalmente ejercen actividades o funciones similares dentro de la proteína. Por lo tanto, la similitud de las secuencias que se comparan también puede ser informada por porcentaje de homología o porcentaje de similitud. Las cifras de identidad y/o de homología se pueden dar sobre los polipéptidos o genes enteros o sólo sobre las regiones individuales. Las regiones homologas o idénticas de diferentes secuencias de ácidos nucleicos o de aminoácidos se definen por lo tanto por igualaciones en las secuencias. A menudo tienen funciones idénticas o similares. Pueden ser pequeñas y cubrir sólo unos pocos nucleótidos o aminoácidos. Con frecuencia, estas pequeñas regiones ejercen funciones esenciales para la actividad global de la proteina. Por lo tanto, puede ser aconsejable basar las coincidencias de secuencias sólo en regiones individuales, posiblemente pequeñas. A menos que se indique otra cosa, las cifras de identidad o de homología dadas en la presente solicitud, sin embargo, se refieren a toda la longitud de la secuencia de ácido nucleico o de aminoácidos especificados en cada caso.

En una modalidad adicional de la invención, que es un rasgo característico adicional de un detergente para lavar vajillas de la invención que su rendimiento de la limpieza corresponde por lo menos a la de un detergente líquido para lavar vajillas que comprende una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 2. El rendimiento de limpieza se determina en un sistema de lavado que comprende un detergente líquido para lavar vajillas que contiene amilasa en una dosis entre 4.0 y 11.0 gramos por litro de licor de limpieza y la proteasa, las proteasas que deben compararse se usan en la misma concentración (basado en proteína activa) y el rendimiento de la limpieza está determinado con respecto a una mancha de carne picada y/o yema de huevo en la vajilla mediante la determinación del residuo restante de la respectiva mancha después de la operación de limpieza, la operación de limpieza se efectúa durante por lo menos 30 minutos, preferiblemente durante 60 minutos, a una temperatura de 50°C, y el agua que tiene una dureza del agua entre 20 y 22°dH (Dureza Germán) , preferiblemente 21°dH.

El detergente para lavar vajillas para el sistema de lavado es preferiblemente un detergente liquido para lavar vajillas bifásico que tiene la siguiente composición (todas las cifras en porcentaje en peso): (a) Fase de Enzima: Aglutinante 15.0-20.0 Alcohol de azúcar 8.0-12.0 Ag . tensioactivo no iónico (etoxilato de alcohol graso C8-C10 con 22 EO) 3.0-5.0 Compuesto de metal alcalino (base) 3.0-4.0 Acido bórico 02.05 a 03.05 Fosfonato (HEDP) 01.05 a 02.05 Amilasa 1.0-2.0 Proteasa ver texto sal Ca 0.8-1.2 sal Zn 0.15-0.25 Espesante 0.8-1.2 Colorante, perfume, conservador 0.25-0.5 Agua agregar a 100 La amilasa es preferiblemente la preparación de una variante de la a-amilasa que tienen las siguientes modificaciones de la secuencia en el listado de la ot-amilasa AA560 en comparación con la a-amilasa AA560 de acuerdo con la SEC ID No. 3: R118K, 0183 * (supresión), G184 * (supresión), N195F, R320K, R458K (de Novozymes) . (b) Fase alcalina: Aglutinante 7.5-12.5 Carbonato de sodio 7.5-12.5 Polímero Sulfo 5.0-8.0 Compuesto de metal alcalino (base) 3.0-5.0 Monoetanolamina 2.0-4 .0 Fosfonato (HEDP) 2.0-5.0 Espesante 0.8-1 .2 Colorante, perfume, conservador 0.25-0.5 Agua agregar a 100 La proteasa está presente en la composición en una concentración de 0.01-1% en peso, preferiblemente de 0.1% a 0.5% en peso, basado en la proteína activa. Para un ciclo de lavado en una máquina lavavaj illas, las dos fases se dosifican en porciones iguales (20 g de cada fase) . El lavado se efectúa dentro de un intervalo de pH entre pH 9 y pH 10 en una máquina lavava illas estándar, por ejemplo una máquina lavavajillas Miele G698SC. Ni la actividad de la proteasa ni la actividad de la amilasa en el liquido de limpieza es de cero al inicio del lavado.

El rendimiento de la limpieza se evaluó visualmente por el método IKW estándar en una escala de 1 a 10, el valor de 10 es la mejor marca (ningún residuo perceptible).

Se da preferencia particular a la determinación del rendimiento de limpieza en una máquina lavavaj illas con respecto a una mancha en la vajilla de carne picada y una mancha de yema de huevo con un detergente liquido para lavar vajillas bifásico como se describió anteriormente.

En una modalidad adicional de la invención, que es un rasgo característico adicional de un detergente para máquina lavavaj illas de la invención que su estabilidad de almacenamiento corresponde por lo menos a la de un detergente para lavar vajillas que incluye una proteasa de acuerdo con SEC ID No. 2. Tal estabilidad de almacenamiento cuando el detergente para lavar vajillas de la invención, después del almacenamiento a 40°C durante cuatro semanas, tiene un rendimiento de limpieza igual o mayor que el detergente para lavar vajillas usado para comparación, la composición de la invención que sólo difiere por la proteasa del presente detergente para lavar vajillas se usa como una comparación.

Más preferiblemente, la composición usada para la comparación es un detergente líquido bifásico para lavar vajillas como se especifica anteriormente, el rendimiento de limpieza se determinó como se especificó anteriormente.

Al comienzo del almacenamiento, las dos composiciones a comparar tienen la misma actividad de partida amilolitica y comprenden la proteasa en la misma concentración sobre la base de enzima activa, y ambas composiciones se tratan de la misma manera. La actividad proteolitica en las composiciones se determina en cada caso a través de la liberación del cromóforo para-nitroanilina (pNA) del sustrato suc-AAPF-pNA, y la actividad amilolitica de cada uno se determina como se especifica anteriormente. Las actividades de partida para la proteasa y la amilasa en la composición respectiva no son iguales a cero.

Mediante el uso de la amilasa con una actividad eguivalente en cada caso y el uso de las proteasas con igual concentración, basado en proteina activa, se asegura que, incluso en el caso de cualquier divergencia en la proporción de sustancia activa a la proteina total (los valores de la actividad especifica) , se están comparando las propiedades enzimáticas presentes reales.

A menos que se indique lo contrario, en el contexto de la presente invención, se hace referencia en cada caso al peso de la composición de lavado liquido, es decir, las cifras dadas se basan en el peso de la misma.

Numerosas proteasas y especialmente subtilisinas toman la forma de lo que se llama preproteinas , es decir, se forman junto con un propéptido y un péptido de señal, la función del péptido de señal asegurando típicamente que la descarga de la proteasa de la célula que la produce en el periplasma en general se necesita para el medio que rodea la célula y el propéptido para el correcto plegamiento de la proteasa. El péptido de señal y el propéptido están generalmente en la porción N terminal de la preprotema. El péptido de señal se separa del resto de la proteasa por una peptidasa de señal bajo condiciones naturales. Esto es seguido por el plegado final correcto de la proteasa, soportado por el propéptido. La proteasa entonces está en su forma, y se separa del mismo propéptido. Después de que el propéptido se ha separado, la proteasa, que es entonces madura (madurada), especialmente subtilisina, ejerce su actividad catalítica sin los presentes aminoácidos N-terminales originales. Para las aplicaciones industriales en general, y especialmente en el contexto de la invención, las proteasas maduras (maduradas) , es decir, las enzimas procesadas después de la producción de los mismos, se prefieren sobre las preproteinas. Las proteasas también pueden ser modificadas por las células que las producen después de que la producción de la cadena del polipéptido, por ejemplo, mediante la unión de moléculas de azúcar, formilaciones , aminaciones, etc. Tales modificaciones son modificaciones posteriores a la traducción y pueden, pero no necesitan, ejercer una influencia en la función de la proteasa .

Además, la proteasa madura también puede estar truncada en su extremo N-terminal y/o C-terminal, de tal manera que una proteasa truncada con respecto a la SEC ID No. 1 o SEC ID No. 2, es decir, un fragmento, está presente en el detergente para lavar vajillas de la invención. Todos los datos de identidad en este caso se refieren a la región en donde se asigna el fragmento particular en una SEC ID No. 1 de alineación. El fragmento respectivo, sin embargo, siempre incluye las posiciones a ser modificadas de acuerdo con la invención, es decir, posiciones asignadas a las posiciones 3, 4, 193, 199 y/o 211 en una alineación con la SEC ID No. 1, y ha modificaciones correspondientes como se prevé en la presente de acuerdo con la invención. Por otra parte, un fragmento de este tipo es proteolíticamente activo. Un fragmento que se prefiere, además, en este sentido comprende una secuencia de aminoácidos que corresponde en una longitud de posiciones de aminoácidos asociados por lo menos 100 o por lo menos 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 265 o 266 con la SEC ID No. 1 o SEC ID No. 2, teniendo en cuenta los aminoácidos antes mencionados para la posición 211 y también para las posiciones 3 y/o 4 y/o 193 y/o 199, y opcionalmente también para las posiciones 99 y/o 188. Más preferiblemente, el rendimiento de limpieza y/o estabilidad de almacenamiento de un detergente liquido para lavar vajillas de la invención que comprende un fragmento de tales corresponde por lo menos a la de un detergente para lavar vajillas que incluye una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos correspondiente a la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 2, en cada caso determinado como se especificó anteriormente.

Una composición de la invención comprende la proteasa, con preferencia creciente, en una cantidad de 1 x 10-8-5% en peso, de 0.0001 a 3% en peso, de 0.0005 a 1% en peso, de 0.001% a 0.75% en peso y más preferiblemente de 0.005% a 0.5% en peso, basado en activa proteina. Una composición de la invención comprende la amilasa, con preferencia creciente, en una cantidad de 1 x 10~8-5% en peso, de 0.0001 a 3% en peso, de 0.0005 a 1% en peso, de 0.001% a 0.75% en peso y más preferiblemente de 0.005% a 0.5% en peso, basado en la proteina activa. La concentración de proteina se puede determinar con la ayuda de métodos conocidos, por ejemplo el método BCA (ácido bicincónico; ácido 2,2'-biquinolill-4 , 4 ' -dicarboxilico) o el método de biuret (A.G. Gornall, C.S. Bardawill y M.M. David, J. Biol. Chem. , 177 (1948), p. 751-766). A este respecto, la concentración de proteina activa se determina a través de una valoración de los sitios activos usando un inhibidor irreversible adecuado (por proteasas, por ejemplo, fluoruro de fenilmetilsulfonilo (P SF) ) y la determinación de la actividad residual (cf. M. Bender et al., J. Am. Chem. Soc. 88, 24 (1966), p. 5890-5913) .

La proteasa y/o la amilasa también se pueden adsorber sobre sustancias y/o incrustarse en sustancias de revestimiento portadoras, con el fin de protegerlos de la inactivación prematura. En el licor de limpieza, es decir, en condiciones de uso, se libera la enzima y puede mostrar su acción catalítica.

En una modalidad adicional de la invención, que es un rasgo característico adicional de la detergente para lavar vajillas que comprende un componente seleccionado de i. sustancia aniónica y/o polianiónica, y/o ii. sustancia catiónica y/o policatiónica, y/o iii. sustancia que tiene un grupo hidroxilo y/o grupo polihidroxilado .

Se ha encontrado que la adición de tales sustancias mejora aún más el rendimiento de limpieza de detergentes para lavar vajillas, especialmente de detergentes líquidos para lavar vajillas que comprenden proteasas y amilasas, especialmente aquellos como se describió anteriormente. Especialmente en combinación con una proteasa para uso de acuerdo con la invención, se produce un efecto sinérgico, particularmente con respecto a la eliminación de por lo menos una mancha sensible a la proteasa, especialmente uno como se especificó anteriormente.

Las sustancias especificadas anteriormente en i. son sustancias aniónicas o polianiónicas , lo que significa que estas sustancias tienen por lo menos una y preferiblemente más de una carga negativa. Se da preferencia a un polímero que tiene por lo menos un monómero cargado negativamente, que tiene preferiblemente una pluralidad de monómeros cargados negativamente. Preferiblemente, de acuerdo con la invención, este polímero es, por lo tanto, un polímero cargado negativamente. Se da preferencia, por ejemplo, para polímeros de ácidos orgánicos o sales de los mismos, especialmente poliacrilatos y/o ácidos de poliazúcar y/o copolímeros de poliacrilato y/o copolímeros de poliazúcar. Otros compuestos preferidos a este respecto son poliacriloilsulfonatos o policarboxilatos , y las sales, copolímeros o sales de los copolímeros de los mismos.

Los ejemplos de sustancias para su uso con especial preferencia son Acusol 587D (poliacriloilsulfonato; de Rohm & Haas/Dow Chemical), Acusol 445N (sal de policarboxilato de sodio; de Rohm & Haas/Dow Chemical), Acusol 590 (copolímero de poliacrilato, de Rohm & Haas/Dow Chemical), Acusol 916 (sal de poliacrilato de sodio; de Rohm & Haas/Dow Chemical), Sokalan CP42 (sal de sodio de policarboxilato modificado; de BASF) , Sokalan PA 30CL (sal de policarboxilato de sodio; de BASF) , Dequest 9000 P (ácido maleico; de Thermphos) , ácido algínico, ácido poli-2-acrilamido-2-metil-l-propanosulfónico, la sal de sodio de ácido poli-4 -estirenosulfónico -co-ácido maleico, sal de sodio de ácido poliacrilamido-co-acrilico, sal sódica del ácido polimetacrilico, ácido poli (éter metil vinilico) -alt- maleico o sal sódica del ácido polivinilsulfónico .

Las materias mencionadas en ii. son sustancias catiónicas o policatiónicas, lo que significa que estas sustancias tienen por lo menos una y preferiblemente más de una carga positiva. Se da preferencia a un polímero que tiene por lo menos un monómero con carga positiva, que tiene preferiblemente una pluralidad de monómeros cargados positivamente. Preferiblemente, de acuerdo con la invención, por lo tanto, este polímero es un polímero cargado positivamente. Ejemplos de compuestos preferidos a este respecto son las sales de las poliaminas, polietileniminas o copolímeros de los mismos, sales de las polialilaminas , las sales de los compuestos de polidialildimetilamonio o compuestos poli (acrilamida-co-dialildimetilamonio) .

Las sustancias especificadas en iii. son sustancias que tienen por lo menos un grupo hidroxilo y/o grupo polihidroxilo y preferiblemente una pluralidad de grupos hidroxilo y/o grupos polihidroxilo. Se da preferencia a este respecto, por ejemplo, a los alcoholes de polivinilo, por ejemplo aquellos disponibles bajo el nombre comercial de owiol (de Kremer Pigmente GmbH & Co. KG) .

Se señala explícitamente en la presente que una sustancia específica puede pertenecer a uno o más de los grupos i. a iii antes mencionados. Por ejemplo, una sustancia puede ser un polímero aniónico que tiene uno o más grupos hidroxilo y/o grupos polihidroxilados. Tal sustancia entonces pertenece a los grupos i. y iii. Igualmente, un polímero catiónico que tiene uno o más grupos hidroxilo y/o grupos polihidroxilados pertenecen a los grupos ii. y iii.

Del mismo modo que pueden usarse en el contexto de la presente invención son derivados de las sustancias mencionadas anteriormente que pertenecen a i., ii. o iii. Un derivado en el contexto de la presente solicitud se entiende en el sentido de una sustancia tal que, partiendo de una de las sustancias mencionadas anteriormente, ha sido modificada químicamente, por ejemplo por la conversión de una cadena lateral o por la unión covalente de otro compuesto a la sustancia. Tal compuesto puede comprender, por ejemplo, compuestos de bajo peso molecular, tales como lipidos o mono-, oligo- o polisacáridos o aminas o compuestos de aminas. Además, el compuesto puede ser glicosilado, hidrolizado, oxidado, N-metilado, N-formilado, N-acetilado, o comprender metilo, formilo, etilo, acetilo, t-butilo, anisilo, bencilo, trifluoroacetilo, N-hidroxisuccinimida, t -butiloxicarbonilo, benzoilo, 4-metilbencilo, tioanisilo, tiocresilo, benciloximetilo, 4-nitrofenilo, benciloxicarbonilo, 2-nitrobenzoilo, sulfenilo 2-nitrofenilo, 4-toluenosulfonilo, pentafluorofenilo, difenilmetilo, 2-clorobenciloxicarbonilo, 2,4,5 - triclorofenilo, 2-bromobenciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetiloxicarbonilo, trifenilmetilo, 2,2,5,7,8-pentametilcromano-6-sulfonilo . Se entiende asimismo que un derivado es el enlace covalente o no covalente de la sustancia a un vehículo macromolecular, e igualmente también en el sentido de una inclusión no covalente en estructuras de jaula macromoleculares adecuadas. El acoplamiento a otros compuestos macromoleculares, por ejemplo, glicol de polietileno, también puede llevarse a cabo. Las modificaciones químicas adicionales preferidos son la modificación de uno o más grupos químicos -COOH, -OH, = NH,-NH2-SH para dar -COOR, -0R, -NHR, -NR2, -NHR, -NR, -SR; en donde : R es - CH = CH-R2, - C = C-R2, - C (R2) = CH2 , - C (R2) = C (R3),-CH = NR2, - C (R2) = N-R3, un sistema de anillo C de 4-7 con o sin sustitución, un heterociclo de 4-7 nitrógeno con o sin sustitución, o una cadena de C2 a Cs que tiene de 1 a 5 enlaces dobles o triples que tienen sustituciones seleccionadas de Rl, R2, o R3, donde -Rl es H, - R, - NO2, -CN, sustituyente haluro, -N3, - alquilo de Cl-8, - (CH2)nC02R2, alquenilo de C2-8 -C02R2, - O (CH2) nC02R2, - C(0)NR2R3, - P(0) (OR2)2, tetrazol-5-ilo sustituido con alquilo, - (CH2) ?? (CH2) n arilo, - NR2R3, - (CH2)nOR2, - (CH2)nSR2, - N(R2)C(0) R3, -S (02)NR2R3, - N (R2)S(02)R3, - (CHR2) nNR2R3, -C(0)R3, (CH2)n N(R3)C(0)R3, -N(R2)CR2R3, (CH2) n-cicloalquilo sustituido o no sustituido, (CH2) n-fenilo sustituido o no sustituido, o -ciclo; donde n es un número mayor que 1; -R2 es H, sustituyente haluro, -alquilo, haloalquilo, - (CH2) n-fenilo, - (CH2 ) 1-3-bifenilo, - (CH2) 1-4-Ph-N (S02-alquilo de Cl-2)2, -CO (CHRl) n-ORl, -(CHRl)n-heterociclo, - (CHRl ) n-NH-CO-Rl , - (CHRl ) n-NH-S02Rl , (CHRl)n-Ph-N ( alquilo-S02-alquilo de Cl-2)2, - (CHRl)nC(O) (CHRl)-NHRl, - (CHRl ) nC ( S ) (CHRl ) -NHR1 , - (CH2)nO (CH2)nCH3, -CF3, - acilo de C2-C5, - (CHRl)nOH, - (CHRl ) nC02Rl , - (CHRl) n O-alquilo, - (CHRl) n-O- (CH2) n-O-alquilo, - (CHRl)n- S-alquilo, - (CHRl ) n-S (O) -alquilo, - (CHRl)n (S) alquilo-02, -(CHRl) n-S (02) -NHR3, - (CHR3)n-N3, - (CHR3 ) nNHR , un alqueno de cadena de C2 a C8 tiene 1 a 5 dobles enlaces, un alquino de cadena C2 a C8 que tiene de 1 a 5 triples enlaces, heterociclo sustituido o no sustituido - (CHR3)n, cicloalquilo sustituido o no sustituido, saturado o insaturado de - (CHR3)n; donde n es un número mayor que 1 y Rl y R3 pueden ser iguales o diferentes; -R3 es H, - OH, - CN, alquilo sustituido, alquenilo de -C2 a C8, cicloalquilo sustituido o no sustituido, -N (Rl) R2, heterociclo de C5 a C7 saturado o insaturado o heterobiciclo de 4 a 7 átomos de carbono, - NR1, NR2-,-NRlR2, que consiste en un heterociclo saturado o insaturado o un heterobiciclo de 4 a 7 átomos de carbono; -R4 es H, - (CH2)nOH, - C (0)0R5, - C(0)SR5, -(CH2) nC (0) NR6R7, -0-C (0) -0-R6, un amino ácido o un péptido, donde n es un número de 0 a 4 ; -R5 es H, -R6 es - C(R7) - (CH2) nO-C (O) -R8, - (CH2)n-C (R7) -0 - C (0) R8, - (CH2)n-C (R7) -0- C (0)- o -R8, o - C (R7) -(CH2) N-0- C (0)- o -R8; donde n es un número de 0 a 4; y -R7 y R8 son cada uno H, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, heterociclo, heterociclo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, o alquilo de CH2C02alquilo, en donde R7 y R8 pueden ser iguales o diferentes.

También es posible de acuerdo con la invención el uso de todas las posibles combinaciones de las sustancias y/o derivados de los mismos mencionados anteriormente como pertenecientes a i., ii. o iii.

Un detergente líquido para lavar vajillas de la invención puede ser usado como tal o después de la dilución con agua para la limpieza de superficies duras. Tal dilución se puede preparar fácilmente, mediante la dilución de una cantidad medida de la composición en una cantidad adicional de agua, en particular, las relaciones en peso de composición: agua, y opcionalmente agitando esta dilución a fin de garantizar una distribución homogénea de la composición en el agua. Las relaciones de peso o volumen posibles de las diluciones son de 1:00 composición: agua para 1:10000 ó 1:20000 composición: agua, preferiblemente de 1:10 a 1:2000 composición: agua.

Todas las formas de administración de líquidos o de flujo libre pueden servir en la presente como detergentes líquidos para lavar vajillas. Las composiciones de "flujo libre" en el contexto de la presente solicitud son composiciones que se puede verter y que tienen viscosidades de las varias decenas de miles de mPas. La viscosidad se puede medir por métodos estándar habituales (por ejemplo, viscosímetro Brookfield LVT-II a 20 rpm y 20°C, husillo 3) y está preferiblemente en el rango de 5 a 30 000 mPas. Las composiciones preferidas tienen viscosidades de 10 a 15 000 mPas, en particular que se da preferencia a valores entre 120 y 8000 mPas. Un detergente líquido para lavar vajillas en el contexto de la presente invención puede por lo tanto también tomar la forma de un gel o pasta, o puede estar presente como una solución o suspensión homogénea o ser formulada en otras formas de administración habituales.

En una modalidad adicional de la invención, un detergente para lavar vajillas de la invención comprende además por lo menos un ingrediente adicional seleccionado del grupo que consiste de aglutinante, agente tensioactivo, polímero y combinaciones de los mismos aniónico. En una modalidad adicional de la invención, un detergente para lavar vajillas de la invención es libre de fosfato. Los detergentes para lavar vajillas sin fosfatos de la invención, son ventajosos especialmente desde un punto de vista ambiental.

Preferiblemente, los ingredientes de las composiciones se combinan con respecto una a la otra. Se da preferencia a las sinergias en términos de rendimiento de limpieza y/o rendimiento de enjuague y/o inhibición de incrustaciones. Se da preferencia particular a las sinergias presentes dentro de un rango de temperatura entre 10°C y 60°C, especialmente dentro de un rango de temperatura de 20°C a 55°C, a partir de 25°C a 50°C y de 30°C a 50°C.

El grupo de aglutinantes preferidos incluye especialmente los citratos y los carbonatos y los coadyuvantes orgánicos. El término "citrato" comprende asimismo ácido cítrico y las sales de los mismos, especialmente las sales de metales alcalinos de los mismos.

Los detergentes para lavar vajillas de la invención particularmente preferida, especialmente los detergentes para máquinas lavavaj illas , comprenden ácido cítrico y citrato, preferentemente citrato de sodio, en cantidades de 5% a 60% en peso, preferiblemente 10% a 50% en peso y especialmente 15% a 40% en peso.

Se da preferencia particular al uso de carbonato y/o hidrogenocarbonato, carbonato preferentemente de metal alcalino, más preferiblemente carbonato de sodio, en cantidades de 5% a 50% en peso, preferiblemente de 10% a 40 % en peso y especialmente de 15% a 30% en peso, basado en cada caso en el peso del detergente para lavar vajillas.

Los coadyuvantes orgánicos incluyen especialmente policarboxilatos/ácidos policarboxílieos y fosfonatos. Estas clases de sustancias se describen a continuación.

Las substancias adyuvantes orgánicas útiles son, por ejemplo, los ácidos policarboxilicos que pueden usarse en la forma de ácido libre y/o sus sales de sodio, ácidos policarboxilicos entendiendo por estos ácidos carboxílicos que llevan más de una función ácida . Ejemplos de estos son ácido adípico, ácido succínico, ácido glutárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido fumárico, ácidos de azúcar, ácidos aminocarboxílicos, ácido nitrilotriacético (NTA) y mezclas de éstos. Los ácidos libres tienen, además de su acción aglutinante, normalmente, también la propiedad de un componente acidificante y por lo tanto también sirven para establecer un pH más bajo y más suave de composiciones de la invención. Debe hacerse especial mención en este contexto de ácido succinico, ácido glutárico, ácido adipico, ácido glucónico y cualquier mezcla de los mismos.

Los fosfatos formadores de complejos incluyen, ácido 1-hidroxietano-l , 1-difosfónico, una serie de diferentes compuestos, por ejemplo dietilentriaminapenta (ácido metilenfosfónico) (DTPMP) . En esta aplicación, se da preferencia especialmente a los fosfonatos de hidroxialcano o aminoalcano. Entre los hudroxialcanofosfonatos , 1-hidroxietano-1, 1-difosfonato (HEDP) es de particular importancia como coaglutinante. Se usa preferiblemente en forma de la sal de sodio, la sal disódica siendo neutra y la sal tetrasódica alcalina (pH 9) . Los fosfonatos de aminoalcano útiles incluyen preferiblemente fosfonato de etilendiaminotetrametileno (EDTMP) , fosfonato de dietilentriaminopentametileno (DTPMP) y los homólogos superiores de los mismos. Se usan preferiblemente en forma de las sales de sodio neutros, por ejemplo como la sal hexasódica de EDTMP o como la sal hepta- y octasodium de DTPMP. El aglutinante usado de la clase de los fosfonatos es preferiblemente HEDP. Los aminoalcanofosfonatos además, han marcado la capacidad de unión de metales pesados. Por consiguiente, especialmente cuando las composiciones también comprenden blanqueadores, puede ser preferible usar aminoalcanofosfonatos, especialmente DTPMP, o mezclas de los fosfonatos mencionados.

Un detergente para lavar vajillas, especialmente detergente para máquina lavavaj illas , preferido en el contexto de esta solicitud, comprende uno o más fosfonatos del grupo de a) ácido aminotrimetilenfosfónico (ATMP) y/o sales de los mismos; b) ácido etilendiamina tetra (metilenfosfónico) (EDTMP) y/o sales de los mismos; c) ácido dietilentriaminapenta (metilenfosfónico) (DTPMP) y/o sales de los mismos; d) ácido 1-hidroxietano-l , 1-difosfónico (HEDP) y/o sales de los mismos; e) ácido 2-fosfonobutano-1 , 2 , 4-tricarboxilico (PBTC) y/o sales de los mismos; f) ácido hexametilendiamintetra (ácido metilenfosfónico ) (HDTMP) y/o sales de los mismos; g) ácido nitrilo (metilenfosfónico) (NTMP) y/o sales de los mismos.

Se da particular preferencia a los detergentes para máquinas para lavar vajillas que comprenden, como fosfonatos, ácido 1 - hidroxietano-1, 1-difosfónico (HEDP) o dietilentriaminapenta (ácido metilenfosfónico) (DTPMP) .

Además, los detergentes para lavar vajillas de la invención, especialmente detergentes para máquinas para lavar vajillas, pueden comprender dos o más diferentes fosfonatos.

La proporción en peso de los fosfonatos en el peso total de detergentes para lavar vajillas de la invención, especialmente detergentes para lavar vajillas automáticos, es preferiblemente de 1% a 8% en peso, más preferiblemente de 1.2% a 6% en peso y especialmente 1.5% a 4% en peso.

Los detergentes para lavar vajillas de la invención, especialmente detergentes para máquinas para lavar vajillas, pueden comprender un agente tensioactivo o una pluralidad de agentes tensioactivos, en cuyo caso los agentes tensioactivos aniónicos, particularmente agentes tensioactivos no iónicos y mezclas de los mismos son útiles.

Entre los agentes tensioactivos aniónicos, se da preferencia a aquellos que tienen por lo menos un grupo sulfato o sulfonato. El agente tensioactivo aniónico que tiene por lo menos un grupo sulfato o sulfonato que se selecciona preferiblemente de los sulfatos de alcoholes grasos, alcanosulfonatos y alquilbencenosulfonatos . Se da preferencia en la presente a sulfatos de alcoholes grasos C12-Ci8 (FAS), por ejemplo, Sulfopon K 35 (Cognis, Alemania), alcanosulfonatos secundarios C13-C17 (SAS) , por ejemplo, Hostapur SAS 93 (Ciariant, Alemania), y sulfonatos de alquilbenceno lineales de C8-C18, especialmente dodecilbencenosulfonato (LAS) .

De acuerdo con la invención, los términos "sulfato" y "sulfonato" abarcan no sólo los compuestos aniónicos pertinentes presentes en forma de sales sino también los ácidos libres, es decir, los ácidos alquilsulfúricos correspondientes o ácidos alquilsulfónicos .

Preferiblemente, el agente tensioactivo aniónico que tiene por lo menos un grupo sulfato o sulfonato está presente en detergentes para lavar vajillas de la invención en una cantidad de 0.1% a 20% en peso, más preferiblemente de 0.5% a 15% en peso, especialmente de 2.5% a 10% en peso.

Los agentes tensioactivos no iónicos usados pueden ser cualquiera de los agentes tensioactivos no iónicos conocidos por los expertos en la técnica. Los tensioactivos no iónicos adecuados son, por ejemplo, glicósidos de alquilo de la fórmula general RO(G)x en donde R es una cadena recta primaria o ramificada con metilo, especialmente 2-metil-ramificado, radical alifático que tiene de 8 a 22 y preferiblemente de 12 a 18 átomos de carbono, y G es el símbolo que representa una unidad de glicosa que tiene 5 ó 6 átomos de carbono, preferentemente de la glucosa. El nivel de oligomerización x, que indica la distribución de monoglicósidos y oligoglicósidos , es cualquier número entre 1 y 10; preferiblemente, x es de 1.2 a 1.4.

Una clase adicional de agentes tensioactivos no iónicos usados con preferencia, que se usan ya sea como el único tensioactivo no iónico o en combinación con otros agentes tensioactivos no iónicos, son alcoxilados, preferiblemente etoxilados o etoxilados y propoxilados, los ésteres alquilicos de ácidos grasos, que tienen preferiblemente de 1 a 4 átomos de carbono en la cadena de alquilo .

Otros agentes tensioactivos no iónicos adecuados pueden ser los de tipo óxido de amina, por ejemplo óxido de N-cocoalquilo-N, N-dimetilamina y óxido de N-ceboalquil-N, N-dihidroxietilamina, y alcanolamidas de ácido graso. La cantidad de estos agentes tensioactivos no iónicos no es preferentemente mayor que la de los alcoholes grasos etoxilados, especialmente no más de la mitad de los mismos.

Además los agentes tensioactivos adecuados son amidas de ácidos grasos polihidroxilados de la fórmula en donde R es un radical acilo alifático que tiene 6 a 22 átomos de carbono, R1 es hidrógeno o un alquilo o tienen de 1 a 4 átomos de carbono y radicales hidroxialquilo [Z] es un polihidroxialquilo lineal o ramificado que tiene de 3 a 10 átomos de carbono y 3 a 10 grupos hidroxilo. Las amidas de ácido graso polihidroxilado son sustancias que normalmente pueden obtenerse mediante aminación reductiva de un reductor de azúcar con amoniaco, una alquilamina o una alcanolamina y subsiguiente acilación con un ácido graso conocido, un éster de alquilo de ácido graso o un cloruro de ácido graso.

El grupo de las amidas de ácido graso polihidroxi también incluye compuestos de la fórmula en donde R es un alquilo lineal o ramificado o radical alquenilo que tiene de 7 a 12 átomos de carbono, R1 es un lineal, ramificado o ramificado o un radical arilo alquilo cíclico que tiene de 2 a 8 átomos de carbono y R2 es un lineal, ramificado o cíclico radical alquilo o un radical arilo o un radical hidroxialquilo que tiene 1 a 8 átomos de carbono, siendo preferidos los radicales alquilo ce C1-4 o fenilo, y [Z] es un radical polihidroxialquilo lineal en donde la cadena alquilo está sustituido con por lo menos dos grupos hidroxilo, o derivados alcoxilados, preferiblemente etoxilados o propoxilados, de estos radicales.

[Z] se obtiene preferiblemente mediante aminación reductora de un azúcar reductor, por ejemplo glucosa, fructosa, maltosa, lactosa, galactosa, mañosa o xilosa. Los compuestos sustituidos con N-alcoxi- o N-ariloxi pueden ser convertidos a las amidas de ácidos grasos polihidroxilados deseados mediante reacción con ésteres metílicos de ácidos grasos en presencia de un alcóxido como catalizador.

Los agentes tensioactivos preferidos usados son agentes tensioactivos no iónicos de baja formación de espuma. Con particular preferencia, las composiciones de lavado o de limpieza, especialmente composiciones de limpieza para máquina lavavajillas y entre estas máquinas para lavar vajillas preferiblemente, comprenden agentes tensioactivos no iónicos del grupo de los alcoholes alcoxilados. Los agentes tensioactivos no iónicos usados son preferiblemente alcoxilados, ventajosamente etoxilados, especialmente alcoholes primarios que tienen preferiblemente 8 a 18 átomos de carbono y un promedio de 1 a 12 moles de óxido de etileno (EO) por mol de alcohol en los que el radical de alcohol puede ser lineal o, preferentemente, ramificado con 2 metilo, o puede contener una mezcla de radicales lineales y ramificados con metilo, como típicamente están presentes en radicales de alcohol oxo. Sin embargo, los etoxilatos de alcoholes especialmente preferidos son aquellos que tienen radicales lineales de alcoholes de origen nativo con 12 a 18 átomos de carbono, por ejemplo alcohol de coco, palma, grasa de sebo u oleico, y un promedio de 2 a 8 EO por mol de alcohol. Los alcoholes etoxilados preferidos incluyen, por ejemplo, alcoholes de C 12-14 que tienen 3 EO o 4 EO, alcohol C9-11 que tiene de 7 EO, alcoholes de C13-15 que tienen 3 EO, 5 EO, 7 EO o 8 EO, alcoholes de C 12-18 que tienen 3 EO, 5 EO o 7 EO y mezclas de los mismos, tales como mezclas de alcohol de C12-14 que tiene de 3 EO y alcohol de C 12-18 que tiene 5 EO. Los grados de etoxilación indicados son valores medios estadísticos que pueden ser un entero o una fracción de un producto específico. Etoxilatos de alcohol preferidos tienen una distribución de los homólogos estrechada (etoxilatos de rango estrecho, NRE) . Además de estos tensioactivos no iónicos, también es posible usar alcoholes grasos que tienen más de 12 EO. Ejemplos de los mismos son el alcohol graso de sebo con 14 EO, 25 EO, 30 EO o 40 EO.

Con preferencia particular, por lo tanto, los agentes tensioactivos etoxilados no iónicos que han sido obtenidos a partir de monohidroxialcanoles de C6-20 o alquilfenoles de C6-20 o alcoholes grasos de C 6-20 y más de 12 moles, preferiblemente más de 15 mol y especialmente más de 20 moles de óxido de etileno por mol de alcohol se usan. Un agente tensioactivo no iónico particularmente preferido se obtiene a partir de un alcohol graso de cadena lineal que tiene de 16 a 20 átomos de carbono (alcohol de C 6-20 ) , preferiblemente un alcohol de Cíe, y por lo menos 12 moles, preferiblemente por lo menos 15 mol y en particular por lo menos 20 moles, de óxido de etileno. De éstos, los "etoxilatos de intervalo estrecho" son particularmente preferidos.

Con particular preferencia, además, se usan los agentes tensioactivos que contienen uno o más de grasa de sebo con alcoholes de 20 a 30 EO en combinación con un antiespumante de silicona.

Se da especial preferencia a los agentes tensioactivos no iónicos que tienen un punto de fusión por encima de la temperatura ambiente. Se da preferencia particular a tensioactivo no iónico que tiene un punto de fusión por arriba de 20 °C, preferiblemente por encima de 25°C, más preferiblemente entre 25 y 60°C y especialmente entre 26.6 y 43.3°C.

Los agentes tensioactivos no iónicos adecuados que tienen de fusión o puntos de reblandecimiento en el rango de temperatura especificado son, por ejemplo, baja formación de espuma. Los tensioactivos no iónicos que pueden ser sólidos o altamente viscosos a temperatura ambiente. Cuando se usan agentes tensioactivos no iónicos de alta viscosidad a temperatura ambiente, que tienen preferiblemente una viscosidad superior a 20 Pa · s, preferiblemente por arriba de 35 Pa · s y en particular por arriba de 40 Pa · s. También se prefieren los agentes tensioactivos no iónicos que tienen una consistencia similar a la cera a temperatura ambiente.

Los agentes tensioactivos no iónicos del grupo de los alcoholes alcoxilados, más preferiblemente del grupo de los alcoholes alcoxilados mixtos y en especial del grupo de los tensioactivos no iónicos EO-AO-EO, se usan igualmente con especial preferencia.

El agente tensioactivo no iónico sólido temperatura ambiente tiene preferiblemente unidades de óxido de propileno en la molécula. Preferiblemente, tales unidades de PO constituyen hasta 25% en peso, más preferiblemente hasta 20% en peso y en particular hasta 15% en peso, de la masa molar total del agente tensioactivo no iónico. Los agentes tensioactivos no iónicos particularmente preferidos son monohidroxialcanoles o alquilfenoles etoxilados que, además, cuentan con unidades de copolimeros de bloque de polioxietí leno-polioxipropileno . La porción de alcohol o alquilfenol de tales moléculas de agentes tensioactivos no iónicos preferiblemente constituyen más de 30% en peso, más preferiblemente más de 50% en peso y en particular más de 70% en peso, de la masa molar total de tales agentes tensioactivos no iónicos. Las composiciones preferidas se caracterizan porque comprenden agentes tensioactivos no iónicos etoxilados y propoxilados en los que las unidades de óxido de propileno en la molécula constituyen hasta 25% en peso, preferiblemente hasta 20% en peso y en particular hasta 15% en peso, de la masa molar total del agente tensioactivo no iónico.

Los agentes tensioactivos para su uso con preferencia proceden de los grupos de agentes tensioactivos no iónicos alcoxilados, especialmente los alcoholes y las mezclas de estos tensioactivos con tensioactivos estructuralmente complejos, tales como polioxipropileño/polioxietileño/polioxipropileño (agentes tensioactivos (EO/PO/PO) primarios etoxilados. Tales agentes tensioactivos no iónicos (PO/EO/PO) son, además, destacados por el buen control de la espuma.

Otros agentes tensioactivos no iónicos con puntos de fusión por encima de temperatura ambiente para su uso con especial preferencia contienen de 40% a 70% de una mezcla de polímeros de bloques de polioxipropileño/polioxietileño/polioxipropileño que contienen 75% en peso de un copolímero de bloque inverso de polioxietileno y polioxipropileno que tiene 17 moles de etileno óxido y 44 moles de óxido de propileno, y 25% en peso de un copolímero de bloque de polioxietileno y polioxipropileno iniciado con trimetilolpropano y que contiene 24 moles de óxido de etileno y 99 moles de óxido de propileno por mol de trimetilolpropano .

Los agentes tensioactivos no iónicos particularmente preferidos en el contexto de la presente invención se han encontrado para ser agentes tensioactivos no iónicos de baja formación de espuma que tienen óxido de etileno y unidades de óxido de alquileno alternadas. Entre estos, se da preferencia a su vez a agentes tensioactivos que tienen EO-AO-EO-AO bloques, en donde de uno a diez grupos EO o AO están unidos el uno al otro antes de que un bloque de los otros grupos en cada caso siguiente. Se da preferencia en al presente a los agentes tensioactivos no iónicos de la fórmula general en donde R1 es un radical alquilo o alquenilo de Ce-24-mono saturado o poliinsaturado de cadena lineal o ramificada; cada grupo R2 o R3 se selecciona independientemente entre-CH3, -CH2CH3, -CH2CH2- CH3 , CH (CH3)2 y los índices w, x, y, z son cada uno independientemente números enteros de 1 a 6.

Los agentes tensioactivos no iónicos preferidos de la fórmula anterior se pueden preparar por métodos conocidos a partir los alcoholes correspondientes R1-OH y óxido de etileno u óxido de alquileno. El radical R1 en la fórmula anterior puede variar dependiendo del origen del alcohol.

Cuando se usan fuentes nativas, el radical R1 tiene un número par de átomos de carbono y en general es no ramificado, y la se da preferencia a los radicales lineales de alcoholes de origen nativo con 12 a 18 átomos de carbono, por ejemplo, alcohol de coco, de palma, grasa de sebo u oleilico. Los alcoholes obtenibles a partir de fuentes sintéticas son, por ejemplo, los alcoholes de Guerbet o los radicales ramificados con 2-metilo o lineales y ramificados con metilo en una mezcla, como están típicamente presentes en los radicales oxo alcohol. Independientemente del tipo del alcohol usado para preparar los agentes tensioactivos no iónicos presentes en las composiciones, se da preferencia a agentes tensioactivos no iónicos en los que R1 en la fórmula anterior es un radical alquilo que tiene de 6 a 24, preferiblemente de 8 a 20, más preferiblemente de 9 a 15 y especialmente 9 a 11 átomos de carbono .

Una unidad de óxido de alquileno que está presente en los agentes tensioactivos no iónicos preferidos en alternancia con la unidad de óxido de etileno es, así como óxido de propileno, especialmente óxido de butileno. Sin embargo, aún más óxidos de alquileno en los que R2 y R3 se seleccionan cada uno independientemente entre -CH2CH2-CH3 y CH(CH3)2 también son adecuados. Se da preferencia al uso de agentes tensioactivos no iónicos de la fórmula anterior en donde R2 y R3 son cada uno un radical -CH3, y X son cada uno independientemente 3 o 4, e Y y Z son cada uno independientemente 1 o 2.

En resumen, se da preferencia en particular a los agentes tensioactivos no iónicos que tienen un radical 5 alquilo de C9-15, que tiene de 1 a 4 unidades de óxido de etileno, seguido de 1 a 4 unidades de óxido de propileno, seguido de 1 a 4 unidades de óxido de etileno, seguido de 1 a 4 unidades de óxido de propileno. En solución acuosa, éstos agentes tensioactivos tienen la viscosidad baja requerida y 10 pueden usarse con especial preferencia de acuerdo con la invención .

Se da preferencia de acuerdo con la invención a los agentes tensioactivos de la fórmula general ? ? R1-CH(OH)CH20-(AO)w-(AO)x-(A' )y-(A,O)z-R2 en donde R1 y R2 son cada uno independientemente un radical alquilo o alquenilo de C2-40 de cadena lineal o ramificada, saturado o mono- o -poliinsaturado ; A, A', A" y A"' son cada 20 uno, independientemente, un radical seleccionado del grupo de -CH2CH2 , -CH2CH2 -CH2 , -CH2CH (CH3), -CH2-CH2 -CH2 -CH2 , -CH2-CH (CH3)-CH2, -CH2CH ( CH2-CH3) ; y W, X, Y, Z son cada uno valores de entre 0.5 y 90, donde x, y y/o Z también puede ser 0.

Muy particularmente se prefieren en la presente los 25 agentes tensioactivos no iónicos de la fórmula general R!O [CH2CH(CH3)0]x[CH2CH20]y[CH2CH2CH)o]zCH2CH(OH)R2 en donde R1 es radical alifático hidrocarbilo lineal o ramificado que tiene de 4 a 22, especialmente de 6 a 18, átomos de carbono o mezclas de los mismos, R2 denota un radical hidrocarbilo lineal o ramificada que tiene de 2 a 26, especialmente de 4 a 20 átomos de carbono o mezclas de los mismos, y X y Z son valores entre 0 y 40 e y es un valor de por lo menos 15, preferiblemente, de 15 a 120, más preferiblemente de 20 a 80.

En una modalidad preferida, el detergente para lavar vajillas, especialmente el detergente para máquina lavavaj illas, basado en el peso total de la misma, comprende un agente tensioactivo no iónico de la fórmula general R10[CH2CH(CH3)0]x[CH2CH20]y[CH2CH(CH3)0]zCH2CH(OH)R2 en cantidades de 0.1% a 15% en peso, preferiblemente de 0.2% a 10% en peso, más preferiblemente de 0.5% a 8% en peso y especialmente de 1.0% a 6% en peso.

Se da preferencia especial a aquellos agentes tensioactivos no iónicos poli (oxialquilados) coronados con grupos extremos de la fórmula R10 [CH2CH20]yCH2CH(OH)R2 en donde R1 es un radical hidrocarbilo alifático lineal o ramificado que tiene de 4 a 22, especialmente de 6 a 16, átomos de carbono o mezclas de los mismos, R2 significa un radical hidrocarbilo lineal o ramificado que tienen de 2 a 26, especialmente de 4 a 20 átomos de carbono, radicales hidrocarbilo ramificados o mezclas de los mismos e y tiene un valor entre 15 y 120, preferiblemente de 20 a 100, especialmente de 20 a 80. El grupo de estos agentes tensioactivos no iónicos incluye, por ejemplo, éteres mixtos hidroxi de la fórmula general C6-22-CH (OH) CH2O- (EO) 20- 120 -C2-26, por ejemplo el alcohol graso de éteres de C8-12 - (EO) 22-2-hidroxidecilo y los éteres de alcohol graso de C4-22- (EO) 40-80-2-hidroxialquilo .

Se da particular preferencia a los detergentes para lavar de vajillas de la invención, especialmente los detergentes para máquinas para lavar vajillas, en donde el agente tensioactivo no iónico de baja espuma usado es un agente tensioactivo de la fórmula general R1CH(OH)CH20-(CH2CH20)2o-i 20" en donde R2 y R1 y R2 son cada uno, independientemente, un radical hidrocarbilo lineal o ramificado alifático que tiene un radical de 2 a 20, especialmente de 4 a 16, átomos de carbono.

Se da preferencia además a los agentes tensioactivos de la fórmula R10[CH2CH(CH3)0]x[CH2CH20]vCH2CH(OH)R2 en donde R1 es un radical hidrocarbilo alifático lineal o ramificado que tiene de 4 a 22 átomos de carbono o mezclas de los mismos, R2 denota un radical hidrocarbilo lineal o ramificado que tiene de 2 a 26 átomos de carbono o mezclas de los mismos y x representa valores entre 0.5 y 4, preferiblemente entre 0.5 a 1.5 e y es un valor de por lo menos 15.

De acuerdo con la invención, se da también preferencia a los agentes tensioactivos de la fórmula general R10[CH2CH(CH3)0]x[CH2CH20]yCH2CH(OH)R2 en donde R1 es un radical alifático hidrocarbilo lineal o ramificado que tiene de 4 a 22 átomos de carbono o mezclas de los mismos, R2 significa un radical hidrocarbilo lineal o ramificado que tiene de 2 a 26 átomos de carbono o mezclas de los mismos y x es un valor entre 1 y 40 e y es un valor entre 15 y 40, en donde las unidades de alquileno [CH2CH (CH3) 0] y [CH2CH20] se aleatorizan, es decir, se encuentran en la forma de una distribución aleatoria estadística .

El grupo de los agentes tensioactivos no iónicos poli (oxialquilados ) coronados con grupo extremo preferido, también incluye agentes tensioactivos no iónicos de la fórmula R10[CH2CH20]x[CH2CH(R3)0]yCH2CH(OH)R2 en donde R1 y R2 son cada uno, independientemente, un radical hidrocarbilo lineal o ramificado, saturado o mono-o poliinsaturado que tiene de 2 a 26 átomos de carbono, R3 se selecciona independientemente entre -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, pero es preferiblemente -CH3, y X e Y son cada uno independientemente valores entre 1 y 32, muy particular que se dé preferencia a los tensioactivos no iónicos con R3 =-CH3 y valores de x de 15 a 32 e y de 0.5 y 1.5.

Otros agentes tensioactivos no iónicos que pueden usarse con preferencia son los agentes tensioactivos no iónicos poli (oxialquilados) coronados con grupo extremo de la fórmula R10[CH2CH(R3)0]x[CH2]kCH(OH)[CH2]jOR2 en donde R1 y R2 son radicales hidrocarbilo aromáticos que tienen de 1 a 30 átomos de carbono, R3 es H o un grupo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, 2-butilo o 2-metil-2-butilo, x representa valores entre 1 y 30, k y j representan valores entre 1 y 12, preferiblemente entre 1 y 5. Si el valor de x >2, cada R3 en la formula anterior R10[CH2CH(R3)0]x[CH2]kCH(OH)[CH2]jOR2 puede ser diferente. R1 y R2 son preferiblemente radicales hidrocarbilo lineales o ramificados, saturados o insaturados, alifáticos o aromáticos que tienen de 6 a 22 átomos de carbono, se da preferencia particular a radicales que tienen de 8 a 18 átomos de carbono. Para le radical R3, se da preferencia particular a H, -CH3 o -CH2CH3. Particularmente los valores preferidos de x están en el rango de 1 a 20, especialmente de 6 a 15.

Como se describió anteriormente, cada R3 en la fórmula anterior puede ser diferente si x >2. Como resultado de esto, la unidad de óxido de alquileno en los corchetes se puede variar. Si x, por ejemplo, es 3, el radical R3 puede ser seleccionado con el fin de formar óxido de etileno (R3 = H) o de óxido de propileno (R3 = CH3) unidades, que pueden estar unidas entre si en cualquier secuencia, por ejemplo (EO) (PO) (EO) , (EO) (EO) (PO), (EO) (EO) (EO) , (PO) (EO) (PO), (PO) (PO) (EO) y (PO) (PO) (PO). El valor de 3 para x se ha seleccionado aquí a modo de ejemplo y puede, posiblemente, ser mayor, con un rango de variación creciente con el aumento de los valores de x, incluyendo, por ejemplo, un gran número de grupos (EO) combinado con un número pequeño de (PO) grupos, o viceversa.

Particularmente los alcoholes poli (oxialquilados) coronados con grupo extremo preferidos de la fórmula anterior tienen valores de k = 1 y j = 1, de tal manera que la fórmula anterior se simplifica a R10[CH2CH(R3)0]xCH2CH(OH)CH2OR2. en la última fórmula R1, R2 y R3 son cada uno como se definieron anteriormente y x representa números de 1 a 30, preferiblemente de 1 a 20 y especialmente de 6 a 18. Se da preferencia particular a los agentes tensioactivos en los que los radicales R] y R2 tienen 9 a 14 átomos de carbono, R3 es H y x asume valores de 6 a 15.

Otros agentes tensioactivos no iónicos usados con preferencia son los tensioactivos no iónicos de la fórmula general R10(AlkO)xM(OAIk)yOR2 donde R1 y R2 son cada uno independientemente un radical alquilo ramificado o no ramificado, saturado o insaturado, opcionalmente hidroxilado que tiene 4 a 22 átomos de carbono; Alk es un radical alquilo ramificado o no ramificado que tiene de 2 a 4 átomos de carbono; x e y son cada uno independientemente valores entre 1 y 70; y es un radical alquilo de entre el grupo de CH2/ CHR3, CR3R4, CH2CHR3 y CHR3CHR4 , donde R3 y R4 son cada uno independientemente un alquilo ramificado o no ramificado, saturado o insaturado que tiene de 1 a 18 átomos de carbono.

Se da preferencia en la presente a los agentes tensioactivos no iónicos de la fórmula general R1-CH(OH)CH2-0(CH2CH20)xCH2CHR(OCH2CH2)yO-CH2CH(OH)-R2 en donde -R, R1 y R2 son cada uno independientemente un radical alquilo o radical alquenilo que tienen de 6 a 22 átomos de carbono; -x e y son cada uno independientemente valores entre 1 y 40.

Se da preferencia en la presente especialmente a compuestos de la fórmula general R1-CH(OH)CH2_ 0(CH2CH20)xCH2CHR(OCH2CH2)yO-CH2CH(OH)-R2 En donde R es un radical alquilo lineal, saturado, que tiene de 8 a 16 átomos de carbono, preferiblemente de 10 a 14 átomos de carbono y n y m cada uno independientemente tiene valores de 20 a 30. Los compuestos correspondientes pueden obtenerse, por ejemplo, por reacción de los dioles alquilo HO-CHR-CH2-OH con óxido de etileno, con reacción subsiguiente con un epóxido de alquilo para coronar la funciones de OH libres para formar un éter de dihidroxilo.

En una modalidad adicional preferida, el agente tensioactivo no iónico se selecciona de agentes tensioactivos no iónicos de la fórmula general R1-0(CH2CH20)xCR3R4(OCH2CH2)yO-R2 en la cual - R1 y R2 son cada uno independientemente un radical alquilo o radical alquenilo que tiene de 4 a 22 átomos de carbono; - R3 y R4 son cada uno independientemente H o un radical alquilo o radical alquenilo que tiene de 1 a 18 átomos de carbono y - x e y son cada uno independientemente valores entre 1 y 40.

Se da preferencia en la presente especialmente a compuestos de la fórmula general R1-0(CH2CH20)xCR3R4(OCH2CH2)yO-R2 en donde R3 y R4 son cada uno H y los índices x e y asumen cada uno independientemente valores de 1 a 40, preferiblemente e l a 15.

Se da preferencia particular especialmente a compuestos de la fórmula general R1-0(CH2CH20)xCR3R(OCH2CH2)yO-R2 en donde los radicales R1 y R2 son cada uno independientemente radicales alquilo saturados que tienen de 4 a 14 átomos de carbono y los índices x e y asumen cada uno independientemente valores de 1 a 15 y especialmente de 1 a 12.

Se da preferencia particular a los compuestos de la fórmula general R1-0(CH2CH20)xCR3R4(OCH2CH2)yO-R2 en donde uno de los radicales R1 y R2 es ramificado.

Se da preferencia muy particular a compuestos de la fórmula general R1-0(CH2CH20)xCR3R4(OCH2CH2)yO-R2 en donde los índices x e y asumen cada uno independientemente valores de 8 a 12.

Las longitudes de cadena de carbono indicadas y los niveles de etoxilación o los niveles de alcoxilación de los agentes tensioactivos no iónicos antes mencionados son valores medios estadísticos que pueden ser un número entero o una fracción para un producto específico. Debido a los procesos de producción, productos comerciales de la fórmula mencionada no suelen constan de un representante individual, sino de mezclas, como resultado de lo cual los valores medios y, como consecuencia de esto, las fracciones pueden surgir tanto para las longitudes de cadena de carbono y para los niveles de etoxilación o los niveles de alcoxilación.

Por supuesto, los agentes tensioactivos no iónicos mencionados anteriormente se pueden usar no solo como sustancias individuales, sino también como mezclas de agentes tensioactivos de dos, tres, cuatro o más tensioactivos . Las mezclas de tensioactivos no se refieren a las mezclas de los tensioactivos no iónicos que, en su totalidad, están cubiertos por una de las fórmulas generales antes mencionadas, pero en lugar de aquellas mezclas que comprenden dos, tres, cuatro o más tensioactivos que se pueden describir por diferentes fórmulas generales desde las anteriores.

Especialmente preferidos son los agentes tensioactivos no iónicos que tienen un punto de fusión por encima de la temperatura ambiente. Se da preferencia particular a un agente tensioactivo no iónico que tiene un punto de fusión por arriba de 20°C, preferiblemente por encima de 25°C, más preferiblemente entre 25 y 60°C y especialmente entre 26,6 y 43.3°C.

La proporción en peso del agente tensioactivo no iónico en el peso total del detergente para lavar vajillas de la invención, especialmente para detergente para máquina lavavaj illas, en una modalidad preferida, es de 0.1% a 20% en peso, más preferiblemente de 0.5% a 15% en peso, especialmente de 2.5% a 10% en peso.

En una modalidad preferida, la relación de % en peso de agente tensioactivo aniónico que tiene por lo menos un grupo sulfonato o sulfato y el agente tensioactivo no iónico es 3:1-1:3, especialmente 2:1-1:2, más preferiblemente de 1.5:1 a 1:1.5.

Detergentes para lavar vajillas de la invención, especialmente los detergentes para máquinas lavavaj illas , comprenden, como un componente adicional, en una modalidad preferida, por lo menos un polímero aniónico. Los polímeros aniónicos preferidos en la presente son los policarboxilatos copoliméricos y los polisulfonatos copoliméricos.

La proporción en peso de polímero aniónico en el peso total del detergente para lavar vajillas de la invención, especialmente para detergente para máquina lavavaj illas, en una modalidad preferida, es de 0.1% a 20% en peso, preferiblemente de 0.5% a 18% en peso, más preferiblemente de 1.0% a 15% en peso y especialmente del 4% al 14% en peso.

Los detergentes para lavar vajillas de la invención, especialmente los detergentes para máquinas lavavaj illas, en donde el polímero aniónico copolimérico se selecciona entre el grupo de los policarboxilatos y polisulfonatos hidrófobamente modificados forma una parte particularmente preferida de la materia objeto de la presente invención, ya que la modificación hidrófoba de los copolímeros aniónicos puede lograr una mejora en las propiedades de abrillantador y propiedades de secado de estas composiciones, en combinación con la formación simultánea de baja escala.

Los copolimeros pueden tener dos, tres, cuatro o más unidades monoméricas diferentes. Los polisulfonatos copoliméricos preferidos comprenden, asi como monómero que contienen qrupos sulfa, por lo menos un monómero del grupo de los ácidos carboxilicos insaturados.

El ácido carboxilico insaturado usado con especial preferencia son ácidos carboxilicos insaturados de la fórmula R1 (R2) C = C (R3) COOH en donde R1 a R3 son cada uno independientemente -H, -CH3, un radical alquilo saturado decadena recta o ramificada que tiene 2 a 12 átomos de carbono, radical alquenilo de cadena lineal o ramificada, mono- o poliinsaturado que tiene de 2 a 12 átomos de carbono, radicales alquilo o alquenilo sustituidos con -NH2 -,-OH- o -COOH como se definió anteriormente, o -COOH o -COOR4 en donde R4 es un radical hidrocarbilo de cadena lineal o ramificada, saturado o insaturado o tiene de 1 a 12 átomos de carbono .

Los ácidos carboxilicos insaturados particularmente preferidos son ácido acrilico, ácido metacrilico, ácido etacrílico, ácido a-cloroacrilico, ácido a -cianoacrilico, ácido crotónico, ácido ot-fenilacrilico, ácido maleico, anhídrido maleico, ácido fumárico, ácido itacónico, ácido citracónico, ácido metilenmalónico, ácido sórbico, ácido cinámico o mezclas de los mismos. Por supuesto, es también posible usar los ácidos dicarboxílieos insaturados.

Los policarboxilatos copoliméricos usados de acuerdo con la invención son más preferiblemente copolímeros de ácido acrilico con ácido metacrilico y ácido acrilico o ácido metacrilico con ácido maleico. Se han encontrado que los copolímeros particularmente adecuados son los de ácido acrilico con ácido maleico que comprenden de 50% a 90% en peso de ácido acrilico y de 50% a 10% en peso de ácido maleico. La masa molecular relativa de los mismos, basada en ácidos libres, es generalmente de 2000 a 70000 g/mol, preferiblemente de 20000 a 50000 g/mol y especialmente 30000 a 40 000 g/mol.

Las masas molares notificadas en el contexto de este documento son masas molares promedio en peso Mw, que siempre se determinaron por medio de cromatografía de permeación en gel (GPC) usando un detector de UV. La medición se llevó a cabo frente a un estándar externo que, debido a su relación estructural con los polímeros que se examinaron, da los valores de masa molares realistas.

Los monómeros preferidos que contienen grupos sulfo son los de la fórmula R5 ( R6) C = C (R7) -X-SO3H en los que R5 a R7 son cada uno independientemente -H,-CH3, un radical alquilo saturado de cadena recta o ramificada que tiene de 2 a 12 átomos de carbono, un radical alquenilo mono o poliinsaturado, de cadena recta o ramificada, que tiene de 2 a 12 átomos de carbono, radicales alquilo o alquenilo sustituidos con -NH2 - , -OH o -COOH-sustituido, o -COOH o-COOR4, en donde R4 es un radical hidrocarbilo saturado o insaturado, de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 12 átomos de carbono, y X es un grupo separador presente opcionalmente seleccionado entre - ( C H2 ) n- con n = 0 a 4, -COO-(CH2)k- con k = 1 a 6, -C (0) -NH-C ( CH3 ) 2 - , -C (0) NH-C (CH3) 2 -CH2- y -C (0) -NH-CH (CH3) -CH2-.

Entre estos monómeros, se da preferencia a los de las fórmulas H2C=CH-X-S03H H2C=C(CH3)-X-S03H H03S C-(R6)C=C(R7)-X-S03H, en donde R6 y R7 se seleccionan cada uno independientemente de -H, -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3 y -CH(CH3)2 y X es un grupo espaciador presente opcionalmente seleccionado entre - ( C H2 ) n- con n = 0 a 4, -C00- ( CH2)k con k = 1 a 6, -C (0) -NH-C (CH3) 2 - , -C (O) -NH-C (CH3) 2-CH2- y -C (0) -NH-CH (CH3) - CH2 - .

Los monómeros particularmente preferidos que contienen grupos sulfa en la presente son el ácido 1-acrilamido-l-propanosulfónico, ácido 2-acrilamido -2- propanosulfónico, ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propanosulfónico, ácido 2 - metacrilamido-2-metil-l-propanosulfónico, ácido 3-metacrilamido-2-hidroxipropanosulfónico, ácido alilsulfónico, ácido metalilsulfónico, ácido aliloxibencenosulfónico, ácido metaluloxubencensulfónico, ácido 2-hidroxi-3- ( 2-propeniloxi ) propanosulfónico, ácido 2-metil-2-propeno-l-sulfónico, ácido estirenosulfónico, ácido vinilsulfónico, acrilato de 3-sulfopropilo, metacrilato de 3-sulfopropilo, sulfometacrilamida, sulfometilmetacrilamida y mezclas de los ácidos mencionados o las sales solubles en agua de los mismos .

En los polímeros, los grupos sulfo pueden estar total o parcialmente en forma neutralizada, lo gue significa que el átomo de hidrógeno ácido del grupo sulfo en algunos o todos los grupos sulfo puede ser intercambiado por iones metálicos, iones de metales alcalinos, preferiblemente y especialmente para los iones de sodio. Se prefiere el uso de copolímeros parcial o totalmente neutralizados que contienen grupos sulfa de conformidad con la invención.

La distribución de monómeros de los copolímeros para uso con preferencia de acuerdo con la invención, en el caso de copolímeros que comprenden solo monómeros que contienen grupos carboxilo y monómeros que contienen grupos sulfo, es preferiblemente de 5% y 95% en peso en cada caso; más preferiblemente, la proporción del monómero que contiene grupos sulfo es de 50% a 90% en peso y la proporción del monómero que contiene grupos carboxilo es de 10% a 50% en peso, los monómeros aquí se seleccionan preferiblemente de los mencionados anteriormente.

La masa molar de los copolimeros sulfonados usados con preferencia de acuerdo con la invención puede variarse con el fin de que coincida con las propiedades de los polímeros para el uso final deseado. Es un rasgo característico de detergentes para lavar vajillas preferidos, especialmente para detergentes para máquinas Iavavaj illas , que los copolimeros tienen masas molares de 2000 a 200000 gmol"1, preferentemente de 4000 a 25 000 gmol"1 y sobre todo de 5000 a 15 000 gmol"1.

En una modalidad preferida adicional, los copolimeros comprenden, así como monómeros que contienen grupos carboxilo y monómeros que contienen grupos sulfo, además, por lo menos un monómero no iónico, preferiblemente hidrófobo. Mediante el uso de estos polímeros modificados de forma hidrófoba, que era especialmente posible mejorar el rendimiento del auxiliar de enjuague de los detergentes para máquinas Iavavaj illas de la invención.

Se da preferencia de acuerdo con la invención a los detergentes para lavar vajillas, especialmente los detergentes para máquinas Iavavaj illas , en donde el detergente para lavar vajillas comprende, como copolimero aniónico, un copolimero que comprende i) monómeros que contienen grupos carboxilo ii) monómeros que contienen grupos sulfo iü) monómeros no iónicos.

Los monómeros no iónicos usados son preferiblemente monómeros de la fórmula general R1 (R2) C = C (R3)-X-R4 en donde R1 a R3 son cada uno independientemente -H, -CH3 o -C2H5, X es un grupo espaciador opcionalmente presente seleccionado de -CH2, -C(0)0- y -C(0)-NH-, y R4 es un radical alquilo saturado de cadena lineal o ramificada que tiene 2 a 22 átomos de carbono o es un insaturados, que tienen de 6 a 22 átomos de carbono, preferiblemente radicales aromáticos.

Los monómeros no iónicos particularmente preferidos son buteno, isobuteno, penteno, 3-metilbuteno, 2 metilbuteno, ciclopenteno, hexeno, hex-l-eno, 2-metilpent-l-eno, 3-metilpent-l-eno, ciclohexeno, metilciclopenteno, ciclohepteno, metilciclohexeno, 2 , 4 , 4-trimetilpent-l-eno, 2, 4, 4-trimetilpent-2-eno, 2, 3-dimetilhex-l-eno, 2,4-dimetilhex-l-eno, 2 , 5-dimetilhex-l-eno, 3, 5-dimetilhex-l-eno, 4 , 4-dimetilhex-l-eno, etilciclohexino, 1-octeno, oc-olefinas que tienen 10 o más átomos de carbono, por ejemplo 1-deceno, 1-dodeceno, 1-hexadeceno, 1-octadeceno y oc-olefina de C22, 2-estireno, a-metilestireno, 3-metilestireno, 4-propilestireno, 4-ciclohexilestireno, 4 - dodecilestireno, 2 etil-4- bencilestireno , 1-vinilnaftaleno, 2-vinilnaftaleno, acrilato de metilo, acrilato de etilo, acrilato de propilo, acrilato de butilo, acrilato de pentilo, acrilato de hexilo, metacrilato de metilo, N-(metil) acrilamida, acrilato de 2-etilhexilo, metacrilato de 2-et ilhexilo, N- (2-etilhexil) acrilamida, acrilato de octilo, metacrilato de octilo, N-(octil) acrilamida, acrilato de laurilo, metacrilato de laurilo, N-(lauril) acrilamida, acrilato de estearilo, metacrilato de estearilo, N-(estearil) acrilamida, acrilato de behenilo, metacrilato de behenilo y N-(behenilo) acrilamida o mezclas de los mismos.

En una modalidad adicional de la invención, que es un rasgo característico de un detergente para lavar vajillas de la invención que comprende por lo menos una enzima adicional, especialmente una proteasa, amilasa, celulasa, enzima de escisión de la pectina, hemicelulasa, mananasa, tanasa, xilanasa, xanthanase, (3 - glucosidasa, carragenina, perhidrolasa, oxidasa, oxidorreductasa o una lipasa, y combinaciones de los mismos, especialmente una combinación seleccionada de proteasa y amilasa, proteasa y lipasa, proteasa y celulasa, proteasa y mananasa, amilasa y lipasa, amilasa y celulasa, amilasa y mananasa, lipasa y celulasa, lipasa y mananasa, lipasa y celulasa, proteasa y amilasa y lipasa, proteasa y amilasa y celulasa, proteasa y amilasa y mananasa, amilasa y lipasa y celulasa, amilasa y lipasa y mananasa, lipasa, celulasa y mananasa, proteasa y amilasa y lipasa y celulasa, proteasa y amilasa y celulasa y mananasa.

Cada enzima adicional de este tipo está ventajosamente presente en la composición en una cantidad de 1 x 10~8 a 5 por ciento en peso basado en la proteina activa. Con preferencia creciente, cada enzima adicional está presente en las composiciones de la invención en una cantidad de 1 x 10~7-3% en peso, de 0.00001-1% en peso, de desde 0.00005 a 0.5% en peso, de 0.0001 a 0.1% en peso y más preferiblemente de 0.0001% a 0.05% en peso, basado en la proteina activa. A este respecto, la concentración de proteina activa se puede determinar de una manera habitual en la técnica, en el caso de hidrolasas, por ejemplo, por una titulación de los sitios activos usando un inhibidor irreversible adecuado y la determinación de la actividad residual (véase, por ejemplo, M. Bender et al., J. Am. Soc. Chem 88, 24 (1966), p 5890- 5913; la referencia citada se refiere a las proteasas, pero el principio de la titulación es aplicable los sitios activos de otras hidrolasas). Más preferiblemente, las enzimas presentan acciones de limpieza sinérgicas con respecto a las manchas o puntos específicos, lo que significa que las enzimas presentes en la composición de promoción de las actuaciones de limpieza de uno al otro. Más preferiblemente, tal sinergismo está presente entre la proteasa presente en conformidad con la invención y una enzima más en una composición de la invención, especialmente entre la proteasa presente en conformidad con la invención y una amilasa y/o una lipasa y/o una mananasa y/o una celulasa y/o una enzima de escisión de la pectina. Los efectos sinérgicos no pueden producirse sólo entre varias enzimas, sino también entre una o más enzimas y otros ingredientes de la composición de la invención.

En una modalidad adicional de la invención, que es un rasgo característico del detergente para lavar vajillas que es un detergente para lavar vajillas. De acuerdo con esta aplicación, los detergentes para máquinas lavavajillas se refieren a composiciones que pueden usarse para la limpieza de vajilla sucia en un proceso de máquina lavavajillas. De esta manera, los detergentes para máquinas lavavajillas de la invención se diferencian, por ejemplo, a partir de los auxiliares de enjuague de la máquina que siempre se usan en combinación con detergentes para máquinas lavavajillas y no muestran ninguna acción de limpieza a sí mismos. Con frecuencia hay más demandas sobre vajillas lavadas en máquinas que en las vajillas lavadas manualmente. Por lo tanto, la vajilla después de la limpieza en máquina no sólo debe estar libre de residuos de alimentos, sino que no deben tener, por ejemplo, manchas blanquecinas causadas por la dureza del agua u otras sales minerales, que se derivan de las gotas de agua secas por falta de agente humectante. Los detergentes modernos para lavar vajillas automáticos cumplen estas demandas a través de la integración de ingredientes activos d elimpieza y/o activos de cuidado y/o activos de suavizado de agua y/o activos de auxiliares de enjuague y son conocidos por el consumidor, por ejemplo, como detergentes para lavar vajillas "lOenl" o "llenl". Como un constituyente esencial para el éxito de limpieza y de enjuague, los detergentes para máquinas lavavaj illas comprenden aglutinantes. Estos aglutinantes en primer lugar, aumentan la alcalinidad del licor de limpieza, con la emulsificación y la hidrólisis de grasas y aceites a medida que aumenta la alcalinidad, y en segundo lugar reducen la dureza del agua del liquido de limpieza por formación de ocmplejos de los iones de calcio presentes en el licor acuoso.

En otra configuración, el detergente para lavar vajillas está rodeado por una película soluble en agua. La película comprende preferiblemente un alcohol de polivinilo (PVA) o consiste en alcohol polivinílico (PVA). Un detergente de lavar vajillas de la invención de este tipo en consecuencia está en forma de porciones.

La invención proporciona además el uso de un detergente para lavar vajillas de la invención para la eliminación de manchas, especialmente manchas sensibles a proteasa y/o amilasa, sobre superficies duras, es decir, para la limpieza de superficies duras. Esto se debe a que las composiciones de la invención, especialmente debido a la combinación de proteasa y amilasa presente, se pueden usar ventajosamente para eliminar impurezas correspondientes de superficies duras. Las modalidades de este objeto de la invención son, por ejemplo, la extracción manual de manchas de superficies duras o el uso en relación con un proceso de la máquina. Todos los hechos, temas o modalidades descritas para detergentes para lavar vajillas de la invención son también aplicables a esta materia de la invención. Por lo tanto, se hace referencia aquí de forma explícita a la descripción en el punto correspondiente, enfatizando que esta descripción se aplica también al uso de la invención anterior .

La invención proporciona además un método para la limpieza de superficies duras, en donde un detergente para lavar vajillas de la invención se usa en por lo menos una etapa de proceso.

Se da preferencia a un método máquina lavavaj illas . El detergente para lavar vajillas se dosifica preferiblemente en el interior de una máquina lavavaj illas durante el funcionamiento de un programa de lavado, antes del comienzo del ciclo de lavado principal o en el transcurso del ciclo de lavado principal. El equipo de medición o introducción de la composición de la invención en el interior de la máquina lavavajillas puede realizarse manualmente, pero la composición se dosifica preferiblemente en el interior de la máquina lavavaj illas por medio de la cámara de dosificación de la máquina lavava illas . En el transcurso del proceso de limpieza, preferiblemente no se dosifica suavizante de agua adicional y ningún agente de enjuague adicional en el interior de la máquina lavavaj illas . Todos los hechos, temas y modalidades descritas para detergentes para lavar vajillas de la invención o el uso de los mismos son también aplicables a los métodos de la invención. Por lo tanto, se hace referencia aqui explícitamente a la descripción en el punto correspondiente, enfatizando que esta descripción se aplica también a los métodos anteriores de la invención.

En una modalidad preferida, es un rasgo característico del proceso que la amilasa está presente en el líquido de limpieza a una concentración de 1 x 10"10-0.2% en peso, de 0.000001 a 0.12% en peso, de 0.000005 a 0.04% en peso, de 0.00001% a 0.03% en peso y más preferiblemente de 0.00005% a 0.02% en peso, y/o que la proteasa está presente en el líquido de limpieza a una concentración de 1 x 10~10-0.2% en peso, de 0.000001-0.12% en peso, de 0.000005-0.04% en peso, de 0.00001% a 0.03% en peso y más preferiblemente de 0.00005% a 0.02% en peso, donde las cifras dadas se basan en proteína activa en el licor de limpieza. En una modalidad preferida adicional, es un rasgo característico del proceso que se lleva a cabo a una temperatura entre 10°C y 70°C, preferiblemente entre 20°C y 60°C y más preferiblemente entre 30°C y 50°C.

Las proteasas usadas en composiciones de la invención, de acuerdo con los detalles anteriores, ventajosamente pueden usarse en detergentes y métodos de lavado de vajillas de la invención, especialmente los métodos para lavar vajillas automáticos. De este modo, se pueden usar ventajosamente para proporcionar una actividad proteolitica en las composiciones correspondientes.

Por consiguiente, la invención proporciona además el uso de una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene identidad de por lo menos 70% más de su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con otros por lo menos dos sustituciones de aminoácidos seleccionados del grupo que consiste de S3T, V4I, V193 y V199I, para la provisión de la actividad proteolitica en un detergente liquido para lavar vajillas, que comprende además una amilasa.

Todos los hechos, sujetos y modalidades descritas para los detergentes para lavar vajillas de la invención, usos o métodos también son aplicables a estos usos. Por lo tanto, se hace referencia aqui de forma explícita a la descripción en el punto correspondiente, enfatizando que esta descripción se aplica también a los usos de la invención anterior .

EJEMPLO: Determinación de la estabilidad de almacenamiento de un detergente liquido para lavar vajillas de la invención La formulación de base usada fue un detergente liquido bifásico para lavar vajillas en máquina que contiene amilasa de la siguiente composición (todas las cifras en porcentaje en peso) : (a) Fase de Enzima: Aglutinante 18.0 Alcohol de azúcar 12.0 Ag. tensioactivo no iónico (etoxilato de alcohol graso C8-C10 con 22 EO) 5.0 Compuesto de metal alcalino (base) 3.5 Ácido bórico 3.0 Fosfonato (HEDP) 1.5 Amilasa 1.2 Sal de Ca 1.2 Sal de Zn 0.2 Espesante 1.0 Colorante, perfume, Conservador 0.3 Agua a 97 La amilasa presente fue una variante de la oc-amilasa que, en comparación con la a-amilasa AA560 de acuerdo con SEC ID No. 3, cuenta con las siguientes modificaciones de la secuencia en el listado de la a-amilasa AA560: R118K, D183 * (supresión), G184 * (supresión), N195F, R320K, R458K (de Novozymes) . (b) Fase alcalina: Aglutinante 12.0 Carbonato de sodio 10.0 Polímero sulfo 7.0 Compuesto de metal alcalino (base) 4.0 Monoetanolamina 3.5 Fosfonato (HEDP) 4.0 Espesante 1.0 Colorante, perfume, Conservador 0.3 Agua a 100 La fase de la enzima de la formulación de base para los diferentes lotes de prueba se mezcló con 3% en peso o 3.5% en peso de las preparaciones de las siguientes proteasas (resultantes en cada caso, respectivamente, en 0.5% en peso y 0.58% en peso de activo proteína): Lote 1: variante de rendimiento mejorado de la proteasa de Bacillus lentus de acuerdo con SEC ID No. 2 de W02011/032988 (referencia); Lote 2: proteasa de acuerdo con SEC ID No. 2 (SEC ID No. 1 + S3T + V4I + V193M + V199I + L211D) .

Para determinar el rendimiento de limpieza, las dos fases fueron dosificadas en partes iguales (20 g de cada fase) . El lavado se efectúa dentro de un intervalo de pH entre pH 9 y pH 10 en una máquina lavavaj illas Miele G698SC en un volumen de 4 litros para un periodo de 60 minutos a una temperatura de 50 °C.

Se usó la vajilla con las siguientes manchas: carne picada (A) , yema de huevo (B) , copos de avena (C) y almidón (D) .

El rendimiento de la limpieza se evaluó visualmente por el método IKW estándar en una escala de 1 a 10, el valor de 10 es la mejor marca (ningún residuo perceptible) .

Las composiciones de limpieza de lotes 1 y 2 se ensayaron con respecto a su rendimiento de limpieza antes y después del almacenamiento a 40°C durante cuatro semanas. Los resultados se resumen en la tabla 1 a continuación: Tabla 1: Después del almacenamiento a 40 °C durante cuatro semanas, es claramente evidente que la composición de la invención, en virtud de la proteasa presente, exhibe claramente el rendimiento de limpieza mejorado, especialmente en las manchas sensibles a la proteasa A y B (rendimiento de limpieza proteolitica) . Además, también se mejora el rendimiento de limpieza sobre manchas sensibles a amilasa C y D (rendimiento de limpieza amilolitica) .

Claims (14)

REIVINDICACIONES

1. - Un detergente liquido para lavar vajillas que comprende (a) una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene identidad de por lo menos 70% más de su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con otras por lo menos dos sustituciones de aminoácidos seleccionadas del grupo que consiste de S3T, V4I, V193M y V199I, y (b) una amilasa.

2. - El detergente para lavar vajillas de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la proteasa comprende una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% y 98.5% de identidad sobre su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con la SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con las sustituciones de aminoácidos S3T, V4I, V193M y V199I.

3. - El detergente para lavar vajillas de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde la proteasa en la posición 99 tiene el aminoácido arginina (R) , y/o la proteasa en la posición 188 tiene el aminoácido alanina (A) , y/o la proteasa tiene una secuencia de aminoácidos según la SEC ID No. 2.

4. - El detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde la amilasa es una amilasa de una variante de la a-amilasa AA560 de acuerdo con la SEC ID No. 3 que tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis de las siguientes modificaciones de la secuencia de la lista de acuerdo a la a-amilasa AA560: R118K, 0183 * (supresión), G184 * (supresión), N195F, R320K, R458K.

5.- El detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la amilasa está presente en una cantidad de 1 x 10~8 a 5 por ciento en peso, basado en proteina activa, y/o la proteasa está presente en una cantidad de 1 x 10"8 a 5 por ciento en peso, basado en la proteina activa.

6.- El detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones l a 5, que comprende además un componente seleccionado de i. sustancia aniónica y/o polianiónica, y/o ii. sustancia catiónica y/o policatiónica, y/o iii. sustancia que tiene grupos hidroxilo y/o grupos polihidroxi lados .

7. - El detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, que comprende por lo menos un ingrediente adicional seleccionado del grupo que consiste de aglutinante, agente tensioactivo, polímero aniónico y combinaciones de los mismos.

8. - El detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende por lo menos una enzima adicional, especialmente una proteasa, amilasa, celulasa, hemicelulasa, mananasa, tanasa, xilanasa, xanthanase, xiloglucanasa, ß-glucosidasa, pectinasa, carragenina, perhidrolasa , oxidasa, oxidorreductasa o una lipasa, y mezclas de las mismas.

9. - El detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, que es un detergente para máquina lavavaj illas .

10. - El uso de un detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para la eliminación de manchas a sensibles proteasa sobre superficies duras .

11. - Un método para la limpieza de superficies duras, que comprende el uso de un detergente para lavar vajillas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en por lo menos una etapa de procedimiento.

12. - El método de acuerdo con la reivindicación 11, en donde la amilasa está presente en el liquido de limpieza a una concentración de 1 x 10~10-0.2% en peso, y/o la proteasa está presente en el liquido de limpieza a una concentración de 1 x 10"10 a 0.2% en peso.

13. - El método de acuerdo con la reivindicación 11 o 12, que se lleva a cabo a una temperatura entre 10 °C y 70°C, preferiblemente entre 20°C y 60°C y más preferiblemente entre 30°C y 50°C.

14.- El uso de una proteasa que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene identidad de por lo menos 70% más de su longitud total con la secuencia de aminoácidos especificada en SEC ID No. 1 y que tiene, en el listado de acuerdo con SEC ID No. 1, la sustitución de aminoácidos L211D en combinación con otros por lo menos dos sustituciones de aminoácidos seleccionados del grupo que consiste de S3T, V4I, V193M y V199I, para proporcionar la actividad proteolitica en un detergente liquido para lavar vajillas que comprende una amilasa.