MX2014002538A - Soluciones transdermicas de bloqueo de acceso venoso. - Google Patents

Abstract

Se describen soluciones que inhiben el crecimiento microbiano y métodos para emplear las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano para lavar y revestir dispositivos médicos. En modalidades alternativas, las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano incluyen combinaciones de una agente quelatador con un agente antimicrobiano de carboxilado de 4 a 9 átomos de carbono, por ejemplo, tal como ácido n-octanoico. También se describen métodos para utilizar estas soluciones que inhiben el crecimiento microbiano para revestir un dispositivo médico y para inhibir infecciones de catéter.

Description

SOLUCIONES TRANDERMICAS DE BLOQUEO DE ACCESO VENOSO CAM PO DE LA INVENCION Esta invención se refiere al cam po de dispositivos médicos transdérm icos perma nentes, tales como catéteres, así como al campo de soluciones q ue i nhi ben el crecim iento m icrobiano para lavar, bloquear, y revestir estos dispositivos médicos. Más específicamente, el cam po de esta i nvención se refiere a soluciones que inh iben el crecimiento microbiano útiles para mantener la permeabilidad del catéter y prevenir infecciones. La presente descripción también se refiere a métodos para utilizar las soluciones que inhiben el crecim iento microbiano de la invención en el manejo y mantenimiento de catéteres de acceso vascular transdérmicos.

ANTECEDENTES Los dispositivos médicos transdérm icos, incluyendo catéteres vasculares, se han vuelto esenciales en el manejo de pacientes hospitalizados o crónicamente enfermos. Desafortunadamente, los catéteres vasculares se han vuelto la fuente principal para sepsis adquirida en hospitales. De esta manera , el beneficio derivado de los dispositivos médicos transdérmicos, tales como catéteres vasculares, por lo reg ular es perturbado por compl icaciones infecciosas. Las oclusiones trom bóticas del lumen de catéteres venosos centrales (“CVC”) son otra complicación y por lo general conducirán a la remoción de catéteres.

Para reducir los problemas asociados con la formación de trombos, ahora es común “bloquear” catéteres de acceso intravascular entre usos sucesivos. El bloqueo típicamente involucra primero lavar el catéter con salina para remover sangre, medicamentos, desperdicio celular y otras substancias del lumen de catéter. Después de que el catéter ha sido lavado, después, una solución de bloqueo, típicamente heparina, es inyectada para desplazar la salina y llenar el lumen. La solución de bloqueo de heparina tanto excluye la sangre del lumen como inhibe activamente coágulos y formación de trombos dentro del lumen. Para dirigir la infección, varias substancias antimicrobianas han sido combinadas con la solución de bloqueo con el fin de inhibir la infección al mismo tiempo que la trombosis está siendo inhibida. Sin embargo, los problemas con la resistencia actual y continuamente emergente a substancias antimicrobianas, así como el sobre-uso (y de esta forma el riesgo incrementado de desarrollar resistencia) de antimicrobianos, es una preocupación siempre en aumento.

Staphylococcus epidermis y S. aureus representan un 75% de infecciones relacionadas con CVC. La especie Candida representa otro 10% a 15% de dichas infecciones. El uso de antibióticos contra estafilococo para prevenir estas infecciones se ha encontrado que reduce infecciones bacterianas relacionadas con CVC, pero solamente a expensas de la ocurrencia de incidencias más altas de infecciones fúngicas { Candida) . El material de glicocál ix fibroso prod ucido por Staphylococci y Candida ayuda a estos organismos a adherirse y pegarse a las superficies de cateteres. Estas capas de bio-pel ícula m icrobiológ ica se hacen de un material de glicocálix fibroso princi palmente polisacárido por naturaleza. La funda protectora provista por el g licocál ix en el sitio infectado efectivamente evita la elim inación y tratamiento de estas infecciones. Como resultado, se necesita q ue las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano sean efectivas para reducir o eliminar el glicocálix de m icroorganismos infecciosos típicamente asociados con la colonización e infección del catéter.

Los catéteres vasculares transdérm icos quedan envueltos por una funda de fibrina que subsecuentemente actúa para cubrir las superficies interna y externa de un catéter. Esta funda de fibrina proporciona organismos ta les como Staphylococci y Candida, con u na capacidad de adherencia mejorada a la superficie del catéter. A diferencia de estos m icrobios particu lares, los bacilos gram-negativos no se adhieren bien a la fibrina y fibronectina. Una composición q ue detenga la formación de fibrina de esta manera podría ser particu larmente útil para detener la colonización de Staphylococci, Candida, y si m i la res, en sitios de catéter transdérm ico.

E l ácido etilendiami notetraacético (“EDTA”) es una anticoagulante uti lizado en tubos de recolección de sangre. También es reconocido como un agente quelatador de calcio. El EDTA tam bién es reconocido por tener un efecto antibacteriano y anti-estafilococo (solo o en combinación) (Harper & Epis (1987) Microbios. 51: 107; Said et al. (1987) J. Med. Microbiol. 24:267; Root et al. (1988) Antimicrob. Agents Chemother. 32: 1627). Aunque estos investigadores encontraron que el EDTA es un bactericida, no se ha provisto ningún remedio o sugerencia sobre cómo el glicocálix microbiano de una infección relacionada con un dispositivo puede ser eliminada.

El ácido etilenglicol tetraacético (“EGTA”) es otro agente quelatador reconocido. Este agente no ha sido descrito como antimicrobiano. El diclorhidrato de trietilentetramina (trientina 2HCI) (“TTH”) es un agente quelatador reconocido que quelata el cobre. El TTH y otros agentes quelatadores, incluyendo ácido dietilentriamino-pentaacético (“DTPA”), son similarmente no reconocidos como teniendo actividad antimicrobiana.

Aunque los antibióticos de glicopéptido (vancomicina y teicoplanina) son efectivos contra estafilococos in vitroy en tejido, no son activos contra estafilococos adherentes embebidos en una capa de bio-película, tal como glicocálix. Aunque el lavado con dichos agentes puede exactamente destruir estos microorganismos, el riesgo de un rápido desarrollo de cepas tolerantes y resistentes en el paciente que es tratado hace a esto un procedimiento contraindicado en la mayoría de los casos.

La Patente de E.U.A. No. 5,362,754 de Raad (“Raad I”) describe composiciones para usarse con catéteres que incluyen un antibiótico de tetracielina, tal como minociclina y EDTA. Raad I enseña el uso de 10-100 mg/ml de EDTA en combinación con 0.001-100 mg/ml de minociclina y la combinación más preferida de 20-60 m/ml de EDTA y 2-9 mg/ml de minociclina. La Patente de E.U.A. No. 5,688,516 tambien de Raad (“Raad II”) en el Ejemplo 10 enseña que las composiciones de minociclina y EDTA de menos de 3 mg/ml de EDTA son inefectivas para controlar todo el crecimiento microbiano. Raad II además enseña: “Estos estudios también demuestran la mejora marcada de actividad inhibidora de anti -Candida albicans, en donde se utiliza una relación de minociclina a EDTA de 10:1 (10% de EDTA)”.

Las Patentes de E.U.A. Nos. 4,343,788 y 4,479,795 de R.V. Mustacich describen composiciones de polímero que contienen agentes antimicrobianos de carboxilato para incorporación en catéteres. La Patente de E.U.A. No. 4,392,848 de D.S. Lucas describe composiciones de polímero para incorporación en catéteres que son permeables a agentes antimicrobianos de carboxilato. La Patente de E.U.A. No. 4,489,097 de R.L. Stone (“Stone I”) describe soluciones intravenosas que contienen agentes antimicrobianos de carboxilato, preferiblemente ácidos n-hexanoico y n-octanoico y sus sales solubles en agua, farmacéuticamente aceptables. Stone describe el uso de estos agentes antimicrobianos de carboxilato para esterilizar soluciones intravenosas y para mantener estas soluciones intravenosas estériles durante manipulación. La administración de las soluciones de Stone, como se describe, en un catéter intravenoso para “bloquear” el cateter bajo una situación estática (sin flujo) podría dar como resultado una rápida oclusión del acceso debido al contraflujo de sangre hacia el dispositivo y la falta de características de coagulación de las composiciones descritas.

U n agente profiláctico para el mantenimiento de catéter debe tanto inhibir/elim inar la formación de glicocálix rico en polisacárido como elim inar Staphylococci y hongos. En vista de lo anterior, existe la necesidad de com posiciones mejoradas, equipos y métodos para lavar, bloquear y desinfectar catéteres. Dichas composiciones deben tener actividad antim icrobiana contra una amplio espectro de microorgan ismos , i ncluyendo preferiblemente hongos y bacterias tanto gram-positivas como gran-negativas, y de preferencia ser efectivas contra m icroorganismos planctónicos (de libre flotación) y adherentes embebidos en u na bio-pelícu la. Las composiciones deben disuadir el desarrollo de m icrobios resistentes, se relativamente no costosas, no tóxicas, compatibles con el material del catéter, seguras si , de forma inadvertida , se infunden sistemáticamente, fáciles de implementar, req uieren un m ínimo o nada de solución, y sean útiles con la mayoría o todos los tipos catéteres implantados, incluyendo catéteres de hemodiálisis y hemofiltración , catéteres IV, catéteres de diálisis peritoneal, catéteres urinarios, catéteres de quim ioterapia , y sim i lares . Al menos algunos de estos objetivos se satisfacen a través de las modalidades de la invención descrita aquí más adelante.

BREVE DESCRI PCION DE LA I NVENCION Las modalidades de la presente invención proporcionan soluciones q ue inhiben el crecimiento m icrobiano únicas y efectivas (por ejemplo, soluciones de bloqueo) q ue incluyen cantidades efectivas de un agente antimicrobiano de carboxilato, tal como un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono o agente antifúngico , y un agente quelatador. En una modalidad preferida, el agente quelatador es EDTA y el agente antim icrobiano de carboxi lato de 4 a 9 átomos de carbono es ácido n-octanoico. En otras modalidades, las soluciones que in hiben el crecimiento m icrobiano comprenden un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador diferente a EDTA. Una combinación preferida incluye un agente antimicrobiano de carboxi lato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador de calcio, tal como EGTA. El agente q uelatador que puede ser utilizado junto con la presente i nvención incluye, pero no se limita a, EDTA, EGTA, DTPA, ácido dimercaptosuccínico (“DMSA”) , deferoxamina, dimercaprol, d iclohidrato de trietilen-tetramina, citrato de zinc, una combinación de bismuto y citrato, penicilamina, etidronato y sales farmaceuticamente aceptable de los mismos. Los agentes quelatadores incluyen aquellos que quelatan cationes de metal divalente tales como Ca , Mg , Mn , Fe y Zn .

Se ha encontrado sorprendentemente que un un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono en com binación con un agente quelatador presente en una cantidad de aproximadamente 2 mg/ml, 1 mg/ml o menos, puede inhibir efectivamente el crecim iento microbiano o fúngico en un catéter. En cualq u iera de las modal idades aqu í descritas, las soluciones que inhiben el crecimiento m icrobiano pueden incluir una combinación de un agente q uelatador y un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, en donde la concentración del agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 2 mg/ml en la solución y la concentración del agente antimicrobiano está presente es una cantidad q ue varía de aproximadamente 0.05 a aproximadamente 5 mg/ml en la solución . En una modalidad preferida, la combinación incluye aproximadamente 0.5 mg/m l del agente quelatador y aproximadamente 1 .15 mg/ml del agente antimicrobiano de carboxi lato de 4 a 9 átomos de carbono.

Cuando el ácido n-octanoico es el agente antim icrobiano de elección, puede ser reconstituido a una concentración apropiada de u n frasco de ácido n-octanoico y l uego combinarse en la forma aquí descrita para proporcionar una solución con la concentración de ácido n-octanoico deseada de acuerdo con los métodos bien conocidos por aquellos expertos en la téen ica de soluciones que inhiben el crecim iento m icrobiano. La solución portadora, a manera de ejem plo, puede comprender salina , sal ina regulada en su pH con fosfato, dextrosa en ag ua, solución de Ringer o pH de agua ajustado a 5.2 o menos.

E n una modalidad , las soluciones que inhiben el crecimiento m icrobiano incl uyen una solución portadora farmacológicamente aceptable, tal como agua , solución de Ringer o pH salino ajustado a 5.2 o menos. Las soluciones que inhiben el crecim iento m icrobiano pueden tener un pH en uso de aproximadamente 6.9 o por abajo, en general en la escala de aproximadamente 3.5 a aproximadamente 5.8, o muy preferiblemente en la escala de pH de aproximadamente 3.5 a aproximadamente 5.2. Dentro de esta escala específica de pH, las concentraciones apropiadas de los compuestos de carboxilato en la forma de ácido libre rápida y eficientemente an iquilan una amplia variedad de bacterias y hongos.

En una modalidad , los agentes quelatadores proporcionan potentes g licocálix de in hibición potencial. Además, los agentes antimicrobianos de carboxi lato de 4 a 9 átomos de carbono de las composiciones, tales como ácido n-octanoico a altas concentraciones , preferiblemente tienen un efecto fúngico y una habilidad única para penetrar una capa de bio-pelicula de glicocálix rico en polisacárido. La combinación del agente antim icrobiano de carboxi lato de 4 a 9 átomos de carbono y agente quelatador puede proporcionar ventajosamente un agente anticoagulante, de inhibición de glicocálix, antibacteriano y antifúngico para la prevención de trombogénesis, adherencia microbiana e infecciones relacionadas con dispositivos. El ácido n-octanoico en combinación con EDTA es un ejemplo de dicha combinación que puede ser preferida para usarse en un equipo. Los agentes quelatadores diferentes a EDTA que son deseados incluyen EGTA y DTPA.

En otra modalidad, se proporcionan métodos para utilizar soluciones que inhi ben el crecim iento microbiano incluyendo el agente quelatador con el agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono en una variedad de aplicaciones terapéuticas. Dicha aplicación terapéutica es para prevenir infecciones por catéter. Un ejemplo de una composición que se utilizará en la práctica de estos métodos com prende ácido n-octanoico con un agente quelatador. El EDTA es un ejemplo de un agente quelatador contem plado para usarse en estos métodos; sin em bargo, se espera tam bién que otros agentes q uelatadores sean útiles.

Para usarse para mantener la permeabilidad del catéter, las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano pueden ser eficazmente uti lizadas con dispositivos médicos tales como un catéter venoso central , un catéter intravenoso periférico, un catéter arterial, u n catéter de Swan-Ganz, u n catéter de hemodiálisis, un catéter umbilical, un catéter de Silicon percutáneo sin túnel, un catéter venoso central tú nel izado con manguito, así como con un puerto venoso central subcutáneo.

Las modalidades de la invención también proporcionan dispositivos médicos , tales como catéteres, que están revestidos con cualquiera de las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano anterior. En una modalidad preferida , la solución que inhibe el crecim iento m icrobiano comprende EDTA y ácido n-octanoico. Cuando el agente quelatador es distinto al EDTA, la la solución que inhibe el crecimiento microbiano, en un ejemplo, incluye EGTA junto con un agente antimicrobiano tal como ácido n-octanoico. Los dispositivos medicos ilustrativos particulares que pueden ser preparados y revestidos con las soluciones de la presente invención se proporcionan en la lista anterior.

Las modalidades de la presente invención también proporcionan procedimientos para preparar dispositivos médicos revestidos con las composiciones aquí descritas. En una modalidad, un procedimiento comprende expone el dispositivo médico a una solución que inhibe el crecimiento microbiano que incluye un agente quelatador combinado con un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono durante una cantidad de tiempo suficiente para proporcionar un revestimiento sobre la superficie expuesta del dispositivo. Cuando la solución que inhibe el crecimiento microbiano está en una forma líquida, puede dejarse secar sobre la superficie del dispositivo para formar una película.

En una modalidad preferida de los procedimientos antes descritos, el dispositivo primero se trata con un agente tensoactivo antes de exponer el dispositivo a la solución que inhibe el crecimiento microbiano. Dichos agentes tensoactivos, a manera de ejemplo, incluyen cloruro de tridodecilmetil-amonio y cloruro de benzalconio.

En otro aspecto, se proporciona una solución de lavado de catéter. Muy preferiblemente, la solución de lavado de catéter comprende una concentración inhibidora de glicocálix de un agente quelatador y u na cantidad efectiva de un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono en una solución portadora farmaceuticamente aceptable (por ejemplo, pH salino ajustado a 5.2 o menos).

En una modalidad preferida de la solución , el agente quelatador es EGTA y el agente antimicrobiano carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono es ácido n-octanoico. Otra modalidad de la solución de lavado de catéter incluye aproximadamente 0.5 mg/ml de EDTA y aproximadamente 1 . 1 5 mg/m l de ácido n-octanoico. A manera de ejemplo, u na sol ución portadora es salina, agua, o una solución de Ringer con un pH ajustado a 5.2 o menos. La solución de lavado de catéter ventajosamente puede ser utilizada para inhibir la formación de glicocálix rico en polisacárido. De esta forma , las infecciones caracterizadas por dicha formación pueden ser efectivamente elim inadas.

Otro aspecto de la presente invención proporciona un método para preparar un dispositivo médico resistente a bio-película. En una modalidad , el método com prende exponer un dispositivo con las soluciones q ue inh i ben el crecimiento microbiano aquí descritas. Cualquiera de una variedad de catéteres puede ser tratado o revestido de acuerdo con el método descrito empleando téenicas de revestimiento bien conocidas por aquellos expertos en el campo.

Aunq ue el método puede ser utilizado para revestir virtualmente cualquier superficie en donde la formación de glicocálix va a ser deseablemente inhibida, el uso del método para preparar un dispositivo de catéter resistente a bio-película microbiana es particularmente contemplado. A manera de ejemplo, los catéteres que pueden ser preparados y tratados de acuerdo con las modalidades de la invención incluyen un catéter venoso central y un catéter de lumen triple. Se anticipa que el método proporcionará un dispositivo resistente a la formación de glicocálix rico en polisacárido, tal como aquel típico de Staphylococci .

En u n aspecto preferido del método descrito, un dispositivo médico resistente a bio-pel ícula se prepara utilizando una solución que inhibe el crecimiento microbiano de un agente quelatador y un agente antim icrobiano de ca rboxi lato de 4 a 9 átomos de carbono. Un ejemplo de dicha solución comprende una combinación de ácido n-octanoico y EDTA, o una combinación de un agente quelatador diferente a E DTA junto con un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono. Las varias escalas de concentración de los agentes antimicrobianos de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y agentes q uelatadores descritos anteriormente también se contemplan como útiles en las com posiciones para revestir un dispositivo médico.

En un aspecto , el método comprende preparar una solución que in hibe el crecim iento m icrobiano de la combinación deseada en una solución portadora de revestimiento adherente biocompatible. La superficie del dispositivo médico de interés después se expone a la solución q ue inh ibe el crecim iento microbiano durante un período de tiem po suficiente para perm itir la formación de una película o revestimiento de la solución sobre la superficie del dispositivo. Esto puede lograrse, por ejem plo, al sumergir el dispositivo en la solución . Muy preferiblemente, el dispositivo que será revestido es un catéter. Dicho tratam iento proporciona un catéter resistente a bio-película.

Las modalidades de la presente invención también proporcionan métodos para i nhibir la formación de gl icocálix rico en polisacárido en un puerto de catéter. El método en una modalidad comprende lavar el catéter periód icamente con una solución que inhibe el crecim iento microbiano q ue comprende una concentración inhibidora de glicocál ix de un agente quelatador y u n agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono en una solución portadora farmacológicamente aceptable.

Los métodos descritos pueden ser utilizados para inhibir infección virtualmente en cualquier catéter tunelizado o no tunelizado. Como parte de un régimen de mantenimiento de catéter, el catéter m uy preferiblemente va a ser lavado con una composición que comprende un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente q uelatador en una solución portadora farmacéuticamente aceptable. El régimen descrito se repite una vez a la semana, una vez cada 4 d ías, una vez cada 2 días, una vez al día (aproximadamente cada 24 horas) , dos veces al día, cada cuatro horas o según sea necesario de acuerdo con las necesidades del paciente.

En otro aspecto más, las modalidades de la invención proporcionan métodos para elim inar la formación de glicocálix microbiano, particularmente la formación de glicocálix rico en polisacárido (Staphylococcal) , en un l umen de catéter. El método, en una modalidad , com prende preparar una solución que inhibe el crecimiento microbiano que comprende un agente quelatador (por ejemplo, EDTA, EGTA, o ambos) junto con un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono (por ejemplo, ácidos n-butírico, n-pentanoico, n-hexanoico, n-heptanoico, n-octanoico o n-nonanoico y/o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos) en una sol ución portadora para proporcionar una composición de lavado, y lavar el catéter con una cantidad efectiva para inhibir el crecimiento microbiano de la composición de lavado.

Muy preferiblemente, el catéter será lavado con un volumen de aproximadamente 3 m i de la solución de ácido n-octanoico y EDTA descrita conteniendo aproximadamente 0.5 mg/ml de EDTA y aproximadamente 1 .1 5 mg/ml de ácido n-octanoico. El catéter puede ser lavado periódicamente a intervalos de una vez a la semana, una vez cada 4 d ías, una vez cada 2 d ías , una vez al día, dos veces al día, cada cuatro horas o según sea necesario de acuerdo con las necesidades del paciente con aproximadamente 2-3 mi de la solución de ácido n-octanoico y EDTA. El régimen de lavado del catéter simplemente puede constituir una vez cada que el catéter se utilice o se cambie. En u n aspecto preferido del método, el catéter va a ser lavada a intervalos de 4 horas con las soluciones aqu í descritas.

Las composiciones aq u í descritas de preferencia permanecen terapéuticamente efectivas para usarse como un agente de lavado de catéter después de almacenam iento a una temperatura refrigerada. Si n em bargo, la solución de ácido n-octanoico y EDTA debe ser llevada a tem peratura ambiente antes de uso en un animal o paciente.

La presente i nvención, en otro aspecto más, proporciona un equipo. En una modalidad , el equipo comprende un contenedor, tal como una jeringa, manteniendo un vol umen de una de las soluciones anteriores conteniendo un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador y un lumen de catéter implantadle para recibir la solución . El equipo además puede comprender un paquete, tal como una caja, charola, tubo, sobre, bolsa, o sim ilar, para mantener el contenedor. El volumen de la solución en el contenedor típicamente está en la escala de 1 ml-20 m i , de preferencia de 2 ml-10 mi, usualmente siendo de aproximadamente 2 ml-4 m i. Opcionalmente, el contenedor usualmente com prenderá una jeringa , o el ispositivo permitirá la introducción directa de la solución en el catéter permanente.

En otra modalidad, el equipo comprende un contenedor, tal como una jeringa con com partimentos, que comprende una pluralidad de compartimentos. Por ejemplo, el contenedor puede tener tres compartimentos, en donde uno de los compartimentos comprende un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, tal como ácido n-octanoico; el segundo compartimento comprende un agente quelatador, tal como EDTA; y el tercer compartimento comprende un diluyente, tal como salina, solución de Ringer, o agua a un pH aj ustado a 5.2 o menos. Los equipos que incluyen un portador adaptado para recibir al menos dos compartimentos constituyen aún otra modalidad del equipo. En estas modalidades, el agente quelatador podría ser incluido junto con el agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono dentro de un com partimento del contenedor. El segundo compartimento podría comprender un d iluyente, tal como aquellos descritos anteriormente. En una modalidad, el agente quelatador y el agente antimícrobiano se incluyen j untos en un primer compartimento del dispositivo en forma de polvo. Los componentes secos de preferencia podrían ser combinados con el dil uyente de un segundo compartimento para proporcionar una solución adecuada para uso.

En estas varias modalidades, el equipo incluye un agente quelatador. En modalidades particulares, el agente quelatador es EDTA, y el agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono es, a manera de ejemplo, ácido n-octanoico.

En otro aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para desinfectar un catéter implantado, que incluye introducir u na solución q ue comprende un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente q uelatador en una solución portadora farmacéuticamente aceptable en un lumen de un catéter, en donde al menos una porción del catéter es suficientemente porosa para permitir de difusión de la solución hacia afuera desde el lumen hacia la superficie externa del cateter y hacia los tejidos o la corriente sanguínea que rodea al catéter para inhibir la infección. El catéter implantado puede ser un catéter subcutáneo o transcutáneo permanente.

La habilidad para inhibir o prevenir infección del catéter implantado puede ser mejorada al utilizar catéteres en donde al menos una porción del cuerpo de catéter es suficientemente porosa para permitir que la solución bloqueadora antim icrobiana penetre el cuerpo de catéter y, preferiblemente pase hacia afuera (es decir, filtrar, destilar, fugar, difundir) hacia la reg ión de tejido que rodea el catéter. Aunque el uso de dichos cuerpos de catéter porosos o parcialmente porosos puede ser benéfico con m uchas soluciones bloqueadoras antim icrobianas, tales como aquellas enseñadas en las Patentes de E. U .A. Nos. 4, 1 86, 745; 4, 767,400; 4, 968, 306; 5, 077,281 ; 5, 91 3,856; 6, 949,087; 7 ,004, 923; y Publicaciones de Patente de E . U .A. Nos. 2006/0074388 y 2006/0253101 , es particularmente útil con los ácidos de la presente i nvención. Se apreciará que los agentes antimicrobianos de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono tienen pesos molecu lares y otras cualidades que les permiten penetrar fácilmente en y a través de m uchos materiales porosos. Los materiales porosos il ustrativos para la construcción del cuerpo de catéter incl uyen hule de silicón, PTFE expandido (por ejemplo, GORE-TRX®, mem branas médicas) , pel ículas de TEFLON®, materiales celulósicos naturales, regenerados o sem i-sintéticos tales como acetato de cel ulosa, diacetato de celulosa , cuprofan, y similares. Dichos materiales pueden ser formados en los cuerpos de catéter tu bu lares o pueden ser incorporados como un componente(s) separado en los cuerpos de catéter.

Se espera que las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano descritas sean efectivas para evitar la adherencia y colonización de superficies de catéter por S. aureus, S. epidermis, y hongos, así como efectivas tanto para tratar como para eliminar formaciones de glicocálix ya formadas de estos organismos infecciosos.

Se contempla que cuando sea apropiado, cualquier modalidad de la presente i nvención puede ser combinada con una o más de otras modalidades de la presente invención, aunq ue las modalidades se describen bajo diferentes aspectos o modalidades de la presente invención. La presente describe aspectos y ventajas adicionales, y serán evidentes a partir de la siguiente Descripción Detallada y las Figuras.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIG URAS Las Figuras 1 A y 1 B muestran métodos de acuerdo con la presente invención para bloquear y desinfectar un catéter transcutáneo.

Las Figuras 2A-2C muestran métodos de acuerdo con la presente i nvención para lavar, bloquear y desinfectar un catéter subcutáneamente implantado.

Las Figuras 3A-3C muestran métodos de acuerdo con la presente i nvención para lavar, bloq uear y desi nfectar un catéter de diálisis peritoneal .

La Figura 4 muestra una modalidad de la presente invención, en donde una solución bloqueadora antim icrobiana penetra un cuerpo de catéter implantado y de preferencia en el tejido que rodea al cuerpo de catéter.

La Fig ura 5 muestra un equipo construido de acuerdo con los principios de la presente invención .

La Fig ura 9 muestra una comparación de Octanoato de Na/EDTA y Heparina a través de aPTT.

DESCRIPCION DE DETALLADA Los detalles de una o más modalidades de la Invención se establecen en la siguiente descripción. Aunque cualquiera de los métodos y materiales sim ilares o equivalentes a aquellos aquí descritos pueden ser utilizados en la práctica o prueba de la presente i nvención , los métodos y materiales ahora se describirán. Otros aspectos, objetos , y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la descripción . En la especificación, las formas singulares también incluyen las formas plurales a menos que el contexto claramente d icte lo contrario. A menos que se defina de otra manera, todos los térm inos téenicos y científicos utilizados aquí tienen el m ismo significado comúnmente entendido por algún experto en la técnica a la cual pertenece esta invención . En el caso de conflicto, la presente Especificación lo controlará.

Definiciones Los térm i nos que se presentan a continuación tienen los siguientes sign ificados a menos que se indique otra cosa.

El térm ino “bio-pelícu la”, como se utiliza aquí, se refiere a un glicocál ix rico en polisacárido que típicamente acompaña a colonización de superficie microbiana.

Como se utiliza aqu í, un dispositivo o superficie “resistente a bio-pel ícula” es una superficie o dispositivo que evitará la adherencia o crecim iento de organismos que produzcan el material de g licocálix rico en polisacárido. Dichos organismos incluyen, pero no se lim itan a, las especies Staphylococcus aureus y S. epidermis.

El térm ino “concentración inhibidora de glicocálix”, como se utiliza aq u í, se refiere a una concentración efectiva para degradar, disolver, o de otra manera inhibir un glicocálix rico en polisacárido. A manera de ejemplo, dicho glicocálix rico en polisacárido es característico de infecciones por estafilococo establecidas de S aureus y S. epidermis.

Como se utiliza aquí, los términos “implantado”, “subdérmico”, “subcutáneo” y “permanente” se utilizan de manera sinónima para referirse a la colocación de un dispositivo médico, por ejemplo, un catéter. Estos catéteres im plantados típicamente tendrán un extremo distal , el cual está al menos parcialmente abierto hacia el lumen del cuerpo. Más com únmente, los catéteres serán catéteres intravascu lares, en donde el extremo d istal está implantado en o unido al vaso sangu íneo, usualmente una vena , pero en algunos casos una arteria. Los cateteres intravasculares ilustrativos incluyen catéteres de hemodiál isis y de hemofiltración, así como también catéteres intravenosos. Los catéteres intravenosos pueden ser utilizados para una amplia variedad de propósitos, incluyendo infusión de fluido y sum inistro de fármaco. Los catéteres unidos a otro tipo de vasculatura i ncl uyen catéteres de diálisis peritoneal, los cuales están abiertos hacia la cavidad peritoneal y catéteres urinarios, los cuales se abren hacia la vej iga.

Los dispositivos médicos, tales como catéteres, los cuales se describen aquí, pueden ser transcutáneamente implantados o subcutáneamente implantados. Por “transcutáneamente implantado” se quiere dar a entender que el extremo d istal del catéter está unido a o im plantado dentro de un lumen de cuerpo objetivo y un extremo próximo del catéter está u bicado de manera externa al paciente. Una porción intermedia del catéter de esta manera pasará a través de o penetrará la piel del paciente, y el extremo próximo del catéter usualmente tendrá una maza para perm itir la unión selectiva de tubos de infusión, jeringas, bolsas de solución , y similares. Más comúnmente, la maza de u nión próxima tendrá un ajuste de tipo luer. Por “subcutáneamente im plantado” se quiere dar a entender que todo el catéter es implantado por abajo de la piel y ninguna porción del catéter se extiende a través de la piel. Dichos catéteres subcutáneamente implantados típicamente están unidos a una maza totalmente implantada en sus extremos próximos. La maza permite el acceso percutáneo a traves de una aguja u otro elemento de penetración.

Las modalidades de la presente invención proporcionan soluciones que inhiben el crecimiento microbiano de agentes antim icrobianos de carboxilato de 4 a 6 átomos de carbono en com binación con agentes q uelatadores . Se espera que estas soluciones que i n hiben el crecimiento microbiano sean particularmente útiles para evitar la formación de la “bio-película” o glicocálix rico en polisacárido que típicamente acompañan a la colonización de superficie microbiana . En particular, se espera que las soluciones que inhiben el crecim iento microbiano sean más efectivas para destruir glicocálix estafilococo y para inhibir su formación. Esta característica hace a las soluciones que inhiben el crecim iento m icrobiano de la presente invención particularmente útiles en el tratam iento de infecciones por estafilococo, en donde se ha formado o potencialmente se puede formar un glicocálix rico en polisacárido, así como en la prevención y tratamiento de infección por Staphlycoccus y Candida.

Las modal idades de la presente invención también proporcionan dispositivos médicos tratados o revestidos, tales como catéteres, que evitan la colonización por estafilococo u hongos. El revestimiento o película provistos en estos dispositivos comprenden una agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, tal como ácido n-octanoico, y un agente quelatador. Una combinación particularmente preferida de ingredientes de las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano incluye ácido n-octanoico y EDTA. Otras combinaciones comprenden una concentración inhibidora de glicocál ix o una cantidad de un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador diferente a EDTA. Los dispositivos revestidos con estas combinaciones de agentes tam bién se consideran como útiles, Agentes Antimicrobianos Los agentes antim icrobianos de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono en cualquiera de las soluciones que inhiben el crecimiento m icrobiano y métodos aqu í descritos pueden incluir ácidos orgánicos de alquilo, alq uenilo o alqumilo de 4 a 9 átomos de carbono no aromáticos solubles en ag ua, o mezclas de los mismos, o cualquiera de sus sales farmacéuticamente aceptables, solubles en agua.

Dichas sales incluyen , por ejemplo, sales de sodio, potasio y amonio. Las sales de sodio y potasio son preferidas.

Aunque los varios compuestos de carboxilato exhiben diferentes grados de actividad antimicrobiana (por mol), los agentes Solubles en agua que tienen la fórmula R-COOH , en donde R = n-alquilo de 3 a 8 átomos de carbono, así como sus sales farmacéuticamente aceptables o una combinación de los mismos, exhiben una excelente actividad antim icrobiana. Los ácidos n-hexanoico y n-octanoico y sus sales solubles en agua, farmacéuticamente aceptables son muy preferidos, siendo más preferido el ácido n-octanoico. Estos materiales en su forma de ácido li bre rápidamente an iquilan de manera esencial todos los patógenos gram-positivos y g ram-negativos, y Candida, a bajas concentraciones de solución en la escala de pH del ácido.

La actividad m icrobiana de los antimicrobianos de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está directamente relacionada con la presencia de sus respectivos ácidos libres en solución. La concentración de ácido carboxílico libre en solución, opuesto a la forma de sal de carboxilato (aniónica) , es una función del pH de la solución. Se pueden util izar sales de ácido carboxílico, pero solo siempre que el pH de la solución sea tal que una concentración m ínima letal (“M LC”) del ácido libre esté presente. Por consiguiente, la cantidad de pacido o sal de ácido utilizada variará un poco con el pH de uso. La cantidad de u na sal de ácido dada o ácido que proporcionará la MLC a un pH dado dependerá del pKa del ácido. Claro que, conociendo el pKa, la MLC del ácido particular y el pH de uso, la cantidad de cualquier ácido de 4 a 9 átomos de carbono o sal de ácido que se utilizará fácilmente se calcula a partir de la siguiente fórmula: pKa = pH + log([HCx]/[Cx-]) , en donde [HCX] es la concentración de ácido libre de longitud de cadena x y [Cx_] es la concentración de su anión.

En una modalidad , el agente antimicrobiano está presente en una cantidad q ue varía de aproximadamente 0.05 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml en la solución que inhibe el crecimiento microbiano. Más específicamente, la cantidad de agente antim icrobiano puede ser de aproxi madamente 0.05 mg/ml, 0.1 mg/ml, 0.25 mg/ml , 0.5 mg/m l, 0.75 mg/ml , 1 mg/ml, 1 .25 mg/ml, 1 .5 mg/ml, 1 .25 mg/ml , 2 mg/ml, 2.25 mg/ml , 2.5 mg/ml, 2.75 mg/ml, 3 mg/ml, 3.25 mg/m l , 3.5 mg/ml, 3.75 mg/ml , 4 mg/ml, 4.25 mg/ml, 4.5 mg/ml, 4.75 mg/ml , 5 mg/ml , y sim ilares. Se debe apreciar que cualquiera de dos cantidades del agente antimicrobiano aquí presentadas además pueden representar puntos finales en una escala terapeuticamente efectiva del agente antim icrobiano. Por ejemplo, las cantidades de 0.5 mg/ml y 1 .5 mg/ml pueden representar las cantidades ind ivid uales del agente antimicrobiano así como una escala preferida del agente antimicrobiano en la solución de aproximadamente 0.5 mg/ml a aproximadamente 1 .5 mg/m l .

Agentes Quelatadores y Reguladores de pH Además de los agentes antim icrobianos de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, las sol uciones que inhiben el crecimiento m icrobiano y los métodos aquí descritos también incluyen uno o más agentes quelatadores. Cualquiera de las soluciones que inhiben el crecim iento microbiano y los métodos aquí descritos también pueden incluir uno o más reguladores de pH adecuados. Ejemplos no limitante de agentes quelatadores y reguladores de pH adecuados que pueden ser uti lizados en varias modalidades de la presente invención pueden ser seleccionados a partir de los Cuadros 1 y 2, respectivamente. También se pueden utilizar sales farmaceuticamente aceptables (por ejem plo, edetato de calcio disódico) de cualquiera de los agentes quelatadores listados en el Cuadro 1 .

CUADRO 1 Agentes Quelatadores Deferoxamina Dimercaprol EDTA EGTA DTPA DMSA Penicilam ina Acido dimercaptosuccínico CUADRO 2 Agentes Reguladores de pH Acetato-Acido Acético Citrato-Acido C ítrico Fosfato-Acido Fosfórico Tartrato-Acido Tartárico Malato-Acido Mélico Fumarato-Acido Fumárico Malonato-Acido Malónico Barbiturato-Acido Barbitúrico En ciertas modal idades preferidas, los agentes antimicrobianos de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono se combinan con EDTA. El EDTA está dispon ible como formu laciones de E DTA disódico y EDTA de sod io. Una forma preferida es EDTA de sodio.

En modalidades alternativas, los agentes antimicrobianos de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono se combinan con agentes quelatadores d istintos a EDTA. Cuando la administración de demasiada solución bloqueadora o la administración de la solución bloqueadora demasiado rápido podría producir formación de complejos de calcio conduciendo a h ipocalcemia, potencialmente dando como resultado arritmias ventriculares y muerte repentina, el uso de dicho agente quelatador a altas concentraciones sería indeseable.

Como será evidente para aquellos expertos en la teenica, las listas anteriores solo pretenden ser ilustrativas. También se espera que otros agentes q uelatadores, asi como reguladores de pH, sean útiles y efectivos en combinación con un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono. Estas combinaciones formuladas como u n revesti iento de preferencia además incluirán un material, tal como un agente tensoactivo catiónico (por ejemplo, cloruro de tridodecilmetil-amonio o cloruro de benzalconio), que mejorará las características de adherencia o formación de película, de la solución. Como una solución para lavar u otro uso medicinal, los ingred ientes serán suspend idos en una solución portadora tal como salina estéril , salina regulada en su pH con fosfato, dextrosa en agua, solución de Ringer, agua destilada o cualquier otra solución fisiológicamente aceptable con un pH ajustado a 5.2 o menos.

En una modalidad, el agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml en la solución que inhiben el crecimiento microbiano. Más específicamente, la cantidad del agente quelatador puede ser de aproximadamente 0.01 mg/ml, 0.05 mg/ml, 0.1 mg/ml, 0.15 mg/ml, 0.2 mg/ml, 0.25 mg/ml, 0.3 mg/ml, 0.35 mg/ml, 0.4 mg/ml, 0.45 mg/ml, 0.5 mg/ml, 0.55 mg/ml, 0.6 mg/ml, 0.65 mg/ml, 0.7 mg/ml, 0.75 mg/ml, 0.8 mg/ml, 0.85 mg/ml, 0.9 mg/ml, 0.95 mg/ml, 1 mg/ml, 1.05 mg/ml, 1.1 mg/ml, 1.15 mg/ml, 1.2 mg/ml, 1.25 mg/ml, 1.3 mg/ml, 1.35 mg/ml, 1.4 mg/ml, 1.45 mg/ml, 1.5 mg/ml, 1.55 mg/ml, 1.6 mg/ml, 1.65 mg/ml, 1.7 mg/ml, 1.75 mg/ml, 1.8 mg/ml, 1.85 mg/ml, 1.9 mg/ml, 1.95 mg/ml, 2 mg/ml, y similares. Se debe apreciar que cualquiera de dos cantidades del agente quelatador aquí presentadas además puede representar puntos finales en una escala terapéuticamente preferida del agente quelatador. Por ejemplo, las cantidades de 0.2 mg/ml y 0.5 mg/ml pueden representar las cantidades individuales del agente quelatador así como una escala preferida del agente quelatador en la solución de aproximadamente 0.2 mg/ml a aproximadamente 0.5 mg/ml.

Métodos para Lavar, Bloquear y Desinfectar un Catéter Haciendo referencia ahora a las Figuras 1A y 1B, se describirán métodos de acuerdo con las modalidades de la presente invención para bloquear un catéter venoso implantado. El catéter venoso 10 será im plantado a través de la piel S de un paciente en una vena V para infusión del paciente. Cuando se desea desconectar al paciente de la fuente de infusión, será necesario bloq uear el catéter para inhibir el taponamiento y ensuciamiento causados por la coagulación, y de preferencia inhi bir o elim inar más el riesgo de infección . En la Figura 1 A se muestra un tubo 12 conteniendo una solución IV normalmente conectado a la maza próxima 14 del catéter 10. La línea IV 1 2 será desconectada, y el catéter 1 0 se enjuaga con una solución de lavado. Después de completar el lavado, se introduce una solución de bloqueo de un agente anti microbiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente q uelatador para llenar el lumen interno del catéter 10, como se muestra en la Figura 1 B. Usualmente, un volumen suficiente de la solución de bloqueo será introducido para llenar completamente el lumen del catéter implantado 10, con un exceso m ínimo pasando desde el extremo distal 16 del catéter. La pérdida de solución en exceso hacia un vaso sanguíneo o muchos otros lúmenes de cuerpo, sin embargo, generalmente no será un problema. La “colum na” de la solución entonces ocupará el lumen interno, y la maza próxima será escalada, ayudando a retener la solución en su lugar. La solución de bloqueo de un agente antimicroblano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador efectivamente inhibirá la formación de coágulo y coagulación en el extremo distal 6 así como inhibirá o eliminará la infección a través del catéter. Cuando se desea volver a unir al paciente a la fuente IV, la solución será removida y el lumen de cateter será lavado.

Haciendo referencia ahora a las Figuras 2A-2C, se describirán el lavado y bloqueo de un catéter 20 subcutáneamente implantado utilizado para acceso a hemodiálisis. El catéter 20 es implantado entre un vaso sangu íneo objetivo BV, típicamente una vena, y un puerto implantado 22. Durante la hemodiálisis, la sangre es retirada a través del catéter 20, a través del puerto 22 y externamente a través de una aguja N y l inea de conexión 23 utilizada para tener acceso, de manera percutánea, al puerto 22 (Figura 2A). Alternativamente, el puerto y el catéter pueden ser utilizados para regresar la sang re tratada hacia el paciente.

Cuando se desea finalizar un tratamiento de hemodiálisis (o hemofiltración) , una solución de lavado (“FS”) de un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador será introducida a través de la aguja N (típicamente desde una jeringa, la cual está unida a la línea de conexión 23) para lavar el lumen, como se muestra en la Figura 2B. Después de com pletar el lavado, se inyecta una solución de bloqueo desde un contenedor tal como una jeringa 20 a través de la línea 23/puerto 22 y hacia el lumen del catéter 20 para desplazar la solución de lavado y bloquear el catéter (Figura 2C). La solución de bloqueo permanecerá en su lugar dentro del catéter 20. Alternativamente o además, la solución de bloqueo puede ser una solución de un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador.

Los métodos de la presente invención también pueden ser utilizados para lavar y bloq uear catéteres no vasculares, tales como catéteres de diálisis peritoneal 30, como se muestra en las Figuras 3A-3C. Después de un tratamiento de diálisis peritoneal, el dializado utilizado es retirado del catéter 30, como se m uestra en la Figura 3A. Después de que el dializado ha sido suficientemente removido, el catéter de diálisis 30 es lavado con una solución de lavado FS de un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador, como se muestra en la Figura 3B. Después del lavado, la solución de bloqueo es introducida al catéter de diálisis peritoneal 30, como se muestra en la Figura 3C, de manera que llena el lumen del catéter, como se describió previamente con los catéteres vasculares. Alternativamente o además, la solución de bloqueo puede ser una solución de u n agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador.

Haciendo referencia ahora a la Figura 4, el uso de una solución de bloqueo conteniendo un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador puede ser mejorado al utilizar un catéter implantado, el cual se forma al menos en parte de un material poroso. Cuando el lumen 40 del cuerpo de catéter poroso 42 se llena con una solución conteniendo un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador, la solución será capaz de penetrar lentamente (es decir, filtrar) en el cuerpo de catéter y hacia afuera en el tejido T que rodea el catéter, como se m uestra por las flechas en la Figura 4. De esta manera, las propiedades antim icrobianas de la solución de bloqueo serán completamente limitadas al lumen interior del cateter, pero también serán efectivas sobre la superficie del catéter y en la región de tejido inmediatamente circundante al cuerpo de catéter. Los materiales particularmente adecuados y propiedades de porosidad para los cuerpos de catéter han sido establecidos anteriormente.

Haciendo referencia a hora a la Fig ura 5, los equipos de acuerdo con la presente invención incluirán al menos un contenedor 60, tal como una jeringa, para contener un volumen de una solución de bloq ueo de un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador y un lumen de catéter ¡mplantable para recibir la solución. El volumen típicamente estará dentro de las escalas establecidas aquí. Los equipos además pueden contener un paq uete 62 para mantener el contenedor 60. El paquete puede ser cualquier paquete de dispositivo médico convencional, incluyendo cajas, tubos, sobres, charolas y bolsas. Además, el equipo puede contener instrucciones para uso (“I FU”) estableciendo un método para bloq uear y/o desinfectar un catéter implantado al introd ucir la solución desde el contenedor hacia un lumen del catéter ¡mplantable entre uso sucesivos del catéter.

EJEMPLOS La presente invención además se define en los siguientes Ejemplos. Se debe entender q ue estos ejemplos, aunque indican modalidades preferidas de la invención , se proporcionan a manera de ilustración solamente. A partir de la discusión anterior y estos Ejemplos, un experto en la téenica puede determinar las características esenciales de esta i nvención , y sin apartarse del espíritu y alcance de la misma, puede hacer arios cambios y modificaciones de la invención para adaptarla a varios usos y condiciones.

Ejemplo 1 - Evaluación de soluciones q ue inhiben el crecimiento microbiano Los siguientes estudios proporcionan prueba antimicrobiana/ anti-fúngica de soluciones que inhiben el crecimiento microbiano formuladas de cuerdo con la presente descripción .

Staphylococcus Aureus Resistente a Meticili na (“MRSA”) U n cultivo de almacén de Staphylococcus aureus se mantuvo como un cultivo de almacén congelado a -70°C hasta uso. La prueba bacteriana utilizó Staphylococcus aureus asilado de sangre humana. Se preparó una suspensión de célula a partir del cultivo de almacén congelado y se cultivó en un caldo de soya tríptica (“TSB”) para producir aproximadamente 1 x1 08 un idades de formación de colonia (“CFU”) por mililitro para MRSA. La concentración final de la solución de inoculo se confirmó uti lizando cuentas de placa .

Prueba Bacteriana - Para la prueba, se inocularon 9.9 m i de cada solución de prueba con 100 ul de la suspensión de célula de MRSA para prod ucir una concentración de celula final de aproximadamente 1 x1 0® CFU/ml. Esto representa una dilución de 1 : 100 del cultivo de inicio de 1 x108 CFU/ml ; la concentración de célula inicial se calculó basándose en la cuenta de placa de inoculo. Cada prueba o solución de cuenta se evaluó por triplicado. Las muestras se recolectaron a T = 1 hora.

Muestreo de organismos tratados para crecimiento - Cada muestra se diluyó en serie en PBS (pH 7.0) y colocó en placas por duplicado en placas de agar de soya tríptica (“TSA”). Todas las placas se incubaron invertidas a 37°C durante 24 horas. Para el volumen restante de la muestra tratada: 1 ) cada muestra se filtró a través de una membrana de filtro de 0.22 m?h , y 2) cada filtro se enjuagó con 15 m i de agua estéril. El filtro se colocó directamente sobre una placa de TSA y se incubó sin inversión durante 24 horas a 37 °C .

Análisis - La CFU/ml para cada solución se transformó logarítm icamente (base 1 0). En casos en donde las cuentas de placa fueron de cero, un valor de 0.5 fue substituido por una de las cuentas de cero. Este valor substituido fue escalado, basándose en la dilución en placa o volumen filtrado. Los resultados de tres experimentos fueron promediados para determinar la densidad de registro media y se calculó la desviación estándar asociada. Se calcularon las reducciones de reg istro para los cultivos tratados con la solución de bloqueo al substraer la densidad de registro media a las 24 horas desde el tiempo cero.

Pseudomonas aeruginosa Se desarrolló Pseudomonas aeruginosa (una bacteria gram-negativa representativa) a un crecim iento de fase de registro definido en cultivo. Las muestras representativas del cultivo se incubaron/trataron durante un tiempo definido con varias soluciones de veh ículo (solvente) o de bloqueo. Las al ícuotas de las muestras tratadas se colocaron en placas sobre placas de agar y se realizaron cuentas de colonia después de un tiempo suficiente de crecimiento para valorar la eficacia del bloqueo en la aniquilación de los organismos de interés.

Cepa bacteriana y soluciones de cultivo - Un cultivo de almacén de Pseudomonas aeruginosa que será probado se mantuvo como un cultivo de almacén congelado a -70°C hasta uso. La prueba bacteriana utilizó Pseudomonas aeruginosa asilado de sangre humana. Se preparó una suspensión de célula a partir del cultivo de almacén congelado y se cultivó en TSB para producir aproximadamente 1 x108 CFU por mililitro para P. aeruginosa. Para referencia, una unidad 0.5 McFarland típicamente reflejará este n úmero aproximado de organismos. La concentración final de la solución de inocu lo se confirmó utilizando cuentas de placa.

Prueba Bacteriana - Para la prueba, se inocularon 9.9 mi de cada solución de prueba con 100 ul de la suspensión de célula de P. aeruginosa para prod ucir una concentración de célula final de aproximadamente 1 x1 0 CFU/ml. Observar que esto representa una dilución de 1 : 1 00 del cultivo de partida de 1 x 108 CFU/ml. Se calculó la concentración de celula inicial basándose en la cuenta de placa de inoculo. Cada solución de prueba o de control se evaluó por triplicado. Las muestras se recolectaron a T = 1 hora. Cada muestra se diluyó en serie en PBS (pH 7.0) y se colocó en placas por duplicado en placas de TSA. Todas las placas se incubaron invertidas a 37°C durante 24 horas. Para el volumen restante de la muestra tratada : 1 ) cada muestra se filtró a través de una membrana de filtro de 0.22 mm , y 2) cada fi ltro se enjuagó con 15 mi de agua estéril . El filtro se colocó directamente sobre una placa de TSA y se incubó (sin inversión) durante 24 horas a 37°C.

Análisis - La CFU/m l para cada solución se transformó logarítm icamente (base 1 0) . En casos en donde las cuentas de placa fueron de cero, un valor de 0.5 fue substituido por una de las cuentas de cero. Este valor substituido fue escalado, basándose en la dilución en placa o volumen filtrado. Los resultados de tres experimentos fueron promediados para determinar la densidad de registro med ia y se calculó la desviación estándar asociada. Se calcularon las reducciones de registro para los cultivos tratados con la solución de bloqueo al substraer la densidad de registro media a las 24 horas desde el tiempo cero.

Candida albicans Se desarrolló Candida albicans (un hongo/levadura representativo) a un crecimiento de fase de registro definido en cultivo. Los ejemplos representativos del cultivo se incubaron/ trataron durante un tiempo defin ido con varias soluciones de veh ícu lo (solvente) o de bloqueo. Las al ícuotas de las muestras tratadas se colocaron en placas sobre placas de agar y se realizaron cuentas de colonia despues de un tiem po suficiente de crecimiento para valorar la eficacia del bloq ueo en la aniquilación de los organismos de interés.

U n cultivo de almacén de Candida albicans ATCC se mantuvo como un cultivo de almacén congelado a -70°C hasta uso. La prueba bacteriana utilizó Candida albicans ATCC # 90028 aislado de sangre humana. Se preparó una suspensión de célula a partir del cultivo de almacén congelado y se cultivó en TSB para producir aproximadamente 1 x 1 08 CFU por mililitro para C. albicans. Para referencia, una unidad 0.5 McFarland típicamente reflejará este número aproximado de organismos. La concentración final de la solución de inoculo se confirmó utilizando cuentas de placa.

Prueba Bacteriana - Para la prueba, se inocularon 9.9 mi de cada solución de prueba con 100 ul de la suspensión de célula de C. albicans para producir una concentración de célula final de aproximadamente 1 x 1 06 CFU/ml. Observar que esto representa una dilución de 1 : 100 del cultivo de partida de 1 x 108 CFU/ml. Se calculó la concentración de célula inicial basándose en la cuenta de placa de inoculo. Cada solución de prueba o de control se evaluó por triplicado. Las muestras se recolectaron a T = 1 hora.

M uestreo de organismos tratados para crecimiento - Cada muestra se diluyó en serie en PBS (pH 7.0) y colocó en placas TSA.

Todas las placas se colocaron en placas por duplicado y se incubaron invertidas a 37°C durante 24 horas. Para el volumen restante de la muestra tratada: 1 ) cada muestra se filtró a traves de una membrana de filtro de 0.22 mhi , y 2) cada filtro se enjuagó con 1 5 mi de agua estéri l. El fi ltro se colocó directamente sobre una placa de TSA y se incubó (sin inversión) durante 24 horas a 37°C.

Análisis - La CFU/ml para cada solución se transformó logarítmicamente (base 10). En casos en donde las cuentas de placa fueron de cero, un valor de 0.5 fue substituido por una de las cuentas de cero. Este valor substituido fue escalado, basándose en la dilución en placa o volumen filtrado. Los resultados de tres experimentos fueron promediados para determinar la densidad de registro media y se calculó la desviación estándar asociada. Se calcularon las reducciones de registro para los cultivos tratados con la solución de bloqueo al substraer la densidad de registro media a las 24 horas desde el tiempo cero. El Cuadro 3 muestra el resumen de los resultados para el estudio 1 .0 discutido anteriormente.

CUADRO 3 Resumen del Estudio 1.0 pH final : 5.0 Los valores reportados son el promedio de tres m uestras *CFU : U nidades de formación de colonia TNTC: Demasiados números para contar CUADRO 4 Resumen de Concentración de Estudio 2.0 CUADRO 5 Resumen de Estudio 2.0 Los valores reportados son el promedio de tres m uestras *CFU : Unidades de formación de colonia TNTC: Demasiados números para contar Los protocolos para Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus fecalis VRE, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, y Serratia marcescens fueron similares o idénticos excepto para el m icroorganismo probado. Es evidente a partir del estudio 1 .0 q ue el caprilato de sodio a una concentración de 0.575 mg/ml y EDTA disód ico a una concentración de 0.5 mg/ml pH aj ustado a 5.0 con u n reg ulador de pH fue efectivo para una reducción de 7-8 log de microorganismos médicamente importantes.

Además, el caprilato de sodio y EDTA disódico a una concentración tan baja como 0.0625 mg/ml pH fue efectivo para una reducción de 6- 7 log de al menos un m icroorganismo medicamente importante (por ejemplo, Pseudomonas aeruginosa) . En resumen, el estudio 1 .0 demostró que las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano que tienen u n agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quélatador fueron sinergísticas a concentraciones de 1 mg/ml de agente quélatador o menores.

Como se muestra en los Cuadros 4-5 (estudio 2.0), el EDTA disódico en un regulador de pH de citrato a la concentración reportada dio como resultado una reducción de 2 log pero no fue capaz de completar la aniquilación de los organismos probados. Sin embargo, la adición de 1 .1 5 mg/ml de caprilato de sodio a la base de EDTA disódico, regulador de pH de citrato dio como resultado una reducción de 8 log de organ ismos de prueba.

A partir de los estudios 1 .0 y 2.0, las concentraciones efectivas del agente quélatador evaluado estuvieron bien por abajo de concentraciones previamente reportadas y a una concentración que enormemente pudo reducir el riesgo potencial de muerte cardiaca repentina asociada con dosis más altas. Además, las soluciones que inhiben el crecimiento m icrobiano evaluadas fueron capaces de mantener catéteres intravenosos en el estado “Bloqueado” sin flujo en la composición propuesta como se demuestra en la Figura 6.

A concentraciones de m icroorganismos que se esperan ver en dispositivos de acceso intravenoso permanentes, se concluyó que las soluciones que inhiben el crecimiento microbiano que tienen concentraciones de agentes quelatadores de acuerdo con la invención fueron capaces de mantener estos dispositivos y efectivamente reducir o elim inar los microorganismos como una fuente de infección sistem ica.

Se debe entender q ue varios cambios y modificaciones a las modalidades actualmente preferidas aquí descritas serán evidentes para aquellos expertos en el campo. Tales cambios y modificaciones pueden hacerse sin apartarse del espíritu y alcance de la presente invención y sin d ism inuir sus ventajas pretendidas. Por lo tanto, se pretende que tales cambios y modificaciones sean cubiertos por las reivindicaciones anexas.

Claims (38)

REIVI NDICACION ES

1 . Una solución que inhibe el crecimiento microbiano que comprende un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, un agente quelatador y un regulador de pH , en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono comprende caprilato de sodio, el agente quelatador comprende ácido etilendiaminotetraacético disódico y está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml, y el regulador de pH comprende citrato.

2. La solución que inhibe el ere cim iento microbiano de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.05 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml.

3. La solución q ue inhibe el crecimiento microbiano de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.1 mg/ml a aproximadamente 1 mg/m l.

4. La solución q ue inhibe el crecim iento microbiano de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.25 mg/ml a aproximadamente 0.5 mg/m l.

5. La solución que inhibe el crecim iento microbiano de acuerdo con la reivindicación 1 , que además comprende una solución portadora farmacológicamente aceptable.

6. La solución que inhibe el crecim iento microbiano de acuerdo con la reivindicación 5, en donde la solución portadora farmacológicamente aceptable comprende salina, solución de Ringer, o agua con un pH ajustado a 5.2 o menos .

7. La solución q ue inhibe el crecimiento microbiano de acuerdo con la reivi ndicación 1 , en donde el regulador de pH está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 1 .5 a aproximadamente 24 m M, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.071 mg/ml a aproximadamente 1 .15 mg/ml, y el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.0625 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

8. El uso de un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador para la preparación de una solución que inhibe el crecim iento microbiano para la desinfección de un lumen de un cateter implantado que tiene bacterias y hongos, en donde la solución que inhibe el crecimiento m icrobiano comprende un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, un agente q uelatador y un regulador de pH, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono com prende caprilato de sodio y está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.05 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml, el agente quelatador comprende ácido etilendiam inotetraacético disódico y está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml, y el regulador de pH comprende citrato.

9. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde al menos una porción del catéter es suficientemente porosa para permitir la difusión de la solución hacia afuera desde el lumen hacia la superficie externa del catéter y hacia los tejidos o la corriente sanguínea q ue rodea el catéter para inhibir infección .

10. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el agente q uelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.1 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml .

1 1 . El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.25 mg/m l a aproximadamente 0.5 mg/ml.

12. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el regulador de pH está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 1 .5 a aproximadamente 24 mM, en donde el agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.071 mg/ml a aproximadamente 1 . 15 mg/ml, y el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.0625 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

13. U n método para revestir un dispositivo médico, el método comprende: exponer el dispositivo médico a una solución que inhibe el crecim iento microbiano durante una cantidad de tiempo suficiente para proporcionar un revestimiento sobre la superficie expuesta del dispositivo, en donde la solución que inhibe el crecimiento m icrobiano comprende un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, un agente quelatador, y un regulador de pH, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono com prende caprilato de sodio y está presente en una cantidad de varia de aproximadamente 0.05 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml, el agente q uelatador comprende ácido etilendiaminotetraacético disódico y está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml, y el regulador de pH comprende citrato.

14. El método de acuerdo con la reivindicación 13, que además comprende tratar el dispositivo con un agente tensoactivo antes de exponer el dispositivo a la solución que inhibe el crecimiento microbiano.

1 5. El método de acuerdo con la reivindicación 14, en donde el agente tensoactivo se selecciona del grupo de agente tensoactivo q ue consiste de cloruro tridodecilmetil-amonio, cloruro de benzalconio y combinaciones de los mismos.

1 6. El método de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.1 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

1 7. El método de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.25 mg/ml a aproximadamente 0.5 mg/ml.

18. El metodo de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el regulador de pH está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 1 .5 a aproximadamente 24 m M, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.071 mg/ml a aproximadamente 1 .15 mg/ml , y el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.0625 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

1 9. U n d ispositivo médico revestido con una solución que inhibe el crecimiento microbiano que com prende un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, un agente quelatador y un regulador de pH , en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono comprende caprilato de sodio y está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.05 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml, el agente quelatador comprende ácido etilendiaminotetraacético disódico y está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml, y el regulador de pH comprende citrato.

20. El d ispositivo médico de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el dispositivo médico se selecciona del grupo de dispositivos que consiste de un catéter venoso central, un catéter intravenoso periférico, un catéter arterial, un catéter de Swant-Ganz, un catéter de hemodiálisis, un catéter umbilical , un catéter de Silicon no tunelizado percutáneo, un catéter venoso central tunelizado con manguito, y un puerto venoso central subcutáneo.

21 . El dispositivo medico de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el agente q uelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.1 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

22. El dispositivo médico de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el agente q uelatador está presente en una cantidad q ue varía de aproximadamente 0.25 mg/ml a aproximadamente 0.5 mg/ml.

23. El dispositivo médico de acuerdo con la reivindicación 19, en donde el regulador de pH está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 1 .5 a aproximadamente 24 mM , en donde el agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.071 mg/ml a aproximadamente 1 .1 5 mg/ml , y el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.0625 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

24. El uso de un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, un agente quelatador y un regulador de pH para la preparación de una solución que inhibe el crecimiento microbiano para bloquear y/o lavar un lumen de un catéter implantado que tiene bacterias y hongos, en donde el lumen del catéter im plantado se abre hacia el lumen de un cuerpo, y en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono comprende caprilato de sodio y está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.05 mg/m l a aproximadamente 5 mg/ml, el agente quelatador comprende ácido etilendiaminotetraacético disódico y está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml, y el regulador de pH comprende citrato.

25. El uso de acuerdo con la reivindicación 24, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.1 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

26. El uso de acuerdo con la reivindicación 24, en donde el agente q uelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.25 mg/ml a aproximadamente 0.5 mg/ml.

27. El uso de acuerdo con la reivind icación 24, en donde el regulador de pH está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 1 .5 a aproximadamente 24 mM, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.071 mg/ml a aproximadamente 1 .15 mg/ml, y el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.0625 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

28. U n equi po para bloquear y/o lavar un catéter implantado, el equipo comprende: un contenedor que contiene un volumen de una solución que inhibe el crecimiento m icrobiano que comprende un agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono, un agente quelatador y un regulador de pH , en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono comprende caprilato de sodio y está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.05 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml, el agente quelatador comprende ácido etilendiam inotetraacético disódico y está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml, y el regulador de pH comprende citrato; y un lumen de catéter implantable que recibe la solución que inhibe el crecim iento microbiano.

29. El equipo de acuerdo con la reivindicación 28, en donde el contenedor com prende una jeringa.

30. El equipo de acuerdo con la reivindicación 28, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.1 mg/m l a aproximadamente 1 mg/ml.

31 . El equipo de acuerdo con la reivindicación 28, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.25 mg/m l a aproximadamente 0.5 mg/ml.

32. El equipo de acuerdo con la reivindicación 28, en donde el regulador de pH está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 1 .5 a aproximadamente 24 mM, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.5 mg/ml a aproximadamente 8 m g/ml, y el agente q uelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.0625 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml.

33. Un equipo para bloquear y/o lavar un catéter implantado, el equipo comprende: un contenedor q ue tiene un primer compartimento que contiene un agente antim icrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono y un agente quelatador en forma de polvo y un segundo compartimento que contiene una solución portadora farmacológicamente acatable, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono comprende caprilato de sodio y está presente en u na cantidad de varía de aproximadamente 0.05 g/ml a aproximadamente 5 mg/ml, el agente quelatador comprende ácido etilendiaminotetraacético disódico y está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml cuando se mezcla con la solución portadora farmacológicamente aceptable, y en donde el primero o segundo com partimento además comprende un regulador de pH que comprende citrato.

34. El eq uipo de acuerdo con la reivindicación 3 3, en donde el contenedor comprende un lumen de catéter implantadle.

35. El equipo de acuerdo con la reivindicación 3 3, en donde el contenedor comprende una jeringa.

36. El equipo de acuerdo con la reivindicación 3 3, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varia de aproximadamente 0. 1 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml cuando se mezcla con la solución portadora farmacológicamente aceptable.

37. El equipo de acuerdo con la reivindicación 3 3, en donde el agente quelatador está presente en una cantidad que varia de aproximadamente 0.25 mg/ml a aproximadamente 0.5 mg/ml cuando se mezcla con la solución portadora farmacológicamente aceptable.

38. El equipo de acuerdo con la reivindicación 3 3, en donde el regulador de pH está presente en una cantidad que varia de aproximadamente 1 .5 a aproximadamente 24 mM, en donde el agente antimicrobiano de carboxilato de 4 a 9 átomos de carbono está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.071 mg/ml a aproximadamente 1 .15 mg/m l, y el agente quelatador está presente en una cantidad de varía de aproximadamente 0.0625 mg/ml a aproximadamente 1 mg/ml cuando se mezcla con la solución portadora farmacológicamente aceptable.