MX2013006261A - Tratamiento de condiciones mediadas por jak2. - Google Patents

Abstract

Se describe en la presente un método para tratar a un sujeto que padece anemia, que comprende administrar al sujeto una cantidad de N-(cianometil)-4-[2-[[4-(4-morfolinil)fenil]amino]-4-pirimidini l]-benzamida [CYT387] o un compuesto relacionado efectiva para mantener o elevar el nivel de hemoglobina. Los sujetos anémicos que incluyen aquellos afligidos con un trastorno mieloproliferativo, tal como mielofibrosis primaria.

Description

TRATAMIENTO DE CONDICIONES MEDIADAS POR JAK2 Campo de la Invención Esta invención se relaciona a la enzima Janus cinasa 2, o JAK2. Más particularmente, la invención se relaciona al uso de inhibidores de JA 2 en el tratamiento de neoplasmas mieloproliferativos y trastornos relacionados, así como condiciones asociadas que incluyen anemia.

Antecedentes de la Invención Las JAKs son cinasas que fosforilan un grupo de proteínas llamadas Transducción de Señal y Activadores de Transcripción o STATs . Cuando se fosforilan, los STATs se dimerizan, se translocan al núcleo y activan la expresión de genes que conduce a, entre otras cosas, la proliferación celular .

La función central desempeñada por la familia JAK de tirosina cinasas de proteína en la regulación dependiente de citocina de tanto la proliferación como función final de varios tipos de células importantes indica que los agentes capaces de inhibir las JAK cinasas son útiles en la prevención y tratamiento quimioterapéutico de estados de enfermedad dependientes de estas enzimas. Los inhibidores potentes y específicos de cada uno de los cuatro miembros de la familia JAK actualmente conocidos proporcionarán un medio para inhibir la acción de las citocinas que conducen a enfermedades inmunológicas e inflamatorias.

Los trastornos mieloproliferativos (MPD) incluyen, entre otras cosas, policitemia vera (PV) , mielofibrosis primaria (PMF), trombocitemia, trombocitemia esencial (ET) , mielofibrosis idiopática (IMF), leucemia mielogenosa crónica (CML) , mastocitosis sistémica (SM) , leucemia neutrofilica crónica (CNL) , síndrome mielodisplásico (MDS) y enfermedad de mastocitos sistémicos (SMCD) . La JAK2 es un miembro de la familia JAK de cinasas en las cuales una mutación especifica (JAK2V617F) se ha descubierto en 99% de pacientes con policitemia vera (PV) y aproximadamente 50% de trombocitopenia esencial (ET) y mielofibrosis idiopática (MF) . Esta mutación se cree que activa la JAK2, dando peso a la propuesta de que el inhibidor de JAK2 será útil en el tratamiento de estos tipos de enfermedades.

La mielofibrosis primaria es una enfermedad particularmente devastadora que aflige pacientes que son típicamente más grandes que 65 años y es marcada por niveles de hemoglobina mejores que los normales y un nivel elevado de glóbulos blancos y blastos circulantes.

Una variedad de inhibidores de JAK están actualmente en desarrollo clínico para el tratamiento de MPD. Estos incluyen INCB018424 para el tratamiento de mielofibrosis¦ primaria, XL019, SB 1518 y AZD1480 para el tratamiento de mielofibrosis post-PV/ET, y TG101348 para el tratamiento de ET JAK2V617F-positivo. También, la fenilamino pirimidina designada CYT387 es el sujeto de ensayos clínicos en curso para el tratamiento de mielofibrosis primaria y mielofibrosis pos-policitemia vera y mielofibrosis trombocitemia pos-esencial.

Es un objetivo de la presente invención proporcionar un método útil para el tratamiento de sujetos afligidos con neoplasmas mieloproliferativos, tal como mielofibrosis primaria.

Es un objetivo de la presente invención proporcionar un método útil para mantener o elevar los niveles de hemoglobina en los sujetos que experimentan anemia, que incluyen sujetos afligidos con neoplasmas mieloproliferativos y otros trastornos y cánceres de la sangre .

Breve Descripción de la Invención Ahora se ha encontrado que los efectos de la terapia de CYT387 son particularmente pronunciados en pacientes con enfermedad mieloproliferativa que cumplen ciertos criterios. Los pacientes que cumplen uno o más de esos criterios de esta manera ahora se pueden identificar y después reclutar para terapia de CYT387, de acuerdo con la presente invención. Estos pacientes se benefician particularmente de una respuesta de la anemia pronunciada y/o respuesta del bazo mejorada, ambas de las cales son indicadores clínicos de la eficacia del fármaco de inhibidor de JhK.

El efecto pronunciado del CYT387 en los niveles de hemoglobina, notables como una respuesta de la anemia, indica que este compuesto es útil para promover ya sea un mantenimiento o elevación de los niveles de hemoglobina en sujetos que son anémicos. Los sujetos anémicos incluyen sujetos que son deficientes de hemoglobina como resultado de un desorden de la sangre tal como un cáncer de la sangre, que incluye enfermedad mieloproliferativa, como resultado de tratamiento quimioterapia con agentes antineoplásicos o modalidades, o como resultado de otras condiciones médicas que afectan el nivel de funcionamiento de qlóbulos rojos.

En un aspecto de la presente invención, se proporciona un método para tratar a un sujeto anémico que comprende administrar al sujeto una cantidad de CYT387 efectivo para mantener o elevar el nivel de hemoglobina en ese sujeto. En un aspecto relacionado, la invención proporciona el uso de CYT387 para el tratamiento de la anemia. En las modalidades, el sujeto es un sujeto anémico afligido con una neoplasia mieloproliferativa tal como mielofibrosis primaria, asi como as mielofibrosis secundaria a la policitemia vera (PV) o trombocitemia esencial (ET) . En otras modalidades, el sujeto es un sujeto anémico afligido con síndrome mielodisplásico (MDS) .

En un aspecto, la invención proporciona un método mejorado para tratar a un sujeto que tiene, o está en riesgo de, una condición médica por la cual se indica un inhibidor de JAK tal como un inhibidor de JAK1/2 o un inhibidor de JAK2, el método que comprende las etapas de (1) seleccionar, para el tratamiento, un sujeto que presente con, o que está en riesgo de, enfermedad mieloproliferativa y cumple por lo menos uno de los siguiente criterios: (i) terapia previa con un fármaco seleccionado de talidomida, lenalidomida, pomalidomida, y un inhibidor de JAK tal como un inhibidor de JAK diferente a CYT387; (ii) un criterio clínico seleccionado de uno o ambos de (1) tamaño agrandado del bazo y 2) un porcentaje mejor de blastos circulantes; (iii) un criterio marcador bioquímico seleccionado de uno o más de (1) un nivel incrementado de por lo menos una proteína seleccionada de EGF, TNF-a, G- CSF, IFN-a, G?-?ß, HGF, MIG, y VEGF; (2) un nivel disminuido de eotaxina; y (3) un nivel alterado de por lo menos una proteína seleccionada de EPO, hepcidina y BMP-2; y después (2) administrar al sujeto seleccionado una cantidad efectiva de tratamiento de CYT387, mediante lo cual el sujeto tratado muestra una respuesta de la anemia y/o una respuesta del bazo que se mejora relativo con un sujeto que no cumple por lo menos uno de los criterios.

En un aspecto reaccionado, el presente método comprende la etapa de evaluar al sujeto una muestra biológica obtenida del mismo, identificar a un sujeto que cumple por lo menos uno de los criterios indicados en lo anterior, y después tratar al - sujeto identificado con CYT387. Similarmente, el presente método también comprende la etapa de evaluar al sujeto o una muestra de sangre obtenida del mismo para identificar a un sujeto que experimenta anemia, y luego tratar al sujeto identificado con una cantidad de CYT387 efectiva para mantener o elevar el nivel endógeno de hemoglobina .

En las modalidades el sujeto está afligido con mielofibrosis primaria. En otras modalidades, el sujeto está afligido con mielofibrosis secundaria a policitemia vera (PV) o trombocitemia esencial (ET) . En una modalidad adicional, el sujeto está afligido con MDS.

En aun otras modalidades, los sujetos que experimentan anemia pueden ser sujetos afligidos con mielofibrosis primaria o PV o ET, y también pueden ser sujetos que experimentan anemia como resultado de un alcance más amplio de trastornos de la sangre que incluyen cánceres de la sangre, o como resultado de tratamiento con un agente quimioterapéutico, o como resultado de anemia de enfermedad crónica u otras causas de anemia.

En otra modalidad, el sujeto seleccionado es un sujeto dependiente de transfusión. En una modalidad adicional, el sujeto dependiente de transfusión se trata con CYT387 o un compuesto relacionado que usa un régimen de dosificación que da por resultado, y sostiene preferiblemente, la independencia de transfusión.

En otro aspecto de la presente invención, se proporciona un articulo de fabricación, que comprende CYT387 en combinación con una etiqueta que indica el tratamiento de un sujeto que presenta con por lo menos uno de los criterios observados, que incluyen anemia.

En un aspecto relacionado de la presente invención, se proporciona un equipo que comprende CYT387 en combinación con la instrucción expresa que enseña un método para seleccionar a un sujeto para terapia de CYT387 con base en los criterios de selección descritos en la presente que incluyen anemia.

Las modalidades de la invención ahora se describirán con mayor detalle con referencia a las Figuras acompañantes en las cuales: Breve Referencia a las Figuras La Figura 1 muestra gráficamente el efecto de CYT387 en los niveles de hemoglobina en pacientes con mielofibrosis primaria, mielofibrosis pos-PV o mielofibrosis pos-ET enrolados en las fases de elevación de la dosis y confirmación de la dosis de un estudio clínico de Fase I/II en curso (Todos los pacientes; N=60) . También muestra el efecto de CYT387 en los niveles de hemoglobina en el subgrupo combinado de estos pacientes con niveles de hemoglobina básales de < 10 g/dL y aquellos quienes son dependientes de transfusión en la linea base. Este subgrupo se consideraría que tiene una anemia marcada en la línea base.

La Figura 2 muestra gráficamente el efecto de CYT387 en los niveles de hemoglobina en los tres grupos de pacientes con mielofibrosis primaria, mielofibrosis pos-PV o mielofibrosis pos-ET enrolados en las fases de aumento de la dosis y confirmación de la dosis de un estudio clínico Fase I/II en curso. Estos grupos incluyen (1) todos los pacientes quienes requirieron transfusiones frecuentes de glóbulos blancos (PvBC) antes del enrolamiento [dependientes de Tx en la línea base] (2) el subgrupo de pacientes dependientes de transfusión quienes respondieron al tratamiento con CYT387 al ser independientes de transfusión [respondedores de Tx] y (3) del subgrupo de pacientes dependientes de transfusión quienes no lograron una respuesta suficiente a CYT387 para calificar como respondedores [no respondedores a Tx] .

Descripción Detallada de la Invención El CYT387 es un compuesto de fenilaminopirimidina que tiene el número de registro CAS CAS 1056634-68-4, el nombre químico N- (cianometil) -4- [2- [ [4- (4- morfolinil) fenil] amino] -4-pirimidinil ] -benzamida, estructura mostrada a continuación: • La síntesis, formulación y uso terapéutico del CYT387 se describe en WO 2008/109943 publicado el 18 de Septiembre de 2008/ y en Blood, 2010, 115 (25) : 5232-40. Por supuesto, el CYT387 se puede usar en la forma de una sal, solvato o profármaco si se desea.

Además del CYT387, el presente método se puede practicar usando análogos estructurales de CYT387 que comparten su perfil de enlace a cinasa o firma, compuestos que son referidos en la presente como "compuestos relacionados".

Los "compuestos relacionados" son compuestos relacionados con CYT387 por su señal de inhibición de JAK selectiva, en la cual se muestra una preferencia para enlazarse a y la inhibición de JAK2 y JAK1, relativos con JAK3 y otros miembros de la familia cinasa, y por su conformación estructural a la fórmula: en donde Z se selecciona independientemente de N y CH ; R1 se selecciona independientemente de H , halógeno, OH , CONHR2 , CON(R2)2, C F3 , R2OR2 , CN , morfolino, tiomorfolinilo, tiomorfolino-1 , 1-dióxido, piperidinilo sustituido o no sustituido, piperazinilo sustituido o no sustituido, imidazolilo, pirrolidinilo sustituido o no sustituido y alquileno de C1-4 en donde los átomos de carbono se reemplazan opcionalmente con NRY y/u O sustituido con morfolino, tiomorfolinilo, tiomorfolino-1 , 1-dióxido, piperidinilo sustituido o no sustituido, piperazinilo sustituido o no sustituido, imidazolilo o pirrolidinilo sustituido o no sustituido; R2 es alquilo de C1-4 sustituido o no sustituido; RY es H o. alquilo de C 1-4 sustituido o no sustituido; R8 es RXCN ; Rx es alquileno de Ci_4 sustituido o no sustituido en donde hasta 2 átomos de carbono se pueden reemplazar opcionalmente con CO , NS02Rx , NRY , CONRY , SO , S02 u 0; R11 es H , halógeno, alquilo de C1- 4 o alquiloxi de C1-4 , o un enantiómero de los mismos, o un profármaco de los mismos o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

El término "alquilo de C1- " se refiere a grupos hidrocarburo de cadena recta o cadena ramificada que tienen de uno a 1 a 4 átomos de carbono. Ejemplos incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, y ter-butilo.

El término "halógeno" se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo .

El término "sustituido" se refiere a un grupo que se sustituye con uno o más grupos seleccionados de alquilo de C1-4, cicloalquilo de C3-6, alquenilo de C2-Z, alquinilo de C2-6f alquilarilo de Ci_6, arilo, heterocicililo, halo, halo alquilo de C1-6, halocicloalquilo de C3-6, haloalquenilo de C2_6, haloalquinilo de C2-6, haloarilo, haloheterocicililo, hidroxi, alcoxi de Ci-6, alqueniloxi de C2-6, alquiniloxi de C2-6, ariloxi, heterocicliloxi, carboxi, haloacoxi de C1-6, haloalqueniloxi de C2-6/ haloalquiniloxi de C2-6, haloariloxi, nitro, nitroalquilo de Ci-e, nitroalquenilo de . 2-6, nitroarilo, nitroheterociclilo, azido, amino, alquilaminouinilacilo de C2_6, arilacilo, heterocicililacilo, acilamino, aciloxi, aldehido, alquilsulfonilo Ci-e, arilosulfonilo, alquilsulfonilamino de Ci_6, arilsulfonilamino, alquilsulfoniloxi de Ci_6, arilsulfoniloxi, alquilsulfenilo de C1-6, alquilsulfenilo de C2_6, arilsulfenilo, carboalkoxi, carboariloxi, mercapto, aquiltio de C1-6, ariltio, . aciltio, ciano y similares. Los sustituyentes preferidos se seleccionan del grupo que consiste de alquilo de C1-4, cicloalquilo de C3-6, alquenilo de C2-6/ alquinilo de C2-6f alquilarlo de C1-6, arilo, heterocicililo, halo, haloarilo, haloheterocicililo, hidroxi, alcoxi de Ci-4, ariloxi, carboxi, amino, alquiladlo de Cx-s, arilacilo, heterocicililacilo, acilamino, aciloxi, alquilsulfenilo de C1-6, arilsulfonilo y ciano.

El término "arilo" se refiere a residuos individuales, polinucleares, conjugados o fusionados de hidrocarburos aromáticos. Ejemplos incluyen fenilo, bifenilo, terfenilo, cuaterfenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, antracenilo, dihidroantracenilo, benzantracenilo, dibenxantracenilo y fenantrenilo .

El término "heterociclilo de 5 o 6 miembros que contienen N insaturado" se refiere a grupos hidrocarburos cíclicos, insaturados que contienen por lo menos un nitrógeno. Los grupos heterocíclicos que contienen N adecuados incluyen grupos heteromonocíclicos de 5 a 6 miembros insaturados que contienen de 1 a 4 átomos de nitrógeno, por ejemplo, pirrolilo, pirrolinilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, triazolilo o tetrazolilo; grupo heteromonocíclico de 5 o 6 miembros insaturado que contiene de 1 a 2 átomos de oxígeno y de 1 a 3 átomos de hidrógeno, tales como, oxazolilo, isoxazolilo u oxadiazolilo; y grupo heteromonocíclico de 5 o 6 miembros insaturado que contiene de 1 a 2 átomos de azufre y de 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como, tiazolilo o tiadiazolilo .

En modalidades preferidas, los compuestos relacionados con CYT387 incluyen aquellos en los cuales R1 se sustituye en la posición para por morfolinilo y en la posición orto por H, Z es carbono, y R11 es H, halógeno, metilo o metoxi.

En modalidades particularmente preferidas, R8 es -C (O) -NH-CH2-CN; -C (O) -NH-C (CH3) 2CN; o -NH-C (O) -CH2-CN .

Los compuestos específicos relacionados con CYT387 útiles de acuerdo con el presente método incluyen: N- (cianometil) -4- (2- (4-morfolinofenilamino) -pirimidin-4-il) benzamida; N- (cianometil) -3- (2- ( -morfolinofenilamino) -pirimidin-4-yl) benzamida; N- (cianometil) -3-metil-4- (2- (4-morfolinofenilamino) pirimidin-4-il ) benzamida; N- (cianometil) -2-metil-4- (2- ( 4-morfolinofenilamino) pirimidin-4-il ) benzamida ; 2-ciano-N- (3- (2- ( 4-morfolinofenilamino) pirimidin-4 -il ) encil ) acetamida; 2-ciano-N- (3- (2- ( 4-morfolinofenilamino) pirimidin-4-il) fenil) acetamida; N- (cianometil) -4- (2- (3-morfolinofenilamino) pirimidin-4-il) benzamida; N- (cianometil) -4- (2- (4-tiomorfolinofenilamino) pirimidin-4-il ) benzamida; N- (cianometil) -4- (2- (4- (morfolinometil ) fenilamino) pirimidin-4-il ) benzamida . 4- ( 5-cloro-2- ( ( -morfolinofenil) amino) pirimidin- -il) -N- (cianometil) benzamida; 4- ( 5-bromo-2- ( (4 -morfolinofenil) amino) pirimidin-4 -il) -N- (cianometil) benzamida; N- (cianometil) -4- (2- ( (4- ( 4-hidroxipiperidin-l-il) fenil) amino) pirimidin-4-il ) benzamida; y N- (cianometil) -4- (5-metil-2- ( (4-mofolinofenil ) amino) pirimidin-4-il ) benzamida En el presente método, CYT387 o un compuesto relacionado se usa para mantener o elevar los niveles de hemoglobina en un sujeto que experimenta anemia o una disminución de hemoglobina. Los sujetos anémicos tienen un nivel de hemoglobina endógeno que es nivel que el nivel que es normal para un sujeto sano de edad y género equivalentes. Niveles aceptables o "normales" ahora son bien establecidos en la práctica médica. Para un hombre humano adulto, la anemia es evidente cuando el nivel de hemoglobina está por debajo de aproximadamente 13.0 g/dL; para mujeres humanas adultas no embarazadas, la deficiencia es evidente cuando el nivel de hemoglobina está por debajo de aproximadamente 12.0g/dL. La medición de los niveles de hemoglobina se lleva a cabo usando técnicas bien establecidas. Las condiciones de anemia grave son evidentes con el nivel de hemoglobina es menor que aproximadamente 8.0g/dL.

En el uso, el CYT387 o un compuesto relacionado se administran a un sujeto anémico en una cantidad efectiva para mantener o elevar el nivel de hemoglobina en el sujeto. La administración del fármaco tiene de esta manera el efecto mínimo de inhibir la reducción adicional en el nivel de hemoglobina en el sujeto tratado. Más deseablemente, la administración del fármaco tiene un defecto de incrementar el nivel de hemoglobina en el sujeto.

Los sujetos anémicos que se beneficiarían del tratamiento con CYT387 o un compuesto relacionado incluyen sujetos que se han sometido o están sometiéndose a quimioterapia o terapia de radiación, tales como pacientes con cáncer. Una amplia variedad de agentes quimioterapéuticos se sabe que tienen la consecuencia de reducir el nivel de funcionamiento de los glóbulos rojos. También, los sujetos que son candidatos al tratamiento de CYT387 son aquellos afligidos con trastornos de la sangre que incluyen cánceres de la sangre que dan por resultados, o se asocian con, una reducción en el conteo de glóbulos rojos. En las modalidades, los sujetos que se tratan son sujetos que tienen anemia asociada con o que resultan de tales condiciones de la sangre como síndrome mielodisplásico . Los síndromes mielodisplásicos (MDS) es un término usado para describir un grupo de enfermedades caracterizadas por hematopoyesis ineficaz que conduce a citopenias de la sangre y médula ósea hxpercelular. La MDS se ha considerado tradicionalmente que es sinónimo con "pre-leucemia" debido al riesgo incrementado de transformación en leucemia mielogenosa aguda (AML) . La evolución a AML y las consecuencias clínicas de la citopenias son causas principales de morbidez y mortalidad en el MDS. Los síntomas debilitantes del MDS incluyen fatiga, palidez, infección, y sangrado. La anemia, neutropenia, y trombocitopenia también son manifestaciones clínicas comunes de MDS. En otras modalidades, los sujetos que se tratan son sujetos que tienen anemia asociada con o que- resultan de tales otras condiciones de la sangre como anemias asociadas con otras neoplasias malignas hematológicas, anemia aplásica, anemia de enfermedad crónica que afecta los glóbulos rojos y similares. La anemia de enfermedad crónica se asocia con tales enfermedades como ciertos cánceres que incluyen linfornas y enfermedad de Hodgkin. Enfermedades autoinmunes tal como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, enfermedad inflamatoria del intestino y polimialgia reumática; las infecciones a largo plazo tales como infección del tracto urinario, VIH y osteomielitis; deficiencia cardiaca; y enfermedad crónica de los ríñones. Además, los pacientes con anemia que resultan de condiciones asociadas con destrucción incrementada, supervivencia reducida de glóbulos rojos y secuestro esplénico también se pueden beneficiar en el tratamiento de CYT387. Los pacientes afligidos con estas condiciones se pueden tratar dé esta manera para mejorar su estado de disminución o deficiencia de hemoglobina.

En ciertas modalidades, el sujeto que se trata es un sujeto anémico que experimenta talasemia. En otras modalidades, el sujeto que se trata es un sujeto diferente a un sujeto que experimenta talasemia.

En las modalidades, el CYT387 o un compuesto relacionado se administra a un sujeto diagnosticado con una enfermedad mieloproliferativa tal como neoplasia mieloproliferativa , para mejorar en consecuencia la prognosis de la enfermedad y, en las modalidades, particularmente para tratar la deficiencia o disminución de hemoglobina asociados con la enfermedad. En otras modalidades, el CYT387 o un compuesto relacionado se administra a un sujeto anémico que es diferente a un sujeto anémico diagnosticado con una enfermedad mieloproliferativa . Esta clase de sujeto tratable se presenta con anemia no relacionada con la enfermedad mieloproliferativa .

"Enfermedades mieloproliferativas" y "neoplasmas mieloproliferativos (MPN)" más notablemente policitemia vera (PV) , trombocitemía esencial (ET) y mielofibrosis primaria (PMF) son un grupo diverso pero interrelacionado de trastornos clónales de células madre hematopoyéticas pluripotentes que comparten un intervalo de características biológicas, y patológicas y clínicas que incluyen la sobreproducción relativa de una o más células de origen mieloide, formación de colonia independiente de factor de crecimiento in vitro, hipercelularidad de la médula ósea, hematopoyesis extramedular, espleno y hepatomegalia, y diátesis trombótica y/o hemorrágica. Un grupo de trabajo internacional para investigación y tratamiento de neoplasias mieloproliferativas (IWG- RT) se ha establecido para delinear y definir estas condiciones (ver por ejemplo Vannucchi y colaboradores, CA Cáncer J. Clin., 2009, 59:171-191), y aquellas definiciones de enfermedades van a ser aplicadas para propósitos de especificación.

Los sujetos, más notablemente pacientes humanos, quienes se presentan con MPN y particularmente PMF son identificables en la técnica usando los criterios IWG-MRT mencionados en lo anterior. Sujetos "en riesgo de" una forma particular de MPN son sujetos que tienen una forma de etapa temprana de la enfermedad, y por ejemplo pueden incluir sujetos que tienen un marcador genético del mismo, tal como el alelo JAK2V617F que se asocia con PV (>95%), con ET (60%) y con PMF (60%) . Los sujetos también se consideran que están "en riesgo de" una forma de MFN si ya manifiestan síntomas de una forma de etapa temprana. De esta manera, los sujetos que presentan MFN están en riesgo de postPV y postET, ambos de los cuales se desarrollan después de la MPN.

La respuesta de pacientes con MPN y particularmente pacientes con PMF a la terapia de CYT387 es particularmente consistente cuando, de acuerdo con la presente invención, son pacientes seleccionados para la terapia de CYT387 con base en uno o más de los siguientes criterios: (i) antes de la terapia con un fármaco seleccionado de talidomida, lenalidomida, pomalidomida y un inhibidor de JAK2 diferente CYT387; (ii) un criterio clínico seleccionado de uno o ambos de (1) tamaño del bazo más pequeño y (2) un porcentaje menor de blastos circulantes; (iv) un criterio marcador bioquímico seleccionado de uno o más de (1) un nivel incrementado de por lo menos una proteína seleccionada de EGF, TNF-a, G-CSF, IFN-a, ???-?ß, HGF, MIG y VEGF; (2) un nivel disminuido de eotaxina; y (3) un nivel alterado de por lo menos una proteína seleccionada de EPO, hepcidina y BMP-2.

El resultado mejorado de la terapia de CYT387 que resulta de la selección de pacientes previos se manifiesta como una mejora consistente en la respuesta de la anemia y/o en la respuesta del bazo.

Por "respuesta de la anemia" se propone un incremento en el nivel de hemoglobina del paciente o un paciente quien fue dependiente de transfusión que se volvió independiente de transfusión. Deseablemente, se logra un incremento mínimo en la hemoglobina de 2.0 g/dL que dura un mínimo de 8 semanas, que es el nivel de mejora especificado en los criterios consenso de Grupo de Trabajo Internacional (I G) . Sin embargo, los incrementos más pequeños, pero aun médicamente significativos en la hemoglobina también se consideran que están dentro del término "respuesta de la anemia" .

Por "respuesta del bazo" se propone una reducción en el tamaño del bazo del paciente como es evaluado por ya sea palpación de un bazo previamente palpable durante examen físico o por formación de imágenes de diagnóstico. Los criterios consenso IWG especifican que existe ya sea una reducción de 50% mínima en la esplenomegalia palpable (agrandamiento del bazo) de un bazo que es por lo 10 cm en la línea base (antes del tratamiento) o de un bazo que es palpable en más de 5 cm en la línea base que ya no es palpable. Sin embargo, también se consideran reducciones más pequeñas que están dentro del término "respuesta del bazo".

En una modalidad, el paciente seleccionado es uno que ha recibido terapia de fármaco previa. Más particularmente, los pacientes seleccionados para terapia de CYT387 incluyen pacientes que se han tratado, o están actualmente siendo tratados, con talidomida (número de CAS 50-35-1) o con un derivado de la misma, particularmente lenalidomida (número de CAS 191732-72-6) . Estos fármacos se usan ambos en el tratamiento de mieloma múltiple, y parece que también están mostrando algún beneficio en los pacientes afligidos con el trastorno mieloproliferativo . Para recibir el beneficio adicional que resulta de la terapia de CYT387 subsecuente, los pacientes estarán ya sea sometiéndose a tratamiento con talidomida, lenalidomida o pomalidomida o agente similar o habrán sido tratados con uno de estos fármacos dentro de un marco de tiempo, relativo con el inicio de la terapia CYT387, suficiente para que se manifiesten los efectos de estos fármacos. Los pacientes que cumplen estos criterios experimentan una respuesta de la anemia significativa, relativos con los pacientes sin tratamiento para esa terapia de fármaco, cuando se tratan subsecuentemente con CYT387. En una modalidad preferida, el paciente CYT387 es uno sometido a la terapia previa con lenalidomida .

Los pacientes seleccionados para la terapia de CYT387 también incluyen pacientes que se han tratado, o están siendo sometidos a tratamiento, con un inhibidor de JAK diferente a CYT387. Se ha descubierto en particular que los pacientes previamente tratados con el inhibidor de JAK designado INCB018424, o el inhibidor JAK designado TG101348, tienen una respuesta del bazo más prominente a la terapia de CYT387 que los pacientes sin tratamiento a tal terapia previa. En una modalidad preferida, el paciente seleccionado para la terapia de CYT387 es uno que, además de ser sometido a la terapia con un inhibidor de JAK diferente a CYT387, también es un paciente dependiente de transfusión. El INCB018424 se administra en dosis de partida de 15 o 20 mg por BID con titulación de dosis de 5 mg de BID a 25 mg de BID. El TG101348 se administra una vez al día con una dosis tolerada máxima (MTD) determinada para ser 680 mg/dia. Los inhibidores de JAK diferentes a CYT387 incluyen todos y cualquier otro inhibidor de JAK, y particularmente otros inhibidores de JAK que tienen una afinidad de JAK, selectividad o sitio de enlace diferente de CYT387. Estas propiedades se pueden determinar usando la estructura de cristal de JAK2 y el procedimiento de modelación y los ensayos de actividad descritos en US 7593820, la descripción completa de la cual se incorpora en la presente a manera de referencia. Para recibir el beneficio adicional que resulta de la terapia de CYT387 subsecuente, los pacientes que ya sea estarán sometiéndose a tratamiento con el otro inhibidor de JAK2 o habrán sido tratados con tal fármaco dentro de un marco de tiempo, relativo con el inicio de la terapia de CYT387, suficiente para los efectos del inhibidor de JAK2 que se manifiestan en el paciente.

Los pacientes seleccionados para la terapia de CYT387 también incluyen pacientes que tienen niveles alterados de marcadores de proteínas detectables . Más particularmente, los pacientes en quienes los niveles de ciertos marcadores de proteínas, que incluyen ciertas citocinas y quimiocinas, son elevados pueden experimentar un beneficio significativo cuando se tratan con CYT387, en términos de su respuesta de la anemia y/o su respuesta del bazo a la terapia de CYT387. En las modalidades, la elevación en el nivel de uno o más de los siguientes marcadores de proteínas significa que el paciente es un candidato preferido para la terapia de CYT387: (1) EGF, o factor de crecimiento epidérmico, la forma madura de la cual comprende los residuos 971-1023 de la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot P01133; (2) TNF-cc, o factor de necrosis tumoral alfa, la forma madura y soluble de la cual comprende los residuos 77-233 de la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot P01375; (3) G-CSF, o factor estimulador de colonias de granulocitos, la forma madura de la cual comprende los residuos 30-207 de la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot P09919; (4) IFN-a, o interferón alfa, comprende una familia de subtipos de las formas maduras de las cuales son bien conocidas en el campo; (5) ???-?ß, o proteina inflamatoria de macrófagos 1-beta (ahora conocida también como quimiocina 4 de motivo C-C, o CC14), la forma madura de la cual comprende ya sea los residuos 24-92 o 26-92 de la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot P13236; (6) HGF, o factor de crecimiento de hepatocitos, las formas maduras de las cuales se basan en la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot P14210, e incluyen la cadena alfa que tiene los residuos 32-494 y la cadena beta que tiene los residuos 495-728; (7) MIG, o monocina inducida por interferón gamma (ahora conocida también como CXCL9) , está dentro de la familia de citocinas quimiotácticas , la forma madura de la cual comprende los residuos 23-125 de la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot Q07325; (8) VEGF, o factor de crecimiento endotelial vascular A, la forma madura de la cual comprende los residuos 27-232 de la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot P15692.

Los pacientes que presentan para la terapia de CYT387 experimentan una respuesta del bazo significativa cuando se seleccionan inicialmente con base en la elevación en el nivel de cualquiera de uno o más de los marcadores indicados en lo anterior. Un nivel elevado es un nivel que es mayor que el nivel en un sujeto normal.

Los pacientes que se presentan para la terapia de CYT387 también pueden experimentar una respuesta de la anemia significativa cuando se seleccionan inicialmente con base en una depresión en el nivel de la proteina eotaxina. Esta proteina, también conocida como proteina quimiotáctica eosinófila y que comprende los residuos 24-97 de la secuencia que tiene la designación Swiss-Prot P51671, funciona a través de la interacción con CCR3 para promover la acumulación de los esoinófilos en respuesta a los alérgenos, una característica prominente de reacciones inflamatorias alérgicas .

Aún otros marcadores útiles para seleccionar pacientes para la terapia de CYT387 incluyen niveles alterados de EPO, hepcidina y BMP-2.

El "nivel" de un marcador dado se considera que está alterado, es decir, ya sea elevado o reducido, cuando el nivel medido en un paciente dado es diferente a un grado estadísticamente significativo del nivel correspondiente en un sujeto normal. Los pacientes que se presentan con niveles de marcadores alterados a un grado suficiente, deseablemente, para producir un valor p de por lo menos 0.05 o más significativo, es decir, mejor, se seleccionan como candidatos para la terapia de CYT387. En modalidades, el valor p es por lo menos 0.03, 0.02 o 0.01, y en modalidades preferidas el valor de p es por lo menos 0.009, 0.007, 0.005, 0.003, 0.001 o mejor.

Los niveles de un marcador dado se pueden determinar usando los ensayos ya bien establecidos para la detección de los marcadores indicados en lo anterior. En las modalidades, esto se logra al extraer una muestra biológica del paciente candidato, tal como una muestra de sangre entera o una fracción de la misma tal como plasma o suero. La muestra entonces se trata para enriquecer el marcador de interés, si se desea, y la muestra enriquecida o pura se somete a ensayo por ejemplo usando un ligando detectable para el marcador, tal como un anticuerpo etiquetado que se enlaza selectivamente al marcador. La cantidad de marcador presente en la muestra entonces se puede determinar ya sea semi-cuantitativamente o cuantitativamente, para obtener un valor que luego se compara contra un valor de referencia que es el nivel normal para ese marcador en un sujeto sano. Como se señaló anteriormente, una diferencia en los niveles de marcadores suficientes para llegar a un valor p que es por lo menos 0.05 indica un nivel de marcador alterado de importancia, y los pacientes que se presentan con un nivel elevado de ese marcador (o en el caso de eotaxina, un nivel disminuido) son candidatos para la terapia de CYT387.

También adecuados como candidatos para la terapia de CYT387 son aquellos pacientes que cumplen ciertos criterios clínicos, que incluyen aquellos que se presentan con un bazo de tamaño relativamente pequeño, y aquellos que se presentan con un nivel elevado de blastos circulantes o periféricos. Estos pacientes responden a la terapia de CYT387 particularmente bien, en términos de su respuesta del bazo. En una modalidad, el paciente seleccionado es uno que todavía no ha progresado a la dependencia de transfusión. El agrandamiento esplénico se evalúa por palpación. El tamaño y volumen esplénicos también se pueden medir mediante formación de imagen de diagnostico tal como ultrasonido, CT o RMI) . El tamaño normal del bazo es de aproximadamente 11.0 cm en longitud craneocaudal .

También adecuados como candidatos para la terapia de CYT387 son aquellos pacientes que presentan con un porcentaje menor de blastos circulantes. Los blastomas son células precursores inmaduras que se encuentran normalmente en la médula ósea y no en la sangre periférica. Dan origen normalmente a células sanguíneas maduras. Porcentaje menor de blastos circulantes se mide por el análisis citomorfológico de un frotis de sangre periférica así como citometría de flujo multiparámetro e inmunohistoquimica . Como un factor de pronóstico se usa >/= 1% de blastos.

La presente invención también proporciona tanto un • articulo de fabricación como un equipo, que comprende un contenedor que comprende CYT387 en una cantidad efectiva para tratar el MPN. El contenedor puede ser simplemente una botella que comprende CYT387 en una forma de dosificación oral, cada forma de dosificación que comprende una dosis unitaria de CYT387, en una cantidad por ejemplo de aproximadamente 50 mg a 400 mg, tal como 150 mg, 200 mg o 300 mg. El equipo comprenderá adicionalmente instrucciones impresas que enseñan el presente método para seleccionar sujetos para CYT387. El articulo de fabricación comprenderá una etiqueta o similar, que indica el tratamiento de un sujeto de acuerdo con el presente método de la selección de pacientes .

La presente invención también proporciona tanto un articulo de fabricación como un equipo, que comprende un contenedor que comprende CYT387 en una cantidad efectiva para tratar anemia. El contenedor puede ser simplemente una botella que comprende CYT387 en forma de dosificación oral, cada forma de dosificación que comprende una dosis unitaria de CYT387, en una cantidad por ejemplo de aproximadamente 50 mg a 400 mg, tal como 150 mg, 200 mg o 300 mg. El equipo comprenderá adicionalmente instrucciones impresas que enseñan el presente método para seleccionar sujetos anémicos para la terapia de CYT387. El articulo de fabricación comprenderá una etiqueta o similar, que indica el tratamiento de un sujeto anémico .

Para el uso en el presente método, el CYT387 o un compuesto relacionado se formula de acuerdo con la práctica farmacéutica estándar.

Los compuestos se pueden preparar como sales que son farmacéuticamente aceptables, tales como sales de cationes farmacéuticamente aceptables tales como sodio, potasio, litio, calcio, magnesio, amonio y alquilamonio; sales de adición ácidas de ácidos inorgánicos farmacéuticamente aceptables tales como ácidos clorhídricos, ortofosfóricos , sulfúricos, fosfóricos, nítricos, carbónicos, bóricos, sulfámicos y hidrobrómicos; o sales de ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables tales como ácidos acéticos, propiónicos, butíricos, tartáricos, maleicos, hidroximaleicos, fumáricos, cítricos, lácticos, múcicos, glucónicos, benzoicos, succínicos, oxálicos, fenilacéticos, metanosulfónicos, trihalometanosulfónicos, toluenosulfónicos, bencenosulfónicos , isotónicos, ascórbicos, valéricos y oróticos. Las sales de los grupos amina también pueden comprender sales de amonio cuaternario en las cuales el átomo de nitrógeno de amino lleva un grupo orgánico adecuado tal como una poción de alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo.

En una modalidad, el compuesto es una sal de clorhidrato de CYT387, tal como una sal de clorhidrato de CYT387.

Donde un compuesto posee un centro quiral el compuesto puede usar como un enantiómero o diastereómero purificado, o como una mezcla de cualquier relación de estereoisómeros . Sin embargo se prefiere que la mezcla comprenda por lo menos 70%, 80%, 90%, 95%, 97.5% o 99% del isómero preferido, donde el isómero preferido da el nivel deseado de potencia y selectividad.

Los profármacos de CYT387 y compuestos relacionados también se pueden administrar. Por ejemplo, los compuestos que tienen grupos amino, amido, hidroxi o ácido carboxilico libres se pueden convertir en profármacos. Los profármacos incluyen compuestos en donde un residuo de aminoácido, o una cadena de polipéptidos de dos o más (por ejemplo, dos, tres o cuatro) residuos de aminoácido que se unen covalentemente a través de los enlaces de péptido a los grupos amino, hidroxi y ácido carboxilico libres de los compuestos de la invención. Los residuos de aminoácido incluyen los 20 aminoácidos de origen natural designados comúnmente por símbolos de tres letras y también incluyen, 4-hidroxiprolina, hidroxilisina, demosina, isodemosina, 3-metilhistidina, norvlina, beta-alanina, gamma-ácido aminobutírico, citrulina, homocisteína , homoserina, ornitina y metionina sulfona. Los profármacos también incluyen compuestos en donde los carbonatos, carbamatos, amidas y ésteres alquilicos que se unen covalentemente a un sustituyente del compuesto de fármaco.

El compuesto se administra como una composición farmacéutica que comprende el compuesto y un portador farmacéuticamente aceptable. El portador debe ser "farmacéuticamente aceptable" significa que es compatible con los otros ingredientes de la composición y no es perjudicial a un sujeto. Las composiciones pueden contener otros agentes terapéuticos como se describe a continuación, y se pueden formular, por ejemplo, al emplear vehículos o diluyentes sólidos o líquidos convencionales, así como aditivos farmacéuticos de un tipo apropiado al modo de administración deseada (por ejemplo, excipientes, aglutinantes, conservadores, estabilizantes, sabores, etcétera) de acuerdo con las técnicas tales como aquellas bien conocidas en el campo de la formulación farmacéutica (Ver, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., 2005, Lippincott Williams & Wilkins) .

El compuesto se puede administrar por cualquier medio adecuado, por ejemplo, oralmente, tal como en la forma de tabletas, cápsulas, gránulos o polvos; sublingualmente; bucalmente; parenteralmente, tal como mediante inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular, intra (trans) dérmica, o intracisternal o técnicas de infusión (por ejemplo, como soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas inyectables estériles) ; nasalmente tal como medio el roció por inhalación o insuflación; tópicamente, tal como en la forma de una crema o ungüento ocularmente en la forma de una solución o suspensión; vaginalmente en la forma de pesarios, tampones o cremas; o rectalmente tal como en la forma de supositorios; en formulaciones unitarias de dosificación que contienen vehículos o diluyentes farmacéuticamente aceptables. No tóxicos. Los compuestos pueden, por ejemplo, ser administrados en una forma adecuada para liberación inmediata o liberación prolongada. La liberación inmediata o liberación prolongada se puede lograr mediante el uso de composiciones farmacéuticas adecuadas que comprenden los compuestos, o, particularmente en el caso de liberación prolongada, mediante el uso de dispositivos tales como implantes subcutáneos o bombas osmóticas.

Las composiciones farmacéuticas para la administración se pueden presentar convenientemente en una forma unitaria de dosificación y se pueden preparar mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en el campo de la farmacia. Estos métodos incluyen generalmente la etapa de llevar el compuesto de fórmula I en asociación con el portador que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las composiciones farmacéuticas se preparan al llevar uniforme e íntimamente el compuesto en asociación con un portador líquido o un portador sólido finamente dividido o ambos, y luego, si es necesario, con forma del producto en la formulación deseada. En la composición farmacéutica el compuesto se incluye en una cantidad suficiente para producir el efecto deseado en el proceso o condición de las enfermedades. Cuando se administra oralmente y una vez al día, una forma de dosificación se coloca preferiblemente en el intervalo de 50 mg a 300 mg. Esta cantidad es efectiva para mantener o elevar los niveles de hemoglobina en los recipientes anémicos.

Las composiciones armacéuticas están deseablemente en una forma adecuada para uso oral, por ejemplo, como tabletas, grageas, pastillas, suspensiones acuosas u aceitosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones propuestas para el uso oral se pueden preparar de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y tales composiciones pueden contener uno o más agentes tales como agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservadores, por ejemplo para proporcionar preparaciones farmacéuticamente estables y agradables. Las tabletas contienen el compuesto de la fórmula I en mezcla con excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos que son adecuados para la fabricación de tabletas.

Estos excipientes pueden ser por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes de granulación y desintegrantes, por ejemplo, almidón de maíz, o ácido alginico; agentes aglutinantes, por ejemplo almidón, gelatina o acacia, y agentes lubricantes, por ejemplo estearáto de magnesio, ácido esteárico o talco. Las tabletas pueden estar no recubiertas o se pueden recubrir mediante técnicas conocidas para retrasar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionan en consecuencia una acción sostenida durante un periodo más prolongado. Por ejemplo, un material de retraso de tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo se pueden emplear. También se pueden recubrir para formar tabletas terapéuticas osmóticas para la liberación de controlada .

Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar como cápsulas de gelatina dura en donde el compuesto se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blandas en donde el compuesto se mezcla con agua o un medio de aceite, por ejemplo aceite de cacahuete, parafina líquida, o aceite de oliva.

Las suspensiones acuosas contienen los materiales activos en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxi-propilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinil-pirrolidona, goma de tragacanto y goma de acacia; agentes de dispersación o de humectación pueden ser un fosfatido de origen natural, por ejemplo lecitina, o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo, estearato de polioxietileno, o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ásteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de sorbitol de polioxietileno, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de sorbitán de polietileno. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservadores, por ejemplo etilo, o n-propilo, p-hidroxibenzoato, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes , y uno o más agentes edulcorantes, tal como sacarosa o sacarina.

Las suspensiones aceitosas se pueden formular al suspender el compuesto en un aceite vegetal, por ejemplo aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de ajonjolí o aceite de coco, o en un aceite mineral tal como parafina liquida. Las suspensiones aceitosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo cera de abeja, parafina dura o alcohol cet lico. Los agentes edulcorantes tales como aquellos expuestos en lo anterior, y los agentes saborizantes se pueden adicional para proporcionar una preparación oral agradable. Estas composiciones se pueden conservar por la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico.

Los polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa por la adición de agua proporcionan el compuesto en mezcla con un agente de dispersación o de humectación, agente de suspensión y uno o más conservadores. Los agentes de dispersación o humectación adecuados y los agentes de suspensión se ejemplifican por aquellos ya mencionados en lo anterior. Los excipientes adicionales por ejemplo agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes, también pueden estar presentes.

Las composiciones farmacéuticas también pueden estar en la forma de emulsiones de aceite en agua. La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de oliva o aceite de cacahuate, o un aceite mineral, por ejemplo parafina liquida o mezcla de estos. Los agentes emulsificantes adecuados pueden ser gomas de origen natural, por ejemplo, goma de acacia o goma de tragacanto, fosfatidos de origen natural, por ejemplo, soja, lecitina, y ésteres y ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de sorbitán, y productos de condensación de los ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo monooleato de sorbitán de polioxietileno . Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes y saborizantes .

Se pueden formular jarabes y elíxires con agentes edulcorantes, por ejemplo glicerol, propilenglicol, sorbitol y sacarosa. Tales formulaciones también pueden contener un emoliente, un conservador, y agentes saborizantes y colorantes.

Las composiciones farmacéuticas también pueden estar en la forma de una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión se puede formular de acuerdo con la técnica conocida usando aquellos agentes de dispersación o humectantes adecuados y agentes de suspensión que se ha mencionado en lo anterior. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril' en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, como una solución en 1, 3-butanodiol . Entre los vehículos y solventes aceptables que se pueden emplear son agua, solución de Ringer y solución de cloruro de sodio isotónica. Además, los aceites fijos, estériles se emplean convenientemente como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito cualquier aceite fijo blando se puede emplear incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tales como ácido oleico encuentran uso en la preparación de formulaciones inyectables.

El compuesto también puede estar presente para el uso en la forma de composiciones veterinarias, que se pueden preparar, por ejemplo, por métodos que son convencionales en la técnica. Ejemplos de tales composiciones veterinarias incluyen aquellas adaptadas para: (a) administración oral, aplicación externa, por ejemplo pociones (por ejemplo, soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas) ; tabletas o bolos; polvos, gránulos o pelotillas para mezcla con productos alimenticios; pastas para la aplicación a la lengua; (b) administración parenteral por ejemplo mediante inyección subcutánea, intramuscular o intravenosa, por ejemplo, como una solución o suspensión estéril; o (cuando sea apropiado) mediante inyección intramamaria donde una suspensión o solución se introduce en la ubre a través de la tetina; (c) aplicaciones tópicas, por ejemplo como una crema ungüento o roció aplicado a la piel; o (d) rectal o intravaginalmente, por ejemplo como un pesario, crema o espuma.

En el tratamiento de un sujeto identificado, una dosis unitaria apropiada del compuesto de fármacos seleccionado será generalmente de aproximadamente 0.01 a 500 mg por kg de peso corporal del paciente al día que se puede administrar en una sola o múltiples dosis. El nivel de dosificación será de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 250 rag/kg al día; tal como aproximadamente 0.5 a aproximadamente 100 mg/kg al día. Un nivel de dosificación adecuado puede ser de aproximadamente 0.01 a 250 mg/kg al día, de aproximadamente 0.05 a 100 mg/kg al día, o aproximadamente 0.1 a 50 mg/kg al día. Dentro de este intervalo, la dosificación puede ser de 0.05 a 0.5, 0.5 a 5 o 5 a 50 mg/kg al día. Las dosis unitarias adecuadas serán típicamente en el intervalo de 10 a 500 smgs, tal como 50-400 mgs, por ejemplo, 100, 150, 200, 250 o 300 mgs . Para la administración oral, las composiciones se proporcionan preferiblemente en la forma de tabletas que contienen 1.0 a 1000 miligramos del ingrediente activo, particularmente 1, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 750, 800, 900, y 1000 miligramos del ingrediente activo. La dosificación se puede seleccionar, por ejemplo, a cualquier dosis dentro de cualquiera de estos intervalos, para la eficacia terapéutica y/o ajuste sintomático de la dosificación al paciente que se trata. El compuesto será preferiblemente administrado en un régimen de 1 a 4 veces al día, preferiblemente una o dos veces al día.

En una modalidad, el CYT387 se administra oralmente una vez o dos veces al día en una dosis de tableta unitaria de 150mg o 300mg.

Se entenderá que el nivel de dosis especifica y frecuencia de dosificación para cualquier paciente particular se puede variar y dependerá en una variedad de factores que incluyen la actividad del compuesto especifico empleado, la estabilidad metabólica y duración de acción de ese compuesto, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, modo y tiempo de administración, velocidad de excreción, combinación de fármacos, la gravedad de la condición particular y el hospedero que se somete a terapia.

La composición farmacéutica puede comprender además o ser administrada en combinación con otros compuestos terapéuticamente activos útiles para tratar las condiciones patológicas mencionadas en lo anterior. La selección de los agentes apropiados para el uso en la terapia de combinación se puede hacer por una persona de experiencia ordinaria en el campo, de acuerdo con los principios farmacéuticos convencionales .

Para el tratamiento de sujetos anémicos, el CYT387 se puede administrar en combinación con un fármaco, compuesto o modalidad de tratamiento de anemia seleccionados de transfusión sanguínea, suplementos de hierro, terapia de eritropoyetina o darbapoyetina, y similares. Para el tratamiento de sujetos que se presentan con trastornos mieloproliferativos , el CYT387 o un compuesto relacionado se puede administrar en combinación con talidomida, lenalidomida, otros inhibidores de JAK2 o JAK1/2 cinasa que incluyen aquellos mencionados supra, en combinación con hidroxiurea o con anagrelido, o en combinación con bisfosfonatos para disminuir la fibrosis de la médula ósea. Asi también, tales pacientes se pueden someter a terapia de radiación o trasplante de médula ósea alogenéica, como parte de la terapia total que incluye la dosificación de CYT387 o compuesto relacionado.

Todas las publicaciones mencionadas en esta especificación se incorporan en la presente a manera de referencia. Se apreciará por las personas expertas en la técnica que numerosas variaciones y/o modificaciones se pueden hacer á la invención como se muestra en las modalidades especificas sin apartarse del espíritu o alcance de la invención como se describe ampliamente. Las presentes modalidades por lo tanto, se van a considerar en todos los aspectos como ilustrativas y no restrictivas.

Ejemplos El CYT387 es un inhibidor de las enzimas cinasa JAK1 y JAK2, que se han implicado en una familia de condiciones hematológicas conocidas como neoplasmas mieloproliferativos, que incluyen mielofibrosis , y también en numerosos trastornos que incluyen indicaciones en hematología, oncología y enfermedades inflamatorias. La mielofibrosis es una enfermedad debilitante crónica en la cual la médula ósea de un paciente se reemplaza por tejido de cicatriz y por lo cual las opciones de tratamiento son limitadas o insatisfactorias .

Síntesis de CYT387 Una mezcla ácido 4-etoxicarbonilfenil-borónico (23.11 g, 119 mmol) , 2 , 4-dicloropirimidina (16.90 g, 113 mmol) , tolueno (230 mL) y carbonato de sodio acuoso (2 M, 56 mL) se agitó vigorosamente y el nitrógeno se hizo burbujear a través de la suspensión durante 15 minutos. Se agregó tetraquis ( trifenilfosfina ) paladio [0 ] (2.61 g, 2.26 mmol). El nitrógeno se hizo burbujear durante otros 10 minutos, la mezcla se calentó a 100°C, luego a 75°C durante la noche. La mezcla se enfrío, se diluyó con acetato de etilo (200 mL) , se adicionó agua (100 mL) y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (100 mi) y se combinaron los extractos orgánicos. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se filtraron través de sulfato de sodio, se concentraron, y el sólido resultante se trituró con metanol (100 mL) y se filtró. Los sólidos se lavaron con metanol (2x30 mL) y se secaron con aire. Este material se disolvió en acetonitrilo (10 mL) y diclorometano (200 mL) , se agitaron con resina de depuración de Pd MP.TMT (Agronaut número de parte 800471) (7.5 g) durante 2 días. La solución se filtró, los sólidos se lavaron con diclorometano (2x100 mL) , y el material filtrado se concentró para proporcionar 4- (2-cloropirimidin-4-il ) enzoato de etilo como un sólido blanquecino (17.73 g, 60%) el lavado adicional con diclorometano produjo 1.38 g adicionales y 0.5 g de producto.

Una mezcla de 4- (2-cloropirimidin-4-il) benzoato de etilo (26.15 g, 99.7 mmol) y 4-morfolinoanilina (23.10 g, 129.6 mmol) se suspendió en 1,4-dioxano (250 mL) . Se agregó monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (17.07 g, 89.73 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 40 h., se enfrió a temperatura ambiente, se concentró, luego el residuo se particionó entre acetato de etilo y carbonato de sodio saturado/agua 1:1 (1 L total) . La fase orgánica se lavó con agua (2x100 mL) y se concentró. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (3x200 mL) . El material que se precipitó durante este trabajo se recolectó por filtración y se colocó a un lado. Los orgánicos líquidos se combinaron, se concentraron, se trituraron con metanol (200 mL) y se filtraron para producir un sólido amarillo adicional. Los sólidos se combinaron, se suspendieron en metanol (500 mL) , se dejaron reposar durante la noche después se sonicaron y se filtraron. Los sólidos se lavaron con metanol (2x50 mL) para proporcionar, después del secado, 4-(2-(4-morfonlinofenilamino) pirimidin-4-il) benzoato de etilo (35.39 g, 88%) .

Una solución de 4- (2- (4-morfolinofenilaraino) pirimidin-4-il) benzoato de etilo (35.39 g, 87.6 mmol) en metanol/tetrahidrofurano 3:1 (350 mL) se trató con hidróxido de litio (4.41 g, 183.9 mmol) en agua (90 mL) . La mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas, se enfrió, se concentró y se acidificó con ácido clorhídrico (2M, 92.5 mL, 185 mmol). Se filtró el precipitado oscuro, se lavó con agua, se secó y se secó bajo vacío. El sólido se molió a un polvo con un mortero y maja, se trituró con metanol (500 mL) luego se filtro nuevamente para producir ácido 4- (2- ( -morfolinofenilamino) pirimidin-4-il ) benzoico como un sólido lodoso. Este material se lavó con éter, se secó con aire durante la noche, y se molió a un polvo fino con mortero y maja. Sobre la base de la recuperación en masa (34.49 g) el rendimiento se asumió para ser cuantitativo.

A una suspensión de ácido 4- (2- (4-morfolinofenilamino) pirimidin-4-il) benzoico (teóricamente . 32.59 g, 86.6 mmol) en DMF (400 mL) se adicionó trietilamina (72.4 mL, 519.6 mmol, 6 eq.). La mezcla se sónico para asegurar la disolución. Se adicionó clorhidrato de aminoacetonitrilo (16.02 g, 173.2 mmol) seguido por N-hidroxibenzotriazol (anhidro, 14.04 g, 103.8 mmol) y clorhidrato de 2-etil-3- (dimetilaminopropilo) carbodiimida (19.92 g, 103.8 mmol). La suspensión se agitó vigorosamente durante la noche. El solvente se evaporó bajo presión reducida, el residuo se diluyó con 5% de bicarbonato de sodio (400 mL) y agua (300 mL) , dando un sólido amarillo que se entrecortó y se filtró. Los sólidos se lavaron varias veces con 100 mL de porciones de agua, se trituraron con metanol/diclorometano caliente (500 mL, 1:1), se concentraron en un volumen de aproximadamente 300 mL) , se enfriaron y se filtraron. Los sólidos se lavaron con metanol frió (3x100 mL) , éter (200 mL) y hexano (200 mL) antes de secar para producir CYT387 (31.69 g, 88%). .p. 238-243°C.

Resultados clínicos del CYT387 Se diseñó un ensayo clínico para evaluar la seguridad, tolerabilidad, y comportamiento farmacocinético del CYT 387 en un estudio de aumento de la dosis de Fase I en pacientes con mielofibrosis primaria de alto riesgo o intermedio (PMF) y mielofibrosis trombocitemia pos-PV o pos-esencial (ET) . El objetivo secundario fue la evaluación del beneficio del CYT387 para pacientes con mielofibrosis . El CYT387 se administró oralmente (en una cápsula sin excipientes) una vez al día en ciclos de 28 días. Para los pacientes que logran menos de una remisión completa después de 3 ciclos de tratamiento, el aumento se permitió a la dosis tolerada más alta en ausencia de la progresión de la enfermedad o toxicidad inaceptable. Una vez que se identificó la toxicidad limitante de dosis (DLT), una cohorte de confirmación de dosis inició el tratamiento en la dosis tolerada máxima (MTD) y/o una dosis clínicamente efectiva menor .

Los resultados se obtuvieron para 36 sujetos enrolados en el ensayo de Fase U/II de 120 pacientes por lo cual el reclutamiento está en curso. De estos, 18 pacientes fueron de la fase de aumento de dosis, y 18 pacientes fueron de la fase de confirmación de dosis subsecuente. Veinte sujetos (56%) fueron dependientes a la transfusión de glóbulos rojos en la entrada del estudio. El tratamiento previo incluyó otros inhibidores de JAK en diez pacientes (nueve y un sujeto con INCB018424 y TG101348, respectivamente) y pomalidomida en nueve pacientes. La duración de tratamiento medio en la publicación fue de 15 semanas (intervalo 4-38).

Los pronosticadores potenciales de la eficacia de CYT, en términos de respuesta de la anemia y respuesta del bazo, surgieron de este estudio, y se presentan en las Tablas 1 y 2 a continuación: Tabla 1 - Pronosticadores de la respuesta de la Anemia/Bazo - variables clínicas Tabla 2 - Pronosticadores de la respuestas de la Anemia/Bazo - Marcadores Resultados de la Eficacia: Respuesta de la Anemia: La tasa de respuesta de la anemia total fue de 63%. De 22 sujetos quienes fueron evaluables para la respuesta de la anemia (Hgb basal <10 g/dL o dependientes de transfusión de glóbulos rojos), nueve sujetos (41%) hablan logrado "Una mejora Clínica (CI)" conforme a los criterios del Grupo de Trabajo Internacional para investigación y Tratamiento de Neoplasias Mieloproliferativas¦ (IWG- RT), que incluyen dos de cuatro sujetos quienes se trataron previamente con INCB018424. Cinco sujetos adicionales experimentaron una reducción de >50% en el requerimiento de transfusión.

Reducción de- Tamaño del Bazo: Veintinueve (97%) de los 30 sujetos evaluables quienes tuvieron esplenomegalia en la línea base (20 cm medio; intervalo 10-32 cm) tuvieron algún grado de reducción de tamaño del bazo (9 cm medio; intervalo 2-18 cm) . Once (37%) pacientes hablan logrado una disminución del 50% mínimo en el tamaño del bazo palpable, calificándolos de esta manera para criterios de CI por IWG-MRT, que incluyen tres de ocho sujetos (38%) quienes se trataron previamente con INCB018424.

Síntomas Constitucionales: La proporción de los pacientes con los siguientes síntomas de la línea base fue como sigue: fatiga (97%), prurito (22%), sudoraciones nocturnas (38%), tos (13%), dolor óseo (28%), y fiebre (16%) . Al final del seguimiento, la mejora (resolución completa; CR) en estos síntomas se reportó por 68% (16% de CR) , 86% (57% de CR) , 83% (75% de CR) , 75% (50% de CR) , 78% (44% de CR) , y 100% (100% de CR) , respectivamente.

El análisis adicional había revelado que los sujetos respondieron muy favorablemente al CYT387 en términos de sus niveles de hemoglobina/respuesta de la anemia. La Figura 1 muestra las hemoglobinas medias para todos de los primeros 60 pacientes enrolados en el estudio (hasta 6 meses o más). La gráfica muestra las hemoglobinas medias a través del tiempo de la línea base, cuando el CYT387 primero se dosificó. También existe una línea para pacientes "evaluables de anemia" que son pacientes quienes se consideran anémicos en la línea base por los criterios IWG. Es decir tienen un hgb basal de < 10 g/dL o son dependientes de transfusión en la línea base.

La Figura 2 ilustra que los pacientes quienes respondieron al CYT387 muestran un incremento inicial módico en la hemoglobina que se sostiene aun aunque ya no reciben transfusiones de RBC. Estos respondedores, quienes ya no se administran por transfusión, mantienen un nivel de hemoglobina medio que es mayor que el nivel de hemoglobina medio de los no respondedores quienes continúan siendo transfundidos .

Como se muestra, la administración del CYT387 proporciona una mejora clara y sostenida en los niveles de hemoglobina en estos pacientes.

Aún los análisis adicionales revelaron lo siguiente : Respuesta Interina por la Diagnosis Respuesta Interina por Dosis Inicial - Respuesta de la Anemia Resultados de la toxicidad: Hasta la fecha, 36 sujetos se evaluaron para toxicidad. En el nivel de dosis más alto (400 mg/día) , dos de seis sujetos experimentaron toxicidad limitantes de dosis (DLT) (cada uno con hiperlipasemia de grado tres asintomático y dolor de cabeza de grado tres que fueron reversibles en la retención de fármaco) ; consecuentemente, la dosis tolerada máxima (MTD) se declaró a 300 mg/dia. En la fase de confirmación de dosis, los sujetos iniciaron en uno de los dos niveles de dosis que se evaluaron clínicamente efectivos: 150 mg/día (n=15) y 300 mq/día (n=3) . Treinta y cinco sujetos estuvieron en terapia activa en la publicación del resumen: 100 mg/dia (n=2), 150 mg/dia (n=20) , 300 mg/dia (n=10), y 400 mg/dia (n=3) .

El CYT387 se toleró bien. NO se observaron toxicidades no hematológicas de grado . Los eventos adversos no hematológicos de grado 3 no fueron frecuentes e incluyeron transaminasas incrementadas (n=2) , fosfatasa alcalina incrementada (n=2), dolor de cabeza/presión de la cabeza (n=2), lipasa incrementada (n=l) , y prolongación de QTc (n=l). Trece (36%) sujetos experimentaron "efecto de la primera dosis" caracterizada por mareo e hipotensión grado 1; este fenómeno se autolimitó y se resolvió generalmente dentro de 3-4 horas con recurrencia rara. La trombocitopenia de grado 3/4 se observó en ocho (22%) sujetos, y la anemia de grado 3 emergente de tratamiento se observó en un sujeto solamente (3%) . No se observó neutropenia de grado 3/4 emergente de tratamiento.

Claims (21)

REIVINDICACIONES

1. Un método para tratar a un sujeto que padece anemia, caracterizado porque comprende administrar al sujeto una cantidad de N- (cianometil) -4- [2- [ [4- (4-morfolinil) fenil] amino] -4-pirimidinil ] -benzamida [CYT387]- o un compuesto relacionado efectiva para mantener o elevar el nivel de hemoglobina.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el sujeto que padece anemia está afligido con un trastorno mieloproliferativo .

3. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el sujeto que padece anemia está afligido con mielofibrosis primaria.

4. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el sujeto que padece anemia está afligido con mielofibrosis primaria, secundaria a la policitemia vera.

5. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el sujeto que padece anemia está afligido con mielofibrosis primaria, secundaria a la trombocitemia esencial.

6. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el sujeto que padece anemia está afligido con síndrome mielodisplásico .

7. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, caracterizado porque el compuesto es CYT387.

8. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el compuesto es la sal de clorhidrato de CYT387.

9. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizado porque el sujeto anémico no está afligido con un trastorno mieloproliferativo .

10. El uso de CYT387 para tratar anemia.

11. Un articulo de fabricación, caracterizado porque comprende un contenedor que comprende CYT387 en una cantidad útil para tratar anemia y, asociada con el contenedor, una etiqueta que indica el tratamiento de un sujeto afligido con anemia.

12. Un equipo, caracterizado porque comprende un contenedor que comprende CYT387 en una cantidad útil para tratar anemia y, en asociación con el mismo, una instrucción impresa que enseña un método para el tratamiento.

13. Un método mejorado para tratar a un sujeto que tiene, o está en riesgo de, una condición médica por la cual se indica un inhibidor de JAK, el método caracterizado porque comprende las etapas de (1) seleccionar, para tratamiento, un sujeto que cumple por lo menos uno de los siguientes criterios : (i) terapia previa con un fármaco seleccionado de talidomida, lenalidomida, pomalidomida y un inhibidor de JAK diferente a CYT387; (ii) un criterio clínico seleccionado de uno o ambos de (1) tamaño agrandado del bazo y 2) un porcentaje menor de blastos circulantes; (iii) un criterio marcador bioquímico seleccionado de uno o más de (1) un nivel incrementado de por lo menos una proteína seleccionada de EGF, TNF-a, G- . CSF, IFN-a, ?G?-?ß, HGF, MIG, y VEGF; (2) un nivel disminuido de eotaxina; y (3) un nivel alterado de por lo menos una proteina seleccionada de EPO, hepcidina y BMP-2; y después (2) administrar al sujeto seleccionado una cantidad efectiva de tratamiento de CYT387, mediante lo cual el sujeto tratado muestra una respuesta de la anemia y/o una respuesta del bazo que se mejora relativo con un sujeto que no cumple por lo menos uno de los criterios.

1 . El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la indicación para la cual el inhibidor de JAK se indica es un neoplasma mieloproliferativo .

15. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el neoplasma mieloproliferativo es mielofibrosis primaria.

16. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el neoplasma mieloproliferativo es mielofibrosis primaria secundaria a la policitemia vera.

17. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el neoplasma mieloproliferativo es mielofibrosis primaria secundaria a la trombocitemia esencial .

18. El método de conformidad con la reivindicación 13-17, caracterizado porque comprende la etapa preliminar de ¦ clasificar al sujeto o una muestra biológica obtenida del mismo para evaluar por lo menos uno de los criterios.

19. .El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque una muestra biológica obtenida del sujeto se clasifica para evaluar el nivel de por lo menos uno de los marcadores bioquímicos.

20. Un artículo de fabricación, caracterizado porque comprende un contenedor que comprende CYT387 una cantidad útil para tratar el MPN y, asociada con el contenedor, una etiqueta que indica el tratamiento de un sujeto identificado de conformidad con la reivindicación 13.

21. Un equipo, caracterizado porque comprende un contenedor que comprende CYT387 en una cantidad útil para tratar el MPN y, en asociación con el mismo, una instrucción impresa que enseña un método de conformidad con la reivindicación 13.