MX2011004686A - Aparato y metodos para procesar tejido para liberar celulas. - Google Patents

Aparato y metodos para procesar tejido para liberar celulas.

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Abstract

Se describen un aparato y métodos para procesar tejido para liberar material biológico, incluyendo células.

Description

APARATO Y MÉTODOS PARA PROCESAR TEJIDO PARA LIBERAR CÉLULAS Solicitud Relacionada Esta solicitud es una continuación-en-parte de la Solicitud de Patente de Estados Unidos de Norteamérica Co-Pendiente No. 12/263,984, presentada el 3 de noviembre de 2008, la cual se incorpora aquí como referencia en su totalidad.
Campo de la Invención La presente invención se relaciona en general con un aparato y métodos para procesar tejido para obtener células.
Antecedentes de la Invención Con frecuencia, el material biológico se utiliza en aplicaciones terapéuticas, de diagnóstico o de investigación. Sin embargo, puede ser preferible que el material esté separado del tejido del cual se deriva antes de ser utilizado en estas aplicaciones. Por ejemplo, las células madre pueden originar varios tipos de tejido que incluyen tejido adiposo, de músculo y de sangre. Puede ser conveniente separar las células madre de los tejidos antes de otro procesamiento para la introducción en pacientes o para el uso en otras aplicaciones.
Para separar el material biológico del tejido, el tejido con frecuencia se somete a un proceso de disociación o de disgregación. El proceso de disgregación puede involucrar medios mecánicos tal como la homogenización y sonicación. En muchos casos, puede también involucrar el uso de reactivos tal como enzimas que digieren, disuelven o alteran la estructura del tejido para efectuar la liberación del material deseado. Por ejemplo, para obtener las células madres de un tejido adiposo, se puede añadir una solución de una enzima tal como colagenaza para digerir el componente del tejido conectivo del tejido adiposo, lo cual libera las células madre deseadas. El uso de enzimas tal como la colagenaza puede requerir el control de temperatura, pH y otras variables durante el proceso de disgregación del tejido.
Después o incluso durante la disgregación del tejido, el material deseado puede someterse a varias etapas de purificación, lo que posiblemente incluye métodos de filtración, centrifugación y de afinidad. Esto significa que persiste la necesidad de un aparato y métodos para procesar tejido, incluyendo las etapas de disgregación y de purificación, para obtener el material biológico incluyendo células.
Breve Descripción de la Invención En un ejemplo, la invención está dirigida a un aparato para procesar tejido para liberar células del tejido. El aparato incluye un primer alojamiento que tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada. El primer alojamiento está adaptado para recibir una muestra de tejido. La pared externa del primer alojamiento es suficientemente porosa para permitir el paso a través del mismo del material incluyendo células derivadas del tejido. En este ejemplo, el aparato también incluye un segundo alojamiento que por lo menos encierra esencialmente el primer alojamiento y tiene una pared externa que tiene la forma seleccionada y está separado de la pared externa del primer alojamiento, para asi definir un hueco entre ellos, el hueco entre la pared externa del primer alojamiento y la pared externa del segundo alojamiento tienen un ancho uniforme o un ancho continuamente variable. Por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos se puede mover para ayudar en el procesamiento del tejido en el primer alojamiento y en el paso del material que incluye células derivadas del tejido a través de la pared externa porosa del primer alojamiento.
En otro ejemplo, la descripción está dirigida a un aparato para procesar tejido para liberar células del tejido, en donde el aparato tiene un primer alojamiento que tiene una pared externa que tiene la forma seleccionada. El primer alojamiento está adaptado para recibir una muestra de tejido y la pared externa es suficientemente porosa para permitir el paso a través del mismo del material, incluyendo las células derivadas del tejido. El aparato también incluye un segundo alojamiento que encierra por lo menos parcialmente al primer alojamiento y tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada que es esencialmente la misma forma que la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento o varía en forma continua con relación a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento. El primer y el segundo alojamientos también están dispuestos a un ángulo menor que 90° con relación al plano horizontal y el primer alojamiento se puede mover con relación al segundo alojamiento para ayudar a mover el fluido sobre el tejido en el primer alojamiento y pasar el material que incluye células derivadas del tejido a través de la pared externa porosa del primer alojamiento.
La invención también está dirigida a métodos para procesar tejidos.
En un ejemplo, el procesamiento de tejido puede incluir liberar células del tejido. En este ejemplo, una muestra de tejido que contiene las células se inserta dentro del primer alojamiento. El primer alojamiento tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada y que es suficientemente porosa para permitir el paso a través de la misma del material que incluye células derivadas de la muestra de tejido. El primer alojamiento por lo menos queda esencialmente encerrado por un segundo alojamiento que tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada que es esencialmente similar a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento o que varía continuamente con relación a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento. El procesamiento también incluye introducir agentes de liberación de tejido dentro de uno de los alojamientos. El procesamiento también incluye mover por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos para procesar la muestra de tejido y para pasar el material que incluye células derivadas de la muestra de tejido a través de la pared externa porosa del primer alojamiento.
Breve Descripción de los Dibujos La Figura 1 es una vista en diagrama, en sección transversal de un aparato ejemplificativo para procesar tejido.
La Figura 2a es una vista en perspectiva de un aparato ejemplificativo para procesar tejido.
La Figura 2b es una vista en perspectiva, en sección transversal, parcial del ejemplo mostrado en la Figura 2a.
La Figura 2c es una vista en despiece del aparato de la Figura 2a.
La Figura 3a es una vista en perspectiva de otro aparato ejemplificativo para procesar tejido.
La Figura 3b es una vista en perspectiva, en sección transversal, parcial del ejemplo mostrado en la Figura 3a.
La Figura 3c es una vista en despiece del aparato mostrado en la Figura 3a La Figura 4a es una vista en perspectiva de otro ejemplo de un aparato para procesar tejido.
La Figura 4b es una vista en despiece del aparato mostrado en la Figura 4a.
La Figura 5 es una vista en sección transversal, parcial del aparato para procesar tejido de la Figura 4a.
La Figura 6 es un diagrama de flujo esquemático de las etapas ejemplificativas para procesar tejido.
La Figura 7 es una vista en diagrama, en sección transversal de otro ejemplo de un aparato para procesar tejido que emplea un agitador.
Descripción Detallada de la Invención Aunque se describen los ejemplos detallados, se debe entender que estos ejemplos son solamente ejemplificativos, y varios aspectos y características aquí descritos pueden tener utilidad solos o en combinación con otras características o aspectos en otra forma diferente a la mostrada, pero serán evidentes para las personas experimentadas en la técnica.
La material de esta solicitud está dirigida en general a un aparato y a métodos para procesar tejido para obtener material biológico. En un ejemplo preferido, el aparato se utiliza para procesar tejido adiposo para liberar células, en particular células madre.
De conformidad con esta descripción, un aparato para procesar tejido se muestra en una vista en diagrama en sección transversal, generalmente con el número 10 en la Figura 1. El aparato incluye un primer alojamiento 12 que tiene una pared 22 externa. La pared externa tiene una superficie 22a interna y una superficie 22b externa. El primer alojamiento 12 está adaptado para recibir una muestra 16 de tejido. El aparato 10 también incluye un segundo alojamiento 18, con el tamaño suficiente de manera que el primer alojamiento 12 queda esencialmente ubicado dentro o encerrado por el segundo alojamiento 18. El segundo alojamiento 18 incluye una pared 19 externa que tiene una superficie 19a interna y una superficie 19b externa.
Por lo menos una porción de la pared 22 externa del primer alojamiento 12 es porosa. La porción porosa de la pared 22 externa del primer alojamiento 12 permite que el material deseado pase a través del mismo, mientras el material no deseado queda retenido en el primer alojamiento. Por ejemplo, las células 20 se pueden liberar de la muestra 16 de tejido durante un procedimiento de disgregación y pueden pasar desde el interior del primer alojamiento 12 a través de los poros de la pared 22 externa del primer alojamiento 12, mientras los fragmentos 24 más grandes de tejido pueden quedar retenidos en el primer alojamiento 12. Las células 20 que pasan a través de la porción porosa de la pared externa del primer alojamiento 12 pueden pasar dentro del espacio o hueco 26 entre el primer y el segundo alojamientos 12, 18.
En un ejemplo, las paredes 22, 19 externas del primer y segundo alojamientos 12, 18 tienen esencialmente la misma forma. Más específicamente, la superficie 19a interna de la pared 19 externa del segundo alojamiento 18 (en la modalidad ilustrada) es esencialmente cilindrica y la superficie 22b externa de la pared 22 externa del primer alojamiento 12 también es esencialmente cilindrica, lo cual define un hueco 26 entre ellas. El primer y el segundo alojamientos pueden ser coaxiales, lo cual define un hueco de un ancho 26a esencialmente uniforme entre ellos. En forma alternativa, cuando sea conveniente, los respectivos ejes pueden estar desplazados para definir un hueco de ancho variable. También, aunque el ensamble ilustrado emplea alojamientos que son ambos cilindricos, no es necesariamente requerido que uno o ambos tengan la forma cilindrica.
Los diámetros interno y externo, respectivamente, de las paredes 22, 19 del primer y segundo alojamientos 12, 18 se seleccionan de modo que la superficie 19a interna del segundo alojamiento 18 circunscribe la superficie 22b externa del primer alojamiento 12. En otras palabras, las superficies 19a y 22b interna y externa están en un arreglo confrontado y definen el hueco 26 entre ellas, es decir, entre las paredes externas del primer y del segundo alojamientos. El ancho del hueco se puede seleccionar para la separación deseada, la cantidad de fluido de disociación a ser utilizado, y para crear o limitar, según sea deseado, las fuerzas de cizallamiento o la turbulencia dentro del hueco. Por ejemplo, en el ejemplo de la Figura 1, aunque no está dibujado a escala, la pared 22 externa del primer alojamiento 12 puede ser cilindrica, como se muestra y tiene un diámetro externo de aproximadamente 10 cm a aproximadamente 12 cm. La pared 19 externa del segundo alojamiento 18, a su vez puede ser cilindrica, y tiene un diámetro interno de aproximadamente 12 cm a aproximadamente 15 cm. También, por ejemplo, el hueco 26 entre la superficie 22b externa de la pared 22 del primer alojamiento 12 y la superficie 19a interna de la pared 19 del segundo alojamiento 18 puede tener un ancho 26a de hueco dentro del intervalo de aproximadamente 1 cm a aproximadamente 2.5 cm. Esto puede corresponder al aparato ejemplificativo que tiene una capacidad para recibir aproximadamente 500 mi de tejido dentro del primer alojamiento 12 y una capacidad total de aproximadamente 700 mi dentro del segundo alojamiento 18.
Como se menciona antes, el primer y el segundo alojamientos 12, 18 de preferencia comparten un eje longitudinal común y con formas esencialmente similares, correspondientes, un hueco 26 esencialmente uniforme puede ser provisto entre la superficie 22b externa de la pared 22 externa del primer alojamiento 12 y la superficie 19a interna de la pared 19 externa del segundo alojamiento 18. Sin embargo, se podrá apreciar que los alojamientos, en forma alternativa, pueden no compartir los ejes comunes, en cuyo caso, el ancho 26a del hueco no será uniforme, sino que variará en forma continua alrededor del dispositivo. Además, para longitudes pre-seleccionadas de los alojamientos, un menor hueco 26 resultará en una separación más pequeña que tiene un volumen relativamente menor. De conformidad con esto, el ancho 26a del hueco más pequeño entre la superficie 22b externa de la pared 22 externa del primer alojamiento 12 y la superficie 19a interna de la pared 19 externa del segundo alojamiento 18 requerirá un menor volumen de las soluciones potencialmente caras utilizadas para procesar el tejido para sumergir por completo la muestra del tejido, incluyendo la disgregación del tejido. De este modo, se puede requerir una menor cantidad de reactivos de disgregación, tales como las enzimas. Esto puede proporcionar un beneficio en el costo.
Además, el ancho del hueco y la velocidad de rotación relativa de los alojamientos se puede seleccionar por razones dinámicas/de procesamiento del fluido. Por ejemplo, un ancho 26a del hueco más pequeño puede, para un diámetro determinado o la velocidad de rotación relativa entre los alojamiento 12 y 18, puede incrementar las fuerzas de cizallamiento o inducir turbulencia, por ejemplo, vórtices dentro del hueco en el cual se somete el fluido. Esto puede ayudar a asegurar una mezcla más completa de reactivos y tejido durante el procesamiento o mejorar el paso de células a través de la pared externa porosa del primer alojamiento. Las fuerzas de cizallamiento más altas también se pueden lograr con una velocidad de rotación relativamente más alta, tal como por ejemplo, cuando el primer alojamiento gira a una velocidad más alta mientras el segundo alojamiento no gira, o viceversa, o cuando ambos alojamientos giran pero en direcciones opuestas, para asi producir una diferencia en la velocidad de rotación relativa incrementada entre los dos alojamientos. De manera similar, cuando sea deseado someter tejidos más delicados o células a fuerzas de cizallamiento de fluido más bajas, se puede seleccionar un ancho 26a de hueco más grande cuando se determinan los diámetros relativos de las paredes 22, 19 externas del primer y segundo alojamientos 12, 18 y/o se puede utilizar una velocidad de rotación relativa más baja.
Además, el ancho del hueco entre el primer y el segundo alojamientos puede variar en una dirección axial. De este modo, por ejemplo, cuando se trabaja con un tejido más ligero, tal como el tejido adiposo, el hueco puede ser más ancho o más estrecho en un extremo del aparato. Más específicamente, el primer alojamiento puede tener una pared externa con un diámetro externo más grande en la parte superior del primer alojamiento, que en su parte inferior, lo que forma una forma cónica truncada. El diámetro externo del primer alojamiento puede ser, en un ejemplo de 0.5 cm a 1.25 cm más grande en la parte superior que en la parte inferior, lo cual ofrece una forma que varía continuamente, mientras el segundo alojamiento puede tener una pared externa con un diámetro constante, lo cual tiene una forma interna cilindrica. Esto puede crear un hueco similar más cerca de la parte superior del aparato y crea fuerzas de cizallamiento más altas en tal ubicación para ayudar en el procesamiento de células adiposas más ligeras, que pueden tender a flotar o de otra forma, acumularse en esta región superior. Tal hueco más pequeño cerca de la parte superior del aparato también se puede lograr en esta región superior. Tal hueco más pequeño cerca de la parte superior del aparato también se puede lograr con un primer alojamiento que tiene una pared externa cilindrica y un segundo alojamiento que tiene una pared externa con una forma de cono truncado que tiene un diámetro más pequeño en la parte superior del segundo alojamiento que en su parte inferior.
Para procesar algunos tejidos, puede ser conveniente que a una velocidad de rotación determinada, se generen fuerzas de cizallamiento más altas cerca de la parte inferior del aparato. En tales casos, esto se puede lograr por ejemplo, cuando el primer alojamiento tiene una pared externa con una forma de cono truncado que tiene un diámetro externo más pequeño en la parte superior del primer alojamiento, que en su parte inferior, mientras el segundo alojamiento tiene una pared externa con una forma interna cilindrica con un diámetro constante. El hueco más grande cerca de la parte superior del aparato creará fuerzas de cizallamiento potencialmente más bajas en tal ubicación, con relación a las fuerzas de cizallamiento más altas generadas más cerca de la parte inferior del aparato. Tal hueco más pequeño cerca de la parte inferior del aparato también se puede lograr con un primer alojamiento que tiene una pared externa cilindrica y un segundo alojamiento que tiene una pared externa con un diámetro variable, tal como una forma cónica truncada que tiene un diámetro más grande en la parte superior del segundo alojamiento que en su parte inferior.
De este modo, se podrá apreciar que tanto la velocidad de rotación y el hueco entre los alojamientos se puede seleccionar al diseñar el aparato para procedimientos particulares, para alcanzar las fuerzas de cizallamiento deseadas que evitarán la oclusión de los poros en la pared externa del primer alojamiento y para ayudar a crear la disociación del tejido.
Cuando se construye el aparato, el primer y el segundo alojamientos 12, 18 puede formarse de una o más materiales, incluyendo materiales desechables. En un ejemplo preferido, los alojamientos también se forman de materiales que forman alojamientos esencialmente rigidos. Los materiales pueden incluir vidrio, plástico y metal y/o combinaciones de tales materiales. En un ejemplo, el segundo alojamiento puede estar compuesto, por lo menos en parte, de un material relativamente transparente que permite el espacio encerrado por el segundo alojamiento, incluyendo el primer alojamiento, a ser visualizado.
En el aparato ejemplificativo, la porción porosa de la pared 22 externa del primer alojamiento 12 se puede formar de un panel de malla. El panel de malla puede incluir una hoja moldeada que tiene aberturas, una membrana no tejida o una estructura de red o trama que tiene hebras de uno o más materiales que se tejen juntos para formar una estructura porosa. Los materiales útiles en el aparato pueden ser del tipo descrito en las Patentes de Estados Unidos de Norteamérica No. 6,491,819; No. 5,194,145; No. 6,497,821; o la Solicitud publicada de Estados Unidos de Norteamérica No. 20050263452, todas ellas incorporadas aquí como referencia en su totalidad. Los materiales del panel de malla se pueden recubrir con materiales que evitan que el tejido, las células, moléculas o reactivos se adhieran con o reaccionen químicamente con la pared 22 externa. La porción porosa, por ejemplo, puede incluir un alambre de metal tejido junto y recubierto con Teflón. Sin considerar sus formas respectivas, los poros de la pared 22 externa pueden tener el tamaño para ser equivalentes a estar dentro del intervalo de aproximadamente 5 µ?t? a aproximadamente 3000 µ?t? de diámetro. En una modalidad ejemplificativa preferida, los poros son equivalentes aproximadamente a 200 µ??? o más grandes en diámetro. Además, la superficie interna 22a y la superficie 22b externa de la pared 22 externa del primer alojamiento 12 se pueden modificar, de modo que el procesamiento del tejido o los agentes de purificación se enlazan o se incorporan dentro de los materiales de la pared 22 externa.
En varios ejemplos, por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos 12, 18 puede moverse para ayudar en el procesamiento del tejido y el paso de material tal como células, a través de la porción de la pared 22 externa del primer alojamiento 12. Los alojamientos se pueden mezclar, girar, agitar o moverse de otra forma, según sea deseado. El movimiento de uno o ambos alojamientos puede por ejemplo, evitar que los fragmentos 24 de tejido se adhieran al primer alojamiento 12 y también facilitan la distribución uniforme de los agentes liberadores de tejido a través de la muestra de tejido.
En un ejemplo, el primer alojamiento se gira con relación al segundo alojamiento. La velocidad de rotación por ejemplo, puede ser aproximadamente una revolución por segundo. Sin embargo, se podrá apreciar que se pueden seleccionar otras velocidades, según sea deseado. Tal acción de rotación puede utilizarse para incrementar la tasa de cizallamiento entre la pared 22 externa porosa del primer alojamiento 12 y el liquido dentro del espacio 26 para evitar la oclusión de la pared 22 externa porosa por la porción sólida del tejido o de otros materiales utilizados en el procesamiento. De este modo, la velocidad de rotación puede variar para alcanzar la tasa de cizallamiento deseada en la superficie de la pared 22 externa porosa del primer alojamiento 12. Mientras la rotación continua de un alojamiento con relación al otro puede ser preferida, la oscilación giratoria o el variar la velocidad de rotación y/o la dirección de un alojamiento con relación al otro se puede utilizar para incrementar la tasa o el grado de disociación.
En algunos ejemplos, el movimiento de los alojamientos puede lograrse al ajustar los alojamientos dentro de un dispositivo durable o de re-uso con una base sub-yacente que puede incluir dispositivos, tales como uno o más motores que se adaptan para ¡nteractuar con y mover los alojamientos . La base también puede incluir dispositivos para controlar y monitorear la temperatura, el pH y otras variables. pon referencia ahora a las Figuras 2a-2c, se muestra un aparato de procesamiento de tejido en tres vistas. El aparato 28 incluye un primer alojamiento 30 que incluye una pared 32 externa porosa que tiene una superficie 32a interna y una superficie 32b externa. Aunque la pared 32 externa del primer alojamiento 30 se muestra como casi completamente porosa en este ejemplo, la pared puede ser porosa solamente en parte, según sea deseado. También, en este ejemplo, la pared 32 externa del primer alojamiento 30 es esencialmente cilindrica El tamaño del poro de la pared 32 se selecciona, tal como dentro de los intervalos antes descritos, para permitir el paso del material biológico deseado, tal como las células derivadas del tejido que se colocan en el primer alojamiento 30. Como se muestra en este ejemplo, el primer alojamiento 30 queda encerrado por el segundo alojamiento 36. El segundo alojamiento 36 incluye una pared 37 externa que tiene una superficie 37a interna y una superficie 37b externa. La pared 37 externa también es esencialmente cilindrica, y por lo tanto, tiene esencialmente la misma forma que la pared 32 externa del primer alojamiento 30. Puede haber un espacio o hueco 38 definido entre la superficie 32b externa confrontada opuesta de la pared 32 del primer alojamiento y la superficie 37a interna de la pared 37 del segundo alojamiento. Los respectivos diámetros de las paredes 32, 37 externas de los alojamientos 30, 36 y el ancho 38a relativo del hueco entre la superficie 32b externa de la pared 32 externa del primer alojamiento 30 y la superficie 37a interna de la pared 37 externa del segundo alojamiento 36, de preferencia, caen dentro de los intervalos descritos antes con respecto al ejemplo de la Figura 1, pero puede variar según sea deseado para el proceso propuesto. Además, el primer y el segundo alojamientos 30, 36 se puede remover para facilitar el procesamiento, la limpieza o para otros propósitos. En el ejemplo mostrado en las Figuras 2a-2c, el primer y el segundo alojamientos 30, 36 puede tener tapas o cubiertas 39, 40:que se ajustan en una abertura superior de los alojamientos respectivos. Las tapas pueden sellar el contenido del aparato 28 del ambiente externo. Las tapas o cubiertas 39, 40 puede removerse para facilitar la colocación o remoción del tejido, o de otra forma permiten el acceso al contenido de los alojamientos cuando sea deseado La parte inferior de cada alojamiento respectivo también puede contener una tapa o cubierta (no mostrada) o la pared externa de cada alojamiento se puede extender para formar la pared o superficie inferior.
Como se menciona antes, el primer y el segundo alojamientos se pueden adaptar para ajustarse dentro de la estructura 42 de base. La base 42 puede contener un motor para agitar, girar o de otra forma, mover el primer alojamiento 30 con relación al segundo alojamiento 36 para agitar por lo menos uno de los alojamientos y facilita la disgregación del tejido, y la liberación de las células de la muestra de tejido. La estructura de base también puede incluir dispositivos para controlar y monitorear la temperatura, el pH u otras variables apropiadas. Los alojamientos y la base asociada puede emplear los principios y las estructuras descritas en la Patente de Estados Unidos de Norteamérica NO. 5,194,145, en donde la rotación relativa entre los alojamientos interno y externo crean tensiones de cizallamiento para liberar la oclusión dentro del dispositivo para una filtración mejorada.
Las Figuras 3a-3c ilustran otro ejemplo de un aparato 44 de conformidad con la invención. Como con los ejemplos previos, el primer alojamiento 46 tiene una pared 48 externa que está adaptada para recibir una muestra de tejido. La pared 48 externa incluye una superficie 48a interna y una superficie 48b externa y consistente con los ejemplos anteriores, es suficientemente porosa para permitir el paso a través de las mismas de material, incluyendo células derivadas de la muestra de tejido, que de preferencia, retienen el material no deseado. El primer alojamiento 46 queda encerrado por un segundo alojamiento 50 que tiene una pared 51 externa que incluye una superficie 51a interna y una superficie 51b externa.
El primer y el segundo alojamientos pueden tener tapas o cubiertas 52, 54, respectivamente, y tienen forma similar a las paredes externas, que en este ejemplo, tienen forma de cono truncado o como se describe antes, pueden tener otra forma que resulten en un hueco variado entre los alojamientos. De este modo, el primer alojamiento 46 y el segundo alojamiento 50 se pueden configurar para asi formar un hueco 55 de un ancho 55a de hueco relativamente uniforme entre la superficie 48b externa de la pared 48 externa del primer alojamiento 46 y la superficie 51a interna de la pared 51 externa del segundo alojamiento 50, cuando las paredes 48, 51 externas del alojamiento corresponden en tamaño y tienen esencialmente la misma forma. Este ancho 55a del hueco puede tener un tamaño predeterminado, lo que resulta en un espacio predeterminado entre estas superficies, como se describe antes con los ejemplos previos.. El ancho 55a del hueco entre las superficies respectivas puede seleccionarse dependiendo de algunos factores, tal como los antes descritos con respecto a las fuerzas de cizallamiento, el volumen de reactivos requerido u otros factores, o otra vez, se puede variar dependiendo de la forma de los alojamientos respectivos.
Una estructura 56 de base puede incluir dispositivos para girar el primer y/o el segundo alojamientos o agitar por lo menos uno de los alojamientos con relación al otro y también puede incluir monitores y sistemas relacionados para detectar y controlar la temperatura, el pH y otras variables, según sea deseado. En este ejemplo, la base 56 incluye un motor, tal como una transmisión de engranes o magnética (no mostrados) que se adaptan para accionar un acoplamiento 57 magnético o de engranes cooperativo en una cubierta 58 de base, para provocar la ¦ rotación del primer alojamiento 46 dentro del segundo alojamiento 50 a una velocidad fija o variable. Otra vez, aunque el primer y el segundo alojamientos se ilustran como concéntricos, los ejes se pueden desplazar para proporcionar un hueco 55 de ancho 55a variable en diferentes ubicaciones circunferenciales alrededor del hueco y el ancho del hueco puede variar en forma axial cuando los alojamientos no tienen la misma forma.
Las Figuras 4a y 4b muestran otro ejemplo de un aparato 60 de conformidad con la invención. En este ejemplo, un primer alojamiento 62 incluye una pared 64 externa y está adaptado para recibir una muestra de tejido. La pared 64 externa es suficientemente porosa para permitir el paso a través de la misma del material que incluye células derivadas del tejido, y tiene una superficie 64a interna y una superficie 64b externa. El primer alojamiento 62 está encerrado por un segundo alojamiento 68 con una cubierta 69. El segundo alojamiento 68 incluye una pared 71 externa que tiene una superficie 71a interna y una superficie 71b externa. El tamaño del alojamiento y el hueco entre los alojamientos tiene la intención de estar dentro de los intervalos antes descritos, y se debe apreciar que en este ejemplo, las paredes 64, 71 externas respectivas del alojamiento tienen esencialmente una forma cilindrica. En este ejemplo, el primer y el segundo alojamientos 62, 68 están colocados en una base 70 a un ángulo menor que 90° en la superficie en donde descansa el aparato 60. Esta posición en ángulo o reclinada incrementa el área superficial del tejido dentro del primer alojamiento que puede quedar expuesta a un fluido o solución colocada en el aparato 60, cuando el fluido no llena por completo el segundo alojamiento 68. De esta forma, se puede utilizar menos solución mientras hace contacto con más tejido en el primer alojamiento. Como con la selección del hueco y la separación entre la superficie 64b externa de la pared 64 externa del primer alojamiento 62 y la superficie 71a interna de la pared 71 externa del segundo alojamiento 68, esto puede proporcionar otra forma para limitar los fluidos requeridos para alcanzar el procesamiento deseado.
La base 70 puede incluir un motor que se puede utilizar para girar el primer alojamiento 62 con relación al segundo alojamiento 68 para mejorar el procesamiento de la muestra de tejido y el paso de material, incluyendo células, a través de la pared 64 externa porosa. La base 70 también incluye dispositivos para controlar y monitorear la temperatura, el pH y otras variables, según sea deseado. Además, un puerto 72 puede estar presente en el fondo del segundo alojamiento 68 para permitir el flujo de fluido, entre los que se incluyen fluidos que contienen material biológico, tal como células, del aparato.
La Figura 5 muestra otro ejemplo de un aparato 74 para procesar tejido. La vista en sección transversal incluye células 90 liberadas y una solución 92, tal como una solución del agente de disgregación. Como con los ejemplos previos, el primer alojamiento 76 incluye una pared 78 externa porosa y está adaptada para recibir una muestra de tejido. Aunque esta vista otra vez no está a escala, el primer alojamiento 76 además se muestra con un diámetro esencialmente reducido, solamente para propósitos descriptivos. La pared 78 externa del primer alojamiento 76 incluye una superficie 78a externa y una superficie 78b interna. El primer alojamiento 76 está encerrado por un segundo alojamiento 82 que incluye una pared 85 externa con una superficie 85a interna y una superficie 85b externa. El primer y el segundo alojamientos 76, 82 puede tener tapas o cubiertas 83, 84, respectivamente, y pueden estar colocados en una base 96. Los alojamientos 76, 82 de este ejemplo pueden tener el tamaño dentro de los intervalos previamente descritos y las paredes 78, 85 de preferencia, tienen tamaños correspondientes para permitirles que tengan esencialmente la misma forma, que en este ejemplo ilustrado son cilindricas, aunque como se describe antes, pueden estar en situaciones en donde las diferentes formas en sección transversal y los huecos variados entre los alojamientos son convenientes.
Como en los ejemplos previos, la base 96 puede incluir uno o más motores o unidades de accionamiento tal como accionamientos acoplados en forma magnética o de engrane que se pueden utilizar para mover por lo menos uno de los alojamientos, tal como para girar el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento, para mejorar el procesamiento del tejido en el primer alojamiento y el paso a través del mismo del material, incluyendo células, derivadas de la muestra de tejido. La base 96 también puede incluir dispositivos para controlar y monitorear la temperatura, el pH y otras variables, según sea deseado. Además, una salida 86 y una tubería 88 pueden ser provistas para que el material biológico, tal como las células 90 liberadas durante la disgregación del tejido, pueda fluir fuera del segundo alojamiento 82 del procesador 74 de tejido.
De conformidad con la descripción y con referencia general a la Figura 5, el método para usar el aparato 74 por lo general, incluye insertar una muestra de tejido que contiene células (por ejemplo, tejido adiposo que contiene células madre) dentro del primer alojamiento 76. La muestra de tejido se somete a un proceso de disgregación mientras se coloca en el primer alojamiento. El proceso de disgregación puede incluir añadir una solución 92 para facilitar la liberación del material biológico. El material biológico, tal como las células 90 se pueden liberar durante la disgregación y las células 90 pueden fluir desde el primer alojamiento 76 a través de la pared 78 externa porosa del primer alojamiento 76. En este ejemplo, las células se muestran como inicialmente recolectadas en un espacio que se forma por el hueco 94 del ancho 94a del hueco entre la superficie 78b externa de la pared 78 externa del primer alojamiento 76 y la superficie 85a interna de la pared 85 externa del segundo alojamiento 82. Durante el procedimiento de disgregación, por lo menos uno del primer y segundo alojamientos pueden girar o agitarse de otra forma uno con relación al otro para facilitar la liberación de células desde la muestra de tejido y el flujo de células a través de la pared 78 externa porosa del primer alojamiento 76.
De conformidad con la descripción, el aparato se puede utilizar con varías fuentes de tejido en donde la disgregación sea conveniente. Por ejemplo, el aparato se puede utilizar con el tejido o músculo adiposo, que se encuentran entre las fuentes preferidas de células madre adultas. El material derivado del tejido que se pueden liberar incluyen células, incluyendo células individuales, agregados multi-celulares y células asociadas con el material no celular. Las células liberadas pueden incluir más de un tipo de célula. En algunos ejemplos, el material biológico también puede ser esencialmente no celular. En un ejemplo preferido, el procesador de tejido puede utilizarse para procesar el tejido adiposo para liberar células madre.
En el ejemplo de tejido adiposo, el tejido se puede obtener de un paciente con los procedimientos convencionales, incluyendo lipoaspiración o liposucción. El tejido adiposo obtenido del paciente puede entonces colocarse directamente dentro del primer alojamiento o ¡nicialmente se puede lavar o tratarse de otra forma antes de ser colocado en el primer alojamiento.
En un ejemplo, el proceso de disgregación de tejido puede involucrar el tratamiento enzimático de la muestra de tejido. Por ejenhplo, la digestión con colagenaza de tejido conectivo se puede utilizar para i; efectuar la liberación de células madre del tejido adiposo. Cuando se i : utiliza el tratamiento enzimático, se puede añadir una solución de la enzima directamente en el primer alojamiento 76 en donde se encuentra el tejido, o se añade al espacio en el hueco 94 entre las paredes del primer y del segundo alojamientos 76, 82, de modo que la enzima de distribuye desde el espacio entre los alojamientos dentro del primer alojamiento 76 Después o durante el proceso de disgregación, el flujo de células 90 desde el primer alojamiento 76 a través de la pared 78 externa porosa del primer alojamiento 76 se puede facilitar al hacer fluir o bombear los fluidos compatibles con las células a través del primer alojamiento 76, de modo que las células se conducen desde el primer alojamiento a través de la pared 78 externa porosa por el flujo de fluidos. En un ejemplo, puede haber un flujo continuo de fluido a través del primer alojamiento 76 para conducir células desde el primer alojamiento a través de la pared 78 externa porosa y hacia una salida 86 ubicada, por ejemplo, en el fondo del segundo alojamiento 82, como se muestra en el ejemplo en la Figura 5.
En un ejemplo, el aparato se puede vincular directamente con uno o más sistemas o aparato para otro procesamiento de materiales. El material derivado del tejido, incluyendo células, puede fluir desde el aparato de procesamiento de tejido a través de una salida y puede entonces fluir a los sistemas , tales como los que emplean un separador, tal como una membrana giratoria o centrifuga para el lavado, la reducción de volumen, el tratamiento u otro procesamiento de las células, tal como por ejemplo, purificar a través de inmuno-selección u otros procesos apropiados. La Figura 6 es un diagrama de flujo esquemático que muestra la forma en que el aparato de procesamiento de tejido puede ser parte de sistemas más grandes para el tratamiento de múltiples etapas y la purificación de las células. Una bomba (no mostrada), tal como una bomba peristáltica u otra bomba apropiada, puede estar incluida para facilitar el flujo de material, tal como células, desde un aparato de procesamiento dé tejido para los sistemas de procesamiento de células.
Otro ejemplo de un aparato para procesar tejido 98 de conformidad con la invención, se muestra en la Figura 7. En varios ejemplos, el aparato 98 incluye un primer alojamiento 100 con una pared 102 externa porosa que tiene una superficie 102a interna y una superficie 102b externa. El primer alojamiento 102 está adaptado para recibir una muestra de tejido y queda encerrado dentro del segundo alojamiento 104, que incluye una pared 105 externa que tiene una superficie 105a interna y una superficie 105b externa. Los tamaños relativos de los alojamientos 100, 104 y la distancia entre las paredes 102, 105 externas respectivas de este ejemplo se mantienen dentro de los intervalos antes descritos. Además, las paredes 102, 105 externas del alojamiento tienen esencialmente la misma forma cilindrica.
En este ejemplo, el aparato también incluye un agitador 106 que está ubicado dentro del primer alojamiento 100 para mejorar el procesamiento del tejido. El agitador 106 puede mejorar la disgregación del tejido al hacer contacto directo con el tejido 108 para disociar o romper el tejido 108, al crear efectos de cizallamiento dentro del primer alojamiento 100, al mejorar el reactivo y la mezcla de tejido o por alguna combinación de estos efectos.
En el ejemplo mostrado en la Figura 7, el agitador 106 está configurado como un émbolo, aunque puede tener otra configuración apropiada, tal como una paleta, un batidor u otro implemento. El diámetro y la longitud del émbolo asi como la contracción del ángulo del émbolo se pueden seleccionar de acuerdo con los requerimientos particulares. Un agitador 106, tal como un émbolo, como se describe aquí se puede utilizar con cualquier otro de los ejemplos descritos de un aparato de procesamiento de tejido.
El aparato 98 también de preferencia, incluye un mecanismo de accionamiento para mover el agitador 106, por ejemplo, tal como girar el émbolo descrito. En el ejemplo mostrado en la Figura 7, el émbolo es accionado por un motor 114 a través de una flecha 112 de accionamiento montada en un soporte 116. Se debe apreciar que en otras modalidades, puede ser deseable utilizar un mecanismo de accionamiento magnético para girar el émbolo, para que el contenido del primer y del segundo alojamientos 100, 104 se pueda sellar por completo del ambiente exterior.
De conformidad con este ejemplo, como en los ejemplos previos, una muestra de tejido se coloca dentro del primer alojamiento 100 que contiene un agitador o émbolo 106. Una solución que contiene un agente de disgregación de tejido, tal como colagenaza también se puede colocar dentro del primer o segundo alojamientos 100, 104. Durante el procesamiento de la muestra de tejido, el agitador 106 y el primer alojamiento 100 pueden ambos girar con relación al segundo alojamiento 104. El agitador y el primer alojamiento 100 pueden ambos girar con relación al segundo alojamiento 104. El agitador y el primer alojamiento 100 pueden gi rar en la misma dirección o en direcciones diferentes, en forma continua o intermitente y ala misma velocidad o velocidades diferentes uno con relación al otro. En un ejemplo preferido, el agitador 106 y el primer alojamiento 100 giran en diferentes direcciones.
El contacto directo del agitador 106 con el tejido 108 puede efectuar la disociación o ruptura del tejido 108 en fragmentos más pequeños, lo que mejora la disgregación del tejido. Además, la rotación del émbolo puede mejorar la disgregación del tejido debido a los efectos de cizallamiento en el tejido y mejorar el mezclado del tejido y los reactivos de disgregación. Como en los ejemplos previos, la disgregación del tejido resulta en fragmentos 108 de tejido más grandes que quedan retenidos en el primer alojamiento 100, mientras las células 100 pasan a través de la pared 102 externa porosa del primer alojamiento 100.
Los aspectos de la invención aquí descrita pueden ser benéficos solos o en combinación, con uno o más aspectos. Sin limitar la descripción anterior, de conformidad con un aspecto de la materia, se proporciona un aparato para procesar tejido para liberar células del tejido, en donde el aparato comprende un primer alojamiento que tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada. El primer alojamiento está adaptado para recibir una muestra de tejido y la pared externa tiene una superficie externa y es suficientemente porosa para permitir el paso del material incluyendo células derivadas del tejido. El aparato también comprende un segundo alojamiento que encierra por lo menos al primer alojamiento y tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada y una superficie interna. La superficie interna de la pared externa del segundo alojamiento está separada de la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento para así definir un hueco entre ellas. El hueco entre la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento y la superficie interna de la pared externa del segundó alojamiento tiene un ancho uniforme o varia en forma continua en el ancho. Además, por lo menos uno del primer y segundo alojamientos se puede mover para ayudar en el procesamiento del tejido en el primer alojamiento y el paso del material incluyendo células derivadas del tejido a través de la pared externa porosa del primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, los alojamientos están adaptados para ajustarse dentro de una base.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, la base está adaptada para mover el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, la base está adaptada para girar el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los tres aspectos anteriores, la base está adaptada para sostener el primer y el segundo alojamientos a un ángulo menor que 90° con relación a una superficie sobre la cual descansa la base durante el procesamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, la pared externa del segundo alojamiento es esencialmente rígida.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, las paredes externas respectivas del primer y del segundo alojamientos tienen una forma esencialmente cilindrica.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, la pared externa del primer alojamiento es suficientemente porosa para permitir el paso a través de la misma del material que incluye células que tienen un diámetro de aproximadamente 5 a 3000 µ?t?.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, la pared del primer alojamiento es suficientemente porosa para permitir el paso de material que incluye células que tienen un diámetro de aproximadamente 200 µ?t?.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, la pared externa del primer alojamiento también comprende un panel de malla.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, el primer alojamiento se puede remover del segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, el aparato está adaptado para ser vinculado con un sistema para procesar células.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, los alojamientos están adaptados para recibir un agente liberador de tejido en comunicación con la muestra de tejido.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, el agente liberador de tejido es una enzima.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, la muestra de tejido es un tejido adiposo De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, el material incluye células que comprende células madre.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, un agitador está dispuesto en forma móvil dentro del primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquiera de los aspectos anteriores, el agitador comprende un émbolo que puede girar con relación al primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto, se proporciona un aparato para procesar tejido para liberar células del tejido, el cual comprende un primer alojamiento que tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada. Además, el primer alojamiento está adaptado para recibir una muestra de tejido y la pared externa es suficientemente porosa para permitir el paso de material que incluye células derivadas del tejido. El aparato también incluye un segundo alojamiento que encierra esencialmente al primer alojamiento y tiene una pared externa que tiene la forma seleccionada que es esencialmente la misma forma que la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento o varía en forma continua con relación a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento. El primer y el segundo alojamientos están dispuestos a un ángulo menor que 90° cbh relación al plano horizontal. El primer alojamiento se puede mover con relación al segundo alojamiento para ayudar a mover el fluido sobre el tejido en el primer alojamiento y pasar el material que incluye células desde el tejido a través de la pared externa porosa del primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, los alojamientos están adaptados para ajustarse dentro de una base.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, la base está adaptada para mover el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con los dos aspectos anteriores, la base está adaptada para girar el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los cuatro aspectos anteriores, la pared externa del segundo alojamiento es esencialmente rígida.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los cinco aspectos anteriores, las respectivas paredes externas del primer y segundo alojamientos tienen una forma esencialmente cilindrica.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los seis aspectos anteriores, la pared externa del primer i ; alojamiento incluye un panel de malla.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los siete aspectos anteriores, el primer alojamiento se puede remover del segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los ocho aspectos anteriores, el aparato está adaptado para ser vinculado con un sistema para procesar tejido.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los nueve aspectos anteriores, el fluido incluye un agente liberador de tejido.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, el agente liberador de tejido es una enzima.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los once aspectos anteriores, la muestra de tejido es un tejido adiposo.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los doce aspectos anteriores, el material incluye células que comprenden células.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los trece aspectos anteriores, un agitador está dispuesto en forma móvil dentro del primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, el agitador comprende un émbolo que puede girar con relación al primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los quince aspectos anteriores, la pared externa del primer alojamiento tiene una superficie externa y la pared externa del segundo alojamiento tiene una superficie interna y la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento está separada de la superficie interna de la pared externa del segundo alojamiento para definir un hueco.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los dieciséis aspectos anteriores, un hueco entre la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento y la superficie interna de la pared externa del segundo alojamiento tiene un ancho uniforme o varia en forma continua.
De conformidad con otro aspecto, se proporciona un método para procesar tejido para liberar células del tejido que comprende insertar la muestra de tejido que contiene células dentro del primer alojamiento, en donde el primer alojamiento tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada y es suficientemente poroso para permitir el paso de material que incluye células derivadas de la muestra de tejido. Además, el primer alojamiento queda por lo menos esencialmente encerrado por el segundo alojamiento que tiene una pared externa que tiene la forma seleccionada que es esencialmente similar a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento o que varía en forma continua con relación a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento. Además, los agentes liberadores de tejido se pueden introducir dentro de por lo menos uno de los alojamientos. Por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos puede moverse para procesar la muestra de tejido ' y para pasar el material que incluye células derivadas de la muestra de tejido a través de la pared externa porosa del primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, el agente liberador de tejido se añade en el primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los dos aspectos anteriores, el agente liberador de tejido se añade en el segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los tres aspectos anteriores, el agente liberador de tejido es colagenaza.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los cuatro aspectos anteriores, la muestra de tejido es tejido adiposo.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los cinco aspectos anteriores, las células derivadas de la muestra de tejido comprenden células madre.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los seis aspectos anteriores, las células derivadas de la muestra de tejido fluyen fuera del segundo alojamiento hacia un dispositivo de recolección.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los siete aspectos anteriores, se utiliza una bomba 'para fluir las células derivadas de la muestra de tejido fuera del segundó alojamiento hacia un dispositivo de recolección.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los ocho aspectos anteriores, las células derivadas de la muestra de tejido fluyen a un aparato para otro procesamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los nueve aspectos anteriores, el mover por lo menos1 uno de por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos incluye mover el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, el mover el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento incluye girar el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los dos aspectos anteriores, mover el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento incluye agitar el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los doce aspectos anteriores, un agitador se coloca dentro del primer alojamiento.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con el aspecto anterior, el agitador gira en una dirección y el primer alojamiento gira en una dirección opuesta.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los catorce aspectos anteriores, las paredes externas respectivas del primer y segundo alojamientos tienen una forma esencialmente cilindrica.
De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los quince aspectos anteriores, la pared externa del primer alojamiento tiene una superficie externa y la pared externa del segundo alojamiento tiene una superficie interna y la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento está separada de la superficie interna de la pared externa del segundo alojamiento para definir un hueco De conformidad con otro aspecto que se puede utilizar o combinar con cualquier de los dieciséis aspectos anteriores, un hueco entre la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento y la superficie interna de la pared externa del segundo alojamiento tiene un ancho uniforme o varía continuamente.
Aunque los aspectos antes descritos se refieren a otros aspectos con los cuales se pueden utilizar o combinar, tales aspectos también se pueden utilizar o combinar con otros aspectos no nombrados, hasta el grado en que las personas experimentadas en la técnica consideren que es apropiado.
Se debe entender que los ejemplos de la presente invención son ilustrativos de algunas de las aplicaciones de los principios de la presente invención. Se pueden realizar muchas modificaciones por las personas experimentadas en la técnica sin apartarse del verdadero espíritu y alcance de la invención. Las diferentes características que se describen aquí pueden utilizarse en combinación y no están limitadas a las combinaciones particulares que se describen específicamente.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Un aparato para procesar tejido para liberar células del tejido, caracterizado porque comprende: un primer alojamiento que tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada, el primer alojamiento está adaptado para recibir una muestra de tejido y una pared externa tiene una superficie externa y es suficientemente porosa para permitir el paso de material que incluye células derivadas del tejido; un segundo alojamiento que esencialmente encierra por lo menos al primer alojamiento y tiene una pared externa que tiene la forma seleccionada y una superficie interna que está separada de la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento, para asi, definir un hueco entre ellas, el hueco entre la superficie externa de la pared externa del primer alojamiento y la superficie interna de la pared externa del segundo alojamiento tiene un ancho uniforme o un ancho que varia continuamente; y por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos se puede mover con relación al otro del primer y del segundo alojamientos para ayudar a procesar el tejido en el primer alojamiento y el paso de material que incluye células derivadas del tejido a través de la pared externa porosa del primer alojamiento.
2. El aparato de conformidad con la reivindicación : 1 , caracterizado porque los alojamientos están adaptados para ajustarsé dentro de una base.
3. El aparato de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la base está adaptada para mover el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
4. El aparato de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque la base está adaptada para girar el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
5. El aparato de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la base está adaptada para sostener al primer y al segundo alojamientos a un ángulo menor que 90° con relación a la superficie sobre la cual descansa la base durante el procesamiento.
6. El aparato de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la pared externa del segundo alojamiento es esencialmente rígida.
7. El aparato de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la pared externa del primer alojamiento es suficientemente porosa para permitir el paso de material que incluye células que tiene un diámetro de aproximadamente 5 a aproximadamente 3000 µ??.
8. El aparato de conformidad con la reivindicación i, caracterizado porque la pared externa del primer alojamiento también comprende un panel de malla.
9. El aparato de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque los alojamientos están adaptados para recibir un agente liberador de tejido en comunicación con la muestra de tejido.
10. El aparato de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque además comprende un agitador dispuesto en forma móvil dentro del primer alojamiento.
11. Un método para procesar tejido para liberar células del tejido, caracterizado porque comprende: a) insertar una muestra de tejido que contiene células dentro del primer alojamiento, en donde el primer alojamiento tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada y que es suficientemente porosa para permitir el paso de material que incluye células derivadas de la muestra de tejido y en donde el primer alojamiento queda por lo menos esencialmente encerrado por el segundo alojamiento que tiene una pared externa que tiene una forma seleccionada que es esencialmente similar a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento o que varía en forma continua con relación a la forma seleccionada de la pared externa del primer alojamiento; b) introducir los agentes liberadores de tejido en por lo menos uno de los alojamientos; y [- c) mover por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos con relación al otro del primer y segundo alojamientos para procesar la muestra de tejido y para pasar el material que incluye células derivadas de la muestra de tejido a través de \£ pared externa porosa del primer alojamiento.
12. El método de conformidad con la reivindicación 11;, caracterizado porque el agente liberador de tejido se añade al primer alojamiento.
13. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el agente liberador de tejido se añade en el segundo alojamiento.
14. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque además comprende fluir las células derivadas de la muestra de tejido a un aparato para otro procesamiento.
15. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque mover por lo menos uno del primer y del segundo alojamientos también comprende mover el primer alojamiento con relación al segundo alojamiento.
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