MX2011002554A - Semilla geneticamente modificada combinada con bacteria formadora de esporas y agentes para combatir insectos opcionales. - Google Patents

Semilla geneticamente modificada combinada con bacteria formadora de esporas y agentes para combatir insectos opcionales.

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Abstract

Se proporcionan productos que mejoran el vigor y rendimiento globales de las plantas combinando cantidades agrícolamente eficaces de al menos una bacteria formadora de esporas y al menos un agente para combatir insectos opcional a una planta, parte vegetal o semilla genéticamente modificada. Este producto es particularmente eficaz en presencia de especies de nematodos y fúngicas parásitas de las plantas. El uso del producto conduce a una reducción global en las pérdidas de cosechas producidas por o nematodos u hongos parásitos de las plantas y esta reducción es mucho mayor que usando semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos. Según algunas realizaciones, el uso del producto produce aproximadamente un aumento del 2%-10% en rendimiento por fanega de soja, un aumento del 3%-6,5% en rendimiento de algodón y un aumento del 3%-8% en rendimiento por fanega de maíz. También se proporcionan procedimientos para utilizar y preparar la combinación.

Description

SEMILLA GENÉTICAMENTE MODIFICADA COMBINADA CON BACTERIA FORMADORA DE ESPORAS Y AGENTES PARA COMBATIR INSECTOS OPCIONALES CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere, en general, a productos y procedimientos para reducir el daño global y las pérdidas en la salud, el vigor y el rendimiento de las plantas producidos por nematodos y hongos parásitos de las plantas. Más específicamente, la invención se refiere a productos que comprenden semilla genéticamente modificada y al menos una bacteria formadora de esporas agrícolamente beneficiosa combinada con un agente para combatir insectos opcional, y a procedimientos para utilizar la combinación para tratar semillas, plantas y partes vegetales genéticamente modificadas.
DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA RELACIONADA Los nematodos son gusanos sin segmentar microscópicos conocidos por residir en prácticamente cualquier tipo de ambiente (terrestre, de agua dulce, marino). De las más de 80.000 especies conocidas, muchas tienen importancia agrícola, particularmente las clasificadas como plagas. Una especie de este tipo es el nematodo de los nudos de la raíz que ataca una gran variedad de plantas, arbustos y cosechas. Estos nematodos transmitidos por la tierra atacan las raíces formadas recientemente produciendo un crecimiento atrofiado, hinchamiento o formación de agallas. Entonces, las raíces pueden abrirse violentamente exponiéndose así las raíces a otros microorganismos tales como bacterias y hongos. Con prácticas respetuosas con el medioambiente tales como un cultivo reducido o sin labranza, y diversas especies de nematodos que adquieren resistencia a semilla transgénica, las pérdidas de cosechas relacionadas con nematodos parecen que van en aumento.
Los nematicidas químicos tales como fumigantes de la tierra o no fumigantes se han usado durante muchos años para combatir infestaciones. Tales nematicidas pueden requerir aplicaciones repetidas de productos químicos sintéticos en el suelo antes de la plantación. Debido a su toxicidad, los nematicidas químicos han sido analizados minuciosamente por la Agencia de protección del medioambiente (EPA) y en algunos casos su uso ha sido limitado o restringido por la EPA. Como el uso de nematicidas químicos tradicionales tales como bromuro de metilo y organofosfatos continúa retirándose paulatinamente, ha surgido la necesidad del desarrollo de opciones de tratamiento alternativas. La patente de EE.UU. n° 6.593.273 desvela el tratamiento de semillas de maíz transgénico con plaguicidas para tratar infestaciones por nematodos.
La patente de EE.UU. n° 6.844.339 desvela el uso de un neonicotinoide para combatir nematodos. Los compuestos preferidos en la patente 339 son compuestos de nitroimino o nitroguanidino. El neonicotinoide puede aplicarse tanto al entorno del nematodo como al propio material vegetal. El documento WO/2007/149817 desvela combinar un agente de combate biológico con un nematicida, tal como avermectina, para potenciar la fitoprotección contra plagas y patógenos. Sin embargo, esta combinación no trata sobre la toxicidad del uso de determinados nematicidas químicos.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Sigue existiendo la necesidad de composiciones y procedimientos eficaces que usen componentes biológicos respetuosos con el medio ambiente y nematicidas químicos menos tóxicos, pero que los utilicen de una forma tal que puedan proporcionar un vigor y un rendimiento de las plantas mejorados sin el uso de nematicidas químicos tradicionales más tóxicos.
La invención proporciona productos y procedimientos mejorados para combatir el daño o las infestaciones por nematodos. El producto usa al menos una bacteria formadora de esporas y un agente para combatir insectos opcional, y un agente de combate fungicida opcional, en combinación con una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada.
También se proporcionan procedimientos para tratar una semilla, planta y/o parte vegetal. El procedimiento comprende (a) proporcionar una composición que comprende una cantidad eficaz de al menos una bacteria formadora de esporas; (b) combinar la bacteria formadora de esporas con un agente para combatir insectos opcional; y (c) aplicar la composición a la semilla, planta y/o parte vegetal genéticamente modificada. La aplicación puede hacerse de cualquier modo deseado, tal como en forma de recubrimiento de semilla, empapado de la tierra y/o directamente en surco y/o como una pulverización foliar y aplicarse o en preemergencia, posemergencia o ambos. Opcionalmente, el agente para combatir insectos puede aplicarse por separado a la semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada. Además, al menos un fungicida también puede combinarse con la bacteria formadora de esporas, el agente para combatir insectos opcional, o aplicarse por separado a la planta, semilla o parte vegetal genéticamente modificada. En resumen, los componentes individuales o la composición pueden aplicarse a la semilla, la planta, las hojas de la planta, al fruto de la planta o a la tierra en la que está creciendo la planta o en la que se desea que crezca.
Según un aspecto de la invención, se proporciona un producto que comprende una bacteria formadora de esporas combinada con un agente para combatir insectos opcional y una semilla genéticamente modificada.
En otro aspecto de la invención se proporciona un procedimiento para tratar una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada que comprende aplicar a la semilla, planta o parte vegetal al menos una bacteria formadora de esporas; y, opcionalmente, al menos un agente para combatir insectos.
En otro aspecto de la invención se proporciona un procedimiento de protección de una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada de nematodos que comprende proporcionar al menos un composición que comprende del 0,0001 al 20% en peso de al menos una bacteria formadora de esporas y del 0,001 al 20% en peso de al menos un agente para combatir insectos; y aplicar la composición a la semilla, planta o parte vegetal.
En todavía otro aspecto de la invención se proporciona una composición para proteger una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada de nematodos que comprende: (i) al menos una bacteria formadora de esporas en una cantidad de aproximadamente el 2% en peso al 80% en peso; (ii) al menos un agente para combatir insectos en una cantidad de aproximadamente el 1% en peso a aproximadamente el 80% en peso; y (iii) un disolvente.
En todavía otro aspecto de la invención se proporciona un procedimiento de preparación de una semilla genéticamente modificada tratada con al menos una bacteria formadora de esporas y un agente para combatir insectos opcional que comprende: (i) aplicar dicha bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos opcional a dicha semilla genéticamente modificada; y (ii) mezclar dicha semilla genéticamente modificada para lograr un tratamiento sustancialmente uniforme.
Otros productos y procedimientos según la composición se proporcionan en la descripción detallada y las reivindicaciones que siguen a continuación. Los objetos, características y ventajas adicionales se expondrán en la siguiente descripción, y en parte, serán obvias de la descripción, o pueden aprenderse por la práctica de la invención. Los objetos, características y ventajas pueden realizarse y obtenerse por medio de la instrumentación y combinación particularmente señaladas en las reivindicaciones adjuntas.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Se ha encontrado que los productos desvelados en este documento proporcionan un mayor grado de vigor y rendimiento de las plantas en entornos infestados por nematodos que lo que cabría esperar de la aplicación de insecticidas a semillas, plantas y partes vegetales genéticamente modificadas. Se ha mostrado que al menos alguno de los agentes para combatir insectos opcionales proporciona un aumento de la masa de raíces incluso en ausencia de presión de insectos cuyo aumento de la masa de raíces conduce a un establecimiento mejorado de las bacterias beneficiosas dentro de la rizoesfera que, a su vez, reduce las pérdidas totales en el vigor y los rendimientos de la cosecha producidos por tanto nematodos como hongos parásitos de las plantas. Junto con la combinación física de estos componentes mientras se tratan plantas y partes vegetales, las composiciones pueden formularse para proporcionar un entorno estable para bacterias formadoras de esporas vivas tales como bacterias formadoras de esporas, colonizadoras de raíces. Dependiendo de las propiedades deseadas, a la bacteria formadora de esporas y/o semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada pueden añadírsele diversos aditivos tales como fungicidas, insecticidas, estabilizadores, emulsionantes.
Las semillas, plantas o partes vegetales genéticamente modificadas se desarrollan normalmente para el combate de insectos y la tolerancia a herbicidas. Por tanto, la suma de utilizar una bacteria formadora de esporas con el agente para combatir insectos opcional ayuda a completar la capacidad de la semilla de sobrevivir en condiciones adversas. La al menos una bacteria formadora de esporas ha demostrado generalmente ser agrícolamente beneficiosa para colonizar un sistema de raíces de plantas. El agente para combatir insectos opcional puede ser al menos un insecticida químico que, tanto si tiene como si no actividad nematicida o fungicida directa probada, posee la capacidad probada de aumentar la masa del sistema de raíces de plantas al que se aplica. La semilla genéticamente modificada puede ser cualquier semilla que produzca una planta o parte vegetal genéticamente modificada que exprese toxinas de insectos o resistencia a herbicidas. Además, la semilla genéticamente modificada puede ser cualquier semilla que produzca una planta o parte vegetal genéticamente modificada que exprese toxinas o resistencia a bacterias y hongos. Además, la semilla genéticamente modificada puede ser cualquier semilla que produzca una planta o parte vegetal genéticamente modificada que exprese tolerancia a factores medioambientales tales como sobrecarga hídrica y producción de nitrógeno.
Con respecto a las toxinas de insectos, la patente de EE.UU. n° 5.877.012, incorporada en este documento por referencia en su totalidad, desvela la clonación y la expresión de proteínas de organismos tales como Bacillus, Pseudomonas, Clavibacter y Rhizobium en plantas para obtener plantas transgénicas con resistencia a plagas tales como gusanos cortadores negros, gusanos cogolleros y barrenadores. Además, las patentes de EE.UU. n° 5.625.136 y 5.859.336, incorporadas por este documento por referencia en su totalidad, desvelan transformar plantas de maíz con un gen de B. thuringiensis que codifica delta-endotoxinas resultando el maíz transgénico con una resistencia mejorada a barrenadores europeos del maíz. Armstrong y col. en Crop Science, 35(2):550-557 (1995), incorporado por este documento por referencia en su totalidad, ha proporcionado un informe exhaustivo de ensayos de campo de maíz transgénico que expresa una proteína insecticida de B. thuringiensis. Referencias adicionales que desvelan maíz codificado con el gen de B. thuringiensis incluyen las patentes de EE.UU. n° 4.766.203; 4.797.279; y 4.910.016, incorporadas por este documento por referencia en su totalidad; y el documento WO 99/312248, incorporado por este documento por referencia en su totalidad. Con respecto a la resistencia a herbicidas, la patente de EE.UU. n° 4.971.908, incorporada en este documento por referencia en su totalidad, desvela plantas genéticamente modificadas que son resistentes a glifosato. La resistencia a glifosato se logra modificando genéticamente la planta o semilla para producir enzimas EPSP sintasa mutantes que presentan una menor afinidad por glifosato, a la vez que mantienen la actividad catalítica. Referencias adicionales que desvelan plantas y semillas resistentes a glifosato incluyen las patentes de EE.UU. n° 5.463.175; 5.776.760; 5.804.425; 6.689.880; 6.803.501 ; 7.214.535; y 7.335.816, incorporadas en este documento por referencia en su totalidad.
La bacteria formadora de esporas ha demostrado beneficio agrícola. Preferentemente, la al menos una bacteria formadora de esporas es una bacteria colonizadora de raíces (por ejemplo, rizobacteria). Beneficio agrícola se refiere a la capacidad de la bacteria de proporcionar protección de los efectos dañinos de hongos o bacterias patógenos de las plantas y/o animales transmitidos por la tierra tales como aquellos que pertenecer al filo Nematoda o Aschelminthes. La protección contra nematodos parásitos y microorganismos parásitos de las plantas puede producirse mediante actividades quitinolítica, proteolítica, colagenolítica u otras actividades perjudiciales para estos animales transmitidos por la tierra y/o perjudiciales para las poblaciones microbianas. Las bacterias que presentan estas propiedades nematicidas, fungicidas y bactericidas pueden incluir, pero no se limitan a, Bacillus argri, Bacillus aizawai, Bacillus albolactis, Bacillus amyloüquefaciens, Bacillus cereus, Bacillus coagulans, Bacillus endoparasiticus, Bacillus endorhythmos, Bacillus firmus, Bacillus kurstaki, Bacillus lacticola, Bacillus lactimorbus, Bacillus lactis, Bacillus laterosporus, Bacillus lentimorbus, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium, Bacillus medusa, Bacillus metiens, Bacillus natto, Bacillus nigrificans, Bacillus popillae, Bacillus pumilus, Bacillus siamensis, Bacillus sphearicus, Bacillus spp., Bacillus subtilis, Bacillus thuringiensis, Bacillus unifagellatus, más aquellos enumerados en la categoría del género Bacillus en Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, primera ed. (1986), incorporado por este documento por referencia en su totalidad.
Preferentemente, la bacteria formadora de esporas es al menos una espora de CNCM 1-1582 de B. firmus y/o espora de la cepa CNCM 1-1562 de B. cereus como se desvelan en la patente de EE.UU. n° 6.406.690, incorporada por este documento por referencia en su totalidad. Lo más preferentemente, la bacteria formadora de esporas es CNCM 1-1582 de B. firmus. Alternativamente, la bacteria formadora de esporas puede ser al menos una IN937a de B. amyloliquefaciens, al menos una cepa de Bacillus subtilis designada GB03, o al menos una cepa de B. pumulis designada GB34. Además, la bacteria formadora de esporas puede ser una mezcla de cualquier especie enumerada anteriormente, además de otras bacterias formadoras de esporas colonizadoras de raíces conocidas por presentar propiedades agrícolamente beneficiosas.
En una realización preferida, la bacteria formadora de esporas puede aplicarse a la semilla, planta o partes vegetales bien como un polvo, disolución acuosa o no acuosa. Los polvos pueden ser o polvos humectables secos o gránulos díspersables en agua. Preferentemente, la bacteria formadora de esporas es una disolución, concentrado emulsionable, polvo humectable, concentrado en suspensión, polvo soluble, gránulos, concentrado de suspensión-emulsión, materiales naturales y sintéticos impregnados con compuestos activos y cápsulas finas de liberación controlada. La bacteria formadora de esporas en una forma líquida o seca puede mezclarse con la tierra antes de, en el momento de o después de la plantación. Lo más preferentemente, la formulación está en un estado líquido mezclado con la tierra antes de o en el momento de la plantación.
La cantidad de la al menos una bacteria formadora de esporas empleada en las composiciones puede variar dependiendo de la formulación final, además del tamaño o tipo de planta, parte vegetal o semilla que va a utilizarse. Preferentemente, al menos una bacteria formadora de esporas en las composiciones está presente de aproximadamente el 2% en peso de la formulación total a aproximadamente el 80% en peso de la formulación total. Más preferentemente, de aproximadamente el 5% en peso de la formulación total a aproximadamente el 65% en peso de la formulación total; y lo más preferentemente de aproximadamente el 10% en peso de la formulación total a aproximadamente el 60% en peso de la formulación total.
Las composiciones comprenden además al menos un agente para combatir insectos opcional. Preferentemente, el agente para combatir insectos puede ser cualquier compuesto químico insecticida o composición que tenga actividad insecticida, pero no actividad nematicida directa y tampoco actividad perjudicial contra la bacteria formadora de esporas utilizada, y preferentemente también tenga la capacidad añadida de aumentar la masa de raíces con la aplicación. Alternativamente, la combinación puede comprender al menos un compuesto químico adicional que no presenta propiedades nematicidas o fungicidas. Tales composiciones pueden ser útiles en áreas geográficas que tienen poblaciones extremadamente altas de infestación por nematodos o para proporcionar actividad fungicida adicional contra una presión de enfermedad fuertemente fúngica. La planta, semilla o material vegetal puede tratarse por separado o simultáneamente con el agente para combatir insectos o fungicida adicional. Lo más preferentemente, el agente para combatir insectos es un compuesto insecticida neonicotinoide no nematicida de fórmula (I).
En otra realización preferida, el agente para combatir insectos opcional es al menos un compuesto insecticida neonicotinoide no nematicida sistémico de fórmula (I) en la que A es un grupo 2-cloropirid-5-ilo, 2-metilpirid-5-ilo, 1 -oxido-3-piridinio, 2-cloro-1-oxido-5-piridinio, 2,3-dicloro-1-oxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3-ilo, 5-metil-tetrahidrofuran-3-ilo o 2-clorotiazol-5-ilo; R es hidrógeno, alquilo C^-Cs, fenilalquilo C C4, cicloalquilo C3-C6, alquenilo C2-C6 o alquinilo C2-C6; Y es -N(R)(R2) o SR2 ; Ri y R2 son independientemente entre sí alquilo C C , alquenilo C C4, alquinilo C C4, -C(=0)-CH3 o bencilo; o juntos forman un grupo -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH2-0-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-NH-CH2- o -CH2-N(CH3)-CH2-; y X es N-N02 o N-CN o CH-N02.
Los insecticidas neonicotinoides no nematicidas particularmente preferidos incluyen 1 -(6-cloro-3-piridilmetil)-N-nitroimidazolidin-2-ilidenamina (imidacloprid), 3-(6-cloro-3-piridilmetil)-1 ,3-tiazolidin-2-ilidencianamida (tiacloprid), 1-(2-cloro-1 ,3-tiazol-5-ilmetil)-3-metil-2-nitroguanidina (clotianidina), nitempiran, /\/1-[(6-cloro-3-piridil)metil]-N2-ciano-N1-metilacetamidina (acetamiprid), 3-(2-cloro-1 ,3-tiazol-5-ilmetil)-5-metil-1 ,3,5-oxadiazinan-4-iliden(nitro)amina (tiametoxam) y 1 -metil-2-nitro-3-(tetrahidro-3-furilmetil)guanidina (dinotefuran).
En una realización alternativa, la combinación de bacteria formadora de esporas -agente para combatir insectos puede incluir opcionalmente un compuesto químico adicional con actividad nematicida directa. Los agentes para combatir insectos nematicidas adecuados incluyen nematicidas antibióticos tales como abamectina; nematicidas de carbamato tales como benomilo, carbofurano, carbosulfan y cleotocard; nematicidas de carbamato de oxima tales como alanicarb, aldicarb, aldoxicarb, oxamilo; nematicidas organofosforosos tales como diamidafos, fenamifos, fostietano, fosfamidon, cadusafos, clorpirifos, diclofention, dimetoato, etoprofos, fensulfotion, fostiazato, heterofos, isamidofos, isazofos, metomilo, forato, fosfocarb, terbufos, tiodicarb, tionazina, triazofos, imiciafos y mecarfon. Otros agentes para combatir insectos nematicidas adecuados incluyen acetoprol, benclotiaz, cloropicrina, dazomet, DBCP, DCIP, 1 ,2-dicloropropano, 1 ,3-dicloropropeno, furfural, yodometano, metam, bromuro de metilo, metilisotiocianato y xilenoles. Alternativamente, la bacteria formadora de esporas también puede combinarse con agentes nematicidas biológicos tales como Myrothecium verrucaria, Burholderia cepacia, Bacillus chitonosporus y Paecilomyces lilacinus o agentes nematicidas de origen vegetal o animal tales como proteínas de horquilla, secuencias de aminoácidos o virus, partículas viroides.
La cantidad del al menos un agente para combatir insectos opcional añadido a la bacteria formadora de esporas puede variar dependiendo de la formulación final, además del tamaño de la planta y semilla que van a tratarse. Preferentemente, el al menos un agente para combatir insectos es aproximadamente del 1 % en peso de la formulación total a aproximadamente el 80% en peso de la formulación total. Más preferentemente, el agente para combatir insectos está presente en una cantidad de aproximadamente el 5% en peso de la formulación total a aproximadamente el 60% en peso de la formulación total. Lo más preferentemente, el agente para combatir insectos está presente en una cantidad de aproximadamente el 10% en peso de la formulación total a aproximadamente el 50% en peso de la formulación total.
En otra realización, la bacteria formadora de esporas, sola o en combinación con el agente para combatir insectos, puede comprender adicionalmente una cantidad eficaz de al menos un fungicida. Los fungicidas preferidos incluyen aldimorf, ampropilfos, ampropilfos-potasio, andoprim, anilazina, azaconazol, azoxistrobina, benalaxilo, benodanilo, benomilo, benzamacrilo, benzamacrilo-isobutilo, bialafos, binapacrilo, bifenilo, bitertanol, blasticidina-S, boscalid, bromuconazol, bupirimato, butiobato, poli(sulfuro de calcio), capsimicina, captafol, captan, carbendazima, carboxina, carvona, quinometionato, clobentiazona, clorfenazol, cloroneb, cloropicrina, clorotalonilo, clozolinato, clozilacon, cufraneb, cimoxanilo, ciproconazol, ciprodinil, ciprofuram, debacarb, diclorofeno, diclobutrazol, diclofluanida, diclomezina, dicloran, dietofencarb, difenoconazol, dimetirimol, dimetomorf, dimoxistrobina, diniconazol, diniconazol-M, dinocap, difenilamina, dipiritiona, ditalimfos, ditianona, dodemorf, dodina, drazoxolon, edifenfos, epoxiconazol, etaconazol, etirimol, etridiazol, famoxadona, fenapanilo, fenarimol, fenbuconazol, fenfuram, fenitropan, fenpiclonilo, fenpropidin, fenpropimorf, acetato de fentina, hidróxido de fentina, ferbam, ferimzona, fluazinam, fludioxonilo, flumetover, fluoromida, fluquinconazol, flurprimidol, flusilazol, flusulfamida, flutolanilo, flutriafol, folpet, fosetilo-aluminio, fosetilo-sodio, ftalida, fuberidazol, furalaxilo, furametpir, furcarbonilo, furconazol, furconazol-cis, furmeciclox, guazatina, hexaclorobenceno, hexaconazol, himexazol, imazalilo, imibenconazol, iminoctadina, albesilato de iminoctadina, triacetato de iminoctadina, yodocarb, ipconazol, iprobenfos (IBP), iprodiona, irumamicina, isoprotiolano, isovalediona, kasugamicina, kresoxim-metilo, preparados de cobre tales como: hidróxido de cobre, naftenato de cobre, oxicloruro de cobre, sulfato de cobre, óxido de cobre, oxina-cobre y mezcla de Bordeaux, mancobre, mancozeb, maneb, meferimzona, mepanipirim, mepronilo, metalaxilo, metconazol, metasulfocarb, metfuroxam, metiram, metomeclam, metsulfovax, mildiomicina, miclobutanilo, miclozolin, dimetilditiocarbamato de níquel, nitrotal-isopropilo, nuarimol, ofurace, oxadixilo, oxamocarb, ácido oxolínico, oxicarboxim, oxifentiina, paclobutrazol, pefurazoato, penconazol, pencicuron, fosdifen, pimaricina, piperalina, polioxina, polioxorim, probenazol, procloraz, procimidona, propamocarb, propanosina-sodio, propiconazol, propineb, protiocinazol, piraclostrobina, pirazofos, pirifenox, pirimetanilo, piroquilona, piroxifur, quinconazol, quintozeno (PCNB), azufre y preparados de azufre, tebuconazol, tecloftalam, tecnazeno, tetciclacis, tetraconazol, tiabendazol, ticiofen, tifluzamida, tiofanato-metilo, tiram, tioximid, tolclofos-metilo, tolilfluanida, triadimefon, triadimenol, triazbutilo, triazóxido, triclamida, triciclazol, tridemorf, trifloxistrobina, triflumizol, triforina, triticonazol, uniconazol, validamicina A, vinclozolina, viniconazol, zarilamid, zineb, ziram y también Dagger G, OK-8705, OK-8801 , a-(1 ,1-dimetiletil)-p-(2-fenoxietil)-1 H-1 ,2,4-triazol-1 -etanol, <x-(2,4-diclorofenil)-p-fluoro-p-propil-1 H-1 ,2,4-triazol-1 -etánol, a-(2,4-diclorofenil)-p-metoxi-a-metil-1 H-1 ,2,4-triazol-1 -etanol, a-(5-metil-1 ,3-dioxan-5-il)- -[[4-(trifluorometil)-fenil]-metilen]-1 H-1 , 2,4-triazol-1 -etanol, (5RS,6RS)-6-hidroxi-2,2,7,7-tetrametil-5-(1 H-1 ,2,4-triazol-1 -il)-3-octanona, (E)-a-(metoxiimino)-N-metil-2-fenoxi-fenilacetamida, carbamato de 1-isopropil{2-met¡l-1-[[[1-(4-metilfenil)-et¡l]-amino]-carbonil]-propilo}, 1-(2,4-diclorofenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-il)-etanon-0-(fenilmetil)-oxima, 1-(2-metil-1-naftalenil)-1 H-pirrol-2,5-diona, 1 -(3,5-diclorofenil)-3-(2-propenil)-2,5-pirrolidindiona, 1 -[(diyodometil)-sulfonil]-4-metil-benceno, 1 -[[2-(2,4-diclorofenil)-1 ,3-dioxolan-2-il]-metil]-1 H-imidazol, 1 -[[2-(4-clorofenil)-3-feniloxiranil]-metil]-1 H-1 ,2,4-triazol, 1 -[1 -[2-[(2,4-diclorofenil)-metoxi]-fenil]-etenil]-1 H-imidazol, 1 -metil-5-nonil-2-(fenilmetil)-3-p¡rrolidinol, 2',6'-dibromo-2-metil-4'-trifluorometoxi-4'-trifluoro-metil-1 ,3-tiazol-5-carboxanilida, 2,2-dicloro-N-[1 -(4-clorofenil)-etil]-1 -etil-3-metil-ciclopropanocarboxamida, tiocianato de 2,6-dicloro-5-(metiltio)-4-pirimidinilo, 2,6-dicloro-N-(4-trifluorometilbencil)-benzamida, 2,6-d¡cloro-N-[[4-(trifluorometil)-fenil]-metil]-benzamida, 2-(2,3,3-triyodo-2-propenil)-2H-tetrazol, 2-[(1-metiletil)-sulfonil]-5-(triclorometil)-1 ,3,4-tiadiazol, 2-[[6-desoxi-4-0-(4-0-metil- -D-glicopiranosil)-a-D-glicopiranosil]-amino]-4-metoxi-1 H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbonitrilo, 2-aminobutano, 2-bromo-2-(bromometil)-pentanodinitr¡lo, 2-cloro-N-(2,3-dihidro-1 ,1 ,3-trimetil-1 H-¡nden-4-il)-3-piridincarboxamida, 2-cloro-N-(2,6-dimetilfenil)-N-(isotiocianatometil)-acetamida, 2-fenilfenol (OPP), 3,4-dicloro-1-[4-(difluorometoxi)-fenil]-1H-pirrol-2,5-diona, 3,5-dicloro-N[cian[(1-metil-2-propinil)-oxi]-met¡l]-benzamida, 3-(1 ,1-dimetilprop¡l-1-oxo-1 H-inden-2-carbonitr¡lo, 3-[2-(4- clorofenil)-5-etoxi-3-isoxazolidinil]-piridina, 4-cloro-2-ciano-N,N-dimetil-5-(4-metilfenil)-1 H-¡midazol-1-sulfonamida, 4-metil-tetrazolo[1 ,5-a]quinazolin-5(4H)-ona, 8-(1 ,1-dimetiletil)-N-etil-N-propil-1 ,4-dioxaespiro[4.5]decano-2-metanamina, sulfato de 8-hidroxiquinolina, hidrazida 9H-xanteno-2-[(fenilamino)-carbonil]-9-carboxilico, 4-[(3-metilbenzoil)-oxi]-2,5-tiofendicarboxilato de bis-(1-metiletil)-3-metilo, cis-1-(4-clorofenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-il)-cicloheptanol, clorhidrato de cis-4-[3-[4-(1 , 1 -dimetilpropil)-fenil-2-metilpropil]-2,6-dimetil-morfolina, [(4-clorofenil)-azo]-cianoacetato de etilo, bicarbonato de potasio, sal sódica de metanotetratiol, 1-(2,3-dihidro-2,2-dimetil-1 H-inden-1-il)-1 H-imidazol-5-carboxilato de metilo, N-(2,6-dimetilfenil)-N-(5-isoxazolilcarbonil)-DL-alaninato de metilo, N-(cloroacetil)-N-(2,6-dimetilfenil)-DL-alaninato de metilo, N-(2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-1-metil-ciclohexanocarboxamida, N-(2,6-dimetilfenil)-2-metoxi-N-(tetrahidro-2-oxo-3-furanil)-acetamida, N-(2,6-dimetilfenil)-2-metoxi-N-(tetrahidro-2-oxo-3-tienil)-acetamida, N-(2-cloro-4-nitrofenil)-4-metil-3-nitro-bencenosulfonamida, N-(4-ciclohexilfenil)-1 ,4,5,6-tetrahidro-2-pirimidinamina, N-(4-hexilfenil)-1 ,4,5,6-tetrahidro-2-pirimid¡namina, N-(5-cloro-2-metilfenil)-2-metoxi-N-(2-oxo-3-oxazolidinil)-acetamida, N-(6-metoxi)-3-piridinil)-ciclopropanocarboxamida, N-[2,2,2-tricloro-1-[(cloroacetil)-amino]-etil]-benzamida, N-[3-cloro-4,5-bis-(2-propiniloxi)-fenil]-N'-metoxi-metanimidamida, sal sódica de N-formil-N-hidroxi-DL-alanina, etilfosforamidotioato de 0,0-dietil-[2-(dipropilamino)-2-oxoetilo], fenilpropilfosforamidotioato de O-metil-S-fenilo, 1 ,2,3-benzotiadiazol-7-carbotioato de S-metilo y espiro[2H]-1-benzopirano-2,1'(3'H)-isobenzofuran]-3'-ona, solos o en combinación.
Se ha encontrado que los procedimientos desvelados en este documento proporcionan un mayor grado de vigor y rendimiento de las plantas en entornos infestados por nematodos que lo que cabría esperar de la aplicación de insecticidas solos a semillas, plantas o partes vegetales genéticamente modificadas. Dependiendo de las propiedades deseadas, a la semilla o planta genéticamente modificada pueden aplicársele diversos aditivos, tales como fungicidas, insecticidas, estabilizadores, emulsionantes.
Los procedimientos incluyen aplicar al menos una bacteria formadora de esporas combinada con un agente para combatir insectos opcional, y agente de combate fungicida opcional, a una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada. Preferentemente, la bacteria formadora de esporas está en forma de disolución, concentrado emulsionable, polvos humectables, concentrado en suspensión, polvos solubles, granulos, concentrado de suspensión-emulsión, materiales naturales y sintéticos impregnados con compuesto activo y cápsulas finas de liberación controlada en sustancias poliméricas. Preferentemente, el agente para combatir insectos, si está presente, se mezcla con la bacteria formadora de esporas y se aplica simultáneamente con la bacteria formadora de esporas. Opcionalmente, el agente para combatir insectos puede aplicarse por separado a la semilla, planta o parte vegetal. Además, si está presente un agente de combate fungicida, éste puede combinarse con la bacteria formadora de esporas / agente para combatir insectos, o aplicarse por separado. Si la bacteria formadora de esporas y el agente para combatir insectos están en forma de polvo, pueden aplicarse directamente a la tierra, semilla u hojas por separado o mezclarse juntos en el momento de uso. Si está en forma líquida, la bacteria formadora de esporas y el agente para combatir insectos pueden pulverizarse o atomizarse foliarmente o en surco en el momento de la plantación, tanto por separado como mezclados juntos en el momento del tratamiento. Alternativamente, la combinación líquida puede introducirse a la tierra antes de la germinación de la semilla o directamente a la tierra en contacto con las raíces utilizando una variedad de técnicas incluidas, pero no limitadas a, riego por goteo, aspersores, inyección a la tierra o empapado de la tierra. Preferentemente, el líquido se aplica a la semilla antes de plantarla.
Dependiendo de la formulación final y el procedimiento de aplicación, también pueden introducirse uno o más aditivos adecuados a la bacteria formadora de esporas y combinaciones de los mismos. A las presentes composiciones puede añadírsele aditivos tales como carboximetilcelulosa y polímeros naturales y sintéticos en forma de polvos, gránulos o látex, tales como goma arábiga, quitina, poli(alcohol vinílico) y poli(acetato de vinilo), además de fosfolípidos naturales tales como cefalinas y lecitinas, y fosfolípidos sintéticos.
En una realización preferida, la bacteria formadora de esporas, el agente para combatir insectos opcional y el agente de combate fungicida opcional se formulan en una única disolución estable, o emulsión o suspensión. Para las disoluciones, los compuestos químicos activos (agentes para combatir insectos y agente de combate fungicida opcional) se disuelven en disolventes antes de añadir la bacteria formadora de esporas. Los disolventes líquidos adecuados incluyen compuestos aromáticos basados en petróleo tales como xileno, tolueno o alquiinaftalenos, hidrocarburos alifáticos tales como ciciohexano o parafinas, por ejemplo fracciones de petróleo, aceites minerales y vegetales, alcoholes tales como butanol o glicol, además de sus éteres y ésteres, cetonas tales como metiletilcetona, metilisobutilcetona o ciclohexanona, disolventes fuertemente polares tales como dimetilformamida y dimetilsulfóxido. Para las emulsiones y suspensiones, el medio o disolvente líquido es agua. La bacteria formadora de esporas, el agente para combatir insectos opcional y el agente de combate fungicida opcional pueden suspenderse en líquidos separados y mezclarse en el momento de la aplicación. Preferentemente, la bacteria formadora de esporas, el agente para combatir insectos opcional y el agente de combate fungicida opcional se combinan en una formulación lista para uso que presenta una estabilidad en almacén de preferentemente dos años. En uso, el líquido puede pulverizarse o atomizarse foliarmente o en surco en el momento de plantar la cosecha. La composición líquida puede introducirse a la tierra antes de la germinación de la semilla o directamente a la tierra en contacto con las raíces utilizando una variedad de técnicas que incluyen, pero no se limitan a, riego por goteo, aspersores, inyección a la tierra o empapado de la tierra.
Opcionalmente, pueden añadirse estabilizadores y tampones que incluyen sales de metal alcalino y alcalinotérreo y ácidos orgánicos tales como ácido cítrico y ácido ascórbico, ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico o ácido sulfúrico. También pueden añadirse biócidas y pueden incluir formaldehídos o agentes liberadores de formaldehído y derivados de ácido benzoico tales como ácido p-hidroxibenzoico. Otros aditivos incluyen agentes funcionales que pueden proteger semillas de efectos dañinos de herbicidas selectivos tales como carbono activo, nutrientes (fertilizantes) y otros agentes que pueden mejorar la germinación y la calidad de los productos o una combinación de los mismos.
Preferentemente, la bacteria formadora de esporas y los agentes para combatir insectos opcionales se formulan como un tratamiento de semillas líquido. El tratamiento de semillas comprende al menos una bacteria formadora de esporas y al menos un agente para combatir insectos opcional. Opcionalmente, un agente de combate fungicida puede mezclarse con la bacteria formadora de esporas y el agente para combatir insectos. Las semillas se recubren sustancialmente uniformemente con una o más capas de bacteria formadora de esporas, agente para combatir insectos opcional y agente de combate fungicida opcional usando procedimientos convencionales de mezcla, pulverización o una combinación de los mismos. La aplicación se hace usando un equipo específicamente diseñado y fabricado que aplica con precisión, con seguridad y eficazmente los productos de tratamiento de semillas a semillas. Tal equipo usa diversos tipos de tecnología de recubrimiento tales como recubridoras rotatorias, recubridoras de tambor, técnicas de lecho fluidizado, lechos efervescentes, neblinas rotatorias o una combinación de los mismos. Preferentemente, la aplicación se hace o mediante un disco "atomizador" giratorio o una boquilla de pulverización que distribuye uniformemente el tratamiento de semillas sobre la semilla a medida que se puede por el modelo de pulverización. Preferentemente, la semilla se mezcla luego o se tamborea durante un periodo de tiempo adicional para lograr una distribución del tratamiento adicional y el secado. Las semillas pueden estar aprestadas o sin aprestar antes de recubrirlas con las composiciones inventivas para aumentar la uniformidad de la germinación y emergencia. En una realización alternativa, una composición de polvo seco puede dosificarse sobre la semilla en movimiento.
Las semillas pueden recubrirse mediante un procedimiento de recubrimiento continuo o discontinuo. En un procedimiento de recubrimiento continuo, el equipo de flujo continuo dosifica simultáneamente tanto el flujo de semillas como los productos de tratamiento de semillas. Una compuerta deslizante, cono y orificio, rueda de semillas o dispositivo de peso (cinta o desviador) regula el flujo de semillas. Una vez se determina la velocidad de flujo de semillas por el equipo de tratamiento, la velocidad de flujo del tratamiento de semillas se calibra a la velocidad de flujo de semillas con el fin de administrar la dosis deseada a la semilla a medida que circula por el equipo de tratamiento de semillas. Adicionalmente, un sistema informático puede controlar la entrada de semillas a la máquina de recubrimiento, manteniéndose así un flujo constante de la cantidad apropiada de semilla.
En un procedimiento de recubrimiento discontinuo, el equipo de tratamiento discontinuo pesa una cantidad recomendada de semilla y coloca la semilla en una cámara de tratamiento cerrada o cubeta en la que luego se aplica el tratamiento de semillas correspondiente. Entonces, la semilla y el tratamiento de semillas se mezclan para lograr un recubrimiento sustancialmente uniforme sobre cada semilla. Entonces, este lote se vuelca fuera de la cámara de tratamiento para preparar el tratamiento del siguiente lote. Con sistemas de control informático, este procedimiento discontinuo se automatiza permitiendo que se repita continuamente el procedimiento de tratamiento discontinuo.
En cualquiera de los dos procedimientos de recubrimiento, la maquinaria de recubrimiento de semillas puede accionarse opcionalmente por un controlador lógico programable que permite poner en marcha y parar diversos equipos sin la intervención de empleados. Los componentes de este sistema están comercialmente disponibles de varias fuentes tales como Gustafson Equipment de Shakopee, MN.
Puede añadirse una variedad de aditivos a los tratamientos de semillas. Pueden añadirse aglutinantes e incluyen aquellos compuestos preferentemente de un polímero adhesivo que puede ser natural o sintético sin efecto fitotóxico sobre la semilla que va recubrirse. Puede emplearse una variedad de colorantes, incluyendo cromóforos orgánicos clasificados como nitroso, nitro, azo, incluyendo monoazo, bisazo y poliazo, difenilmetano, triarilmetano, xanteno, metano, acridina, tiazol, tiazina, indamina, indofenol, azina, oxazina, antraquinona y ftalocianina. Otros aditivos que pueden añadirse incluyen oligonutrientes tales como sales de hierro, manganeso, boro, cobre, cobalto, molibdeno y cinc. Puede aplicarse un polímero u otro agente para combatir el polvo para retener el tratamiento sobre la superficie de la semilla.
Otros aditivos de tratamiento de semillas convencionales incluyen, pero no se limitan a, agentes de recubrimiento, agentes humectantes, agentes de tamponamiento y polisacáridos. Al menos un vehículo agrícolamente aceptable puede añadirse a la formulación de tratamiento de semillas tal como agua, sólidos o polvos secos. Los polvos secos pueden derivarse de una variedad de materiales tales como cortezas de madera, carbonato cálcico, yeso, vermiculita, talco, humus, carbón activado y diversos compuestos de fósforo.
En una realización, el recubrimiento de semillas puede comprender al menos una carga, que es un componente orgánico o inorgánico natural o sintético, con la que los componentes activos se combinan para facilitar su aplicación sobre la semilla. Preferentemente, la carga es un sólido inerte tal como arcillas, silicatos naturales o sintéticos, sílice, resinas, ceras, fertilizantes sólidos (por ejemplo, sales de amonio), minerales de la tierra naturales tales como caolines, arcillas, talco, cal, cuarzo, atapulgita, montmorillonita, bentonita o tierras de diatomeas, o minerales sintéticos tales como sílice, alúmina o silicatos, en particular silicatos de aluminio o magnesio. ¡ La bacteria formadora de esporas, el agente para combatir insectos opcional y el agente de combate fungicida opcional pueden combinarse con cualquier semilla de planta genéticamente modificada que pueda germinar para formar una planta o parte vegetal que es susceptible de ser atacada por nematodos y/u hongos o bacterias patógenos. La semilla genéticamente modificada puede ser cualquier semilla que produzca una planta o parte vegetal genéticamente modificada que exprese toxinas de insectos o resistencia a herbicidas. Además, la semilla genéticamente modificada puede ser cualquier semilla que produzca una planta o parte vegetal genéticamente modificada que exprese toxinas o resistencia a bacterias y hongos. Además, la semilla genéticamente modificada puede ser cualquier semilla que produzca una planta o parte vegetal genéticamente modificada que exprese tolerancia a factores medioambientales tales como estrés del agua y producción de nitrógeno. Las semillas genéticamente modificadas adecuadas incluyen aquellas de cosechas de colza, verduras, frutas, árboles, cosechas de fibra, cosechas de aceite, cosechas de tubérculos, café, flores, legumbres, cereales, además de otras plantas de las especies monocotiledóneas y dicotiledóneas. Preferentemente, las semillas genéticamente modificadas incluyen cacahuete, tabaco, hierbas, trigo, cebada, centeno, sorgo, arroz, semilla de colza, remolacha azucarera, girasol, tomate, pimiento, judía, lechuga, patata y zanahoria. Lo más preferentemente, las semillas genéticamente modificadas incluyen algodón, soja y maíz (dulce, forrajero, para siembra o para palomitas). Las semillas genéticamente modificadas particularmente preferidas incluyen semillas de algodón DELTA AND PINE LAND® tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos de Monsanto; semillas de algodón STONEVILLE™ tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos de Bayer CropScience; semillas de algodón FIBERMAX® tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos de Bayer CropScience; sojas tolerantes a glifosato de Stine Seed Company; semillas de soja ASGROW® tolerantes a glifosato de Monsanto; semillas de maíz PIONEER® tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos de DuPont; semillas de soja NORTHRUP KING™ tolerantes a glifosato de Syngenta; semillas de maíz tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos de Burrus Company; y semillas de maíz tolerantes a glifosato de Garst Company (AGRIEDGE™) y tolerantes a insectos de Syngenta.
Las ventajas de la novedosa combinación de bacteria formadora de esporas y semilla genéticamente modificada serán evidentes a partir de los siguientes ejemplos no limitantes. Los siguientes ejemplos demuestran mejoras inesperadas en el rendimiento global de la cosecha de plantas combinando la bacteria formadora de esporas con un agente para combatir insectos y aplicando la combinación a semillas genéticamente modificadas.
Ejemplos Ejemplo 1 El Ejemplo 1 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). Las semillas genéticamente modificadas en este experimento de comparación procedieron de DELTA AND PINE LAND® disponibles de Monsanto, que son semillas de algodón que contienen expresiones génicas de tanto tolerancia a glifosato (rasgo de Round-up Ready®) como de tolerancia a insectos (gen Sí). El insecticida fue imidacloprid (Gaucho Grande) o imidacloprid y tiodicarb (AERIS®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. El tipo de nematodo varió de ninguno, nematodo de los nudos de la raíz, nematodo reniforme y nematodo lanza. La concentración de agentes para combatir insectos fue 600 g de pa/litro, y en forma líquida. La dosis de aplicación de los agentes para combatir insectos fue 500 - 1000 g de pa/100 kg. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de algodón. La dosis de la mezcla varió de 1369 - 2608 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de algodón creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en libras de algodón por acre. La siguiente tabla compara las libras de algodón por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas a diversos tipos de nematodos. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario. > Algunos de los valores de rendimiento negativos son el resultado de cuestiones medioambientales y de la plantación incontrolables. Con respecto al Experimento número 3, el valor negativo puede atribuirse a los bajos números de plantas por un error del sembrador, que afectará el rendimiento global de la cosecha. Para el Experimento n° 6 no se hicieron duplicados debido al daño a los terrenos de plantación.
Ejemplo 2 El Ejemplo 2 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicados a la semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). Las semillas genéticamente modificadas en este experimento de comparación procedieron de STONEVILLE™ disponibles de Bayer CropScience, que son semillas de algodón que contienen expresiones génicas de tanto tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®) como de tolerancia a insectos (gen Sí). El insecticida fue imidacloprid (GAUCHO GRANDE®) o imidacloprid y tiodicarb (AERIS®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. El tipo de nematodo varió de ninguno, nematodo de los nudos de la raíz y nematodo reniforme. La concentración de agentes para combatir insectos fue 600 g de pa/litro, y en forma líquida. La dosis de aplicación de los agentes para combatir insectos fue 500 - 1000 g de pa/100 kg. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de algodón. La dosis de la mezcla varió de 1369 - 2608 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de algodón creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en libras de algodón por acre. La siguiente tabla compara las libras de algodón por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas a diversos tipos de nematodos. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Exp. n° Nematodo Combate Combate + B. Diferencia del firmus rendimiento 1 Nudos de la raíz 1658 1728 70 2 Nudos de la raíz 2780 2766 -14 3 Reniform 404 377 -27 4 Ninguno 596 632 36 Ejemplo 3 El Ejemplo 3 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). Las semillas genéticamente modificadas en este experimento de comparación procedieron de FIBERMAX® disponibles de Bayer CropScience, que son semillas de algodón que contienen expresiones génicas de tanto tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®) como de tolerancia a insectos (gen Bt). El insecticida fue imidacloprid (GAUCHO GRANDE®) o imidacloprid y tiodicarb (AERIS®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. Los tipos de nematodos fueron nematodo de los nudos de la raíz y nematodo reniforme. La concentración de agentes para combatir insectos fue 600 g de pa/litro, y en forma líquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de algodón. La dosis de la mezcla varió de 1369 - 2608 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de algodón creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en libras de algodón por acre. La siguiente tabla compara las libras de algodón por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas a diversos tipos de nematodos. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Ejemplo 4 El Ejemplo 4 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). Las semillas genéticamente modificadas en este experimento de comparación son de Stine Seed Company, que son semillas de soja que contienen expresión génica de tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®). El insecticida fue ¡midacloprid (GAUCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. Los tipos de nematodos fueron ninguno, nematodo de los nudos de la raíz y quiste de la soja. La concentración de agentes para combatir insectos fue 600 g de pa/litro, y estaba en forma líquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de soja. La dosis de la mezcla varió de 261 - 652 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de soja creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de soja por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de soja por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas a diversos tipos de nematodos. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Ejemplo 5 El Ejemplo 5 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bactena formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). La semilla genéticamente modificada en este experimento de comparación fue ASGROW® de Monsanto, que es una semilla de soja que contiene expresión génica de tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®). El insecticida fue imidacloprid (GAUCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. fírmus. Los tipos de nematodos fueron nematodo de los nudos de la raíz y quiste de la soja. La concentración de agente para combatir insectos fue 600 g de pa/litro y estaba en forma líquida. La concentración de B. fírmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. fírmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de soja. La dosis de la mezcla varió de 261 - 652 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de soja creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de soja por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de soja por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Ejemplo 6 El Ejemplo 6 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). Las semillas genéticamente modificadas en este experimento de comparación procedieron de PIONEER® de DuPont, que son semillas de soja que contienen expresión génica de tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®). El insecticida fue imidacloprid (GAUCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. Los tipos de nematodos fueron ninguno y quiste de la soja. La concentración de agente para combatir insectos fue 600 g de pa/litro, y estaba en forma líquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de soja. La dosis de la mezcla varió de 261 - 652 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de soja creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de soja por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de soja por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Ejemplo 7 El Ejemplo 7 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). La semilla genéticamente modificada en este experimento de comparación procedió de NORTHRUP KING™ de Syngenta Seeds, que es una semilla de soja que contiene expresión génica de tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®). El insecticida fue imidacloprid (GAUCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. El tipo de nematodo fue quiste de la soja. La concentración de agente para combatir insectos fue 600 g de pa/litro, y estaba en forma liquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y ß. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de soja. La dosis de cubrición de semillas de mezcla varió de 261 - 652 mi por 100 kg de semilla. Una vez plantada, la semilla de soja creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de soja por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de soja por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Exp. n° Nematodo Combate Combate + B. Diferencia del firmus rendimiento 1 Quiste de la soja 44 45,3 1 ,3 2 Quiste de la soja 46 46,3 0,3 Ejemplo 8 El Ejemplo 8 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). La semilla genéticamente modificada en este experimento de comparación procedió de PIONEER® de DuPont, que es una semilla de maíz que contiene expresiones génicas de tanto tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®) como de tolerancia a insectos (gen Bt). El insecticida fue clotianidina (PONCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. Estaban presentes múltiples especies de nematodos. La concentración de agente para combatir insectos fue 600 g de pa/litro, y estaba en forma líquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de maíz. La dosis de la mezcla varió de 522 - 1044 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de maíz creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de maíz por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de maíz por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Exp. n° Nematodo Combate Combate + B. Diferencia del firmus rendimiento 1 Múltiples especies 1 19,3 132,3 13 Ejemplo 9 El Ejemplo 9 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). Las semillas genéticamente modificadas en este experimento de comparación procedieron de Burrus Company, que son semillas de maíz que contienen expresiones génicas de tanto tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®) como de tolerancia a insectos (variables). El insecticida fue clotianidina (PONCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. Estaban presentes múltiples especies de nematodos. La concentración de agente para combatir insectos fue 600 g de pa / litro, y en forma líquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de maíz. La dosis de la mezcla varió de 522 - 1044 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de maíz creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de maíz por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de maíz por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Exp. n° Nematodo Gen de Combate Combate + Diferencia tolerancia a B. firmus del insectos rendimiento 1 Múltiples Gusano de la 148,1 146,8 -1 ,3 especies raíz del maíz y Bt 2 Múltiples Bt 172 183,5 11 ,5 especies Ejemplo 10 El Ejemplo 10 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). La semilla genéticamente modificada en este experimento de comparación procedió de Garst Company (AGRIEDGE™) de Syngenta Seeds, que es una semilla de maíz que contiene expresiones génicas de tanto tolerancia a glifosato (rasgo de ROUND-UP READY®) como de tolerancia a insectos (gusano de la raíz del maíz). El insecticida fue clotianidina (PONCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. Estaban presentes múltiples especies de nematodos. La concentración de agente para combatir insectos fue 600 g de pa / litro, y en forma líquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de maíz. La dosis de la mezcla varió de 522 - 1044 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de maíz creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de maíz por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de maíz por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Los valores de diferencia del rendimiento negativos para cada exper mento pueden atribuirse lo más probablemente a daños de los terrenos de plantación, que no produjeron experimentos duplicados. Cuando se promedia el Experimento número 1 y 2, el combate es 142,6, el combate + B. firmus es 146,1 y la diferencia del rendimiento es 3,5. Por tanto, el uso de la bacteria formadora de esporas muestra un resultado positivo neto.
Ejemplo 11 El Ejemplo 1 1 muestra los resultados del rendimiento de la cosecha bajo presión de nematodos para la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos aplicada a semilla genéticamente modificada (combate + bacteria formadora de esporas) en comparación con semilla genéticamente modificada con sólo un agente para combatir insectos (combate). La semilla genéticamente modificada en este experimento de comparación fue una semilla de maíz desconocida comprada de una compañía de producción que contenía diversas expresiones génicas para tanto resistencia a herbicidas como resistencia a insectos. El insecticida fue clotianidina (PONCHO®). La bacteria formadora de esporas fue B. firmus. Estaban presentes múltiples especies de nematodos. La concentración de agente para combatir insectos fue 600 g de pa / litro, y en forma líquida. La concentración de B. firmus osciló de 100.000 a 0.000.000 unidades formadoras de colonias por semilla. El agente para combatir insectos y B. firmus se mezclaron juntos en una suspensión acuosa en un volumen suficiente para cubrir adecuadamente la semilla de maíz.
La dosis de la mezcla varió de 522 - 1044 mi por 100 kg de semilla para asegurar una cubrición adecuada de los diversos tamaños de semilla. Una vez plantada, la semilla de maíz creció hasta la madurez completa y los resultados se midieron en fanegas de maíz por acre. La siguiente tabla compara las fanegas de maíz por acre entre el combate y el combate más bacteria formadora de esporas. Los números de la diferencia del rendimiento representan un promedio de varios resultados experimentales, a menos que se indique lo contrario.
Los resultados anteriores son sorprendentes. Como se muestra anteriormente, la mayoría de las variedades de semillas alcanzaron un mejor resultado con la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos frente a sólo el agente para combatir insectos.
Según algunas realizaciones, se obtuvieron los siguientes aumentos del rendimiento de la cosecha en porcentaje. Con respecto a la semilla de soja, la adición de bacteria formadora de esporas a semilla de soja NORTHUP KING™, semilla de soja PIONEER® y semilla de soja de Stine Seed Company mostró aproximadamente un aumento del 2%, un aumento del 5% - 10% y un aumento del 4,3%, respectivamente, en rendimiento por fanega de soja. Esta mejora, extendida a varios cientos de acres, da como resultado una mejora significativa en el rendimiento de la cosecha. Con respecto a la semilla de algodón, la adición de bacteria formadora de esporas a semilla de algodón DELTA AND PINE LAND® y semilla de algodón FIBERMAX® mostró aproximadamente un aumento del 3% y un aumento del 6,5%, respectivamente, en libras de algodón por acre. De nuevo, extendiendo esta mejora a varios cientos de acres de planta de algodón, da una mejora espectacular en el rendimiento. Con respecto a la semilla de maíz, la adición de bacteria formadora de esporas a semilla de maíz de Burrus Seed Company y semilla de maíz desconocida comercialmente disponible mostró aproximadamente un aumento del 3,2% y un aumento del 8%, respectivamente, en fanegas de maíz por acre. De nuevo, esto da como resultado una enorme mejora el rendimiento global de la cosecha cuando se extiende a varios cientos de acres. En suma, hay una sorprendente ventaja en el rendimiento de la cosecha cuando se usa la combinación de bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos con semillas genéticamente modificadas.
Otras ventajas, características y modificaciones se producirán fácilmente para aquellos expertos en la materia. Por tanto, la invención en sus aspectos más amplios no se limita a los detalles específicos y dispositivos representativos mostrados y descritos en este documento. Por consiguiente, pueden hacerse diversas modificaciones sin apartarse del espíritu o alcance del concepto inventivo general como se define por las reivindicaciones adjuntas y sus equivalentes.
Todos los documentos citados en este documento se incorporan específicamente en este documento por su referencia en sus totalidades.
Como se usa en este documento y en las siguientes reivindicaciones, artículos tales como "el", "la", "un" y "una" pueden connotar el singular o el plural.

Claims (31)

REIVINDICACIONES
1. Un producto caracterizado porque comprende: al menos una bacteria formadora de esporas; opcionalmente, al menos un agente para combatir insectos; y al menos una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada.
2. El producto de la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho producto comprende además al menos un agente para combatir insectos y al menos una semilla o planta genéticamente modificada.
3. El producto de la reivindicación 2, caracterizado porque el agente para combatir insectos es al menos un insecticida neonicotinoide sistémico.
4. El producto de la reivindicación 3, caracterizado porque el al menos un insecticida neonicotinoide se selecciona del grupo que está constituido por 1 -(6-cloro-3-piridilmetil)-N-nitroimidazolidin-2-ilidenamina (imidacloprid), 3-(6-cloro-3-piridilmetil)-1 ,3-tiazolidin-2-ilidencianamida (tiacloprid), 1-(2-cloro-1 ,3-t¡azol-5-ilmetil)-3-metil-2-nitroguanidina (clotianidina), nitempiran, A/1-[(6-cloro-3-piridil)metil]-N2-ciano-N1-metilacetamidina (acetamiprid), 3-(2-cloro-1 ,3-tiazol-5-ilmetil)-5-metil-1 ,3,5-oxadiazinan-4-¡lidene(nitro)am¡na (tiametoxam) y 1-metil-2-nitro-3-(tetrahidro-3-furilmetil)guanidina (dinotefuran).
5. El producto de la reivindicación 2, caracterizado porque la al menos una bacteria formadora de esporas presenta actividad nematicida.
6. El producto de la reivindicación 2, caracterizado porque dicha semilla genéticamente modificada es tolerante a insectos.
7. El producto de la reivindicación 2, caracterizado porque dicha semilla genéticamente modificada está transformada con un gen de B. thuringiensis.
8. El producto de la reivindicación 2, caracterizado porque dicha semilla genéticamente modificada es tolerante a glifosato.
9. El producto de la reivindicación 2, caracterizado porque dicha semilla genéticamente modificada es tanto tolerante a insectos como tolerante a glifosato.
10. El producto de la reivindicación 2, caracterizado porque dicha semilla genéticamente modificada se selecciona del grupo que está constituido por: semillas de algodón DELTA AND PINE LAND® tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos; semillas de algodón STONEVILLE™ tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos; semillas de algodón FIBERMAX® tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos; semillas de soja ASGROW® tolerantes a glifosato; semillas de maíz PIONEER® tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos; semillas de soja NORTHRUP KING™ tolerantes a glifosato; y semillas de maíz AGRIEDGE™ tolerantes a glifosato y tolerantes a insectos de Syngenta.
1 1. El producto de la reivindicación 5, caracterizado porque la al menos una bacteria formadora de esporas se selecciona del grupo que está constituido por Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus firmus, Bacillus subtilis y Bacillus pumulis.
12. El producto de la reivindicación 1 1 , caracterizado porque Bacillus firmus comprende la cepa CNCM 1-1582.
13. El producto de la reivindicación 1 1 , caracterizado porque Bacillus amyloliquefaciens comprende la cepa IN37a.
14. El producto de la reivindicación 11 , caracterizado porque Bacillus subtilis comprende la cepa GB03.
15. El producto de la reivindicación 1 1 , caracterizado porque Bacillus pumulis comprende la cepa GB34.
16. El producto de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque comprende además al menos un fungicida químico adicional.
17. Un procedimiento de protección de una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada de nematodos, caracterizado porque comprende aplicar a la semilla, planta o parte vegetal al menos una bacteria formadora de esporas; y, opcionalmente, al menos un agente para combatir insectos.
18. El procedimiento de la reivindicación 17, caracterizado porque dicha bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos opcional se aplican simultáneamente a dicha semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada.
19. El procedimiento de la reivindicación 17, caracterizado porque dicha semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada es tolerante a insectos.
20. El procedimiento de la reivindicación 17, caracterizado porque dicha semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada es tolerante a glifosato.
21. El procedimiento de la reivindicación 17, caracterizado porque dicha semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada se transforma con un gen de B. thuringiensis.
22. El procedimiento de la reivindicación 17, caracterizado porque dicha al menos una bacteria formadora de esporas se selecciona del grupo que está constituido por Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus firmus, Bacillus subtilis y Bacillus pumulis.
23. Un procedimiento de protección de una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada de nematodos, el procedimiento estando caracterizado porque comprende proporcionar al menos una composición que comprende del 0,0001 al 20% en peso de al menos una bacteria formadora de esporas y del 0,001 al 20% en peso de al menos un agente para combatir insectos; y aplicar la composición a la semilla, planta o parte vegetal.
24. El procedimiento de la reivindicación 23, caracterizado porque la composición se aplica mediante un procedimiento seleccionado del grupo que está constituido por: riego por goteo, aspersores, pulverización foliar, recubrimiento de semillas, inyección a la tierra o empapado de la tierra.
25. Una composición para proteger una semilla, planta o parte vegetal genéticamente modificada de nematodos caracterizada porque comprende: (i) al menos una bacteria formadora de esporas en una cantidad de aproximadamente el 2% en peso al 80% en peso; (ii) al menos un agente para combatir insectos en una cantidad de aproximadamente el 1 % en peso a aproximadamente el 80% en peso; y (iii) un disolvente.
26. La composición de la reivindicación 29, caracterizada porque dicha bacteria formadora de esporas se selecciona del grupo que está constituido por: Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus firmus, Bacillus subtilis y Bacillus pumulis.
27. Un procedimiento de preparación de una semilla genéticamente modificada tratada con al menos una bacteria formadora de esporas y un agente para combatir insectos opcional, caracterizado porque comprende: (i) aplicar dicha bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos opcional a dicha semilla genéticamente modificada; y (ii) mezclar dicha semilla genéticamente modificada para lograr un tratamiento sustancialmente uniforme.
28. El procedimiento de la reivindicación 27, caracterizado porque una máquina de recubrimiento continuo se usa para aplicar dicha bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos opcional.
29. El procedimiento de la reivindicación 28, caracterizado porque un sistema informático controla el flujo de semilla genéticamente modificada en la máquina de recubrimiento continuo.
30. El procedimiento de la reivindicación 27 caracterizado porque se usa un procedimiento de recubrimiento discontinuo para aplicar dicha bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos opcional.
31. El procedimiento de la reivindicación 30, caracterizado porque dicho procedimiento de recubrimiento discontinuo comprende: (i) pesar una cantidad fija de semilla genéticamente modificada; (ii) colocar la semilla en una cámara de tratamiento cerrada; (iii) añadir la bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos opcional a la cámara de tratamiento; y (iv) mezclar dicha semilla genéticamente modificada, bacteria formadora de esporas y agente para combatir insectos opcional.
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