MX2010011881A - Nuevos enfoques terapeuticos para tratar la enfermedad de alzheimer y trastornos relacionados mediante una modulacion de la angiogenesis. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a composiciones y procedimientos para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y enfermedades relacionadas. Más particularmente, la invención se refiere a terapias combinadas que modulan la angiogénesis para el tratamiento de dicha enfermedad.

Description

NUEVOS ENFOQUES TERAPÉUTICOS PARA TRATAR LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER Y TRASTORNOS RELACIONADOS MEDIANTE UNA MODULACIÓN DE LA ANGIOGÉNESIS CAMPO DE LA INVENCIÓN ¡ La presente invención se refiere a composiciones y procedimientos para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer (EA) y trastornos relacionados.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La EA es el prototipo de demencia cortical que se caracteriza por un déficit de memoria junto con disfasia (trastorno del lenguaje en el que existe un deterioro del habla y de la comprensión del habla), dispraxia (incapacidad para coordinar y realizar ciertos movimientos y gestos intencionados en ausencia de alteraciones motoras o sensoriales) y agnosia (capacidad para reconocer objetos, personas, sonidos, formas u olores) atribuible a la afectación de áreas de asociación corticales. También pueden estar implicados síntomas especiales, tales como paraparesia espástica (debilidad que afecta a las extremidades inferiores) (1 -4).

La incidencia de la enfermedad de Alzheimer aumenta espectacularmente con la edad. La EA es, en la actualidad, la causa más habitual de demencia. Clínicamente se caracteriza por una disminución global de la función cognitiva que progresa lentamente y deja a los pacientes terminales confinados a la cama, incontinentes y dependientes de custodia. La muerte se produce, de media, 9 años después del diagnóstico (5).

La tasa de incidencia de la EA aumenta espectacularmente con la edad. Las proyecciones sobre la población de las Naciones Unidas estiman que el número de personas mayores de 80 años se acercará a los 370 millones en el año 2050. Actualmente, se ha estimado que el 50 % de las personas mayores de 85 años están afectadas por EA. Por tanto, más de 100 millones de personas de todo el mundo sufrirán demencia en 50 años. El gran número de personas que requiere atención constante y otros servicios afectará gravemente a los recursos médicos, monetarios y humanos (6).

La alteración de la memoria es la primera característica de la enfermedad e implica a la memoria episódica (memoria para los acontecimientos del día de hoy). La memoria semántica (memoria para los significados verbales y visuales) se ve afectada en etapas posteriores de la enfermedad. Por el contrario, la memoria de trabajo (memoria a corito plazo que afecta a las estructuras y procesos usados para el almacenamiento temporal y la manipulación de la información) y la memoria de procedimientos (memoria inconsciente que es la memoria a largo plazo de capacidades y procedimientos) se conservan hasta tarde. A medida que la enfermedad progresa aparecen las características adicionales de alteración del lenguaje, déficit visuales, preceptúales y espaciales, agnosias y apraxias.

El cuadro clásico de la enfermedad de Alzheimer es lo bastante característico como para permitir la identificación en aproximadamente el 80 % de los casos (7). No obstante, hay heterogeneidad clínica y esto no solo es importante para el tratamiento clínico sino que proporciona más implicaciones de los tratamientos médicos específicos para formas funcionalmente diferentes. (8).

El rasgos característico patológico de la EA incluye placas amiloides que contienen beta amiloide (Abeta), ovillos neurofibrilares (ONF) que contienen disfunción y pérdida de Tau, neuronal y sináptica (9-11 ) Durante la última década se han propuesto dos hipótesis principales sobre la causa de la EA: La "hipótesis de la cascada amiloide", que afirma que el proceso neurodegenerativo es una serie de acontecimientos desencadenados por el procesamiento anormal de la proteína precursora amiloide (APP) (12) y la "hipótesis de la degeneración del citoesqueleto neuronal" (13), que propone que los acontecimientos desencadenantes son los cambios en el citoesqueleto. La teoría más aceptada que explica la progresión de la EA sigue siendo la hipótesis de la cascada amiloide (14-16) y los investigadores sobre la EA se han centrado principalmente sobre la determinación del mecanismo subyacente a la toxicidad asociada con las proteínas Abeta. Por el contrario, la proteína Tau ha recibido mucha menos atención de la industria farmacéutica que la amiloide, por motivos tanto fundamentales como prácticos. Además, los cambios de densidad sináptica son la lesión patológica que se correlaciona mejor con la alteración cognitiva que los otros dos. Los estudios han revelado que la patología amiloide parece progresar de un modo específico de neurotransmisor, de modo que los terminales colinérgicos parecen más vulnerables, seguidos por los terminales glutamatérgicos y, por último, los terminales GABAérgicos (H ).

BREVE DESCIPCIÓN DE LA INVENCIÓN El propósito de la presente invención es proporcionar nuevos enfoques terapéuticos para tratar la EA y trastornos relacionados.

Los inventores han identificado una vía molecular que está implicada en la génesis de la EA y ofrece nuevas dianas para el desarrollo de nuevos tratamientos para atenuar la EA y los trastornos relacionados, particularmente para el desarrollo de terapias de combinación usando moléculas nuevas o existentes previamente usadas en otras indicaciones. Más particularmente, los inventores han identificado varios fármacos que, solos o en combinación(ciones), pueden afectar de forma eficaz a dicha vía y representan una terapia nueva y eficaz para el tratamiento de la EA y trastornos relacionados.

Por tanto, la invención proporciona nuevas composiciones y procedimientos para tratar la EA y los trastornos relacionados.

Más particularmente, la invención se refiere a composiciones adecuadas para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno seleccionado en un sujeto que lo necesite, donde dichas composiciones comprenden un fármaco que incrementa la angiogénesis.

Otro objeto de la presente invención se refiere a composiciones adecuadas para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno seleccionado en un sujeto que lo necesite, donde dichas composiciones comprenden una combinación de al menos dos fármacos que incrementan la angiogénesis, para administración combinada, por separado o secuencial.

Más preferentemente, el fármaco o fármacos que incrementan la angiogénesis se unen o modulan la actividad de una proteína codificada por un gen seleccionado de ABCA1 , ACAT, ACC2, ADAMTS12, ADCY2, ADIPOQ, ADIPOR1 , ADIPOR2, ADRB2, AGPAT5, AIP4, AKAP2, AKR1 C2, AMPK, ANG2, ANK1 , ANXA1 , APOA1 , ARHGAP17, ATP10A, AUH, AUTOTAXINA, BAI3, BCAR1 , BIN1 , BMP3A, CA10, CAMK1 D, CAMKK2, CD36, CD44, CDC42, CDH13, CHAT, CNTFR, COL4A2, CPT, CSH1 , CTNN, CUBN, CYP7B1 , CYSLTR1 , CYSLTR2, DGKB, DGKH, DGKZ, DHCR7, DHFR, DRD2, DRD5, EDG1 , EDG2, EDG3, EDG4, EDG5, EDG6, EDG7, EDG8, EDNRA, EHHADH, ENPP6, ERBB4, ERK1 , ERK2, ESRRG, ETFA, F2, FDPS, FGF2, FLNA, FLT4, FOX01 , FOX03A, FTO, GABBR2, GATA3, GH1 , GNA12, GNA13, GRK2, GRK5, GRM5, HAPLN1 , HAS1 , HAS2, HAS3, HCRTR2, HIF1A, HSD11 B1 , HYAL1 , HYAL2, HYAL3, IL20RA, IL20RB, IL6ST, IL8, ITGA6, ITGB1 , KDR, LAMA1 , LDLR, LEPR, LEPTINA, LIFR, LIPL2, LKB1 , LRP, LTBP2, MAT2B, ME1 , MEGALINA, MERLIN, MET, MGST2, MMP2, MMP9, MTOR, MTR, NCK2, NEDD9, NFKB1 , NFKBIB, NOS2A, NOS3, NR1 I2, NR3C2, NRG1 , NRP1 , NRP2, OPRS1 , OSBPL10, OSBPL3, OSTEOPONTINA, P2RY1 , P2RY12, PAI1 , PAI2, PAK1 , PAK6, PALLD, PAP1 , PAR1 , PAXILINA, PC, PCTP, PDE1 1A, PDE1A, PDE3A, PDE4D, PDE5, PDGFA, PDGFB, PDGFRA, PDGFRB, PI3K, PITPNC1 , PKA, PKCD, PLA1A, PLA2, PLAT, PLAU, PLCB1 , PLD1 , PLD2, PLG, PLXDC2, PPARA, PPARG, PPARGC1 B, PRKG1 , PRL, PTGS2, PTN, PTPN1 1 , PYK2, RAC1 , RAS, RHEB, RHOA, ROCK1 , ROCK2, RPS6KA1 , RPS6KB2, SCARB1 , SCHIP1 , SGPP2, SLC25A21 , SMAD3, SMAD4, SNCA, SORBS2, SPLA2, SPOCK1 , SRD5A1 , SREBF1 , SREBF2, STAT3, TGFBR1 , TGFBR2, TGFBR3, THBS1 , THBS2, THEM2, THRB, TIAM1 , TIMP2, TLL2, TSC1 , TSC2, TSPO, VEGFA, VEGFR1 y YES1.

Ejemplos específicos y preferidos de dichos fármacos incluyen, sin limitaciones, compuestos seleccionados de acamprosato, albuterol, alendronato, ambrisentan, ácido aminocaproico, argatroban, baclofeno, balsalazida, becaplermina, cabergolina, cilostazol, clopidogrel, desirudina, dihidroergotamina, eplerenona, fenoldopam, fludrocortisona, flunitrazepam, gemfibrozilo, hesperetina, imatinib, ketotifeno, leflunomida, L-histidina, liotironina, marimastat, meloxícam, mepacrina, metazolamida, metimazol, milrinona, montelukast, netilmicina, nitroglicerina, nitroprusida, pegaptanib, pentazocina, fenformina, fenilbutarato sódico, pirimetamina, sulfisoxazol, sunitinib, tadalafilo, temazepam, terbinafina, tietilperazina, tirofiban, topiramato, topotecán, vidarabina y warfarina, o una combinación de los mismos.

En una forma de realización concreta, las composiciones de la presente invención comprenden además al menos un fármaco que modula la función sináptica para el uso combinado, por separado o secuencial.

Como alternativa o. de manera adicional, las composiciones de la presente invención pueden comprender además al menos un fármaco que modula la respuesta de estrés celular para el uso combinado, por separado o secuencial.

Normalmente, las composiciones de la presente invención comprenden además un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Otro objeto de la presente invención reside en un procedimiento de producir un fármaco para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, en donde el procedimiento comprende una etapa de someter a ensayo un fármaco candidato para determinar la actividad sobre la angiogénesis y seleccionar los fármacos candidatos que incrementan la angiogénesis.

La invención también se refiere a un procedimiento para producir una composición para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, en donde el procedimiento comprende preparar una combinación de un fármaco que incrementa la angiogénesis y un fármaco que modula la función sináptica o la respuesta de estrés celular, y formular dicha combinación de fármacos para la administración simultánea, por separado o secuencial a un sujeto que lo necesite.

La invención se refiere además a un procedimiento de tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, en donde el procedimiento comprende administrar de forma simultánea, por separado o secuencialmente a un sujeto que lo necesite un fármaco o una combinación de fármacos que incrementan la angiogénesis.

La invención se refiere además a un procedimiento de tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, en donde el procedimiento comprende administrar de forma simultánea, por separado o secuencialmente a un sujeto que lo necesite un fármaco que incremente la angiogénesis y un fármaco que module la función sináptica y/o un fármaco que module la respuesta de estrés celular.

La invención se refiere además al uso de un fármaco que incrementa la angiogénesis para la fabricación de un medicamento para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado.

La invención además se refiere al uso de una combinación de al menos dos fármacos que incrementan la angiogénesis para la fabricación de un medicamento para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, en donde dichos al menos dos fármacos se administran juntos, por separado o secuencialmente.

Tal como se trata en la presente solicitud, las terapias anteriores y las terapias de combinación proporcionan nuevos y eficaces enfoques para tratar la EA en sujetos humanos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA FIGURA Fig 1 : Efecto protector de determinados fármacos contra la toxicidad del péptido beta-amiloide en la liberación de LDH en células cerebrales endoteliales. 0 p < 0,05: significativamente diferente del vehículo. **:p < 0,01 ; *** p < 0,0001 ; **** p < 0,00001 : Significativamente diferente de A ß25-35 prueba bilateral de Student. Una ß25-35 30 µ? produce una intoxicación moderada pero significativa (Fig 1 -A a D, en rojo). Esta intoxicación se previene significativamente con leflunomida (Fig 1A), Terbinafina (Fig 1 B), Sulfisoxazol (Fig 1 C) o Baclofeno (-) (Fig 1 D). Además, leflunomida y terbinafina no sólo previenen el efecto perjudicial del amiloide sino que también disminuyen la muerte celular espontánea en el medio de cultivo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona nuevos enfoques terapéuticos para tratar la EA o trastornos relacionados. La invención da a conocer nuevos usos de fármacos o combinaciones de fármacos que permiten una corrección eficaz de dichas enfermedades y que pueden usarse para el tratamiento de pacientes.

El término "trastorno relacionado con la AE" designa enfermedad de Alzheimer (EA), demencia senil de tipo EA (DSTEA), enfermedad de Parkinson, demencia de cuerpos de Lewis, demencia vascular, alteración cognitiva leva (Mel), alteración de la memoria asociada con la edad (AMAE) y problemas asociados con el envejecimiento, parkinsonismo postencefalitis, ALS y síndrome de Down.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, "tratamiento" de un trastorno incluye la terapia, la prevención, la profilaxis, el retraso o la reducción de los síntomas provocados por el trastorno. El término tratamiento incluye, en particular, el control de la progresión de la enfermedad y de los síntomas asociados.

El término "incremento", en referencia a la angiogénesis, incluye cualquier incremento de la angiogénesis en comparación con el nivel existente en el sujeto. Dicho alivio puede incluir una restauración, es decir hasta niveles normales, o menor incremento, que todavía son suficientes para mejorar el estado del paciente. Dicho incremento se puede evaluar o verificar usando pruebas biológicas, tales como los descritos en la sección experimental.

Asimismo, con la designación de compuestos específicos dentro del contexto de la presente invención se pretende incluir no sólo las moléculas específicamente citadas, sino también cualquier sal, hidrato, éster, éter, isómeros, racemato, conjugados o profármacos de los mismos.

El término "combinación" designa un tratamiento en el que al menos dos o más fármacos se administran de manera conjunta a un sujeto para producir un efecto biológico. En una terapia combinada de acuerdo con la presente invención, los al menos dos fármacos pueden administrarse juntos o por separado, al mismo tiempo o secuencialmente. Asimismo, los al menos dos fármacos pueden administrarse a través de diferentes vías y protocolos. Como resultado, aunque pueden formularse juntos, los fármacos o una combinación también se pueden formular por separado.

Tal como se ha tratado en párrafos anteriores, la invención se refiere a composiciones y procedimientos para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado en un sujeto que lo necesite, usando un fármaco o una combinación de fármacos que incrementa la angiogénesis.

Mediante una integración exhaustiva de los datos experimentales que cubren los resultados de estudios de biología celular, experimentos de perfiles y estudios de asociación genética, que describen diferentes aspectos de la enfermedad de Alzheimer y vínculos existentes en la señalización celular y las vías funcionales, los inventores han descubierto que la angiogénesis representa un mecanismo importante que está alterado en los sujetos con EA. Los genes localizados en dicha red funcional e implicados en la enfermedad de Alzheimer se seleccionaron mediante los criterios siguientes: interacción directa con los genes causantes responsables de casos familiares de la enfermedad de Alzheimer (APP, ApoE, presenilinas, proteína tau), parejas funcionales de los genes seleccionados mediante el criterio (1 ), parejas funcionales más cercanas de los genes seleccionados mediante el criterio (2), A través de este procedimiento, los inventores pudieron establecer que la red responsable de la angiogénesis es una red funcional fundamental afectada en la enfermedad de Alzheimer.

La angiogénesis desempeña un papel fundamental en asegurar la homeostasis de un tejido y en las respuestas adaptativas a los retos ambientales y fisiológicos, tales como hipoxia y cicatrización de heridas; su disfunción contribuye a la patogenia de numerosas y heterogéneas patologías que van desde complicaciones cardiovasculares hasta crecimiento tumoral y metástasis.

Aunque la enfermedad de Alzheimer tradicionalmente se ha considerado una afección neurodegenerativa que se acompaña de patología vascular colateral, nuestro análisis permite la reevaluación del impacto patogénico de la alteración de la regulación vascular y atribuye un importante, y probablemente causal, papel a las vías angiogénicas en la etiología de esta enfermedad. Los inventores han encontrado que los genes que regulan la angiogénesis están extremadamente enriquecidos en las redes de señalización implicadas en la enfermedad de Alzheimer. Esta conclusión tiene profundas consecuencias para la prevención y curación de la enfermedad de Alzheimer y proporciona nuevas guías para el tratamiento combinatorio de este complejo trastorno neurodegenerativo. Los inventores también han encontrado que esta red podría subdividirse formalmente en las familias de los factores angiogénicos y de las proteínas de las dos vías (vía AMPK y vía metabólica del LPA), estrechamente implicados en la regulación de la angiogénesis.

La proteína abeta amiloide afecta profundamente no solo a la biología de las neuronas, sino que también posee una fuerte actividad antiangiogénica (17). Otro gen, asociado causalmente con casos familiares de enfermedad de Alzheimer, la prensenilina es capaz de modular, por medio de la regulación de la proteólisis intramembrana, la angiogénesis a través de varias vías independientes mediadas por sus sustratos funcionales VEGFRI, ErbB4, Notch, DCC, CD44, receptores de efrina y caderinas (18-20).

El gen CD44 codifica un receptor del ácido hialurónico (AH), cuyos productos de degradación estimulan la angiogénesis (21 ). Este receptor estaba implicado en la organización y/o estabilización del endotelio de los vasos en formación o recién formados (22). También se puede unir y regula la actividad de proteínas tales como osteopontina, colágenos y metaloproteinasas de la matriz (MMP) implicadas en la dinámica de la matriz extracelular, que acompaña a la formación de nuevos vasos sanguíneos (23).

Otros receptores de membrana identificados por el análisis de los datos de los inventores incluyen IL20Ra, LEPTR, NRP 1 y NRP2, y el receptor de endotelina EDNRA. El gen IL20R codifica un receptor de la IL20, una citoquina pleiotrópica implicada en la formación de tubos vasculares (24). La leptina, una hormona endocrina y ligando de LEPTR, estimula la angiogénesis de forma sinérgica con el factor de crecimiento de fibroblastos FGF-2 y el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), los dos factores angiogénicos más potentes y de expresión ubicua. Asimismo, está implicada en el incremento de la permeabilidad vascular (25). NRPI y NRP2 son co-receptores transmembrana que modulan la activación de la señalización de VEGFR-2, que asegura la angiogénesis del desarrollo (26).

Por último, los inventores también han seleccionado un grupo de genes implicados en la organización y remodelado de la matriz extracelular (THBS2, LAMA1 , COL4A2, ADAMTS12 y ADAM10) o en el procesamiento funcional (TLL2) de los moduladores angiogénicos bien conocidos, tales como prolactina, hormona de crecimiento y lactógeno placentario (27).

Se admite que la familia de la proteína quinasa activada por AMP (AMPK) es un sensor intracelular de la proporción de AMP:ATP y desempeña un papel fundamental en el mantenimiento de la homeostasis de la energía mediante la regulación de procesos metabólicos, tales como el metabolismo de la glucosa o de los ácidos grasos. Esta familia de serina/treonina quinasas se activa mediante tensiones metabólicas que inhiben la producción de ATP o estimulan el consumo de ATP (28).

Además de su papel bien establecido en el control del equilibrio de la energía celular, la señalización de AMPK también es un regulador de la angiogénesis requerido para la migración y diferenciación de células endoteliales en condiciones de hipoxia (29). Esta quinasa es uno de los efectores posteriores responsables de los efectos proangiogénicos del VEGF (30), adiponectina (31 ), IGF-I y, probablemente, el receptor PPARy. Se ha encontrado que la AMPK está anormalmente activada en ratones APP/PS2 dobles transgénicos, un modelo in vivo de la enfermedad de Alzheimer.

Los inventores han identificado varios genes asociados con la enfermedad de Alzheimer y representan tanto moduladores anteriores y efectores posteriores de las quinasas activadas por AMP. Entre los moduladores anteriores de las proteínas AMPK, se podrían mencionar la leptina y los receptores de CNTF, CDH13 (33), un co-receptor putativo de la adiponectina Acrp30 y las vías de señalización de la trombina, así como quinasas que, junto con la LKBI quinasa, se admite que son un modulador directo principal de la actividad de AMPK (28).

Sobre los efectores posteriores de la AMPK, los genes implicados en el metabolismo de los ácidos grasos y el colesterol representan un interés concreto. Notablemente, el gen ACC2, diana bien establecida de la señalización de AMPK, codifica la Acetil-CoA carboxilasa (ACC) que cataliza la carboxilación dependiente de ATP de la acetil-CoA a malonil-CoA y, por tanto, controla la etapa limitante de la velocidad en la síntesis de los ácidos grasos. La AMPK activada fosforila la proteína ACC2, disminuye su actividad enzimática y, por tanto, potencia la oxidación de los ácidos grasos. Otros varios genes, principalmente mitocondriales, implicados en el metabolismo de los ácidos grasos, tales como EFTA, AUH, SLC25A2I, PC, ME1 y EHHADH podrían también participar en el control mediado por AMPK del equilibrio de la energía celular en el contexto de la enfermedad de Alzheimer. Entre ellos, el gen PC codifica la piruvato carboxilasa y está implicada en múltiples vías metabólicas, tales como la gluconeogénesis, la lipogénesis y la síntesis del neurotransmisor glutamato. Se ha demostrado que el deterioro en la actividad de PC podría estar relacionado con la disfunción cerebral (34-35). Es interesante el hecho de que el receptor de GABA(B) también se ha identificado como diana funcional para la quinasa activada por AMP. En un estudio reciente se demostró que la activación de AMPK podría ser de neuroprotección, mediante la fosforilación del receptor de GABA(B) (36) y, por tanto, podría participar en la progresión de la patología amiloide dirigida a los terminales GABAérgicos (11 ).

Además, la vía de señalización de AMPK podría modificar la evolución de las lesiones asociadas con la enfermedad del Alzheimer afectando al metabolismo del colesterol. La AMPK puede influir sobre el metabolismo del colesterol reduciendo la actividad de los factores de transcripción SERBP (37). Las proteína SREBP son sensores y reguladores principales de los niveles de colesterol intracelulares; al ser activados por escisión proteolítica cuando disminuyen los niveles de colesterol, los SREBP se unen al elemento regulador de esterol específico (SER) en las regiones promotoras de los genes que codifican enzimas, implicadas en la biosíntesis del colesterol, y potencian su transcripción.

El colesterol no sólo sirve como precursor de la biosíntesis de esferoides neuroprotectores, sino que también es un importante regulador reconocido de la fluidez de la membrana y desempeña un papel fundamental en la dinámica de las balsas lipídicas, concentrando las plataformas para una variedad de moléculas implicadas en la clasificación de membrana , tráfico y transduccion de la señal. Los productos intermedios en la biosíntesis del colesterol generados por la farnesil-PP y la geranigeranil-PP sintasas desempeñan un papel fundamental en la modulación de la actividad de las GTPasas pequeñas, incluidas RhoA y Rae, que son reguladores fundamentales de la angiogénesis y el crecimiento de los axones.

Otros diversos genes implicados en el metabolismo y transporte del colesterol también podrían influir sobre el desarrollo de la enfermedad de Alzheimer. Las proteínas DHCR7, SRD5A1 y CYP7B1 están implicadas en la producción de esferoides que podrían proteger las células neuronales contra agresiones tóxicas asociadas con la enfermedad de Alzheimer (38). El gen ABCA1 que codifica un miembro de la familia de los transportadores de cásete de unión a ATP (ABC) también tiene un interés concreto, ya que controla la secreción de la lipoproteína ApoE, el principal factor de predisposición del riesgo para el desarrollo de la enfermedad de Alzheimer (39).

El ácido fosfatídico (PA), el ácido lisofosfatídico (LPA) y la esfingosina 1 -fosfato (S1 P) son fosfolípidos naturales que poseen potentes propiedades de señalización. Es notable el hecho de que estos factores de crecimiento de fosfolípidos muestran efectos divergentes sobre el potencial angiogénico de las células endoteliales y podrían, de forma complementaria y combinada, inducir de forma eficaz la neurovascularización. La S1 P está principalmente implicada en la estimulación de la migración quimiotáctica de las células endoteliales, mientras que el LPA está más implicado en la estabilización de la función de barrera de monocapa endotelial en las últimas etapas de la angiogénesis (40).

El LPA afecta a la angiogénesis modulando la actividad de la RhoA GTPasa o potenciando la expresión de varios factores angiogénicos- VEGF, PDGFB y IL-8 (41-45). Además de su estrecha implicación en la angiogénesis, el LPA también se admite que es una señalización de lípidos extracelulares que provocan el colapso del cono de crecimiento de neuritas y que influyen sobre la migración de las neuronas posmitóticas tempranas durante el desarrollo (46).

El LPA se puede sintetizar mediante la lisofosfolipasa D secretada (autotaxina) y actúa a través de receptores de EDG2, EDG4 y EDG7 acoplados a proteína G específica que afectan a la proliferación, supervivencia y motilidad celular (47). Con mayor probabilidad, la capacidad del LPA para controlar la morfología y la motilidad celular está mediada por la activación del módulo de señalización RhoA-ROCK a través de la proteína G 2/13 (48).

Algunos datos experimentales indican un importante papel de la señalización mediada por LPA en la patogenia de la enfermedad de Alzheimer. Se ha demostrado que la expresión de autotaxina está potenciada en la corteza frontal de los pacientes de demencia de tipo Alzheimer (49) y la retracción de neuritas inducida por LPA in vitro se acompaña de un incremento del patrón de fosforilación de tipo Alzheimer de la proteína tau en células de neuroblastoma humano diferenciado (50). Además, las manipulaciones genéticas con APP o proteínas presenilina afectan a la expresión de la enzima autotoxina en cerebros de ratones transgénicos (51-52).

Usando el enfoque de análisis de datos de los inventores, los inventores han identificado un gran número de genes implicados en el metabolismo de LPA o modulados por la señalización de LPA y unidos potencialmente ligados a la progresión de la enfermedad de Alzheimer (MTR, MAT2B, CUBN, ATP1 OA, THEM2, PITPNC1 , ENPPG, SGPP2, AGPAT, DGKH, DGKB, MGST2, PLD2 y DRD2). Entre ellos, el gen CUBN codifica un receptor del factor intrínseco-vitamina B12, mientras que la deficiencia en la biodisponibilidad de folato y cobalamina (vitamina B9 y B12) se asoció previamente con la patogenia de la enfermedad de Alzheimer (53).

En la presente invención, los inventores proponen nuevas composiciones que se pueden usar para aumentar la angiogénesis alterada en la enfermedad de Alzheimer y otros trastornos neurodegenerativos.

En una forma particular de realización, las composiciones y procedimientos de tratar la ED de acuerdo con la presente invención usan fármacos que incrementan la angiogénesis a través de su interacción con o modulación de un gen o proteína tal como se ha indicado con anterioridad.

Más específicamente, las composiciones de la presente invención comprenden un fármaco o fármacos que incrementan la angiogénesis a través de la unión a, o modulación de la actividad de una proteína codificada por un gen seleccionado de ABCA1 , ACAT, ACC2, ADAMTS12, ADCY2, ADIPOQ, ADIPOR1 , ADIPOR2, ADRB2, AGPAT5, AIP4, AKAP2, AKR1 C2, AMPK, ANG2, ANK1 , ANXA1 , APOA1 , ARHGAP17, ATP10A, AUH, AUTOTAXINA, BAI3, BCAR1 , BINI, BMP3A, CA10, CAMK1 D, CAMKK2, CD36, CD44, CDC42, CDH13, CHAT, CNTFR, COL4A2, CPT, CSH1 , CTNN, CUBN, CYP7B1 , CYSLTR1 , CYSLTR2, DGKB, DGKH, DGKZ, DHCR7, DHFR, DRD2, DRD5, EDG1 , EDG2, EDG3, EDG4, EDG5, EDG6, EDG7, EDG8, EDNRA, EHHADH, ENPP6, ERBB4, ERK1 , ERK2, ESRRG, ETFA, F2, FDPS, FGF2, FLNA, FLT4, F0X01 , F0X03A, FTO, GABBR2, GATA3, GH1 , GNA12, GNA13, GRK2, GRK5, GRM5, HAPLN1 , HAS1 , HAS2, HAS3, HCRTR2, HIF1A, HSD11 B1 , HYAL1 , HYAL2, HYAL3, IL20RA, IL20RB, IL6ST, IL8, ITGA6, ITGB1 , KDR, LAMA1 , LDLR, LEPR, LEPTINA, LIFR, LIPL2, LKB1 , LRP, LTBP2, MAT2B, ME1 , MEGALINA, MERLIN, MET, MGST2, MMP2, MMP9, MTOR, MTR, NCK2, NEDD9, NFKB1 , NFKBIB, NOS2A, NOS3, NR1 I2, NR3C2, NRG1 , NRP1 , NRP2, OPRS1 , OSBPL10, OSBPL3, OSTEOPONTINA, P2RY1 , P2RY12, PAI1 , PAI2, PAK1 , PAK6, PALLD, PAP1 , PAR1 , PAXILINA, PC, PCTP, PDE1 1A, PDE1A, PDE3A, PDE4D, PDE5, PDGFA, PDGFB, PDGFRA, PDGFRB, PI3K, PITPNC1 , PKA, PKCD, PLAIA, PLA2, PLAT, PLAU, PLCB1 , PLD1 , PLD2, PLG, PLXDC2, PPARA, PPARG, PPARGC1 B, PRKG1 , PRL, PTGS2, PTN, PTPN1 1 , PYK2, RAC1 , RAS, RHEB, RHOA, ROCK1 , ROCK2, RPS6KA1 , RPS6KB2, SCARB1 , SCHIP1 , SGPP2, SLC25A21 , SMAD3, SMAD4, SNCA, SORBS2, SPLA2, SPOCK1 , SRD5A1 , SREBF1 , SREBF2, STAT3, TGFBR1 , TGFBR2, TGFBR3, THBS1 , THBS2, THEM2, THRB, TIAMI, TIMP2, TLL2, TSC1 , TSC2, TSPO, VEGFA, VEGFR1 y YES1.

Las secuencias de todos los genes y proteínas indicados anteriormente están disponibles en genotecas y se pueden aislar mediante técnicas conocidas en la técnica. Además, la actividad de estos genes y proteínas se puede evaluar mediante técnicas conocidas per se en la técnica, tal como se trata en la sección experimental.

La invención describe además fármacos que se pueden usar para modular estos genes y proteínas diana. La invención divulga la identificación y la actividad de fármacos concretos que, bien solos pero, preferentemente, en combinación(es), modulan la vía anterior y pueden usarse para tratar dichas enfermedades. En particular, los inventores han identificado moléculas pequeñas que ya existen en la literatura pero usados para tratar enfermedades distintas en sujetos humanos.

A este respecto, en una forma de realización más preferida, las composiciones de la presente invención comprenden al menos un inhibidor de ACAT (preferentemente hesperetina), un modulador de ADCY2 (preferentemente vidarabina), un modulador de AMPK (preferentemente seleccionado de fenformina y vidarabina), un modulador de AUTOTAXINA (preferentemente, L-histidina), un inhibidor de CA10 (preferentemente, metazolamida), un antagonista de CYSLTR1 y CYSLTR2 (preferentemente, montelukast), un inhibidor de DHFR (preferentemente, pirimetamina), un modulador de DRD2 (preferentemente seleccionado de dihidroergotamina y cabergolina), un agonista del receptor de dopamina DRD5 (preferentemente, fenoldopam), un antagonista de EDNRA (preferentemente, sulfisoxazol), un modulador de F2 (preferentemente, warfarina), un inhibidor de FDPS (preferentemente, alendronato), un modulador de GABBR2 (preferentemente seleccionado de baclofeno y acamprosato), un modulador de las hialuronano sintasas HAS1-3 (preferentemente, leflunomida), un modulador de HIF1A (preferentemente seleccionado de topotecán y meloxicam), un modulador de MGST2 (preferentemente, balsalazida), un modulador de MMP2 y MMP9 (preferentemente, marimastat), un modulador de NOS2A (preferentemente seleccionado de gemfibrozilo, albuterol y tietilperazina), un modulador de NOS3 (preferentemente, ketotifeno), un agonista de NR1 I2 (preferentemente, topiramato), un modulador de NR3C2 (preferentemente seleccionado de eplerenona y fludrocortisona), un agonista de OPRS1 (preferentemente, pentazocina), un modulador de P2RY1 y P2RY12 (preferentemente seleccionado de clopidogrel y tirofiban), un inhibidor del receptor de trombina PAR1 (preferentemente, argatroban), un inhibidor de PDE11A (preferentemente, tadalafilo), un inhibidor de PDE3A (preferentemente, cilostazol), un inhibidor de PDE4D (preferentemente, milrinona), un modulador de PDGFRA y PDGFRB (preferentemente seleccionado de becaplermina e imatinib), un inhibidor de fosfolipasas PLA1A y PLA2 (preferentemente seleccionado de netilmicina y mepacrina), un modulador de PLAT (preferentemente, fenilbutirato), un modulador de PLD2 (preferentemente seleccionado de ambrisentan y fenoldopam), un modulador de PLG (preferentemente, ácido aminocaproico), un agonista de PPARA (preferentemente, gemfibrozilo), un agonista de PPARG (preferentemente, fenilbutirato sódico), un activador de PRKG1 (preferentemente seleccionado de nitroprusida, nitroglicerina, tadalafilo y cilostazol), un modulador de RHOA (preferentemente seleccionado de alendronato y terbinafina), un modulador de THRB (preferentemente seleccionado de liotironina y metimazol), un inhibidor de TROMBINA (preferentemente, desirudina), un modulador de TSPO (preferentemente seleccionado de flunitrazepam y temazepam), y/o un antagonista de VEGFRI (preferentemente seleccionador de sunitinib y pegaptanib).

Tal como se ha tratado en párrafos anteriores, la invención propone particularmente diseñar terapias de combinación para abordar los mecanismos de la EA y trastornos relacionados. A este respecto, más adelante se dan a conocer ejemplos de dianas y combinaciones de fármacos más preferidos.

Más preferentemente, la composición de la invención comprende al menos una de las siguientes combinaciones de fármacos, para administración combinada, por separado o secuencial: un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina), - un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un antagonista del receptor de endotelina EDNRA (preferentemente, sulfisoxazol), un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de HASI-3 hialuronano sintasas (preferentemente, leflunomida), un modulador de RHOA (preferentemente, baclofeno) y un antagonista del receptor de endotelina EDNRA (preferentemente, sulfisoxazol), un modulador DE RHOA (preferentemente, terbinafina) y un modulador de HASI-3 hialuronano sintasas (preferentemente, leflunomida), un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un agonista del receptor de dopamina DRD5 (preferentemente, fenoldopam), - un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un inhibidor de fosfolipasas PLA1A y PLA2 (preferentemente mepacrina), un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un modulador de AMPK (preferentemente, fenformina), un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un modulador de receptores purinérgicos P2RYI y P2RY12 (preferentemente, clopidogrel), un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de AMPK (preferentemente, fenformina), un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de receptores purinérgicos P2RYI y P2RY12 (preferentemente, clopidogrel), - Un antagonista del receptor de endotelina EDNRA (preferentemente, sulfisoxazol) y un modulador de AMPK (preferentemente, fenformina), un modulador de las hialuronano sintasas HAS1-3 (preferentemente, leflunomida) y un agonista del receptor de dopamina DRD5 (preferentemente, fenoldopam), o un modulador de las hialuronano sintasas HAS1-3 (preferentemente, leflunomida) y un inhibidor de fosfolipasas PLA1 A y PLA2 (preferentemente mepacrina), Ejemplos más preferidos de composiciones de la presente invención comprenden un compuesto seleccionado de acamprosato, albuterol, alendronato, ambrisentan, ácido aminocaproico, argatroban, baclofeno, balsalazida, becaplermina, cabergolina, cilostazol, clopidogrel, desirudina, dihidroergotamina, eplerenona, fenoldopam, fludrocortisona, flunitrazepam, gemfibrozilo, hesperetina, imatinib, ketotifeno, leflunomida, L-histidina, liotironina, marimastat, meloxicam, mepacrina, metazolamida, metimazol, milrinona, montelukast, netilmicina, nitroglicerina, nitroprusida, pegaptanib, pentazocina, fenformina, fenilbutarato sódico, pirimetamina, sulfisoxazol, sunitinib, tadalafilo, temazepam, terbinafina, tietilperazina, tirofiban, topiramato, topotecán, vidarabina y warfarina, o una combinación de los mismos.

En otra forma de realización preferida, las composiciones de acuerdo con la invención comprenden al menos un compuesto escogido del grupo constituido por leflunomida, sulfisoxazol, terbinafina, baclofeno, clopidogrel, fenoldopam, mepacrina y fenformina, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para administración simultánea, por separado o secuencial.

En otra forma de realización preferida, las composiciones de acuerdo con la invención comprenden una combinación de al menos dos compuestos escogidos del grupo constituido por leflunomida, sulfisoxazol, terbinafina, baclofeno, clopidogrel, fenoldopam, mepacrina y fenformina, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para administración simultánea, por separado o secuencial.

En otra forma de realización, las composiciones de la invención comprenden una combinación de al menos dos compuestos escogidos del grupo constituido por leflunomida, sulfisoxazol, terbinafina, baclofeno, clopidogrel, fenoldopam, mepacrina y fenformina, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, donde dicha composición incrementa la angiogénesis alterada en trastornos neurodegenerativos seleccionados del grupo constituido por la enfermedad de Alzheimer (EA), la enfermedad de Parkinson (EP), esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y esclerosis múltiple (EM).

En otra forma de realización preferida, las composiciones de la invención comprenden una combinación de al menos dos compuestos escogidos del grupo constituido por leflunomida, sulfisoxazol, terbinafina, baclofeno, clopidogrel, fenoldopam, mepacrina y fenformina, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA).

Preferentemente, la composición para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno seleccionado en un sujeto que lo necesite, comprende al menos uno de las siguientes combinaciones de fármacos para administración combinada, por separado o secuencial: baclofeno y terbinafina, baclofeno y sulfisoxazol, baclofeno y leflunomida, - terbinafina y sulfisoxazol, terbinafina y leflunomida, terbinafina y fenoldopam, terbinafina y mepacrina, terbinafina y fenformina, - terbinafina y clopidogrel, baclofeno y fenformina, baclofeno y clopidogrel, sulfisoxazol y fenformina, Leflunomida y fenoldopam, o - leflunomida y mepacrina, En la forma de realización más preferida, la composición de la invención comprende una combinación de al menos dos compuestos seleccionados de leflunomida, terbinafina, sulfisoxazol y baclofeno, o sales o profármacos o derivados de formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para administración simultánea, por separado o secuencial.

En otra forma de realización preferida, la composición de acuerdo con la invención comprende uno o más compuestos seleccionados de leflunomida, terbinafina, sulfisoxazol y baclofeno, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado.

En otra forma de realización, la composición de la invención comprende además al menos un fármaco que incrementa la angiogénesis para el uso combinado, por separado o secuencial.

Preferentemente, dicho fármaco adicional que incrementa la angiogénesis se selecciona de un inhibidor de ACAT (preferentemente hesperetina), un modulador de ADCY2 (preferentemente, vidarabina), un modulador de AMPK (preferentemente, vidarabina), un modulador de AUTOTAXINA (preferentemente, L-histidina), un inhibidor de CA10 (preferentemente, metazolamida), un antagonista de CYSLTRI y CYSLTR2 (preferentemente, montelukast), un inhibidor de DHFR (preferentemente, pirimetamina), un modulador de DRD2 (preferentemente seleccionado de dihidroergotamina y cabergolina), un modulador de F2 (preferentemente, warfarina), un inhibidor de FDPS (preferentemente, alendronato), un modulador de GABBR2 (preferentemente, acamprosato), un modulador de HIFIA (preferentemente seleccionado de topotecán y meloxicam), un modulador de MGST2 (preferentemente, balsalazida), un modulador de MMP2 y MMP9 (preferentemente, marimastat), un modulador de NOS2A (preferentemente seleccionador de gemfibrozilo, albuterol y tietilperazina), un modulador de NOS3 (preferentemente, ketotifeno), un agonista de NRII2 (preferentemente, topiramato), un modulador de NR3C2 (preferentemente seleccionador de eplerenona y fludrocortisona), un agonista de OPRS 1 (preferentemente, pentazocina), un modulador de P2RYI y P2RY12 (preferentemente, tirofiban), un inhibidor del receptor de trombina PARI (preferentemente, argatroban), un inhibidor de PDE1 1A (preferentemente, tadalafilo), un inhibidor de PDE3A (preferentemente, cilostazol), un ¡nhibidor de PDE4D (preferentemente, milrinona), un modulador de PDGFRA y PDGFRB (preferentemente seleccionado de becaplermina e imatinib), un inhibidor de PLA1A y PLA2 (preferentemente, netilmicina), un modulador de PLAT (preferentemente, fenilbutirato sódico), un modulador de PLD2 (preferentemente, ambrisentan), un modulador de PLG (preferentemente, ácido aminocaproico), un agonista de PPARA (preferentemente, gemfibrozilo), un agonista de PPARG (preferentemente, fenilbutirato), un activador de PRKG1 (preferentemente seleccionado de nitroprusida, nitroglicerina, tadalafilo y cilostazol), un modulador de RHOA (preferentemente, alendronato), un modulador de THRB (preferentemente seleccionado de liotironina y metimazol), un inhibidor de TROMBINA (preferentemente, desirudina), un modulador de TSPO (preferentemente seleccionado de flunitrazepam y temazepam), y/o un antagonista de VEGFRI (preferentemente seleccionado de sunitinib y pegaptanib)..

En otras formas de realización, dicho fármaco adicional que incrementa la angiogénesis se selecciona del fármaco o fármacos que se unen o modulan la actividad de una proteína codificada por un gen seleccionado de ABCA1 , ACAT, ACC2, ADAMTS12, ADCY2, ADIPOQ, ADIPOR1 , ADIPOR2, ADRB2, AGPAT5, AIP4, AKAP2, AKR1C2, AMPK, ANG2, ANK1 , ANXA1 , APOA1 , ARHGAP17, ATP10A, AUH, AUTOTAXINA, BAI3, BCAR1 , BIN1 , BMP3A, CA10, CAMK1 D, CAMKK2, CD36, CD44, CDC42, CDH13, CHAT, CNTFR, COL4A2, CPT, CSH1 , CTNN, CUBN, CYP7B1 , CYSLTR1 , CYSLTR2, DGKB, DGKH, DGKZ, DHCR7, DHFR, DRD2, DRD5, EDG1 , EDG2, EDG3, EDG4, EDG5, EDG6, EDG7, EDG8, EDNRA, EHHADH, ENPP6, ERBB4, ERK1 , ERK2, ESRRG, ETFA, F2, FDPS, FGF2, FLNA, FLT4, FOX01 , FOX03A, FTO, GABBR2, GATA3, GH1 , GNA12, GNA13, GRK2, GRK5, GRM5, HAPLN1 , HAS1 , HAS2, HAS3, HCRTR2, HIF1A, HSD11 B1 , HYAL1 , HYAL2, HYAL3, IL20RA, IL20RB, IL6ST, IL8, ITGA6, ITGB1 , KDR, LAMA1 , LDLR, LEPR, LEPTINA, LIFR, LIPL2, LKB1 , LRP, LTBP2, MAT2B, ME1 , MEGALINA, MERLIN, MET, MGST2, MMP2, MMP9, MTOR, MTR, NCK2, NEDD9, NFKB1 , NFKBIB, NOS2A, NOS3, NR1 I2, NR3C2, NRG1 , NRP1, NRP2, OPRS1 , OSBPL10, OSBPL3, OSTEOPONTINA, P2RY1 , P2RY12, PAI1 , PAI2, PAK1 , PAK6, PALLD, PAP1 , PAR1 , PAXILINA, PC, PCTP, PDE11A, PDE1A, PDE3A, PDE4D, PDE5, PDGFA, PDGFB, PDGFRA, PDGFRB, PI3K, PITPNC1 , PKA, PKCD, PLA1A, PLA2, PLAT, PLAU, PLCB1 , PLD1, PLD2, PLG, PLXDC2, PPARA, PPARG, PPARGC1 B, PRKG1, PRL, PTGS2, PTN, PTPN11 , PYK2, RAC1 , RAS, RHEB, RHOA, ROCK1 , ROCK2, RPS6KA1, RPS6KB2, SCARB1 , SCHIP1 , SGPP2, SLC25A21 , SMAD3, SMAD4, SNCA, SORBS2, SPLA2, SPOCK1 , SRD5A1 , SREBF1 , SREBF2, STAT3, TGFBR1 , TGFBR2, TGFBR3, THBS1 , THBS2, THEM2, THRB, TIAM1 , TIMP2, TLL2, TSC1 , TSC2, TSPO, VEGFA, VEGFR1 y YES1.

Los inventores han establecido que los fármacos y combinaciones de fármacos anteriores proporcionan un mejor efecto biológico sinérgico que conduce a una corrección o normalización eficaz o una alteración de la regulación funcional que produce EA y trastornos relacionados.

Los compuestos citados con anterioridad se enumeran en la tabla 1 siguiente, junto con su número CAS. Tal como se ha tratado anteriormente, debe entenderse que la invención abarca el uso de los compuestos anteriores, así como cualquier sal, hidrato, éster, éter, isómeros, racemato, conjugados o profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los profármacos se pueden preparar (p. ej., mediante acoplamiento del fármaco a un vehículo adecuado) para ofrecer un control mejor sobre los parámetros farmacocinéticos del tratamiento.

Tabla 1 NOMBRE DEL FÁRMACO NUMERO CAS Acam prosato 77337-76-9 Albuterol 18559-94-9 Alendronato 66376-36-1 Ambrisentan 177036-94-1 Acido aminocaproico 60-32-2 Argatroban 74863-84-6 Baclofeno 1134-47-0 Balsalazida 80573-04-2 Becaplermina 165101-51-9 Cabergolina 81409-90-7 Cilostazol 73963-72-1 Clopidogrel 113665-84-2 Desirudina 120993-53-5 Dihidroergotamina 6190-39-2 Eplerenona 107724-20-9 Fenoldopam 67227-57-0 Fludrocortisona 127-31-1 Flunitrazepam 1622-62-4 Gemfibrozilo 25812-30-0 Hesperetina 520-33-2 Imatinib 152459-95-5 Ketotifeno 34580-14-8 Leflunomida 75706-12-6 L-histidina 71-00-1 Liotironina 6893-02-3 Marimastat 154039-60-8 Meloxicam 71125-38-7 Mepacrina 83-89-6 Metazolamida 554-57-4 NOMBRE DEL FARMACO NÚMERO CAS Metimazol 60-56-0 Milrinona 78415-72-2 Montelukast 158966-92-8 Netilmicina 56391-56-1 Nitroglicerina 55-63-0 Nitroprusida 15078-28-1 Pegaptanib 222716-86-1 Pentazocina 359-83-1 Fenformina 114-86-3 Fenilbutirato sódico 1716-12-7 Pirlmetamina 58-14-0 Sulfisoxazol 127-69-5 Sunitinib 557795-19-4 Tadalafilo 171596-29-5 Temazepam 846-50-4 Terbinafina 91161-71-6 Tietilperacina 1420-55-9 Tirofiban 144494-65-5 Topiramato 97240-79-4 Topotecán 119413-54-6 Vidarabina 24356-66-9 Warfarina 81-81-2 Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de ácido farmacéuticamente aceptables, sales de adición de base farmacéuticamente aceptables, sales metálicas farmacéuticamente aceptables, sales de amonio y de amonio alquilados. Las sales de adición de ácido incluyen sales de ácidos inorgánicos, así como ácidos orgánicos. Ejemplos representativos de ácidos inorgánicos adecuados incluyen ácidos clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, fosfórico, sulfúrico, nítrico y similares. Ejemplos representativos de ácidos orgánicos adecuados incluyen los ácidos fórmico, acético, tricloroacético, trifluoroacético, propiónico, benzoico, cinnámico, cítrico, fumárico, glicólico, láctico, maleico, mélico, malónico, mandélico, oxálico, pícrico, pirúvico, salicílico, succínico, metanosulfónico etanosulfónico, tartárico, ascórbico, pamoico, bismetilensalicílico, etanodisulfónico, glucónico, citracónico, aspártico, esteárico, palmítico, EDTA, glicólico, p-aminobenzoico, glutámico, bencenosulfónico, o-toluenosulfónico, sulfatos, nitratos, fosfatos, percloratos, boratos, acetatos, benzoatos, hidroxinaftoatos, glicerofosfatos, cetogl uta ratos y similares. Ejemplos adicionales de sales de adición de ácido inorgánico u orgánico farmacéuticamente aceptable se enumeran en, por ejemplo, J. Pharm. Sci. 1977, 66, 2, QUE se incorpora en la presente memoria por referencia. Ejemplos de sales de metales incluyen sales de litio, sodio, potasio, magnesio y similares. Ejemplos de sales de amonio y de amonio alquilado incluyen sales de amonio, metilamonio, dimetilamonio, trimetilamonio, etilamonio, hidroxietilamonio, dietilamonio, butilamonio, tetrametilamonio y similares. Ejemplos de bases orgánicos incluyen lisina, arginina, guanidina, dietanolamina, clona y similares.

La terapia de acuerdo con la invención se puede realizar sola o como combinación de fármacos y/o junto con cualquier otra terapia, dirigida a la misma vía o que tienen distintos modos de acción. Se puede proporcionar en el domicilio, la consulta del médico, una clínica, el departamento ambulatorio de un hospital o un hospital, de modo que el médico pueda observar estrechamente los efectos de la terapia y realizar los ajustes que sean necesarios.

En una forma de realización concreta, las composiciones de la presente invención comprenden además al menos un fármaco que modula la función sináptica, preferentemente que atenúa la función sináptica, para el uso combinado, por separado o secuencial. Más preferentemente, dicho al menos un fármaco que modula la función sináptica se selecciona de alfentanilo amilorida amlodipina aztreonam, buclizina bumetanida buprenorfina, lidocaína, clorzoxazona, cinacalcet, dasatinib, difilina, eletriptán, ergotamina, fosfenitoína, fenobarbital, pregabalina, propiltiouracilo, tiagabina, triamtereno, vigabatrina y zonisamida (véase la tabla 2 a continuación).

Tabla 2 Como alternativa o además de la forma de realización precedente, las composiciones de la presente invención pueden comprender además al menos un fármaco que modula la respuesta de estrés celular, preferentemente que inhibe la respuesta de estrés celular, para el uso combinado, por separado o secuencial. Los fármacos más preferidos que modulan la respuesta de estrés celular se seleccionan de arabitol, manitol, metaraminol, omeprazol, prilocaína, rapamicina, rifabutina, tioguanina, trehalosa y vidarabina (véase la tabla 3 a continuación).

Tabla 3 En una forma de realización concreta, la invención se refiere a una composición que comprende un fármaco que incrementa la angiogénesis, un fármaco que atenúa la función sináptica y un fármaco que inhibe la respuesta de estrés celular, para administración simultánea, por separado o secuencial.

Normalmente, las composiciones de la invención comprenden uno o varios vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables. La duración de la terapia depende del estadio de la enfermedad que se está tratando, la combinación usada, la edad y estado del paciente y cómo responde el paciente al tratamiento.

La dosificación, frecuencia y modo de administración de cada componente de la combinación se puede controlar de forma independiente. Por ejemplo, se puede administrar un fármaco por vía oral, mientras que el segundo fármaco se puede administrar por vía intramuscular. La terapia de combinación se puede administrar en ciclos de terapia y descanso, que incluyen periodos de descanso de modo que el cuerpo del paciente tenga la posibilidad de recuperarse de cualquiera de los efectos secundarios todavía sin predecir. Los fármacos también se pueden formular juntos de modo que una administración libere todos los fármacos.

La administración de cada fármaco de la combinación puede ser por cualquier medio adecuado que tenga como resultado una concentración del fármaco que, combinada con el otro componente, sea capaz de corregir el funcionamiento de las vías implicadas en la EA.

Cuando es posible administrar los ingredientes activos de la combinación en forme del químico puro, es preferible presentarlos como una composición farmacéutica, también denominada en este contexto formulación farmacéutica. Las posibles composiciones incluyen las adecuadas para administración oral, rectal, tópica (incluidas transdérmica, bucal y sublingual) o parenteral (incluidas subcutánea, intramuscular, intravenosa e intradérmica).

Más habitualmente, estas formulaciones farmacéuticas se prescriben al paciente en "paquetes para el paciente" que contienen una serie de unidades de dosificación u otros medios para administración de dosis unitarias medidas para usar durante un período de tratamiento distinto en un envase único, normalmente un envase blíster. Los paquetes para el paciente tienen una ventaja sobre las prescripciones tradicionales, en las que un farmacéutico divide un suministro para un paciente de un producto farmacéutico de un suministro global, en que el paciente siempre tiene acceso a la ficha técnica contenida en el paquete para el paciente, que normalmente no está disponible en las prescripciones tradicionales. Se ha demostrado que la inclusión de una ficha técnica mejora el cumplimiento del paciente con las instrucciones del médico. Por tanto, la invención además incluye una formulación farmacéutica, como se ha descrito antes en la presente memoria, en combinación con material de acondicionamiento adecuado para dichas formulaciones. En dicho envase para paciente, el uso destinado de una formulación para el tratamiento de combinación se puede deducir mediante instrucciones, instalaciones, condiciones, adaptaciones y/u otros medios auxiliares usando la formulación más adecuada para el tratamiento. Dichas medidas convierten un envase para paciente en específicamente adecuado para, y adaptado para, usar para el tratamiento con la combinación de la presente invención.

El fármaco puede estar contenido en cualquier cantidad adecuada y cualquier sustancia transportadora adecuada y puede estar presente en una cantidad de 1-99 % en peso del peso total de la composición. La composición puede proporcionarse en una forma de dosificación que sea adecuada para la vía de administración oral, parenteral (p. ej., intravenosa, intramuscular), rectal, cutánea, nasal, vaginal, inhalado, cutánea (parche) y ocular. Por tanto, la composición puede estar en forma de, por ejemplo comprimidos, cápsulas, pildoras, polvos, granulados, suspensiones, emulsiones, soluciones, geles, incluidos hidrogeles, pastas, ungüentos, cremas, yesos, vendajes, dispositivos de liberación osmótica, supositorios, enemas, inyectables, implantes, aerosoles o aerosoles.

Las composiciones farmacéuticas pueden formularse de acuerdo con la práctica farmacéutica convencional (véase, p. ej., Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.), ed. A. R. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000 y Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. 1. Swarbrick y J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York).

Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden formularse para liberar el fármaco activo sustancialmente inmediatamente tras la administración o en cualquier momento o periodo de tiempo predeterminado tras la administración.

Las formulaciones de liberación controlada incluyen (i) formulaciones que crean una concentración sustancialmente constante del fármaco dentro del cuerpo durante un periodo de tiempo extendido; (ii) formulaciones que después de un periodo de demora predeterminado crean una concentración sustancialmente constante del fármaco dentro del cuerpo durante un periodo de tiempo extendido; (iii) formulaciones que sostienen la acción del fármaco durante un periodo de tiempo predeterminado manteniendo un nivel de fármaco eficaz relativamente constante en el cuerpo, con minimización concomitante de efectos secundarios indeseables asociados con fluctuaciones a nivel plasmático de la sustancia farmacológica activa; (iv) formulaciones que localizan la acción del fármaco mediante, p. ej., colocación espacial de una composición de liberación controlada adyacente a o en el tejido u órgano enfermo; y (v) formulaciones dirigidas a la acción del fármaco mediante el uso de vehículos o derivados químicos para liberar el fármaco en un tipo de célula diana concreto.

Especialmente se prefiere la administración de fármacos en forma de una formulación de liberación controlada en los casos en los que el fármaco, bien solo o en combinación, tiene (i) un estrecho índice terapéutico (Es decir, la diferencia entre la concentración en plasma que da lugar a efectos secundarios dañinos o reacciones tóxicas y la concentración en plasma que producir un efecto terapéutico es pequeña; en general, el índice terapéutico, IT, se define como la proporción entre la mediana de la dosis letal (DL50) y la mediana de la dosis efectiva (DE50)); (II) un margen de absorción estrecho en el tracto gastrointestinal; o (iii) una semivida biológica muy corta de modo que durante un día se requiere dosificación frecuente con el fin de mantener el nivel plasmático en un nivel terapéutico.

Se puede ejercer una serie de estrategias con el fin de obtener liberación controlada en la que la velocidad de liberación supera a la velocidad del metabolismo del fármaco en cuestión. La liberación controlada se puede obtener mediante la selección adecuada de varios parámetros e ingredientes de formulación, incluidas, por ejemplo, varios tipos de composiciones y revestimientos de liberación controlada. Por tanto, el fármaco se formula con excipientes adecuados en una composición farmacéutica que, tras la administración, libera el fármaco de forma controlada (composiciones en comprimido o cápsula de una o múltiples unidades, soluciones de aceite, suspensiones, emulsiones, microcápsulas, microesferas, nanopartículas, parches y liposomas).

Formas de dosificación sólida para uso oral Las formulaciones para uso oral incluyen comprimidos que contienen el(los) ingrediente(s) activo(s) en una mezcla con excipientes no tóxicos farmacéuticamente aceptables. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes o cargas inertes (p. ej., sacarosa, celulosa microcristalina, almidones, incluidos almidón de patata, carbonato cálcico, cloruro sódico, fosfato cálcico, sulfato cálcico o fosfato sódico); agentes de granulación y disgregantes (p. ej., derivados de celulosa, incluidas celulosa microcristalina, almidones, incluidos almidón de patata, croscarmelosa sódica, alginatos o ácido algínico); agentes aglutinantes (p. ej., goma arábiga, ácido algínico, alginato sódico, gelatina, almidón, almidón pregelatinizado, celulosa microcristalina, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, Hidroxipropilmetilcelulosa, etilcelulosa, polivinilpirrolidona o polietilenglicol; y agentes lubricantes, deslizantes y antiadhesivos (p. ej., ácido esteárico, sílices o talco). Otros excipientes farmacéuticamente aceptables pueden ser colorantes, agentes aromatizantes, plastificantes, humectantes, agentes tampón y similares.

Los comprimidos pueden estar sin recubrir o pueden recubrirse mediante técnicas conocidas, opcionalmente para retrasar la disgregación y absorción en el tracto gastrointestinal y, de este modo, proporcionar una acción sostenida durante un periodo de tiempo largo. El revestimiento puede adaptarse para liberar la sustancia farmacológica activa en un patrón predeterminado (p. ej., para conseguir una formulación de liberación controlada) o pueden adaptarse para no liberar la sustancia farmacológica activa hasta después de haber pasado el estómago (revestimiento entérico). El revestimiento puede ser un revestimiento de azúcar, un revestimiento pelicular (p. ej., basado en hidroxipropilmetilcelulosa, metilcelulosa, metilhidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, carboximetilcelulosa, copolímeros de acrilato, polietilenglicoles y/o polivinilpirrolidona) o un revestimiento entérico (p. ej., basado én copolímero de ácido metacrílico, acetato ftalato de celulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulosa, acetato ftalato de polivinilo, goma shellac y/o etilcelulosa). Se puede emplear un material de retraso de tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

Las composiciones sólidas pueden incluir un revestimiento adaptado para proteger la composición de cambios químicos indeseados (p. ej., degradación química antes de la liberación de la sustancia farmacológica activa). El revestimiento puede aplicarse sobre la forma de dosificación sólida de un modo similar al descrito en Encyclopedia of Pharmaceutical Technology.

Varios fármacos se pueden mezclar en el comprimido o se pueden dividir. Por ejemplo, el primer fármaco está contenido en el interior del comprimido y el segundo fármaco está fuera, de modo que una porción sustancial del segundo fármaco se libera antes de la liberación del primer fármaco.

Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar en forma de comprimidos masticables o en forma de cápsulas de gelatina dura, en los que el ingrediente activo está mezclado con un diluyente sólido Inerte (p. ej., almidón de maíz, celulosa microcristalina, carbonato cálcico, fosfato cálcico o caolín) o como cápsulas de gelatina blanda, en las que el ingrediente activo está mezclado con agua o con un medio oleoso, por ejemplo parafina líquida o aceite de oliva. Los polvos y granulados se pueden preparar usando los ingredientes mencionados en lo que antes en comprimidos y cápsulas de un modo convencional.

Se pueden construir composiciones de liberación controlada para uso oral para, por ejemplo, liberar el fármaco activo mediante el control de la disolución y/o la difusión de la sustancia farmacológica.

La disolución o difusión de liberación controlada se puede conseguir mediante el revestimiento adecuado de una formulación en comprimido, cápsula, pastilla o granulado de fármacos o mediante la incorporación del fármaco en una matriz adecuada. Un revestimiento de liberación controlada puede incluir una o más de las sustancias de revestimiento mencionadas en lo que antecede y/o, por ejemplo, goma shellac, cera de abeja, cera de glucosa, cera de ricino, cera carnauba, alcohol estearílico, monoestearato de glicerilo, diesterato de glicerilo, palmitoestearato de glicerol, etilcelulosa, resinas acrílicas, ácido dl-poliláctico, acetato butirato de celulosa, cloruro de polivinilo, acetato de polivinilo, pirrolidona de vinilo, polietileno, polimetacrilato, metilmetacrilato, 2-hidroximetacrilato, hidrogeles de metacrilato, 1 ,3-butilenglicol, metacrilato de etilenglicol y/o polietilenglicoles. En una formulación de matriz de liberación controlada, el material de la matriz también puede incluir, por ejemplo, metilcelulosa hidratada, cera de carnauba y alcohol estearílico, carbopol 934, silicona, triestearato de glicerilo, acrilato de metilo-metacrilato de metilo, cloruro de polivinilo, polietileno y/o fluorocarbono hidrogenado.

Una composición de liberación controlada que contiene uno o más de los fármacos de las combinaciones reivindicadas también puede estar en forma de un comprimido o cápsula flotante (es decir, un comprimido o cápsula que, tras la administración oral, flota encima del contenido gástrico durante un periodo de tiempo determinado). Una composición de comprimido flotante del(los) fármaco(s) se pueden preparar mediante granulación de una mezcla del(los) fármaco(s) con excipientes y 20-75 % p/p de hidrocoloides, tales como hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa o hidroxipropilmetilcelulosa. A continuación, los granulos obtenidos se pueden comprimir para formas comprimidos. Tras el contacto con el jugo gástrico, el comprimido forma una barrera en gel impermeable al agua alrededor de su superficie. Esta barrera en gel toma parte en el mantenimiento de una densidad inferior a uno, de modo que se permite que el comprimido permanezca flotando en el jugo gástrico.

Líquidos para administración oral Polvos, polvos dispersables o gránulos adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua son formas de dosificación conveniente para administración oral. La formulación en forma de suspensión proporciona el ingrediente activo en una mezcla con un agente de dispersión o humectación, agente de suspensión y uno o más conservantes. Agentes se suspensión adecuados son, por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, alginato sódico y similares.

Composiciones parenterales La composición farmacéutica también se puede administrar por vía parenteral mediante inyección, infusión o implantación (intravenosa, intramuscular, subcutánea o similar) en formas de dosificación, formulaciones o mediante dispositivos de liberación adecuados o implantes que contienen vehículos y adyuvantes no tóxicos farmacéuticamente aceptables. La formulación y preparación de dichas composiciones son bien conocidas para los expertos en la técnica de la formulación farmacéutica.

Las composiciones para uso parenteral se pueden proporcionar en formas de dosificación unitaria (p. ej., en ampollas de una única dosis) o en viales que contienen varias dosis y en los que se puede añadir un conservante adecuado (véase más adelante). La composición puede estar en forma de una solución, una suspensión, una emulsión, un dispositivo de infusión o un dispositivo de liberación para implantar, o se puede presentar en forma de un polvo seco para reconstituir con agua u otro vehículo adecuado antes de usar. Aparte del(los) ingrediente(s) activo(s), la composición puede incluir vehículos y/o excipientes adecuados parenteralmente aceptables. El(los) fármaco(s) activo(s) se pueden incorporar en microesferas, microcápsulas, nanopartículas, liposomas o similares para liberación controlada. La composición puede incluir agentes de suspensión, solubilización, estabilización, de ajuste de pH y/o agentes de dispersión.

Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden estar en forma adecuada para inyección estéril. Para preparar dicha composición, el(los) fármaco(s) activo(s) adecuado(s) se disuelven o suspenden en un vehículo líquido parenteralmente aceptable. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear están agua, agua ajustada hasta un pH adecuado mediante la adición de una cantidad adecuada de ácido clorhídrico, hidróxido sódico o un tampón adecuado, 1-3-butanodiol, solución de Ringer y solución de cloruro sódico isotónico. La formulación acuosa puede también contener uno o más conservantes (p. ej., p-hidroxibenzoato de metilo, etilo o n-propilo). En los casos en los que uno de los fármacos es poco o ligeramente soluble en agua se puede añadir una disolución de potenciación o un agente solubilizante, o el disolvente puede incluir 10-60 % p/p de propilenglicol o similares.

Las composiciones parenterales de liberación controlada pueden estar en forma de suspensiones acuosas, microesferas, microcápsulas, microesferas magnéticas, soluciones oleosas, suspensiones oleosas o emulsiones. Como alternativa, el(los) fármaco(s) activo(s) pueden incorporarse en vehículos biocompatibles, liposomas, nanopartículas, implantes o dispositivos de infusión. Materiales para usar en la preparación de microesferas y/o microcápsulas son, por ejemplo, polímeros biodegradables/bioerosionables tales como poligalactina, poli(c¡anoacr¡lato de isobutilo), poli(2-h¡droxietil-L-glutamina). Vehículos biocompatibles que se pueden usar al formular una formulación parenteral de liberación controlada son hidratos de carbono (p. ej., dextranos), proteínas (p. ej., albúmina), lipoproteínas o anticuerpos. Materiales para usar en implantes pueden ser no biodegradables (p. ej., polidimetilsiloxano) o biodegradables (p. ej., poli(caprolactona), poli(ácido glicólico) o poli(ortoésteres)).

Composiciones rectales Para aplicación rectal, formas de dosificación adecuadas para una composición incluyen supositorios (de tipo emulsión o suspensión) y cápsulas de gelatina rectal (soluciones o suspensiones). En una formulación de supositorio típica, el(los) fármaco(s) activo(s) se combinan con una base de supositorio adecuada farmacéuticamente aceptable, tal como manteca de cacao, ácidos grasos esterificados, gelatina glicerinada y varias bases hidrosolubles o dispersables como polietilenglicoles. Se pueden incorporar varios aditivos, potenciadores o tensioactivos.

Composiciones percutáneas y tópicas Las composiciones farmacéuticas pueden también administrarse tópicamente sobre la piel para absorción percutánea en formas de dosificación o formulaciones que contienen vehículos y excipientes farmacéuticos convencionalmente no tóxicos, incluidas microesferas y liposomas. Las formulaciones incluyen cremas, ungüentos; lociones, linimentos, geles, hidrogeles, soluciones, suspensiones, barras, aerosoles, pastas, yesos y otros tipos de sistemas de liberación transdérmica del fármaco. Los vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables puede incluir agentes emulsionantes, antioxidantes, agentes tampón, conservantes, humectantes, potenciadores de la penetración, agentes quelantes, agentes formadores de gel, bases de ungüento, perfumes y agentes protectores de piel.

Los agentes emulsionantes pueden ser gomas naturales (p. ei., goma arábiga o goma de tragacanto) Los conservantes, humectantes, potenciadores de la penetración pueden ser parabenes, tales como p-hidroxibenzoato de metilo o propilo, y cloruro de benzalconio, glicerina, propilenglicol, urea etc.

Las composiciones farmacéuticas descritas en párrafos anteriores para administración tópica sobre la piel pueden también usarse en relación con la administración tópica o cerca de la parte del cuerpo gue se va a tratar. Las composiciones se pueden adaptar para aplicación directa o para aplicación por medio de dispositivos de liberación de fármaco especiales, tales como vendajes o, como alternativa, yesos, compresas, esponjas, tiras u otras formas de material flexible adecuado.

Dosificaciones y duración del tratamiento Debe entenderse que los fármacos de la combinación se pueden administrar de forma concomitante, bien en la misma o en diferente formulación farmacéutica, o secuencialmente. Si hay administración secuencial, el retraso en la administración del segundo (o adicional) ingrediente activo no debe ser tal que se pierdan los beneficios del efecto eficaz de la combinación de los ingredientes activos. Un requisito mínimo para una combinación de acuerdo con esta descripción es que la combinación debe estar destinada al uso combinado con el beneficio del efecto eficaz de la combinación de los ingredientes activos. El uso pretendido de una combinación se puede deducir mediante instalaciones, condiciones, adaptaciones y/u otros medios auxiliares usando la combinación de acuerdo con la invención.

Aunque los fármacos activos de la presente invención se pueden administrar en dosis divididas, por ejemplo dos o tres veces al día, se prefiere una única dosis diaria de cada fármaco en la combinación, siendo más preferida una única dosis diaria de todos los fármacos en una única composición farmacéutica (forma de dosificación unitaria).

La expresión "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente pequeñas (tales como cápsulas, comprimidos o cilindros de jeringuilla cargados) adecuados como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, de modo que cada unidad contiene una cantidad predeterminada de material o materiales activos calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con un vehículo farmacéutico requerido.

La administración puede ser de una a varias veces al día durante varios días a varios años e, incluso, puede ser durante toda la vida del paciente. En la mayoría de los casos estará indicada la administración crónica, o al menos repetida periódicamente a largo plazo.

Adicionalmente, la información farmacogenómica (el efecto del genotipo sobre el perfil farmacocinético, farmacodinámico o de eficacia de una sustancia terapéutica) sobre un paciente concreto puede afectar a la dosificación usada.

Excepto cuando se responde a casos de enfermedad de EA especialmente deteriorantes, en donde se pueden requerir dosificaciones más altas, la dosificación referida de cada fármaco en la combinación normalmente residirá dentro del intervalo de dosis no superiores a la prescrita normalmente para el tratamiento de mantenimiento a largo plazo o cuando se ha demostrado que son seguras en estudios clínicos de tamaño grande de fase 3.

La dosificación más preferida corresponderá a cantidades del 1 % hasta el 10 % de las normalmente prescritas para el tratamiento de mantenimiento a largo plazo. Por ejemplo, las posibles dosificaciones para las terapias de combinación particularmente preferidas de la presente invención pueden ser: epierenona por vía oral de aproximadamente 0,25 a 5 mg una o dos veces al día y marimastat oral de aproximadamente 0,1 a 1 mg al día, gemfibrozilo por vía oral de aproximadamente 12 a 120 mg administrados en dos dosis divididas 30 minutos antes de la comida por la mañana y por la noche y marimastat por vía oral de aproximadamente 0,1 a 1 mg al día. marimastat por vía oral de aproximadamente 0,1 a 1 mg al día y terbinafina por vía oral de aproximadamente 2,5 a 25 mg una o dos veces al día topotecán por vía oral de aproximadamente 0,025 a 0,25 mg al día y metazolamida por vía oral de aproximadamente 1 a 10 mg 2-3 veces al día epierenona por vía oral de aproximadamente 0,25 a 5 mg una o dos veces al día y tadalafilo oral de aproximadamente 0,05 a 0,5 mg al día epierenona por vía oral de aproximadamente 0,25 a 5 mg una o dos veces al día y cilostazol oral de aproximadamente 1 a 10 mg al día, sunitinib por vía oral de aproximadamente 0,5 a 5 mg al día y terbinafina por vía oral de aproximadamente 2,5 a 25 mg una o dos veces al día fenformina por vía oral de aproximadamente 0,5 a 5 mg al día y baclofeno oral de aproximadamente 0,4 a 8 mg al día, administrados en dos o tres dosis divididas, fenformina por vía oral de aproximadamente 0,5 a 5 mg al día y terbinafina por vía oral de aproximadamente 2,5 a 25 mg una o dos veces al día tadalafilo por vía oral de aproximadamente 0,05 a 0,5 mg al día y alendronato oral de aproximadamente 0,7 a 7 mg una vez a la semana o de 0,7 a 7 mg una vez al día cilostazol por vía oral de aproximadamente 1 a 10 mg al día y alendronato oral de aproximadamente 0,7 a 7 mg una vez a la semana o de 0,7 a 7 mg una vez al día mepacrina por vía oral de aproximadamente 3 a 30 mg al día y terbinafina por vía oral de aproximadamente 2,5 a 25 mg una o dos veces al día mepacrina por vía oral de aproximadamente 3 a 30 mg al día y balsalazida oral de aproximadamente 7 a 75 mg que se han de tomar 3 veces al día - terbinafina por vía oral de aproximadamente 2,5 a 25 mg una o dos veces al día e imanitib por vía oral de aproximadamente 4 a 60 mg al día Debe entenderse que la cantidad del fármaco administrado en realidad deberá determinarla un médico a la luz de circunstancias relevantes, incluida la afección o afecciones a tratar, la composición exacta que se va a administrar, la edad, el peso y la respuesta de cada paciente individual y la gravedad de los síntomas del paciente y la vía de administración elegida. Por tanto, con los intervalos de dosificación anteriores se pretende dar unas directrices generales y un soporte para las enseñanzas de la presente memoria, pero no están destinados a limitar el alcance de la invención.

Los ejemplos siguientes se ofrecen a modo de ilustración y no como limitación.

Ejemplos Validación del fármaco usando ensayos in vitro Los ensayos in vitro son una potente herramienta para mejorar los fármacos y sus combinaciones que actúan sobre las vías implicadas en la EA. Los fármacos de la presente invención, y sus combinaciones, se optimizan mediante la acción en ensayos in vitro específicos adaptados de acuerdo con la red de EA identificada en la presente invención. Posteriormente, estas moléculas o sus combinaciones podrían analizarse en un modelo in vivo de EA.

Estas pruebas in vitro comienza con el estudio del potencial protector de los fármacos sobre las células endoteliales expuestas al efecto tóxico de la proteína Abeta. Los fármacos en la vía implicada podrían analizarse individualmente, seguido por ensayos de su acción en combinación. En la etapa posterior, las combinaciones más eficientes que actúan sobre las dianas en vías individuales se combinan y se analizan de nuevo en ensayos de estrés celular, sobrecrecimiento del axón y toxicidad vascular.

Cultivo celular: El cultivo principal de células cerebrales endoteliales de rata (Vect-Horus SAS, Marseille) se cultiva en el pase 0. En la confluencia, las células endoteliales se disocian con tripsina EDTA (Pan Biotech Ref: Pl 0-0231 00). Las células se siembran a una densidad de 25.000 células/pocilio en placas de 96 pocilios (los pocilios se revisten con 30 µ? de colágeno de rata de tipo I a 1 ,5 mg/ml, Vect-Horus SAS, Marseille) y se cultivan en medio MCBD 131 (M-131 -500, Invitrogen) suplementado con 1 % de suplemento de crecimiento microvascular (MVGS, S-005-25, Invitrogen). Las células se cultivan a 37 °C en atmósfera de aire humidificado (95 %)/C02 (5 %). La mitad del medio se cambia en días alternos por medio fresco.

Después de 4 días se añaden fármacos al medio de cultivo celular a diferentes concentraciones, disueltos en DIVISO 0,1 % o agua. Se realiza una preincubación de 1 hora, en un medio de cultivo que contiene medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM, Pan Biotech Ref: P04-03600), suplementado con un 2 % de suero bovino fetal (FBS; Invitrogen ref : 16000-036), un 1 % de L-glutamina (Pan Biotech ref: P04-80 100), un 1 % de penicilina, estreptomicina (PS; Pan Biotech ref: P06-07100), 0,1 mg/ml de heparina (Sigma), 10 ng/ml de factor de crecimiento epidérmico (EGF, Invitrogen) y 10 ng/ml de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF, PHG0146, Invitrogen).

Después, las células se Intoxican con 30 µ? de ß-amiloide (25-35; Sigma) junto con fármacos en el mismo medio de cultivo. Después, las células se intoxican durante 3 días.

Ensayo de actividad de la lactato deshidrogenasa (LDH) Para cada cultivo, tras 3 días de intoxicación, se recoge el sobrenadante y se analiza con el kit de detección de citotoxicidad (LDH, Roche Applied Sciences). Este ensayo colorimétrico para la cuantificación de la muerte celular se basa en la medición de la actividad de la lactato deshidrogenasa (LDH) liberada del citosol de células dañadas al sobrenadante. La densidad óptica (DO) se evalúa mediante espectrofotometría a 492 nm de longitud d onda mediante un aparato multiscan (Thermo, Ref Ascent).

Resultados Los resultados presentados en la Figura 1 se extraen de dos cultivos independientes, 6 pocilios por afección. Todos los valores se expresan en forma de la media + e.e.m.. Con los datos brutos se realiza un análisis con la prueba bilateral t de Student. Los resultados se expresan en porcentaje de viabilidad celular en comparación con el control (vehículo).

Los fármacos se incuban con células endoteliales cerebrales primarias de rata una hora antes de intoxicar con ?ß25-35 30µ? de 3 días de duración.

Tres días después de esta incubación se cuantifica la liberación de LDH en el medio de cultivo, lo que refleja el nivel de muerte celular. Los inventores han observado que 4 fármacos ejercen claramente un efecto protector contra esta intoxicación por A ß25-35 (Fig. 1 ).

Ensayos in vivo Los compuestos y sus combinaciones activas en los ensayos in vitro se han analizado en un modelo ¡n vivo de enfermedad de Alzheimer. La sobreexpresión de los transgenes de la proteína precursora de beta amiloide (APP) humana mutante ligada con la enfermedad de Alzheimer ha sido el medio más fiable de estimular el depósito de Abeta en los cerebros de ratones transgénicos que sirvieron como modelos de enfermedad EA en numerosos estudios. A medida que envejecen, estos ratones con APP mutante desarrollan una patología amiloide sólida y otras características similares a la EA, incluidos disminución de la densidad sináptica, glíosis reactiva y algunos déficit cognitivos. Muchos modelos de ratones con APP mutante muestran pocas pruebas de pérdida neuronal franca y patología de ovillos neurofibrilares (ONF). Los ratones hemicigotos para este transgen BRI-Abeta42 son viables y fértiles con un ciclo de vida normal. El ARNm de BRI-Abeta42 transgénico se expresa en un patrón característico de, promotor de la proteína prión de ratón; mayores niveles de expresión del transgen se detectan el las células del granulo cerebelar y el hipocampo, seguidos por la corteza, el puente troncocenfálico, el tálamo y el mesencéfalo. En la proteína de fusión transgénica, Abeta 1-42 se condensa con el extremo C de a proteína BRI en el sitio de escisión de tipo furina, de modo que la escisión tiene como resultado una eficiente secreción de Abetal -42 en la luz del espacio extracelular. Por tanto, estos ratones expresan de forma específica la isoforma de Abetal -42. Los ratones BRI-Abeta42 hemocigóticos acumulan beta amiloide insoluble en detergente con la edad y desarrollan placas nucleadas en el cerebelo ya a los 3 meses de edad. El desarrollo de patología del prosencéfalo se produce más tarde, las placas Abeta extracelulares no están presentes de forma consistente en el hipocampo y las cortezas entorina/piriforme hasta los 12 meses de edad Los depósitos de beta amiloide (placas nucleadas) se pueden observar ya a los 3 meses en la capa molecular del cerebelo de ratones transgénicos y se convierte en más pronunciado con la edad; se observan placas extracelulares ocasionales en las cortezas entorina/piriforme y el hipocampo a los 6 meses de edad, pero no se encuentran de forma consistente hasta > 12 meses de edad. Los ratones más viejos muestran una patología más extendida con placas nucleadas y difusas en el cerebelo, la corteza, el hipocampo y el bulbo olfatorio. Las placas amiloides extracelulares muestran densos núcleos amiloides con fibrillas irradiantes; muchos haces de neuronas distróficas se observan en la periferia de estas placas. La gliosis reactiva se asocia con las placas.

Tratamientos farmacológicos Los ratones Tg (Pmp-ITM2B /APP695 2) AI2E me transgénicos (57) se han obtenido en Jackson Laboratory (http://jaxmice.jax.org/strain/007002.html). Los ratones con los niveles en plasma más elevados de Abeta42, línea BRI-Abeta42A (12e), se han mantenido en un fondo mixto con B6C3. Los ratones transgénicos machos adultos tienen acceso libre a alimento y agua. De acuerdo con un protocolo aprobado por el Institutional Animal Care and Use Committee, se han pesado a los ratones y se inyectó i.p. o alimentaron a la fuerza una vez al día durante de 10 a 20 semanas consecutivas con una solución control (placebo) o fármacos PXT, preparados a dosis diferentes.

Análisis de la supervivencia Las tasas de supervivencia se han analizado usando procedimientos de Kaplan-Meier. Se han usado procedimientos de Holm-Sidak (post hoc) para todos los ensayos pareados de comparación múltiple. Las muertes extrañas se censuran. Todas las comparaciones se han realizado entre carnadas para limitar cualquier efecto potencialmente confuso a partir de diferencias básicas en las cepas.

Ensayos conductuales Los ensayos conductuales se diseñaron y realizaron de acuerdo con los procedimientos publicados por varios autores (58-61 ).

Aprendizaje y memoria espacial en el laberinto de Morris Water (MWM) Este experimento se realiza en una piscina circular, de 90 cm de diámetro, hecha de plástico blanco y llena con agua de color lechoso. Una plataforma de escape de 8 cm de diámetro, hecha de plástico transparente, se sumergió 0,5 cm debajo del nivel de agua. Se proporcionan pistas visuales mediante diferentes formas geométricas impresas en letras de tamaño A4 y se colocan en las 4 paredes adyacentes (la distancia desde la piscina era de 50 a 70 cm). En cada ratón se realizaron cuatro ensayos diariamente (intervalo de 5 a 7 minutos entre ensayos, un total de 16 ensayos) durante 4 días. Cada ensayo se realizó desde uno de cuatro puntos de partida diferentes. El movimiento de los ratones se monitoriza usando Videotrack Software (View Point). Se ha determinado el tiempo necesario para colocar la plataforma de escape (latencia de escape; hasta 60 segundos). Después de colocar la plataforma, se permitió al ratón sentarse en ella durante 15 segundos. Los ratones que no encontraron la plataforma en 60 segundos fueron guiados a ella y se les dejó estar en ella durante 15 segundos. En el registro se introdujo una latencia de 60 segundos para este caso. Se realizó la media de los cuatro ensayos al día para el análisis estadístico, excepto por el primer ensayo el día 1. El día 9 (5 días después del último entrenamiento), los ratones se han sometido a un ensayo sonda de 60 segundos en el que se retira la plataforma y se deja que los ratones la busquen. El tiempo que cada animal tarda en cada cuadrante se registra (tiempo de búsqueda por cuadrante). Se han usado varios grupos de ratones macho a 3, 7, 10 y 12 meses.

Unos pocos ratones han mostrado un comportamiento de inmovilidad (p. ej., se quedan inmóviles en el agua y rechazan nadar) que interfirió considerablemente en el ensayo; se excluyó a estos animales del análisis de datos.

Todos los ensayos conductuales se realizan en un ambiente tranquillo y con reducción de luz.

Ensayo de la memoria de trabajo en el laberinto con agua de brazos radiales Esta medida sensible basada en la cognición de la memoria de trabajo se ha obtenido con ayuda del aparato constituido por una piscina llena de agua de 100 cm de diámetro (también usada para el laberinto de agua de Morris y las tareas de reconocimiento de plataforma) equipada con un inserto de aluminio para crear seis brazos de nado distribuidos radialmente. Los ensayos constan de cinco ensayos de 1 minuto por sesión diaria, durante 9-12 días consecutivos. Al principio de cada sesión, se coloca una plataforma transparente sumergida en el extremo de uno de los seis brazos (seleccionado al azar, cambiado a diario). Para cada uno de los primeros cuatro ensayos de adquisición, se introduce al animal en uno de los brazos que no contienen la plataforma (secuencia aleatorizada) y se les deja buscar la plataforma. Durante el ensayo de 60 s, cada vez que el animal entra en otro brazo que no contiene la plataforma, se le devuelve suavemente a su lugar de partida y se registra un error. Después del cuarto ensayo, se deja descansar al animal durante 30 minutos, seguido por un quinto ensayo (retención), que se inicia en el último brazo de nado que contiene la plataforma. El número de errores (elecciones incorrectas del brazo) y la latencia de escape (tiempo para llegar hasta la plataforma, máximo 60 s) se registran para cada ensayo.

Aprendizaje y memoria de referencia espacial en el ensayo de la plataforma circular Este ensayo de tareas basado en la cognición se realiza con la ayuda del aparato constituido por una plataforma circular de 69 cm que tiene 16 orificios de "escape" espaciados de forma equidistante alrededor de la circunferencia. Se instala un refugio de escape debajo de uno de los agujeros y rodeando a la plataforma una cortina negra, sobre la cual se colocan varias pistas visuales. El animal se coloca en el centro de la plataforma al principio de un único ensayo de 5 minutos y se presentan estímulos de aversión (luces brillantes, aire con ventilador). Se registra el número total de errores (husmeos en los agujeros sin escape) y la latencia del escape (tiempo hasta alcanzar el agujero de escape).

Capacidad de reconocimiento en el ensayo de reconocimiento de la plataforma Esta tarea de búsqueda basada en la cognición evalúa la capacidad de reconocimiento y de identificación de objetos. El objeto diana consiste en una plataforma circular de 9 cm de diámetro equipada con una enseña negra de 10 cm x 40 cm, que se coloca a 0,8 cm por encima de la superficie del agua en una piscina circular de 100 cm de diámetro. El ensayo consta de cuatro ensayos de 60 s al día en cada uno de cuatro días consecutivos. Cada día, el objeto diana se coloca en un cuadrante diferente de la piscina para cada ensayo y el animal se libera en el mismo lugar a lo largo de la circunferencia de la piscina para los cuatro ensayos. La latencia total (máximo 60 s) se registra para cada ensayo.

Examen de Irwin modificado Se usa un filtro exhaustivo, modificado de Irwin, para determinar si alguno de los ratones exhibía deteriores fisiológicos, conductuales o sensori motores relacionado con su genotipo. Para explorar las capacidades motoras, la coordinación y la fuerza muscular, los ratones se colocan en un alambre tensado entre dos columnas de 30 cm de altura y se evalúa su capacidad para mantener el equilibrio sobre el alambre. Además, se determina su capacidad para agarrarse y colgarse del alambre con las cuatro patas durante al menos 5 segundos y de volver a escalar al alambre.

Cuantificación del depósito amiloide vascular Para cuantificar la angiopatía amiloide cerebral (AAC), secciones de 5 µ?? incluidas en parafina a intervalos de 30 µ?t? a través de las leptomeninges de la corteza cerebelar o parietal se someten a inmunotinción con anticuerpo Ab9 biotinilado (anti-Ap1-16, 1 :500) durante la noche a 4 °C (n= 5-7 ratones por genotipo en cada grupo de edad, n= 6 secciones por ratón). Los vasos sanguíneos cargados positivamente se evalúan visualmente usando el sistema de puntuación modificada de Vonsattel (62). La puntuación de la gravedad de AAC se calcula multiplicando el número de vasos AAC con el grado de gravedad de la AAC.

Histología: Inmunohistoquímica e Inmunofluorescencia Ratones Tg y WT de 3 a 12 meses de vida se anestesian y perfunden transcardialmente de modo secuencial con un 0,9 % de NaCI y un 4 % de paraformaldehído en 0,1 mol/l de solución salina tamponada con fosfato (PBS) (pH 7,4) o un 10 % de formalina y un 4 % de paraformaldehído en 0,1 mol/l de PBS (pH 7,4). Se extraen los cerebros y las médulas espinales y se almacenan en paraformaldehído al 4 %. Algunas muestras se incluyen en parafina y se cortan en un microtomo de deslizamiento a un espesor de 10 µ??. Se cortan criosecciones (14 µ??) en un crioestat y se montan en portas recubiertos con aluminio— cromo. La peroxidasa endógena se inactiva tratando la sección con metanol que contiene un 0,3 % de H202 durante 30 minutos. Las secciones se bloquean en un 10 % de suero de caballo. Se usan anticuerpos primarios y se incuban durante la noche a 4 °C en presencia de un 1 % de suero de caballo. Todos los anticuerpos biotinilados o acoplados a fluoresceína, rojo Texas y AMCA, fluorocromos, kit ABC y 3.3'-diaminobencidina como cromógeno para la actividad peroxidasa proceden de Vector Laboratories La incubación con el anticuerpo secundario se realiza a temperatura ambiente durante 1 hora. Todas las etapas de lavado (3-10 minutos) y la dilución del anticuerpo se realizan usando solución salina tamponadas con fosfato (0,1 ml/l de PBS, Ph 7,4) o solución salina tamponada con Tris (0,01 mol/l de Tris, 0,15 mol/l de NaCI, pH 7,4). La incubación con el complejo ABC y la detección con 3,3'-diaminobencidina se llevan a cabo de acuerdo con el manual del fabricante. Se realiza contratinción con hematoxilina de acuerdo con procedimientos convencionales. Para cada determinación se usa un mínimo de tres ratones por genotipo, edad y sexo (63).

Análisis estadístico de los datos in vivo.

Los resultados de todos los experimentos se analizan con STATISTICA 8.0 (Statsoft). La gravedad de AAC se analizó usando un ANOVA con el ensayo post hoc de comparación múltiple de Holm-Sidak o dos pruebas t de Student. Si el conjunto de datos no cumple las suposiciones del ensayo parámetrico, se realiza bien el ensayo de Kruskal-Wallis, seguido por la comparación múltiple post hoc de Duna o la prueba de suma de rangos de Mann-Whitney. Todas las comparaciones se realizan entre hermanos de carnada.

La modelización de la respuesta al fármaco se realiza excluyendo las muestras control (0 mg/kg). La DE50 corresponde a la dosis requerida (mg/kg) para inducir un 50 % de la respuesta máxima inducida por fármaco en los experimentos. Se calcula usando el modelo de ecuación de Hill para el log de la DE50.

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Claims (20)

REIVINDICACIONES

1. Una composición caracterizada porque comprende una combinación de al menos dos compuestos escogidos del grupo constituido por leflunomida, sulfisoxazol, terbinafina, baclofeno, clopidogrel, fenoldopam, mepacrina y fenformina, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para administración simultánea, por separado o secuencial.

2. Una composición caracterizada porque comprende una combinación de al menos dos compuestos escogidos del grupo constituido por leflunomida, sulfisoxazol, terbinafina, baclofeno, clopidogrel, fenoldopam, mepacrina y fenformina, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, en donde dicha composición incrementa la angiogénesis alterada en trastornos neurodegenerativos seleccionados del grupo constituido por la enfermedad de Alzheimer (EA), la enfermedad de Parkinson (EP), la esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y la esclerosis múltiple (EM).

3. La composición de la reivindicación 1 , caracterizada porque comprende una combinación de al menos dos compuestos escogidos del grupo constituido por leflunomida, sulfisoxazol, terbinafina, baclofeno, clopidogrel, fenoldopam, mepacrina y fenformina, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para tratar la enfermedad de Alzheimer (EA).

4. Una composición caracterizada porque comprende al menos una de las siguientes combinaciones de fármacos, para administración combinada, por separado o secuencial. - un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina), - un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un antagonista del receptor de endotelina EDNRA (preferentemente, sulfisoxazol), - un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de las hialuronano sintasas HAS1-3 (preferentemente, leflunomida), - un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un antagonista del receptor de endotelina EDNRA (preferentemente, sulfisoxazol), - un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un modulador de las hialuronano sintasas HAS1-3 (preferentemente, leflunomida), - un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un agonista del receptor de dopamina DRD5 (preferentemente, fenoldopam), - un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un inhibidor de las fosfolipasas PLA1A y PLA2 (preferentemente mepacrina), - un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un modulador de AMPK (preferentemente, fenformina), - un modulador de RHOA (preferentemente, terbinafina) y un modulador de los receptores purinérgicos P2RY1 y P2RY12 (preferentemente, clopidogrel), - un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de AMPK (preferentemente, fenformina), - un modulador del receptor GABBR2 (preferentemente, baclofeno) y un modulador de los receptores purinérgicos P2RYI y P2RY12 (preferentemente, clopidogrel), - un antagonista del receptor de endotelina EDNRA (preferentemente, sulfisoxazol) y un modulador de AMPK (preferentemente, fenformina), - un modulador de las hialuronano sintasas HAS1-3 (preferentemente, leflunomida) y un agonista del receptor de dopamina DRD5 (preferentemente, fenoldopam), o - un modulador de las hialuronano sintasas HAS1-3 (preferentemente, leflunomida) y un inhibidor de las fosfolipasas PLA1A y PLA2 (preferentemente mepacrina),

5. La composición de la reivindicación 1 para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno seleccionado en un sujeto que lo necesite, caracterizada porque dicha composición comprende al menos una de las siguientes combinaciones de fármacos para administración combinada, por separado o secuencial: - baclofeno y terbinafina, - baclofeno y sulfisoxazol, - baclofeno y leflunomida, - terbinafina y sulfisoxazol, - terbinafina y leflunomida, - terbinafina y fenoldopam, - terbinafina y mepacrina, - terbinafina y fenformina, - terbinafina y clopidogrel, - baclofeno y fenformina, - baclofeno y clopidogrel, - sulfisoxazol y fenformina, - leflunomida y fenoldopam, - leflunomida y mepacrina,

6. La composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque dicha composición comprende además al menos un fármaco que incrementa la angiogénesis para el uso combinado, por separado o secuencial.

7. La composición de la reivindicación 6 caracterizada porque al menos un fármaco que incrementa la angiogénesis se selecciona de un inhibidor de ACAT (preferentemente, hesperetina), un modulador de ADCY2 (preferentemente, vidarabina), un modulador de AMPK (preferentemente, vidarabina), un modulador de AUTOTAXINA (preferentemente, L-histidina), un inhibidor de CA10 (preferentemente, metazolamida), un antagonista de CYSLTR1 y CYSLTR2 (preferentemente, montelukast), un inhibidor de DHFR (preferentemente, pirimetamina), un modulador de DRD2 (preferentemente seleccionado de dihidroergotamina y cabergolina), un modulador de F2 (preferentemente, warfarina), un inhibidor de FDPS (preferentemente, alendronato), un modulador de GABBR2 (preferentemente, acamprosato), un modulador de HIF1A (preferentemente seleccionado de topotecán y meloxicam), un modulador de MGST2 (preferentemente, balsalazida), un modulador de MMP2 y MMP9 (preferentemente, marimastat), un modulador de NOS2A (preferentemente seleccionado de gemfibrozilo, albuterol y tietilperazina), un modulador de NOS3 (preferentemente, ketotifeno), un agonista de NR1 I2 (preferentemente, topiramato), un modulador de NR3C2 (preferentemente seleccionado de eplerenona y fludrocortisona), un agonista de OPRS1 (preferentemente, pentazocina), un modulador de P2RY1 y P2RY12 (preferentemente, tirofiban), un inhibidor del receptor de trombina PAR1 (preferentemente, argatroban), un inhibidor de PDE11A (preferentemente, tadalafilo), un inhibidor de PDE3A (preferentemente, cilostazol), un inhibidor de PDE4D (preferentemente, milrinona), un modulador de PDGFRA y PDGFRB (preferentemente seleccionado de becaplermina e imatinib), un inhibidor de PLA1A y PLA2 (preferentemente, netilmicina), un modulador de PLAT (preferentemente, fenilbutirato sódico), un modulador de PLD2 (preferentemente, ambrisentan), un modulador de PLG (preferentemente, ácido aminocaproico), un agonista de PPARA (preferentemente, gemfibrozilo), un agonista d PPARG (preferentemente, fenilbutirato), un activador de PRKG1 (preferentemente seleccionado de nitroprusida, nitroglicerina, tadalafilo y cilostazol), un modulador de RHOA (preferentemente, alendronato), un modulador de THRB (preferentemente seleccionado de liotironina y metimazol), un inhibidor de TROMBINA (preferentemente, desirudina), un modulador de TSPO (preferentemente seleccionado de flunitrazepam y temazepam), y/ o un antagonista de VEGFR1 (preferentemente seleccionado de sunitinib y pegaptanib).

8. La composición de la reivindicación 6, caracterizada porque dicho al menos un fármaco que incrementa la angiogénesis se selecciona del fármaco o fármacos que se unen o modulan la actividad de una proteína codificada por un gen seleccionado de ABCA1 , ACAT, ACC2, ADAMTS12, ADCY2, ADIPOQ, ADIPOR1 , ADIPOR2, ADRB2, AGPAT5, AIP4, AKAP2, AKR1C2, AMPK, ANG2, ANK1 , ANXA1 , APOA1 , ARHGAP17, ATP10A, AUH, AUTOTAXINA, BAI3, BCAR1 , BIN1 , BMP3A, CA10, CAMK1 D, CAMKK2, CD36, CD44, CDC42, CDH13, CHAT, CNTFR, COL4A2, CPT, CSH1 , CTNN, CUBN, CYP7B1, CYSLTR1 , CYSLTR2, DGKB, DGKH, DGKZ, DHCR7, DHFR, DRD2, DRD5, EDG1 , EDG2, EDG3, EDG4, EDG5, EDG6, EDG7, EDG8, EDNRA, EHHADH, ENPP6, ERBB4, ERK1 , ERK2, ESRRG, ETFA, F2, FDPS, FGF2, FLNA, FLT4, FOX01 , FOX03A, FTO, GABBR2, GATA3, GH1 , GNA12, GNA13, GRK2, GRK5, GRM5, HAPLN1 , HAS1, HAS2, HAS3, HCRTR2, HIF1A, HSD11 B1 , HYAL1 , HYAL2, HYAL3, IL20RA, IL20RB, IL6ST, IL8, ITGA6, ITGB1 , KDR, LAMA1 , LDLR, LEPR, LEPTINA, LIFR, LIPL2, LKB1 , LRP, LTBP2, MAT2B, ME1 , MEGALINA, MERLIN, MET, MGST2, MMP2, MMP9, MTOR, MTR, NCK2, NEDD9, NFKB1 , NFKBIB, NOS2A, NOS3, NR1 I2, NR3C2, NRG1 , NRP1 , NRP2, OPRS1 , OSBPL10, 0SBPL3, OSTEOPONTINA, P2RY1 , P2RY12, PAI1 , PAI2, PAK1 , PAK6, PALLD, PAP1 , PAR1 , PAXILINA, PC, PCTP, PDE11A, PDE1A, PDE3A, PDE4D, PDE5, PDGFA, PDGFB, PDGFRA, PDGFRB, PI3K, PITPNC1 , PKA, PKCD, PLA1A, PLA2, PLAT, PLAU, PLCB1 , PLD1 , PLD2, PLG, PLXDC2, PPARA, PPARG, PPARGC1 B, PRKG1 , PRL, PTGS2, PTN, PTPN11 , PYK2, RAC1 , RAS, RHEB, RHOA, ROCK1 , ROCK2, RPS6KA1 , RPS6KB2, SCARB1 , SCHIP1 , SGPP2, SLC25A21 , SMAD3, SMAD4, SNCA, SORBS2, SPLA2, SPOCK1 , SRD5A1 , SREBF1 , SREBF2, STAT3, TGFBR1 , TGFBR2, TGFBR3, THBS1, THBS2, THEM2, THRB, TIAM1 , TIMP2, TLL2, TSC1 , TSC2, TSPO, VEGFA, VEGFR1 y YES1.

9. La composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque dicha composición además comprende al menos un fármaco que modula la función sináptica, para administración combinada, por separado o secuencial.

10. La composición de la reivindicación 9, caracterizada porque dicho al menos un fármaco que modula la función sináptica se selecciona de alfentanilo amilorida amlodipina aztreonam, buclizina bumetanida buprenorfina, lidocaína, clorzoxazona, cinacalcet, dasatinib, difilina, eletriptán, ergotamina, fosfenitoína, fenobarbital, pregabalina, propiltiouracilo, tiagabina, triamtereno, vigabatrina y zonisamida.

11. La composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque dicha composición además comprende al menos un fármaco que modula la respuesta de estrés celular, para administración combinada, por separado o secuencial.

12. La composición de la reivindicación 11 , caracterizada porque al menos un fármaco que modula la respuesta de estrés celular se selecciona de arabitol, manitol, metaraminol, omeprazol, prilocaína, rapamicina, rifabutina, tioguanina, trehalosa y vidarabina.

13. La composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

14. La composición de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque dicha composición se administra repetidamente al sujeto.

15. Un procedimiento de producir un fármaco para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, caracterizado porque el procedimiento comprende una etapa de someter a ensayo un fármaco candidato para determinar la actividad sobre la angiogénesis y seleccionar los fármacos candidatos que incrementan la angiogénesis.

16. El procedimiento de la reivindicación 15, caracterizado porque comprende determinar si el fármaco candidato se une a, o modula, la actividad de un gen o proteína tal como se ha definido en la reivindicación 8.

17. Un procedimiento de producir una composición para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, caracterizado porque el procedimiento comprende preparar una combinación de un fármaco que incrementa la angiogénesis y un fármaco que modula la función sináptica o la respuesta de estrés celular, y formular dichos fármacos para la administración simultánea, por separado o secuencial a un sujeto que lo necesite.

18. Un procedimiento de tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado, caracterizado porque el procedimiento comprende administrar de forma simultánea, por separado o secuencialmente a un sujeto que lo necesite un fármaco que modula la angiogénesis y un fármaco que modula la función sináptica o la respuesta de estrés celular.

19. Una composición caracterizada porque comprende una combinación de al menos dos compuestos seleccionados de leflunomida, terbinafina, sulfisoxazol y baclofeno, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para administración simultánea, por separado o secuencial.

20. Una composición caracterizada porque comprende uno o más compuestos seleccionados de leflunomida, terbinafina, sulfisoxazol y baclofeno, o sales o profármacos o derivados o formulaciones de liberación sostenida de los mismos, para tratar la enfermedad de Alzheimer o un trastorno relacionado.