MX2010010943A - Composicion farmaceutica con bisfosfonato. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a formulaciones de depósito que comprenden una sal escasamente soluble en agua de una de una formación de bisfosfonato junto con uno o más polímero biocompatibles, a sales escasamente solubles en agua de dichos bisfosfonatos, a formas cristalinas de los compuestos libres y las sales y a otros aspectos relacionados, en donde los compuestos son de la fórmula (I), en donde R1 y R2 son como se describe en la especificación. Los compuestos de la Fórmula (I) y sus formar mencionadas en la descripción son útiles para el tratamiento de trastornos relacionados con los huesos y cáncer.

Description

COMPOSICION FARMACEUTICA CON BISFOSFONATO CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a formulaciones de depósito que comprenden una sal escasamente soluble en agua (también denominada como sal escasamente soluble en agua de aquí en adelante, que es escasamente soluble en agua) de una formación de bisfosfonato junto con uno o más polímero biocompatibles. La formulación de depósito puede estar en la forma de micropartículas o implantes. Las formulaciones de depósito son útiles para el tratamiento y prevención de varias enfermedades relacionadas con los huesos y/o proliferativas, especialmente enfermedades degenerativas y artritis reumatoide y osteoartritis.

En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a nuevas sales incluyendo nuevas formas de cristal de dichas sales de ciertos bisfosfonatos, así como nuevas formas de cristal de los bisfosfonatos en forma libre (por ejemplo, zwiteriónicos).

Además, varias otras modalidades (usos, métodos, procedimientos o métodos de preparación y materia objeto relacionada) son modalidades de la invención.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Los bisfosfonatos son ampliamente utilizados para inhibir la actividad de osteoclastos en una variedad de enfermedades benignas y malignas, en donde la reabsorción de huesos es incrementada. De este modo, solamente los bisfosfonatos solubles en agua, por ejemplo, la sal de sodio, han sido utilizados en composiciones farmacéuticas. En el caso de la formulación de soluciones para infusión, este es un aspecto razonable. Sin embargo, en el caso de una formulación de depósito, la alta solubilidad de agua del bisfosfonato le conducirá a una alta liberación inicial ocasionando severas irritaciones de tejido local.

Por ejemplo, el fármaco de ácido zoledrónico se utiliza para la prevención de eventos relacionados con el esqueleto, tales como, entre otros, fracturas patológicas, compresión espinal, radiación o cirugía en huesoso o hipercalcemia inducida por tumor, en pacientes con varias enfermedades o trastornos, por ejemplo, que involucran el metabolismo del calcio y huesos, tales como malignidades avanzadas que involucran huesos, tratamiento de hipercalcemia inducida por tumor, enfermedad de Paget, operación y prevención de fracturas de la cadera, o similares.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Sorprendentemente ahora se ha encontrado que los bisfosfonatos escasamente solubles en agua de una nueva clase de bisfosfonatos pueden ser encapsulados lo suficiente para que la liberación del fármaco esté muy bien bajo control.

Una ventaja de una sal escasamente soluble en agua es que generalmente la encapsulación de la substancia de fármaco es mejorada, ya que las sales altamente solubles en agua pueden disolverse en la fase acuosa durante la fabricación de las micropartículas a través de un método de evaporación/extracción de emulsión-solvente comúnmente utilizado. Una ventaja más es que la liberación del fármaco fuera de la formulación de depósito resultante generalmente se controla mejor si la substancia de fármaco tiene una solubilidad en agua limitada comparado con sales altamente solubles en agua.

Una ventaja de la micronización de la substancia de fármaco es la encapsulación más completa de las partículas de substancia de fármaco en matrices poliméricas comparado con partículas de substancia de fármaco grandes, las cuales solo en parte han sido encapsuladas en la matriz conduciendo a una liberación no controlada de la substancia de fármaco.

Además, se ha encontrado que nuevas sales permiten la fabricación de las formulaciones antes mencionadas.

Más aún, se han encontrado nuevas formas de cristal de ciertos bisfosfonatos y sus sales (incluyendo hidratos u otros solvatos) y son una modalidad de la invención.

DESCRIPCION DETALLADA DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra el difractograma de rayos X de la sal zwiteriónica cristalina (interna) de ácido [2-(5-etil-imidazol-1-il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico (Comp. A), para detalles ver Ejemplo 6.

La Figura 2 muestra el difractograma de rayos X de la sal de Ca cristalina del Comp. A (1:2), para detalles ver Ejemplo 7.

La Figura 3 muestra el difractograma de rayos X de la sal de Mg cristalina del Comp. A (1:2), para detalles ver Ejemplo 8.

La Figura 4 muestra el difractograma de rayos X de la sal de Zn cristalina del Comp. A (1:2), para detalles ver Ejemplo 9.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION En la siguiente descripción de la invención, también se pueden utilizar definiciones más específicas provistas para términos generales en una de las modalidades para definir los términos generales más específicamente en otra modalidad, esto formando modalidades más específicas de la invención, siempre que, cada término pueda ser reemplazado independientemente de los otros términos generales que definen una modalidad de la invención.

La presente invención, en una primera modalidad, se refiere a formulaciones de depósito que comprenden una sal escasamente soluble en agua de un bisfosfonato de la fórmula I junto con polímeros biocompatibles.

La presente invención a este respecto especialmente se refiere a formulaciones de depósito que comprenden una sal escasamente soluble en agua de un bisfosfonato formando junto con uno o más polímeros biocompatibles, en donde el compuesto de bisfosfonato es un compuesto seleccionado de compuestos de la fórmula I, en donde uno de R y R2 es hidrógeno y el otro es alquilo de 1 a 5 átomos de carbono (preferiblemente alquilo de 2 a 5 átomos de carbono) que está ramificado o no ramificado en la forma de una sal escasamente soluble en agua.

Se prefiere una formulación de depósito del bisfosfonato de la fórmula I, en donde uno de y R2 es hidrógeno y el otro el metilo en la forma de una sal escasamente soluble en agua.

Alternativamente, una formulación de depósito del bisfosfonato de la fórmula I, en donde uno de R-i y R2 es hidrógeno y el otro es etilo en la forma de una sal escasamente soluble en agua es muy preferida.

Muy preferida es una formulación de depósito del bisfosfonato de la fórmula I con el nombre de ácido [2-(5-metil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico o muy preferiblemente ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico en la forma de una sal escasamente soluble en agua.

También las sales escasamente solubles en agua de los compuestos de la fórmula I, especialmente las sales con los compuestos preferidos de la fórmula I como se definió en los párrafos precedentes, como tales son una modalidad de la invención, especialmente en la forma de polimorfos específicos (formas de cristal o modificaciones de cristal) como se describe más adelante con mayor detalle.

"Escasamente", cada vez que se utilice en este texto, significa que la solubilidad es 2 mg/ml en agua a una temperatura de 21 a 24°C, muy preferiblemente menos de 1 mg/ml de agua a dicha temperatura.

La presente invención se refiere en especial a formulaciones de depósito en la forma de micropartículas que comprenden una sal escasamente soluble en agua de un bisfosfonato de la fórmula I junto con uno o preferiblemente más polímeros biocompatibles, de preferencia polímeros biodegradables.

La presente invención también se refiere a implantes que comprenden una sal escasamente soluble en agua de un bisfosfonato de la fórmula I junto con uno o preferiblemente más polímeros biocompatibles, de preferencia polímeros biodegradables.

La presente invención se refiere a métodos para el tratamiento y prevención de enfermedades o trastornos en donde se encuentra reemplazo de hueso anormal, como se proporciona con mayor detalle más adelante, que comprende administrar una formulación de depósito o una sal escasamente soluble en agua o una forma cristalina de una forma libre (o su sal interna, por ejemplo, sal zwiteriónica) de un compuesto de la fórmula I a un paciente con la necesidad de dicho tratamiento en una dosis terapéuticamente efectiva, así como el uso de una formulación de depósito o sal escasamente soluble en agua o una forma cristalina de una forma libre (o su sal interna, por ejemplo sal zwiteriónica) de un compuesto de la fórmula I en la elaboración de medicamentos para el tratamiento de dichas enfermedades o trastornos y su uso en el tratamiento de dichos trastornos o enfermedades, así como las formulaciones de depósito o sales de formas cristalinas de una forma libre (o su sal interna, por ejemplo sal zwiteriónica) de un compuesto de la fórmula I para usarse en dicho tratamiento.

La sal escasamente soluble en agua de un compuesto de la fórmula I, la cual es una modalidad de la invención o es parte de una formulación de depósito de acuerdo con la invención se selecciona de la sal de calcio, magnesio y zinc, o una mezcla de dos de todas estas sales, preferiblemente como sales 1:1 ó es especial 1:2 (aquí cada vez que se mencione dando la relación molar de (ion metálico)®compuesto de la fórmula I), en donde "metal o metálico" se refiere a calcio, magnesio y/o (especialmente "o") zinc). Estas sales tienen una baja solubilidad en agua, en otros términos, escasamente solubles en agua significa que la solubilidad en agua es de 25% o menos de una sal de sodio correspondiente.

Preferiblemente, las formulaciones de depósito de la invención contienen como ingrediente activo solo un compuesto de la fórmula I, de preferencia ácido [2-(5-metil-imidazol-1— i I >— 1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico o muy especialmente ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 - hidroxi-1 -fosfono-etilj-fosfónico en la forma de su sal escasamente soluble en agua, o una forma cristalina de un compuesto de la fórmula I denominada ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico en forma libe (por ejemplo, especialmente zwiteriónico).

Se ha encontrado que las sales de calcio se encapsulan mejor en el polímero en las formulaciones de acuerdo con la invención que las sales de zinc, por lo tanto, las sales de calcio de un compuesto de la fórmula I son en general más preferidas, en especial para las formulaciones de depósito.

Además, las formas de cristal definidas de los compuestos libres así como las sales de los compuestos de la fórmula I, respectivamente, muestran ventajas adicionales, por ejemplo, una relación estequiométrica fija entre sus componentes y, en donde se forman solvatos, tales como hidratos, las moléculas de solvente, muestran buena molturabilidad para producir partículas en la escala de micrómetro, buena capacidad de fluidez y otras propiedades ventajosas de materiales cristalinos sobre amórficos que facilitan el procesamiento de dichos materiales a formulaciones farmacéuticas, también incluyendo capacidad de almacenamiento mejorada.

De preferencia, las micropartículas de la invención contienen un compuesto de la fórmula I, en forma de la sal de calcio, aún muy preferiblemente la sal de calcio de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosf o no-etil]-fosfón ico.

Los bisfosfonatos de la fórmula I pueden estar presentes en una cantidad de aproximadamente 1% a aproximadamente 60%, más usualmente alrededor de 2% a aproximadamente 20%, de preferencia de aproximadamente 5% a aproximadamente 10%, en peso del peso seco del depósito de la formulación de micropartícula.

Los bisfosfonatos de la invención son liberados desde las formulaciones de depósito de la invención y desde las composiciones de la invención durante un período de varias semanas, por ejemplo, alrededor de 2 semanas a 18 meses, por ejemplo de 3 semanas a 12 meses.

De preferencia, el bisfosfonato de la fórmula I en la forma de su sal escasamente soluble en agua utilizado para preparar las formulaciones de depósito es un polvo muy fino producido a través de cualquier tipo de técnica de micronización (por ejemplo, molienda de chorro u homogenizacion a alta presión) teniendo un tamaño de partícula (por ejemplo, con 90% del peso de las partículas en esa escala, de preferencia 98%) de aproximadamente 0.1 micrómetros a aproximadamente 15 micrómetros, de preferencia menos de aproximadamente 5 micrómetros, aún muy preferiblemente menos de alrededor de 3 micrómetros. Se encontró que la micronización de la substancia de fármaco mejora la eficiencia de encapsulación.

De acuerdo con un aspecto, la invención es una sal de calcio de un compuesto de la fórmula I, especialmente con una estequiometría de un calcio y dos moléculas del compuesto de la fórmula I (una sal 1:2), en especial una sal de calcio del Compuesto A (= Comp. A = ácido [2-(5-etil-imidazol-1-il)-1-hidrox¡-1-fosfono- et¡l]-fosfónico).

De acuerdo con otro aspecto, la invención proporciona una sal de zinc de un compuesto de la fórmula I, en especial con una estequiometría de un zinc y dos moléculas del compuesto de la fórmula I (una sal 1:2) o de un zinc y dos moléculas del compuesto de la fórmula I (una sal 1:1), en especial una sal de zinc del Compuesto A (= Comp. A = ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico) .

De acuerdo con otro aspecto más, la invención proporciona una sal de magnesio de un compuesto de la fórmula I, en especial con una estequiometría de un magnesio y dos moléculas del compuesto de la fórmula I (una sal 1:2), en especial una sal de magnesio del Compuesto A (= ácido [2-(5-etil-imidazol-1— i I >— ? -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico).

Además, sorprendentemente se ha encontrado que los compuestos de la fórmula I en forma libre (este término siempre incluye sales internas, tales como formas zwiteriónicas) así como sales de compuestos de la fórmula I pueden estar presentes en formas polimórficas (diferentes modificaciones de cristal).

Por lo tanto, la invención en una modalidad adicional se refiere a nuevas formas cristalinas de sales con baja solubilidad en agua de compuestos de la fórmula I o sus forma libre (por ejemplo, zwiteriónica), especialmente de ácido 2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etilj-fosfónico (Comp. A de aquí en adelante), el procedimiento para la preparación de estas formas cristalinas, composiciones que contienen estas formas cristalinas, y el uso de estas formas cristalinas en métodos de diagnóstico o tratamiento terapéutico de animales de sangre caliente, especialmente seres humanos.

Ambas formas libres así como las formas de sal, cada una en forma cristalina, pueden estar libres de solvente o (en especial en el caso de las sales) en solvato, por ejemplo, forma de hidrato, por ejemplo, como el dihidrato.

Con respecto a las formas cristalinas, la invención, en un primer aspecto, proporciona una forma cristalina de la forma libre o una de las formas de sal (especialmente una sal en forma de hidrato) de un compuesto de la fórmula I.

En un aspecto más enfocado, la invención proporciona una forma cristalina de la forma zwiteriónica libre del Comp. A, la cual muy preferiblemente tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción de 2-theta (T) de 10.5, 13.1, 14.7, 17.2, 23.5, 25.2 y 29.2, ± 0.2, respectivamente, en especial como se ilustra en la Figura 1; alternativamente, por lo menos 80% en peso del Comp. A en la forma zwiteriónica libre muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X.

En un aspecto más enfocado, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de calcio del Comp. A (especialmente en la forma de hidrato, tal como el dihidrato) con una estequiometría de un calcio y dos moléculas del Comp. A, que muy preferiblemente tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción 2-theta (T) de 7.9, 10.6, 12.1, 25.7, 27.4 y 29.2, ± 0.2, respectivamente, en especial como se ilustra en la Figura 2; alternativamente, por lo menos 80% en peso de la sal de calcio 1:2 del Comp. A muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X.

En otro aspecto más enfocado, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de zinc del Comp. A (en especial en la forma de hidrato, tal cómo el dihidrato) con una estequiometría de un zinc y dos moléculas del Comp. A, que muy preferiblemente tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción 2-theta (T) de 6.7, 9.5, 12.5, 17.7 y 27.3, ± 0.2, respectivamente, en especial como se ilustra en la Figura 3; alternativamente, por lo menos 80% en peso de la sal de zinc 1:2 del Comp. A muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X.

En otro aspecto adicional enfocado, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de magnesio del Comp. A (en especial en la forma de hidrato, tal como el dihidrato) con una estequiometría de un magnesio y dos moléculas del Comp. A, que muy preferiblemente tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción 2-theta (T) de 6.7, 12.5, 20.0 y 27.3, ± 0.2, respectivamente, en especial como se muestra en la Figura 4; alternativamente, por lo menos 80% en peso de la sal de magnesio 1:2 del Comp. A muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X.

Los parámetros y dispositivos para la recuperación de los datos de rayos X mencionados anteriormente y en las reivindicaciones de preferencia están de acuerdo con aquellos mencionados más adelante en los Ejemplos.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, la invención proporciona una formulación farmacéutica (en especial una formulación de depósito como se describe aquí) incluyendo una forma cristalina, especialmente como se describió en cualquiera de los párrafos enfocados anteriormente mencionados de la invención, de un compuesto de la fórmula I o una sal escasamente soluble en agua del mismo, en especial una sal de calcio (calcio : Comp. A = 1:2 siendo especialmente preferida, en especial en la forma de hidrato, por ejemplo dihidrato) y por lo menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, en especial para administración parenteral.

En otro aspecto, la invención se refiere a una forma amorfa o cristalina de un compuesto de la fórmula I, especialmente Comp. A, en la forma de una sal escasamente soluble seleccionada de zinc, (especialmente) sal de magnesio y (muy especialmente) de calcio, en especial cuando la estequiometría del ion metálico al compuesto de la fórmula I es 1:2; o a una forma cristalina de un compuesto de la fórmula I, especialmente en su forma libre (por ejemplo, zwiteriónico interno) o en la forma de una sal de zinc (en especial 1:1 o muy especialmente 1:2), de magnesio (especialmente) o de calcio (muy especialmente), cada una en especial en forma de hidrato, por ejemplo, en la forma de un dihidrato, o una mezcla de dos o más de dichas formas, especialmente para usarse en el tratamiento de una o más enfermedades o trastornos en donde se encuentra reemplazo de hueso anormal (el término tratamiento cada vez que se use en esta descripción incluyendo tratamiento tanto profiláctico como terapéutico (por ejemplo, paliativo o curativo).

Aproximadamente, cuando se utiliza en esta especificación, especialmente significa que el número mencionado después de "aproximadamente" puede variar por más de 10 a menos de 10 por ciento de su valor absoluto. La distribución de tamaño de partícula de las sales escasamente solubles en agua de bisfosfonatos de la fórmula I puede influenciar el perfil de liberación del fármaco. Típicamente, entre más pequeño sea el tamaño de partícula, menor es el arranque y liberación durante la primera fase de difusión, por ejemplo, los primeros 20 días. De preferencia, la distribución de tamaño de partícula es de, por ejemplo, x 10 < 2 mieras, es decir, 10% de las partículas son más pequeñas que 2 mieras; x 50 < 5 mieras, es decir, 50% de las partículas son más pequeñas que 5 mieras; ó x 90 < 10 mieras, es decir, 90% de las partículas son más pequeñas que 10 mieras.

II. Micropartículas Se ha encontrado que la administración de micropartículas que comprenden una sal de baja solubilidad de un bisfosfonato de la fórmula I embebida en un polímero farmacológicamente aceptable biocompatible, de preferencia un polímero farmacológicamente aceptable biodegradable, suspendida en un vehículo adecuado proporciona liberación del agente activo durante un período extendido de tiempo, por ejemplo, una semana hasta 18 meses, de preferencia de aproximadamente 3 semanas a aproximadamente 12 meses.

La presente invención, en otro aspecto, proporciona un procedimiento para la preparación de micropartículas de la invención, que comprende: (i) la preparación de una fase orgánica interna que comprende: (ia) disolver el polímero o polímeros en un solvente orgánico o mezcla de solvente, y opcionalmente disolver/dispersar un agente de influencia de porosidad en la solución obtenida en el paso (¡a), o - agregar una sal básica a la solución obtenida en el paso (ia), agregar un agente tensoactivo a la solución obtenida por el paso (ia); (ib) suspender una sal escasamente soluble en agua de un compuesto de la fórmula I en la solución de polímero obtenida en el paso (¡a), o disolver una sal escasamente soluble en agua de un compuesto de la fórmula I en un solvente miscible con el solvente usado en el paso (ia) y mezclar dicha solución son la solución de polímero, o disolver directamente una sal escasamente soluble en agua de un compuesto de la fórmula I en la solución de polímero; (¡i) la preparación de una fase acuosa externa que comprende: (iia) preparar un regulador de pH para ajustar el pH a 3.0-8.0, por ejemplo, pH de 3.0-5.0, por ejemplo, regulador de pH de acetato, y (iib) disolver un estabilizador en la solución obtenida en el paso (iia); (iii) mezclar la fase orgánica interna con la fase acuosa externa, por ejemplo, con un dispositivo para crear altos esfuerzos cortantes, por ejemplo, con una turbina o mezclador estático, para formar una emulsión; y (iv) endurecer las micropartículas a través de evaporación de solvente o extracción de solvente, opcionalmente además de lavar las micropartículas, por ejemplo, con agua, y recolectar y secar las micropartículas, por ejemplo, mediante secado por congelación o secado bajo vacío.

Los solventes orgánicos adecuados para los polímeros incluyen por ejemplo, acetato de etilo o hidrocarburos halogenados, por ejemplo, cloruro de metileno, cloroformo, o mezclas de dos o más de ellos.

Ejemplos adecuados de un estabilizador para el paso (iib) incluyen: a) alcoholo polivinílico (PVA), preferiblemente teniendo un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 10,000 Da a aproximadamente 150,000 Da, por ejemplo, aproximadamente 30,000 Da. Convenientemente, el alcohol polivinílico tiene baja viscosidad teniendo una viscosidad dinámica de aproximadamente 3 mPa s a aproximadamente 9 mPa s cuando se mide como una solución acuosa al 4% a 20°C o a través de DIN 53015. De manera adecuada, el alcohol polivinílico puede ser obtenido hidrolizando acetato de polivinilo. Preferiblemente, el contenido del acetato de polivinilo es de aproximadamente 10% a aproximadamente 90% del alcohol polivinílico. Convenientemente, el grado de hidrólisis es de aproximadamente 85% a aproximadamente 89%.

Típicamente, el contenido de acetilo residual es de aproximadamente 10-12%. Las marcas preferidas incluyen Mowiol® 4-88, 8-88 y 18-88 disponible de Kuraray Specialities Europe, GmbH.

De preferencia, el alcohol polivinílico en una cantidad de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 5%, por ejemplo, aproximadamente 0.5%, en peso del volumen de la fase acuosa externa; b) hidroxietilcelulosa (HEC) y/o hidroxipropilcelulosa (HPC), por ejemplo, formada a través de la reacción con óxido de etileno y óxido de propileno, respectivamente. HEC y HPC están disponibles en una amplia escala de tipos de viscosidad; preferiblemente la viscosidad es media. Las marcas preferidas incluyen Natrosol® de Hercules Inc., por ejemplo, Natrosol® 250MR y Klucel® de Hercules Inc.

Preferiblemente, HEC y/o HPC está presente en una cantidad total de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 5%, por ejemplo, aproximadamente 0.5% en peso del volumen de la fase acuosa externa; c) Polivinilpirrolidona, por ejemplo, convenientemente con un peso molecular de entre aproximadamente 2,000 Da y 20,000 Da. Ejemplos adecuados incluyen aquellos comúnmente conocidos como Povidone K12 F con un peso molecular promedio de aproximadamente 2,500 Da, Povidone K15 con un peso molecular promedio de aproximadamente 8,000Da, Povidone K17 con un peso molecular promedio de aproximadamente 10,000 Da. De preferencia, la polivinilpirrolidona está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 50%, por ejemplo, 10% en peso del volumen de la fase acuosa externa. d) Gelatina, preferiblemente gelatina de porcino o de pescado. Convenientemente, la gelatina tiene una viscosidad de aproximadamente 25 cps a aproximadamente 35 cps para una solución al 10% a 20°C. Típicamente, el pH de una solución al 10% es de aproximadamente 6 a aproximadamente 7. Una marca adecuada tiene un peso molecular alto, por ejemplo, gelatina de pescado con un peso molecular alto, Norland, de Norland Products Inc., Cranbury, New Jersey, E.U.A.

Preferiblemente, la gelatina está presente en una cantidad de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 5%, por ejemplo, aproximadamente 0.5%, en peso del volumen de la fase acuosa externa.

De preferencia, se utiliza alcohol polivinílico. Preferiblemente, no se usa gelatina. De preferencia, las micropartículas están libres de gelatina.

Las micropartículas resultantes pueden tener un diámetro de pocas sub-micras a pocos milímetros, por ejemplo, se procuran diámetros de a lo mucho, por ejemplo, 5-200 mieras, de preferencia 5-130 mieras, muy preferiblemente 5-100 mieras, por ejemplo, con el fin de facilitar el paso a través de una aguja para inyección. Se prefiere una distribución de tamaño de partícula estrecho. Por ejemplo, la distribución del tamaño de partícula puede ser, por ejemplo, de 10% <20 mieras, 50% <50 mieras, ó 90% <80 mieras.

La uniformidad de contenido de las micropartículas de una dosis unitaria es excelente. Se pueden producir dosis unitarias que varían de aproximadamente 20% a aproximadamente 125%, por ejemplo, de aproximadamente 70% a aproximadamente 115%, por ejemplo, de aproximadamente 90% a aproximadamente 110%, o de aproximadamente 95% a aproximadamente 105% de la dosis teórica.

Las micropartículas en estado seco pueden, por ejemplo, ser mezcladas, por ejemplo, revestidas con un agente anti-aglomeración, o, por ejemplo, cubiertas a través de una capa de un agente anti-aglomeración, por ejemplo, en una jeringa o frasco pre-llenado.

Los agentes anti-aglomeración adecuados incluyen, por ejemplo, manitol, glucosa, dextrosa, sacarosa, cloruro de sodio o polímeros solubles en agua, tales como polivinilpirrolidona o polietilen glicol, por ejemplo, con las propiedades descritas anteriormente.

De preferencia, un anti-aglomeración está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 10%, por ejemplo, aproximadamente 4% en peso de las micropartículas.

Antes de administración (usualmente s.c. o i.m.), las micropartículas se suspenden en un vehículo adecuado para inyección.

Por consiguiente, la presente invención además proporciona una composición farmacéutica que comprende micropartículas de la invención en un vehículo. El vehículo opcionalmente además puede contener: a) uno o más agentes humectantes; y/o b) uno o más agentes de tonicidad; y/o c) uno o más agentes de incremento de viscosidad.

De preferencia, el vehículo es a base de agua, por ejemplo, puede contener agua, por ejemplo, desionizada, y opcionalmente un regulador de pH para ajustar el pH a 7-7.5, por ejemplo, un regulador de pH de fosfato, tal como una mezcla de Na2HP04 y KH2P04, y uno o más agentes a), b), y/o c) como se indicó anteriormente.

Sin embargo, cuando se utiliza agua como un vehículo, las micropartículas de la invención no pueden suspenderse y pueden flotar sobre la parte superior de la fase acuosa. Con el fin de mejorar la capacidad de las micropartículas de la invención que serán suspendidas en un medio acuoso, el vehículo preferiblemente comprende un agente humectante a). El agente humectante se selecciona para permitir una capacidad de suspensión rápida y adecuada de las micropartículas en el vehículo. De preferencia, las micropartículas rápidamente son humedecidas por el vehículo y con rapidez formar una suspensión ahí.

Los agentes humectantes adecuados para suspender las micropartículas de la invención en un vehículo a base de agua incluyen agentes tensoactivos no iónicos, tales como poloxámeros, o ésteres de ácido graso de polioxietilensorbitán, las características de los cuales han sido descritas anteriormente. Se puede utilizar una mezcla de agentes humectantes. De preferencia, el agente humectante comprende Pluronic F68, Tween 20 y/o Tween 80.

El agente humectante puede estar presente de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 1% en peso de la composición que será administrada, de preferencia de 0.01-0.5% y puede estar presente en aproximadamente 0.01-5 mg/ml del vehículo, por ejemplo, aproximadamente 2 mg/ml.

De preferencia, el vehículo además comprende un agente de tonicidad b), tal como manitol, cloruro de sodio, glucosa, dextrosa, sacarosa o glicerina. Preferiblemente, el agente de tonicidad es manitol.

La cantidad del agente de tonicidad se selecciona para ajustar la isotonicidad de la composición que será administrada. En caso de que un agente de tonicidad esté contenido en las micropartículas, por ejemplo, para reducir la aglomeración como se mencionó anteriormente, se debe entender que la cantidad de agente de tonicidad es la suma de ambos. Por ejemplo, el manitol de preferencia puede ser de aproximadamente 1% a aproximadamente 5% en peso de la composición que será administrada, de preferencia aproximadamente 4.5%.

Preferiblemente, el vehículo además puede comprender un agente de incremento de viscosidad c). los agentes de incremento de viscosidad adecuados incluyen carboximetilcelulosa de sodio (CMC-Na), sorbitol, polivinilpirrolidona o monoestearato de aluminio.

Convenientemente se puede utilizar CMC-Na con una baja viscosidad. Las modalidades pueden ser como se describió anteriormente. La viscosidad puede ser de aproximadamente 1 mPa s a aproximadamente 30 mPa s, por ejemplo, de aproximadamente 10 mPa s a aproximadamente 15 mPa s cuando se mide como una solución acuosa al 1% (p/v) a 25°C en un viscosímetro Brookfield LVT con un husillo 1 a 60 rpm, o una viscosidad de 1-15 mPa*s para una solución de NaCMC 7LF (bajo peso molecular) como una solución al 0.1-1% en agua.

Se puede utilizar una polivinilpirrolidona con las propiedades descritas anteriormente.

Puede estar presente un agente de incremento de viscosidad, por ejemplo, CMC-Na en una cantidad de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 2%, por ejemplo, aproximadamente 0.7% o aproximadamente 1.75% del vehículo (en volumen), por ejemplo, en una concentración de aproximadamente 1 mg/ml a aproximadamente 30 mg/ml en el vehículo, por ejemplo, aproximadamente 7 mg/ml o aproximadamente 17.5 mg/ml.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un equipo que comprende micropartículas de la invención y un vehículo de la invención. Por ejemplo, el equipo puede comprender micropartículas que comprenden la cantidad exacta del compuesto de la invención que será administrado, por ejemplo, como se describe más adelante, y aproximadamente 1 mi a aproximadamente 5 mi, por ejemplo, aproximadamente 2 mi del vehículo de la invención.

En una modalidad, las micropartículas secas, opcionalmente en mezcla con un agente anti-aglomeración, pueden ser colocadas como relleno en un contenedor, por ejemplo, un frasco o una jeringa, y esterilizarse, por ejemplo, usando irradiación gama. Antes de la administración (usualmente s.c. o i.m.), las micropartículas pueden ser suspendidas en el contenedor agregando un vehículo adecuado, por ejemplo, el vehículo descrito anteriormente. Por ejemplo, las micropartículas, opcionalmente en mezcla con un agente antiaglomeración, un agente de incremento de viscosidad y/o un agente de tonicidad, y el vehículo para suspensión, pueden ser alojadas en forma separada en una jeringa de cámara doble. Una mezcla de las micropartículas con un agente anti-aglomeración y/o un agente de incremento de viscosidad y/o un agente de tonicidad, también forma parte de la invención.

En otra modalidad, bajo condiciones estériles, las micropartículas esterilizadas secas, opcionalmente en mezcla con un agente anti-aglomeración, pueden ser suspendidas en un vehículo adecuado, por ejemplo, el vehículo descrito anteriormente, y se colocan como relleno en un contenedor, por ejemplo, un frasco o una jeringa. El solvente del vehículo, por ejemplo, agua, después puede ser removido, por ejemplo, a través de secado por congelación o evaporación bajo vacío, conduciendo a una mezcla de las micropartículas y los componentes sólidos del vehículo en el contenedor. Antes de la administración, las micropartículas y los componentes sólidos del vehículo pueden ser suspendidos en el contenedor agregando un vehículo adecuado, por ejemplo, agua, por ejemplo, agua para infusión, o de preferencia una solución de regulador de pH de fosfato de baja molaridad. Por ejemplo, la mezcla de las micropartículas, opcionalmente el agente anti-aglomeración, y componentes sólidos del vehículo y el vehículo para suspensión, por ejemplo, agua, pueden ser alojados separadamente en una jeringa de cámara doble.

III. Implantes Se ha encontrado que la administración de implantes que comprenden una sal escasamente soluble de un bisfosfonato de la fórmula I embebida en un polímero farmacológicamente aceptable biocompatible proporciona la liberación de todo o de substancialmente todo el agente activo durante un período extendido de tiempo, por ejemplo, una semana hasta 18 meses, en especial durante aproximadamente 3 semanas a aproximadamente 12 meses, por ejemplo, 3 meses a aproximadamente 12 meses. El término "formulación de depósito" en la presente descripción, por lo tanto, también se refiere a dichos implantes.

La presente invención en otro aspecto proporciona un procedimiento para la preparación de los implantes de la invención, que comprende: (i) la preparación de una mezcla de polvo de DS escasamente soluble en agua y el polímero biodegradable mediante la molienda criogénica con nitrógeno líquido de ambos componentes en conjunto y/o utilizando un solvente orgánico para un paso de granulación y removiendo este solvente otra vez mediante un procedimiento de secado; (ii) llenar un extrusor RAM con la mezcla de polvo (alternativamente, se utiliza un extrusor de tornillo o de doble tornillo); (iii) calentar las paredes del extrusor a temperaturas en la escala de 50-120°C, en caso de utilizar poli(lactida-co-glicolida) como matriz de polímero, preferiblemente 60-90°C; (iv) empujar la mezcla de polvo fundida a través de una agujero de pasador con un diámetro de 1-4 mm a una pequeña velocidad, preferiblemente a través de un agujero de pasador de 1.5 mm con una velocidad de 5 mm/minuto; y (v) cortar las varas resultantes a una longitud más corta dependiendo de la dosis anticipada, por ejemplo, 20 mm.

Para aplicación, los implantes se colocaron en un aplicador o trocar, sellado en una hoja de aluminio y esterilizado utilizando radiación gama con una dosis mínima de 25 kGy. Estos aplicadores están comercialmente disponibles, por ejemplo, de Rexam Pharma, Süddeutsche Feinmechanik GmbH (SFM) o Becton Dickerson.

IV. Polímeros Biocompatibles La matriz de polímero de las formulaciones de depósito puede ser un polímero sintético o natural. El polímero puede ser ya sea biodegradable o no biodegradable, o una combinación de polímeros biodegradables y no biodegradables, preferiblemente biodegradables.

Los polímeros adecuados incluyen: (a) poliésteres lineales o ramificados que con cadenas lineales de una porción poliol, por ejemplo, glucosa, por ejemplo, un poliéster, tal como ácido D-, L-, poliláctico o racémico, ácido potig licólico, ácido plihidroxibutírico, oxalato de polialquileno, ésteres de polialquilen glicol de un ácido del ciclo de Kreb, por ejemplo ciclo de ácido cítrico, y similares, o una combinación de los mismos, (b) polímeros y copolímeros de éteres orgánicos, anhídridos, amidas y ortoésteres, incluyendo tales copolímeros con otros monómeros, por ejemplo, un polianhídrido, tal como un copolímero de 1 ,3-6/s-(p-carboxifenoxi)-propano y un diácido, por ejemplo, ácido sebácico, o un copolímero de dímero de ácido erúcico con ácido sebácico; un poliortoéster que resulta de la reacción de un orto-éster con un triol, por ejemplo, 1 ,2,6-hexanotriol, o de una diceteno acetal, por ejemplo, 3,9-dietiliden-2,4,8,10-tetraoxaespiro[5,5]un-decano, con un diol, por ejemplo, 1 ,6-dihexanodiol, trietilen glicol ó 1,10-decanodiol; o una poliéster amida obtenida con un monómero de amida-diol, por ejemplo, 1 ,2-di-(h¡droxiacetamido)-etano ó 1,10-di-(hidroxiacetamido)decano; o (c) alcohol polivinílico.

Los polímeros pueden estar entrelazados o no entrelazados, usualmente no más de 5%, típicamente menos de 1%.

Se prefieren los polímeros de polilactida-co-glicolida (también denominados PLGA).

El Cuadro II lista ejemplos de los polímeros de la invención: Los polímeros preferidos de esta invención son poliésteres lineales y poliésteres de cadena ramificada. Los poliésteres lineales pueden ser preparados a partir de ácidos alfa-hidroxi carboxílicos, por ejemplo, ácido láctico y/o ácido glicólico, a través de condensación de los dímeros de lactona. Las cadenas de poliéster preferidas en los polímeros lineales o ramificados (de estrella) con copolímeros de las porciones de ácido alfa-carboxílíco, ácido láctico y ácido glicólico, o de los dímeros de lactona, también denominados aquí como PLGA. La relación molar de I a ct i d a : g ? i co I id a de polilactida-c-glicolidas en los poliésteres lineales o ramificados es de preferencia de aproximadamente 100:0 a 40:60, muy preferida de 95:5 a 50:50, con mayor preferencia 95:5 a 55:45.

Los poliésteres lineales, por ejemplo, polilactida-co-glicolidas lineales, de preferencia usados de acuerdo con la invención, tienen un peso molecular promedio en peso (Mw) de entre aproximadamente 10,000 Da y aproximadamente 500,000 Da, por ejemplo, aproximadamente 50.000 Da. Dichos polímeros tienen una polidispersidad Mw/Mn, por ejemplo, entre 1.2 y 2. Los ejemplos adecuados incluyen, por ejemplo, poli(D, L-lactida-co-glicolida), poli (D, L-lactida) lineal y un grupo extremo de ácido poli lineal (D,L- lactida) carboxílico libre, por ejemplo, teniendo una fórmula general -[(C6H804)x(C4H404)y]n- (cada uno de x, y, y n teniendo un valor de manera que la suma total proporciona los Mws indicados anteriormente), por ejemplo, aquellos comercialmente disponibles, por ejemplo, Resomers® de Boehringer Ingelheim, Lactel® de Durect, Purasorb® de Purac and Medisorb® de Lakeshore.

Los poliésteres ramificados, por ejemplo, polilactida-co-glicolidas ramificados, también utilizados de acuerdo con la invención pueden ser preparados utilizando compuestos polihidroxílicos, por ejemplo, poliol, por ejemplo, glucosa o manitol como el iniciador. Estos ésteres de un poliol son conocidos y se describen en, por ejemplo, GB 2,145,422 B, los contenidos de la cual se incorporan aquí por referencia. El poliol contiene por lo menos 3 grupos hidroxi y tiene un peso molecular de hasta 20,000 Da, con al menos 1, de preferencia por lo menos 2, por ejemplo, como una media de 3 grupos hidroxi del poliol estando en la forma de grupos éster, que contienen cadenas de poli-lactida o co-poli-lactida. Típicamente se utiliza 0.2% de glucosa para iniciar la polimerización. Los poliésteres ramificados (Glu-PLG) tienen una porción de glucosa central que tiene rayos de cadenas de polilactida lineales, por ejemplo, tienen una estructura con forma de estrella.

Los poliésteres ramificados que tienen una porción de glucosa central que tienen rayos de cadenas de polilactida-co-glicolida lineales (Glu-PLG) pueden ser preparados haciendo reaccionar un poliol con una lactida y de preferencia también una glicolida a una temperatura elevada en presencia de un catalizador, el cual hace factible una polimerización de abertura de anillo.

Los poliésteres ramificados que tienen una porción de glucosa central que tienen rayos de cadenas de polilactida-co-glicolida lineales (Glu-PLG) tienen preferiblemente un peso molecular promedio en peso Mw en la escala de aproximadamente 10,000-200,000, de preferencia 25,000-100,000, en especial 35,000-60,000, por ejemplo, aproximadamente 50,000 Da, y una polidispersidad, por ejemplo, de 1.7-3.0, por ejemplo, 2.0-2.5. Las viscosidades intrínsecas de polímeros de estrella de Mw de 35,000 o Mw de 60,000 son de 0.36 dL/g ó 0.51 dL/g, respectivamente, en cloroformo. Un polímero de estrella teniendo un Mw de 52,000 tiene una viscosidad de 0.475 dl/g en cloroformo.

La velocidad deseada de degradación de polímeros y el perfil de liberación deseada para los compuestos de la invención pueden ser variados dependiendo del tipo de monómero, si se emplea un homo- o copolímero o si se emplea una mezcla de polímeros.

V. Método de Tratamiento Los usos y métodos de la presente invención representan una mejora a la terapia existente de varias enfermedades, incluyendo enfermedades y trastornos en donde se encuentra reemplazo de huesos (en especial anormalmente incrementado), también enfermedades malignas en donde se utilizan bisfosfonatos para evitar o inhibir el desarrollo de metástasis ósea o reabsorción excesiva de huesos, ya también en especial para la terapia de enfermedades inflamatorias tales como artritis reumatoide y osteoartritis. Se ha encontrado que el uso de bisfosfonatos para embolizar vasos sanguíneos recientemente formados condujo a la supresión de tumores, por ejemplo, tumores sólidos, y metástasis, por ejemplo, metástasis ósea y aún la reducción del tamaño de tumores, por ejemplo, tumores sólidos, y metástasis, por ejemplo, metástasis ósea, después de períodos apropiados de tratamiento. Se ha observado, utilizando angiografía, que los vasos sanguíneos recientemente formados desaparecen después del tratamiento con bisfosfonato, pero que los vasos sanguíneos normales permanecen intactos. Además, se ha observado que los vasos sanguíneos embolizados no se restauran después de la cesación del tratamiento con bisfosfonato. También se ha observado que los pacientes con metástasis ósea, artritis reumatoide y con osteoartritis experimentan dolor reducido después del tratamiento con bisfosfonato.

Las condiciones del reemplazo de hueso anormal, por ejemplo anormalmente incrementado, que pueden ser tratadas de acuerdo con la presente invención incluyen: tratamiento de reemplazo de hueso anormal relacionado con cáncer (por ejemplo, óseo), tratamiento de osteoporosis pos-menopáusica, por ejemplo, para reducir el riesgo de fracturas osteoporóticas; prevención de osteoporosis pos-menopáusica, por ejemplo, prevención de pérdida de hueso pos-menopáusica; tratamiento o prevención osteoporosis masculina; tratamiento o prevención de osteoporosis inducida por corticoesteroide y otras formas de pérdida de hueso secundaria a o debido a medicamentos, por ejemplo, difenilhidantoina, terapia de reemplazo de hormona tiroidea; tratamiento o prevención de pérdida de hueso asociada con inmovilización y vuelos aéreos; tratamiento o prevención de pérdida de hueso asociada con artritis reumatoide, osteogénesis imperfecta, hipertiroidismo, anorexia nerviosa, trasplante de órganos, aflojamiento de prótesis de articulación, y otras condiciones médicas. Por ejemplo, dichas otras condiciones médicas pueden incluir el tratamiento o prevención de erosiones óseas periarticulares en artritis reumatoide; tratamiento de osteoartritis, por ejemplo, prevención/tratamiento de osteoclerosis subcondrial, quistes óseos subcondriales, formación de osteofito, y de dolor osteoartrítico, por ejemplo, a través de reducción en la presión intra-ósea; tratamiento o prevención de hipercalcemia que resulta de reabsorción de hueso excesiva secundaria a hiperparatiroidismo, tirotoxicosis, sarcoidosis, o hipervitaminosis D, lesiones de reabsorción dental, dolor asociado con cualquiera de las condiciones anteriores, en particular, osteopenia, enfermedad de Paget, osteoporosis, artritis reumatoide, osteoartritis.

Especialmente útil (para uso humano o veterinario) es el tratamiento de una o más enfermedades (este término incluyendo condiciones o trastornos), que involucran reemplazado de hueso anormal asociado con enfermedades de huesos y articulaciones, por ejemplo: - condiciones benignas tales como osteoporosis, osteopenia, osteomielitis, osteoartritis, artritis reumatoide, edema de médula ósea, dolor de huesos, distrofia simpatética refleja, espondilitis anquilosante (aka Morbus Bechterev), enfermedad de Paget de hueso o enfermedad periodontal, - condiciones malignas tales como hipercalcemia de malignidad, metástasis ósea asociada con tumores sólidos malignidades hematológicas, condiciones ortopédicas tales como aflojamiento de prótesis, migración de prótesis, fijación de implante, recubrimiento de implante, curación de fracturas, osteogénesis por confusión, fusión espinal, osteonecrosis avascular, injerto de hueso, substitutos de hueso, o cualquier combinación de dos o más de dichas condiciones.

Claro que la dosis apropiad de las formulaciones de depósito de la invención variarán, por ejemplo, dependiendo de la condición que será tratada (por ejemplo, el tipo de enfermedad o la naturaleza de resistencia), el fármaco utilizado, el efecto deseado y el modo de administración.

Específicamente, con una formulación de depósito de acuerdo con la invención se obtienen resultados satisfactorios en la administración, por ejemplo, administración parenteral, a dosis del orden de aproximadamente 0.2 mg a aproximadamente 100 mg, por ejemplo, de 0.2 mg a aproximadamente 35 mg, de preferencia de aproximadamente 3 mg a aproximadamente 100 mg del compuesto de la fórmula I (calculado con base en su forma libre) de la invención por inyección por mes o de aproximadamente 0.03 a aproximadamente 1.2 mg, por ejemplo, 0.03-0.3 mg por kilogramo del peso del cuerpo por mes. Las dosis mensuales adecuadas para pacientes de esta manera son del orden de aproximadamente 0.3 mg a aproximadamente 100 mg de un compuesto de la fórmula I (calculado con base en su forma libre, también usado aquí en la forma de la sal y/o cristal).

Las composiciones farmacéuticas en una forma más general que contienen un compuesto de la fórmula I como forma cristalina de la forma libre (zwiteriónica) o una sal escasamente soluble de un compuesto de la fórmula I o en especial una forma cristalina de dicha sal (incluyendo un solvato, por ejemplo, hidrato, en especial un dihidrato, de dicha sal) como se describió anteriormente y más adelante, son aquellas para administración enteral, tal como oral, o rectal y parenteral, a animales de sangre caliente, el ingrediente activo farmacológico estando presente solo o junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Estas composiciones farmacéuticas novedosas adicionales comprenden, por ejemplo, de aproximadamente 0.0001 a 80%, de preferencia de aproximadamente 0.001 a 10% del ingrediente activo. Las composiciones farmacéuticas para administración enteral o parenteral son, por ejemplo, aquellas en formas de dosis unitarias tales como grageas, tabletas, cápsulas o supositorios, así como ampollas, frascos, jeringas pre-llenadas. Estas composiciones farmacéuticas se preparan en una forma conocida per se, por ejemplo, a través de métodos convencionales de mezclado, granulación, confección, disolución o liofilización. Por ejemplo, se pueden obtener composiciones farmacéuticas para administración oral combinando el ingrediente activo con vehículos sólidos, opcionalmente granulando una mezcla resultante y procesando la mezcla o granulado, si se desea o si es necesario después de la adición de excipientes adecuados, a núcleos de tabletas o grageas.

Los vehículos adecuados en particular son llenadores tales como azúcar, por ejemplo, lactosa, sacarosa, manitol o sorbitol, preparaciones de celulosa y/o fosfatos de calcio, por ejemplo, fosfato tricálcico o bifosfato de calcio, y también aglutinantes tales como pastas de almidón, por ejemplo, almidón de maíz, arroz, o papa, gelatina, tragacanto, metilcelulosa y/o polivinilpirrolidona, y/o si se desea, agentes de desintegración, tales como los almidones antes mencionados, también almidón de carboximetilo, polivinilpirrolidona entrelazada, agar, ácido algínico o una sal del mismo tal como alginato de sodio. En particular, los excipientes son agentes de desliz y lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico o sales de los mismos tales como estearato de magnesio o estearato de calcio, y/o polietilen glicol. Los núcleos de grageas se proporcionan con recubrimientos adecuados, los cuales pueden ser resistentes a los jugos gástricos, utilizando entre otros soluciones de azúcar concentradas que pueden contener goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, polietilen glicol y/o dióxido de titanio, soluciones de goma laca en solventes orgánicos adecuados o mezclas de solventes, o para la preparación de recubrimientos que son resistentes a los jugos gástricos, soluciones de preparaciones de celulosa adecuadas tales como ftalato de acetil celulosa o ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa. Se pueden agregar colorantes o pigmentos a los recubrimientos de tabletas o grageas, por ejemplo, para identificar o indicar diferentes dosis del ingrediente activo.

Otras composiciones farmacéuticas para administración oral son cápsulas llenadas en seco hechas de gelatina o hipromelosa y también cápsulas selladas suaves que consisten de gelatina y plastificante tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas llenadas en seco pueden contener el ingrediente activo en la forma de gránulos, por ejemplo, en mezcla con llenadores tales como lactosa, aglutinantes tales como almidones, y/o agentes de desliz tales como talco o estearato de magnesio, y opcionalmente estabilizadores. En cápsulas suaves, el ingrediente activo de preferencia se disuelve o suspende en un líquido adecuado, tal como un aceite graso, aceite de parafina o un polietilen glicol líquido, al cual también se puede agregar un estabilizador.

Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración rectal son, por ejemplo, supositorios, los cuales consisten de una combinación del ingrediente activo con una base para supositorio. Ejemplos de bases de supositorio adecuadas son triglicéridos naturales o sintéticos, hidrocarburos de parafina, polietilen glicoles y alcandés superiores. También es posible utilizar cápsulas rectales de gelatina que contienen una combinación del ingrediente activo con un material de base. Los materiales de base adecuados son, por ejemplo, triglicéridos líquidos, polietilen glicoles e hidrocarburos de parafina.

Las formas de dosis particularmente adecuadas para administración parenteral (la cual es la preferida) son soluciones acuosas de un ingrediente activo en forma soluble en agua, por ejemplo, una sal soluble en agua. La solución puede ser ajustada con ácidos o bases inorgánicas u orgánicas a un valor de pH fisiológicamente aceptable de aproximadamente pH 4-9, o muy preferiblemente de alrededor de 5.5 - 7.5. Las soluciones además pueden hacerse isotónicas con sales inorgánicas como cloruro de sodio, o compuestos orgánicos tales como azúcares, alcoholes de azúcar, o aminoácidos, muy preferiblemente con manitol o glicerol. Las composiciones adecuadas también son las suspensiones del ingrediente activo, tales como suspensiones de inyección oleosas correspondientes, para las cuales se utilizan solventes o vehículos lipofílicos adecuados tales como aceites grasos, por ejemplo, aceite de ajonjolí, o ésteres de ácido graso sintéticos, por ejemplo, oleato de etilo o triglicéridos, o suspensiones acuosas para inyección que contienen substancias que incrementan la viscosidad, por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio, sorbitol y/o dextrana, y opcionalmente también estabilizadores.

La presente invención también se refiere a formas del compuesto de la fórmula I (incluyendo una sal, una forma cristalina, y/o una formulación de depósito) preferiblemente para el tratamiento de condiciones inflamatorias, principalmente enfermedades asociadas con daño del metabolismo del calcio, por ejemplo, enfermedades reumáticas y, en particular, osteoporosis.

Las dosis parenterales por abajo de 0.1 pg/kg del peso del cuerpo afectan el metabolismo del tejido duro solo de manera insignificante. Pueden ocurrir efectos laterales tóxicos a largo plazo a dosis por arriba de 1000 pg/kg del peso del cuerpo. Las formas de los compuestos de la fórmula I de acuerdo con la invención pueden ser administradas oralmente, así como de forma subcutánea, intramuscular o intravenosa en solución iso- o hipertónica. Las dosis diarias preferidas están, para administración oral, en la escala de aproximadamente 1 a 100 mg/kg, para administración intravenosa, subcutánea e intramuscular en la escala de aproximadamente 20 a 500 pg/kg.

La dosis de las formas de los compuestos de la fórmula I (basándose en el peso del compuesto de la fórmula I como tal), sin embargo, puede ser variable y depende de las condiciones respectivas tales como la naturaleza y severidad de la enfermedad, la duración del tratamiento y del compuesto respectivo. La forma de dosis unitaria para administración parenteral, . por ejemplo, intravenosa contiene, por ejemplo, de 10 300 pg/kg del peso del cuerpo, de preferencia de 15 a 150 pg/kg del peso del cuerpo; y las formas de dosis unitaria orales contienen por ejemplo de 0.1 a 5 mg, de preferencia de 0.15 a 3 mg por kilogramo del peso del cuerpo. La dosis individual preferida para administración oral es de 10 a 200 mg y, para administración intravenosa, de 1 a 10 mg. Son necesarias dosis más altas para administración oral para la absorción limitada. En un tratamiento prolongado, la dosis normalmente puede ser reducida a un nivel más bajo después de una dosis inicialmente más alta con el fin de mantener el efecto deseado. Las dosis parenterales (por ejemplo, intravenosa o subcutánea) pueden ser administradas intermitentemente a intervalos regulares de entre 1 y 52 veces por año. Las dosis orales pueden ser administradas en forma regular en un régimen de dosificación diaria, semanal, mensual o cuatrimestral. Para formulaciones de depósito, de acuerdo con la invención, las dosis mencionadas anteriormente son preferidas.

Las propiedades de las formulaciones de depósito, sales, formas de cristal y composiciones farmacéuticas de la invención pueden ser probadas en pruebas estándares con animales o ensayos clínicos, por ejemplo, como sigue: Las siguientes publicaciones (cada una de las cuales se incorpora aquí para referencia, especialmente con respecto a la descripción de los ensayos o métodos mencionados más adelante ahí) describen varios ensayos y métodos que pueden ser usados para confirmar el perfil biológico ventajoso de los compuestos de la fórmula I: Los efectos de una administración i.v. individual a ratas maduras ovariectomizadas (OVX) como un modelo para osteoporosis pos-menopáusica con el fin de producir (1) los cambios temporales en marcadores bioquímicos de reemplaza de hueso y densidad mineral del hueso femoral (BMD), (2) para medir cambios de parámetros histomorfométricos estáticos y dinámicos, micro-arquitectura ósea y resistencia mecánica, y (3) para determinar los efectos preventivos de tratamiento crónico con un compuesto de la fórmula I en estos parámetros, pueden ser demostrados como se describe en Calcif. Tissue Int. (2003) 72, 519-527. Aquí se puede encontrar alta actividad.

El efecto de un compuesto de la fórmula I (en la preparación de las siguientes descripciones de posibles ensayos biológicos que incluyen una o ambas de las formas de sal así como las formas de cristal descritas aquí) en inflamación sinovial, daño estructural a articulaciones, y metabolismo de hueso en ratas durante la fase efectora de artritis inducida por colágeno (CIA) puede ser demostrado como se muestra en ARTHRITIS & RHEUMATISM (2004), 50(7), 2338-2346.

El efecto de un compuesto de la fórmula I sobre el crecimiento hacia adentro de huesos puede ser examinado en un modelo de animal en donde se colocaron implantes de tantalio poroso bilateralmente dentro de cúbitos de perros como se describe en J. Bone Joint Surg. (2005), 87-B, 416-420.

La inhibición de crecimiento de tumor esquelético en un modelo de ratón puede demostrarse de acuerdo con el método descrito en J. Nati. Cáncer. Inst. (2007), 99, 322 - 30.

La estructura de rayos X de los compuestos de la fórmula I cuando se unen a farnesil pirofosfato sintasa puede ser obtenida a través de o en analogía con los métodos descritos en Chem. Med. Chem. (2006), 1, 267 - 273. FPPS humana, una enzima homodimérica de 41 kDa subunidades, cataliza la síntesis de dos pasos del metabolito C15 de farnesil pirofosfato (FPP) a partir de isprenoides dimetilalil pirofosfato C5 (DMAPP) e ¡sopentenil pirofosfato. FPP se requiere para la prenilación de pos-traducción de proteínas de señalización esenciales GTPase tales como Ras y Rho y también es un precursor para la síntesis de colesterol, dolichol, y ubiquinona.

Por ejemplo, en un ensayo in vitro libre de célula, se puede mostrar la superioridad de los compuestos de la fórmula I sobre los compuestos ya conocidos. Brevemente, la reacción prosigue en presencia de la enzima y un inhibidor de la fórmula I, y el producto de reacción (farnesil pirofosfato) es cuantificado a través de LC/MS/MS.

En detalle, el inhibidor y la enzima son pre-incubados antes de agregar los substratos.

El ensayo es un ensayo libre de marca para farnesil pirofosfato sintasa (FPPS) basado en LC/MS/MS. Este método cuantifica farnesil pirofosfato (FPP) no marcado in vitro y es adecuado para clasificación de alto rendimiento (HTS) para encontrar inhibidores de FPPS y para las determinaciones de valores de IC50 de compuestos candidato. El tiempo de análisis es de 2.0 minutos con un tiempo de ciclo total de 2.5 minutos. El análisis puede ser formateado para placas de 384 cavidades dando lugar a un tiempo de análisis de 16 horas por placa.

Reactivos: El pentanol, metanol y alcohol isopropílico son de grado HPLC y se obtuvieron de Fisher Scientific. DMIPA es de Sigma-Aldrich. El agua es de un sistema Milli-Q casero. El regulador de pH de ensayo (20 mM HEPES, 5 mM MgCI2 y 1 mM CaCI2) se preparó a través de dilución de soluciones de abastecimiento 1 mM obtenidas de Sigma-Aldrich. Los estándares de geranil pirofosfato (GPP), isoprenil pirofosfato (FPP), y farnesil S-tiolopirofosfato (FSPP) son de Echelon Biosciences (Salt Lake City, UT). La farnesil pirofosfato sintasa humana (FPPS, Swissprot ID: P14324) (13.8 mg/m) se preparó como se describió por Rondeau y otros (ChemMedChem 2006, 1, 267-273.

Ensayo: Se realizaron análisis de LC/MS/MS en un analizador de masa cuádruple en tándem Micromass Quattro Micro (Waters Corp., Milford, MA, USA) interconectado a una bomba Agilent 1100 binary LC Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA). Se realizó la inyección con un auto-muestreador Analytics (Leap Technologies Inc., Carrboro, NC, USA) utilizando un tamaño de bucle de inyección de 2.5 pL. Se realizó la cromatografía en una columna de seguridad de 5 pm Waters 2.1 x 20 mm Xterra MS C18 (P/N186000652) (Waters Corp., Milford, MA, USA) contenida en un soporte de columna de seguridad (P/N 186000262) utilizando DMI PA/metanol al 0.1% como solvente A y DMIPA/agua al 0.1% como solvente B (DMIPA es dimetilisopropilamina). El gradiente es A al 5% de 0.00 a 0.30 minutos, A al 50% a 0.31 minutos, A al 80% a 1.00 minutos, y A al 5% de 1.01 a 2.00 minutos. La velocidad de flujo es de 0.3 ml/minuto, y el flujo se desvió a desperdicio de 0.00 a 0.50 minutos y otra vez de 1.20 a 2.00 minutos.

Las transiciones de Verificación de Reacción Múltiple (MRM) son 381?79- para FPP y 397?159- para FSSP a una energía de colisión de 22 eV y una presión de celda de colisión de 2.1 x 10-3 mbarias de Ar. El tiempo de residencia por transición es de 400 mseg. con un espacio de 0.4 Da. El retraso de inter-canal y el retraso de inter-exploración ambos son de 0.02 mseg. Otros parámetros de operación espectrométricos masivos son: capilar, 2.0 kV; cono, 35 V; extractor, 2.0 V, temp. de fuente, 100 °C; temp. de gas de desolvación, 250 °C; flujo de gas de desolvación, 650 L/hr; flujo de gas de cono, 25 L/hr; multiplicador, 650 V.

El tiempo de ciclo total por muestra es de 2.5 minutos. Ya que el análisis se formateó para placas de 384 cavidades, una placa se analizó en 16 horas. Los cromatogramas se procesaron utilizando el software Quanlynx, el cual divide el área de picos de FPP individuales entre el área de los picos de FSPP (estándar interno). Los valores resultantes se reportaron como la respuesta relativa para la cavidad de muestra correspondiente.

Procedimiento de Ensayo de FPPS En cada cavidad de una placa de 384 cavidades, se colocaron 5 pL del compuesto en DMSO/agua al 20%. Se agregaron 10 pl_ de FPPS (diluido 1 a 80000 con regulador de pH de ensayo) a cada cavidad y se dejaron pre-incubar con el compuesto durante 5 minutos. En ese momento, después se agregaron 25 pL de GPP/IPP (5 pM cada uno en regulador de pH de ensayo) para iniciar la reacción. Después de 30 minutos, la reacción se detuvo a través de la adición de 10 pL de 2 pM FSPP en DMIPA/IPA al 2%. La mezcla de reacción después se extrajo con 50 pL de n-pentanol utilizando mezclado de remolino. Después de la separación de fase, se transfirieron 25 pL de la capa superior (n-pentanol) a una nueva placa de 384 cavidades y el pentanol se evaporó utilizando una centrífuga a vacío. El residuo seco se reconstituyó en 50 pL de DMIPA/agua al 0.1% para análisis a través del método de LC/MS/MS.

Se utilizó FSPP como el estándar interno para los espectros masivos. Una porción de fosfato generó un ion (M-H)- como el pico base en los espectros.

Los compuestos de la invención preferiblemente, en este sistema de prueba, tienen una IC50 en la escala de 0.8 a 10 nM, las preferidas de preferencia de 0.9 a 3.3 nM, (por ejemplo, en el caso de experimentos con ácido [2-(5-etil-imidazol-1-il)-1-hidroxi-1-fosfono-etil]-fosfónico en la escala de 2.4 a 3.1 nM). Especialmente, muestran, por ejemplo, ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico, una superioridad sorprendente sobre los compuestos en la técnica anterior. La utilidad del ensayo para las determinaciones de IC50 se valido usando ácido zoledrónico, un inhibidor de bisfosfonato conocido de FPPS.

La formulación de depósito, las sales y las formas de cristal, así como las composiciones de la invención, son bien toleradas.

La invención también se refiere a las modalidades dadas en las reivindicaciones, especialmente las reivindicaciones dependientes, de manera que dichas reivindicaciones es incorporan aquí para referencia, así como especialmente a las modalidades de la invención provistas en los siguientes Ejemplos.

También el Resumen se incorpora aquí para referencia, que también describe modalidades de la invención.

Preparación general de los compuestos de la Fórmula I: Un compuesto de la fórmula I puede ser preparado de acuerdo con métodos que, para compuestos diferentes, son conocidos en la técnica. Por ejemplo, basándose por lo menos en los productos novedosos obtenidos y/o los eductos novedosos empleados, se prefiere un procedimiento novedoso que comprende hacer reaccionar un compuesto de ácido carboxílico de la fórmula II, (li) donde P y R2 son como se definieron para un compuesto de la fórmula I, con oxihalogenuro de fósforo para dar un compuesto de la fórmula I, o una sal del mismo, y, si se desea, convertir un compuesto libre obtenible de la fórmula I a su sal, convertir una sal obtenible de un compuesto de la fórmula I al compuesto libre y/o convertir una sal obtenible a un compuesto de la fórmula I a una sal diferente del mismo.

Como oxihalogenuro de fósforo, es especialmente preferido el oxicloruro de fósforo (POCI3). La reacción de preferencia toma lugar en un solvente o mezcla de solvente de costumbre, por ejemplo, en un hidrocarburo aromático, tales como tolueno, de preferencia a temperaturas elevadas, por ejemplo, en la escala de 50°C a la temperatura de reflujo de la mezcla de reacción, por ejemplo, de (aproximadamente) 80 a (aproximadamente) 120°C.

Los materiales de partida de la fórmula II, por ejemplo, pueden ser obtenidos saponificando un compuesto de la fórmula III, en donde y R2 como se define para un compuesto de la fórmula I y R es alquilo no substituido o substituido, en especial alquilo inferior o fenilalquilo inferior, en presencia de un ácido apropiado, por ejemplo, un ácido hidrohálico, tal como ácido clorhídrico, de preferencia en presencia de un solvente acuoso, tal como agua, preferiblemente a temperaturas elevadas, por ejemplo, en la escala de (aproximadamente) 50 a (aproximadamente) 100°C, por ejemplo, de 80 a 100°C, para dar el compuesto de la fórmula II, o una sal del mismo.

Un compuesto de la fórmula III, por ejemplo, preferiblemente, puede ser obtenido haciendo reaccionar un compuesto imidazol de la fórmula IV, (IV) en donde Ri y R2 son como se define para u n compuesto de la fórmula I, con un éster de la fórmula V, (V) en donde R es como se define para un compuesto de la fórmula III y X es halógeno, especialmente fluoro, cloro, yodo, o especialmente bromo, alcansulfoniloxi inferior o toluensulfoniloxi, de preferencia en presencia de una base fuerte, tal como un alcoholato de metal alcalino, en especial ter-butilato de potasio, en un solvente apropiado o mezcla de solvente, por ejemplo, un éter cíclico, tal como tetrahidrofurano, de preferencia a temperaturas en la escala de (aproximadamente) -10 a (aproximadamente) 80°C, por ejemplo, de 20 a 30°C. Cuando se. requiere, las mezclas resultantes de los compuestos de la fórmula III (en donde en un compuesto Ri es alquilo de 2 a 5 átomos de carbono y R2 es hidrógeno, en el otro R2 es alquilo de 2 a 5 átomos de carbono y Ri es hidrógeno) pueden ser separadas, por ejemplo, a través de métodos cromatográficos, cristalización diferencial, o similares.

Los materiales de partida de las fórmulas IV y V, así como otros materiales de partida empleados no descritos antes, pueden ser obtenidos a través de métodos que son bien conocidos en la técnica o en analogía a los mismos, están comercialmente disponibles y/o pueden hacerse en analogía a métodos descritos aquí.

Los siguientes Ejemplos sirven para ilustrar la invención son limitar su alcance.

Los siguientes compuestos de la fórmula I se obtienen como se describe en los siguientes Ejemplos de Referencia: Si no se menciona de otra manera, las temperaturas se dan en grados Celsius (°C). Cuando no se menciona la temperatura, la reacción u otro paso de método toman lugar a temperatura ambiente.

Abreviaturas Ac. acetilo ac. acuoso DMSO sulfóxido de dimetilo Et etilo h hora(s) HPLC cromatografía líquida de alto rendimiento KOtBu ter-butilato de potasio Me metilo mi mililitro(s) NMR Resonancia Magnética Nuclear rt temperatura ambiente THF tetrahidrofurano 4- y 5-etilimidazol y otros derivados de imidazol se preparan de acuerdo con D. Horne y otros, Heterocycles, 1994, Vol. 39, No. 1, p.139-153.

Ejemplo de Referencia 1: ácido í2-(4-Etil-imidazol-1 -ih-1 -hidroxi-1 -fosfono-etill-fosfónico (también denominado Compuesto A o Comp. A de aquí en adelante) Se disolvieron 650 mg (3.38 mmoles) de ácido (4-etil-imidazol- 1 -il)-acético en 15 mi tolueno a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se agregaron 852 mg (3 mmoles) de H3P03 y la mezcla se calentó a 80°C. Se agregaron gota a gota 0.936 mi (3 mmoles) de POCI3. La mezcla resultante se calentó a 120°C y se agitó durante la noche. El solvente se decantó, se agregaron 15 mi 6N HCI y la mezcla se calentó durante tres horas a reflujo.

La solución amarillo pálido resultante se concentró al vacío. Después de la dilución con acetona (25 mi) la mezcla se agitó vigorosamente con acetona (5 x 25 mi) hasta que se formó un sólido gris. El sólido gris se secó a alto vacío y se cristalizó a partir de EtOH/agua para dar el compuesto del título. HPLC-MS: t = 0.31 min, (M-H)- = 299; 1 H-NMR (D20/NaOD): d = 1.07 (t, 3H), 2.53 (q, 2H), 4.45 (t, 2H), 7.08 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 31P-NMR (D20/NaOD): d = 15.04 ppm Resumen de Síntesis: Condiciones de HPLC-MS: Columna: XTerra (Waters Corp., Milford, MA, USA) 3x30 mm, 2.5µ?t?, C18 Solvente A: agua, 5% acetonitrilo, 1% HCOOH Solvente B: acetonitrilo, 1% HCOOH Gradiente: min % B 0,0 01 0,5 01 2,5 30 3,5 95 4,5 95 4,9 01 Los materiales de partida se prepararon como Paso 1: éster etílico del ácido (4-etil-imidazol-1 -il)-acético y éster etílico del ácido (5-et i l-i m idazol- 1 -iD-acético Se disolvieron 5.02 g (50 mmoles) de 4-etilimidazol en 100 mi de THF a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se agregaron 5.9 g (52 mmoles) KOtBu y la reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Se agregaron gota a gota 6.3 mi (55 mmoles) de bromoacetato de etilo durante un período de 30 minutos y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas. Se agregaron 20 mi H20 y 130 mi AcOEt, la capa orgánica se separó y la capa acuosa se lavó otra vez 2 x con 100 mi de AcOEt. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgS0 y se concentró al vacío. La reacción se purificó a través de cromatografía de vaporización instantánea (gel de sílice, MeOH/cloruro de metileno) para dar éster etílico del ácido (4-etil-imidazol-1 -il)-acético y éster etílico del ácido (5-etil-imidazol-1-il)-acético, respectivamente.

Ester etílico del ácido (4-etil-imidazol -1 -il)-acético: HPLC-MS: t = 0.60 min; 100 área%, MH + = 183; 1 H-NMR (d6-DMSO) d = 1.09 (t, 3H), 1.18 (t, 3H), 2.43 (q, 2H), 4.13 (q, 2H), 4.83 (s, 2 H), 6.78 (s, 1H), 7.43 (s, 1H) Ester etílico del ácido (5- Et¡ I- im id azo I- 1 -il)-acético: HPLC-MS : t = 0.72 min, 100 área%, MH + =183; 1 H-NMR (d6-DMSO): d = 1.12 (t, 3H), 1.18 (t, 3H), 2.40 (q, 2H), 4.14 (q, 2H), 4.85 (s, 2H), 6.61 (s, 1H), 7.48 (s, 1H) Paso 2: ácido-(4-etil-imidazol-1 - i I) -acético Se disolvieron 1.7 g (9.5 mmoles) de éster etílico del ácido (4-etil-imidazol-1 -i l)-acét ico en 47 mi (190 mmoles) 4N HCI y la mezcla se calentó a reflujo. Después de 2 horas, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se removió al vacío. El producto resultante se utilizó son purificación adicional. MS: MH + = 155, 1H-NMR (DMSO): d = 1.18 (t, 3H), 2.65 (q, 2H), 5.07 (s, 2H), 7.43 (d, 1H). 9.0 (d, 1H) Ejemplo de Referencia 2: ácido f2-(5-etil-imidazol-1 - i I > - 1 -hidroxi-1 -fosfono-etill-fosfónico Se sintetizó ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico de acuerdo con la síntesis presentada anteriormente a partir del éster etílico del ácido (5-etil-imidazol-1 -il)-acético correspondiente, el cual es el segundo producto del paso 1 en el Ejemplo 1.

HPLC-MS: t = 0.32 min, (M-H)- = 299; 1 H-NMR (D20/NaOD): d = 1.10 (t, 3H), 2.63 (q, 2H), 4.43 (t, 2H), 6.95 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 31P-NMR (D20/NaOD): d = 14.96 ppm En analogía con los procedimientos antes descritos, se prepararon los siguientes compuestos: Ejemplo de Referencia 3: ácido r2-(4-propil-imidazol-1 -hidrox¡-1 -fosfono-etill-fosfónico HPLC-MS: t = 0.44 min, (M-H)- = 313.1; 1 H-NMR (D20/NaOD): d 0.78 (t, 3H), 1.52 (m, 2H), 2.52 (t, 2H), 4.50 (t, 2H)7.13 (s, 1H), 8. (s, 1H); 31P-NMR (D20/NaOD) d = 15.25 ppm Ejemplo de Referencia 4: ácido r2-(5-propil-imidazol-1 -hidroxi-1 -fosfono-eti II -fosf ó n ico HPLC-MS: t = 0.46 min, (M-H)- = 313.1; 1 H-N R (D2Ó/NaOD) 0.81 (t, 3H), 1.51 (m, 2H), 2.60 (t, 2H), 4.44 (t, 2H), 6.96 (s, 8.54 (s, 1H); 31P-NMR (D20/NaOD) d = 15.06 ppm Ejemplo de Referencia 5: ácido r2-(4-butil-imidazol-1 -il)-1¦ hidroxi-1 -fosfono-etin-fosfónico HPLC-MS: t = 0.56 min, (M-H)- = 327.2; 1 H-NMR (D20/NaOD): d 0.73 (t, 3H), 1.17 (m, 2H), 1.46 (m, 2H), 2.51 (t, 2H), 4.44 ( t, 2H ) 7.09 (s, 1H), 8.40 (s, 1H); 31P-NMR (D20/NaOD): d = 14.98 ppm Ejemplo de Referencia 6: ácido r2-(5-butil-imidazol-1 -ih-1 -hidroxi-1 -f osfono-etilT-fosf ónico HPLC-MS: t = 0.44 min, (M-H)- = 327.2; 1 H-NMR (D20/NaOD): d = 0.79 (t, 3H), 1.27 (m, 2H), 1.51 (m, 2H), 2.67 (t, 2H), 4.49 (t, 2H), 6.99 (s, 1H), 8.58 (s, 1H); 31P-NMR (D20/NaOD): d = 15.16 ppm Ejemplo de Referencia 7: ácido f 1 -hidroxi-2-(4-isopropil-imidazol-1 -il)-1-fosfono-etiH-fosfónico HPLC-MS: t = 0.42 min, (M-H)- = 313; 1 H-NMR (d6-DMSO): d = 1.13, 1.15 (d, 6H), 2.86-2.95 (m, 1H), 4.49 (t, 2H), 7.12 (s, 1H), 8.46 (s, 1H); 31P-NMR (d6-DMSO): d = 15.35 ppm Ejemplo de Referencia 8: ácido GG1 -hidroxi-2-(5-isopropíl-imidazol-1-il)-1 -fosfono-etill-fosfónico HPLC-MS: t = 0.40 min, (M-H)- = 313; 1 H-NMR (d6-DMSO): d = 1.10, 1.12 (d, 6H), 3.12-3.19 (m, 1H), 4.52 (t, 2H), 7.01 (s, 1H), 8.56 (s, 1H); 31P-NMR (d6-D SO): d = 15.24 ppm Ejemplo de Referencia 9: ácido f(2-f4-(1 -Etii-propih-imidazol- -¡11-1 -hidroxi-1 -fosfono-etilV-fosfónico HPLC-MS: t = 0.55 min, (M-H)- = 341; 1 H-NMR (d6-DMSO): d = 0.80 (m, 6H), 1.50-1.75 (m, 4H), 2.49-2.60 (m, 1H), 4.52 (bs, 2H), 7.40 (s, 1H), 8.90 (s, 1 H).

Ejemplo de Referencia 10: ácido (2-G5-? -etil-propil)-imidazol-1 -i H-1 - hidroxi-1 -fosfono-etil)-fosfónico 1 H-NMR (d6-DMSO): d = 0.77 (m, 6H), 1.40-1.60 (m, 4H), 2.97 (t, 1H), (4.44 (t, 2H), 6.60 (s, 1H), 7.92 (s, 1H).

Ejemplo 1 ¡Procedimiento de fabricación para la sal de Ca de ácido f2-(5-Etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etill - fosfónico (1 : 2) Se disolvieron 3.5 g (11.67 mmoles) de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico en 540 mi de agua desionizada a 90°C. A esta solución, en 1 minuto a 90°C se agregó una solución caliente de 667 mg (5.83 mmoles) de cloruro de calcio en 10 mi de agua. La mezcla de reacción se enfrió a 20°C durante 14 horas y la suspensión se filtró. El sólido se lavó con 2 x 50 mi de agua de hielo y se secó a 60°C y 5 mbarias. Se obtuvo la sal de calcio de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi- -fosfono-etil]-fosfónico (1:2).

Ejemplo 2: Procedimiento de fabricación para la sal de Zn de ácido r2-(5-Etil-imidazol-1 - i I > - 1 -hidroxi-1 -fosfono-etill- fosfónico (1 : 2) Se disolvieron 3.5 g (11.67 mmoles) de ácido [2-( 5-eti I-imidazol-1-il)-1-hidroxi-1-fosfono-etil]-fosfónico en 540 mi de agua desionizada a 90°C. A esta solución, en 1 minuto 1 a 90°C se agregó una solución caliente de 811 mg (5.83 mmoles) cloruro de zinc y se agregaron 10 mi de agua. La mezcla de reacción se enfrió a 20°C y se secó a 60°C para producir la sal de zinc de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico (1:2).

Ejemplo 3: Micronización de las sales a partir de los Ejemplos 1 y 2 v fabricación de micropartículas de acurdo con la invención con las sales micronizadas a) Micronización (i) Molienda La sal seca de Ca del Ejemplo 1 y la sal seca de Zinc del Ejemplo 2 se molieron en un molino de chorro de aire de cerámica (presión de gas de molienda de 5 barias) (ii) Partículas Resultantes Antes de la molienda de la sal de Ca, las partículas tienen un tamaño de hasta aproximadamente 150 µ??. Después de la molienda, las partículas tienen un tamaño menor que 10 pm de acuerdo con la microscopía.

En el caso de la sal de zinc, las partículas antes de la molienda tienen un tamaño de hasta aproximadamente 100 µ?t?. después de la molienda, las partículas presentan tamaños por abajo de 5 pm. b) Fabricación de micropartículas Se disolvieron 3.1 g de PLGA 50:50 con una viscosidad inherente de 0.38 dL/g (Lactel®) en 15.5 mi de diclorometano para formar una solución clara al 20% (m/V) PLGA. Se dispersaron 0.9 g de la sal de Ca de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico del Ejemplo 1 (ensayo del ácido libre al 89.0%) en la solución de PLGA utilizando un mezclador de alto esfuerzo cortante (Ultra Turrax, S25N-10G) a 20?00 rpm durante 4 minutos bajo enfriamiento en un baño de hielo-agua. La suspensión resultante se denomina como la fase orgánica.

Se disolvieron 25 g de alcohol polivinílico 18-88 (PVA de aquí en adelante), 11.3 g de trihidrato acetato de sodio y 25.0 g de ácido acético glacial en 5 litros de agua. Esta solución de PVA a 0.5% -100 mM regulador de pH de acetato con un pH de 4 se denomina como la fase acuosa.

La fase orgánica se mezcló con la fase acuosa a través de un dispositivo de alto esfuerzo cortante en línea con dos flujos de entrada y un flujo de salida a una relación de velocidad de flujo de 30:600 ml/minuto y a 3800 rpm. La emulsión resultante se recogió en un reactor de doble pared llevando ya un volumen de partida de 170 mi de fase acuosa bajo agitación con un agitador de propulsor a 400 rpm.

El diclorometano se removió a través de evaporación que se facilitó a través de agitación continua del lote con 400 rpm, calentando el lote a 50°C en 5 horas, manteniendo esta temperatura durante 2 horas más. Durante este tiempo la fase de gas cerca de la superficie de la emulsión se intercambió utilizando vacío.

Después de enfriar a temperatura ambiente otra vez se formó un sedimento de micropartículas durante 12 horas. El sobrenadante se removió a gran grado. Las micropartículas se volvieron a suspender de nuevo en el sobrenadante resultante y se-aislaron a través de filtración sobre 5 pm. Las micropartículas se lavaron 4 veces con aproximadamente 50 mi de agua y se secaron al vacío durante 3 días. Finalmente, las micropartículas secas se desaglomeraron a través de un tamiz con un tamaño de malla de 140 pm. Se obtuvieron 2.32 g de micropartículas como un polvo fino blanco. La imagen microscópica electrónica mostró perfectamente partículas esféricas de superficie suave. La distribución de tamaño de micropartícula se encontró a través de difracción de luz láser como sigue: x10: 15.6 pm, x50: 35.8 pm, x90: 53.7 pm. Un ensayo de substancia de fármaco de 14.7% se encontró a través de HPLC que corresponde a una eficacia de encapsulación de 74%. Después de 24 horas solo el 1.9% de la substancia de fármaco se liberaron en una prueba de liberación in vitro en un regulador de pH con un pH de 7.4 a 37°C, lo cual muestra que esta formulación ventajosamente evita una liberación demasiado rápida.

El siguiente Cuadro resume la formulación clave, procedimientos y datos analíticos del Ejemplo 1 y Ejemplos adiciones 2-4 de microparticulas de la sal de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etilj-fosfónico (ver cuadro de composición) preparadas análogamente al Ejemplo 1. './i O Cuadro 1. Formulación, procedimiento y datos analíticos DS representa substancias de fármacos, L:G la relación molar de ácido láctico a glicolida en el comonómero. En los Ejemplos 1 y 3, Lactel® se utiliza como PLGA, en los Ejemplos 2 y 4 Resomer® RG 753 S (ver Cuadro II anterior).

Esto muestra muy claramente que en este caso la formulación de micropartículas de la sal de Ca del Ejemplo 3A muestra la cinética de liberación más ventajosa solo con una liberación muy baja en el día 1 y menor que 60% de liberación hasta el día 21 del compuesto de la fórmula I.

Al utilizar imágenes microscópicas electrónicas de barrido (las muestras se salpicaron con oro-paladio y se investigaron a través de un microscopio electrónico de barrido de las micropartículas de las formulaciones del Ejemplo 3A, 3B, 3C y 3D), es evidente que en el caso de las partículas de la sal de Zn (Ejemplos 3C y 3D), la substancia de fármaco aparentemente no está encapsulada a todo o solo a un grado menor: las partículas de substancia de fármaco pueden ser observadas sobre la superficie de las partículas, y nada de substancia de fármaco puede ser vista en la matriz de polímero en secciones transversales. Para la representación de superficie, las micropartículas son transferidas a soportes de objeto adecuados, salpicados con 20 nm de oro y examinados con el microscopio electrónico de barrido (Camscan CS 24/EO, Id. G. 16,MIK,S008). Para las vistas en sección transversal, se prepararon secciones transversales embebiendo las partículas en Araldite F (marca comercial de Ciba Specialty Chemicals, Basle, Suiza; resina epóxica) y cortando secciones semi-delgadas (espesor de aproximadamente 1 pm). Las secciones se salpicaron con oro y también se examinaron en SE .

En contraste, las imágenes de las micropartículas de sal de Ca (Ejemplos 3A, 3B) demuestran la encapsulación más eficaz comparado con la sal de Zn. Sin embargo, se pueden seguir viendo algunas partículas de substancia en la superficie de la formulación de PLGA 75:25 (Ejemplo 3B) que explica el alto efecto de reventamiento (alta liberación las primeras 24 horas). En contraste, la formulación de sal de Ca con PLGA 50:50 no mostró nada de substancia de fármaco en toda la superficie. En la sección transversal de partículas se pueden observar partículas de substancia de fármaco.

Ejemplo 4: Estudio de tolerabilidad de la sal de calcio de micropartículas del compuesto A en ratas después de administración s.c Las micropartículas del Ejemplo 3A se suspendieron en un vehículo conteniendo carboximetilcelulosa de sodio, D-manito, Pluronics F68® (poloxámero 188, un copolímero de óxido de etileno y ácido de propileno, BASF AG, Ludwisgshafen, Alemania) y agua para inyección. Se inyectaron subcutáneamente 200 microlitros de estas suspensiones a la piel rasurada en el lado dorsal izquierdo de ratas Wistar vírgenes hembra de 8 semanas de edad (peso del cuerpo de aproximadamente 220 g). De esta manera se aplicaron una dosis de 1 mg (por animal) de micropartículas de Va - Comp. A (Ejemplo 3A) y una dosis de 2 mg (por animal) a un grupo de 6 animales. El espesor de la piel se midió a través de un micro-calibre en el lado de inyección y el lado no inyectado contra-lateral. Como referencia, se inyectó una suspensión de substancia de fármaco no encapsulada a una dosis de 60 microgramos. Además, como control también se inyectaron micropartículas de placebo hechas de PLGA 50:50.

Se puede mostrar que no se ocasionó nada de irritación por la formulación de macropartículas de acuerdo con la invención.

Ejemplo 5: Producción de implantes con el compuesto A - sal de calcio Se mezclaron concienzudamente 1.5 g de la sal de calcio micronizada del Compuesto A (sal 1:") y 10.7 g de PLGA 50:50 (IV 0.65 dL/g) a través de una molienda criogénica en nitrógeno líquido. El polvo fino resultante se extruyó a 90°C a través de un extrusor de con una velocidad de 5 mm/minuto. Los implantes se colocaron en aplicadores, sellados con hoja de aluminio y finalmente se esterilizaron utilizando radiación gama con una dosis de 30 kGy.

En los siguientes Ejemplos, se midieron loa patrones de difracción de polvo de rayos X en un difractómetro Bruker D8 Advanced Series 2, Detector: PSD Vantec-1 con radiación Cu Ka (1.54A). Los parámetros son como se describen en los Ejemplo, respectivamente.

Ejemplo 6: Cristales del compuesto A en forma libre (forma de sal zwiteriónica interna): Se obtuvo el difractograma de rayos X de la sal zwiteriónica del Compuesto A (que se puede obtener como en el Ejemplo de Referencia 1) y produjo los siguientes Picos (ver también Figura 1). Cuadro a. Picos de Difracción de Polvo de Rayos X para la forma cristalina de los zwiteriones del Compuesto A del Ejemplo de Referencia 1 : Tipo: 2Th trabado - Inicio: 2.000 0 - Fin: 40.030 0 - Paso: 0.017 0 - Tiempo de paso: 107. s - Temp.: 25 °C (ambiente) - Tiempo de inicio: 0 s - 2-Theta: 2.000 °.

El punto de fusión (m.p.= de la forma zwiteriónica es de 237°C.

Ejemplo 7: Cristales del compuesto A en forma de la sal de Ca a) Procedimiento para hacer la Forma Cristalina de la Sal de Calcio 1:2 del Compuesto A (1 equivalente Ca : 2 equivalentes Comp. A): En un matraz de de tres cuellos de 1000 mi con agitador mecánico, se agregaron 3.5 g del Comp. A y 540 mi de agua. Esta mezcla se calentó a aproximadamente 90°C hasta que todo se hizo solución. A esta solución clara se agregó una solución de 667 mg de dihidrato de cloruro de calcio en 10 mi de agua. Apareció un precipitado blanco y la mezcla después se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La sal de Ca precipitada después se aisló a través de filtración, se lavó con agua fría y se secó en un horno de vacío a 60°C durante la noche. Esta es la sal de Ca de una composición que corresponde al dihidrato, m.p. >230°C. El contenido de Ca de la sal es de 5.8 % (teoría 5.9%).

Aquí, la cal de calcio del Comp. A tiene una estequiometría de una molécula de calcio y dos moléculas del Comp. A. b) El difractograma de la sal de Ca del Comp. A, como se obtuvo en a), produce los siguientes Picos (ver también Figura 2): Cuadro b. Picos de Difracción de Polvo de Rayos X para la Forma Cristalina de la Sal de Calcio 1:2 del Comp. A Tipo: 2Th trabado - Inicio: 2.000 ° - Fin: 40.030 0 - Paso: 0.017 0 - Tiempo de paso: 107. s - Temp.: 25 °C (ambiente) - Tiempo de Inicio: 0 s - 2-Theta: 2.000 ° Ejemplo 8: Cristales del Compuesto A en la forma de sal de Zn (1:2) a) Procedimiento para hacer la Forma Cristalina de la Sal de Zinc 1:2 del Compuesto A (1 equivalente Zn:2 equivalentes Comp. A): En un matraz de 3 cuellos de 1000 mi con un agitador mecánico, se agregaron 3.5 g del Comp. A y 540 mi de agua. Esta mezcla se calentó a aproximadamente 90°C hasta que todo se hizo solución. A esta solución clara se agregó una solución de 811 mg de cloruro de zinc en 10 mi de agua. Apareció un precipitado blanco y la mezcla después se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La sal de Zn precipitada después se aisló a través de filtración, se lavó con agua fría y se secó en un horno de vacío a 60°C durante la noche. Esta es la sal de Zn con una composición que corresponde a un dihidrato, m.p. >230°C. El contenido de Zn de la sal es de 9.0 % (teoría 9.3 %).

Aquí, la cal de zinc del Comp. A tiene una estequiometría de una molécula de zinc y dos moléculas del Comp. A. b) El difractograma de la sal de Zn del Comp. A, como se obtuvo en a), produce los siguientes Picos (ver también Figura 3): Cuadro c. Picos de Difracción de Polvo de Rayos X para la Forma Cristalina de la Sal de Zinc 1:2 del Comp. A Tipo: 2Th trabado - Inicio: 2.000 0 - Fin: 40.030 ° - Paso: 0.017 0 -Tiempo de paso: 107. s - Temp.: 25 °C (ambiente) - Tiempo de inicio: O s - 2-Theta: 2.000 °.

Ejemplo 9: Cristales del Compuesto A en forma de la sal de Mg LllH a) Procedimiento para hacer la Forma Cristalina de la Sal de Magnesio 1:2 del Compuesto A (1 equivalente Mg:2 equivalentes Comp. A): en un frasco de 20 mi con agitador magnético, se agregaron 74.20 mg del Comp. A y 15 mi de agua. Esta mezcla se calentó a aproximadamente 90°C hasta que todo se hizo solución. A esta solución clara se agregó una solución de 11.8 mg de cloruro de magnesio en 24 mi de agua. Apareció un precipitado blanco y la mezcla después se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La sal de Mg del precipitado después se aisló a través de centrifugación y se secó en un horno de vacío a 40°C durante la noche. Esto proporcionó la sal de Mg de una composición correspondiente a un dihidrato; m.p. >230°C. El contenido de Mg de la sal fue de aproximadamente 3.4% (teoría 3.7%).

Aquí la sal de Mg del Comp. A tiene una estequiometría de una molécula de magnesio y dos moléculas del Comp. A. b) El difractograma de la sal de Mg del Comp. A, como se obtuvo en a), produce los siguientes Picos (ver también Figura 4): Cuadro d. Picos de Difracción de Polvo de Rayos X para la Forma Cristalina de la Sal de Magnesio 1:2 del Comp. A Tipo: 2Th solo - Inicio: 2.000 ° - Fin: 40.030 ° - Paso: 0.017 ° Tiempo de paso: 0.3 s - Temp.: 25 °C (ambiente) - Tiempo de inicio 0 s - 2-Theta: 2.000 °

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Una formulación de depósito, este término incluye un implante, que comprende una sal escasamente soluble en agua de un compuesto bisfosfonato de la fórmula I, (I), en donde uno de R y R2 es hidrógeno y el otro es alquilo de 1 a 5 átomos de carbono (preferiblemente alquilo de 2 a 5 átomos de carbono) que está ramificado o no ramificado en la forma de una sal escasamente soluble en agua, y una matriz de polímero.

2. Una formulación de depósito de acuerdo con la reivindicación 1, en la forma de micropartículas.

3. Una formulación de depósito de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto de la fórmula I es ácido [2-(5-etil-imidazol-1-il)-1-hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico.

4. Una formulación de depósito de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde la sal escasamente soluble en agua es una sal de zinc, magnesio, o especialmente de calcio.

5. Una formulación de depósito de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la matriz de polímero comprende una polilactida-co-glicolida lineal o ramificada.

6. Una formulación de depósito de acuerdo con la reivindicación 5, que además comprende un agente tensoactivo, un agente de influencia de porosidad y/o una sal básica.

7. Una composición farmacéutica que comprende una formulación de depósito de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes y un vehículo a base de agua que comprende un agente humectante, en especial un poloxámero y/o un éster de ácido graso de polioxietilensorbitán.

8. Una composición de acuerdo con la reivindicación 7, en donde el vehículo comprende un agente de tonicidad.

9. Una composición de acuerdo con la reivindicación 7, en donde el vehículo comprende un agente de incremento de viscosidad.

10. Un equipo que comprende una formulación de depósito de acuerdo con la reivindicación 1 y un vehículo a base de agua.

11. Micropartículas tales como las mencionadas en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10.

12. Una sal escasamente soluble en agua de un compuesto de la fórmula I, en donde uno de y R2 es hidrógeno y el otro es alquilo de 1 a 5 átomos de carbono (preferiblemente alquilo de 2 a 5 átomos de carbono) que está ramificado o no ramificado en la forma de una sal escasamente soluble en agua, especialmente una sal de zinc, magnesio o más especialmente de calcio, en forma libre o de solvato.

13. Una sal de acuerdo con la reivindicación 12 de ácido [2-(5-etil-imidazol- 1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-et¡l]-fosfónico de la fórmula I, la cual es la sal de calcio, en especial en donde la estequiometría de Ca:compuesto de la fórmula I es 1:2.

14. Una forma cristalina de un compuesto de la fórmula I, en donde uno de y R2 es hidrógeno y el otro es alquilo de 1 a 5 átomos de carbono (preferiblemente alquilo de 2 a 5 átomos de carbono) que está ramificado o no ramificado en forma libre o en la forma de una sal escasamente soluble en agua, en especial una sal de zinc, magnesio o más especialmente de calcio, en forma libre o de solvato, muy en especial seleccionado del grupo de formas de cristal definidas como sigue: una forma cristalina de la forma zwiteriónica de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico, que es un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción 2-theta (T) de 10.5, 13.1, 14.7, 17.2, 23.5, 25.2, 34.4, cada uno ± 0.2, especialmente como se ilustra en la Figura 1; alternativamente, por lo menos 80% en peso del Comp. A en la forma zwiteriónica libre muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X; una forma cristalina de la sal de calcio de ácido [2 -(5-eti I -imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico (especialmente en la forma de hidrato, tal como el dihidrato) con una estequiometria de un calcio y dos moléculas del Comp. A, que muy preferiblemente tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción 2-theta (T) de 7.9, 10.6, 12.1, 25.7, 27.4, 29.2, cada uno ± 0.2, en especial como se ilustra en la Figura 2; alternativamente, por lo menos 80% en peso de la sal de calcio 1:2 del Comp. A muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X; una forma cristalina de la sal de zinc de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-et¡l]-fosfónico (en especial en la forma de hidrato, tal como el dihidrato) con una estequiometria de un zinc y dos moléculas del Comp. A, que muy preferiblemente tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción 2-theta (T) de 6.7, 9.5, 12.5, 17.7, 27.3, cada uno ± 0.2, en especial como se ¡lustra en la Figura 3; alternativamente, por lo menos 80% en peso de la sal de zinc 1:2 del Comp. A muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X; y una forma cristalina de la sal de magnesio de ácido [2-(5-etil-imidazol-1 -il)-1 -hidroxi-1 -fosfono-etil]-fosfónico (en especial en la forma del hidrato, tal como el dihidrato) con una estequiometría de un magnesio y dos moléculas del Comp. A, que muy preferiblemente tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, de preferencia dos, preferiblemente tres, muy preferiblemente todos los siguientes picos a un ángulo de refracción 2-theta (T) de 6.7, 12.5, 20.0, 27.3, cada uno ± 0.2, en especial como se muestra en la Figura 4; alternativamente, por lo menos 80% en peso de la sal de magnesio 1:2 del Comp. A muestra dicho patrón de difracción de polvo de rayos X.

15. Un método de tratamiento y prevención de una enfermedad o trastorno en donde se encuentra reemplazo de hueso anormal, que comprende administrar una formulación de depósito de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, un equipo de acuerdo con la reivindicación 10, micropartículas de acuerdo con la reivindicación 12 o reivindicación 13, o una forma de cristal de acuerdo con la reivindicación 14 a un paciente con la necesidad de dicho tratamiento en una dosis terapéuticamente efectiva; el uso de la formulación de depósito de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, un equipo de acuerdo con la reivindicación 10, micropartículas de acuerdo con la reivindicación 12 o reivindicación 13, o una forma de cristal de acuerdo con la reivindicación 14 en la fabricación de medicamentos pata el tratamiento de dichas enfermedades o trastornos; preparaciones farmacéuticas que comprenden una formulación de depósito de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, un equipo de acuerdo con la reivindicación 10, micropartículas de acuerdo con la reivindicación 12 o reivindicación 13, o una forma de cristal de acuerdo con la reivindicación 14 en el tratamiento de dichos trastornos o enfermedades, o una formulación de depósito de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, un equipo de acuerdo con la reivindicación 10, micropartículas de acuerdo con la reivindicación 12 o reivindicación 13, o una forma de cristal de acuerdo con la reivindicación 14 para usarse en dicho tratamiento.