MX2008002228A - Composiciones y metodos para contrarestar el mal olor oral. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se relaciona con composiciones para contrarrestar el mal olor oral, hedonicamente placenteras que incluyen composiciones saborizantes y productos para el cuidado oral, con metodos para formar tales composiciones y con metodos para contrarrestar el mal olor oral. Las composiciones comprenden 2 o mas activos para contrarrestar el mal olor oral de la formula I en una concentracion total de por lo menos 10% (p/p) con base en la concentracion total de los ingredientes saborizantes y con una concentracion individual de 1% o mas para contrarrestar el mal olor oral, basado en los ingredientes saborizantes totales. La concentracion maxima de cualquier activo para contrarrestar el mal olor oral individual basado en el total de los activos para contrarrestar el mal olor oral es de 70%. Los activos para contrarrestar el mal olor oral identificados son diferentes compuestos saborizantes e ingredientes naturales.

Description

COMPOSICIONES Y MÉTODOS PARA CONTRARRESTAR EL MAL OLOR ORAL DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con métodos para contrarrestar el mal olor oral, con composiciones para contrarrestar el mal olor oral (OMC, por sus siglas en inglés) que comprenden activos para OMC y con productos para el cuidado oral formados mezclando los activos o composiciones para OMC con una formulación de producto de cuidado oral. Los volátiles claves involucrados en el mal olor oral incluyen diferentes moléculas de azufre, especialmente sulfuro de hidrógeno (H2S) , metantiol (MeSH) y sulfuro de dimetilo (Me-S-Me) . Entre estos, el MeSH tiene el umbral de olor más bajo y, por lo tanto, es de relevancia mayor. Los productos para el cuidado oral, por ejemplo, pasta de dientes, enjuague bucal y goma de mascar, contienen clásicamente sabores intensos para enmascarar el mal olor oral, o incluso su percepción, usando un sabor u olor dominante, mientras que el mal olor se mantiene presente, pero es menos detectable en combinación. Por ejemplo, JP 2004018431 describe diferentes composiciones saborizantes que contienen aceites de menta o compuestos que se conoce que están comprendidos en las plantas de menta, los cuales son activos conocidos contra halitosis (por ejemplo, mentol), en REF.: 190263 combinación con los compuestos saborizantes enmascaradores. El mal olor oral se forma por bacterias Gram negativas en la boca. Por lo tanto, otro método clásico para reducir el mal olor oral es combatir estas bacterias, por ejemplo, por los agentes antibacterianos clásicos, tales como Triclosan, cloruro de cetil-piridinio y clorhexidina. En algunos casos, se usa el efecto antibacteriano de los ingredientes naturales o compuestos saborizantes. Entre estos, por ejemplo, se conocen el timol, aceite de gaulteria, salicilato de metilo, eucaliptol y aceites de menta y los compuestos que se presentan en las plantas de menta, en particular mentol. Los ingredientes naturales adicionales que se conocen que tienen un efecto para contrarrestar el mal olor incluyen perejil, que se ha usado desde tiempos ancestros contra el mal olor oral. Una combinación de iononas con sales de zinc también se ha usado para contrarrestar el mal olor oral (alfa-ionona, beta-ionona, gama-ionona, dihidroionona, alfa-metilionona, irona) . Además, algunos alcoholes superiores, en particular nonanol, se conoce que matan microorganismos, tales como levaduras y son útiles en las composiciones de cuidado oral cuando se combinan con alcoholes inferiores C?-C4 (WO 99/51093). Particularmente, el octanol se encontró que no tiene efecto. Sin embargo, la inhibición o erradicación completa de estas bacterias puede ser imposible y a menudo es indeseado para no perturbar las bacterias orales que se presentan naturalmente que, cuando se perturban, pueden reemplazarse potencialmente por microorganismos más dañinos. Una alternativa es reducir el mal olor oral por medios que dejen las bacterias orales considerablemente intactas, en particular capturando químicamente los volátiles malolientes con químicos reactivos. Por ejemplo, los compuestos polifenólicos, tales como los contenidos en el extracto de té verde han mostrado que capturan los compuestos de azufre volátiles. El mismo modo de acción también se atribuye a las sales de zinc usadas regularmente en los productos del cuidado oral . Un método químico adicional es degradar los volátiles de azufre malolientes aplicando agentes de oxidación. Sin embargo, el inconveniente de estos métodos químicos es que para cada molécula del compuesto de azufre odorífero se necesita una cantidad estequiométrica de las moléculas de unión o degradación, y por lo tanto, son necesarias concentraciones relativamente altas de los químicos reactivos para contrarrestar exitosamente el mal olor oral. Otro método es por inhibición enzimática de la o las enzimas bacterianas relevantes, de modo que no se formen, en primer lugar, los volátiles de azufre malolientes. Por ejemplo, algunos extractos de plantas (tomate, Uncaria gambier, Quilla ja saponaria, Hamamelis virginiana, Eriobotrya japónica , Equisetum arvense, Cretaegus oxyacantha, Diospyros kaki , Cúrcuma domestica, Ginkgo biloba, té verde, té negro y/o té negro) se conoce que inhiben la enzima metioninasa que genera MeSH. Por ejemplo, un lavado bucal se conoce que contiene extracto de tomate 0.001, aldehido cinámico 0.0001, cloruro de cetilpiridinio 0.0001, gluconato de clorhexidina 0.0001, aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno 2, glicerol 8, etanol 5, sacarina sódica 0.04 y agua c.s. a 100%. Todos los métodos descritos anteriormente son sólo exitosos parcialmente con respecto a su efecto para contrarrestar el mal olor oral, en particular sufren de los siguientes inconvenientes. El método de enmascaramiento adicionando sabor no enmascarará completamente el mal olor y es de corta duración. Los agentes antibacterianos reducen la población bacteriana oral, pero no es posible o necesariamente deseado desinfectar completamente la cavidad oral. La unión o degradación química necesita una mayor cantidad de activo y, por lo tanto, es ineficiente y no es práctica. Un inconveniente adicional con el uso de los ingredientes conocidos, por ejemplo, timol, eugenol, aldehido cinámico y mentol, es que tienen un sabor dominante cuando se usan a una concentración relativamente alta que es necesaria para la efectividad, que después conduce a un producto hedónicamente no placentero y no se acepta fácilmente por el consumidor. Además, muchos activos, en particular los activos antibacterianos, tienen un sabor mantecoso o astringente, por ejemplo, Triclosan o las sales de zinc. Con los ingredientes para contrarrestar el mal olor oral actualmente conocidos, es difícil para los químicos del sabor, proporcionar productos para el cuidado oral con una actividad suficiente y un sabor aceptable. Esto es particularmente difícil para los ingredientes que necesitan integrarse en una composición en una alta concentración para tener un efecto contrarrestante del mal olor oral suficiente. Muchos compuestos antibacterianos u otros activos tienen sabores no placenteros. Los compuestos o ingredientes saborizantes que contienen un compuesto saborizante predominante, cuando se usan en una alta concentración, resultarán en un sabor percibido como "químico" o abrumador para los consumidores . Cuando se usa una menor concentración para evitar el sabor no placentero, esta concentración no puede ser suficiente para contrarrestar efectivamente el mal olor oral. Un sabor no placentero abrumador es, en particular, el caso del timol, eugenol, aldehido cinámico y mentol. Además, el mentol provocará una sensación de quemazón a una mayor concentración mientras que a una menor concentración se percibe como refrescante (ambos efectos son mediados por medio del nervio trigémino en lugar de los receptores del sabor) . Mientras que se aceptan por algunos grupos consumidores, otros, y en particular los niños, son más sensibles, especialmente al mentol. Por lo tanto, en particular para algunos productos incluyendo la pasta de dientes para niños, es necesaria una alternativa. Por lo tanto, hay una necesidad de composiciones hedonísticamente aceptables que proporcionen un efecto para contrarrestar el mal olor suficientemente alto. Un problema adicional cuando se identifican los ingredientes para tales composiciones es un sistema de prueba adecuado. El solicitante ha encontrado que mientras que algunos ingredientes parece que inhiben suficientemente las enzimas in vi tro y las pruebas que usan especies de bacterias simples, a menudo los resultados son diferentes una vez que el ingrediente se prueba en poblaciones bacterianas en la lengua completa en muestras de raspado de saliva/lengua, ya que estas muestras ex vivo incluyen varias especies diferentes de bacterias y representan mejor la situación in vivo. Por lo tanto, es importante probar la efectividad de los activos para contrarrestar el mal olor oral en las poblaciones bacterianas mezcladas de la lengua, en lugar de (o además de) las pruebas en especies bacterianas relevantes simples, tales como F. nucl eatum . Además, la muestra bacteriana mezclada de la lengua contiene además todas las proteínas de la saliva que pueden adsorber los ingredientes activos, y contiene las enzimas hidrolíticos de la saliva, que pueden inactivar algunos ingredientes, por ejemplo, los esteres. Los experimentos y resultados se describen en detalle en los ejemplos. Usando los sistemas de prueba anteriores, sorprendentemente, se han identificado un grupo estructural de ingredientes de grado alimenticio que incluyen compuestos saborizantes como activos para contrarrestar el mal olor oral útiles en las composiciones saborizantes o los productos para el cuidado oral de acuerdo con la invención. Estos ingredientes o compuestos para contrarrestar el mal olor identificados ("activos para OMC") se encuentra que tienen una actividad para contrarrestar el mal olor suficiente, de modo que pueden formarse las composiciones saborizantes y los productos para el cuidado oral que no tienen un sabor abrumador . Los activos de OMC útiles para las composiciones saborizantes y los productos para el cuidado oral de acuerdo con la invención son los compuestos de acuerdo con la fórmula I: en donde Ri es un residuo seleccionado del grupo que consiste de CH3 O CH2CH3; R2 es un residuo seleccionado del grupo que consiste de H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3; y el doble enlace con la línea punteada como se muestra es un enlace doble o un enlace triple. Los activos para OMC como se definió en la presente anteriormente permiten al químico del sabor proporcionar una composición para OMC efectiva con un sabor aceptado fácilmente por el consumidor cuando se usa en combinación con por lo menos 2 activos para OMC en una composición para OMC. Una composición para OMC hedonísticamente aún más placentera puede obtenerse cuando se usan 3 o más activos para OMC. Por lo tanto, la presente invención proporciona composiciones que son altamente efectivas contra el mal olor oral y al mismo tiempo hedonísticamente placenteras para el consumidor. Además, la invención proporciona métodos para formar las composiciones para OMC y con métodos para contrarrestar el mal olor empleando las composiciones para OMC. Las composiciones para OMC de acuerdo con la invención pueden usarse para reducir la concentración de los contrarrestantes del mal olor orales conocidos, mientras que se conserva el efecto para OMC de la composición, o para mejorar el efecto de una composición con los contrarrestantes del mal olor orales conocidos a una concentración dada.

En un primer aspecto, la invención se relaciona con una composición que comprende: (a) 2 o más activos contrarrestantes del mal olor oral, en donde los 2 activos para contrarrestar el mal olor oral tienen cada uno una concentración de 1% (p/p) o más basado en los ingredientes saborizantes totales, y en donde la concentración total de los 2 o más activos para contrarrestar el mal olor oral es de 10% (p/p) o más, con base en la concentración total de los ingredientes saborizantes, y en donde cada activo para OMC individual tiene una concentración máxima de hasta 70% con base en los activos para OMC totales, y (b) ingredientes opcionales seleccionados de aditivos, excipientes, solventes e ingredientes saborizantes; en donde los 2 activos para contrarrestar el mal olor oral son los compuestos de acuerdo con la fórmula I: en donde Ri es un residuo seleccionado del grupo que consiste de CH3 O CH2CH3; R2 es un residuo seleccionado del grupo que consiste de H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3; y el doble enlace con la línea punteada como se muestra es un enlace doble o un enlace triple. En una modalidad particular, los activos para OMC se seleccionan del grupo que consiste de metil éster del ácido oct-2-inoico, metil éster del ácido non-2-inoico, etil éster del ácido oct-2-enoico, metil éster del ácido oct-2-enoico, metil éster del ácido non-2-enoico, etil éster del ácido hex-2-enoico, metil éster del ácido hex-2-enoico, etil éster del ácido non-2-inoico, etil éster del ácido non-2-enoico, etil éster del ácido hept-2-enoico y metil éster del ácido hept-2-enoico. En otra modalidad, la composición para OMC comprende por lo menos 2 de los 2 o más activos para OMC seleccionados del grupo particular de los activos para OMC como se definió en el párrafo anterior. La composición para OMC también puede comprender 2 activos de OMC seleccionados de este grupo, y puede o no puede comprender activos para OMC adicionales. En otra modalidad, una composición para OMC como se define en la presente comprende además, como un componente adicional, uno o más activos seleccionados del grupo que consiste de ionona, alfa-ionona, beta-ionona, sales de zinc, compuestos polifenólicos y agentes antibacterianos. Los agentes antibacterianos pueden seleccionarse del grupo que consiste de triclosan, cloruro de cetilpiridinio, polihexidina bisguanida, clorhexidina y materiales saborizantes antibacterianos. Los materiales saborizantes antibacterianos incluyen, en particular, timol, carvacrol, eugenol, isoeugenol, aldehido cinámico, mentol. Los materiales saborizantes pueden proporcionarse en la forma de un aceite esencial que contiene estos ingredientes. Los aceites esenciales preferidos incluyen aceite de timo, orégano, clavo, hoja de cinamomo, corteza de cinamomo, semilla de perejil, hoja de perejil, menta, menta verde y hierbabuena. Los compuestos polifenólicos útiles son, por ejemplo, los que comprenden un radical de galato, en particular galato de epigalocatequina. Estos pueden ser en la forma de algunos ingredientes naturales, en particular en el té verde y su extracto, por ejemplo, extracto de té verde enriquecido en galato de epigalocatequina. En particular, un saborizante para OMC en la forma particulada puede formarse secando por atomización una composición de saborizante para OMC y mezclándola con partículas de té verde para formar una mezcla seca de té verde y una composición saborizante para OMC. El material particulado resultante puede mezclarse fácilmente hasta una formulación de producto para OMC. En otra modalidad, una composición para OMC como se define en la presente comprende además como un componente adicional uno o más activos seleccionados del grupo que consiste de 5-isopropil-2-metil-fenol , octan-1-ol, 3,7- dimetil-oct-6-en-l-ol, 3 , 7-dimetil-octan-l-ol, l-isopropil-4-metil-ciclohex-3-enol, 3, 7-dimetil-octa-2 , 6-dien-l-ol, 2- (4-metil-ciclohex-3-enil) propan-2-ol, 3 , 7-dimetil-octa-l, 6-dien-3-ol, nona-2 , 4-dienal, non-2-enal, 2 , 6, 6-trimetil-ciclohex-1-encarboxaldehído, 3- (4-isopropil-fenil) -2-metil-propionaldehído, 4-isopropenil-ciclohex-l-encarbaldehído, 5-metil-2-fenil-hex-2-enal , 4-metoxi-benzaldehído, 2,6-dimetil-hept-5-enal, dec-2-enal, fenil-acetaldehído, 2-fenil-propionaldehído, 3,7, 11-trimetil-dodeca-l, 3,6, 10-tetraeno, 3 , 7-dimetil-octa-l, 3 , 6-trieno, 1-isopropil-4-metil-ciclohexa-1, 3-dieno, l-metil-4- (5-metil-l-metilen-hex-4-enil) -ciclohexeno, l-isopropil-4-metilbenceno, dec-3-en-2-ona, 3-metil-2-pentil-ciclopent-2-enona, 6-metil-hepta-3 , 5-dien-2-ona, octil éster del ácido acético, oct-2-enil éster del ácido acético, hex-3-enil éster del ácido 2-metil-but-2-enoico, nonil éster del ácido acético, heptil éster del ácido acético, 3-fenil-alil éster del ácido butírico, 1,7,7-trimetil-biciclo[2.2. l]hept-2-il éster del ácido acético, 4-alil-2-metoxi-fenil éster del ácido acético, 1-metil-l- (4-metil-ciclohex-3-enil) -etil éster del ácido acético, 2-isopropenil-5-metil-ciclohexil éster del ácido acético, 5-octil-dihidro-furan-2-ona, 1, l-dimetoxi-3 , 7-dimetil-octa-2 , 6-dieno, l-alil-4-metoxi-benceno, 6-hexil-tetrahidro-piran-2-ona, 3-butil-3H-isobenzofuran-l-ona, 2-pentil-furano, (2E, 5E/Z) -5, 6, 7-trimetilocta-2 , 5-dien-4-ona, 4-metil-dec-3- en-5-ol, l-ciclopropilmetil-4-metoxi-benceno, aceite esencial de origanum, aceite esencial de galbanum, aceite esencial de Litsea cubeba, aceite esencial de tagete, jazmín absoluto, aceite esencial de lavanda, aceite esencial de lavandina, aceite esencial de romero y aceite esencial de vetiver. La combinación de las sustancias para contrarrestar el mal olor oral de inhibición enzimática con algunos sabores antibacterianos se ha encontrado que es particularmente benéfica y resulta en composiciones altamente efectivas y de sabor placentero. Por lo tanto, en otra modalidad, una composición para OMC como se define en la presente, comprende además como un componente adicional hasta 50% o hasta 90% (p/p) de los ingredientes saborizantes totales, uno o más sabores con propiedades antibacterianas seleccionadas del grupo que consiste de mentol, timol, eugenol, 5-isopropil-2-metil-fenol, octan-1-ol, 3 , 7-dimetil-oct-6-en-l-ol , 3,7-dimetil-octan-1-ol, l-isopropil-4-metil-ciclohex-3-enol, 3,7-dimetil-octa-2, 6-dien-l-ol, 2- (4-metil-ciclohex-3-enil)propan-2-ol y 3 , 7-dimetil-octa-l, 6-dien-3-ol . Los compuestos pueden adicionarse en la forma de compuestos puros o en la forma de ingredientes naturales (por ejemplo, aceites esenciales de plantas, tales como aceites de menta, aceite de hierbabuena, aceite de menta verde para mentol o aceite de timo para el timol). En otra modalidad, la concentración total de los 2 o más activos para OMC es de por lo menos 20%, 30%, 40%, 50%, 60% o por lo menos 70% (p/p) o más basado en la concentración total de los ingredientes saborizantes en la composición para OMC (excluyendo los excipientes, tales como solventes y aditivos) . En otra modalidad, la composición para OMC es como se definió anteriormente, y cada ingrediente para OMC individual tiene una concentración máxima de hasta 60%, 50%, 40%, 30% y 20%, lo que evitará extremadamente un sabor percibido como "químico", "artificial", no placentero, abrumador o desbalanceado . Para una composición particularmente bien balanceada en su sabor, se usan 3 o más activos para OMC. Las composiciones de acuerdo con la invención comprenden composiciones saborizantes para OMC y productos para el cuidado oral para OMC. Las composiciones saborizantes para OMC pueden adicionarse a las formulaciones para el cuidado oral para formar un producto para el cuidado oral para OMC. De manera alternativa, los compuestos para OMC pueden adicionarse directamente a una formulación de producto para el cuidado oral para formar un producto para el cuidado oral para OMC . En otro aspecto, la invención se relaciona con un método para formar una composición para OMC mezclando 2 o más activos para OMC (opcionalmente en la forma de una composición saborizante para OMC como se describió en la presente anteriormente) con una formulación para el cuidado oral para formar un producto para el cuidado oral para OMC de aproximadamente 0.05 a aproximadamente 1% (p/p) de activos para OMC como se describe en la presente, basado en el peso total del producto para el cuidado oral para OMC . En aún otro aspecto, la invención se relaciona con un método para contrarrestar el mal olor oral aplicando oralmente un producto para el cuidado oral para OMC como se define en la presente. Para proporcionar un efecto para OMC suficiente en los productos para el cuidado oral, los activos para OMC o las composiciones saborizantes para OMC se usan en una concentración tal que la concentración total de los activos para OMC en el producto para el cuidado oral proporcione una actividad para OMC suficiente, por ejemplo, en las concentraciones dadas a continuación. Los productos para el cuidado oral comprenden activos para OMC como se definió en la presente anteriormente, en una concentración total p/p de aproximadamente 0.05% a aproximadamente 1%, de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 0.75% o de aproximadamente 0.15% a aproximadamente 0.4% (p/p basado en el peso total del producto para el cuidado oral) . En particular, la última concentración proporciona al mismo tiempo una excelente actividad y un sabor que se percibe como placentero por el consumidor. Las concentraciones mayores indicadas mejoran la actividad, mientras que se proporciona un sabor aún fácilmente aceptado por la mayoría de los consumidores . Las concentraciones inferiores dadas proporcionan un excelente sabor con una actividad aún suficientemente efectiva. Los productos para el cuidado oral pueden formarse mediante la adición de los activos para OMC o las composiciones saborizantes para OMC definidos anteriormente a las formulaciones del producto para el cuidado oral conocidas. Los productos para el cuidado oral incluyen, por ejemplo, pasta dental, enjuague bucal, lavado bucal y productos para el control del mal olor oral portátiles "de salida" que incluyen goma de mascar, dulces, pastillas, laminillas comestibles y atomizadores orales. Las formulaciones para los productos para el cuidado oral mencionadas anteriormente son bien conocidas en la técnica. Los productos para el cuidado oral contienen excipientes que incluyen, por ejemplo, surfactantes, emulsificantes, solventes, colorantes, conservadores, antioxidantes, agentes antimicrobianos, enzimas, aceites vegetales o minerales, grasas, proteínas, solubilizantes, derivados de azúcar, vitaminas, polioles que incluyen sorbitol, ácidos orgánicos, edulcorantes artificiales, polímeros, espesadores, bases de goma para gomas de mascar, activos para el cuidado oral, que incluyen compuestos de flúor y sales de zinc (por ejemplo, gluconato de zinc, acetato de zinc, citrato de zinc) . Algunos productos para el cuidado oral contienen alcoholes, en particular alcoholes inferiores (C?-C4) . Los compuestos de la presente invención no son dependientes de la presencia de un alcohol inferior para su actividad y serán activos en la composición de base acuosa sin los alcoholes C?-C4. De manera ventajosa, pueden formarse las composiciones sin alcoholes, en particular sin alcoholes inferiores (C1-C4) . Esto es deseable, por ejemplo, para evitar el efecto de secado que estos alcoholes pueden tener en los epitelios. Para los productos para el cuidado oral particulares, algunos intervalos de concentración pueden elegirse para proporcionar al mismo tiempo una buena actividad y un sabor percibido como placentero. Por ejemplo, para la pasta de dientes, es útil una concentración de 0.1% a 0.625% o de 0.25% a 0.4% (p/p de volumen total) de los activos para OMC como se definió anteriormente . Por ejemplo, para el lavado bucal, es útil una concentración de 0.05% a 0.25% o de 0.75 a 0.125% (p/p de volumen total) de los activos para OMC como se definió en la presente anteriormente. Por ejemplo, para la goma de mascar, es útil una concentración de 0.1% a 0.75% o de 0.2% a 0.625% (p/p de volumen total) de los activos para OMC como se definió en la presente anteriormente. Las composiciones para OMC pueden comprender ingredientes y excipientes adicionales bien conocidos en la técnica, en particular ingredientes saborizantes adicionales, para proporcionar un acuerdo de sabor deseado. Ejemplos de los ingredientes saborizantes conocidos pueden encontrarse en una de las publicaciones del FEMA (Flavour and Extracts Manufacturers Association of the United States) o una compilación de la misma, que está disponible y se publica por FEMA y contiene todas las publicaciones del FEMA GRAS (en general considerado como seguro) , 1965 al presente, en particular las publicaciones GRAS 1-21 (siendo la más reciente GRAS 21 publicada en 2003) o en Allured' s Flavor and Fragance Materials 2004, publicado por Allured Publishing Inc. Ejemplos de los excipientes conocidos para los productos para el cuidado oral pueden encontrarse en Gaffar, Abdul, Advanced Technology, Corporate Technology, Department of Oral Care, Colgate-Palmolive Company, Piscataway, NJ, USA. Editor(es): Barel, Andre O.; Paye, Marc; Maibach, Howard I., Handbook of Cosmetic Science and Technology (2001), 619-643. Publisher: Marcel Dekker, Inc., New York, N. Y, and in Cosmetics: Science and technology, 2nd edition, p. 423-563. Editado por M.S. Balsam and E. Sagarin, Wiley Interscience, 1972.

EJEMPLOS Ejemplo 1 Identificación activos para OMC potenciales para la selección in vi tro para la inhibición enzimática La enzima metionina-?-liasa corta la metionina en metantiol (MeSH), amonio y a-ceto butirato. El ADN genómico se extrae de una bacteria que expresa la enzima anterior, por ejemplo Fusobacterium nucleatum, cepa DSMZ 20482 (disponible públicamente de Deutsche Sammiung Microorganismen und Zellkulturen, Braunschweig) . El gen que codifica la metionina-?-liasa se amplifica usando los cebadores apropiados que diferirán dependiendo de la bacteria. Para Fusobacterium nucleatum, se usan los siguientes cebadores: CATGCCATGGAAATGAAAAAATCTGGT y CGGAATTCCCAATTTTTTCTAGTCCTTGTTC, empleando las condiciones de PCR estándares con los reactivos obtenidos de SIGMA (Buchs, Suiza) . La región amplificada se purifica y se digiere con las enzimas de restricción Ncol y EcoRI . El marco de lectura abierto después se liga a una secuencia que codifica una marca de 6 x Histidina y se clona en el vector de expresión pET-3a (Studier and Moffatt, 1986) . Los plásmidos resultantes se transforman en la cepa huésped de E. coli BL21(DE3). Las cepas recombinantes se crecen en un medio de crecimiento estándar (LB) , inducido con IPTG (isopropil-beta-D-tiogalactopiranosida) y después de 4 h las células se lisan por tres pasajes a través de una prensa francesa en amortiguador de fosfato (50 mM, pH 8) que contiene imidazol 10 mM. El lisado celular se clarifica por centrifugación a 10,000 g durante 15' y el sobrenadante se carga en una columna de afinidad Ni-NTA (Qiagen, Hilden, Alemania) . La columna se lava con el mismo amortiguador, pero que contiene imidazol 20 mM y por último se eluye con el mismo amortiguador, pero con una concentración de imidazol 250 mM. El eluato resultante contiene la enzima recombinante en una pureza > 90%, y se usa para las pruebas de selección como sigue : Los ingredientes o compuestos a probarse se disuelven en DMSO hasta una concentración final de 4% y se diluyen en serie en el mismo solvente. Las alícuotas de las soluciones de los diferentes inhibidores (2.5 µl) se distribuyen a pozos individuales de una placa de microtitulación. La enzima recombinante se diluyen 20 veces en amortiguador de fosfato 50 mM, pH 7 (Amortiguador A) y se adicionan 100 µl a cada pozo. La reacción se inicia adicionando el sustrato de metionina (100 µl, concentración de 2 mM en el Amortiguador A) . Después de 1 h de incubación, el MeSH liberado se derivada adicionando a cada pozo de la placa microtitulación 100 µl de una solución patrón de monobromobimano (obtenido de Fluka, Buchs, Suiza) (0.5 mM en NaC03 ÍM, pH 8.8). Después de 10 minutos, la fluorescencia en los pozos de las placas de microtitulación se mide en un Flex-station (Molecular devices, Sunnyvale, CA, USA) con una longitud de onda de excitación de 385 nm y una longitud de onda de emisión de 480 nm. Después de la determinación de la fluorescencia, se sustrae de todos los pozos el valor blanco que contiene únicamente el amortiguador, DMSO y la enzima sin el sustrato adicionado. La fluorescencia de los pozos de control sólo con la enzima, el sustrato y DMSO después se compara con la fluorescencia en los pozos que contienen los inhibidores potenciales para calcular la inhibición en por ciento. La siguiente Tabla 1 en la presente lista los activos para OMC identificados que inhiben la enzima y que son útiles en una composición de acuerdo con la invención. Los activos para OMC identificados tienen un IC50 (concentración que da 50% de la inhibición enzimática) menor de 0.01% en peso por volumen, y son también son activos en cultivos de bacterias mezcladas que crecen de las muestras de saliva, ver el ejemplo 3.

Ejemplo 2 Identificación de los activos para OMC potenciales por el método de selección in vi tro para los inhibidores de la formación de MeSH en cultivos de F. nucl ea tum F. nucleatum DSMZ 20482 se crece en placas de agar que contienen el medio 104 (Germán collection of microorganisms and cell cultures, Braunschweig, Alemania) durante 48 h bajo condiciones anaeróbicas a 37°C. Las células se cosechan y se suspenden en un amortiguador de fosfato (50 mM, pH 7) que contiene 2.92 g/L de NaCl hasta una densidad óptica final de 1 medida a 600 nm. Las condiciones anaeróbicas se generan aplicando una corriente de nitrógeno a la suspensión celular y el sustrato de metionina se adiciona hasta una concentración final de 1 mM. Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO hasta una concentración de 2% (p/v) y 10 µl de la solución se adicionan a una ampolleta de GC de 5 ml de espacio de cabeza. Las ampolletas se sellan y se retira el oxígeno aplicando una corriente de nitrógeno. A cada ampolleta, se adiciona 1 ml de la suspensión celular que contiene metionina y los cultivos se incuban durante 4 h a 37°C. Los cultivos después se pasteurizan por calentamiento a 80°C durante 15' y el nivel de MeSH en el espacio de cabeza se determina por cromatografía de gas: Las muestras se calientan a 75°C y se inyecta 1 ml del espacio de cabeza en una columna apropiada para la separación de los compuestos de azufre (SPWl-sulfur, Supelco) . El programa de temperatura se establece a 1 minuto de temperatura inicial a 50°C, calentando a una velocidad de 10°C/minuto a 100°C y después calentando a 20°C/minuto a 200°C. La concentración de MeSH formado se compara con los cultivos de control que contienen solamente el solvente de DMSO, y se calcula el % de inhibición de formación de MeSH.

Los activos para OMC identificados tienen un % de inhibición promedio de por lo menos 60% cuando se prueban a una concentración de 0.02% (p/p), y se incluyen en la Tabla 1, que lista los activos para OMC identificados útiles en las composiciones de acuerdo con la invención que inhiben la enzima mostrada por el método del ejemplo 1 y/ó 2, y también son activos en los cultivos de bacterias mezclados que crecen de las muestras de saliva, ver el ejemplo 3.

Ejemplo 3 Identificación de los activos para OMC potenciales por el método de selección ex vivo para los inhibidores de la formación de MeSH en cultivos de bacterias mezclados que crecen de saliva incubada Las muestras de saliva se colectan de panelistas que se instruyen para cosechar simultáneamente la biolaminilla bacteriana de su lengua raspando sobre su lengua con sus dientes. Se reúne el cultivo que contiene la saliva y las bacterias de cuatro donantes, se diluye con un amortiguador de fosfato (50 mM, pH 7) que contiene 2.92 g/L de NaCl en una relación de 2:1 y se suplementa con metionina hasta una concentración final de 1 mM. Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO hasta una concentración de 2% (p/v) y se adicionan 10 µl de la solución a una ampolleta GC de espacio de cabeza de 5 ml . Las ampolletas se sellan y el oxígeno se retira aplicando una corriente de nitrógeno. A cada ampolleta, se adiciona 1 ml de la muestra de saliva que contiene metionina y los cultivos se incuban durante 4 h a 37°C. Los cultivos después se pasteurizan y se determina el nivel de MeSH en el espacio de cabeza como se describió anteriormente . La concentración del MeSH formado se compara con los cultivos de control crue contienen sólo el solvente de DMSO, y se calcula el % de inhibición de la formación de MeSH. La tabla 1 lista los activos de MOC calculados que inhiben la formación de MeSH. Los activos para OMC identificados tienen un % de inhibición promedio de por lo menos 50% cuando se prueban a una concentración de 0.02% (p/p).

Tabla 1. Activos para OMC identificados como se describe en los Ejemplos 1-3 Nombre IUPAC Nombre trivial o nombres alternativos metil éster del ácido oct-2-enoico 2-octenoato de metilo (trans) metil éster del ácido non-2-enoico Neofolione™ etil éster del ácido hex-2-enoico 2-hexenoato de etilo metil éster del ácido hex-2-enoico 2-hexenoato de metilo, 3- propilacrilato de metilo etil éster del ácido non-2-inoico 2-noninoato de etilo etil éster del ácido non-2-enoico 2-nonenoato de etilo etil éster del ácido hept-2-enoico 2-heptenoato de etilo metil éster del ácido hept-2- 2-heptenoato de enoico metilo Ejemplo 4a Validación de las composiciones saborizantes para OMC en la saliva incubada (Ejemplo 3) y prueba de F. nucl eatum (ejemplo Las composiciones saborizantes para OMC se crean mezclando los ingredientes indicados en la siguiente tabla.

Todas las cantidades se dan en % de concentración (p/p) . Las composiciones saborizantes que contienen activos para OMC se designan A-F. Como un ejemplo comparativo, un saborizante de gaulteria que no contiene activos para OMC (Saborizante G) .

Las composiciones A-F de saborizantes para OMC y el ejemplo comparativo G se prueban como se describe en los ejemplos 2 y 3 anteriores, los resultados se muestran en la siguiente tabla. Los saborizantes A-F se muestran para proporcionar una buena actividad para OMC aun a una concentración baja de 0.01% de la composición saborizante para producir una concentración final de 0.0027% a 0.0041% de los activos para OMC. La concentración en un producto necesita ser de 20-50 veces mayor que la cantidad mínima para una actividad significativa en esta prueba para representar la dilución por el flujo salival. De esta manera, los productos que contienen 0.2-1% de una mezcla que da una buena actividad a una concentración final de 0.01%-0.02% dan una eficacia prolongada cuando se usan por un consumidor. Comparar los resultados en la siguiente tabla. La actividad para OMC a una concentración de 0.02% de la composición saborizante para OMC que contiene 0.052% a 0.082% con los activos para OMC es excelente, comparar los resultados en la siguiente tabla. Los presentes activos adicionales (citronelol, anisaldehído, ciclamen aldehido y otros ingredientes clásicos usados contra el mal olor oral, por ejemplo, aceite de hierbabuena) proporcionan una actividad aún más fuerte.

Ejemplo 4b Composiciones de sabor menta que emplean las composiciones de saborizante para OMC A-F del ejemplo 4a Cada composición de sabor para OMC A-F se combina con un aceite de menta (aceite esencial de hierbabuena y menta verde) en una relación de 1:1, 1:2 y 1:3 (composición de sabor para OMC ¡aceite de menta) como se lista a continuación.

Las composiciones de sabor de menta para OMC son efectivas contra el mal olor oral y tienen un sabor placentero.

Ejemplo 5 Un extracto de té verde que contiene 40% de galato de epigalocatequina (p/p) se prueba en combinación con la composición de sabor A y E de acuerdo con el ejemplo 4 en la prueba de saliva incubada como se describió anteriormente. La siguiente tabla lista los resultados obtenidos: A una concentración del té verde que es suficiente para una reducción significativa del nivel de MeSH (0.005%) hay un mejoramiento significativo de la actividad de la composición de sabor.

Ejemplo 6 Productos para el cuidado oral para OMC que comprenden activos para OMC Ejemplo 6a) Pasta dental, opaca La concentración de los activos para OMC como se definió anteriormente en la presente en el producto para el cuidado oral es: 0.39%. El producto muestra un buen efecto para contrarrestar el mal olor oral en uso.

Ejemplo 6b) Pasta dental, clara La concentración de activos para OMC como se definió en la presente anteriormente en el producto para el cuidado oral es: 0.36%. El producto muestra un buen efecto para contrarrestar el mal olor oral en uso.

Ejemplo 6c) Lavado bucal La concentración de los activos para OMC como se definió en1 la presente anteriormente en el producto para el cuidado oral es: 0.1%. El producto muestra un buen efecto para contrarrestar el mal olor oral en uso.

E emplo 6d) ATOMIZACIÓN BUCAL La concentración de los activos para OMC como se definió en la presente anteriormente en el producto para el cuidado oral es de 0.65%. El producto muestra un buen efecto para contrarrestar el mal olor oral en uso.

Ejemplo 6e) GOMA DE MASCAR EN BARRA DE AZÚCAR La concentración de los activos para OMC como se definió en la presente anteriormente en el producto para el cuidado oral es: 0.78%. El producto muestra un buen efecto para contrarrestar el mal olor oral en uso. Ejemplo 6f) GOMA DE MASCAR SIN AZÚCAR Ejemplo 6g) GOMA DE MASCAR EN BARRA DE AZÚCAR *galato de epigalocatequina La concentración de los activos para OMC como se definió en la presente anteriormente en el producto para el cuidado oral es: 0.78%. En combinación con el extracto de té verde que contiene 40% de EGCG, el producto muestra un mal olor oral superior.

Ejemplo 6h) GOMA DE MASCAR SIN AZÚCAR *galato de epigalocatequina. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (10)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Una composición, caracterizada porque comprende: (a) 2 o más activos para contrarrestar el mal olor oral, en donde los 2 activos para contrarrestar el mal olor oral tiene cada uno una concentración de 1% (p/p) o más, basado en los ingredientes de sabor total, y en donde la concentración total de los 2 o más activos para contrarrestar el mal olor oral es de 10% (p/p) o más, con base en la concentración total de los ingredientes saborizantes, y en donde cada ingrediente para OMC individual tiene una concentración máxima de hasta 70% con base en la concentración total de los activos para OMC, y (b) ingredientes opcionales seleccionados de aditivos, excipientes, solventes e ingredientes saborizantes; en donde los 2 activos para contrarrestar el mal olor oral son compuestos de acuerdo con la fórmula I: en donde
2. Ri es un residuo seleccionado del grupo que consiste de CH3 o CH2CH3; R2 es un residuo seleccionado del grupo que consiste de H, CH3 , CHCH3 , CHCH2CH ; y el doble enlace con la línea punteada como se muestra es un enlace doble o un enlace triple. 2. Una composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque por lo menos 2 de los activos para contrarrestar el mal olor oral se seleccionan del grupo que consiste de metil éster del ácido oct-2-inoico, metil éster del ácido non-2-inoico, etil éster del ácido oct-2-enoico, metil éster del ácido oct-2-enoico, metil éster del ácido non-2-enoico, etil éster del ácido hex-2-enoico, metil éster del ácido hex-2-enoico, etil éster del ácido non-2-inoico, etil éster del ácido non-2-enoico, etil éster del ácido hept-2-enoico y metil éster del ácido hept-2-enoico. 3. Una composición de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque además comprende uno o más activos seleccionados del grupo que consiste de compuestos polifenólicos, compuestos polifenólicos que comprenden un radical de galato, galatos de epigalocatequina, té verde, extracto de té verde enriquecido en galato de epigalocatequina, ionona, alfa-ionona, beta-ionona, sales de zinc, compuestos antibacterianos, triclosan, cloruro de cetilpiridinio, polihexidina bisguanida, clorhexidina, materiales saborizantes antibacterianos, timol, carvacrol, eugenol, isoeugenol, aldehido cinámico, mentol, aceites esenciales que contienen activos que incluyen aceites esenciales de timo, orégano, clavo, hoja de cinamomo, corteza de cinamomo, semilla de perejil, hoja de perejil, menta, menta verde, hierbabuena, octan-1-ol, 3 , 7-dimetil-oct-6-en-l-ol, 3 , 7-dimetil-octan-l-ol, l-isopropil-4-metil-ciclohex-3-enol, 3 , 7-dimetil-octa-2 , 6-dien-l-ol , 2- (4-metil-ciclohex-3-enil) propan-2-ol, 3 , 7-dimetil-octa-l, 6-dien-3-ol , nona-2,4-dienal, non-2-enal, 2 , 6, 6-trimetil-ciclohex-l-encarboxaldehído, 3- (4-isopropil-fenil) -2-metil-propionaldehído, 4-isopropenil-ciclohex-l-encarbaldehído, 5-metil-2-fenil-hex-2-enal, 4-metoxi-benzaldehído, 2,6-dimetil-hept-5-enal, dec-2-enal, fenil-acetaldehído, 2-fenil-propionaldehído, 3 , 7, 11-trimetil-dodeca-l, 3 , 6 , 10-tetraeno, 3 , 7-dimetil-octa-l, 3 , 6-trieno, l-isopropil-4-metil-ciclohexa-1, 3-dieno, l-metil-4- (5-metil-l-metilen-hex-4-enil) -ciclohexeno, l-isopropil-4-metilbenceno, dec-3-en-2-ona, 3-metil-2-pentil-ciclopent-2-enona, 6-metil-hepta-3 , 5-dien-2-ona, octil éster del ácido acético, oct-2-enil éster del ácido acético, hex-3-enil éster del ácido 2-metil-but-2-enoico, nonil éster del ácido acético, heptil éster del ácido acético, 3-fenil-alil éster del ácido butírico, 1,7,7-trimetil-biciclo [2.2. l]hept-2-il éster del ácido acético, 4-alil-2-metoxi-fenil éster del ácido acético, 1-metil-l- (4- metil-ciclohex-3-enil) -etil éster del ácido acético, 2-isopropenil-5-metil-ciclohexil éster del ácido acético, 5-octil-dihidro-furan-2-ona, 1, l-dimetoxi-3 , 7-dimetil-octa-2 , 6-dieno, l-alil-4-metoxi-benceno, 6-hexil-tetrahidro-piran-2-ona, 3-butil-3H-isobenzofuran-l-ona, 2-pentil-furano, (2E, 5E/Z) -5,6, 7-trimetilocta-2, 5-dien-4-ona, 4-metil-dec-3-en-5-ol, l-ciclopropilmetil-4-metoxi-benceno, aceite esencial de origanum, aceite esencial de galbanum, aceite esencial de
3. Litsea cubeba, aceite esencial de tagete, jazmín absoluto, aceite esencial de lavanda, aceite esencial de lavandina, aceite esencial de romero y aceite esencial de vetiver.
4. 4. La composición de conformidad con la reivindicación 1, 2 ó 3, caracterizada porque se selecciona del grupo que consiste de una composición saborizante y un producto para el cuidado oral.
5. 5. El producto para el cuidado oral de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque los activos para contrarrestar el mal olor oral de conformidad con la reivindicación 1 están en una concentración de 0.05% a 1% (p/p) con base en el peso total del producto para el cuidado oral para contrarrestar el mal olor oral.
6. 6. El producto para el cuidado oral de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque se selecciona del grupo que consiste de pasta dental, enjuague bucal, lavado bucal, goma de mascar, dulces, pastillas, laminillas comestibles y atomizaciones orales.
7. 7. El producto para el cuidado oral de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el producto para el cuidado oral es una pasta de dientes y en donde los activos para contrarrestar el mal olor oral de conformidad con la reivindicación 1 están en una concentración de 0.1% a 0.625% (p/p) con base en el peso total del producto para el cuidado oral para contrarrestar el mal olor oral.
8. 8. El producto para el cuidado oral de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque es un enjuague bucal o lavado bucal y en donde los activos para contrarrestar el mal olor oral de conformidad con la reivindicación 1 están en una concentración de 0.05% a 0.25% (p/p) con base en el peso total del producto para el cuidado oral para contrarrestar el mal olor oral.
9. 9. El producto para el cuidado oral de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque es una goma de mascar y en donde los activos para contrarrestar el mal olor oral de conformidad con la reivindicación 1 están en una concentración de 0.1% a 0.75% (p/p) con base en el peso total del producto para el cuidado oral para contrarrestar el mal olor oral . 10. Método para formar una composición para contrarrestar el mal olor oral, caracterizado porque 2 o más activos para contrarrestar el mal olor oral de conformidad con la reivindicación 1 se mezclan con una formulación de producto para el cuidado oral para formar un producto para el cuidado oral para contrarrestar el mal olor oral en una concentración de 0.05% a 1% (p/p) con base en el peso total del producto para el cuidado oral para contrarrestar el mal olor oral . 11. Método para contrarrestar el mal olor oral, caracterizado porque aplica oralmente un producto para el cuidado oral para contrarrestar el mal olor oral de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 5, 6, 7, 8, 9 y
10. 10.