MX2007015895A - Composiciones farmaceuticas, amortiguadas por estabilidad que incluyen peptidos tipo motilin. - Google Patents

Abstract

Se describen composiciones farmaceuticas, estables que incluyen un peptido sintetico tipo motilin en una solucion amortiguada. La composicion proporciona un peptido que permanece estable y que retiene substancialmente su potencia inicial durante almacenamiento prolongado y despues de esterilizacion con vapor.

Description

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS. AMQRTDGUAi ESTABILIDAD QUE INCLUYEN PEPTBDOS TAPO MOTIL! Referencia Cruzada con Solicitudes Relacionadas La presente solicitud reclama el beneficio de la Solicitud Provisional Norteamericana Número 60/691,555, presentada el 17 de junio de 2005, cuyos contenidos están incorporados a la presente invención como referencia. Campo de Ba invención) La presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que incluyen un péptido tipo motilín. Más particularmente, la presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que incluyen un péptido tipo motilín que permanece estable y que retiene su potencia y afinidad de enlace después de periodos de almacenamiento prolongados. Antecedentes de Ha invención El péptido motilín es una hormona de polipéptido lineal gastrointestinal, que estimula la actividad motora gastrointestinal en mamíferos. Motilín juega un papel importante en el incremento de motilidad gástrica, regulando el complejo mioeléctrico interdigestivo. La administración de motilín a sujetos humanos acelera el tránsito intestinal y aumenta el vaciamiento gástrico [Christofides y asociados, Gastroenterology 76. 903-907 (1979)]. Los estudios in vitro han mostrado que motilín estimula las contracciones de las franjas de músculo liso duodenal y las células de músculo liso gastrointestinal aisladas de humanos y ratones. Motilín ha sido reportada por estimular el vaciamiento de sólidos y líquidos en pacientes con gastroparesis diabética [Peeters y asociados, Gastroenteroloy 100, A480 (1991)], y ha sido utilizado para tratar pacientes con íleo paralítico originado por carcinoma del tracto gastrointestinal [Meyer y asociados, Med. Klin. 86, 515-517 (1991)]. Uno de los inconvenientes de motilín es su vida media relativamente corta in vivo (Christofides, 1979, op. cit.], lo cual hace necesario administrar la hormona mediante infusión continua para inducir un efecto terapéutico. En respuesta a este inconveniente, se han desarrollado péptidos tipo motilín sintéticos los cuales mimetizan la actividad de motilín poseyendo al mismo tiempo estabilidad metabólica mejorada. Estos péptidos se reportan y describen en la Patente Norteamericana Número 5,422,341, la cual está incorporada a la presente invención como referencia. Los péptidos sintéticos tipo motilín descritos en la Patente Norteamericana Número 5,422,341, han mostrado ser efectivos en la estimulación de la actividad gastrointestinal, y demuestran estabilidad incrementada a biodegradación en homogenados de tejido de órganos relevantes. Sin embargo, como con motilín que ocurre naturalmente, los compuestos sintéticos tipo motilín están sujetos potencialmente a una rápida degradación del péptido debido a hidrólisis, oxidación u otros procesos químicos antes de la administración. Los compuestos de motilín y sintéticos tipo motilín en soluciones que contienen bajas concentraciones, pueden ser inestables durante el almacenamiento, incluso cuando se almacene en contenedores sellados. Se sabe que ciertos péptidos que están propensos de otra manera a degradación durante almacenamiento pueden ser estabilizados, y por lo tanto, almacenados durante períodos prolongados sin pérdida de actividad biológica, preparando el péptido como una composición acuosa. Por ejemplo, la Patente Norteamericana Número 5,482,931, describe una composición acuosa para administración de péptidos tales como oxitocín, vasopresín y análogos y derivados de los mismos, lo cual puede mantener la estabilidad con el tiempo a temperatura ambiente. La solución contiene un amortiguador, un conservador o desinfectante de amina cuaternaria y un agente de control osmótico. De acuerdo con la Patente Norteamericana Número 5,482,931, la composición de péptido acuosa retuvo la vida en anaquel útil después de varias semanas de almacenamiento a temperatura ambiente. Otros ejemplos de formulaciones acuosas de péptido estables se describen en la Patente Norteamericana Número 5,916,582 y 6,068,850. Estas patentes describen formulaciones acuosas de péptidos de hormona de liberación de hormona de luteinización (LHRH) de alta concentración, la cual puede ser almacenada a temperaturas elevadas (por ejemplo, 37°C), durante periodos de tiempo prolongados. Un ejemplo de una composición de motilín "estable" se describe en la Patente EP 437,621 A1. Las soluciones acuosas de motilín y las composiciones secadas por congelación mostraron estabilidad en una solución en un pH de 4.0-5.5. Las motilinas descritas en la presente invención incluyeron motilín de canino, motilín de cerdo, motilín de humano y ciertos derivados de motilín (por ejemplo, motilín de cerdo-13leucina). Estas motilinas y derivados de motilín retuvieron aproximadamente el 94% de contenido de motilín después de 7 días de almacenamiento a una temperatura de 60°C. Aunque la técnica anterior reconoce que el efecto de estabilización de ciertas soluciones en péptidos seleccionados, y la Patente EP 437,621 A1 sugiere que motilín inactivo (longitud total) puede prepararse en la forma de composiciones acuosas o secadas por congelación estables, los resultados ahí proporcionados no anticipan como otros derivados de motilín o péptidos tipo motilín pueden comportarse en soluciones acuosas o composiciones liofilizadas similares. Esto se debe a que ciertas diferencias en la estructura de péptidos y la existencia o ausencia de grupos funcionales cargados y ácido/base de un péptido determinado pueden afectar significativamente la solubilidad, perfil de pH/solubilidad, punto isoeléctrico y valores pKa, haciendo de esta forma un péptido lo suficientemente diferente a otros péptidos relacionados. Por consiguiente, no se puede anticipar con exactitud si una formulación acuosa o liofilizada estable de un derivado de motilín puede ser preparada. Tal como se describe en la Patente Norteamericana Número 5,422,341, los péptidos tipo motilín son estructuralmente distintos del motilín activo. Estas diferencias estructurales, las cuales se describen con mayor detalle más adelante, hacen que sea difícil determinar si el péptido tipo motilín puede retener su estabilidad en una solución acuosa o liofilizada. Debido a las ventajas antes descritas proporcionadas por los péptidos tipo motilín, puede ser deseable proporcionar composiciones farmacéuticas acuosas que incluyan dichos péptidos tipo motilín. También puede ser deseable proporcionar composiciones que incluyan péptidos tipo motilín que puedan ser administrados a un paciente después de un almacenamiento a largo plazo. Además, puede ser deseable proporcionar composiciones que eviten substancialmente la degradación del péptido tipo motilín, aunque se mantengan los niveles máximos de potencia del compuesto durante el periodo de almacenamiento. Puede ser deseable proporcionar una composición de péptido acuosa lista para utilizarse que permanezca estable (y mantenga la potencia) después de almacenamiento en condiciones de temperatura ambiente, así como después de exposición a temperaturas elevadas, tal como, pero sin limitarse a la temperatura de la esterilización de vapor. Puede ser deseable proporcionar dichos péptidos tipo motilín sintéticos como composiciones acuosas en concentraciones diversas o en forma liofilizada. Finalmente, puede ser deseable proporcionar una composición que incluya un péptido tipo motilín sintético que, si es necesario, pueda almacenarse y permanecer estable durante periodos de tiempo prolongados en cualesquiera de uno de los diversos diferentes contenedores. Breve Descripción de la [Invención En un aspecto, la presente invención se dirige a composiciones farmacéuticas que comprenden aproximadamente 0.5 µg/ml a 100 mg/ml de un péptido tipo motilín sintético que tiene no más de 16 aminoácidos y la estructura que se describe más adelante. Dichas composiciones incluyen además 5-250 mM de un amortiguador, y tienen un pH de entre 3 y 9 y una osmolaridad de aproximadamente 10-500 mOsm/kg. En un aspecto adicional, la presente invención se dirige a composiciones que incluyen el péptido tipo motilín sintético que puede ser esterilizado mediante esterilización con vapor a una temperatura de 120°C-128°C, en donde el péptido retiene al menos aproximadamente el 95% de su potencia inicial.

En un aspecto adicional, la presente invención se dirige a composiciones farmacéuticas listas para utilizarse que incluyen el péptido tipo motilín sintético, en donde el péptido puede ser almacenado durante al menos 18 meses a una temperatura de -37°C, y retiene al menos aproximadamente el 90% de su potencia inicial. Aún en un aspecto adicional, la presente invención se dirige a composiciones que incluyen un péptido sintético tipo motilín que tiene la estructura descrita más adelante que incluye no más de 16 aminoácidos, en donde la composición es proporcionada en una forma concentrada que incluye una cantidad seleccionada de péptido y amortiguador, mediante lo cual al momento de la dilución la composición acuosa incluye 0.5 µg/ml-100 µg/ml del péptido, 10-100 mM de un amortiguador, que tiene un pH de entre 3-9 y un osmolaridad de aproximadamente 10-500 mOsm/kg. Aún en un aspecto adicional, la presente invención se dirige a composiciones liofilizadas que incluyen un péptido sintético tipo motilín que tiene la estructura que se describe más adelante y que incluye no más de 16 aminoácidos, mediante lo cual al momento de la reconstitución, la composición reconstituida incluye 0.5 µg/ml-100 µg/ml del péptido y tiene un pH de entre 3-9 y una osmolaridad de aproximadamente 10-500 mOsm/kg. Opcionalmente, la composición también puede incluir 10-200 mM de un amortiguador. Breve Descripción de las Figuras La figura 1, es una gráfica que muestra la estabilidad del péptido en una composición que representa la presente invención, en un almacenamiento de hasta 24 meses. La figura 2, es una gráfica que muestra la estabilidad del péptido en una composición que representa la presente invención después de autoclave. La figura 3, es una gráfica que muestra el perfil de estabilidad del péptido sintético tipo motilín en una concentración de 5 µg/ml en una composición que representa la presente invención cuando se almacena en un contenedor de vidrio seleccionado. La figura 4, es una gráfica que muestra el perfil de estabilidad del péptido sintético tipo motilín en una concentración de 30 µg/ml en una composición que representa la presente invención cuando se almacena en un contenedor de vidrio seleccionado. La figura 5, es una gráfica que muestra la estabilidad del péptido en una composición que representa la presente invención después de almacenamiento, en donde la composición es liofilizada, almacenada en su forma liofilizada y reconstituida en forma subsecuente. Descripción Detallada de la Bnvenc?ón Las composiciones farmacéuticas de la presente invención incluyen un péptido sintético tipo motilín que puede ser efectivo en el tratamiento de trastornos gastrointestinales, pero no se limita a, íleo post-operativo, gastroparesis diabética e íleo paralítico. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención incluyen un péptido sintético tipo motilín, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en un amortiguador seleccionado en una concentración seleccionada. Las composiciones farmacéuticas tienen un pH y osmolaridad también seleccionadas para mantener la estabilidad del péptido durante un periodo de tiempo prolongado. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención permanecen estables durante almacenamiento a largo plazo, tal como al menos 12 meses, y preferentemente al menos 18 meses, y hasta 24 meses a temperaturas comúnmente encontradas durante el almacenamiento, tal como, pero sin limitarse a, entre aproximadamente 4°C y aproximadamente 30°C. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención muestran degradación y pérdida de potencia de péptido mínimas durante dichos periodos de tiempo y en dichas temperaturas. El péptido tipo motilín de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, permanece químicamente estable y biológicamente potente incluso después de exposición a temperaturas elevadas, tales como, pero sin limitarse a, temperatura de esterilización de vapor (por ejemplo 121°C). Tal como se utiliza en la presente invención, las referencias a estabilidad se refieren al grado de degradación del péptido y potencia residual del péptido, tal como se determina a través de ensayos biológicos. Por ejemplo, un péptido tipo motilín que está al 95% no degradado después del almacenamiento, tal como se determina mediante análisis de pureza química, retiene el 95% de potencia en ensayos biológicos. En las composiciones farmacéuticas de la presente invención, el péptido tipo motilín no se degrada substancialmente y permanece substancialmente potente y efectivo en el tratamiento de trastornos gastrointestinales. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención incluyen, en general, una cantidad seleccionada de un polipéptido sintético tipo motilín. El péptido sintético puede ser Un péptido tipo motilín que es efectivo para tratar o estimular la actividad motora gastrointestinal. Los péptidos tipo motilín para estimular la actividad gastrointestinal muestran una alta afinidad con el receptor de motilín. Los ejemplos de dichos polipéptidos de motilín se describen en la Patente Norteamericana Número 5,422,341, incorporada previamente como referencia, la cual describe secuencias de aminoácido de péptido sintéticos tipo motilín. En una modalidad preferida de la presente invención, el péptido sintético tipo motilín contenido en las composiciones de la presente invención está truncado. Preferentemente, el péptido sintético tipo motilín normalmente incluirá no más de 16 aminoácidos, y más preferentemente de 11 a 16 aminoácidos. En una modalidad, el péptido tipo motilín tiene la siguiente estructura: R2 Ri N-*CHCO-A-B-D-E-Thr-F-G-H-Leu-I-J-NH-*CHR6 R3 CH2R4 CH2R5 en donde: A es L-estereoisómero de un aminoácido alifático lipofílico; B es L-prolina o L-alanina; D es el L-estereoisómero de un aminoácido alifático lipofílico; E es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático, alifático lipofílico, o alicíclico; F es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático o heteroaromático; G es glicina o D-alanina; H es ácido L-glutámico o L-glutamina; I es L-glutamina; J es seleccionado del grupo que consiste en Z, Z-Leu, Z- Leu-Gln, Z-Leu-GIn-Glu, Z-Leu-GIn-Glu-Lys, en donde Z es seleccionado del grupo que consiste en D-arginina, D- homoarginina, D-glutamina, D-asparagina y D-alanina; Ri es alquilo inferior o alilo; R2 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior, propargilo y alilo; R3 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior y alilo; R4 es cicloalquilo o arilo el cual puede ser no substituido o substituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halógeno, hidroxi y alcoxi inferior; R5 es seleccionado del grupo que consiste en --CH2 CONH2, grupos aminoalquilo que contienen de 1 a 3 átomos de carbono; y grupos guanidinoalquilo que contienen de 2 a 3 átomos de carbono; R6 es --COOH o --CONH2; y el símbolo * representa un átomo de carbono asimétrico el cual puede estar en la configuración D o L, y en donde cada grupo de alquilo inferior contiene de 1 a 4 átomos de carbono, siempre que: (i) R5 sea --CH2 CONH2, únicamente cuando J sea Z-Leu; En una modalidad preferida, el péptido contenido en una composición farmacéutica de la presente invención puede incluir en forma adicional D-Arginina en la posición 12. El péptido de la presente invención también puede incluir un N-término alquilado, y preferentemente, trialquilado (por ejemplo, metilado). Además, el péptido sintético tipo motilín puede incluir un grupo amida (-CONH2) en la funcionalidad de ácido carboxílico C-terminal de la cadena de polipéptido, lo cual cambia el perfil pKa y la carga del péptido tipo motilín (tal como se compara con motilín nativo) y también se considera que afecta la solubilidad. Una modalidad particularmente preferida de la presente invención incluye el agonista de receptor de péptido sintético tipo motilín, que incluye SEQ ID NO.: 1 y que está representado por la siguiente fórmula: (Me3N) +Phe-Val-Pro-lle-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-D-Arg-Leu-Lys-NH2, en donde las siguientes abreviaturas representan los aminoácidos: Phe - L-Fenilalanina Tyr - L-Tirosina Leu - L-Leucina Val - L-Valina Pro - L-Prolina Me - L-lsoleucina Thr - L-Treonina Gly - Glicina Glu - ácido L-Glutámico Gln - L-Glutamina D-Arg - D-Arginina Lys - L-Lisina. Los péptidos tipo motilín, que incluyen SEQ ID NO.: 1, son particularmente efectivos y muestran estabilidad mejorada, potencia prolongada y son adecuados para esterilización mediante autoclave (que se describe más adelante) cuando dichos péptidos están incluidos en las composiciones de la presente invención. También incluidos dentro del alcance de la presente invención, están todas las sales farmacéuticamente aceptables del péptido identificado anteriormente. Otros péptidos, incluyendo los que se describen en la Patente Norteamericana Número 5,422,341, los cuales son substancialmente similares al péptido que incluye SEQ ID NO: 1 descrito en la presente invención, también pueden mostrar estabilidad mejorada en las composiciones de la presente invención. Esto puede incluir, por ejemplo, otros péptidos sintéticos tipo motilín descritos en las patentes referenciadas las cuales tienen homología substancial (es decir mayor al 50% y preferentemente de al menos el 60 al 70%) con la secuencia N-terminal del péptido de motilín humano. El péptido tipo motilín contenido en las composiciones de la presente invención se proporciona en una cantidad de aproximadamente 0.5 µg/ml a 100 mg/ml. Más preferentemente, cuando la composición está "lista para utilizarse" (es decir, no requiere dilución o reconstitución adicional) la cantidad de péptido tipo motilín puede ser de entre aproximadamente 1 µg/ml y 1 mg/ml, incluso más preferentemente 1 µg/ml-50 µg/ml y normalmente dentro del rango de 1 µg/ml-30 µg/ml. Debido a la potencia de los péptidos, las composiciones de baja concentración pueden ser convenientes en la administración controlada de la cantidad deseada de los péptidos. Por supuesto, una composición más concentrada del péptido, que representa una presente invención, puede ser diluida para producir una solución para administración conveniente. En una modalidad, cuando la composición es proporcionada en una forma "lista para utilizarse", el péptido tipo motilín se disuelve en una solución amortiguadora para proporcionar una composición acuosa. El amortiguador se selecciona para mantener el pH de la composición farmacéutica entre aproximadamente 3 y 9, en donde el pH del péptido muestra estabilidad y retención de potencia substancialmente mejoradas. Más preferentemente, el pH de las composiciones farmacéuticas es de entre aproximadamente 4 y 6, más preferentemente 4.5 y 5.5 y lo más preferentemente entre 4.8-5.2. En estos niveles de pH, el péptido de SEQ. ID. 1, un ejemplo preferido de péptido tipo motilín, muestra únicamente degradación mínima durante almacenamiento. (El pH preferido de la composición también puede ser determinado, en parte, con base en si la composición se prepara como una composición acuosa o una formulación liofilizada, que se describe más adelante). Las soluciones amortiguadoras adecuadas para utilizarse con las composiciones farmacéuticas de la presente invención incluyen amortiguadores tales como acetato de sodio/ácido acético, amortiguadores de fosfato de hidrógeno de sodio y citrato de sodio/ácido cítrico. Otros sistemas amortiguadores conocidos para los expertos en la técnica, tales como, pero sin limitarse a, tartrato, succinato, TRIS, histidina y glicina también pueden proporcionar una amortiguación adecuada de las composiciones dentro del rango de pH identificado anteriormente. Tal como se indicó anteriormente, en una modalidad, se combina el amortiguador de acetato de sodio/ácido acético con el péptido tipo motilín para proporcionar una composición acuosa. Cuando se proporciona como una solución lista para utilizarse, la concentración del amortiguador en la composición farmacéutica puede ser de entre 5 y 250 mM, y más preferentemente entre 5 y 50 mM, con una concentración de aproximadamente 5-25 mM siendo la más preferida para muchas de las modalidades, para lograr y mantener el pH preferido. Cuando la composición se proporciona como una solución concentrada que requiere dilución, la concentración de amortiguador puede ser significativamente mayor, tal como, pero sin limitarse a, hasta 10 veces más o hasta 2-3 M. (En dichas soluciones concentradas, la concentración de péptido también será correspondientemente más alta). Las composiciones concentradas posteriormente son diluidas con un diluyente para llegar a la concentración y cantidades de amortiguador preferidas (por ejemplo 5-250 mM) y péptidos (por ejemplo 1 µg/ml-100 µg/ml) con una tonicidad adecuada para administración. Los diluyentes adecuados, farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a agua estéril, solución de cloruro de sodio estéril, soluciones estériles de dextrosa (por ejemplo 5%) y otros azúcares, y similares. Las composiciones farmacéuticas acuosas de la presente invención, pueden ser ya sea hipotónicas, substancialmente isotónicas o hipertónicas, teniendo una osmolaridad de entre 10-500 mOsm. Sin embargo, más preferentemente la composición es isotónica, o levemente hipotónica o levemente hipertónica, aunque las composiciones hipotónicas con una osmolaridad entre 100 mOsm e incluso debajo de 50 Osm, también pueden efectivas. Normalmente, sin embargo la tonicidad de la composición farmacéutica puede ser de entre 270-320 mOsm. La tonicidad de la composición farmacéutica puede ser ajustada utilizando cloruro de sodio (NaCI) u otros aditivos de ajuste de tonicidad, tales como glicerina, manitol, sacarosa y otros azúcares reducidos, u otros agentes conocidos para los expertos en la técnica, según sea necesario. La tabla 1, que se encuentra más adelante, resume los constituyentes y condiciones preferidas de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, tanto en formas listas para utilizarse como concentradas.

En una modalidad preferida lista para utilizarse, las composiciones farmacéuticas acuosas de la presente invención incluyen 1 µg/ml-100 µg/ml del péptido sintético tipo motilín de la SEQ. ID. No. 1 en aproximadamente 10 mM de amortiguador de acetato de sodio/ácido acético en un pH de aproximadamente 4.8-5.2 y una osmolaridad de aproximadamente 300±20 mOsm. Además de las composiciones acuosas, listas para utilizarse o composiciones concentradas que requieren dilución, la composición de la presente invención también puede almacenarse en una forma liofilizada (secada por congelación). La composición, en su forma liofilizada, puede incluir las cantidades relativas del péptido y amortiguador establecidas en la tabla 1 anterior (así como otros agentes). Se podrá apreciar que cuando la composición ha sido almacenada en una forma liofilizada, la administración de la composición puede ocurrir inmediatamente al momento de la reconstitución, haciendo menos crítica la estabilidad de almacenamiento a largo plazo de !a composición reconstituida, y por lo tanto, opcional la presencia de un amortiguador. En cualquier caso, en una modalidad de la formulación utilizada, el amortiguador opcional puede ser citrato/ácido cítrico en un pH preferido de aproximadamente 4.7 y más preferentemente 6.0. Además, la formulación utilizada puede incluir además uno o más agentes de generación de volumen tales como, pero sin limitarse a, sacarosa, manitol y glicina y/o combinaciones de los mismos. Los agentes de generación de volumen pueden incluirse en una concentración de 0.5-15% p/v. Las composiciones farmacéuticas acuosas de la presente invención proporcionan los beneficios conocidos previamente. El péptido tipo motilín de las composiciones farmacéuticas de la presente invención permanece estable cuando se almacenan en un amplio rango de temperatura durante periodos de tiempo prolongados. Por ejemplo, cuando se almacena a temperatura ambiente o su temperatura de almacenamiento inferior preferida de 4°C-5°C, se mantiene la estabilidad substancial durante periodos de tiempo significativos. Por ejemplo, a una temperatura de almacenamiento de aproximadamente 25°C, el péptido contenido en la composición de la presente invención permanece estable durante al menos 12 meses, y más preferentemente al menos de aproximadamente 18 meses, e incluso más preferentemente, hasta e incluyendo más allá de aproximadamente 24 meses, reteniendo una potencia de 90% o más tal como se muestra, por ejemplo, en la figura 1. A una temperatura de almacenamiento de 5°C, normalmente se observa el almacenamiento únicamente con degradación marginal (y una potencia de al menos 90-95%) durante hasta al menos 18 meses. Una ventaja adicional de la composición farmacéutica de la presente invención, es su estabilidad de péptido cuando la composición se somete a temperaturas elevadas tales como la temperatura de esterilización. Muchos péptidos son inherentemente inestables, y cuando se someten a calor, se sabe que se degrada muy rápidamente, normalmente en unos cuantos minutos o menos. En contraste, en composiciones de la presente invención, el péptido retiene substancialmente su estabilidad (es decir, permanece substancialmente no degradable y retiene su porcentaje substancial de potencia inicial), incluso después de que la composición es (1) sometida a esterilización, (durante al menos 10 minutos y hasta 60 minutos) a temperaturas de aproximadamente 100°C-128°C y normalmente 121°C), y (2) almacenada subsecuentemente en un contenedor adecuado (descrito más adelante) a temperaturas inferiores normalmente encontradas en una composición farmacéutica, tal como aproximadamente 4°C-5°C hasta aproximadamente 25°C. Tal como se muestra en la figura 2, y se describe en el ejemplo 1 que se encuentra más adelante, en muestras de una composición farmacéutica de la presente invención que fueron sometidas a esterilización con vapor en un contenedor de frasco de vidrio Tipo I, y se almacenó subsecuentemente en dicho contenedor, el péptido retuvo un porcentaje significativo de su potencia inicial (y afinidad de enlace) después de periodos prolongados de almacenamiento a temperaturas de 5°C, 25°C, 40°C, e incluso 55°C. Se puede mejorar de manera adicional la prevención de degradación de péptido, y por consiguiente, la retención de potencia y afinidad de enlace almacenando las composiciones de la presente invención en un contenedor adecuado. Aunque muchos diferentes tipos de vidrio y algunos plásticos han probado ser satisfactorios, durante almacenamiento a largo plazo, los frascos de silicón tratados con vapor son los preferidos. Los frascos de silicón tratados con vapor Tipo 1 Plus están disponibles, por ejemplo en Schott of Lebanon, Pennsylvania, bajo el nombre de producto de frascos recubiertos con sílice Schott Tipo 1 Plus. Otros contenedores de almacenamiento adecuados incluyen frascos USP Tipo 1, ampolletas de vidrio y jeringas de vidrio empacadas previamente Tipo 1. Algunos plásticos también han probado ser efectivos en ayudar a la estabilización de la composición de péptido. A este respecto, los plásticos preferidos son copolímeros de olefina cíclica, disponibles por ejemplo en West Pharmaceuticals bajo el nombre de producto de frascos de resina CZ o de Schott bajo el nombre de producto de frascos TopPAC, o de empaque Alean bajo el nombre de producto de frascos de suero Ticona Topas. Las composiciones de la presente invención también pueden ser almacenadas en PVC, así como en bolsas flexibles que no son de PVC. Cuando se almacena en los contenedores de vidrio o plástico descritos anteriormente, los tiempos de almacenamiento descritos anteriormente a las temperaturas de almacenamiento descritas anteriormente pueden lograrse, aunque para periodos de almacenamiento de al menos 18 meses, los frascos Tipo I Plus (silicón tratado con vapor) y ampolletas de vidrio Tipo I Plus son las preferidas. Tal como se muestra, por ejemplo en las figuras 3 y 4, el almacenamiento de una composición acuosa de la presente invención que incluye aproximadamente 5 µg/ml (figura 3) o 30 µg/ml (figura 4) del péptido sintético tipo motilín de la secuencia SEQ ID 1 en los frascos Schott Tipo 1, demostraron estabilidad (y mantuvieron los altos niveles de potencia) durante varios meses cuando se almacenaron a temperaturas de 5°C a 55°C. Podrá ser apreciado por los expertos en la técnica que la estabilidad medida de las composiciones farmacéuticas a temperaturas elevadas, tales como 40°C o mayor, puede servir como las bases de anticipación de estabilidad durante periodos más largos a temperatura de almacenamiento más típicas, tales como 20°-25°C o 4°C-8°C, por ejemplo. Dichos estudios de "almacenamiento acelerado" son comunes en el campo de la presente invención.

Ejemplo 1 Estabilidad de Reptado topo SViotiBfn después de Autoclave v Almacenamiento El péptido tipo motilín de la SEQ ID NO.: 1 se disolvió en una concentración de 30 µg/ml en amortiguador de acetato de sodio 10 mM, pH 5.0. Las muestras de la solución de péptido almacenadas en frascos de vidrio Tipo I se sometieron a autoclave a una temperatura de 121°C durante 15 minutos y las muestras de autoclave se incubaron a una temperatura de 5°C, 25°C, 40°C o 55°C. La potencia del péptido después de almacenamiento en cada temperatura, se midió con el tiempo probando muestras después de la incubación durante una semana, dos semanas, tres semanas, un mes y tres meses. La potencia se determinó utilizando HPLC para medir la cantidad de péptido no degradado que permanece en cada muestra. Tal como se muestra en la figura 2, el péptido retuvo más del 90% de potencia después de autoclave y almacenamiento durante 3 meses, incluso a una temperatura de almacenamiento elevada de 55°C. La composición farmacéutica de la presente invención muestra estabilidad remarcada durante el período de almacenamiento incluso a una temperatura de almacenamiento elevada. Los expertos en la técnica podrán apreciar que los datos de estabilidad obtenidos a dichas temperaturas elevadas (es decir condiciones de almacenamiento acelerada) se pueden utilizar para anticipar la estabilidad a temperaturas de almacenamiento menores, más típicas durante periodos de tiempo prolongados. Ejemplo 2 Estabilidad de Formulaciones Liofilizadas de Gomposiciones de Péptódo tipo MotiBín El péptido tipo motilín que incluye SEQ ID NO.: 1, se disolvió en una concentración de 30 µg/ml en amortiguador de citrato 10 mM y 1% p/v de sacarosa (agente de generación de volumen) en un pH 6.0. La composición se liofilizó mediante técnicas estándar y se almacenó en un frasco de 20 ml a una temperatura de 40°C. La potencia del péptido tipo motilín se midió en los intervalos de tiempo indicados en la figura 5, reconstituyendo la composición en agua. La potencia se determinó utilizando HPLC para medir la cantidad de péptido no degradado que permanece en cada muestra. Tal como se muestra en la figura 5, el péptido tipo motilín liofilizado retuvo un nivel de potencia significativa (es decir, mayor a 90%) durante varios meses. Se obtuvieron resultados similares cuando el agente de generación de volumen de sacarosa se reemplazó con una glicina combinada del 0.04% p/v y agente de generación de volumen de manitol de 0.4% p/v. Los expertos en la técnica podrán apreciar que la estabilidad de las composiciones farmacéuticas a temperaturas elevadas, tales como 40°C tal como se muestra en la figura 5, pueden servir como la base de anticipación de estabilidad durante periodos más largos a temperaturas de almacenamiento más típicas, íales como de aproximadamente 20°C-25°C o 4°C-8°C, por ejemplo. Ya sea que se preparen y almacenen como una solución acuosa amortiguada, lista para utilizarse o concentrada, o una composición liofilizada que sea reconstituida subsecuentemente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención permanecen potentes durante almacenamiento en periodos de tiempo prolongados. La potencia del péptido mantenida de alrededor 90-100%, y en algunos casos mayor a 95% durante almacenamiento a temperaturas de 5, 25, 40 y 55°C durante al menos 18 meses, hace a la composición farmacéutica de la presente invención un medio preferido para el suministro terapéutico de péptidos tipo motilín. Aunque la presente invención ha sido descrita dentro del contexto de sus modalidades preferidas, son posibles numerosas modificaciones a dichas modalidades sin apartarse del espíritu de la presente invención, el cual se establece en las reivindicaciones adjuntas.

Claims (23)

REBV1MDDCACDONES

1. Una composición farmacéutica que comprende: (a) de aproximadamente 0.5 µg/ml a 100 mg/ml de un péptido sintético tipo motilín que tiene no más de 16 aminoácidos y que tiene la siguiente estructura: R2 Ri en donde: A es L-estereoisómero de un aminoácido alifático lipofílico; B es L-prolina o L-alanina; D es el L-estereoisómero de un aminoácido alifático lipofílico; E es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático, alifático lipofílico, o alicíclico; F es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático o heteroaromático; G es glicina o D-alanina; H es ácido L-glutámico o L-glutamina; I es L-glutamina; J es seleccionado del grupo que consiste en Z, Z-Leu, Z- Leu-Gln, Z-Leu-GIn-Glu, Z-Leu-GIn-Glu-Lys, en donde Z es seleccionado del grupo que consiste en D-arginina, D- homoarginina, D-glutamina, D-asparagina y D-alanina; RT es alquilo inferior o alilo; R2 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior, propargilo y alilo; R3 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior y alilo; R4 es cicloalquilo o arilo el cual puede ser no substiíuido o substituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halógeno, hidroxi y alcoxi inferior; R5 es seleccionado del grupo que consiste en --CH2 C0NH2, grupos aminoalquilo que contienen de 1 a 3 átomos de carbono; y grupos guanidinoalquilo que contienen de 2 a 3 átomos de carbono; R6 es --COOH o --CONH2; y el símbolo * representa un átomo de carbono asimétrico el cual puede estar en la configuración D o L, y en donde cada grupo de alquilo inferior contiene de 1 a 4 átomos de carbono, siempre que: (i) R5 sea --CH2 CONH2, únicamente cuando J sea Z-Leu ó Z-Leu-GIn-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly; (b) 5-250 mM de un amortiguador, teniendo la composición un pH de entre 3 y 9 y teniendo una osmolaridad de aproximadamente 10-500 mOsm/kg.

2. La composición tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque el péptido sintéíico íipo molilín liene 14 aminoácidos.

3. La composición tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque el péptido sintético tipo motilín es (Me3N) +Phe-Val-Pro-lle-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-D-Arg-Leu-Lys-NH2.

4. La composición tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque el aminoácido en la posición 12 del péptido tipo motilín es D-Arginina.

5. La composición tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque el amortiguador comprende acetato de sodio/ácido acético.

6. La composición tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque comprende: (a) entre 1 µg y 100 µg/ml microgramo por mililitro del péptido sintético tipo motilín; y (b) 10-100 mM del amortiguador, teniendo la composición un pH de aproximadameníe 4.5 a 5.5.

7. La composición lal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque el péptido sintético tipo motilín permanece estable durante al menos 18 meses cuando se almacena a 4°C-5°C.

8. La composición lal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque ha sido esterilizada mediante autoclave a una temperatura de aproximadamente 121°C-128°C.

9. La composición tal como se describe en la reivindicación 6, caraclerizada porque la composición puede ser almacenada en un frasco Tipo I a una lemperatura de 55°C durante al menos 3 meses y reíiene al menos 90% de su potencia de péptido.

10. Una composición farmacéutica acuosa que comprende un péplido sintético lipo motilín que tiene no más de 16 aminoácidos en un amortiguador de acéfalo de sodio/ácido acético esterilizado medianle esterilización con vapor a una temperaíura de 120-128°C, en donde el péplido retiene al menos aproximadamente el 95% de su potencia inicial después de la eslerilización.

11. La composición lal como se describe en la reivindicación 10, caraclerizada porque la composición puede ser almacenada a una lemperatura de hasta 55°C duraníe al menos aproximadamente 3 meses y retener al menos 90% de su potencia inicial después del almacenamiento.

12. Una composición farmacéutica acuosa estable que comprende un péptido sintélico lipo motilín que tiene no más de 16 aminoácido en un amoríiguador de aceíato de sodio/ácido acético en donde la composición, se puede almacenar durante al menos 9 meses a una temperalura de aproximadamente 5°C-37°C, y retiene al menos aproximadamente 90% de su potencia inicial.

13. La composición tal como se describe en la reivindicación 12, caraclerizada porque incluye 1 µg/ml-100 µg/ml del péptido de tipo molilín en aproximadameníe 10 mM del amoríiguador.

14. La composición tal como se describe en la reivindicación 1, preparada a partir de una formulación liofilizada de la composición que ha sido reconstituida, en donde la composición incluye además un agente de generación de volumen.

15. La composición tal como se describe en la reivindicación 14, caracterizada porque incluye agentes de generación de volumen seleccionado del grupo que consiste en Sacarosa, glicina y manitol.

16. La composición tal como se describe en la reivindicación 15, caracterizada porque el agente de generación de volumen se encuentra en una concenlración de 1% p/v o menos.

17. La composición lal como se describe en la reivindicación 15, caracterizada porque comprende un agente de generación de volumen que incluye la combinación de glicina y manitol.

18. La composición tal como se describe en la reivindicación 12, almacenada en un frasco recubierto con sílice íralado con vapor.

19. La composición tal como se describe en la reivindicación 12, almacenada en un contenedor de plástico elaborado de un material que comprende un copolímero de ólefina cíclica.

20. La composición tal como se describe en la reivindicación 1, preparada a partir de una solución concentrada del péptido sintético íipo molilín del amoríiguador que ha sido diluido.

21. La composición íal como se describe en la reivindicación 20, caraclerizada porque la solución concentrada incluye hasta 10 veces la cantidad del péptido y el amortiguador.

22. Una composición farmacéutica acuosa concentrada, que incluye: a) una cantidad seleccionada de un péptido sintélico tipo motilín que tiene no más de 16 aminoácidos y que tiene la estruclura: R2 en donde: A es L-estereoisómero de un aminoácido alifático lipofílico; B es L-prolina o L-alanina; D es el L-estereoisómero de un aminoácido alifático lipofílico; E es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático, alifático lipofílico, o alicíclico; F es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático o heteroaromálico; G es glicina o D-alanina; H es ácido L-glutámico o L-glutamina; I es L-glutamina; J es seleccionado del grupo que consiste en Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-GIn-Glu, Z-Leu-GIn-Glu-Lys, en donde Z es seleccionado del grupo que consiste en D-arginina, D-homoarginina, D-glutamina, D-asparagina y D-alanina; R es alquilo inferior o alilo; R2 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior, propargilo y alilo; R3 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior y alilo; R es cicloalquilo o arilo el cual puede ser no substituido o substiluido con uno o más suslituyentes seleccionado del grupo que consiste en halógeno, hidroxi y alcoxi inferior; R5 es seleccionado del grupo que consiste en --CH2 CONH2, grupos aminoalquilo que contienen de 1 a 3 átomos de carbono; y grupos guanidinoalquilo que contienen de 2 a 3 átomos de carbono; R6 es --COOH o --CONH2; y el símbolo * representa un átomo de carbono asimétrico el cual puede estar en la configuración D o L, y en donde cada grupo de alquilo inferior contiene de 1 a 4 átomos de carbono, siempre que: (i) R5 sea --CH2 CONH2, únicamente cuando J sea Z-Leu ó Z-Leu-GIn-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly; y b) una cantidad seleccionada de un amortiguador, en donde al momento de la dilución la composición farmacéutica acuosa diluida comprende: i) 0.5 µg/ml a 100 µg/ml del péplido; ii) 10-100 mM del amortiguador; iii) tiene un pH de entre 3-9 y una osmolaridad de aproximadamente 10-500 mOsm/kg.

23. Una composición farmacéutica liofilizada que incluye: a) un péptido sintético tipo molilín que tiene no más de 16 aminoácidos, que tiene la estructura: R2 en donde: A es L-estereoisómero de un aminoácido alifático lipofílico; B es L-prolina o L-alanina; D es el L-estereoisómero de un aminoácido alifáíico lipofílico; E es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático, alifático lipofílico, o alicíclico; F es el L-estereoisómero de un aminoácido aromático o heteroaromático; G es glicina o D-alanina; H es ácido L-glutámico o L-glutamina; I es L-glutamina; J es seleccionado del grupo que consiste en Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-GIn-Glu, Z-Leu-GIn-Glu-Lys, en donde Z es seleccionado del grupo que consiste en D-arginina, D-homoarginina, D-glutamina, D-asparagina y D-alanina; R-\ es alquilo inferior o alilo; R2 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior, propargilo y alilo; R3 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo inferior y alilo; R4 es cicloalquilo o arilo el cual puede ser no substituido o substituido con uno o más sustituyentes seleccionado del grupo que consiste en halógeno, hidroxi y alcoxi inferior; R5 es seleccionado del grupo que consiste en --CH2 C?NH2, grupos aminoalquilo que contienen de 1 a 3 átomos de carbono; y grupos guanidinoalquilo que contienen de 2 a 3 átomos de carbono; R6 es --COOH o --CONH2; y el símbolo * representa un átomo de carbono asimétrico el cual puede estar en la configuración D o L, y en donde cada grupo de alquilo inferior contiene de 1 a 4 álomos de carbono, siempre que: (i) R5 sea --CH2 CONH2, únicamente cuando J sea Z-Leu ó Z-Leu-GIn-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly; mediante lo cual al momento de la reconstitución, la composición acuosa reconstituida comprende: i) 0.5 µg/ml a 100 µg/ml del péptido; ii) 10-200 mM de un amortiguador; iii) que tiene un pH de entre 3-9 y una osmolaridad de aproximadamente 10-500 mOsm/kg. RESUMEM Se describen composiciones farmacéuticas, estables que incluyen un péptido sintético tipo motilín en una solución amortiguada. La composición proporciona un péptido que permanece estable y que retiene substancialmenle su potencia inicial durante almacenamiento prolongado y después de esterilización con vapor.