MX2007001342A - Anticuerpos monoclonales humanos contra interleucina-4 humana (il-4). - Google Patents

Abstract

Se describen anticuerpos que son especificos para la interleucina-4 humana, y su uso en el tratamiento de enfermedades mediadas por IL-4 y/o IgE.

Description

ANTICUERPOS MONOCLONALES HUMANOS CONTRA INTERLEUCINA-4 HUMANA (IL-4) Descripción de la Invención La presente invención se refiere a anticuerpos que son específicos para la interleucina-4 humana (hlL-4). Las enfermedades alérgicas, tales como dermatitis atópica, rinitis alérgica, asma, y alergias a alimentos, están característicamente asociadas con respuestas exacerbadas de las células Th2 a los antígenos medio-ambientales inocuos (alérgenos).

Los alérgenos son capturados por las células presentadoras de antígeno, procesados y presentados en el contexto de moléculas MHC Clase II ante las células auxiliares T (Th) específicas de alérgeno. Las células Th específicas de alérgeno pertenecen al fenotipo Th2 y se desarrollan a partir de células T precursoras bajo la influencia de la interleucina-4 (IL-4). Una vez que se activan las células Th2, secretan IL-4 e interleucina-13 (IL-13), que, junto con las señales enlazadas a la superficie, inducen a las células B a cambiar hasta células de plasma productoras de IgE. Las moléculas de IgE se enlazan con FceR de alta afinidad sobre los mastocitos y, después de su encuentro subsecuente con el alérgeno, inducen la activación de los mastocitos y la liberación de los mediadores de las reacciones alérgicas. Las citocinas Th2 también promueven la sobrevivencia de los eosinófilos y el crecimiento de los mastocitos que, después de la desgranulación, también liberan citocinas Th2 adicionales capaces de aumentar la producción de IgE, la diferenciación de células Th, y la sobrevivencia de los eosinófilos. Por consiguiente, las células Th2 tienen un papel pivotal en la inducción y desarrollo de las respuestas alérgicas y, por consiguiente, la antagonización de su desarrollo y/o de sus funciones efectoras sería una manera eficiente de intervenir en las respuestas alérgicas. IL-4 e IL-13 comparten muchas actividades biológicas debido al hecho de que ambas citocinas utilizan la cadena (IL-4R)-alfa receptora de IL-4 como un componente de sus complejos receptores respectivos. IL-13 señala a través de un complejo heterodimérico que consiste en una cadena de enlace de IL-13 (IL-13Ra1) y la cadena IL-4Ra. IL-4 utiliza este complejo IL-4Ra/IL-13Ra1 , denominado como IL-4R tipo II, como una alternativa a IL-4R tipo I, consistente en la cadena IL-4Ra y la cadena ? común (c?) compartida por los receptores para IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15, y linfopoietina estromal tímica (TSLP). Debido a que las células T no expresan IL-13Ra1, IL-13 en contraste con IL-4 no soporta la proliferación de células T, y no puede inducir la diferenciación de las células Th humanas puras hacia el fenotipo Th2 (ver, por ejemplo, J. E. de Vries y colaboradores, Encyclopedia of Hormones and related cell regulators, Academic Press, 2002). IL-4 tiene un papel pivotal en la proliferación de células T y, por lo tanto, en el desarrollo y mantenimiento de enfermedades alérgicas. Los ratones deficientes en el gen de IL-4, o los ratones que carecen de IL-4 (ver, por ejemplo, Kuhn R. y colaboradores, Science, 1991 (5032) 707:10), o del factor de señalización corriente abajo STAT6 (ver, por ejemplo, Kaplan M. H. y colaboradores, Immunity, 1996 (3) 313-9), no desarrollan números significativos de célula Th2, y tienen respuestas de IgE reducidas. Ahora hemos encontrado anticuerpos con una alta afinidad por la IL-4 humana, y un fuerte potencial inhibidor de la síntesis de IgE mediada por IL-4, por parte de las células B humanas puras. En un aspecto, la presente invención proporciona un anticuerpo específico de IL-4 humana, el cual se enlaza con la IL-4 humana con una constante de disociación Kd igual o menor que 800 pM, tal como, por ejemplo, igual o menor que 200 pM. En otro aspecto, la presente invención proporciona un anticuerpo que tiene un primer dominio que comprende, en secuencia, las regiones hipervariables CDR1, CDR2, y CDR3, y un segundo dominio que comprende, en secuencia, las regiones hipervariables CDR1', CDR2', y CDR3', seleccionado a partir del grupo que consiste en un anticuerpo en donde: a) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Phe-Ser-Ser-Tyr-Ala-Met-His (GFTFSSYAMH), la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Phe-lle-Trp-Asp-Asp-Gly-Ser-Phe-Lys-Tyr-Tyr-Ala-Glu-Ser-Val-Lys-Gly (FIWDDGSFKYYAESVKG), la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Gly-Ser-Trp-Ser-Pro-Asp-lle-Phe (EGSWSPDIF), la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Ser-Arg-Ala (SQGISRA), la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser (DAS), la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr- Pro-lle (FNSYPI), b) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Leu-Ser-Ser-Phe-Gly-Met-His (GFTLSSFGMH), la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-lle-Trp-Tyr-Asp-Gly-Ser-Asn-Glu-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly (VIWYDGSNEYYADSVKG), la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Gly-Ser-Trp-Ser-Pro-Asp-lle-Phe (EGSWSPDIF), la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Arg-Ser-Ala (SQGIRSA), la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser (DAS), la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro-Val (FNSYPV), c) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr- Leu-Ser-Ser-Tyr-Gly-Met-His (GFTLSSYGMH), la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-lle-Trp-Tyr-Asp-Gly-Asn-Asn-Gln-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly (VIWYDGNNQYYADSCKG), la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Gly-Ser-Trp- Ser-Pro-Asp-lle-Phe (EGSWSPDIF), la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Ser-Ser-Tyr (SQGISSY), la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser (DAS), la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro (FNSYP), d) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Asp-Thr-Phe-Ser-Ser-Tyr-Ala-lle-Ser (GDTFSSYAIS), la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-lle-lle-lle- Pro-VAI-lle-Gly-Thr-Val-Asn-Tyr-Glu-Glu-Arg-Phe-GIn-Asp-Arg (GIIIPVIGTVNYEERFQD), la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Glu-Gly-Phe-Leu (EEGFL), la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle- Ser-Ser-Ala (SQGISSA), la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser (DAS), la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro-Leu (FNSYPL), e) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Phe-Ser-Cys-Cys-Gly-Met-His (GFTFSCCGMH), la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-lle-Trp-Tyr-Asp-Gly-Ser-Asn-Lys-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly (VIWYDGSNKYYADSVKG), la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ser-Ser-Gly-Ser-Phe-Tyr-Glu-Tyr-Phe (DSSGSFYEYF), la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Asn-Ser-Ala (SQGINSA), la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser (DAS), la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro-Tyr (FNSYPY), y f) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Phe-Ser-Gly-Tyr-Gly-Met-His (GFTFSGYGMH), la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-Val-Trp-Tyr-Asp-Gly-Gly-Tyr-Lys-Phe-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly (VVWYDGGYKFYADSVKG), la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ser-Ser-Gly-Ser-Phe-Tyr-Glu-Tyr-Leu (DSSGSFYEYL), la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Ser-Ser-Ala (SQGISSA), la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser (DAS), la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr- Pro-His (FNSYPH). CDR1, CDR2, y CDR3 son parte de la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de este anticuerpo, y CDR1', CDR2', y CDR3' son parte de la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de este anticuerpo.

También hemos encontrado un anticuerpo que comprende: - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 1, y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 2, ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 9, y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 10, ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 17, y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 18, ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 25, y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 26, ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 33, y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 34, ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 41, y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de la SEC ID NO: 42.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un anticuerpo que comprende: a) un polipéptido de la SEC ID NO: 1 y un polipéptido de la SEC ID NO: 2, ó b) un polipéptido de la SEC ID NO: 9 y un polipéptido de la SEC ID NO: 10, ó c) un polipéptido de la SEC ID NO: 17 y un polipéptido de la SEC ID NO: 18, ó d) un polipéptido de la SEC ID NO: 25 y un polipéptido de la SEC ID NO: 26, ó e) un polipéptido de la SEC ID NO: 33 y un polipéptido de la SEC ID NO: 34, ó f) un polipéptido de la SEC ID NO: 41 y un polipéptido de la SEC ID NO: 42. Además hemos encontrado un anticuerpo que comprende: - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de la SEC ID NO: 1, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 3), y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de la SEC ID NO: 2, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 4), ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de la SEC ID NO: 9, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 11), y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de la SEC ID NO: 10, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 12), ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de la SEC ID NO: 17, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 19), y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de la SEC ID NO: 18, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 20), ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de la SEC ID NO: 25, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 27), y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de la SEC ID NO: 26, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 28), ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de la SEC ID NO: 33, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 35), y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de la SEC ID NO: 34, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 36), ó - la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de la SEC ID NO: 41, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 43), y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de la SEC ID NO: 42, que además contiene una secuencia líder (= SEC ID NO: 44). En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un anticuerpo que comprende: a) un polipéptido de la SEC ID NO: 3 y un polipéptido de la SEC ID NO: 4, ó b) un polipéptido de la SEC ID NO: 11 y un polipéptido de la SEC ID NO: 12, ó c) un polipéptido de la SEC ID NO: 19 y un polipéptido de la SEC ID NO: 20, ó d) un polipéptido de la SEC ID NO: 27 y un polipéptido de la SEC ID NO: 28, ó e) un polipéptido de la SEC ID NO: 35 y un polipéptido de la SEC ID NO: 36, ó f) un polipéptido de la SEC ID NO: 43 y un polipéptido de la SEC ID NO: 44. Los anticuerpos proporcionados por la presente invención también se designan posteriormente en la presente como "compuesto(s) de (acuerdo con) la presente invención". En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención, el cual se selecciona a partir del grupo que consiste en un anticuerpo monoclonal específico de IL- 4 humana (hlL-4 mAb), un fragmento del mismo, y un análogo del mismo. Un hlL-4 mAb es un anticuerpo que reconoce específicamente la IL-4 humana, es decir, incluye sitios de enlace de antígeno específicos para la IL-4 humana, y el cual tiene específicamente sus CDRs pero también otras partes de la cadena pesada y ligera derivadas a partir de inmunoglobulinas humanas. El anticuerpo puede ser de cualquier isotipo, incluyendo IgG 1 , lgG2, lgG3, e lgG4, de preferencia del isotipo lgG1. "Un fragmento del mismo" significa una parte de la secuencia variable de cadena pesada y ligera de un hlL-4 mAb, la cual retiene la misma especificidad de enlace de antígeno y/o capacidad neutralizante que la molécula a partir de la cual se derivan los fragmentos, por ejemplo un fragmento Fab, o un fragmento F(ab')2 derivado a partir del hlL-4 mAb. Un fragmento Fab contiene la cadena ligera entera y las porciones amino-terminales de la cadena pesada; un fragmento F(ab')2 es el fragmento formado por 2 fragmentos Fab enlazados por enlaces de disulfuro. Estos fragmentos se pueden obtener por medios convencionales, por ejemplo disociación de los anticuerpos monoclonales con las enzimas proteolíticas apropiadas, papaína y/o pepsina, o mediante métodos recombinantes, y los fragmentos mismos son útiles como agentes terapéuticos y/o profilácticos. "Un análogo del mismo" significa un hlL-4 mAb con una secuencia de aminoácidos que es modificada por cuando menos un aminoácido fuera de las regiones CDR, por ejemplo fuera de CDR1, CDR2, y CDR3 de la cadena pesada, o fuera de CDR1', CDR2', y CDR3' de la cadena ligera. Esta modificación incluye una modificación química, una sustitución, o una reconfiguración de uno o unos cuantos aminoácidos, es decir, no más de 10 aminoácidos, cuya modificación permite que la secuencia de aminoácidos retenga las características biológicas, por ejemplo especificidad de antígeno y afinidad, de la secuencia no modificada. Por ejemplo, se pueden construir mutaciones silenciosas por medio de sustitución para crear sitios de restricción de endonucleasa dentro o alrededor de las regiones CDR. Un análogo también puede presentarse como una variación alélica. Una "variación o modificación alélica" es una alteración en la secuencia de ácido nucleico que codifica un anticuerpo de la presente invención fuera de las regiones CDR. Estas alteraciones o modificaciones se pueden deber a las degeneraciones del código genético, o se pueden diseñar liberalmente para proporcionar las características deseadas. Estas variaciones o modificaciones pueden o no dar como resultado alteraciones en cualquier secuencia de aminoácidos codificada, pero retienen las actividades biológicas, por ejemplo, especificidad de antígeno y afinidad. También hemos encontrado polinucleótidos que codifican los compuestos de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención proporciona polinucleótidos aislados que comprenden polinucleótidos que codifican un compuesto de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención proporciona polinucleótidos que codifican la secuencia de aminoácidos de CDR1, CDR2, y CDR3 de un compuesto de la presente invención, y polinucleótidos que codifican la secuencia de aminoácidos de CDR1', CDR2', y CDR3' de un compuesto de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención proporciona polinucleótidos que comprenden: a) un polinucleótido de la SEC ID NO: 5, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 6, ó b) un polinucleótido de la SEC ID NO: 13, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 14, ó c) un polinucleótido de la SEC ID NO: 21, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 22, ó d) un polinucleótido de la SEC ID NO: 29, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 30, ó e) un polinucleótido de la SEC ID NO: 37, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 38, ó f) un polinucleótido de la SEC ID NO: 45, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 46. En otro aspecto, la presente invención proporciona polinucleótidos que codifican: a) un polipéptido de las SEC ID NO: 7 y SEC ID NO: 8, ó b) un polipéptido de las SEC ID NO: 15 y SEC ID NO: 16, ó c) un polipéptido de las SEC ID NO: 23 y SEC ID NO: 24, ó d) un polipéptido de las SEC ID NO: 31 y SEC ID NO: 32, ó e) un polipéptido de las SEC ID NO: 39 y SEC ID NO: 40, ó f) un polipéptido de las SEC ID NO: 47 y SEC ID NO: 48. La SEC ID NO: 5 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1. La SEC ID NO: 6 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2. La SEC ID NO: 7 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3.

La SEC ID NO: 8 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 4. La SEC ID NO: 13 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 9. La SEC ID NO: 14 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 10. La SEC ID NO: 15 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 11. La SEC ID NO: 16 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 12. La SEC ID NO: 21 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 17. La SEC ID NO: 22 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 18. La SEC ID NO: 23 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 19. La SEC ID NO: 24 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 20. La SEC ID NO: 29 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 25. La SEC ID NO: 30 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 26. La SEC ID NO: 31 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 27. La SEC ID NO: 32 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 28. La SEC ID NO: 37 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 33. La SEC ID NO: 38 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 34. La SEC ID NO: 39 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 35. La SEC ID NO: 40 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 36. La SEC ID NO: 45 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 41. La SEC ID NO: 46 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 42. La SEC ID NO: 47 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 43. La SEC ID NO: 48 es un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 44. Un compuesto de la presente invención se puede producir mediante técnicas de ADN recombinante. Por consiguiente, se pueden construir una o más moléculas de ADN que codifiquen el anticuerpo, un fragmento del mismo, o un análogo del mismo, y se pueden colocar bajo secuencias de control apropiadas en un vector apropiado, y se pueden transferir a un huésped (organismo) adecuado para la expresión. El compuesto de la presente invención se puede obtener de acuerdo con, por ejemplo de una manera análoga a, un método convencional, junto con la información proporcionada en la presente, por ejemplo, con el conocimiento de la secuencia de aminoácidos de las regiones hipervariables y/o variables y los polinucleótidos que codifican estas regiones. Por ejemplo, en la Patente Europea Número EP 239 400, se describe un método para construir un gen de dominio variable, y se puede resumir brevemente como sigue: Se prepara un vector de expresión replicable que incluya un promotor adecuado operativamente enlazado a una secuencia de polinucleótido de interés, por ejemplo que codifique cuando menos un dominio variable de una cadena pesada o ligera de inmunoglobulina que comprenda CDRs, se transforma una línea celular adecuada con este vector de expresión, se cultiva la línea celular transformada, y se obtiene la inmunoglobulina correspondiente. En otro aspecto, la presente invención proporciona un vector de expresión que comprende un polinucleótido que codifica un compuesto de la presente invención, por ejemplo cuando menos un polinucleótido de las SEC ID NO: 5, SEC ID NO: 6, SEC ID NO: 7, SEC ID NO: 8, SEC ID NO: 13, SEC ID NO: 14, SEC ID NO: 15, SEC ID NO: 16, SEC ID NO: 21, SEC ID NO: 22, SEC ID NO: 23, SEC ID NO: 24, SEC ID NO: 37, SEC ID NO: 38, SEC ID NO: 39, SEC ID NO: 40, SEC ID NO: 45, SEC ID NO: 46, SEC ID NO: 47, ó SEC ID NO: 48. Naturalmente, un vector de expresión puede comprender más de un polinucleótido. En otro aspecto, la presente invención proporciona: - Un sistema de expresión que comprende un polinucleótido que codifica un compuesto de la presente invención, en donde este sistema de expresión o parte del mismo es capaz de producir un compuesto de la presente invención, por ejemplo un hlL-4 mAb, cuando el sistema de expresión o parte del mismo esté presente en una célula hospedadora compatible; y - Una célula hospedadora aislada que comprende un sistema de expresión como se define anteriormente. Los vectores de expresión, por ejemplo que comprenden promotores adecuados y genes que codifican las partes constantes de cadena pesada y ligera son conocidos, por ejemplo, y están comercialmente disponibles, e incluyen, por ejemplo, el vector de cadena pesada lgG1 y el vector de cadena ligera kappa humano. Se puede producir un vector de expresión convencional o un plásmido recombinante mediante la colocación del polinucleótido respectivo en asociación operativa con secuencias de control reguladoras convencionales capaces de controlar la réplica y expresión en, y/o la secreción a partir de, una célula hospedadora. Las secuencias reguladoras incluyen secuencias promotoras, por ejemplo el promotor CMV, el promotor LCK, y secuencias de señales apropiadas. Una célula hospedadora seleccionada se puede transfectar mediante técnicas convencionales con el vector de interés para crear una célula hospedadora transfectada, la cual entonces se puede cultivar mediante técnicas convencionales para producir los compuestos de la presente invención. Las líneas celulares apropiadas se pueden encontrar de acuerdo con, por ejemplo de una manera análoga a, un método convencional. Los huéspedes apropiados son conocidos o se pueden encontrar de acuerdo con, por ejemplo de una manera análoga a, un método convencional, e incluyen cultivos celulares o animales transgénicos. Las células o líneas celulares huéspedes adecuadas para la expresión de los compuestos de la presente invención son de preferencia células eucarióticas, tales como, por ejemplo, CHO, COS, una célula de fibroblasto (por ejemplo, 3T3), y células mieloides, entre otras, de preferencia una célula de mamífero, tal como una célula CHO o SP2/0. Los compuestos de la presente invención exhiben actividad farmacológica y, por consiguiente, son útiles como productos farmacéuticos. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención interfieren fuertemente con el enlace de IL-4 a un receptor de IL-4, y en la presente también son referidos como compuestos bloqueadores o neutralizantes de IL-4 de la presente invención, incluyendo hlL-4 Ab(s). Los compuestos de la presente invención muestran actividad, y su afinidad se puede determinar en la PRUEBA: MEDICIÓN DE AFINIDAD, como se describe en el Ejemplo 1. Un compuesto de la presente invención, por consiguiente, muestra actividad terapéutica contra enfermedades mediadas por IL-4 y/o IgE, tales como: - diferentes enfermedades alérgicas, por ejemplo incluyendo urticaria, reacciones alérgicas a medicamentos, rinitis, por ejemplo rinitis alérgica, conjuntivitis, por ejemplo rinoconjuntivitis, dermatitis, por ejemplo dermatitis atópica, asma, por ejemplo asma atópico y asma alérgico, choque anafiláctico; de preferencia dermatitis atópica, asma alérgico, rinitis alérgica, rinoconjuntivitis alérgica, tal como asma alérgico o dermatitis atópica; - enfermedades autoinmunes, incluyendo, por ejemplo, enfermedad de Kawasaki, enfermedad de Grave, síndrome de Sjorgen, síndrome linfoproliferativo autoinmune, anemia hemolítica autoinmune, uveitís autoinmune, miastenia gravis, lupus eritematoso, y penfigoide buloso; - trastornos del sistema digestivo en donde IL-4 y/o IgE tengan un papel, incluyendo, por ejemplo, úlceras, inflamación gástrica, inflamación de la mucosa, colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn, enfermedad inflamatoria del intestino, y otros trastornos del sistema digestivo en los que IL-4 y/o IgE tengan un papel; - enfermedades en donde se sobre-produzcan IL-4 y/o IgE, y que se considere que contribuyan a la patología, incluyendo, por ejemplo, esclerosis sistémica (esclerodermia), artritis séptica, y artritis reactiva. En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención, por ejemplo un hlL-4 mAb, para utilizarse como un producto farmacéutico, por ejemplo contra enfermedades mediadas por IL-4 y/o IgE, por ejemplo enfermedades alérgicas, por ejemplo dermatitis atópica, asma alérgico, rinitis alérgica, de preferencia dermatitis atópica. En otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de la presente invención de un compuesto de la presente invención, el cual se selecciona a partir del grupo que consiste en un hlL-4 mAb, un fragmento del mismo, y un análogo del mismo. Para uso farmacéutico, un compuesto de la presente invención incluye uno o más, de preferencia un compuesto de la presente invención, por ejemplo una combinación de dos o más compuestos de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la presente invención para la fabricación de un medicamento, por ejemplo una composición farmacéutica, para el tratamiento de enfermedades mediadas por IL-4 y/o IgE, por ejemplo enfermedades alérgicas, por ejemplo rinoconjuntivitis alérgica, dermatitis atópica, asma alérgico, rinitis alérgica, de preferencia asma alérgico o dermatitis atópica, tal como dermatitis atópica. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la presente invención para la fabricación de un medicamento, por ejemplo una composición farmacéutica, para el tratamiento de una enfermedad como se describe anteriormente, por ejemplo seleccionada a partir del grupo que consiste en dermatitis atópica, asma alérgico, y rinitis alérgica. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención, para los usos mencionados anteriormente, en donde el compuesto de la presente invención se selecciona a partir del grupo que consiste en hlL-4 mAb, un fragmento del mismo, y un análogo del mismo. Por ejemplo, se ha determinado que la constante de afinidad de un compuesto de la presente invención, por ejemplo un hlL-4 mAb, un fragmento del mismo, o un análogo del mismo, para la IL-4 humana, es igual o menor que 800 pM, por ejemplo es igual o menor que 200 pM, tal como de aproximadamente 30 pM a aproximadamente 200 pM, de preferencia de aproximadamente 45 pM a aproximadamente 170 pM, tal como aproximadamente 100 pM, más preferiblemente aproximadamente 50 pM, tal como aproximadamente 45 PM- Por ejemplo, también se ha determinado que la constante de afinidad de un compuesto de la presente invención, por ejemplo un hlL-4 mAb, un fragmento del mismo, o un análogo del mismo, para la IL-4 humana, es de 30 pM a 200 pM, de preferencia de 45 pM a 170 pM, tal como 100 pM, más preferiblemente 50 pM, tal como 45 pM. Por consiguiente, se indica que, para el tratamiento de las enfermedades mediadas por IL-4, los compuestos de la presente invención se pueden administrar a mamíferos superiores, por ejemplo seres humanos, mediante modos de administración similares, en dosificaciones similares a las convencionalmente utilizadas con los anticuerpos monoclonales. En otro aspecto, la presente invención proporciona un anticuerpo que se enlaza con la IL-4 humana con una constante de disociación igual o menor que 200 pM, por ejemplo de 30 a 200 pM. En un aspecto adicional de la presente invención, el anticuerpo para los usos mencionados anteriormente, es un hlL-4 mAb, un fragmento del mismo, o un análogo del mismo, el cual se enlaza con la IL-4 humana con una constante de disociación Kd igual o menor que 200 pM, por ejemplo de 30 a 200 pM. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un método de tratamiento de enfermedades que son mediadas por IL-4 y/o IgE, por ejemplo enfermedades alérgicas, por ejemplo dermatitis atópica, asma alérgico, rinitis alérgica, de preferencia dermatitis atópica, cuyo tratamiento comprende administrar a un sujeto que necesite el tratamiento, una cantidad efectiva de un compuesto de la presente invención, por ejemplo en la forma de una composición farmacéutica. En un aspecto adicional de la presente invención, un compuesto de la presente invención se administra en combinación con otro agente farmacéuticamente activo, ya sea de una manera simultánea o en secuencia. El tratamiento incluye tratamiento y profilaxis. Para este tratamiento, la dosificación apropiada, por supuesto, variará dependiendo, por ejemplo, de la naturaleza química y de los datos farmacocinéticos de un anticuerpo de la presente invención empleado, del huésped individual, del modo de administración, y de la naturaleza y severidad de las condiciones que se estén tratando. Sin embargo, en general, para obtener resultados satisfactorios en mamíferos superiores, por ejemplo en seres humanos, una dosificación diaria indicada está en el intervalo de, por ejemplo, aproximadamente 0.1 nanogramos/kilogramo a, por ejemplo, 10 miligramos/kilogramo, tal como de, por ejemplo, aproximadamente 100 nanogramos/kilogramo, a, por ejemplo, aproximadamente 2 miligramos/kilogramo de un compuesto de la presente invención; convenientemente administrados, por ejemplo, en dosis divididas hasta cuatro veces al día. Un compuesto de la presente invención se puede administrar por cualquier vía convencional, por ejemplo parenteralmente, por ejemplo incluyendo administración intravenosa, intradérmica, intramuscular, subcutánea, intranasal, soluciones o suspensiones inyectables, o polvo inhalador. En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención en asociación con cuando menos un excipiente farmacéutico, por ejemplo un vehículo y/o diluyente apropiado, por ejemplo incluyendo rellenos, aglutinantes, desintegrantes, acondicionadores de flujo, lubricantes, azúcares y edulcorantes, fragancias, conservadores, estabilizantes, agentes humectantes y/o emulsionantes, solubilizantes, sales para regular la presión osmótica, y/o reguladores del pH.

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención, la cual comprende además otro agente farmacéuticamente activo. Estas composiciones se pueden fabricar de acuerdo con, por ejemplo de una manera análoga a, un método convencional, por ejemplo mediante procesos de mezcla, granulación, recubrimiento, disolución, o liofilización. Las formas de dosificación unitaria pueden contener, por ejemplo, de aproximadamente 0.5 miligramos a, por ejemplo, aproximadamente 1000 miligramos, tal como de 1 miligramo a aproximadamente 500 miligramos. Un compuesto de la presente invención se puede utilizar para tratamiento farmacéutico de acuerdo con la presente invención, solo o en combinación con uno o más agentes farmacéuticamente activos diferentes. Estos otros agentes farmacéuticamente activos incluyen, por ejemplo, otros anticuerpos, por ejemplo tales como anticuerpos que neutralicen la IgE, las citocinas, o los receptores de citoquina, los cuales se seleccionan de acuerdo con la condición particular que se vaya a tratar. Las combinaciones incluyen combinaciones fijas, en donde dos o más agentes farmacéuticamente activos están en la misma formulación; estuches terapéuticos, en donde dos o más agentes farmacéuticamente activos en formulaciones separadas se venden en el mismo paquete, por ejemplo con instrucciones para su coadministración; y combinaciones libres, en donde los agentes farmacéuticamente activos se empacan por separado, pero se dan instrucciones para su administración simultánea o en secuencia. En otro aspecto, la presente invención también proporciona un método para diagnosticar alergias y otras condiciones asociadas con una producción excesiva de IgE en un ser humano, el cual comprende: a) poner en contacto una muestra de un fluido biológico con un anticuerpo de la presente invención, y b) ensayar para determinar la presentación del enlace entre este anticuerpo y la IL-4 humana. En los siguientes Ejemplos, todas las temperaturas están en grados Celsius (°C) y no están corregidas. Se utilizan las siguientes abreviaturas: Regulador FACS PBS, FCS al 2 por ciento, y NaN3 al 0.2 por ciento. FCS Suero de becerro fetal. FITC Isocianato de fluoresceína. Cl50 Concentración inhibidora. KLH Hemocianína de limpete de orificio. mAb Anticuerpo monoclonal. MTX Metotrexato. PBS Suero regulado con fosfato. slgD Inmunoglobulina D superficial. rmlL-3 lnterleucina-3 de murino recombinante. rhlL-4 lnterleucina-4 humana recombinante. rhlL-13 lnterleucina-13 humana recombinante. rpm Revoluciones por minuto. RPMI Medio del Roswell Park Memorial Institute. RT Temperatura ambiente. Regulador-TF Sacarosa 272 mM, MgCI2 1 mM, regulador de fosfato 7 mM, pH de 7.4. EJEMPLOS EJEMPLO 1: a) Producción de anticuerpo. Los plásmidos que codifican las regiones variables de la secuencia SEC ID NO: 5 ó 7 (= cadena pesada) y la secuencia SEC ID NO: 6 u 8 (= cadena ligera) del anticuerpo, se clonan en casetes de expresión para las cadenas ligeras kappa humanas y las cadenas pesadas IgG 1 humanas. Las regiones determinantes de especificidad se combinan con los elementos necesarios para generar anticuerpos monoclonales completos, es decir, promotor, secuencia líder, y sitios donadores de empalme, para el empalme con los exones de la región constante del anticuerpo que se requieren para la expresión de las proteínas de inmunoglobulina funcionales. Los casetes de región variable para los anticuerpos de cadena pesada y ligera, que codifican para las secuencias líder, la región variable, y los sitios donadores de empalme de cebador-3' para empalmar los exones CH1-CH4 de la región constante y kappa, se transfieren a los vectores de expresión de mamífero HC (vector de cadena pesada, lgG1 humano) y LC (vector de cadena ligera, kappa humano).

El plásmido que contiene la cadena ligera y el plásmido que contiene la cadena pesada, se introducen en células Sp2/0 en un planteamiento de co-transfección. Por ejemplo, para la transfección, se utilizan células en fase de crecimiento exponencial con una viabilidad de aproximadamente el 95 por ciento. Las células se lavan dos veces con regulador-TF frío, y se ajusta la concentración celular a 2 x 107 células/mililitro en regulador-TF. Se mezclan 0.8 mililitros de la suspensión celular obtenida con 15 microgramos de cada uno de los plásmidos de cadena pesada y de cadena ligera, y se colocan sobre hielo durante 10 minutos. La transfección se hace mediante electroporación utilizando el Biorad Gene Pulser (280 V y 25 µF). Después de la electroporación, las células se colocan sobre hielo durante 15 minutos, se transfieren a 50 mililitros de medio de cultivo frío, y se incuban durante 1 día a 37°C y con CO2 al 5 por ciento. Para la amplificación clonal, las células resistentes a G418 se cultivan en la presencia de MTX 200 nM. Se siembra una alícuota de la reserva celular heterogénea en placas de 96 pozos en una densidad clonal de 1 célula viable/pozo en un medio de cultivo que contiene MTX 200 nM, permitiendo la selección de poblaciones clónales de células amplificadas. Se aplica clonación de dilución limitante para generar las líneas celulares clónales después de la amplificación y adaptación a las condiciones de cultivo sin suero. Las células se siembran en dos placas de 96 pozos en una concentración de 0.5 células/pozo. Los pozos se rastrean microscópicamente para determinar la clonalidad un día después de la siembra. Solamente se utilizan anticuerpos monoclonales para la prueba adicional. El anticuerpo obtenido comprende una secuencia de aminoácidos de las SEC ID NO: 1 y SEC ID NO: 2. b) Mediciones de afinidad. Las mediciones de afinidad de los anticuerpos monoclonales humanos de la presente invención se llevan a cabo en un instrumento BIAcore R 2000. La IgG anti-humano se recubre sobre un chip sensor BIAcore CM-5 (BIAcore), de tal manera que la aplicación de cantidades definidas de anticuerpos monoclonales humanos dé como resultado la captura sobre esta superficie preparada, y por consiguiente, un cambio de las propiedades refractarias que se miden. Una aplicación subsecuente de rhlL-4 da como resultado un cambio adicional de las propiedades refractarias, el cual permite hacer la determinación del índice de asociación ( activado, índice activado), así como el índice de disociación ( desact. ado- índice desactivado), y el producto de estos dos, la afinidad (Kd, constante de disociación, dada en pM), de acuerdo con el software BIAevaluation 3.0. Utilizando varias concentraciones de rhlL-4 en BIAbuffer (regulador BIA), se determina una afinidad de 43 pM de un anticuerpo monoclonal como se define por las CDRs descritas en la reivindicación 2a). c) Determinación del potencial inhibidor sobre IgE mediada por IL-4. d) Fuentes celulares.

Se aislan células B humanas a partir de sangre periférica, respectivamente, recubrimientos esponjosos mediante centrifugación de densidad Ficoll-paque, seguida por separación magnética con perlas MACS (Miltenyi Biotech) específicas para CD19 humano ó CD22 humano, en un dispositivo AutoMACS. De una manera similar, se aislan células B humanas puras, utilizando anticuerpos F(ab')2 de cabra marcados con FITC contra slgD humana, seguidos por perlas MACS anti-FITC. c2) Cultivo/mantenimiento celular. Los transfectantes (transfectantes BaF/3 que llevan IL-4Ra e IL-13Ra se cultivan en un medio RPMI 1640 complementado con Glutamax (Invitrogen), suero de becerro fetal al 10 por ciento, penicilina al 1 por ciento/ estreptomicina, y 10 nanogramos/mililitro de rhlL-4 (Novartis). Las células se dividen a 1:1 dos veces a la semana, se lavan con medio fresco sin rhlL-4, y se mantienen en este medio durante la noche (= células en inanición). Los cultivos de células B (puras) humanas ex vivo se incuban en un medio X-Vivo (Cambrex, XV15) complementado con Glutamax, suero de becerro fetal al 10 por ciento, penicilina al 1 por ciento/estreptomicina, en placas de 96 pozos (Costar). c3) Ensayo de proliferación celular BAF. Las células en inanición descritas en b) se recolectan, se lavan con medio fresco, se cuentan, y se ajustan a 2 x 105 células/mililitro, de donde se distribuyen 100 microlitros en placas de 96 pozos (Costar). Para la serie de titulación, se preparan las citocinas rhlL-4, rhlL-13, y rmlL-3 en 4 veces la concentración final deseada en el mismo medio. Para la serie de titulación, se utilizan anticuerpos ya sea como sobrenadantes de cultivo celular con concentraciones determinadas por ELISA, o bien a partir del material purificado, en 4 veces las concentraciones deseadas en el mismo medio. Las pre-diluciones de citocinas y anticuerpos se mezclan en volúmenes iguales, y se transfieren 100 microlitros de la pre-mezcla al pozo preparado con células. Se establecen controles para la proliferación del fondo (medio sin citoquina y sin anticuerpo = inhibición del 100 por ciento) y para la proliferación máxima (medio con citoquina solamente = inhibición del 0 por ciento). Después de una incubación durante la noche a 37°C en la presencia de CO2 al 5 por ciento, se agrega [metil-3H]-timidina (Amersham TRK120) a 1 µCi por pozo en 10 microlitros del medio, y se incuba durante 8 horas. En seguida de un ciclo de congelación/descongelación, las células se cosechan de las placas sobre esteras de filtro utilizando un cosechador Tomtek. Las esteras de filtro se secan en un horno de microondas durante 2 minutos a 650 W, y se transfieren a una bolsa de muestra junto con una hoja de Cera de Cintilación Meltilex (Wallac). La cera se funde a través del filtro, y los filtros obtenidos se colocan adentro de los cartuchos apropiados y se insertan en un lector micro-beta (Wallac) para el conteo de cintilación, utilizando un programa que mide 30 segundos por campo, y extrapolando a conteos por minuto.

Se mide una Cl50 de 30 pM en este sistema de prueba para el anticuerpo. c4) Aumento de CD23 inducido por IL-4 en células B. Las células B separadas por MACS se ajustan a 0.5-1 x 106 células/mililitro en XV15, y se aplican en 100 microlitros por pozo en placas de fondo redondo de 96 pozos. Las citocinas (1 nanogramo/mililitro final) y el anticuerpo monoclonal (2 microgramos/mililitro - 2 nanogramos/mililitro final) se pre-diluyen y se pre-mezclan como se describe anteriormente, y se agregan en 100 microlítros para alcanzar un volumen final de 200 microlitros. Después de cultivar durante la noche a 37°C en la presencia de CO2 al 5 por ciento, las células se transfieren a placas de 96 pozos (Costar), y se centrifugan a 2200 revoluciones por minuto (aproximadamente 1000 x g) durante 1 minuto, después de sacudir el sobrenadante lavado con regulador FACS. Se preparan anticuerpos marcados con florocromo [HLA-DR FITC (Catálogo # MHLDR01, 1:800), CD19 PE (Catálogo # MHCD1904, 1:200), y CD23 APC (Catálogo # MHCD2305, 1:200)], en regulador FACS, y se distribuyen en 50 microlitros por pozo. Después de una incubación de 30 a 60 minutos a temperatura ambiente, los pozos se rellenan con regulador FACS, se centrifugan, y el residuo de la centrifugación obtenido se lava con regulador FACS. Las células se vuelven a suspender en regulador FACS con 2 microgramos/mililitro de yoduro de propidio, y se analizan en un citómetro de flujo FacsCalibur de láser doble (BD Biosciences). Las células se pasan por la compuerta de acuerdo con sus propiedades de dispersión hacia adelante y de dispersión lateral, así como con su capacidad para excluir el yoduro de propidio y su expresión de CD19. Se determinan las intensidades de fluorescencia promedio y el porcentaje de células arriba del umbral arbitrario (establecido sobre las células no inducidas) en la expresión de CD23. La expresión de la línea base (inhibición del 100 por ciento) se determina en células sin citoquina, mientras que la inhibición del 0 por ciento se establece sobre las células incubadas con citoquina pero sin anticuerpo monoclonal. Se determina una Cl50 de 334 pM para este anticuerpo para la expresión de CD23 inducida por IL-4 sobre las células como se describe anteriormente, en la presencia de IL-4 humana recombinante 70 pM. c5) Producción de IgE inducida por IL-4 por parte de las células B puras. Las células B puras magnéticamente clasificadas se ajustan a 3 x 105 células por mililitro en XV15, y se aplican en 100 microlitros por pozo en placas de 96 pozos, en un arreglo de 6 x 6 en el centro de la placa, rodeadas por pozos rellenados con suero regulado con fosfato durante los 10 días del cultivo a 37°C en la presencia de CO2 al 5 por ciento. Se prepara una placa por cada anticuerpo monoclonal que se vaya a probar, consistiendo en 3 pozos por cada control no inducido e inducido, y repeticiones quintuplicadas de titulaciones de anticuerpo monoclonal, empezando en 7 microgramos/mililitro, y ejecutando en una dilución triple bajando hasta concentraciones finales de 29 nanogramos/ mililitro agregadas en 50 microlitros de una pre-dilución concentrada cuatro veces. Las condiciones de inducción son rhlL-4 en 20 nanogramos/mililitro más anticuerpo monoclonal anti-CD40 (Novartis) en concentraciones finales de 0.5 microgramos/mililitro también agregadas en 50 mícrolitros de una pre-dilución concentrada cuatro veces. Las concentraciones de IgE se determinan al final del período de cultivo mediante un método ELISA de emparedado estándar. Se determina una Cl50 de 2806 pM para este anticuerpo, para la IgE inducida por IL-4 sobre las células, como se describe en lo anterior. EJEMPLOS 2 A 6: Se obtienen anticuerpos de una manera análoga a la descrita en el Ejemplo 1, y comprenden las siguientes secuencias de aminoácidos: El Ejemplo 2 es un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos SEC ID NO: 9 y SEC ID NO: 10. El Ejemplo 3 es un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos SEC ID NO: 17 y SEC ID NO: 18. El Ejemplo 4 es un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos SEC ID NO: 25 y SEC ID NO: 26. El Ejemplo 5 es un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos SEC ID NO: 33 y SEC ID NO: 34. El Ejemplo 6 es un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos SEC ID NO: 41 y SEC ID NO: 42. La Tabla 1 resume los valores Cl50 de los anticuerpos en los diferentes sistemas de prueba, como se describe en los Ejemplos 1b a c. TABLA 1: LISTADO DE SECUENCIAS SEC ID NO: 1 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena pesada, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1, CDR2, y CDR3). QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYAMHWVRQAPGKGLEW VTFIWDDGSFKYYAESVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AREGSWSPDIFDIWGQGTMVTVSS SEC ID NO: 2 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena ligera, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1', CDR2', y CDR3'). AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISRALAWYQQKPGKAPKLLIYD ASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPITFGQ GTRLEIKRT SEC ID NO: 3 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 1 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MEFGLNWVFLVALFRGVHCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTF SSYAMHWVRQAPGKGLEWVTFIWDDGSFKYYAESVKGRFTISRDNSKN TLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGSWSPDIFDIWGQGTMVTVSS SEC ID NO: 4 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 2 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MDMRVPAQLLGLLLLWLPGARCAIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQ GISRALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISS LQPEDFATYYCQQFNSYPITFGQGTRLEIKRT SEC ID NO: 5 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1). CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGA GGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTAGC TATGCCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGT GGGTGACATTTATATGGGATGATGGAAGTTTTAAATATTATGCAGAGT CCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACG CTGTATTTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAAGACACGGCTGTGTA TTACTGTGCGAGAGAGGGCAGCTGGTCTCCTGATATATTTGATATCTG GGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA SEC I D NO : 6 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC JD NO: 2). GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGG AGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGCAGAG CTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAG CTCCTAAGCTCCTG ATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAG CGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTG C AGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCC CATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGAACT SEC I D NO: 7 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3). ATGGAGTTTGGGCTGAACTGGGTTTTCCTCGTTG CTCTTTTCAGAGGT GTCCACTGTCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGG CGTGGTCC AGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTG CAGCGTCTGGATTCACC TTCAGTAGCTATGCCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGG G CTGGAGTGGGTGACATTTATATGGGATGATGGAAGTTTTAAATATTA TGCAGAGTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCA AGAACACGCTGTATTTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAAGACACG GCTGTGTATTACTGTGCGAGAGAGGGCAGCTGGTCTCCTGATATATT TGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA SEC I D NO : 8 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 4). ATGGACATGAGGGTCCCCG CTCAGCTCCTGGGGCTTCTGCTGCTCTG G CTCCCAGGTGCCAGATGTGCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCA AGTCAGGGCATTAGCAGAGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGG GAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGT CAACAGTTTAATAGTTACCCCATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACT GGAGATTAAACGAACT S EC I D NO : 9 ( Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena pesada, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR 1, CDR2, y CDR3) . QVQLVESGGGVVQPG RSLRLSCAASG FTLSSFG MHWVRQAPG KG LEW VAVIWYDGSN EYYADSVKG RFTTSRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY CAREGSWSPD I FD IWGQGTMVTVSS S EC I D NO : 10 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena ligera, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1', CDR2', y CDR3'). AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQGIRSALAWYQQNPGKAPKLLIYD ASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPVTFG QGTRLEIKRT SEC ID NO: 11 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 9 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGG VQPGRSLRLSCAASGFTL SSFGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNEYYADSVKGRFTTSRDNSK NTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGSWSPDIFDIWGQGTMVTVSS SEC ID NO: 12 (Secuencia de aminoácidos del polipéptído de la SEC ID NO: 10 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MDMRVPAQLLGLLLLWLPGARCAIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRTSQ GIRSALAWYQQNPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISS LQPEDFATYYCQQFNSYPVTFGQGTRLEIKRT SEC ID NO: 13 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 9). CAGGTGCAACTGGTGGAGTCGGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGA GGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTAAGTAGC TTTGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGT GGGTGGCAGTTATATGGTATGATGGAAGTAATGAATACTATGCAGACT CCGTGAAGGGCCGATTCACCACCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACG CTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTA TTACTGTGCGAGAGAGGGCAGCTGGTCTCCTGATATTTTTGATATCTG GGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA SEC I D NO : 14 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 10). GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGG AGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGACAAGTCAGGGCATTCGCAGTG CTTTAGCCTGGTATCAGCAGAACCCCGGGAAAGCTCCTAAGCTCCTG ATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAG CGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGC AGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCC CGTCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGAACT S EC I D NO: 1 5 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1 1 ). ATGGAGTTTGGGCTGAGCTGGGTTTTCCTCGTTGCTCTTTTAAGAGGT GTCCAGTGTCAGGTG CAACTGGTGGAGTCGGGGGGAGGCGTGGTCC AGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACC TTAAGTAGCTTTGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGG CAAGGG GCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATGGTATGATGGAAGTAATGAATACT ATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCACCTCCAGAGACAATTCC AAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACAC GGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGAGGGCAGCTGGTCTCCTGATATTT TTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA SEC ID NO: 16 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 12). ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTTCTGCTGCTCTG GCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGACA AGTCAGGGCATTCGCAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAACCCCGG GAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGT CAACAGTTTAATAGTTACCCCGTCACCTTCGGCCAAGGGACACGACT GGAGATTAAACGAACT SEC ID NO: 17 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena pesada, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1, CDR2, y CDR3). QVQLVESGGGMVQPGRSLRLSCAASGFTLSSYGMHWVRQAPGKGLEW VTVIWYDGNNQYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC AREGSWSPDIFDIWGQGTMVTVSS SEC ID NO: 18 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena ligera, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1', CDR2', y CDR3').

AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYD ASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPITFGQ GTRLEIKRT SEC ID NO: 19 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 17 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGMVQPGRSLRLSCAASGFT LSSYGMHWVRQAPGKGLEWVTVIWYDGNNQYYADSVKGRFTISRDNSK NTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGSWSPDIFDIWGQGTMVTVSS SEC ID NO: 20 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 18 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MDMRVPAQLLGLLLLWLPGARCAIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQ GISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISS LQPEDFATYYCQQFNSYPITFGQGTRLEIKRT SEC ID NO: 21 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 17). CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCATGGTCCAGCCTGGGA GGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCCTCAGTAGC TATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGT GGGTGACAGTTATATGGTATGATGGAAATAATCAATACTATGCAGACT CCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACG CTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTATA TTACTGTGCGAGAGAGGGCAGCTGGTCTCCTGATATTTTTGATATCTG GGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA SEC I D NO : 22 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 18). GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGG AGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGCAGTT ATTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCTCCTAAGCTCCTG ATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAG CGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGC AGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCC CATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGAACT SEC I D NO: 23 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 19). ATGGAGTTTGGGCTGAGCTGGGTTTTCCTCGTTGCTCTTTTAAGAGGT GTCCAGTGTCAGGTG CAG CTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCATGGTCC AGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACC CTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGG GGCTGGAGTGGGTGACAGTTATATGGTATGATGGAAATAATCAATACT ATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCC AAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACAC GGCTGTATATTACTGTGCGAGAGAGGGCAGCTGGTCTCCTGATATTT TTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA SEC ID NO: 24 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 20). ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTTCTGCTGCTCTG GCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCA AGTCAGGGCATTAGCAGTTATTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGG GAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGT CAACAGTTTAATAGTTACCCCATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACT GGAGATTAAACGAACT SEC ID NO: 25 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena pesada, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1, CDR2, y CDR3). QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGDTFSSYAISWVRQAPGQGFEW MGGIIPVIGTVNYEERFQDRVTITADNSTSTAYMELTSLRSEDTAVYFCG REEGFLDYWGQGTLVTVSS SEC ID NO: 26 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena ligera, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1', CDR2', y CDR3'). AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYD ASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLLTF GGGTKVEIKRT SEC ID NO: 27 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 25 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MDWTWRFLFVVAAATGVQSQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGDT FSSYAISWVRQAPGQGFEWMGGIIPVIGTVNYEERFQDRVTITADNSTST AYMELTSLRSEDTAVYFCGREEGFLDYWGQGTLVTVSS SEC ID NO: 28 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 26 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MDMRVPAQLLGLLLLWLPGARCAIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQ GISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISS LQPEDFATYYCQQFNSYPLLTFGGGTKVEIKRT SEC ID NO: 29 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 25). CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGT CCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGACACCTTCAGCAGT TATGCTATCAGTTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGTTTGAGTG GATGGGAGGGATCATCCCTGTCATTGGTACAGTAAATTATGAAGAGA GATTCCAGGACAGAGTCACGATTACCGCGGACAATTCCACGAGCACA GCCTACATGGAGTTGACTAGTCTGAGATCTGAAGACACGGCCGTGTA TTTTTGTGGGAGAGAAGAGGGCTTCCTTGACTATTGGGGCCAGGGAA CCCTGGTCACCGTCTCCTCA SEC I D NO : 30 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 26) . ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAG CTCCTGGGGCTTCTGCTGCTCTG GCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCA AGTCAGGGCATTAGCAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGG GAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGT CAACAGTTTAATAGTTACCCTCTTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAG GTGGAGATCAAACGTACG SEC I D NO: 31 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 27). ATGGACTGGACCTGGAGGTTCCTCTTTGTGGTGGCAGCAG CTACAGG TGTCCAGTCCCAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAG AAG CCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGACAC CTTCAGCAGTTATGCTATCAGTTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAG GGTTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTGTCATTGGTACAGTAAAT TATGAAGAGAGATTCCAGGACAGAGTCACGATTACCGCGGACAATTC CACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGACTAGTCTGAGATCTGAAGACA CGGCCGTGTATTTTTGTGGGAGAGAAGAGGGCTTCCTTGACTATTGG GGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA SEC ID NO: 32 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 28). ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTTCTGCTGCTCTG GCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCA AGTCAGGGCATTAGCAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGG GAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGT CAACAGTTTAATAGTTACCCTCTTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAG GTGGAGATCAAACGTACG SEC ID NO: 33 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena pesada, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1, CDR2, y CDR3). QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSCCGMHWVRQAPGKGLEW VAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDTSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC ATDSSGSFYEYFQHWGQGTLVTVSS SEC ID NO: 34 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena ligera, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1', CDR2', y CDR3'). AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGINSALAWYQQKPGKAPKLLIYD ASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPYTFG QGTKLEIKRT SEC ID NO: 35 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 33 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTF SCCGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDTSK NTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATDSSGSFYEYFQHWGQGTLVTVSS SEC ID NO: 36 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 34 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MDMRVPAQLLGLLLLWLPGARCAIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQ GINSALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISS LQPEDFATYYCQQFNSYPYTFGQGTKLEIKRT SEC ID NO: 37 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 33). CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGA GGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTTGC TGTGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGT GGGTGGCAGTTATATGGTATGATGGAAGTAATAAATACTATGCAGACT CCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACACTTCCAAGAACACG CTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTA TTACTGTGCGACAGATAGTTCGGGGAGTTTTTATGAATACTTCCAGCA CTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCCTCA SEC ID NO: 38 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 34) . GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGG AGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAACAGTG CTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAG CTCCTAAGCTCCTG ATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAG CGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGC AGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCC GTACACTTTTGG CCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAACGAACT SEC I D NO: 39 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 35). ATGGAGTTTGGGCTGAGCTGGGTTTTCCTCGTTG CTCTTTTAAGAGGT GTCCAGTGTCAGGTG CAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCC AGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACC TTCAGTTGCTGTGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGG GGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATGGTATGATGGAAGTAATAAATAC TATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACACTTC CAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAG CCTGAGAGCCGAGGACA CGGCTGTGTATTACTGTGCGACAGATAGTTCGGGGAGTTTTTATGAAT ACTTCCAGCACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCCTCA SEC I D NO : 40 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 36). ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTTCTGCTGCTCTG GCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCA AGTCAGGGCATTAACAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGG GAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGT CAACAGTTTAATAGTTACCCGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCT GGAGATCAAACGAACT SEC ID NO: 41 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena pesada, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1, CDR2, y CDR3). QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSGYGMHWVRQAPGRGLDW VAVVWYDGGYKFYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY CARDSSGSFYEYLQHWGQGTLVTVSS SEC ID NO: 42 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido maduro de la cadena ligera, los aminoácidos subrayados corresponden a CDR1', CDR2', y CDR3'). AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYD ASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPHFWP GDQAGDQTNCG SEC ID NO: 43 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 41 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTF SGYGMHWVRQAPGRGLDWVAVVWYDGGYKFYADSVKGRFTISRDNSK NTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDSSGSFYEYLQHWGQGTLVTVSS SEC ID NO: 44 (Secuencia de aminoácidos del polipéptido de la SEC ID NO: 42 con la secuencia líder, los aminoácidos marcados en negrillas corresponden a la secuencia líder). MDMRVPAQLLGLLLLWLPGARCAIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQ GISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISS LQPEDFATYYCQQFNSYPHFWPGDQAGDQTNCG SEC ID NO: 45 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 41). CAGGTGCAGTTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGA GGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTGGC TATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAGGGGGCTGGACT GGGTGGCAGTTGTGTGGTATGATGGAGGTTATAAGTTCTATGCAGAC TCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACAC GCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGT ATTACTGTGCGAGAGATAGTTCGGGGAGTTTTTATGAATACTTACAAC ATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCCTCA SEC I D NO : 46 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 42). GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTG CATCTGTAGG AGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGCAGTG CTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCTCCTAAGCTCCTG ATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAG CGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGC AGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCC TCACTTTTGGCCAGGGGACCAAG CTGGAGATCAAACGAACT SEC I D NO: 47 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 43). ATGGAGTTTGGGCTGAGCTGGGTTTTCCTCGTTGCTCTTTTAAGAGGT GTCCAGTGTCAGGTGCAGTTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCC AGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACC TTCAGTGG CTATGGCATGCACTGGGTCCG CCAGGCTCCAGG CAGGG GGCTGGACTG GGTGG CAGTTGTGTGGTATGATGGAGGTTATAAGTTC TATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTC CAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACA CGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGATAGTTCGGGGAGTTTTTATGAAT ACTTACAACATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCCTCA S EC I D NO : 48 (Nucleótidos que codifican una secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 44) . ATGGACATGAGGGTCCCCGCTCAGCTCCTGGGGCTTCTGCTGCTCTG GCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCT CCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCA AGTCAGGGCATTAG CAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGG GAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACT CTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGT CAACAGTTTAATAGTTACCCTCACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGG AGATCAAACGAACT

Claims (18)

REIVINDICACIONES

1. Un anticuerpo específico de IL-4 humana, el cual se enlaza a la IL-4 humana con una constante de disociación Kd igual o menor que 800 pM.

2. Un anticuerpo de la reivindicación 1, el cual tiene un primer dominio que comprende, en secuencia, las regiones hipervariables CDR1, CDR2, y CDR3, y un segundo dominio que comprende, en secuencia, las regiones hipervariables CDR1', CDR2', y CDR3', seleccionado a partir del grupo que consiste en un anticuerpo en donde: a) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Phe-Ser-Ser-Tyr-Ala-Met-His, la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Phe-lle-Trp-Asp-Asp-Gly-Ser-Phe-Lys-Tyr-Tyr-Ala-Glu-Ser-Val-Lys-Gly, la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Gly-Ser-Trp-Ser-Pro-Asp-lle-Phe, la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Ser-Arg-Ala, la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser, la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro-lle, b) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Leu-Ser-Ser-Phe-Gly-Met-His, la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-lle-Trp-Tyr- Asp-Gly-Ser-Asn-Glu-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly, la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Gly-Ser-Trp-Ser-Pro-Asp-lle-Phe, la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Arg-Ser-Ala, la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser, la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro-Val, c) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Leu-Ser-Ser-Tyr-Gly-Met-His, la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-lle-Trp-Tyr-Asp-Gly-Asn-Asn-Gln-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly, la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Gly-Ser-Trp-Ser-Pro-Asp-lle-Phe, la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle- Ser-Ser-Tyr, la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser, la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro, d) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Asp-Thr- Phe-Ser-Ser-Tyr-Ala-lle-Ser, la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-lle-lle-lle-Pro-VAI-lle-Gly-Thr-Val-Asn-Tyr-Glu-Glu-Arg-Phe-GIn-Asp-Arg, la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Glu-Glu-Gly-Phe-Leu, la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Ser-Ser-Ala, la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser, la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro-Leu, e) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Phe-Ser-Cys-Cys-Gly-Met-His, la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-lle-Trp-Tyr-Asp-Gly-Ser-Asn-Lys-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly, la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ser-Ser-Gly- Ser-Phe-Tyr-Glu-Tyr-Phe, la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Asn-Ser-Ala, la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser, la CDR3' tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr- Pro-Tyr, y f) la CDR1 tiene la secuencia de aminoácidos Gly-Phe-Thr-Phe-Ser-Gly-Tyr-Gly-Met-His, la CDR2 tiene la secuencia de aminoácidos Val-Val-Trp-Tyr-Asp-Gly-Gly-Tyr-Lys-Phe-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly, la CDR3 tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ser-Ser-Gly-Ser-Phe-Tyr-Glu-Tyr-Leu, la CDR1' tiene la secuencia de aminoácidos Ser-GIn-Gly-lle-Ser-Ser-Ala, la CDR2' tiene la secuencia de aminoácidos Asp-Ala-Ser, la CDR3" tiene la secuencia de aminoácidos Phe-Asn-Ser-Tyr-Pro-His.

3. Un anticuerpo de la reivindicación 1 ó 2, el cual comprende: a) un polipéptido de la SEC ID NO: 1 y un polipéptido de la SEC ID NO: 2, ó b) un polipéptido de la SEC ID NO: 9 y un polipéptido de la SEC ID NO: 10, ó c) un polipéptido de la SEC ID NO: 17 y un polipéptido de la SEC ID NO: 18, ó d) un polipéptido de la SEC ID NO: 25 y un polipéptido de la SEC ID NO: 26, ó e) un polipéptido de la SEC ID NO: 33 y un polipéptido de la SEC ID NO: 34, ó f) un polipéptido de la SEC ID NO: 41 y un polipéptido de la SEC ID NO: 42.

4. Un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, el cual comprende: a) un polipéptido de la SEC ID NO: 3 y un polipéptido de la SEC ID NO: 4, ó b) un polipéptido de la SEC ID NO: 11 y un polipéptido de la SEC ID NO: 12, ó c) un polipéptido de la SEC ID NO: 19 y un polipéptido de la SEC ID NO: 20, ó d) un polipéptido de la SEC ID NO: 27 y un polipéptido de la SEC ID NO: 28, ó e) un polipéptido de la SEC ID NO: 35 y un polipéptido de la SEC ID NO: 36, ó f) un polipéptido de la SEC ID NO: 43 y un polipéptido de la SEC ID NO: 44.

5. Un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, el cual se selecciona a partir del grupo que consiste en un anticuerpo monoclonal específico de IL-4 humana, un fragmento del mismo, y un análogo del mismo.

6. Polinucleótidos aislados que comprenden polinucleótidos que codifican un anticuerpo de la reivindicación 1.

7. Polinucleótidos de la reivindicación 6, los cuales codifican la secuencia de aminoácidos de un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5.

8. Polinucleótidos de cualquiera de las reivindicaciones 6 ó 7, los cuales comprenden: a) un polinucleótido de la SEC ID NO: 5, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 6, ó b) un polinucleótido de la SEC ID NO: 13, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 14, ó c) un polinucleótido de la SEC ID NO: 21, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 22, ó d) un polinucleótido de la SEC ID NO: 29, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 30, ó e) un polinucleótido de la SEC ID NO: 37, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 38, ó f) un polinucleótido de la SEC ID NO: 45, y un polinucleótido de la SEC ID NO: 46.

9. Polinucleótidos de cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, los cuales codifican: a) un polipéptido de las SEC ID NO: 7 y SEC ID NO: 8, ó b) un polipéptido de las SEC ID NO: 15 y SEC ID NO: 16, ó c) un polipéptido de las SEC ID NO: 23 y SEC ID NO: 24, ó d) un polipéptido de las SEC ID NO: 31 y SEC ID NO: 32, ó e) un polipéptido de las SEC ID NO: 39 y SEC ID NO: 40, ó f) un polipéptido de las SEC ID NO: 47 y SEC ID NO: 48.

10. Un vector de expresión que comprende polinucleótidos de cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9.

11. Un sistema de expresión que comprende un polinucleótido de cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, en donde este sistema de expresión o parte del mismo, es capaz de producir un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, cuando este sistema de expresión o parte del mismo está presente en una célula hospedadora compatible.

12. Una célula hospedadora aislada que comprende un sistema de expresión de la reivindicación 11.

13. El uso de un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, como un producto farmacéutico.

14. El uso de un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades mediadas por IL-4 y/o IgE.

15. El uso de la reivindicación 14, en donde la enfermedad se selecciona a partir del grupo que consiste en dermatitis atópica, asma alérgico, y rinitis alérgica.

16. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, en donde el anticuerpo se selecciona a partir del grupo que consiste en un anticuerpo monoclonal de IL-4 humana, un fragmento del mismo, o un análogo del mismo.

17. Una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en asociación con cuando menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

18. Un método de tratamiento de enfermedades mediadas por IL-4 y/o IgE, cuyo tratamiento comprende administrar a un sujeto que necesite el tratamiento, una cantidad efectiva de un anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.