ME02194B - Agensi koji vežu amiloid - Google Patents

Agensi koji vežu amiloid

Info

Publication number
ME02194B
ME02194B MEP-2015-118A MEP11815A ME02194B ME 02194 B ME02194 B ME 02194B ME P11815 A MEP11815 A ME P11815A ME 02194 B ME02194 B ME 02194B
Authority
ME
Montenegro
Prior art keywords
compound
compounds
pharmaceutically acceptable
amyloid
mhz
Prior art date
Application number
MEP-2015-118A
Other languages
English (en)
Inventor
Jerry Yang
Emmanuel A Theodorakis
Original Assignee
Univ California
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ California filed Critical Univ California
Publication of ME02194B publication Critical patent/ME02194B/me

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/32—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring
    • C07C255/42—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/32—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring
    • C07C255/42—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms
    • C07C255/43—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms the carbon skeleton being further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/12—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms
    • C07D295/125—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms with the ring nitrogen atoms and the substituent nitrogen atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C07D295/13—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms with the ring nitrogen atoms and the substituent nitrogen atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings to an acyclic saturated chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/155—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/22—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/28—Nitrogen atoms
    • C07D295/30—Nitrogen atoms non-acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/14—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D317/18—Radicals substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D317/24—Radicals substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms esterified
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G01N2333/4701—Details
    • G01N2333/4703—Regulators; Modulating activity

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

EP2509940
The Regents of the University of California
1111 Franklin Street, 12th Floor
Oakland, CA 94607
SAD
 
AGENSI KOJI VEŽU AMILOID
 
OPIS
[0001] Alzheimer-ova bolest (AD) se karakterizuje progresivnim gubitkom kognitivne funkcije i predstavlja najčešći i fatalni neurodegenerativni poremećaj. Genetički i klinički nalazi podržavaju hipotezu da nakupljanje amiloidnih depozita u mozgu igra važnu ulogu u patologiji pomenute bolesti. Ova pojava je povezana sa perturbacijama bioloških funkcija u okolnom tkivu šta dovodi do smrti nervnih ćelija, šta doprinosi razvoju bolesti. Depoziti su primarno sastavljeni od amiloidnih (Aβ) peptida, tipično sekvence od 39-43 amino-kiselina koje spontano agregiraju u fibrilarni β-nabrani lisni motiv. Dok tačna tri-dimenziona struktura agregiranih Aβ peptida nije poznata, predložen je model za strukturu koja zadržava sposobnost da agregira. Ovo daje mogućnost stvaranja in vivo slike amiloidnih depozita koja ne samo da može da pomogne da se procene vremenske i razvojne karakteristike bolesti već takođe može da omogući vremensko praćenje terapeutskih tretmana.
 
[0002] Historijski gledano, Kongo crveno (CR) i Tioflavin T (ThT) su omogućili početnu tačku za vizualizaciju amiloidnih plakova, a čak i sada se koriste kod post-mortem histoloških analiza. Međutim, zbog njihovog naboja pomenuta jedinjenja se smatra da su neprikladna kod in vivo aplikacija. Sa druge strane, nekoliko molekula je opisano za primenu u drugim tehničkim aplikacijama. Na primer, derivati hidrofilnog molekularnog rotora su opisani kod primene u biofluidima za određivanje viskoznosti (Haidekker et al., Bioorg. Chem. 2004, 32, 274-289). Nadalje, prijavljene su fotorefraktivne karakteristike polimernih kompozita na bazi poli(N-vinilkarbazola) koji je bio pojačan sa sensitizerom C60, plasticizera butil benzil ftalata, i dve serije hromofora (Díaz-García M. A. et al., Chem. Mater. 1999, 11, 1784-1791). Takođe je opisano da određeni supstituisani stireni pokazuju elektroluminiscentne karakteristike kada se nalaze u odgovarajućim aranžmanima (vidi Američki patent 5,874,180). Jedinjenja benzalanilin-3-sulfonske kiseline i procesi za njihovu pripremu su razotkriveni od autora Krell M. W. & Johnson F. E. (Američki patent 2,798,090). Metinska jedinjenja su predložena za primenu u tehnikama bojanja i nanošenja boja (vidi Američki patent 2,583,614). Osim toga, Američki patent 4,258,182 opisuje bojila sa kvaternizovanim amino-supstituisanim stirilom. Esteri α-cijanoakrilne kiseline koji sadrže silikon su razotkriveni bez specifične reference za neku definisanu aplikaciju (Senchenya et al., Russian Chemical Bulletin, 1993, 42, 909-911). Dokument FR 1.321.641 se odnosi na jedinjenja sa pojačanom rezistencijom na UV-zračenje, a posebno na estere 2-alkoksi-α-cijano-1-naftalen akrila. Dokument WO 2005/073697 opisuje postupak za detektovanje vrednosti lokalnog stresa smicanja (klizanja) uz pomoć molekularnih rotora. U svrhu obezbeđivanja jedinjenja koja su prikladna za in vivo aplikacije, nekoliko laboratorija je razvilo jedinjenja sa ne-nabijenim, lipofilnim (logP= 0.1-3.5) hemijskim strukturama sa niskom molekularnom masom (M.M. manja od 650) koja ubrzavaju prelazak krvno-moždane barijere. Dodatno funkcionalizovanje pomenutih jedinjenja sa radionuklidima je dovelo do nove generacije reagenasa za in vivo dijagnostiku koji ciljaju plakove i slične strukture za posmatranje uz pomoć pozitronsko emisione tomografije (PET) i računarne tomografije emisije pojedinačnog fotona (SPECT), kao šta je već poznato stanju tehnike.
Unatoč pomenutom napretku, još uvek postoji hitna potreba za dizajniranjem i razvojem novih molekula koji ciljaju amiloid i koji imaju poboljšane fizičke, hemijske i biološke karakteristike. Ovde su obezbeđeni postupci i jedinjenja koje zadovoljavaju pomenute zahteve, a zadovoljavaju i druge zahteve stanja tehnike.
 
KRATKI SAŽETAK
[0003] Ovde su obezbeđena inter alia jedinjenja. Obezbeđeni su postupci (za koje se ne zahteva zaštita) za detekciju amiloida i upotrebu u tretmanu bolesti koje su povezane sa amiloidima uključujući Alzheimer-ovu bolest i druge slične neurodegenerativne bolesti koje su takođe povezane sa amiloidima.
U prvom aspektu su obezbeđena jedinjenja koja vežu amiloidne peptide i/ili amiloide (na primer, amiloidni peptidni agregati).
 
[0004] U drugom aspektu je obezbeđena farmaceutska kompozicija. Pomenuta farmaceutska kompozicija uključuje jedinjenje, za koje se ovde zahteva zaštita, i neki farmaceutski prihvatljivi ekscipijent.
 
[0005] U drugom aspektu je obezbeđena upotreba u postupku za tretman bolesti koja je karakterizovana nakupljanjem amiloida (na primer, amiloidnih depozita) u nekom subjektu. Upotreba u takvom postupku uključuje davanje subjektu u potrebi efektivne količine nekog jedinjenja ili farmaceutske kompozicije kao šta se ovde zahteva.
 
KRATKI OPIS SLIKA
[0006] Jedinjenja koja nisu obuhvaćana patentnim zahtevima su označena sa zvezdom (*).
SLIKE. 1A-D prikazuju fluorescencijsku ekscitaciju i emisione spektare Jedinjenja 8d* i 11 u vodenom PBS rastvoru (pune linije) i u prisustvu Aβ peptida (isprekidane linije). SL. 1A: spektar fluorescencijske ekscitacije za Jedinjenje 8d*. SL. 1B: emisioni spektar za Jedinjenje 8d*. SL. 1C: spektar fluorescencijske ekscitacije za Jedinjenje 11. SL. 1D: emisioni spektar za Jedinjenje 11.
SL. 2 prikazuje očitu veznu konstantu (Kd) Jedinjenja 8d* i 11 prema pre-agregiranom Aβ peptidu. Legenda: Jedinjenje 8d* (dijamant); Jedinjenje 11 (kvadrat).
SL. 3 prikazuje inhibiciju interakcija IgG-Aβ fibrila sa Jedinjenjem 8d* (Sl. 3, gore) i Jedinjenjem 11 (Sl 3, dole).
SL. 4 prikazuje spektare fluorescencijske ekscitacije (levi paneli) i emisione spektare (desni paneli) za Jedinjenja 8a*, 8b*, 8c*, 14* i 19* sa agregiranim Aβ(1-42) fibrilom, kao šta je ovde opisano.
SL. 5 prikazuje fluorescencijsko-emisione spektare Jedinjenja 8a*, 8b*, 8c*, 8d*, 11, 14* i 19* sa i bez monomernog Aβ monomera, kao šta je ovde opisano.
SL. 6 prikazuje dvostruko-recipročni grafikon fluorescencijskog maksimuma u odnosu na koncentraciju Jedinjenja 8a*, 8b*, 8c*, 14* i 19*, kao šta je ovde opisano. Legenda: Jedinjenje 8a* (dijamant); Jedinjenje 8b* (kvadrat); Jedinjenje 8c* (trougaonik); Jedinjenje 14* (krst); Jedinjenje 19* (označeni krst).
SLIKE. 7A-D prikazuju inhibicioni maksimum i IE50 vrednosti za jedinjenja koja su ovde opisana. SL. 7A: Jedinjenje 8a*; SL. 7B: Jedinjenje 8b*; SL. 7C: Jedinjenje 8c*; SL. 7D: Jedinjenje 14*.
SL. 8 prikazuje rezultate studija citotoksičnosti kao šta je ovde opisano. Legenda: za svaku koncentraciju jedinjenja koje je uključeno u testu citotoksičnosti, % preživljenja ćelija je prikazan kao odgovarajući histogram (levo prema desno): Jedinjenje 8a*, 8b*, 8c*, 8d*, 11 i 14*.
SLIKE. 9A-F prikazuju spektare fluorescencijske ekscitacije i emisione spektare Jedinjenja 27*, 28-31 i 33* u rastvoru (pune linije) i u prisutnosti Aβ peptida (isprekidane linije).
SLIKE. 10A-F prikazuje fluorescencijski intenzitet u odnosu na koncentraciju agregiranih Ab peptida za Jedinjenja 27*, 28-31 i 33*.
SLIKE. 11A-F prikazuje slike plakova koji su bili obojeni sa A) jedinjenjem 27*, B) jedinjenjem 28, C) jedinjenjem 29, D) jedinjenjem 30, E) jedinjenjem 31, ili F) jedinjenjem 33* kao šta je ovde opisano.
 
DETALJAN OPIS
I. Definicije
[0007] Skraćenice koje se ovde koriste imaju svoja uobičajena značenja u skladu sa pravilima hemijskog i biološkog polja istraživanja. Hemijske strukture i formule koje su ovde navedene su konstruisane u skladu sa standardnim pravilima hemijske valencije koja su poznata u polju hemije.
 
[0008] Dok su supstituentne grupe specifikovane uz pomoć njihovih konvencionalnih hemijskih formula, koja se pišu s leva na desno, pomenute takođe obuhvataju hemijski identične supstituente koji bi se pojavili kada bi se struktura pisala s desna na levo, na primer, -CH2O- je ekvivalenta sa -OCH2-.
 
[0009] Termin "grupa koja daje elektron (EDG)" se odnosi na hemijski ostatak koji modifikuje elektrostatičke sile koje deluju na susedni hemijski ostatak uz pomoć doniranja negativnog naboja pomenutom hemijskim ostatku. U nekim izvedbama, grupa koja daje elektron donira negativni naboj π-konjugiranom elementu iz jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita.
 
[0010] Termin "π-konjugirani element", "πKE", ili "pi-konjugirani element" se odnosi na dvovalentni hemijski ostatak koji formira π-konjugirani sistem koji poseduje izmenjujuće jednostruke i višestruke veze (na primer, dvostruke veze) kao na primer takve u kojima su elektroni u p-orbitalama atoma u sistemu delokalizovani. U nekim izvedbama, jednostruke i višestruke veze π-konjugiranog elementa mogu da budu planarno ili značajno planarno orijentisane.
 
[0011] Termin "grupa koja može da se rastvori u vodi" se odnosi na hemijski ostatak koji povećava rastvorljivost pomenutih jedinjenja (na kojih je pomenuti spojen) u vodi. Povećanje rastvorljivosti u vodi može da se izmeri uz pomoć tehnika koje su poznate stanju tehnike, poput određivanja particionog koeficijenta jedinjenja sa ili bez spojene grupe koja je rastvorljiva u vodi. U nekim izvedbama, pomenuti particioni koeficijent može da se izmeri uz pomoć mešanja jedinjenja sa vodom i hidrofobnim rastvaračem, poput oktanola. Što je jedinjenje više hidrofobno, veći je particioni koeficijent. Što je jedinjenje više hidrofilno, manji je particioni koeficijent. U nekim izvedbama, grupe koje mogu da se rastvore u vodi i koje su ovde opisane, mogu da poboljšaju rastvorljivost (u vodi) prekursorskih molekula uz pomoć smanjivanja njihovog particionog koeficijenta. U nekim izvedbama, grupe koje se rastvaraju u vodi mogu da povećaju particioni koeficijent prekursorskih molekula (koji imaju veći particioni koeficijent pre spajanja grupe koja se rastvara u vodi) za najmanje oko 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, ili 90%. U nekim izvedbama, grupe koje se rastvaraju u vodi i koje su ovde opisane mogu da smanje particioni koeficijent prekursorskih molekula za 1-puta, 2-puta, 3-puta, 4-puta, ili više.
 
[0012] Termin "amiloid" ovde se koristi u skladu sa njegovim uobičajenim značenjem u području. Amiloidi sadrže mnoštvo spojenih amiloidnih peptida, poput agregata amiloidnih peptida. Tako, u nekim izvedbama, amiloidi uključuju amiloidni peptid agregiran sa jednim ili više amiloidnih peptida. U nekim izvedbama, amiloidi uključuju "amiloidne plakove", "amiloidni depozit", "amiloidne agregate" ili "agregate amiloidnih peptida". Jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da asociraju sa (na primer, da se vežu) amiloidnim peptidom i/ili amiloidom. U nekim izvedbama, jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da asociraju sa amiloidom uz pomoć hidrofobnih interakcija.
 
[0013] Termin "alkil", sam za sebe i kao deo nekog drugog supstituenta, označava, osim ako je drugačije navedeno, ravan (tj. nerazgranat) ili razgranat lanac, ili neka njihova kombinacija, koji je potpuno zasićen, mono- ili poli-nezasićen i može da uključuje di- i multi-valentne radikale, koji imaju mnoštvo označenih atoma ugljenika (tj. C1-C10 znači jedan od deset atoma ugljenika). Primeri zasićenih ugljovodoničnih radikala uključuju, ali bez ograničenja, grupe poput metila, etila, n-propila, izopropila, n-butila, t-butila, izobutila, sek-butila, (cikloheksil)metila, homologe i izomere, na primer, n-pentila, n-heksila, n-heptila, n-oktila, i slično. Nezasićena alkilna grupa je ona koja ima jednu ili više dvostrukih veza ili trostrukih veza. Primeri nezasićenih alkilnih grupa uključuju, ali bez ograničenja, vinil, 2-propenil, krotil, 2-izopentenil, 2-(butadienil), 2,4-pentadienil, 3-(1,4-pentadienil), etinil, 1- i 3-propinil, 3-butinil, i njihove više homologe i izomere. Alkoksi je alkil koji je spojen na ostatak molekula preko linkera od kiseonika (-O-).
 
[0014] Termin "alkilen" sam za sebe ili kao deo drugog supstituenta označava dvovalentni radikal koji je izveden iz alkila, kao na primer, ali bez ograničenja, -CH2CH2CH2CH2-, a dodatno uključuje one grupe koje su opisane ispod kao "heteroalkilen". Tipično, alkil (ili alkilen) sadrži od 1 do 24 atoma ugljenika, pri čemu su one grupe koje imaju 10 ili manje atoma ugljenika preferirane. "Niži alkil" ili "niži alkilen" je alkil ili alkilen kratkog lanca, koji generalno ima osam ili manje atoma ugljenika.
 
[0015] Termin "heteroalkil" sam za sebe ili u kombinaciji sa drugim terminom, označava, osim ako je drugačije navedeno, stabilni ili razgranati lanac, ili ciklički ugljovodonični radikal, ili njihove kombinacije, koji sadrži najmanje jedan atom ugljenika i najmanje jedan heteroatom koji je izabran iz grupe koja obuhvata O, N, P, Si i S. Atomi azota ili sumpora mogu ponekad da budu oksidirani, a azotni heteroatom može ponekad da bude kvaternizovan. Heteroatom(i) O, N, P i S i Si mogu da se nalaze na bilo kojoj unutrašnjoj poziciji heteroalkilne grupe ili na poziciji na kojoj je alkilna grupa spojena na ostatak molekula. Primeri uključuju, ali bez ograničenja, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2,-S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-OCH3, -CH=CH-N(CH3)-CH3, O-CH3, -O-CH-2-CH3, i -CN. Najviše dva heteroatoma mogu da budu susedna, kao na primer, -CH2-NH-OCH3. Slično, termin "heteroalkilen" sam za sebe ili kao deo drugog supstituenta označava divalentni radikal koji je izveden iz heteroalkila, kao na primer, ali bez ograničenja, -CH2-CH2-S-CH2-CH2- i -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-. Za heteroalkilen, heteroatomi mogu takođe da okupiraju jedan ili oba kraja lanca (tj., alkilenoksi, alkilendioksi, alkilenamino, alkilendiamino, i slično). Dodatno, za spojne alkilen i heteroalkilen grupe, orijentacija spojne grupe nije navedena uz pomoć smera u kojem se piše formula spojne grupe. Na primer, formula-C(O)2R'- označava obe grupe, -C(O)2R'- i -R'C(O)2-. Kao šta je ovde opisano, heteroalkili, kao šta se ovde koriste, uključuju one grupe koje su spojene na ostatak molekula preko nekog heteroatoma, poput -C(O)R', -C(O)NR', -NR'R", -OR', -SR', i/ili -SO2R'. Kada je naveden "heteroalkil", nakon navođenja specifičnih heteroalkilnih grupa, poput -NR'R" i slično, treba da se razume da termini heteroalkil i -NR'R" nisu suvišni ili međusobno isključivi. Radije, specifične heteroalkilne grupe se navode sa ciljem poboljšanja jasnoće. Tako, termin "heteroalkil" ne treba da se interpretira kao da isključuje određene heteroalkilne grupe, poput -NR'R" i slično.
 
[0016] Termini "cikloalkil" i "heterocikloalkil", sami za sebe ili u kombinaciji sa drugim terminima, predstavljaju, osim ako je drugačije navedeno, cikličke verzije "alkila" i "heteroalkila". Dodatno, u heterocikloalkilu heteroatom može da se nalazi na poziciji na kojoj je heterocikal spojen na ostatak molekula. Primeri za cikloalkil uključuju, ali bez ograničenja, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, 1-cikloheksenil, 3-cikloheksenil, cikloheptil, i slično. Primeri heterocikloalkila uključuju, ali bez ograničenja, 1 -(1,2,5,6-tetrahidropiridil), 1-piperidinil, 2-piperidinil, 3-piperidinil, 4-morfolinil, 3-morfolinil, tetrahidrofuran-2-il, tetrahidrofuran-3-il, tetrahidrotien-2-il, tetrahidrotien-3-il, 1-piperazinil, 2-piperazinil, i slično. "Cikloalkilen" i "heterocikloalkilen", sami za sebe ili kao deo nekog drugog supstituenta označavaju dvovalentni radikal koji je izveden iz cikloalkila i heterocikloalkila.
 
[0017] Termini "halo" ili "halogen", sami za sebe ili kao deo nekog drugog supstituenta, označavaju, osim ako je drugačije navedeno, atom fluora, hlora, broma, ili joda. Dodatno, termini poput "haloalkila" treba da uključuju monohaloalkil i polihaloalkil. Na primer, termin "halo(C1-C4)alkil" treba da uključuje, ali bez ograničenja, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, 4-hlorobutil, 3-bromopropil, i slično.
 
[0018] Termin "acil" označava -C(O)R gde je R supstituisani ili nesupstituisani alkil, supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil, supstituisani ili nesupstituisani heteroalkil, supstituisani ili nesupstituisani heterocikloalkil, supstituisani ili nesupstituisani aril ili supstituisani ili nesupstituisani heteroaril.
 
[0019] Termin "aril" označava, osim ako je drugačije navedeno, poli-nezasićeni, aromatski, ugljovodonični supstituent koji može da bude pojedinačni prsten ili višestruki prsten (preferirano od 1 do 3 prstena) koji su međusobno spojeni (tj., fuzionisani arilni prsten) ili su spojeni kovalentno. Fuzionisani arilni prsten se odnosi na više prstena koji su međusobno fuzionisani, a najmanje jedan od njih je arilni prsten. Termin "heteroaril" se odnosi na arilne grupe (ili prstene) koje sadrže od jednog do četiri heteroatoma izabrana iz N, O, i S. Atomi azota i sumpora su ponekad oksidirani, a azotni atom(i) su ponekad kvaternizovani. Tako, termin "heteroaril" uključuje heteroarilne grupe fuzionisane u prsten (tj. višestruki prsteni međusobno fuzionisani pri čemu najmanje jedan od pomenutih fuzionisanih prstena je heteroaromatski prsten). 5,6-fuzionisani prsten heteroarilena se odnosi na dva prstena koja su međusobno fuzionisana, pri čemu jedan prsten ima 5 članova, a drugi prsten ima 6 članova, i pri čemu najmanje jedan prsten je heteroarilni prsten. Slično, 6,6-fuzionisani prsten heteroarilena se odnosi na dva prstena koja su međusobno fuzionisana, pri čemu jedan prsten ima 6 članova, a drugi prsten ima takođe 6 članova, i pri čemu je najmanje jedan prsten heteroarilni prsten. 6,5-fuzionisani prsten heteroarilena se odnosi na dva međusobno fuzionisana prstena, pri čemu jedan prsten ima 6 članova, a drugi prsten ima 5 članova, i pri čemu najmanje jedan od prstena je heteroarilni prsten. Heteroarilna grupa može da bude spojena na ostatak molekula preko ugljenika ili heteroatoma. Ne-ograničavajući primeri arila i heteroarila uključuju fenil, 1-naftil, 2-naftil, 4-bifenil, 1-pirolil, 2-pirolil, 3-pirolil, 3-pirazolil, 2-imidazolil, 4-imidazolil, pirazinil, 2-oksazolil, 4-oksazolil, 2-fenil-4-oksazolil, 5-oksazolil, 3-izoksazolil, 4-izoksazolil, 5-izoksazolil, 2-tiazolil, 4-tiazolil, 5-tiazolil, 2-furil, 3-furil, 2-tienil, 3-tienil, 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, 2-pirimidil, 4-pirimidil, 5-benzotiazolil, purinil, 2-benzimidazolil, 5-indolil, 1-izohinolil, 5-izohinolil, 2-hinoksalinil, 5-hinoksalinil, 3-hinolil, i 6-hinolil. Supstituenti za svaku od pomenutih arilnih i heteroarilni prstenskih sistema su izabrani iz grupe prihvatljivih supstituenata koji su opisani ispod. "Arilen" i "heteroarilen", sami za sebe ili kao deo nekog drugog supstituenta označavaju dvovalentni radikal koji je izveden iz arila i heteroarila.
 
[0020] Radi sažetosti, termin "aril", kada se koristi u kombinaciji sa drugim terminima (tj., ariloksi, ariltioksi, arilalkil) uključuje oba prstena, arilni i heteroarilni, kao šta je malopre definisano. Tako, termin "arilalkil" treba da uključuje one radikale u kojima je arilna grupa spojena na alkilnu grupu (tj., benzil, fenetil, piridilmetil i slično) uključujući one alkilne grupe u kojima jedan atom ugljenika (tj., metilenska grupa) je zamenjen sa, na primer, atomom kiseonika (tj., fenoksimetil, 2-piridiloksimetil, 3-(1-naftiloksi)propil, i slično).
 
[0021] Termin "okso", kao šta se ovde koristi, označava kiseonik koji je spojen na atom ugljenika preko dvostruke veze.
 
[0022] Termin "alkilsulfonil", kao šta se ovde koristi, označava ostatak koji ima formulu -S(O2)-R', gde R' je alkilna grupa, kao šta je malopre definisano. R' može da ima specifikovan broj ugljenika (na primer, "C1-C4 alkilsulfonil").
 
[0023] Svaki od malopre pomenutih termina (na primer, "alkil", "heteroalkil", "aril" i "heteroaril") treba da uključuje supstituisane i nesupstituisane forme navedenog radikala. Preferirani supstituenti za svaki tip radikala su navedeni ispod.
 
[0024] Supstituenti za alkilne i heteroalkilne radikale (uključujući one grupe koje su često označene kao alkilen, alkenil, heteroalkilen, heteroalkenil, alkinil, cikloalkil, heterocikloalkil, cikloalkenil, i heterocikloalkenil) mogu da budu jedna ili više od brojnih grupa koje su izabrane iz, ali bez ograničenja: -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R", -SR', -halogena, -SiR'R"R'", -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', -NR"C(O)2R', -NR-C(NR'R"R"")=NR"", -NR-C(NR'R")=NR"', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN i -NO2, koje mogu da budu zastupljene od nula do (2m'+1) puta, pri čemu m' je ukupan broj atoma ugljenika u takvom radikalu. R', R", R'" i R"" svaki preferirano i nezavisno se odnose na vodonik, supstituisani ili nesupstituisani heteroalkil, supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil, supstituisani ili nesupstituisani heterocikloalkil, supstituisani ili nesupstituisani aril (na primer, aril supstituisan sa 1-3 halogena), supstituisani ili nesupstituisani alkil, alkoksi ili tioalkoksi, ili arilalkil. Kada jedinjenje, za koje se ovde traži zaštita, uključuje više od jedne R grupe, na primer, svaka pomenuta R grupa je nezavisno izabrana iz svake od R', R", R'" i R"" grupa kada je prisutno više od jedne od pomenutih grupa. Kada su R' i R" spojene na isti azotni atom, pomenute ne mogu da se kombinuju sa atomom azota kako bi se formirao 4-, 5-, 6-, ili 7-člani prsten. Na primer, -NR'R" treba da uključuje, ali bez ograničenja, 1-pirolidinil i 4-morfolinil. U vezi sa gornjom diskusijom o supstituentima, stručnjak u polju razume da termin "alkil" treba da uključuje grupe koje uključuju atome ugljenika koji su spojeni na grupama koje su različite od vodonika, poput haloalkila (na primer, -CF3 i -CH2CF3) i acila (na primer, -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O)CH2OCH3, i slično).
 
[0025] Slično, supstituentima koji su opisani za alkilni radikal, supstituenti za arilne i heteroarilne grupe takođe variraju i mogu da se izaberu iz, na primer: halogena, -OR', -NR'R", -SR', -halogena, - SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', -NR"C(O)2R', -NR-C(NR'R"R"')=NR"", -NR-C(NR'R")=NR"', -S(O)R', - S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN i -NO2, -R', -N3, -CH(Ph)2, fluoro(C1-C4)alkoksi, i fluoro(C1-C4)alkila, koje su zastupljeni od nule pa do ukupnog broja slobodnih valencija u aromatskom prstenskom sistemu; i pri čemu R', R", R'" i R"" su preferirano nezavisno izabrani iz vodonika, supstituisanog ili nesupstituisanog alkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heteroalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog cikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heterocikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog arila i supstituisanog ili nesupstituisanog heteroarila. Kada jedinjenje, za koje se ovde zahteva zaštita, uključuje više od jedne R grupe, na primer, svaka od R grupa je nezavisno izabrana iz svake R', R", R'" and R"" grupe, kada je prisutno više od jedne takve grupe.
 
[0026] Dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu ponekad da formiraju prsten sa formulom -T-C(O)-(CRR')q-U-, u kojem T i U su nezavisno NR-, -O-, -CRR'- ili jednostruka veza, a q je celi broj, od 0 do 3. Alternativno, dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu ponekad da budu zamenjena sa supstituentom sa formulom -A-(CH2)r-B-, gde A i B su nezavisno -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NR'- ili jednostruka veza, a r je celi broj, od 1 do 4. Jedna od jednostrukih veza u tako formiranom novom prstenu može ponekad da bude zamenjena sa dvostrukom vezom. Alternativno, dva supstituenta na susednim atomima u arilnom ili heteroarilnom prstenu mogu ponekad da budu zamenjena sa supstituentom sa formulom -(CRR')s-X'-(C"R"')d-, gde s i d su nezavisno celi brojevi, od 0 do 3, a X' je -0-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, ili -S(O)2NR'-. Supstituenti R, R', R" i R'" su preferirano nezavisno izabrani iz vodonika, supstituisanog ili nesupstituisanog alkila, supstituisanog ili nesupstituisanog cikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog heterocikloalkila, supstituisanog ili nesupstituisanog arila, i supstituisanog ili nesupstituisanog heteroarila.
 
[0027] Kao šta se ovde koristi, termin "heteroatom" ili "heteroatom iz prstena" treba da uključuje kiseonik (O), azot (N), sumpor (S), fosfor (P), i silicijum (Si).
 
[0028] "Supstituentna grupa", kao šta se ovde koristi, znači grupu koja je izabrana iz sledećih ostataka:
(A)                      -OH, -NH2, -SH, -CN, -CF3, -NO2, okso, halogen, nesupstituisani alkil, nesupstituisani heteroalkil, nesupstituisani cikloalkil, nesupstituisani heterocikloalkil, nesupstituisani aril, nesupstituisani heteroaril, i
(B)                      alkil, heteroalkil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril, i heteroaril, koji su supstituisani sa najmanje jednim supstituentom koji je izabran iz:
(i)                      okso, -OH, -NH2, -SH, -CN, -CF3, -NO2, halogena, nesupstituisanog alkila, nesupstituisanog heteroalkila, nesupstituisanog cikloalkila, nesupstituisanog heterocikloalkila, nesupstituisanog arila, nesupstituisanog heteroarila, i
(ii)                      alkila, heteroalkila, cikloalkila, heterocikloalkila, arila, i heteroarila, koji su supstituisani sa najmanje jednim supstituentom koji je izabran iz:
(a)       okso, -OH, -NH2, -SH, -CN, -CF3, -NO2, halogena, nesupstituisanog alkila, nesupstituisanog heteroalkila, nesupstituisanog cikloalkila, nesupstituisanog heterocikloalkila, nesupstituisanog arila, nesupstituisanog heteroarila, i
(b)       alkila, heteroalkila, cikloalkila, heterocikloalkila, arila, ili heteroarila, koji su supstituisani sa najmanje jednim supstituentom koji je izabran iz okso, -OH, -NH2, -SH, -CN, -CF3, -NO2, halogena, nesupstituisanog alkila, nesupstituisanog heteroalkila, nesupstituisanog cikloalkila, nesupstituisanog heterocikloalkila, nesupstituisanog arila, i nesupstituisanog heteroarila.
 
[0029] "Supstituent koji je ograničen veličinom" ili "supstituentna grupa koja je ograničena veličinom", kao šta se ovde koristi, označava grupu koja je izabrana iz svih malo pre pomenutih supstituenata pod terminom "supstituentna grupa", pri čemu svaki supstituisani ili nesupstituisani alkil je neki supstituisani ili nesupstituisani C1-C20 alkil, svaki supstituisani ili nesupstituisani heteroalkil je neki supstituisani ili nesupstituisani 2- do 20-člani heteroalkil, svaki supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil je neki supstituisani ili nesupstituisani C4-C8 cikloalkil, a svaki supstituisani ili nesupstituisani heterocikloalkil je neki supstituisani ili nesupstituisani 4- do 8-člani heterocikloalkil.
 
[0030] "Niži supstituent" ili "niža supstituentna grupa", kao šta se ovde koristi, označava grupu koja je izabrana iz svih malopre pomenutih supstituenata pod terminom "supstituentna grupa", pri čemu svaki supstituisani ili nesupstituisani alkil je neki supstituisani ili nesupstituisani C1-C8 alkil, svaki supstituisani ili nesupstituisani heteroalkil je neki supstituisani ili nesupstituisani 2- do 8-člani heteroalkil, svaki supstituisani ili nesupstituisani cikloalkil je neki supstituisani ili nesupstituisani C5-C7 cikloalkil, a svaki supstituisani ili nesupstituisani heterocikloalkil je neki supstituisani ili nesupstituisani 5- do 7-člani heterocikloalkil.
 
[0031] Termin "farmaceutski prihvatljive soli" treba da uključuje soli aktivnih jedinjenja koja se pripremaju sa relativno netoksičnim kiselinama ili bazama, u zavisnosti o pojedinačnim supstituentima koji se nalaze na jedinjenjima za koja se ovde zahteva zaštita. Kada jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita sadrže relativno kisele funkcionalnosti, bazne adicione soli mogu da se dobiju uz pomoć kontaktiranja neutralne forme takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene baze, u čistoj formi ili u nekom prikladnom inertnom rastvaraču. Primeri za farmaceutski prihvatljive bazne adicione soli uključuju soli natrijuma, kalijuma, kalcijuma, amonijuma, organski amino, ili soli magnezijuma, ili slične soli. Kada jedinjenja, za koja se ovde zahteva zaštita, sadrže relativno bazne funkcionalnosti, kisele adicione soli mogu da se dobiju uz pomoć kontaktiranja neutralne forme takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene kiseline, ili čiste ili u nekom prikladnom inertnom rastvaraču. Primeri za farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli uključuju one koje su izvedene iz anorganskih kiselina poput hlorovodonične, bromovodonične, azotne, karbonilne, monohidrogenkarbonilne, fosforne, monohidrogenfosforne, dihidrogenfosforne, sumporne, monohidrogensumporne, hidridne, ili fosforne kiseline i slično, kao i soli koje su izvedene iz relativno netoksičnih organskih kiselina poput sirćetne, propionske, izobutirične, maleične, malonske, benzojeve, sukcinske, suberinske, fumarne, mlečne, mandelične, ftalne, benzensulfonske, p-tolilsulfonske, limunske, tartarne, oksalne, metansulfonske, i slično. Takođe su uključene soli amino-kiselina poput arginata i slično, i soli organskih kiselina poput glukuronske ili galaktunorinske kiseline i slično (vidi, na primer, Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). Određena specifična jedinjenje, za koja se ovde zahteva zaštita, sadrže obe funkcionalnosti, baznu i kiselu, šta omogućava jedinjenju da se konvertuje u baznu ili kiselu adicionu so.
 
[0032] Tako, jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da postoje kao soli, poput soli sa nekim farmaceutski prihvatljivim kiselinama. Primeri takvih soli uključuju hidrohloride, hidrobromide, sulfate, metansulfonate, nitrate, maleate, acetate, citrate, fumarate, tartrate (na primer, (+)-tartrati, (-)-tartrati ili njihove smeše uključujući racemične smeše), sukcinate, benzoate i soli sa amino-kiselinama poput glutamnske kiseline. Ove soli mogu da se pripreme uz pomoć postupaka koji su poznati stručnjacima u polju.
 
[0033] Neutralne forme jedinjenja se preferirano regenerišu uz pomoć kontaktiranja neke soli sa bazom ili kiselinom i izolovanja parentnog jedinjenja na konvencionalan način. Pomenuta parentna forma jedinjenja se razlikuje od brojnih solnih formi u određenim fizičkim karakteristikama, poput rastvorljivosti u polarnim rastvaračima.
 
[0034] Određena jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da postoje u nerastvorenim formama kao i u solvatizovanim formama, uključujući hidratne forme. Opšte uzeto, solvatizovane forme su ekvivalent nesolvatizovanim formama i spadaju u okvire ovoga pronalaska. Određena jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da postoje u višestrukim kristalnim ili amorfnim formama. Opšte uzeto, sve fizičke forme su prikladne za upotrebu koja je predviđena ovim razotkrivanjem.
 
[0035] Određena jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita poseduju asimetrične atome ugljenika (optičke centre) ili dvostruke veze; racemati, dijastereomeri, tautomeri, geometrijski izomere i pojedinačni izomeri. Jedinjenja za koja se ovde zahtjeva zaštita ne uključuju ona za koja se u stanju tehnike zna da su previše neprikladna za sintezu i/ili izolovanje.
 
[0036] Kada je neki supstituent jedinjenja, koje je ovde obezbeđeno, "R-supstituisan" (na primer, R1-supstituisan), treba da se razume da je pomenuti supstituent supstituisan sa jednim ili više već pomenutih R grupa (na primer, R1), kao šta je prikladno. U nekim izvedbama, pomenuti supstituent je supstituisan sa jednim ili više već pomenutih R grupa.
 
[0037] Termini "tretirati" ili "tretman" se odnosi na bilo koji pokazatelj uspeha tretmana ili ublažavanja neke ozlede, patologije ili stanja, uključujući bilo koji objektivan ili subjektivan parametar poput poništavanja; povlačenja; smanjivanje simptoma ili situaciju kada pomenuta ozleda, patologija ili stanje postanu podnošljiviji pacijentu; kada im se uspori rata degeneracije ili opadanja; kada zadnji stepen degeneracije postane manje iscrpljujuća; kada se poboljša pacijentovo fizičko ili mentalno stanje. Tretman ili ublažavanje simptoma može da se bazira na objektivnim ili subjektivnim parametrima; uključujući rezultate fizičkog pregleda, neuro-psihijatrijskih pregleda, i/ili psihijatrijske evaluacije. Na primer, određeni postupci koji su ovde prikazani uspešno tretiraju rak uz pomoć smanjivanja incidencije njegove pojave, inhibiranja njegovog rasta i/ili uzrokovanja povlačenja raka.
 
[0038] "Efektivna količina" je neka količina jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita koja je dovoljna da doprinese tretmanu, prevenciji, ili smanjivanju jednog ili više simptoma neke bolesti, ili da inhibira efekt amiloida u odnosu kada je pomenuto jedinjenje odsutno. Kada se pomenuti termin spominje u vezi sa nekom tretmanu bolesti, "efektivna količina" može takođe da se odnosi na "terapeutski efektivnu količinu". "Smanjenje" jednog ili više simptoma (i svi gramatički ekvivalenti ove fraze) označava smanjenje snage ili frekvencije simptoma (ili više njih), ili eliminaciju simptoma (ili više njih). "Profilaktički efektivna količina" nekog leka je neka određena količina pomenutog leka koja će kada se administrira nekom subjektu uspeti da ostvari predviđeni profilaktički efekt, na primer, da spreči ili uspori izbijanje (ili povratak) neke bolesti, ili da smanji verovatnost izbijanja (ili povratka) neke bolesti ili njenih simptoma. Puni profilaktički efekt se ne javlja nužno nakon administracije samo jedne doze, već može da se pojavi samo nakon administracije više serija doza. Tako, profilaktički efektivna količine može da se administrira uz pomoć jedne ili više administracija. "Količina koja smanjuje delovanje", kao šta se ovde koristi, se odnosi na količinu antagonista koji je potreban da smanji delovanje nekog encima u odnosu na situaciju kada pomenuti antagonist nije prisutan. "Količina koja smanjuje funkciju", kao šta se ovde koristi, se odnosi na količinu antagonista koja je potrebna da razori funkciju osteoklasta ili leukocita u odnosu na slučaj kada antagonist nije prisutan.
 
II. Jedinjenja koja vežu amiloid
[0039] U jednom aspektu su obezbeđena jedinjenja koja mogu da asociraju sa amiloidom (ili amiloidima) i/ili amiloidnim peptidom (ili amiloidnim peptidima).
 
[0040] Jedinjenja sa Formulama koja su vode obezbeđena su jedno ili više od jedinjenja koja su prikazana u Tabeli 1 ispod:
 
Tabela 1. Jedinjenja.
Jedinjenje
Struktura
11
 
 
29
 
 
28
 
 
30
 
 
31
 
 
 
III. Farmaceutske kompozicije
[0041] U drugom aspektu, farmaceutske kompozicije, za koje se ovde zahteva zaštita (tj., formulacije) mogu da uključuju jedinjenje, za koje se ovde zahteva zaštita, u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom (na primer, nosilac). Farmaceutske kompozicije uključuju optičke izomere, dijastereomere, ili farmaceutski prihvatljive soli inhibitora koji su ovde razotkriveni. Na primer, u nekim izvedbama, farmaceutske kompozicije uključuju jedinjenje, za koje se ovde zahteva zaštita, i citrat kao farmaceutski prihvatljiva so. Pomenuto jedinjenje koje je uključeno u farmaceutskoj kompoziciji može da bude kovalentno spojeno na neki nosilac, kao šta je ovde opisano. Alternativno, jedinjenje koje je uključeno u farmaceutskoj kompoziciji nije kovalentno spojeno na ostatak.
 
[0042] "Farmaceutski prihvatljivi nosilac", kao šta se ovde koristi, se odnosi na farmaceutske ekscipijente, na primer, farmaceutski, fiziološki, prihvatljive organske ili anorganske supstancije za nosioce koji su prikladni za enteralnu ili parenteralnu primenu i koji ne reaguju štetno sa aktivnim agensom. Prikladni farmaceutski prihvatljivi nosioci uključuju vodu, rastvore soli (poput Prstener-ov rastvor), alkohole, ulja, želatin, i ugljene hidrate poput laktoze, amiloze ili skroba, estere masnih kiselina, hidroksimetilcelulozu, i polivinil pirolidin. Takvi preparati mogu da budu sterilni i, ako je poželjno, pomešani sa pomoćnim agensima poput lubrikanata, prezervativa, stabilizera, agenasa za vlaženje, agenasa za emulziju, soli za delovanje na osmotski pritisak, pufera, agenasa za bojanje, i/ili aromatskih supstancija i slično pri čemu pomenuti ne smeju štetno da deluju na jedinjenja, koja su ovde razotkrivena.
 
[0043] Jedinjenja, za koje se ovde zahteva zaštita, subjektu mogu da se administriraju sami za sebe ili mogu da se ko-administriraju. Ko-administracija treba da uključuje simultanu ili sekvencijalnu administraciju jedinjenja, pojedinačno ili u kombinaciji (više od jednog jedinjenja). Pomenuti preparati mogu takođe da se kombinuju, ako je poželjno, sa drugim aktivnim supstancijama (na primer, sa ciljem da se smanji metabolička degradacija).
 
A. Formulacije
[0044] Jedinjenja mogu da se pripreme i administriraju na brojne načine preko oralnih, parenteralnih, i topikalnih doznih forma. Tako, jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da se administriraju uz pomoć injekcije (na primer, intravenozno, intramišićno, intrakutano, supkutano, intraduodenalno, ili intraperitonealno). Takođe, jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da se administriraju uz pomoć inhalacije, na primer, intranazalno. Dodatno, jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da se administriraju transdermalno. Takođe je predviđeno korišćenje višestrukih ruta administracije (na primer, intramišićno, oralno, transdermalno) sa ciljem davanja jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita. Prema tome, farmaceutske kompozicije mogu da uključuju neki farmaceutski prihvatljivi nosilac ili ekscipijent i jedno ili više jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita.
 
[0045] Za pripremu farmaceutskih kompozicija od jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita, farmaceutski prihvatljivi nosioci mogu da budu čvrsti ili tečni. Preparati u čvrstoj formi uključuju prahove, tablete, pilule, kapsule, kašete, čepiće, i poželjne granule. Čvrsti nosilac može da bude jedna ili više supstancija koje takođe mogu da deluju kao razređivači, agensi za ukus, veznici, prezervativi, agensi za raspadanje tableta, ili materijali za kapsuliranje.
 
[0046] Kod prahova, nosilac je fino podeljena čvrsta materija u smeša sa fino podeljenom aktivnom komponentom. Kod tableta, aktivna komponenta je pomešana sa nosiocem koji poseduje potrebne vezne karakteristike u prikladnim proporcijama i kompaktirana u poželjnu formu i veličinu.
 
[0047] Pomenuti prahovi i tablete preferirano sadrže od 5% do 70% aktivnog jedinjenja. Prikladni nosioci su magnezijum karbonat, magnezijum stearat, talk, šećer, laktoza, pektin, dekstrin, skrob, želatin, tragakant, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza, vosak koji se topi na nižim temperaturama, maslac od kakaa, i slično. Termin "priprema" treba da uključuje formulaciju aktivnog jedinjenja sa kapsuliranim materijalom kao nosiocem koji obezbeđuje kapsulu u kojoj je aktivna komponenta, sa ili bez drugih nosioca, okružena sa nosiocem, koji na taj način ostvaruje kontakt sa pomenutim. Slično, uključeni su i kašeti i lozengi. Tablete, prahovi, kapsule, pilule, kašeti, i lozengi mogu da se koriste kao čvrste dozne forme koje su prikladne za oralnu administraciju.
 
[0048] Za pripremu čepića, vosak koji se topi na niskoj temperaturi, poput smeše masnih kiselih glicerida ili maslaca od kakaa, se najpre rastopi, a nakon toga se aktivna komponenta homogeno disperguje u pomenuto, na primer uz mešanje. Rastopljena homogena smeša se tada izlije u prikladne kalupe, ostavi da se ohladi, a nakon toga i ukruti.
 
[0049] Preparati u tečnoj formi uključuju rastvore, suspenzije, i emulzije, na primer, voda ili rastvor voda/propilen glikola. Za parenteralnu injekciju, tečni preparati mogu da se formulišu u rastvoru vodenog polietilen glikola.
 
[0050] Kada je potrebna ili poželjna parenteralna primena, posebno prikladne mešavine za jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštitan su sterilni rastvori koji mogu da se injektiraju, preferirano uljani ili vodeni rastvori, kao i suspenzije, emulzije, ili implanti, uključujući čepiće. Posebno, nosioci za parenteralnu administraciju uključuju vodene rastvore dekstroze, slani rastvor, čistu vodu, etanol, glicerol, propilen glikol, ulje od kikirikija, ulje od susama, polioksietilen-blok polimere, i slično. Ampule su prikladne unitarne doze. Jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu takođe da se ugrade u liposome ili da se administriraju preko transdermalnih pumpi ili nalepnica. Farmaceutske mešavine koje su prikladne za ovde navedenu upotrebu uključuju one koje su opisane, na primer, u Pharmaceutical Sciences (17. izd., Mack Pub. Co., Easton, PA) i u dokumentu WO 96/05309, pri čemu su oba navoda ovde uključena referencom.
 
[0051] Vodeni rastvori koji su prikladni za oralnu upotrebu mogu da se pripreme uz pomoć rastvaranja aktivne komponente u vodi i dodavanja prikladnih koloranata, ukusa, stabilizera, i agenasa za ugušćivanje, ako je poželjno. Vodene suspenzije koje su prikladne za oralnu upotrebu mogu da se načine uz pomoć dispergovanja fino podeljene aktivne komponente u vodi sa viskoznim materijalom, poput prirodnih ili sintetičkih guma, smola, metilceluloze, natrijum karboksimetilceluloze, i drugih dobro-poznatih agenasa za suspendovanje.
 
[0052] Takođe su uključeni i preparati u čvrstoj formi koji su namenjeni konvertovanju, neposredno pre upotrebe, u preparati u tečnoj formi za oralnu administraciju. Takve tečne forme uključuju rastvore, suspenzije, i emulzije. Ovi preparati mogu da sadrže, osim aktivne komponente, kolorante, ukuse, stabilizere, pufere, veštačke i prirodne zaslađivaće, disperzante, agense za ugušćivanje, solubilizere, i slično.
 
[0053] Farmaceutski preparat se preferirano ostvaruje u unitarnoj doznoj formi. U takvoj formi, preparat je podeljen u unitarne doze koje sadrže odgovarajuće količine aktivne komponente. Unitarna dozna forma može da bude pakovani preparat, pri čemu paket sadrži diskretne količine preparata, poput pakovanih tableta, kapsula, i prahova u posudama ili ampulama. Takođe, unitarna dozna forma može da bude kapsula, tableta, kašet, ili lozeng, ili može da sadrži odgovarajući broj već pomenutih u pakovanoj formi.
 
[0054] Količina aktivne komponente u unitarnom doznom preparatu može da varira ili da se podesi od 0.1 mg do 10000 mg, tipično od 1.0 mg do 1000 mg, a najbolje od 10 mg do 500 mg, u skladu sa pojedinačnim aplikacijama i potencijom same aktivne komponente. Kompozicija može, ako je poželjno, takođe da sadrži druge kompatibilne terapeutske agense.
 
[0055] Neka jedinjenja mogu da imaju ograničenu rastvorljivost u vodi pa prema tome mogu da zahtevaju prisutnost surfaktanta ili drugog odgovarajućeg ko-rastvarača u kompoziciji. Takvi ko-rastvarači uključuju: Polisorbat 20, 60, i 80; Pluronic F-68, F-84, i P-103; ciklodekstrin; i polioksil 35 ricinusovo ulje. Takvi ko-rastvarači se tipično koriste u nivou između oko 0.01% i oko 2% po težini.
 
[0056] Viskoznost koja je veća od one u jednostavnim vodenim rastvorima može da bude poželjna sa ciljem smanjivanja varijacija u stepenu rastvaranja pomenutih formulacija, smanjivanja fizičke separacije komponenata suspenzije ili emulzije iz formulacije, i/ili sa ciljem drugačijeg poboljšanja same formulacije. Takvi agensi koji pomažu viskoznost uključuju, na primer, polivinil alkohol, polivinil pirolidon, metil celulozu, hidroksi propil metilcelulozu, hidroksietil celulozu, karboksimetil celulozu, hidroksi propil celulozu, hondroitin sulfat i njihove soli, hijaluronsku kiselini i njezine soli, i kombinacije pomenutih. Takvi agensi se tipično koriste u nivoima između oko 0.01% i oko 2% po težini.
 
[0057] Kompozicije za koje se ovde zahteva zaštita mogu da uključuju dodatne komponente sa ciljem da se obezbedi zadržano oslobađanje i/ili komfor. Takve komponente uključuju anjonske mukomimetičke polimere visoke molekularne mase, polisaharide za želatiniranje, i fino-podeljene supstancije za nosioce. O ovim komponentama se diskutira detaljno u Američkim pat. br. 4,911,920; 5,403,841; 5,212,162; i 4,861,760. Celokupni sadržaj pomenutih dokumenata je ovde uključen referencom.
 
B. Efektivne doze
[0058] Farmaceutske kompozicije koje su ovde obezbeđene uključuju kompozicije u kojima je aktivni sastojak zastupljen u terapeutski efektivnoj količini, tj., u količini koja je efektivna da ostvari predviđeni cilj. Aktualna količina koja je efektivna za pojedinačnu aplikaciju zavisi, inter alia, o stanjima koja se tretiraju. Na primer, kada se govori o postupcima za tretman raka, pomenute kompozicije sadrže količinu aktivnog sastojaka koja je dovoljna da postigne željeni rezultat (na primer, smanjenje broja ćelija raka u nekom subjektu).
 
[0059] Doza i frekvencija (pojedinačna ili višestruka doza) administriranog jedinjenja mogu da variraju u zavisnosti o brojnim faktorima, uključujući rutu administracije; veličinu, starost, pol, zdravlje, telesnu težinu, indeks telesne mase, i dijete recipijenta; prirodu i snagu simptoma bolesti koja se tretira; mogućnost postojanja drugih bolesti ili drugih zdravstvenih problema; vrste konkurentnog tretmana; i komplikacije usled bilo koje bolesti ili bilo kojeg tretmana. Drugi terapeutski režimi ili agensi mogu da se koriste zajedno sa postupcima i jedinjenjima koji su razotkriveni ovde.
 
[0060] Za bilo koje jedinjenje za koje se ovde zahteva zaštita, terapeutski efektivna količina može da se inicijalno odredi iz testova ćelijske kulture, kao šta je poznato stanju tehnike.
 
[0061] Terapeutski efektivne količine za upotrebu kod ljudi mogu da se odrede iz pomoć životinjskih modela. Na primer, doza za ljude može da se formuliše tako da postiže koncentraciju za koju se zna da je efektivna u životinja.
 
[0062] Doze mogu da variraju u zavisnosti u potrebama pacijenta i o jedinjenju koje se koristi. Doza koja se administrira pacijentu treba da bude dovoljna da uspostavi koristan terapeutski odgovor u pacijentu tokom vremena. Veličina doze se takođe određuje na osnovu postojanja, prirode, i snage bilo kojeg nus-efekta. Generalno, tretman započinje sa malim dozama, koje su manje od optimalne doze jedinjenja. Nakon toga, doza se povećava u malim koracima sve do postizanja optimalnog efekta u određenim okolnostima. U jednoj izvedbi, dozni raspon se kreće od 0.001% do 10% w/v. U drugoj izvedbi, dozni raspon se kreće od 0.1% do 5% w/v.
 
[0063] Dozne količine i intervali mogu da se podese individualno sa ciljem da se postignu nivoi jedinjenja koje se administrira koji su dovoljni da se tretira pojedinačna klinička indikacija. Ovo omogućuje terapeutski režim koji je primeren snazi pojedinačnog bolesnog stanja.
 
[0064] Uz pomoć tehnika koje su ovde obezbeđene, efektivan profilaktički ili terapeutski režim za tretman može da se planira tako da ne uzrokuje značajnu toksičnost, a da pri tome ostane dovoljno efikasan da može da tretira kliničke simptome koji se ispoljavaju kod pojedinačnog pacijenta. Ovo planiranje može da uključuje pažljiv odabir aktivnog jedinjenja uzimajući u obzir faktore poput potencije jedinjenja, relativne biodostupnosti, telesne težine pacijenta, prisutnosti i snage štetnih nus-pojava, preferiranog modusa administracije, i toksikološkog profila izabranog agensa.
 
C. Toksičnost
[0065] Omer između toksičnosti i terapeutskog efekta za pojedinačno jedinjenje je njegov terapeutski indeks i može da se izrazi kao omer između LD50 (količine jedinjenja koja je letalna za 50% populacije) i ED50 (količine jedinjenja koja je efektivna u 50% populacije). Jedinjenja koja pokazuju visoko terapeutske indikacije su preferirana. Podaci za terapeutski indeks koji su dobiveni iz testova ćelijskih kultura i/ili studija na životinjama mogu da se koriste za formulisanje raspona doza koje mogu da se koriste na ljudima. Doze takvih jedinjenja preferirano se kreću u rasponu koncentracija u plazmi koje uključuju ED50 sa malom ili bez toksičnosti. Doza može da varira u nekom rasponu koji zavisi o korišćenoj doznoj formi i ruti za administraciju. Vidi, na primer, Fingl et al., In: THE PHARMACOLOGICAL BASIS OF THERAPEUTICS, Pog. 1, str. 1, 1975. Tačna formulacija, ruta administracije, i doza mogu da se izaberu od strane pojedinačnog lekara uzimajući u obzir pacijentovo stanje i pojedinačan postupak preko kojeg se primenjuje jedinjenje.
 
IV. Postupci za upotrebu
[0066] "Amiloidni kompleks" se ovde koristi za označavanje kompleksa jedinjenje za kojeg se ovde zahteva zaštita i najmanje jednog amiloidnog peptida (na primer, agregat amiloidnih peptida). Jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita mogu da formiraju kompleks sa nekim amiloidom uz pomoć brojnih interakcija, poput ne-kovalentnih interakcija (na primer, hidrofobnih interakcija ili vodonikovih veza).
 
[0067] Amiloidi koji su ovde opisani mogu da se sastoje od najmanje jednog amiloidnog peptidnog molekula. Amiloidni peptid se ovde odnosi na peptid ili belančevinu koja može da formira deo amiloida ili je sposobna da formira amiloid zajedno sa drugim peptidima ili belančevinama. Amiloidi koji su ovde opisani mogu da se sastoje od bilo kojeg amiloidnog peptida ili bilo koje amiloidne belančevine za kojih se zna da mogu da formiraju amiloide. U nekim izvedbama, amiloidi uključuju mnoštvo amiloidnih peptida i/ili amiloidnih peptidnih molekula. U nekim izvedbama, amiloid uključuje amiloidni peptidni molekul koji je agregiran sa jednim ili više amiloidnih peptidnih molekula.
 
[0068] U nekim izvedbama, amiloidni peptidi mogu da uključuju Aβ peptid, prionsku belančevinu, α-sinuklein, ili superoksid dismutazu. U nekim izvedbama, amiloidni peptidi mogu da uključuju deo ili funkcioni fragment Aβ peptida, prionske belančevine, α-sinukleina, ili superoksid dismutaze. U nekim izvedbama, amiloidni peptid i/ili amiloid mogu da se rastvore u rastvoru i da se vežu na jedno ili više jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita. U nekim izvedbama, amiloidi uključuju amiloidne peptide koji su aranžirani u β-plohe koje omogućuju vezanje jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita. U nekim izvedbama; jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita pokazuju povećanu fluorescenciju (ako se uporedi sa situacijom u slobodnom rastvoru) u odnosu na situaciju kada su vezani i reaguju sa amiloidima uz pomoć hidrofobnih interakcija.
 
[0069] U drugom aspektu za kojeg se ne zahteva zaštita, razotkriveni postupci uključuju postupke testiranja pomenutih jedinjenja sa ciljem određivanja vezanja pomenutih jedinjenja da amiloide i/ili amiloidne peptide. Uz korišćenje tehnika koje su poznate stanju tehnike i instrukcija koje su ovde obezbeđene, jedinjenja kandidati mogu da se jednostavno testiraju na sposobnost da vežu amiloide. Na primer, agensi koji vežu amiloid i koji imaju strukturu iz Formula koje su ovde obezbeđene ili njihove izvedbe mogu da se testiraju uz pomoć in vitro testova. U nekim izvedbama, in vitro testovi mogu da uključuju merenje fluorescencije pomenutih jedinjenja kada su vezana na amiloide u odnosu na situaciju kada nisu vezana na amiloide (slobodni rastvor). Generalno, povećanje fluorescencije indicira vezanje na amiloid. Vezne konstante za pomenuta jedinjenja mogu takođe da se odrede uz pomoć tehnika koje su poznate stanju tehnike. Na primer, studije kompetetivnog vezanja mogu da se koriste sa ciljem da se odredi efektivnost jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita u inhibiranju, na primer, IgG-Aβ peptidnih interakcija. Ćelijski testovi mogu takođe da se koriste da se procene vezne karakteristike agenasa (kandidata) koji vežu amiloid i koji imaju strukturu iz Formula koje su ovde obezbeđene ili iz njihovih izvedaba. Ćelijski testovi uključuju ćelije iz bilo kojeg odgovarajućeg izvora, uključujući biljne i životinjske ćelije (poput ćelija sisara). Ćelijski testovi mogu takođe da se provedu u humanim ćelijama. Izbor odgovarajućeg testa spada u uobičajene veštine stručnjaka u polju.
 
[0070] Jednom kada se za jedinjenja utvrdi da su sposobna da se vežu na amiloide in vitro i/ili u ćeliji, pomenuta jedinjenja mogu dodatno da se testiraju na njihovu sposobnost da selektivno vežu amiloid (na primer, u amiloidnim plakovima) u životinjskim modelima (na primer, cele životinje, životinjski organi, ili životinjska tkiva). Tako, jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita mogu dodatno da se testiraju u ćelijskim modelima ili životinjskim modelima na njihovu sposobnost da uzrokuju primetljive promene u fenotipu koji je povezan sa pojedinačnim amiloidnim peptidom i/ili amiloidom. Osim ćelijske kulture, životinjski modeli mogu da se koriste sa ciljem testiranja jedinjenja za koje se ovde zahteva zaštita na njihovu sposobnost da tretiraju, na primer, bolesti koje su povezane sa amiloidima u nekom životinjskom modelu. U nekim izvedbama, jedinjenja za koja se ovde zahteva zaštita, ovde mogu da se koriste za slikanje amiloida u životinjskom tkivu. U nekim izvedbama, životinjsko tkivo je ljudsko tkivo.
 
[0071] U drugom aspektu, obezbeđena je upotreba u postupku za tretman neke bolesti koja je povezana sa amiloidnim peptidima i/ili amiloidima u nekom subjektu u potrebi. U nekim izvedbama, bolest može da se karakterizuje uz pomoć akumulacije amiloida (na primer, amiloidnih plakova) u nekom subjektu. Upotreba takvih postupaka može da uključuje administraciju subjektu efektivne količine (na primer, terapeutski efektivnu količinu) nekog jedinjenja koje ima strukturu iz Formula koje su ovde obezbeđene (ili u nekoj od izvedaba koje su ovde opisane).
 
[0072] Termin "subjekt", kao šta se ovde koristi, se odnosi na sisara kojem se administrira farmaceutska kompozicija ili formulacija. Primeri za subjekte uključuju ljude, kao i veterinarske i laboratorijske životinje poput konja, svinja, stoke, pasa, mačaka, zečeva, pacova, miševa, i vodenih sisara. U nekim izvedbama, subjekt je čovek.
 
[0073] U nekim izvedbama, bolest može da uključuje Alzheimer-ovu bolest, goveđu spongiformnu encefalopatijua (BSE), Parkinson-ovu bolest, Huntington-ovu bolest, Down-ov sindrom, demenciju sa Lewy-evim telima, ili amiotrofičnu lateralnu sklerozu (ALS). U nekim izvedbama, amiloidni peptid je Aβ peptid, a bolest je Alzheimer-ova bolest. U nekim izvedbama, upotreba u postupcima za tretiranje, koji su ovde opisani, uključuje upotrebu u postupku za tretman Alzheimer-ove bolesti. U nekim izvedbama, upotreba u postupcima za tretiranje, koji su ovde opisani, uključuje upotrebu u postupku za tretman Parkinson-ove bolesti.
 
V. Primeri
Primer 1
[0074] Opšta procedura za pripremu jedinjenja koja su ovde opisana, a i u Primerima 1a-1m. U bocu sa okruglim dnom koja sadrži rastvor aldehida (5.0 mmol) i 2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil 2-cijanoacetata (5.5 mmol) u 20 ml THF su dodani 0.50 mmol piperidina, a smeša je grejana na 50° C. Reakcija je praćena uz pomoć TLC, a završena je za 21 čas. Gruba smeša je koncentrisana pod smanjenim pritiskom, a produkt je prečišćen uz pomoć fleš hromatografije (10-30% etil acetat u heksanu).
 
[0075] Opšte primedbe: Svi reagensi su bili (Aldrich, Acros) u skladu sa najvišim komercijalnim standardima kvalitete, a korišćeni su bez dodatnog prečišćavanja osim kada je to navedeno. Tečnosti koje su osetljive na vazduh i vlagu i rastvori su dodavani uz pomoć šprica ili kanule od nerđajućeg čelika. Organski rastvori su koncentrisani uz pomoć rotacionog isparavanja ispod 45° C na približno 20 mmHg. Sve ne-vodene reakcije su provedene u bezvodnim uslovima. Prinosi se odnose na hromatografski i spektroskopski (1H NMR, 13C NMR) homogene materijale, osim ako je drugačije navedeno. Reakcije su praćene uz pomoć tanko-slojne hromatografije (TLC) koja se provodi na pločicama od silika-gela od 0.25 mm (E. Merck; 60F-254), a vizualizirane su pod UV svetlom i/ili razvijene uz pomoć potapanja u rastvor od 10% etanolno-fosfomolibdinske kiseline (PMA) ili uz pomoć p-anisaldehida, nakon čega su grejane. Silika-gel (E. Merck; 60, veličina čestica: 0.040-0.063 mm) je korišćen za fleš-hromatografiju. Razdvajanja uz pomoć preparativne tanko-slojne hromatografije su provođena na pločicama od silika-gela od 0.25 ili 0.50 mm (E. Merck; 60F-254). NMR spektari su snimljeni na aparatima Varian Mercury 300 ili 400 MHz, a kalibracija je izvedena uz pomoć rezidualnog ne-deuterisanog rastvarača koji je služio kao interna referenca. Sledeće skraćenice su korišćene sa ciljem da se objasne multipliciteti: s = singlet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet, b = široko. Maseni spektari visoke rezolucije (HRMS) su snimljeni na masenom spektrometru VG 7070 HS nakon jonizacije uz pomoć elektronskog spreja (ESI) ili u uslovima elektronskog impakta (EI). Podaci fluorescencijske spektroskopije su snimljeni na 25° C (aparat: MD-5020 Photon Technology International Spectrophotometer).
 
[0076] Važna za sintezu jedinjenja, koja su ovde opisana, je kondenzacija po Knoevenagel-u sa 1 ekvivalentom odgovarajućeg aldehida, na primer 6, sa 1.1 ekvivalenata odgovarajućeg derivata malonske kiseline, na primer 7. Vidi Šemu 1. Ova reakcija je katalizovana uz pomoć piperidina (10%) pa je kompletovana tokom 21 časa u THF pod refluksom. Vidi X. H. Chen, Z. J. Zhao, Y. Liu, P. Lu, Y. G. Wang, Chemistry Letters 2008, 37:570-571; M. A. Haidekker, T. P. Brady, D. Lichlyter, E. A. Theodorakis, Journal of the American Chemical Society 2006, 128:398-399. Nakon standardnog hromatografskog prečišćavanja na silika-gelu, željeni produkt 8 je izolovan sa dobrim prinosom (Tabela 2). Reagensi i uslovi za Šemu 1: (a) 1.0 ekviv. 6, 1.1 ekviv. 7, 0.1 ekviv. piperidin, THF, 50° C, 21 h.
 
 
Tabela 2. Strukture i prinosi za Jedinjenja 8a-8d (ne zahteva se zaštita).
Jedinj. Br.
R4
R5
Prinos (%)
8a
Me
H
98
8b
Me
OMe
98
8c
Et
H
90
8d
nBu
H
78
 
[0077] Jedinjenje 11 na bazi naftalena je sintetizovano uz pomoć tretmana komercijalno dostupnog metoksi naftaldehida 9 sa osam ekvivalenata litijumovanog piperidina i kondenzacije po Knoevenagel-u preostalog aldehida 10 sa cijano esterom 7 (Šema 2, 29% ukupni prinos). Vidi H. M. Guo, F. Tanaka, J. Org. Chem. 2009, 74:2417-2424. Šema 2 reagensi i uslovi: (a) 8.0 ekviv. piperidina u benzen/HMPA: 1/1, 0° C, 8.0 ekviv. nBuLi, 0° C, 15 min, a tada 1.0 ekviv. 9, 25° C, 12 h, 35%; (b) 1.0 ekviv. 10, 1.1 ekviv. 7, 0.1 ekviv. piperidina, THF, 50° C, 21 h, 82%. U nekim izvedbama, R4, R5 i R16 odgovaraju R4, R5 i R16, koji su ovde opisani.
 
 
[0078] Jedinjenje 14 (ne zahteva se zaštita) je pripremljeno uz pomoć kondenzacije aldehida 6a sa α-cijano esterom 12, a nakon toga sledi otklanjanje zaštite sa acetonidne jedinice šta je katalizovano sa kiselinom (Šema 3, 68% ukupan prinos). Vidi M. A. Haidekker, T. P. Brady, S. H. Chalian, W. Akers, D. Lichlyter, E. A. Theodorakis, Bioorg. Chem. 2004, 32:274-289. Šema 3, reagensi i uslovi: (a) 1.0 ekviv. 6a, 1.1 ekviv. 12, 0.1 ekviv. piperidina, THF, 50° C, 21 h, 91%; (b) 1.5 mmol 13, 0.10 g DOWEX-H+,1:1 THF/MeOH, 25° C, 20 h, 75%.
 
 
[0079] Jedinjenje 19 na bazi stilbena (ne traži se zaštita) je sintetizovano u četiri koraka koja uključuju: (a) konverziju benzil bromida 15 u fosfonat 16; (b) olefinaciju po Horner-Emmon-u 16 sa aldehidom 6a sa ciljem da se dobije 17; (c) litijumovanje bromida 17 i formilacija sa ciljem da se dobije aldehid 18; i (d) kondenzaciju po Knoevenagel-u nastalog aldehida 18 sa cijano esterom 7 (Šema 4, 42% ukupan prinos). Vidi H. Meier, E. Karpuk, H. C. Holst, Eur. J. Org. Chem. 2006, 2609-2617; L. Viau, O. Maury, H. Le Bozec, Tetrahedron Lett. 2004, 45:125-128. Šema 4, reagensi i uslovi: (a) 1.0 ekviv. 15, 15 ekviv. trietil fosfita, 90° C, 19 h, 98%; (b) 1.0 ekviv. 16, 1.0 ekviv. NaOMe, 1.0 ekviv. 6a, višak DMF, 25° C, 24 h, 74%; (c) 1.0 ekviv. 17, 1.0 ekviv. n-BuLi, 1.33 ekviv. DMF, THF, -78° C, 60%; (d) 1.0 ekviv. 18, 1.1 ekviv. 7, 0.1 ekviv. piperidina, THF, 50° C, 21 h, 97%. R1 i R2 u Šemi 4 su specifični za Šemu 4, a nisu namenjeni da odgovaraju R1 i R2, koji su ovde opisani.
 
 
[0080] Primer 1a. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil 2-cijano-3-(4-(dimetilamino)fenil)akrilat (8a) (ne zahteva se zaštita). 98%; žuta čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 7.93 (d, 2H, J= 9.0 Hz), 6.69 (d, 2H, J= 9.1 Hz), 4.41 (m, 2H), 3.81- 3.79 (m, 2H), 3.73-3.65 (m, 6H), 3.56 -3.54 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.10 (s, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 164.2, 154.7, 153.6, 134.1, 119.3, 117.4, 111.4, 93.6, 71.9, 70.8, 70.6, 70.5, 68.9, 65.0, 59.0,40.0; HRMS Izračun. za C19H26N2O5 (M)+ 362.1836 pronađeno 362.1841.
 
[0081] Primer 1b. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil2-cijano-3-(4-(dimetilamino)-2-metoksifenil)akrilat (8b) (ne zahteva se zaštita). 98% prinos; žuta čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.64 (s,1H), 8.39 (d, 1H, J= 9.2 Hz), 6.63 (dd, 1H, J= 2.3 Hz, J= 9.2 Hz), 6.01 (s, 1H), 4.40 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.81- 3.78 (m, 2H), 3.73- 3.65 (m, 6H), 3.56- 3.53 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.10 (s, 6H); 13C NMR (400 MHz, CDCl3) 8 165.0, 162.2, 155.9, 148.5, 131.3, 118.4, 109.7, 105.4, 93.0, 92.0, 72.2, 71.1, 70.9, 70.8, 69.2, 65.1, 59.3, 55.6, 40.4; HRMS Izračun. za C20H28N2O6 (M+Na)+ 415.1840 pronađeno 415.1836.
 
[0082] Primer 1c. (Z)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil 2-cijano-3-(4-(dietilamino)fenil)akrilat (8c) (ne zahteva se zaštita). 90% prinos; narandžasta tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 7.92 (d, 2H, J= 9.1 Hz), 6.67 (d, 2H, J= 9.2 Hz), 4.42 (m, 2H), 3.82- 3.79 (m, 2H), 3.73-3.72 (m, 2H), 3.69-3.65 (m, 4H), 3.57- 3.54 (m, 2H), 3.45 (q, 4H, J= 7.1 Hz), 3.37 (s, 3H), 1.23 (t, 6H, J= 7.1 Hz); 13CNMR (100 MHz, CDCl3) δ 164.7, 154.8, 151.9, 134.8, 119.0, 117.8, 111.4, 93.0, 72.2, 71.1, 70.9, 70.8, 69.2, 65.2, 59.3, 45.0, 12.8; HRMS Izračun. za C21H30N2O5 (M+Na)+ 413.2047 pronađeno 413.2053.
 
[0083] Primer 1d. (Z)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil-2-cijano-3-(4-(dibutilamino)fenil)akrilat (8d) (ne zahteva se zaštita). 78% prinos; žuta tečnost; 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.00 (s, 1H), 7.87 (d, 2H, J= 9.0 Hz), 6.60 (d, 2H, J= 9.2 Hz), 4.38 (m, 2H), 3.78- 3.76 (m, 2H), 3.71-3.69 (m, 2H), 3.66-3.62 (m, 4H), 3.53-3.51 (m, 2H), 3.34- 3.30 (m, 7H), 1.57 (m, 4H), 1.34 (m, 4H), 0.94 (t, 6H, J= 7.3 Hz); 13CNMR (100 MHz, CDCl3) δ 164.7, 154.7, 152.2, 134.6, 118.9, 117.9, 111.5, 92.8, 72.1, 71.0, 70.8, 69.1, 65.2, 59.2, 51.1, 29.5, 20.4, 14.1; HRMS Izračun. za C25H38N2O5 (M+Na)+ 469.2673 pronađeno 469.2677.
 
[0084] Primer 1e. 6-(piperidin-1-il)-2-naftaldehid (10) (ne zahteva se zaštita). U bocu sa okruglim dnom (od 50 ml) koja je sadržavala benzen (3 mL), HMPA (3 mL) i piperidin (1.65 ml, 16.7 mmol) je dodan n-BuLi (1.6 M u heksanu, 10.4 mL, 16.7 mmol) uz pomoć šprica, na 0° C. Nakon mešanja tokom 15 min, reakciona smeša je tretirana sa rastvorom 6-metoksi-2-naftaldehida (390 mg, 2.09 mmol) u smeši benzen : HMPA, 1:1 (2 ml). Reakciona smeša je ugrejana do sobne temperature, ostavljena da se meša tokom 12 časa, a tada je izlivena u hladni 5% vodeni NaCl (30 ml). Smeša je ekstrahovana sa dietil etrom (3 x 20 mL), osušena preko MgSO4 i koncentrisana. Produkt je prečišćen uz pomoć fleš-hromatografije (20% EtOAc u heksanima) šta daje jedinjenje 9. 9: 35% prinos, žuta čvrsta materija; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.02 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.88-7.73 (m, 2H), 7.67 (d, 1H, J= 8.6 Hz), 7.32 (dd, 1H, J= 2.5 Hz, J= 9.1 Hz), 7.08 (d, 1H, J= 2.4 Hz), 3.42-3.32 (m, 4H), 1.85-1.57 (m, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 192.2, 152.2, 138.8, 134.7, 131.6, 130.7, 127.5, 126.5, 123.6, 119.7, 109.0, 49.8, 25.8, 24.6; HRMS izračun. za C16H17NO(M+H)+ 240.1383 pronađeno 240.1387.
 
[0085] Primer 1f. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil-2-cijano-3-(6-(piperidin-1-il)naftalen-2- il)akrilat (11). 82% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.30 (s, 1H), 8.22 (d, 1H, J= 1.2 Hz), 8.10 (dd, 1H, J= 1.8 Hz, J= 8.8 Hz), 7.76 (d, 1H, J= 9.2 Hz), 7.65 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 7.29 (dd, 1H, J= 2.4 Hz, J= 9.2 Hz), 7.05 (d, 1H, J= 2.2 Hz), 4.47 (m, 2H), 3.85-3.82 (m, 2H), 3.74- 3.66 (m, 6H), 3.57- 3.54 (m, 2H), 3.42-3.38 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 1.74-1.67 (m, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl13) δ 163.4, 155.5, 151.9, 137.8, 134:7, 130.6, 127.3, 126.4, 126.0, 125.7, 119.3, 116.4, 108.4, 98.7, 71.9, 70.8, 70.6, 70.5, 68.8, 65.4, 59.0, 49.4, 25.5, 24.3; HRMS Izračun. za C26H32N2O5 (M+H)+ 453.2384 pronađeno 453.2390.
 
[0086] Primer 1g. (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 2-cijanoacetat (12) (ne zahteva se zaštita). U rastvor 2-cijanosirćetne kiseline (1.02 g, 12 mmol) su dodani acetal (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanol (1.32 g, 10 mmol) u 5 ml DCM i DMAP (61 mg, 0.50 mmol) kap po kap na 0° C. Konačno je dodan EDC 1.86 g (12 mmol), a reakciona smeša je mešana na 0° C tokom 6 časa. Reakcija je razređena sa 15 mL DCM, a nastao DCU je filtriran. Filtrat je osušen preko bezvodnog MgSO4, a rastvarači su odstranjeni pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen uz pomoć fleš-hromatografije (Heks : EtOAc; 10 : 1) šta daje jedinjenje 12. 12: 71% prinos; bezbojna tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.34- 4.32 (m, 1H), 4.28- 4.17 (m, 2H), 4.07 (dd, 1H, J= 6.5 Hz, J= 8.5 Hz), 3.75 (dd, 1H, J= 5.8 Hz, J= 8.5 Hz), 3.51 (s, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.34 (s, 3H); HRMS Izračun. za C9H13NO4(M+H)+ 200.0923 pronađeno 200.0931.
 
[0087] Primer 1h. (E)-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil2-cijano-3-(4-(dimetilamino)fenil)akrilat (13) (ne zahteva se zaštita). U bocu sa okruglim dno koja sadrži rastvor aldehida 6a (0.75 g, 5.0 mmol) i jedinjenja 12 (1.2 g, 5.5 mmol) u 20 ml THF je dodano 0.50 mmol piperidina, a smeša je grejana na 50° C. Gruba smeša je koncentrisana pod smanjenim pritiskom, a produkt je prečišćen uz pomoć fleš-hromatografije (10-30% etil acetat u heksanu) šta daje jedinjenje 13. 13: 91% prinos; žuta čvrsta materija; 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.94 (d, 2H, J= 9.0 Hz), 6.69 (d, 2H, J= 9.2 Hz), 4.42- 4.29 (m, 3H), 4.13 (dd, 1H, J= 6.2 Hz, J= 8.6 Hz), 3.89 (dd, 1H, J= 5.9 Hz, J= 8.5 Hz), 3.11 (s, 6H), 1.46 (s, 3H), 1.38 (s, 3H); 13CNMR (400 MHz, CDCl3) δ 164.3, 155.3, 153.9, 134.5, 119.5, 117.5, 111.7, 110.1, 93.3, 73.7, 66.7, 65.6, 40.3, 26.9, 25.7; HRMS Izračun. za C18H22N2O4(M+H)+ 331.1658 pronađeno 331.1691.
 
[0088] Primer 1i. (E)-2,3-dihidroksipropil 2-cijano-3-(4-(dimetilamino)fenil) akrilat (14) (ne zahteva se zaštita). Jedinjenje 13 (0.5 g, 1.5 mmol) je rastvoreno u smeši THF/MeOH (1:1) pa je dodana smola DOWEX-H+ (0.10 g), a heterogena smeša je mešana tokom 20 časa. Smola DOWEX-H+ je odstranjena uz pomoć filtracije pa je dodan trietilamin (50 mg, 0.5 mmol), a rastvarač je odstranjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen uz pomoć fleš-hromatografije (100% etar) šta daje jedinjenje 14. 14: 75% prinos; svetlo-žuta čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.94 (d, 2H, J= 9.1 Hz), 6.69 (d, 2H, J= 9.2 Hz), 4.42-4.32 (m, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.80- 3.70 (m, 2H), 3.12 (s, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 199.0, 164.8, 155.5, 154.0, 134.6, 119.4, 117.9, 111.8, 111.7, 92.8, 70.3, 70.2, 66.9, 66.8, 63.6, 63.5, 40.3, 40.2; HRMS Izračun. za C15H18N2O4 (M+H)+ 291.1345 Pronađeno 291.1361.
 
[0089] Primer 1j. Dietil 4-bromobenzilfosfonat (16) (ne zahteva se zaštita). 1-bromo-4-(bromometil) benzen (5.0 g, 20 mmol) i trietil fosfit (51 mL, 300 mmol) su pomešani u boci sa okruglim dnom pa su refluksovani na 90° C tokom 19 časa. Višak trietil fosfita je odstranjen pod smanjenim pritiskom, a produkt je prečišćen uz pomoć fleš-hromatografije (1:1 Heksan/EtOAc) šta daje jedinjenje 16. 16: 98% prinos; bezbojna tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.30 (d, 2H, J= 7.5 Hz), 7.05 (d, 2H, J= 7.6 Hz), 3.99- 3.88 (m, 4H), 2.99 (s, 1H), 2.94 (s, 1H), 1.12 (t, 6H, J=6.9 Hz); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 131.7, 131.6, 131.5, 121.0, 62.3, 34.0, 32.0, 16.5; HRMS Izračun. za C11H16BrO3P (M+H)+ 307.0097 pronađeno 307.0093.
 
[0090] Primer 1k. (E)-4-(4-bromostiril)-N,N-dimetilanilin (17) (ne zahteva se zaštita). DMF (bezvodni) (10.5 mL) je dodan u natrijum metoksid (176 mg, 3.26 mmol) nakon čega se boja promeni u ljubičastu. Ovom rastvoru je dodan dietil 4-bromobenzilfosfonat (1.0 g, 3.26 mmol) u DMF (6.5 ml) kap po kap tokom 2 min, a nakon toga je dodan 4 (dimetilamino)benzaldehid (486 mg, 3.26 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 časa. Dodana je dejonizovana voda (17 mL). Produkt je filtriran uz pomoć vakuumske filtracije pa je rekristalizovan sa DCM/heksanom šta daje jedinjenje 17. 17: 74%. Prinos; crna čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47- 7.32 (m, 6H), 7.04 (d, 1H, J= 12.5 Hz), 6.83 (d, 1H, J= 16.3 Hz), 6.71 (d, 2H, J= 8.9 Hz), 2.99 (s, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 150.5, 137.4, 136.1, 132.1, 131.8, 129.7, 128.3, 128.2, 127.9, 127.7, 125.5, 123,2, 120.3, 112.6, 40.7; HRMS Izračun. za C16H16BrN 302.0541 pronađeno 302.0539.
 
[0091] Primer 1l. 4-(4-(dimetilamino)stiril)benzaldehid (18) (ne zahteva se zaštita). U bocu sa okruglim dnom je dodano jedinjenje 17 (300 mg, 1 mmol), a nakon toga i THF (5 mL). Heterogeni rastvor je ohlađen do -78° C pa je dodan n-BuLi (1.6 M u heksanima, 1 mmol) kap po kap tokom 5 min, a nakon toga i DMF (1.5 mL). Reakciona smeša je mešana na -78° C tokom 3 časa, tada je ugašena sa vodom (1 mL), a smeša je ekstrahovana sa etrom (2 x 25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani sa slanim rastvorom, osušeni preko MgSO4 i koncentrisani pod smanjenim pritiskom šta daje jedinjenje 18. 18: 60% prinos; žuti prah; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.96 (s, 1H), 7.83 (d, 2H, J= 8.2 Hz), 7.60 (d, 2H, J= 8.2 Hz), 7.44 (d, 2H, J= 8.8 Hz), 7.22 (d, 1H, J= 16.2 Hz), 6.94 (d, 1H, J= 16.2 Hz), 6.72 (d, 2H, J= 8.8 Hz), 3.01 (s, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 191.8, 150.8, 144.7, 134.7, 134.6, 132.7, 130.4, 128.4, 126.4, 124.9, 122.8, 112.4, 40.5; HRMS izračun. za C17H17NO 252.1384 pronađeno 252.1383.
 
[0092] Primer 1m. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil-cijano-3-(4-(4(dimetilamino)stiril)fenil)akrilat (19) (ne zahteva se zaštita). 97% prinos; crvena čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.20 (s, 1H), 7.98 (d, 2H, J= 8.4 Hz), 7.57 (d, 2H, J= 8.4 Hz), 7.45 (d, 2 H, J= 8.7 Hz), 7.20 (d, 1H, J= 16.2 Hz), 6.92 (d, 1H, J=16.2 Hz), 6.72 (d, 2H, J= 8.7 Hz), 4.47 (m, 2H), 3.84- 3.82 (m, 2H), 3.74-3.72 (m, 2H), 3.70- 3.66 (m, 4H), 3.57- 3.55 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.02 (s, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 154.9, 133.0, 132.2, 128.6, 128.5, 126.7, 122.7, 112.4, 72.2, 71.1, 70.8, 69.0, 65.8, 59.3, 40.6, 40.5, 29.9, 28.2; HRMS izračun. za C27H32N2O5 (M+Na)+ 487.2203 pronađeno 487.2201.
 
[0093] Primer 2. Sinteza Jedinjenja 27 (ne zahteva se zaštita), 28-31, 32 (ne zahteva se zaštita) i 33 (ne zahteva se zaštita). Rezultati analize jedinjenja koja su ovde opisana su obezbeđeni u Primerima 2a-2o, koji slede.
 
[0094] Opšte primedbe. Svi nabavljeni reagensi su imali najveće komercijalne standarde, a korišćeni su bez dodatnog prečišćavanja osim ako je drugačije navedeno. Tečnosti koje su osetljive na vazduh i vlagu i rastvori su dodavani uz pomoć šprica ili kanule od nerđajućeg čelika. Organski rastvori su koncentrisani uz pomoć rotacionog isparavanje na temperaturi ispod 45° C i približno 20 mmHg. Sve ne-vodene reakcije su provedene u bezvodnim uslovima. Prinosi se odnose na hromatografski i spektroskopski (1H NMR, 13C NMR) homogene materijale, osim ako je drugačije navedeno. Reakcije su praćene uz pomoć tanko-slojne hromatografije (TLC) koja je provedena na pločicama od silika-gela od 0.25 mm (Dynamic Adsorbents, Inc.; 60F-254), a vizualizirane su pod UV-svetlom i/ili su razvijene potapanjem u rastvore 10% etanolno-fosfomolibdinske kiseline (PMA) uz naknadno grejanje. Pločice od silika-gela (Dynamic Adsorbents, Inc.; 60, veličina čestica: 0.040-0.063 mm) su korišćene za fleš-hromatografiju. NMR spektari su snimljeni na aparatu Varian Mercury 400, 300 i/ili Unity 500 MHz, a za kalibraciju je korišćen rezidualni ne-deuterisani rastvarač koji je služio kao interna referenca. Sledeće skraćenice su korišćene sa ciljem da se objasne multipliciteti: s = singlet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet, b = široko. Masena spektroskopija visoke rezolucije (HRMS) je provedena na aparatu VG 7070 HS uz jonizaciju sa elektronskim sprejom (ESI) ili u uslovima elektronskog impakta (EI).
 
[0095] Opšta strategija za sintezu jedinjenja, koja su ovde opisana, uključujući jedinjenja 27-33, je prikazana u šemi 5. Komercijalno dostupni metil 6-bromo naftalen-2-karboksilat (20) je konvertovan u odgovarajući naftaldehid 21 u dva koraka: a) redukcija estera u primarni alkohol uz pomoć DIBALH i b) oksidacija alkohola u aldehid nakon tretmana sa PCC. Granzhan, A.; Teulade-Fichou, M.-P., Tetrahedron 2009, 65, (7), 1349-1360. Transformacija bromida u odgovarajući amin je zahtevala upotrebu novog hemijskog pristupa sa ciljem da se poboljša prinos i da se pomenuti postupak primeni na većoj skali. Tretman bromida 21 u prisutnosti paladijuma uz korišćenje uslova po Buchwald-u & Hartwig-u rezultuje u pojavu aldehida 22-25 sa dobrim prinosom u većini slučajeva. Guram, A. S.; Rennels, R. A.; Buchwald, S. L., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1995, 34, (12), 1348-1350; Wolfe, J. P.; Buchwald, S. L., J. Org. Chem. 2000, 65, (4), 1144-1157; Hartwig, J. F., Accounts Chem. Res. 2008,41, (11), 1534-1544. Kondenzacija aldehida 22-25 po Knövenagel-u i odgovarajući cijanoester 26 su završili sintezu finalnih proba 27-32. Sutharsan, J.; Lichlyter, D.; Wright, N. E.; Dakanali, M.; Haidekker, M. A.; Theodorakis, E. A., Tetrahedron 2010, 66, (14), 2582-2588. Otklanjanje zaštite sa acetala u probi 32 uz pomoć kiselog ostataka je dala finalnu boju 33. Tabela 3 prikazuje R, X kombinacije finalnih produkata i prinos kondenzacije.
 
 
Tabela 3. Strukture i prinosi za Aβ vezne probe
Jedinjenje
X
R
Prinos
27 (ne zahteva se zaštita)
 
 
 
 
90%
28
 
 
 
 
85%
29
 
 
 
 
83%
30
 
 
 
 
87%
31
 
 
 
 
89%
32 (ne zahteva se zaštita)
 
 
 
 
83%
33 (ne zahteva se zaštita)
 
 
 
 
84%
 
[0096] Primer 2a. 6-bromo-2-naftaldehid (21) (ne zahteva sed zaštita). U rastvor DIBAL-H (1.0 M u heptanu, 34 mL, 34 mmol) na 0° C pod argonom je dodan rastvor 20 (3.0 gr, 11 mmol) u bezvodnom THF kap po kap. Reakciona smeša je ostavljena da se ugreje do sobne temperature pa je mešana preko noći. Nakon kompletovanja reakcije je dodan MeOH, a nakon toga i zasićeni rastvor natrijum kalijum tartrata i etilacetata. Nakon odvajanja obeju faza, organska faza je isprana sa zasićenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom, osušena preko MgSO4 i koncentrisana pod smanjenim pritiskom šta daje 6-bromo-2-(hidroksimetil)naftalen. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.99 (bs, 1H), 7.77 (bs, 1H), 7.74 (d, 1H, J= 8.5 Hz), 7.69 (d, 1H, J= 8.7 Hz), 7.55 (dd, 1H, J= 1.7 Hz, J= 8.7 Hz), 7.49 (dd, 1H, J= 1.7 Hz, J= 8.5 Hz), 4.84 (bs, 2H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 138.8, 133.9, 131.7, 129.7, 129.5, 129.5, 127.4, 126.1, 125.2, 119.8, 65.2.
 
[0097] U suspenziju piridinijum hlorohromata (2.4 gr, 11 mmol) u bezvodnom CH2Cl2 (60 mL) je dodan rastvor malopre pomenutog alkohola u bezv. CH2Cl2, a reakciona smeša je grejana pod refluksom tokom 5 časa. Nakon kompletovanja reakcije, sve je ohlađeno do sobne temperature i izliveno u dietil etru. Rastvor je tada filtriran kroz pločicu od silike pa je koncentrisan pod smanjenim pritiskom šta daje 21 (2.4 g, 95%). 20: bela čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.15 (s, 1H), 8.31 (bs, 1H), 8.08 (bs, 1H), 7.98 (dd, 1H, J= 1.5 Hz, J= 8.5 Hz), 7.86 (m, 2H), 7.67 (dd, 1H, J= 1.5 Hz, J= 8.5 Hz); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 191.8, 137.3, 134.3, 134.1, 131.0, 131.0, 130.6, 130.2, 128.2, 124.0, 123.
 
[0098] Opšta procedura za sintezu 6-amino-supstituisanih naftaldehida (Jedinjenja 22-25) (ne zahteva se zaštita). U suvom i degaziranom toluenu (0.8 mL) su dodani Pd(OAc)2 (0.022 mmol) i P(tBu)3 (0.078 mmol). Nakon mešanja tokom 20 min su dodani 8 (0.207 mmol), odgovarajući amin (0.249 mmol) i Cs2CO3 (0.280 mmol), a reakciona smeša je ostavljena da se meša tokom tri dana pod refluksom. Nakon tri dana, reakciona smeša je ohlađen do sobne temperature, razređena sa CH2Cl2, filtrirana, koncentrisana pod smanjenim pritiskom i prečišćena uz pomoć fleš-hromatografije na silika-gelu (heksani/EtOAc 0-10%).
 
[0099] Primer 2b. 6-(piperidin-1-il)naftalen-2-karbaldehid (22) (ne zahteva se zaštita). 70% prinos, žuta čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.03 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.83 (m, 2H), 7.68 (d, 1H, J= 8.6 Hz) 7.32 (dd, 1H, J= 2.4 Hz, J= 9.1 Hz), 7.08 (d, 1H, J= 2.4 Hz), 3.38 (m, 4H), 1.78-1.63 (m, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 191.9, 151.9, 138.5, 134.4, 131.3, 130.4, 127.2, 126.3, 123.4, 119.5, 108.8, 49.6, 25.5, 24.3; HRMS Izračun. za C16H18NO (M+H)+ 240.1383 pronađeno 240.1381.
 
[0100] Primer 2c. 6-morfolinonaftalen-2-karbaldehid (23) (ne zahteva se zaštita). 79% prinos, žuta čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.06 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.88 (m, 2H), 7.73 (d, 1H, J= 8.4 Hz), 7.32 (m, 1H), 7.11 (d, 1H, J= 1.2 Hz), 3.92 (m, 4H), 3.36 (m, 4H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 191.9, 151.3, 138.1, 134.2, 131.8, 130.6, 127.5, 127.0, 123.6, 118.7, 109.0, 66.7,48.5; HRMS Izračun. za C15H15NO2Na (M+Na)+ 264.0995 pronađeno 264.0996.
 
[0101] Primer 2d. 6-(4-metilpiperazin-1-il)naftalen-2-karbaldehid (24) (ne zahteva se zaštita). 77% prinos, žuta čvrsta materija; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.00 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.80 (m, 2H), 7.66 (d, 1H, J= 8.6 Hz), 7.28 (dd, 1H, J= 2.1 Hz, J= 9.2 Hz), 7.06 (d, 1H, J= 2.1 Hz), 3.36 (m, 4H), 2.57 (m, 4H), 2.33 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 191.5, 151.0, 138.0, 134.0, 131.3, 130.2, 127.1, 126.4, 123.1, 118.7, 108.7, 54.5, 47.8, 45.7; HRMS Izračun. za C16H19N2O (M+H)+ 255.1492 pronađeno 255.1491.
 
[0102] Primer 2e. 6-(2-morfolinoetilamino)naftalen-2-karbaldehid (25) (ne zahteva se zaštita). 33% prinos, žuta čvrsta materija; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.01 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.83 (dd, 1H, J= 1.6 Hz, J= 8.6 Hz), 7.76 (d, 1H, J= 8.9 Hz), 7.64 (d, 1H, J= 8.6 Hz), 6.98 (dd, 1H, J= 2.3 Hz, J= 8.9 Hz), 6.79 (d, 1H, J= 2.3 Hz), 4.88 (bs, 1H), 3.75 (m, 4H), 3.31 (dd, 2H, J= 5.1 Hz, J= 11.1 Hz), 2.72 (m, 2H), 2.51 (bs, 4H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 191.9, 148.8, 139.1, 134.6, 130.8, 130.7, 126.6, 126.0, 123.8, 118.7, 103.8, 66.9, 56.7, 53.3, 39.3; HRMS Izračun. za C17H21N2O2 (M+H)+ 285.1598 pronađeno 285.1600.
 
[0103] Opšta procedura za sintezu 2-cijanoacetata (26) (ne zahteva se zaštita). U rastvor 2-cijanosirćetne kiseline (2.72 mmol) kap po kap je dodan odgovarajući alkohol (2.27 mmol) u CH2Cl2 (2.5 mL) i DMAP (0.013 mmol) na 0° C. Konačno, dodan je DCC (2.72 mmol), a reakciona smeša je mešana na 0° C tokom 6 časova. Reakciona smeša je razređena sa CH2Cl2, a nastao DCU je filtriran. Filtrat je osušen preko MgSO4 i koncentrisan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen uz pomoć fleš-hromatografije na silika-gelu šta daje 2-cijanoacetat 7.
 
[0104] Primer 2f. 2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil-2-cijanoacetat (26a) (ne zahteva se zaštita). 86% prinos; bezbojna tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.29 (m, 2H), 3.67, (m, 2H), 3.59 (m, 6H), 3.50 (m, 2H), 3.49 (s, 2H), 3.32 (s, 3H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ 163.0, 113.0, 71.7, 70.4, 70.3, 68.3, 65.5, 58.8, 24.5; HRMS: izračun. za C10H17NO5: (M+H+) 232.1185, pronađeno 232.1199.
 
[0105] Primer 2g. 2-(2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etoksi)etil-2-cijanoacetat (26b) (ne zahteva se zaštita). 68% prinos; bezbojna tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.21 (bs, 2H), 3.61 (bs, 2H), 3.51 (m, 12H), 3.43 (m, 2H), 3.24 (bs, 3H) 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 163.0, 113.0, 71.4, 70.2, 70.1, 70.1, 70.0, 68.1, 65.3, 58.5, 24.2;
 
[0106] Primer 2h. (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 2-cijanoacetat (26c) (ne zahteva se zaštita). 71% prinos; bezbojna tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.35 (m, 1H), 4.29-4.19 (m, 2H), 4.09 (m, 1H), 3.76 (dd, 1H, J= 5.8 Hz, J= 8.6 Hz), 3.52 (s, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.36 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162.8, 112.7, 110.1, 73.0, 66.8, 65.9, 26.6, 25.2, 24.6; HRMS Izračun. za C9H13NO4 (M+H)+ 200.0923 pronađeno 200.0931.
 
[0107] Opšta procedura za sintezu fluorescentnih proba 27 (ne zahteva se zaštita), 28-31, 32 (ne zahteva se zaštita) i 33 (ne zahteva se zaštita). U bocu sa okruglim dnom koja je sadržavala rastvor aldehida (0.21 mmol) i odgovarajućeg 2-cijanoacetata (0.23 mmol) u THF (0.8 mL) je dodan piperidin (0.02 mmol), a smeša je ostavljena da se meša na 50° C. Reakcija je praćena uz pomoć TLC, a trajala je 21 čas. Gruba smeša je koncentrisana pod smanjenim pritiskom, a produkt je prečišćen uz pomoć kolonske fleš-hromatografije (10-30% EtOAc u heksanima).
 
[0108] Primer 2i. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil 2-cijano-3-(2-(piperidin-1-il)naftalen-6-il)akrilat (27) (ne zahteva se zaštita). 90% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.31 (s, 1H), 8.22 (bs, 1H), 8.10 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 7.76 (d, 1H, J= 9.2 Hz), 7.65 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 7.30 (dd, 1H, J= 2.1 Hz, J= 9.2 Hz), 7.05 (d, 1H, J= 2.1 Hz), 4.47 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.74-3.66 (m, 6H), 3.56 (m, 2H), 3.42-3.38 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 1.74 (m, 6H); 13C NMR (100, MHz, CDCl3) δ 163.3, 155.4, 151.9, 137.7, 134.7, 130.6, 127.2, 126.4, 125.9, 125.6, 119.2, 116.4, 108.3, 71.8, 70.7, 70.5, 70.5, 68.7, 65.3, 58.9, 49.3, 25.4, 24.3; HRMS Izračun. za C26H32N2O5Na (M+Na)+ 475.2203 pronađeno 475.2197.
 
[0109] Primer 2j. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil 2-cijano-3-(2-(4-metilpiperazin-1-il)naftalen-6-il) akrilat (28). 85% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.31 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.10 (d, 1H, J= 8.6 Hz), 7.78 (d, 1H, J= 9.1 Hz), 7.67 (d, 1H, J= 8.6 Hz), 7.29 (d, 1H, J= 9.1 Hz), 7.06 (s, 1H), 4.46 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.73 (m, 2H), 3.67 (m, 4H), 3.55 (m, 2H) 3.42 (bs, 4H),3.36 (s, 3H), 2.61 (bs, 4H), 2.37 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 163.2, 155.4, 151.4, 137.5, 134.5, 130.6, 127.4, 126.9, 126.1, 126.1, 119.0, 116.2, 108.7, 99.3, 71.9, 70.8, 70.6, 70.5, 68.8, 65.4, 59.0, 54.8, 48.0, 46.1; HRMS Izračun. za C26H34N3O5 (M+H)+ 468.2493 pronađeno 468.2494.
 
[0110] Primer 2k. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil 2-cijano-3-(2-morfolinonaftalen-6-il)akrilat (29). 83% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.31 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.11 (dd, 1H, J= 1.9 Hz, J= 8.8 Hz), 7.80 (d, 1H, J= 9.1 Hz), 7.69 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 7.28 (m, 1H), 7.06 (d, 1H, J= 1.9 Hz), 4.47 (m, 2H), 3.90 (m, 4H), 3.83 (m, 2H), 3.70 (m, 6H), 3.55 (m, 2H), 3.35 (m, 7H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 163.0, 155.2, 151.3, 137.2, 134.4, 130.6, 127.4, 127.0, 126.1, 126.0, 118.5, 116.1, 108.5, 99.4, 71.8, 70.7, 70.5, 70.4, 68.6, 66.5, 65.3, 58.9, 48.2; HRMS Izračun. za C25H30N2O6Na (M+Na)+ 477.1996 pronađeno 477.1995.
 
[0111] Primer 21. (E)-2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etil 3-(2-(2-morfolinoetilamino) naftalen-6-il)-2-cijano akrilat (30). 87% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.28 (s, 1H), 8.19 (d, 1H, J= 1.6 Hz), 8.08 (dd, 1H, J= 1.9 Hz, J= 8.8 Hz), 7.69 (d, 1H, J= 8.9 Hz), 7.60 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 6.95 (dd, 1H, J= 2.3 Hz, J= 8.8 Hz), 6.74 (d, 1H, J= 2.2 Hz), 4.96 (bs, 1H), 4.46 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.76-3.72 (m, 6H), 3.69-3.65 (m, 4H), 3.57-3.54 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.31 (s, 2H), 2.70 (m, 2H), 2.51 (s, 4H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 163.4, 155.5, 149.0, 138.3, 135.0, 130.9, 126.6, 126.3, 126.2, 124.9, 118.9, 116.5, 103.6, 98.2, 71.9, 70.8, 70.6, 70.5, 68.8, 66.9, 65.3, 59.0, 56.6, 53.2, 39.2; HRMS Izračun. za C27H36N306 (M+H)+ 498.2599 pronađeno 498.2596.
 
[0112] Primer 21m. (E)-2-(2-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)etoksi)etil 2-cijano-3-(2-(piperidin-1-il)naftalen-6-il) akrilat (31). 89% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.20 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.01 (d, 1H, J= 8.5 Hz), 7.66 (d, 1H, J= 9.0 Hz), 7.55 (d, 1H, J= 9.0 Hz), 7.20 (d, 1H, J= 8.5 Hz), 6.95 (s, 1H), 4.39 (bs, 2H), 3.75 (bs, 2H), 3.65-3.54 (m, 10H), 3.45 (m, 2H), 3.31 (bs, 4H), 3.28 (s, 3H), 1.65-1.54 (m, 6H);. 13C NNM (100 MHz, CDCl3) δ 163.2, 155.3, 151.8, 137.6, 134.6, 130.5, 127.1, 126.3, 125.8, 125.5, 119.1, 116.3, 108.2, 98.4, 71.7, 70.6, 70.4, 70.3, 68.6, 65.3, 58.8, 49.2, 25.3, 24.2; HRMS Izračun. za C28H36N2O6Na (M+Na)+ 519.2466 pronađeno 519.2468.
 
[0113] Primer 2n. (E)-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 2-cijano-3-(2-(piperidin-1-il)naftalen-6-il) akrilat (32) (ne zahteva se zaštita). 83% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.29 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.09 (dd, 1H, J= 1.9 Hz, J= 8.8 Hz), 7.74 (d, 1H, J= 9.3 Hz), 7.63 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 7.28 (dd, 1H, J= 2.8 Hz, J= 9.3 Hz), 7.03 (d, 1H, J= 1.9 Hz), 4.43 (m, 1H), 4.36 (m, 2H), 4.14 (dd, 1H, J= 6.0 Hz, J= 8.5 Hz), 3.90 (dd, 1H, J= 6.0 Hz, J= 8.5 Hz), 3.40 (m, 4H), 1.73-1.66 (m, 6H), 1.48 (s, 3H), 1.39 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162.9, 155.4, 151.5, 137.6, 134.6, 130.5, 127.0, 126.2, 125.6, 125.3, 119.0, 116.1, 109.6, 108.2, 98.0, 73.1, 65.9, 65.6, 57.1, 49.1, 45.5, 29.4, 26.4, 25.2, 24.0; MS (M+H)+ 421.24.
 
[0114] Primer 2o. (E)-2,3-dihidroksipropil 2-cijano-3-(2-(piperidin-1-il)naftalen-6-il)akrilat (33) (ne zahteva se zaštita). Jedinjenje 31 (50 mg, 0.12 mmol) je rastvoreno u smeši THF/MeOH (1:1) pa je dodana smola DOWEX-H+ (15 mg), a heterogena smeša je mešana tokom 20 časa. Smola je odstranjena uz pomoć filtracije pa je dodan trietilamin, a rastvarač je odstranjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen uz pomoć fleš-hromatografije šta daje jedinjenje 32. 32: 38 mg, 84% prinos; crvena tečnost; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.30 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.08 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 7.74 (d, 1H, J= 9.1 Hz), 7.63 (d, 1H, J= 9.1 Hz), 7.29 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.46-4.36 (m, 2H), 4.09 (m, 1H), 3.81 (dd, 1H, J= 5.5 Hz, J= 11.3 MHz), 3.73 (dd, 1H, J= 5.5 Hz, J= 11.3 Hz), 3.41 (m, 4H), 1.74-1.67 (m, 6H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 163.6, 156.0, 152.0, 137.9, 135.0, 130.7, 127.3, 126.3, 125.9, 125.5, 119.2, 116.6, 108.3, 97.8, 69.9, 67.0, 63.2, 49.3, 25.5, 24.3; HRMS Izračun. za C22H25N2O4 (M+H)+ 381.1809 pronađeno 381.1802.
 
Primer 3. Studije detekcije i vezanja.
[0115] Studije za Jedinjenja 8a-8d (ne zahteva se zaštita), 11, 14 (ne zahteva se zaštita) i 18 (ne zahteva se zaštita). Inicijalna studija koja određuje da li neko jedinjenje može da veže agregirani Aβ se koristi za uporedbu njegovih fluorescencijskih spektara pre i nakon mešanja sa Aβ agregatima. Vidi E. E. Nesterov, J. Skoch, B. T. Hyman, W. E. Klunk, B. J. Bacskai, T. M. Swager, Angew. Chem. Int. Edit. 2005, 44:5452-5456; Z. P. Zhuang, M. P. Kung, H. F. Kung, J. Med. Chem. 2006, 49:2841-2844; Q. A. Li, J. S. Lee, C. Ha, C. B. Park, G. Yang, W. B. Gan, Y. T. Chang, Angew. Chem. Int. Edit. 2004, 43:6331-6335; H. F. Kung, C. W. Lee, Z. P. Zhuang, M. P. Kung, C. Hou, K. Plossl, J. Am. Chem. Soc. 2001, 123:12740-12741. Tipično, fluorescentni agens koji veže amiloid pokazuje značajni porast fluorescencijskog intenziteta nakon vezanja na Aβ agregate ako se uporedi sa njegovim nativnim fluorescencijskim intenzitetom u rastvoru. Vidi H. LeVine III, Protein Sci. 1993, 2:404-410. Osim pomenutih linija mi smo izmerili i fluorescentne karakteristike svakog jedinjenja u koncentraciji od 4 µM pre i nakon mešanja sa pre-agregiranim Aβ(1-42) peptidima (5 µM, agregirani u PBS puferu tokom 3 dana na 25° C).
 
[0116] U svim slučajevima, porast fluorescencijskog intenziteta za 1.3-9.4 puta je bio primećen u prisutnosti agregiranog Aβ, šta govori da pomenuta jedinjenja vežu peptid (Tabela 2). U najvećem broju slučajeva je primećen blagi plavi-pomak (6-20 nm) nakon vezanja. Samo u slučajevu kada je korišćeno Jedinjenje 11 na bazi naftalena je primećen značajan crveni pomak od 76 nm nakon vezanja na pre-agregirani Aβ (Slike. 1c, 1d). Interesantno, ovo vezanje je praćeno sa porastom intenziteta za 9.3 puta. Sličan porast intenziteta je primećen sa FDDNP i može da se objasni sa sposobnosti naftalenskog motiva da stvori ekscimere nakon vezanja na svoju metu. Vidi E. D. Agdeppa, V. Kepe, J. Liu, S. Flores-Torres, N. Satyamurthy, A. Petric, G. M. Cole, G. W. Small, S. C. Huang, J. R. Barrio, J. Neurosci. 2001, 21:1-5; S. Abad, I. Vaya, M. C. Jimenez, U. Pischel, M. A. Miranda, ChemPhysChem 2006, 7:2175-2183; C. Spies, R. Gehrke J. Phys. Chem. A 2002, 106:5348-5352.
 
[0117] Jedinjenja 8a i 8b pokazuju slične fluorescencijske karakteristike šta sugeriše da dodavanje metoksi grupe na fenilnu grupu ne menja vezne karakteristike jedinjenja koja se koriste kao probe. Sa druge strane, važno je da se primeti da povećanje veličine alkilnih grupa azota dovodi do značajnog porasta fluorescencijskog intenziteta nakon vezanja (Tabela 4, 8a, 8c, 8d). Verovatno je da je fenomen rezultat smanjene slobode rotiranja molekula nakon vezanja na agregirane forme Aβ peptida. Vidi W W. Schuddeboom, S. A. Jonker, J. M. Warman, U. Leinhos, W. Kuehnle, K. A. Zachariasse, J. Phys. Chem. 1992, 96 :10809-10819; Y. V. Il'chev, W. Kuehnle, K. A. Zachariasse, J. Phys. Chem. 1998, 102 :5670-5680. Interesantno, porast fluorescencijskog intenziteta nije primećen nakon mešanja pomenutih jedinjenja sa monomernim Aβ peptidom. Ovo podržava pretpostavku da se pomenuta jedinjenja selektivno vežu na agregirane forme Aβ. Fluorescencijski profil 8d (ekscitacija i emisija) je prikazan na Sl. 1A i Sl. 1B.
 
Tabela 4. Fluorescencijski profil, Kd, IC50 i slične vrednosti za interakciju sintetizovanih jedinjenja sa agregiranim Aβ(1-42) peptidima
Jedinj. Br
Maks. ekscitacija pre vezanja (nm)
Maks. ekscitacija nakon vezanja (nm)
Maks. emisija pre vezanja (nm)
Maks. emisija nakon vezanja (nm)
Porast (puta)
Kd (µM)
R2
Maks. % inhibicije (ELISA)
IC50 (µM) (ELISA)
LogP
8a
439
435
476
470
1.8
2.6
0.93
81
129.0
1.74
8b
442
444
478
469
1.3
5.3
0.99
92
1.2
1.54
8c
445
442
478
470
4.2
4.8
0.96
98
11.4
2.49
8d
432
440
466
468
9.4
4.4
0.95
91
90.6
4.62
11
445
440
462
538
9.3
2.5
0.98
58
74.3
3.81
14
437
434
476
467
2.2
3.3
0.99
79
82.1
1.07
19
312
319
658
638
2.3
1.4
0.98
40
33.6
4.30
 
[0118] Agregirani Aβ peptid je pripremljen uz pomoć rastvaranja Aβ(1-42) u PBS (pH 7.4) do finalne koncentracije od 100 µM. Ovaj rastvor je magnetski mešan na 1200 rpm tokom 3 dana na sobnoj temperaturi. Po 100 µM Aβ(1-42) stok-rastvora u PBS je podeljen u alikvote i smrznut na -80° C tokom 4 sedmica bez vidljive promene karakteristika. 150 µL pre-agregiranog Aβ(1-42) je dodano u 2.85 mL jedinjenja sa ciljem da se dobije finalna koncentracija od 5 µM Aβ(1-42) i 4 µM jedinjenja. Rastvor je prenesen u kivetu od 3 mL, a tada je izmerena fluorescencija na 25° C. Kao šta je prikazano na Sl. 4, asocijacija ovde opisanih jedinjenja sa agregiranim Aβ dovodi do promena u spektarima ekscitacije i emisije. Spektari fluorescencijske ekscitacije za Jedinjenja 8a, 8b, 8c, 14 i 19 su prikazani na Sl. 4.
 
[0119] Mi smo takođe izmerili i vidljive vezne konstante (Kd) jedinjenja (u koncentracijama od 10, 5, 2.5 i 1.25 µM) za 5.0 µM pre-agregirani Aβ(1-42) peptid. Kd može da se izmeri iz dvostrukog recipročnog fluorescentnog maksimuma i koncentracije pomenutog jedinjenja. Vidi H. LeVine III, Protein Sci. 1993, 2:404-410. Sve Kd vrednosti su izmerene i pokazuju vrednosti između 1.4 i 5.3 µM (Tabela 4). Značajno je to da, osim strukturnih razlika, pomenuta jedinjenja pokazuju slične Kd vrednosti šta sugeriše da agregirani Aβ vežu na sličan način. Štaviše, ove vrednosti su slične objavljenim Kd vrednostima za ThT (2 µM). [22] Vidi LeVine, Id.; Lockhart, L. Ye, D. B. Judd, A. T. Merritt, P. N. Lowe, J. L. Morgenstern, G. Z. Hong, A. D. Gee, J. Brown, J. Biol. Chem. 2005, 280:7677-7684; M. Biancalana, K. Makabe, A. Koide, S. Koide, J. Mol. Biol. 2008, 383:205-213; M. Biancalana, K. Makabe, A. Koide, S. Koide, J. Mol. Biol. 2009, 385:1452-1063. Dvostruko recipročni prikazi fluorescencijskih intenziteta u odnosu na koncentraciju Jedinjenja 8d i 11 su prikazani na Sl. 2. Kd odgovara -1/(x-sjecištu) linearne regresije.
 
[0120] Asocijacija sintetizovanih jedinjenja sa agregiranim Aβ peptidima je testirana uz pomoć polu-kvantitativne ELISA na bazi testa koji je razvijen od autora Yang i njegovih saradnika. Vidi P. Inbar, J. Yang, Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 16:1076-1079; P. Inbar, C. Q. Li, S. A. Takayama, M. R. Bautista, J. Yang, ChemBioChem 2006, 7:1563-1566; P. Inbar, M. R. Bautista, S. A. Takayama, J. Yang, Anal. Chem. 2008, 80:3502-3506. Test se bazira na pretraživanju molekula koji inhibiraju interakciju agregiranog Aβ peptida sa monoklonskim anti-Aβ IgG antitelom koje je podignuto protiv ostataka 1-17 iz Aβ. Tabela 4 pokazuje koncentracije jedinjenja koje odgovaraju 50% inhibiciji (IC50) IgG-Aβ interakcija kao i maksimalni procenat IgG koji su inhibirani zbog vezanja na fibrile. Sva jedinjenja pokazuju IC50 vrednosti u nivou µM, a najniža vrednost je izmerena za 8b (IC50 = 1.17 µM). Maksimalna inhibicija, mera količine površinskog prekrivanja agregiranog peptida sa pomenutim jedinjenjima, je određena na vrednosti od između 40-98% (Tabela 4). Vidi P. Inbar, J. Yang, Bioorg. Med Chem. Lett. 2006, 16:1076-1079; P. Inbar, C. Q. Li, S. A. Takayama, M. R. Bautista, J. Yang, ChemBioChem 2006, 7:1563-1566; P. Inbar, M. R. Bautista, S. A. Takayama, J. Yang, Anal. Chem. 2008, 80:3502-3506. Uporedba pomenutih podataka pokazuje da se površinsko prekrivanje povećava sa smanjivanjem veličine jedinjenja ili prisutnošću π-sistema. Specifično, dok se maksimalna inhibicija kreće između 81-98% za fenilna jedinjenja, pomenuta opada na 58% za duže naftalensko jedinjenje 11 i na 40% za konjugirani stilben 19. Reprezentativni grafikoni za Jedinjenja 8d i 11 su prikazani na Sl. 3. Reprezentativni grafikoni za Jedinjenja 8a, 8b, 8c i 14 su prikazani na Slikama 7A-D.
 
[0121] LogP vrednosti za sva jedinjenja su izračunata i iznose između 1.07 i 4.62 (Tabela 2) šta pokazuje da većina od pomenutih jedinjenja zadovoljava kriterijume rastvorljivosti i verovatno mogu da prođu krvno-moždanu barijeru. Vidi P. Inbar, J. Yang, Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 16:1076-1079; P. Inbar, C. Q. Li, S. A. Takayama, M. R. Bautista, J. Yang, ChemBioChem 2006, 7:1563-1566; P. Inbar, M. R. Bautista, S. A. Takayama, J. Yang, Anal. Chem. 2008, 80:3502-3506; C. A. Lipinski, F. Lombardo, B. W. Dominy, P. J. Feeney, Adv. Drug Deliver. Rev. 1997, 23:3-25. LogP vrednosti su izračunate uz pomoć programa Molinspiration Cheminformatics.
 
[0122] Studije za Jedinjenja 27 (ne zahteva se zaštita), 28-31 i 33 (ne zahteva se zaštita). Agregirani Aβ peptid je pripremljen uz pomoć rastvaranja Aβ(1-42) u PBS, pH 7.4 do konačne koncentracije od 100 µM. Ovaj rastvor je magnetski mešan na 1200 rpm tokom 3 dana na sobnoj temperaturi. Po 100 µM Aβ(1-42) stok-rastvora u PBS je podeljeno u alikvote i smrznuto na -10° C tokom najviše 4 sedmica bez vidljive promene karakteristika. 15 µL pre-agregiranog Aβ(1-42) je dodano u 285 µL probe (5% DMSO u nano-čistoj vodi) sa ciljem da se postigne finalna koncentracija od 5 µM Aβ(1-42) i 4 µM za probu. Rastvor je prenesen u kivetu od 300 mL pa je izmerena fluorescencija. Slike. 9A-F pokazuju spektare fluorescencijske ekscitacije za Jedinjenja 27-31 i 33.
 
Tabela 5. Fluorescencijski profil, Kd i logP vrednosti sintetizovanih proba sa agregiranim Aβ(1-42) peptidima
Jed. #
Maks. eks. (nm)
pre nakon
Maks. emis. (nm)
pre nakon
Porast
(puta)
Kd
SD
R2
logP
27
415
410
590
545
7.7
1.4
0.2
0.99
3.81
28
400
385
580
530
4.9
4.6
1.3
0.98
2.79
29
400
380
530
525
5.1
13.8
2.9
0.99
2.74
30
430
430
570
540
2.9
6.7
2.1
0.98
2.53
31
420
410
590
546
8.3
1.6
0.3
0.93
3.60
33
410
410
540
535
7.2
1.6
0.9
0.93
3.14
 
[0123] U principu, proba koja veže amiloid pokazuje značajan porast fluorescentne emisije nakon vezanja agregata upoređeno sa onom u rastvoru. LeVine III, H., Protein Sci. 1993, 2, (3), 404-410. Osim ovih linija, mi smo uporedili i fluorescentne karakteristike 27-31 ili 33 u vodenom rastvoru sa ili bez prisutnosti agregiranih Aβ42 peptida. Specifično, mi smo izmerili fluorescentne karakteristike svake boje u koncentraciji od 4 µM u nano-čistoj vodi, pre i nakon mešanja sa agregiranim Aβ42 peptidom (konačna koncentracija peptida = 5 µM). Kao šta je prikazano u Tabeli 5, u svim slučajevima je primećen značajan porast (3 do 9-puta) intenziteta emisionog spektra proba nakon asocijacije sa agregiranim amiloidnim peptidima. Ovaj porast intenziteta je takođe praćen sa plavim pomakom emisionih spektara od oko 5-50 nm. Nakon vezanja, sva jedinjenja pokazuju ekscitacijski maksimu između 380-430 nm, a njihovi emisioni maksimumi su između 525-545 nm, šta sugeriše da male promene u donorskom ili akceptorskom delu molekula ne menjaju značajno njihov fluorescentni maksimum. Međutim, jedinjenja 27, 31 i 33, koja poseduju piperidin koji služi kao donor elektrona, pokazuju veći porast fluorescencijskog intenziteta nakon vezanja (7.7-, 8.3- i 7.2-puta) u odnosu na probe koje sadrže piperazin, morfolin, ili morfolino-etanamin kao elektronske donore. Slika 9C pokazuje jedan reprezentativni primer fluorescentnih karakteristika jedinjenja 29. Pomenuta slika pokazuje fluorescentne emisione spektare za jedinjenje 29 pre (puna linja) i nakon (isprekidana linija) mešanja sa Aβ agregatima.
 
[0124] MI smo takođe izmerili i očite vezne konstante (Kd) proba za agregirane Aβ42 peptide. Fluorescentni intenzitet svake probe je izmeren kod koncentracija od 1.25, 2.5, 5.0 i 10 µM u nano-čistoj vodi, pri mešanju sa 5 µM pre-agregiranih Aβ42 peptida. Zhao, X.; Yang, J., ACS Chem. Neurosc. 1, (10), 655-660. U svim slučajevima Kd vrednosti su na nivou µM pri čemu jedinjenja 27, 31 i 33 pokazuju najveće afinitete za vezanje agregiranih Aβ peptida. Podaci iz ovih studija vezanja sugerišu da male hemijske modifikacije u regionu iz ANCA motiva, koji je rastvorljiv u vodi, ne deluju značajno na vezanje proba na Aβ agregate (jedinjenja 27, 31 i 33). Sa druge strane, opadanje Kd vrednosti je primećeno nakon hemijskog menjanja elektronskog donora iz ANCA okvira. Kao šta je prikazano u Tabeli 5, jedinjenja koja imaju piperidin koji sliži kao elektronski donor pokazuju niže Kd vrednosti (1.4-1.6 µM) u uporedbi sa onima koji poseduju piperazin, morfolin, ili morfolino-etanamin kao elektron donor (jedinjenja 28, 29 i 30). Slike. 10A-F pokazuju grafikone fluorescencijskih intenziteta (at λ=525 nm) jedinjenja 27-31 i 32 kao funkciju koncentracije u prisutnosti agregiranih Aβ42 peptida (5 µM) u rastvoru. Na primer, podešavanje podataka za jedinjenje 29 je otkrilo Kd od 13.8 µM za asocijaciju pomenutog jedinjenja 29 sa agregiranim Aβ42 peptidom.
 
[0125] Konačno, izračunata je lipofilnost (logP) sintetizovanih proba. Sva jedinjenja su pokazivala logP vrednosti od između 2.53 i 3.81, šta sugeriše da najveći deo njih zadovoljava kriterijum rastvorljivosti i može potencijalno da prođe kroz krvno-moždanu barijeru. Lipinski, C. A.; Lombardo, F.; Dominy, B. W.; Feeney, P. J., Adv. Drug Delivery Rev. 1997, 23, (1-3), 3-25.
 
[0126] Primer 6. Određivanje veznih konstanti za jedinjenja koja su ovde opisana: Pre-agregirani Aβ(1-42) (5 µM finalna koncentracija) je pomešan sa ovde opisnim jedinjenjima u različitim koncentracijama (10, 5, 2.5, 1.25 µM) u PBS puferu (pH 7.4), a njihova fluorescencija je izmerena. Negativna inverzija x-sjecišta linearne regresije, koja je prikazana kao funkcija između dvostrukog recipročnog maksimalnog fluorescencijskog intenziteta i koncentracije pomenutih jedinjenja, predstavlja veznu konstantu jedinjenja (Kd) za Aβ(1-42).
 
[0127] Primer 7. Određivanje Kd iz fluorescencijskog postupka. Sa ciljem da se odrede disocijacijske konstante (Kd's) za vezanje fluorescentnih jedinjenja na agregirane β-amiloidne peptide, mi smo koristili postupak koji je opisan od autora LeVine (vidi H. LeVine III, Protein Sci. 1993, 2, 404-410). Ovaj postupak je sličan sa postupkom koji je opisan od autora Benesi-Hildebran (vidi C. Yang, L. Liu, T. W. Mu, Q. X. Guo, Anal. Sci. 2000, 16, 537-539). Ovde, fluorescencija jedinjenja je izmerena sa i bez dodavanja agregiranih peptida u rastvor. Relativno pojačavanje fluorescencije jedinjenja nakon vezanja na agregirane β-amiloidne peptide je određeno uz pomoć određivanja razlike između F (fluorescencija nakon dodavanja agregiranih peptida) i Fo (fluorescencija pre dodavanja agregiranih peptida).
 
[0128] Sa ciljem da se utvrdi vezna konstanta (Kd) za komplekse jedinjenje-Aβ iz fluorescencijskih studija, mi smo uzeli u obzir sledeće pretpostavke:
1.       Sva jedinjenja su potpuno rastvorena i ne podležu bilo kakvom značajnom kompetetivnom veznom procesu poput sam-agregiranja.
2.       Koncentracija nevezanih jedinjenja može da se apstrahuje na vrednost koja je bliska ukupnoj koncentraciji samih jedinjenja.
3.       Vezna mesta na agregiranim Aβ peptidima nisu potpuno okupirana kod koncentracije jedinjenja koja vežu Aβ i koja su korišćena u fluorescencijskim studijama (tj., eksperimenti se provode u uslovima ne-zasićenog vezanja).
 
[0129] U skladu sa Beer-Lambert-ovim zakonom (vidi J. W. Robinson, "Atomic spectroscopy", 1996), moguće je da se dobiju dve ekspresije koje su slične sa koncentracijom vezanog jedinjenja ([HG]), slobodnog jedinjenja ([G]), i slobodnih amiloidnih peptida ([H]) uz pomoć 1) merenja fluorescencije jedinjenja u rastvoru pre dodavanja agregiranih peptida (Fo), ili 2) merenja fluorescencije jedinjenja u prisutnosti amiloidnih peptida (F):
 
 
 
pri čemu [Go] = ukupna koncentracija jedinjenja εG = apsorpcijski koeficijent G
[G] = koncentracija nevezanog jedinjenja εHG = apsorpcijski koeficijent HG
[HG] = koncentracija kompleksa jedinjenje-Aβ εH = apsorpcijski koeficijent H
[HO] = ukupna koncentracija agregiranog peptida l = dužina puta
[H] = koncentracija nevezanog agregiranog peptida.
 
[0130] Uvrštavanjem [Go] = [G] + [HG] u jednačinu 1, i uzimajući u obzor aproksimaciju koja kaže da εHG[HG] + εGl[G] >> εHl[H], može se dobiti pojednostavljeni izraz za relativnu fluorescenciju vezanog jedinjenja (ΔF):
 
 
 
 
gde Δε = εHG - εG.
 
[0131] Sa ciljem da se pokaže odnos između promene u izmerenoj fluorescenciji jedinjenja (ΔF) i vezne konstante jedinjenja za agregirane β-amiloidne peptide (Kd's), mi smo koristili standardnu jednačinu za veznu izotermu kako bi pokazali odnos između [HG] i Kd:
 
 
[0132] Spajanjem jednačina 4 i 5, mi smo dobili odnos između ΔF i Kd:
 
 
[0133] Sa ciljem da se proceni Kd jedinjenja koje je vazno na agregirane Aβ peptide iz izmerene promene u fluorescenciji, mi smo uzeli recipročnu jednačinu 6 i dobili:
 
 
[0134] Jednačina 7 sugeriše da dvostruki recipročni prikaz ΔF i [G] daje ravnu liniju sa x-sjecištem koje je jednako -1/Kd. Sl. 2 i Sl. 6 prikazuju dvostruke recipročne prikaze izmerenih fluorescencija naspram ukupne koncentracije jedinjenja [Go]. Pod pretpostavkom da [G] može približno da bude jednak sa [Go] (pretpostavka 2), mi smo mogli da procenimo Kd za komplekse jedinjenje-Aβ iz x-sjecišta za linearna podešavanja podataka za svako jedinjenje. Procenjeni Kd za neka jedinjenja, koja su ovde opisana, su prikazan u Tabeli 3.
 
[0135] Primer 8. ELISA test: Agregirani Aβ peptidi su dobiveni iz sintetičkih Aβ(1-42) peptida uz pomoć rastvaranja 30 µg peptida u 90 µL nano-čiste vode (pH 5-6) i uz inkubiranje na 37° C tokom ≥72 h bez mešanja. Svaka rupica na pločici sa 96-rupica (volumen rupice je 0.4 mL; prozirne, ravno dno, polipropilen) je omotana sa 50 µL 1.3 µM rastvora Aβ peptida u slanom rastvoru koji je bio puferovan sa fosfatom (PBS, 10 mM NaH2PO4/Na2HPO4, 138 mM NaCl, 2.7 mM KCl, pH 7.4) tokom 3 h na 25° C. Nakon odstranjivanja viška primerka, 50 µL rastvora jedinjenja u PBS-puferu (različite koncentracije su dobivene uz pomoć razređivanja stok-rastvora sa PBS-puferom) je inkubirano u rupicama tokom 12 h. Jedinjenja koja se nisu rastvorila u PBS-puferu su rastvorena u DMSO i razređena u PBS-puferu šta daje finalni rastvor od 5% DMSO u PBS-puferu. Višak rastvora je tada odstranjen, a sve rupice su blokirane tokom 30 min uz pomoć dodavanja 300 µL 1% (w/v) rastvora albumina iz kravljeg seruma u PBS-puferu (BSA/PBS). Povremeno je proveden dodatan korak blokiranja pre inkubacije sa rastvorima malih molekula. Rastvor za blokiranje je odbačen, a rupice su isprane jednom sa 300 µL PBS-pufera. Rupice su inkubirane tokom 1 h sa 50 µL 1.1 nM rastvora (u 1% BSA/PBS, razređenje 1:6000) anti-Aβ IgG antitela (klon 6E10, monoklonsko, mišje), a nakon toga je rastvor odstranjen. Rupice su bile isprane dva puta sa 300 µL PBS-pufera i inkubirane tokom 60 min sa 50 µL sekundarnog IgG antitela (anti-mišji IgG H+L, poliklonsko, zečje) koje je bilo konjugirano sa alkalinom fosfatazom (6.8 nM u 1% BSA/PBS, razređenje 1:1000). Rastvor je odbačen, a rupice su isprane dva puta sa 300 µL PBS-pufera. Vezana sekundarna IgG antitela su detektovana uz pomoć dodavanja 50 µL p-nitrofenil fosfatnog rastvora (2.7 mM, u smeši 100 mM dietanol amin / 0.5 mM magnezijum hlorid, pH 9.8). Intenziteti apsorbancije su određeni kod 405 nm uz korišćenje UV-VIS spektroskopije na čitaču pločica (Sprectramax 190, Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Svaki pokušaj je proveden pet puta kako bi se dobio prosek. Histogrami sa pogreškama pokazuju standardne devijacije. Grafikoni su napravljeni i podešeni uz pomoć sigmoidalne krive.
 
[0136] Primer 9. Fluorescencijske studije sa monomernim Aβ. Aβ (Biopeptid, Inc.) je inicijalno rastvoren u heksafluoroizopropanolu kod koncentracije od 1 mM, vorteksovan, sonifikovan i ponovo vorteksovan. Posuda je pokrivena sa folijom pa je inkubirana tokom 21 časa na 25° C na šejkeru, pri čemu je 3 puta vorteksovana tokom inkubacionog perioda. Rastvor je ponovo sonifikovan i vorteksovan, a tada je razređen sa hladnom nano-čistom vodom (2:1 = H2O:HFIP), podeljen u željene količine u male staklene posude, i odmah smrznut u banji od CO2/acetona. Svaka frakcija je pokrivena sa parafilmom koji je probušen kako bi se omogućilo isparavanje rastvarača. Frakcije su liofilizovane tokom 2 dana sa ciljem da se dobije monomerni Aβ (91% monomer; 12% Tris-bi PAGE; analiza na gelu). 1.8 µL (8.42 µM) monomernog Aβ(1-42) je dodano u 3 µL rastvora malih molekula u koncentraciji od 4 µM koji je bio pripremljen uz pomoć rastvaranja u PBS-puferu, pH 7.4, sa ciljem da se dobije finalna koncentracija od 5 µM Aβ(1-42) i 4 µM jedinjenja. Rastvor je prenesen u kivete od 3 mL, a fluorescencija je izmerena na 25° C.
 
[0137] Primer 10. Procena rigidnih rotora kod citotoksičnog delovanja protiv SHSY-5Y ćelija humanog neuroblastoma (MTT test): SHSY-5Y ćelije humanog neuroblastoma, MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid) komplet hemikalija za proliferaciju ćelija, Eagle-ov minimalni esencijalni medijum (EMEM), Ham-ova F12 smeša nutrienta, i fetalni kravlji serum (FBS) su nabavljeni od ATCC (Manassas, VA). Ukratko, SH-SY5Y ćelije (u 1:1 EMEM:Ham F-12 sa 10% FBS) su posejane u pločice sa 96-rupica u gustoći od 5x104 ćelija/rupici. Pločice su inkubirane preko noći (u vlažnoj atmosferi od 95% vazduha, 5% CO2, na 37° C) sa ciljem da se potakne prianjanje ćelija na zidove rupica. Ćelije su tada tretirane sa jedinjenjem 8a (ne zahteva se zaštita), 8b (ne zahteva se zaštita), 8c (ne zahteva se zaštita), 8d (ne zahteva se zaštita), 11, ili 14 (ne zahteva se zaštita) u različitim koncentracijama i inkubirane tokom 24 časa (vlažna atmosfera od 95% vazduha, 5% CO2, na 37° C). MTT reagens (20 µL) je dodan u medijum i sve je inkubirano tokom dodatna 4 časa. Nakon inkubacije, 100 µL deterdženta je dodano, a pločice su pokrivene sa aluminijumskom folijom i ostavljene na sobnoj temperaturi preko noći. Količina solubilizovanog MTT formazana je izmerena uz pomoć spektrofotometrijske apsorbancije kod 570 nm (Spectramax 190, Molecular Devices, Sunnyvale, CA). MTT test nije proveden sa jedinjenjem 19 zbog njegove slabe rastvorljivosti u vodenom medijumu. Svi podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± S.D, N = 3 za svaku koncentraciju. Student t-test je primenjen za sve analize. p-vrednost od <0.05 se smatrala statistički značajnom razlikom u odnosu na kontrolne ćelije. Kao šta je pokazano na Sl. 8, sva jedinjenja su pokazivala malu ili nikakvu citotoksičnost prema ćelijama humanog neuroblastomaa u koncentracijama od najviše 100 µM. Ove karakteristike predstavljaju značajan napredak za daljnju in vivo procenu.
 
[0138] Primer 11. Slikanje humanog tkiva sa jedinjenjima koja vežu amiloid. Slike 11A-F pokazuju fluorescencijske snimke amiloidnih plakova u humanom tkivu u AD slučajevima. Nakon šta je smrznuto tkivo porezano i stavljeno na stakleni slajd, tkivo je obrađeno sa rastvorom koji je sadržavao fluorescentnu probu tokom 30 min. Primerak je ispran sa vodom sa ciljem da se eliminiše ne-specifično bojanje tkiva, a tada je slikano uz pomoć invertnog epi-fluorescencijskog mikroskopa. Snimke su pokazale lokaciju plakova koji su bili obojeni sa A) jedinjenjem 27 (ne zahteva se zaštita), B) jedinjenjem 28, C) jedinjenjem 29, D) jedinjenjem 30, E) jedinjenjem 31, ili F) jedinjenjem 33 (ne zahteva se zaštita).
 
 
 
1.       Jedinjenje, naznačeno time, što je izabrano iz grupe koja obuhvata
 
 
 
 
i
 
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
 
2.       Jedinjenje u skladu sa zahtevom 1, naznačeno time, što je
 
ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
 
3.       Jedinjenje u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačeno time, što pomenuta farmaceutski prihvatljiva so je izabrana iz grupe koja se sastoji od hidrohlorida, hidrobromida, sulfata, metanosulfata, nitrata, maleata, acetata, citrata, fumarata, tartrata, sukcinata, benzoata i soli sa amino-kiselinama.
 
4.       Jedinjenje u skladu sa zahtevom 3, naznačeno time, što pomenuta farmaceutski prihvatljiva so je hidrohlorid.
 
5.       Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži jedinjenje u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 4 ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so i neki farmaceutski prihvatljivi ekscipijent.
 
6.       Farmaceutska kompozicija u skladu sa zahtevom 5, naznačena time, što pomenuta kompozicija sadrži neki farmaceutski prihvatljivi nosilac.
 
7.       Farmaceutska kompozicija u skladu sa zahtevom 5 ili 6, naznačena time, što su pomenuto jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so kovalentno spojeni za pomenuti farmaceutski prihvatljivi nosilac.
 
8.       Farmaceutska kompozicija u skladu sa bilo kojim od zahteva od 5 do 7, naznačena time, što je pomenuti farmaceutski prihvatljivi nosilac izabran iz grupe koja obuhvata vodu, rastvor soli, alkohole, ulja, želatin, ugljene hidrate, estere masnih kiselina, hidroksimetilcelulozu i polivinil pirolidon.
 
9.       Farmaceutska kompozicija u skladu sa zahtevima od 5 do 8, naznačena time, što pomenuta kompozicija sadrži neki pomoćni agens koji je izabran iz grupe koja obuhvata lubrikante, prezervative, stabilizere, agense za vlaženje, agense za emulziju, soli koji deluju na osmotski pritisak, pufere, agens za bojanje i/ili aromatske supstancije.
 
10.       Jedinjenje ili kompozicija u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 9, naznačeni time, što se upotrebljavaju u postupku za tretman neke bolesti, koja se karakterizuje akumulacijom amiloida u subjektu, pri čemu tretman podrazumeva administraciju pomenutom subjektu u potrebi efektivne količine nekog jedinjenja ili farmaceutske kompozicije u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1-9.
 
11.       Jedinjenje ili kompozicija u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 9, naznačeni time, što se upotrebljavaju u skladu sa zahtevom 10, pri čemu pomenuta bolest je Alzheimer-ova bolest, goveđa spongiformna encefalopatija (BSE), Parkinson-ova bolest, Huntington-ova, Down-ov sindrom, demencija sa Lewy-evim telima, ili amiotrofična lateralna skleroza (ALS).
 
 
 
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
sa Aβ
bez boje
 
sa Aβ
bez boje
 
(koncentracija sonde)-1 (µM) -1
 
Slika 1
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 2
 
Inhibicija (%)
 
Inhibicija (%)
 
Max. inhibicija = 91%
 
Max. inhibicija = 58%
 
Koncentracija 8d/M
 
Koncentracija 11/M
 
Slika 3
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
talasna dužina (nm)
 
sa nagomilanim Ab
bez boje
 
sa nagomilanim Ab
bez boje
 
sa nagomilanim Ab
bez boje
 
sa nagomilanim Ab
bez boje
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 4
 
 
sa nagomilanim Ab
bez boje
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 4 nastavak
 
sa mono Ab
bez boje
 
 
sa mono Ab
bez boje
 
 
sa mono Ab
bez boje
 
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
Intenzitet E4
 
sa mono Ab
bez boje
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 5
 
(koncentracija sonde)-1 (µM) -1
 
Slika 6
 
Koncentracija 8b/M
 
Max. inhibicija = 92%
 
Max. inhibicija = 81%
 
Koncentracija 8a/M
 
Inhibicija (%)
 
Inhibicija (%)
 
Slika 7B
 
Slika 7A
 
Koncentracija 14/M
 
Inhibicija (%)
 
Inhibicija (%)
 
Max. inhibicija = 79%
 
Koncentracija 8c/M
 
Max. inhibicija = 98%
 
Slika 7D
 
Slika 7C
 
*P-vrednost <0,05
 
% preživljavanja ćelija
 
Koncentracija malih molekula (µM)
 
Slika 8
 
Intenzitet x 103
 
Intenzitet x 103
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 9A
 
Slika 9B
 
Intenzitet x 103
 
Intenzitet x 103
 
talasna dužina (nm)
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 9C
 
Slika 9C
 
Intenzitet x 103
 
Intenzitet x 103
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 9F
 
talasna dužina (nm)
 
Slika 9E
 
Intenzitet (E)
 
Intenzitet (E)
 
Koncentracija (µM)
 
Koncentracija (µM)
 
Slika 10A
 
Slika 10B
 
Intenzitet (E)
 
Intenzitet (E)
 
Koncentracija (µM)
 
Koncentracija (µM)
 
Slika 10C
 
Slika 10D
 
Intenzitet (E)
 
Intenzitet (E)
 
Koncentracija (µM)
 
Koncentracija (µM)
 
Slika 10F
 
Slika 10E
 
Slika 11
 
 

Claims (11)

1.Jedinjenje, naznačeno time, što je izabrano iz grupe koja obuhvata i ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
2.Jedinjenje u skladu sa zahtevom 1, naznačeno time, što je ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so.
3.Jedinjenje u skladu sa zahtevom 1 ili 2, naznačeno time, što pomenuta farmaceutski prihvatljiva so je izabrana iz grupe koja se sastoji od hidrohlorida, hidrobromida, sulfata, metanosulfata, nitrata, maleata, acetata, citrata, fumarata, tartrata, sukcinata, benzoata i soli sa amino-kiselinama.
4.Jedinjenje u skladu sa zahtevom 3, naznačeno time, što pomenuta farmaceutski prihvatljiva so je hidrohlorid.
5.Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži jedinjenje u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 4 ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so i neki farmaceutski prihvatljivi ekscipijent.
6.Farmaceutska kompozicija u skladu sa zahtevom 5, naznačena time, što pomenuta kompozicija sadrži neki farmaceutski prihvatljivi nosilac.
7.Farmaceutska kompozicija u skladu sa zahtevom 5 ili 6, naznačena time, što su pomenuto jedinjenje ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so kovalentno spojeni za pomenuti farmaceutski prihvatljivi nosilac.
8.Farmaceutska kompozicija u skladu sa bilo kojim od zahteva od 5 do 7, naznačena time, što je pomenuti farmaceutski prihvatljivi nosilac izabran iz grupe koja obuhvata vodu, rastvor soli, alkohole, ulja, želatin, ugljene hidrate, estere masnih kiselina, hidroksimetilcelulozu i polivinil pirolidon.
9.Farmaceutska kompozicija u skladu sa zahtevima od 5 do 8, naznačena time, što pomenuta kompozicija sadrži neki pomoćni agens koji je izabran iz grupe koja obuhvata lubrikante, prezervative, stabilizere, agense za vlaženje, agense za emulziju, soli koji deluju na osmotski pritisak, pufere, agens za bojanje i/ili aromatske supstancije.
10.Jedinjenje ili kompozicija u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 9, naznačeni time, što se upotrebljavaju u postupku za tretman neke bolesti, koja se karakterizuje akumulacijom amiloida u subjektu, pri čemu tretman podrazumeva administraciju pomenutom subjektu u potrebi efektivne količine nekog jedinjenja ili farmaceutske kompozicije u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1-9.
11.Jedinjenje ili kompozicija u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 9, naznačeni time, što se upotrebljavaju u skladu sa zahtevom 10, pri čemu pomenuta bolest je Alzheimer-ova bolest, goveđa spongiformna encefalopatija (BSE), Parkinson-ova bolest, Huntington-ova, Down-ov sindrom, demencija sa Lewy-evim telima, ili amiotrofična lateralna skleroza (ALS).
MEP-2015-118A 2009-12-10 2010-12-10 Agensi koji vežu amiloid ME02194B (me)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US28547009P 2009-12-10 2009-12-10
EP10836776.4A EP2509940B1 (en) 2009-12-10 2010-12-10 Amyloid binding agents
PCT/US2010/059952 WO2011072257A2 (en) 2009-12-10 2010-12-10 Amyloid binding agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ME02194B true ME02194B (me) 2016-02-20

Family

ID=44146211

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MEP-2015-118A ME02194B (me) 2009-12-10 2010-12-10 Agensi koji vežu amiloid

Country Status (25)

Country Link
US (3) US8940918B2 (me)
EP (1) EP2509940B1 (me)
JP (1) JP5591946B2 (me)
KR (3) KR20180041767A (me)
CN (2) CN103201258B (me)
AU (1) AU2010327918B2 (me)
BR (1) BR112012013810B1 (me)
CA (1) CA2783466C (me)
CY (1) CY1116487T1 (me)
DK (1) DK2509940T3 (me)
ES (1) ES2546063T3 (me)
HR (1) HRP20150854T1 (me)
HU (1) HUE027199T2 (me)
IN (1) IN2012DN05186A (me)
ME (1) ME02194B (me)
MX (1) MX347591B (me)
NZ (1) NZ600459A (me)
PL (1) PL2509940T3 (me)
PT (1) PT2509940E (me)
RS (1) RS54158B1 (me)
RU (1) RU2517174C2 (me)
SG (1) SG181561A1 (me)
SI (1) SI2509940T1 (me)
SM (1) SMT201500216B (me)
WO (1) WO2011072257A2 (me)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013180815A1 (en) * 2012-05-30 2013-12-05 University Of Tennessee Research Foundation Compounds for amide-forming reactions
US9588129B2 (en) 2013-03-15 2017-03-07 Amira Medical Technologies Inc. Methods for analyzing blood to detect diseases associated with abnormal protein aggregation
AR098232A1 (es) 2013-10-31 2016-05-18 Cognoptix Inc Métodos de preparación de una formulación oftálmica y usos de la misma
WO2015072964A1 (en) * 2013-11-12 2015-05-21 Cognoptix, Inc. Method for measuring fluorescence in ocular tissue
AU2015231239B2 (en) 2014-03-19 2018-11-29 Amydis, Inc. Amyloid targeting agents and methods of using the same
EP3191107A2 (en) * 2014-09-12 2017-07-19 Amydis Diagnostics, Inc. In vitro compositions comprising human sample and amyloid targeting agent
US11286233B2 (en) 2017-05-09 2022-03-29 Ambient Photonics, Inc. Stilbene derivatives for the treatment of CNS and other disorders
CN112424606B9 (zh) 2018-05-31 2025-03-07 阿米达斯公司 用于检测创伤性脑损伤的组合物和方法
CA3118325A1 (en) * 2018-11-02 2020-05-07 Amydis, Inc. Phosphate compounds for detecting neurological disorders
KR102240400B1 (ko) 2020-11-19 2021-04-15 한국원자력연구원 베타-아밀로이드 검출용 수용성 화합물
PH12023552437A1 (en) * 2021-03-12 2024-02-19 Amydis Inc Methods of detecting systemic amyloidosis via binding to misfolded or aggregated protein
CN115322165A (zh) * 2022-09-30 2022-11-11 镇江百单医疗生物科技有限公司 近红外荧光探针成像肝纤维化中亚铁离子的动态波动

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2583614A (en) 1950-05-13 1952-01-29 Eastman Kodak Co Acylated methine dye compounds
US2798090A (en) * 1953-03-02 1957-07-02 Eastman Kodak Co Process for preparing benzalaniline-3-sulfonic acid compounds
US3074971A (en) * 1959-01-23 1963-01-22 Gen Aniline & Film Corp alpha-cyanocinnamic acid esters
US3149146A (en) * 1960-03-09 1964-09-15 Gen Aniline & Film Corp Alpha-cyano-2-alkenoxy-1-naphthaleneacrylic acid esters
FR1321641A (fr) * 1962-03-08 1963-03-22 Gen Aniline & Film Corp Nouvelles compositions absorbantes de rayons ultraviolets
BE794010A (fr) * 1972-01-13 1973-05-02 Du Pont Colorants cationiques de couleur jaune-vert
DE2714653C3 (de) * 1977-04-01 1980-10-30 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Kationische Styrylfarbstoffe und Verfahren zum Färben mit diesen Farbstoffen
DE2942185A1 (de) * 1979-10-18 1981-04-30 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Basische farbstoffe
JPS5815912A (ja) * 1981-07-22 1983-01-29 Ss Pharmaceut Co Ltd 消炎鎮痛剤
US4911920A (en) 1986-07-30 1990-03-27 Alcon Laboratories, Inc. Sustained release, comfort formulation for glaucoma therapy
FR2588189B1 (fr) 1985-10-03 1988-12-02 Merck Sharp & Dohme Composition pharmaceutique de type a transition de phase liquide-gel
JPS63163826A (ja) * 1986-12-26 1988-07-07 Idemitsu Kosan Co Ltd 有機非線型光学材料
DE3905916A1 (de) * 1989-02-25 1990-08-30 Basf Ag Verwendung von derivaten des n-phenyl-3,4,5,6-tetrahydrophthalimids zur desikkation und abszission von pflanzenorganen
JP2594486B2 (ja) 1991-01-15 1997-03-26 アルコン ラボラトリーズ インコーポレイテッド 局所的眼薬組成物
US5212162A (en) 1991-03-27 1993-05-18 Alcon Laboratories, Inc. Use of combinations gelling polysaccharides and finely divided drug carrier substrates in topical ophthalmic compositions
US6309853B1 (en) 1994-08-17 2001-10-30 The Rockfeller University Modulators of body weight, corresponding nucleic acids and proteins, and diagnostic and therapeutic uses thereof
DE4430691A1 (de) * 1994-08-30 1996-03-07 Bayer Ag Elektrolumineszierende Anordnungen und deren Verwendung
EP1467967B1 (en) * 2002-01-18 2011-04-27 The Hospital For Sick Children Compounds for modulating cell proliferation
GB0228410D0 (en) * 2002-12-05 2003-01-08 Glaxo Group Ltd Novel Compounds
ZA200507321B (en) 2003-03-05 2007-03-28 Celgene Corp Diphenylethylene compounds and uses thereof
WO2005073697A1 (en) * 2004-01-20 2005-08-11 The Curators Of The University Of Missouri Local flow and shear stress sensor based on molecular rotors
JP2007530455A (ja) * 2004-03-26 2007-11-01 エイチエスシー リサーチ アンド ディベロップメント リミテッド パートナーシップ 細胞増殖を調節する化合物
WO2006059245A2 (en) * 2004-11-16 2006-06-08 Neurochem (International) Limited Compounds for the treatment of cns and amyloid associated diseases
US7666886B2 (en) 2005-07-15 2010-02-23 The Regents Of The University Of California Compounds and methods for the diagnosis and treatment of amyloid associated diseases
KR101414317B1 (ko) 2006-07-31 2014-07-02 바스프 에스이 수소화에 적합한 루테늄 촉매의 재생 방법
FR2905009A1 (fr) * 2006-08-18 2008-02-22 Servier Lab Methode de criblage de composes aux proprietes anti-amyloide
CN101209976B (zh) * 2006-12-29 2012-01-11 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 取代的酒石酸衍生物及其用于制备β-分泌酶抑制剂的用途
EP2217930B1 (en) * 2007-10-24 2013-03-06 Tallinn University Of Technology Maldi ms-based high-throughput screening method for substances inhibiting aggregation of alzheimer's amyloid beta peptides

Also Published As

Publication number Publication date
EP2509940B1 (en) 2015-06-10
PT2509940E (pt) 2015-09-24
US8940918B2 (en) 2015-01-27
US9551722B2 (en) 2017-01-24
KR101849680B1 (ko) 2018-04-17
BR112012013810A2 (pt) 2020-08-25
CY1116487T1 (el) 2017-03-15
DK2509940T3 (en) 2015-07-20
ES2546063T3 (es) 2015-09-18
NZ600459A (en) 2014-01-31
RS54158B1 (sr) 2015-12-31
JP5591946B2 (ja) 2014-09-17
EP2509940A4 (en) 2013-04-17
KR20120104306A (ko) 2012-09-20
MX2012006552A (es) 2012-08-23
EP2509940A2 (en) 2012-10-17
CA2783466A1 (en) 2011-06-16
RU2517174C2 (ru) 2014-05-27
CN103201258B (zh) 2016-01-27
WO2011072257A2 (en) 2011-06-16
AU2010327918A1 (en) 2012-06-21
SMT201500216B (it) 2015-10-30
MX347591B (es) 2017-05-03
KR20190109594A (ko) 2019-09-25
HRP20150854T1 (hr) 2015-09-25
IN2012DN05186A (me) 2015-10-23
US20150177262A1 (en) 2015-06-25
HUE027199T2 (en) 2016-08-29
JP2013513619A (ja) 2013-04-22
HK1225729A1 (zh) 2017-09-15
CN103201258A (zh) 2013-07-10
AU2010327918B2 (en) 2014-01-16
PL2509940T3 (pl) 2015-11-30
CN105669597A (zh) 2016-06-15
SG181561A1 (en) 2012-07-30
HK1177930A1 (en) 2013-08-30
CN105669597B (zh) 2019-05-07
KR102079160B1 (ko) 2020-02-19
CA2783466C (en) 2019-09-24
US20170315137A1 (en) 2017-11-02
US20120302603A1 (en) 2012-11-29
KR20180041767A (ko) 2018-04-24
RU2012128798A (ru) 2014-01-20
WO2011072257A3 (en) 2011-10-20
SI2509940T1 (sl) 2015-09-30
BR112012013810B1 (pt) 2022-01-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ME02194B (me) Agensi koji vežu amiloid
JP7664201B2 (ja) アミロイド標的剤及びその使用方法
JP7662639B2 (ja) エストロゲン受容体分解活性を有する新規クロマン誘導体およびその使用
CN102724975B (zh) IRE-1α抑制剂
EP3259256B1 (en) Compounds and methods for inducing browning of white adipose tissue
WO2024015730A2 (en) Amphiphilic compounds for attenuating neurotoxicity of amyloid-beta oligomers and diagnostic methods
HK1177930B (en) Amyloid binding agents
HK1225729B (zh) 淀粉状蛋白结合剂
RU2815432C2 (ru) Композиция, применяемая для ингибирования людского фактора трилистника 3
JPWO2019146670A1 (ja) 光応答性Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄリガンド
HK1241362B (en) Compounds and methods for inducing browning of white adipose tissue