MD4003532T2 - Forme cristaline de 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetil-N-((6-metil-4-(metiltio)-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxamidă - Google Patents

Abstract

REZUMATPrezenta dezvăluire se referă la o formă cristalină 1 a 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetil-N-((6-metil-4-(metiltio) -2-oxo-1,2- dihidropiridin-3-il)metil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxamidă, care este utilă ca modulatori ai activităţii enzimelor modificatoare de metil histonă. Prezenta dezvăluire furnizează, de asemenea, compoziţii acceptabile farmaceutic cuprinzând forma cristalină şi metode de utilizare a respectivelor compoziţii în tratamentul diferitelor tulburări.

Description

CERERI ÎNRUDITE

Această cerere revendică prioritatea cererii provizorii U.S. Nr. 62/878.012, depusă în 24 iulie 2019.

STADIUL TEHNICII

Cromatina eucariotă este compusă din complexe macromoleculare denumite nucleozomi. Un nucleozom are 147 de perechi de baze de ADN înfăşurate în jurul unui octamer proteic care are două subunităţi din fiecare dintre proteina histonă H2A, H2B, H3 şi H4. Proteinele histonice sunt supuse unor modificări post-traducere care, la rândul lor, afectează structura cromatinei şi expresia genelor. Un tip de modificare post-traducere găsită pe histone este metilarea reziduurilor de lizină şi arginină. Metilarea histonelor joacă un rol critic în reglarea expresiei genelor la eucariote. Metilarea afectează structura cromatinei şi a fost legată, atât de activarea, cât şi de reprimarea transcripţiei (Zhang şi Reinberg, Genes Dev. 15:2343-2360, 2001). Enzimele care catalizează ataşarea şi îndepărtarea grupărilor metil din histone sunt implicate în liniştirea genelor, dezvoltarea embrionară, proliferarea celulară şi alte procese.

O clasă de histon metilaze este caracterizată prin prezenţa unui domeniu Supresor de variegaţie, Amplificator de Zeste Trithorax (SET), care cuprinde aproximativ 130 de aminoacizi. Amplificatorul de Omolog Zeste 2 (EZH2) este un exemplu de domeniu SET uman care conţine metilază. EZH2 se asociază cu EED (Dezvoltarea ectodermului embrionar) şi SUZ12 (supresor al omologului zeste 12) pentru a forma un complex cunoscut cu denumirea de PRC2 (Complex 2 represiv de grup Polycomb) care are capacitatea de a trimetila histona H3 la lizina 27 (Cao şi Zhang, Mol. Cell 15:57-67, 2004). Complexele PRC2 pot include, de asemenea, subunităţi RBAP46 şi RBAP48. Un alt exemplu este metilaza înrudită EZH1.

Activităţile oncogene ale EZH2 au fost demonstrate printr-o serie de studii. În experimentele pe linie celulară, supraexprimarea EZH2 induce invazia celulară, creşterea în agar moale şi motilitatea, în timp ce inactivarea EZH2 inhibă proliferarea şi invazia celulară (Kleer şi colab., 2003, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 100:11606-11611; Varambally şi colab., (2002), "The polycomb group protein EZH2 is involved in progression of prostate cancer", Nature 419, 624-629). A fost arătat că EZH2 reprimă expresia mai multor supresori tumorali, incluzând, printre altele, E-cadherin, DAB2IP şi RUNX3. În modele de xenogrefă, inactivarea EZH2 inhibă creşterea tumorii şi metastaza. Recent, a fost arătat că modularea prin scădere a EZH2 în modele murine blochează metastaza cancerului de prostată (Min şi colab., "An oncogene-tumor suppressor cascade drives metastatic prostate cancer by coordinately activating Ras and nuclear factor- kappaB", Nat Med. Martie 2010; 16(3):286-94). Supraexprimarea EZH2 este asociată cu agresivitatea anumitor tipuri de cancer, cum ar fi cancer de sân (Kleer şi colab., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 100:11606-11611, 2003). Studii recente sugerează, de asemenea, că gena de fuziune oncogenă specifică cancerului de prostată, TMPRSS2-ERG, induce programe epigenetice represive prin activare directă a EZH2 (Yu et al., "An Integrated Network of Androgen Receptor, Polycomb, and TMPRSS2-ERG Gene Fusions in Prostate Cancer Progression," Cancer Cell. 18 mai 2010;17(5):443-454).

Compusul 1, 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetil-N-((6-metil-4-(metiltio)-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxamidă, este un inhibitor cu moleculă mică al EZH2 care prezintă un mare potenţial terapeutic pentru tratarea unei varietăţi de afecţiuni asociate cu o enzimă de modificare a metilului, de ex., în tratarea tulburărilor proliferative, cum ar fi cancer. Compusul 1 este exemplificat în cererea provizorie U.S. Nr. 62/659.408, şi în WO2019/204490 şi are structura

Dezvoltarea formelor alternative ale Compusului 1 reprezintă o zonă atractivă pentru continuarea tratamentului bolilor sau tulburărilor care răspund la inhibarea EZH2. Inhibitorii de EZH2 sunt descrişi, de exemplu, în EP3121175.

REZUMAT

Aici este furnizată forma 1 cristalină, conform revendicării 1, a compusului 1.

De asemenea, aici sunt furnizate compoziţii farmaceutice care cuprind forma 1 cristalină a compusului 1.

În plus, este furnizată forma 1 cristalină a compusului 1 pentru utilizare în tratamentul bolilor sau tulburărilor care răspund la inhibarea EZH2, de exemplu, cancerul.

SCURTĂ DESCRIERE A FIGURILOR

FIG. 1 ilustrează un model de difracţie de raze X în pulbere (XRPD) pentru forma 1 cristalină a Compusului 1.

FIG. 2 ilustrează o termogramă de calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) exemplificatoare pentru Forma 1 a Compusului 1.

FIG. 3 ilustrează un model de difracţie de raze X în pulbere (XRPD) pentru forma 2 cristalină a Compusului 1.

FIG. 4 ilustrează termograma de analiză termogravimetrică (TGA) şi termograma de calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) combinate pentru Forma 2 a Compusului 1.

FIG. 5 ilustrează un model de difracţie de raze X în pulbere (XRPD) pentru forma 3 cristalină a Compusului 1.

FIG. 6 ilustrează termograma de analiză termogravimetrică (TGA) şi termograma de calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) combinate pentru Forma 3 a Compusului 1.

FIG. 7 ilustrează un model de difracţie de raze X în pulbere (XRPD) pentru forma amorfă a compusului 1 aşa cum este preparat din procedurile stabilite în Exemplul 17 din cererea provizorie U.S. Nr. 62/659.408.

DESCRIERE DETALIATĂ

Definiţii

Aşa cum este utilizat aici, "cristalin" se referă la o formă solidă a unui compus în care există o ordine atomică a poziţiilor atomilor pe o distanţă mare. Natura cristalină a unui solid poate fi confirmată, de exemplu, prin examinarea modelului de difracţie de raze X în pulbere.

Cu excepţia cazului în care se specifică altfel, formele cristaline (Forma 1, Forma 2, şi Forma 3) ale Compusului 1 sunt fiecare forme monocristaline. O "formă monocristalină" înseamnă că compusul menţionat, adică compusul 1, este prezent sub forma unui singur cristal sau a unei multitudini de cristale, în care fiecare cristal are aceeaşi formă de cristal (de ex., Formă 1, 2 sau 3). Procentul în greutate al unei forme de cristal particulare este determinat de greutatea formei de cristal particulare împărţită la suma dintre greutatea cristalului particular, plus greutatea celorlaltor forme de cristal prezente, plus greutatea formei amorfe prezente, înmulţit cu 100%.

"Formă 1", "Formă 1 cristalină", sau "Formă monocristalină 1" sunt folosite interschimbabil. "Formă 2", "Formă 2 cristalină", sau "Formă monocristalină 2" sunt folosite interschimbabil. "Formă 3", "Formă 3 cristalină", sau "Formă monocristalină 3" sunt folosite interschimbabil.

Puritatea chimică se referă la măsura în care forma dezvăluită este lipsită de materiale cu structuri chimice diferite. Puritatea chimică a compusului în formele cristaline dezvăluite înseamnă greutatea compusului împărţită la suma dintre greutatea compusului plus greutatea materialelor/impurităţilor cu structuri chimice diferite, înmulţit cu 100%, adică procente în greutate.

Termenul "amorf" se referă la un solid care este prezent într-o stare sau formă necristalină. Solidele amorfe sunt dispuneri dezordonate de molecule şi, prin urmare, nu posedă reţea cristalină distinctă sau unitate de celulă şi, în consecinţă, nu au o ordonare care să poată fi definită pe distanţă mare. Ordonarea solidelor în stare solidă poate fi determinată prin tehnici standard cunoscute în domeniu, de exemplu, prin difracţie de raze X în pulbere (XRPD) sau prin calorimetrie de scanare diferenţială (DSC).

Termenul "anhidru" and "anhidrat" sunt folosiţi interschimbabil şi înseamnă că forma cristalină la care se face referire, în mod substanţial, nu are apă în reţeaua cristalină, de ex., are mai puţin decât 1% în greutate, aşa cum a fost determinat prin analiză Karl Fisher

Valorile 2-teta ale modelelor de difracţie de raze X în pulbere pentru formele cristaline descrise aici pot varia uşor de la un instrument la altul şi, de asemenea, în funcţie de variaţiile de la prepararea probei şi de variaţia de la lot la lot din cauza unor factori, cum ar fi variaţia temperaturii, deplasarea probei, precum şi prezenţa sau absenţa unui standard intern. Prin urmare, cu excepţia cazului în care este definit altfel, modelele/repartizările XRPD menţionate aici nu trebuie interpretate ca absolute şi pot varia cu ± 0,2 grade. Este bine cunoscut în domeniu că această variabilitate va explica factorii de mai sus fără a împiedica identificarea fără echivoc a unei forme de cristal. Cu excepţia cazului în care se specifică altfel, valorile 2-teta furnizate aici au fost obţinute utilizând radiaţia Cu Kα1.

Valorile temperaturii, de exemplu, pentru vârfurile DSC de aici pot varia uşor de la un instrument la altul şi, de asemenea, în funcţie de variaţiile în prepararea probei, de variaţia de la lot la lot, şi de factori de mediu înconjurător. Prin urmare, cu excepţia cazului în care este definit altfel, valorile temperaturii menţionate aici nu trebuie interpretate ca absolute şi pot varia cu ± 5 grade sau cu ± 2 grade.

"În mod substanţial acelaşi model XRPD" sau "un model de difracţie de raze X în pulbere în mod substanţial similar cu" o cifră definită înseamnă că, în scopuri de comparaţie, sunt prezente cel puţin 90% din vârfurile arătate. Mai mult, trebuie înţeles că, în scopuri de comparaţie, este permisă o anumită variabilitate a intensităţilor de vârf faţă de cele arătate, cum ar fi ± 0,2 grade.

Cantitatea de o formă cristalină în raport cu o altă formă cristalină dintr-o probă poate fi evaluată prin prepararea unei serii de amestecuri ale celor două forme cristaline cu rapoarte de greutate cunoscute şi obţinerea unui spectru XRPD pentru fiecare. De exemplu, cantităţile relative de Formă 1 şi Formă 2 cristaline dintr-o probă pot fi evaluate prin selectarea unuia sau mai multor vârfuri caracteristice ale Formei cristaline 1 şi ale Formei 2 ilustrate în FIG. 1 şi, respectiv, FIG. 3, şi prin corelarea intensităţilor lor relative din XRPD al probei cu intensităţile lor relative din XRPD-urile amestecului.

Aşa cum sunt utilizaţi aici, termenii "subiect" şi "pacient" pot fi utilizaţi interschimbabil şi înseamnă un mamifer care are nevoie de tratament, de ex., animale de companie (de ex., câini, pisici, şi altele asemenea), animale de fermă (de ex., vaci, porci, cai, oi, capre, şi altele asemenea) şi animale de laborator (de ex., şobolani, şoareci, cobai, şi altele asemenea). De obicei, subiectul este un om care are nevoie de tratament.

Termenul "purtător acceptabil farmaceutic" se referă la un purtător, adjuvant sau vehicul netoxic care nu afectează negativ activitatea farmacologică a compusului cu care este formulat, şi care este, de asemenea, sigur pentru uz uman. Purtătorii, adjuvanţii sau vehiculele acceptabile farmaceutic care pot fi utilizate în compoziţiile din această dezvăluire includ, dar nu se limitează la, schimbătoare de ioni, alumină, stearat de aluminiu, stearat de magneziu, lecitină, proteine serice, cum ar fi albumină serică umană, substanţe tampon, cum ar fi fosfaţi, glicină, acid sorbic, sorbat de potasiu, amestecuri parţiale de gliceride de acizi graşi vegetali saturaţi, apă, săruri sau electroliţi, cum ar fi sulfat de protamină, fosfat acid disodic, fosfat dicalcic, fosfat acid de potasiu, clorură de sodiu, săruri de zinc, dioxid de siliciu coloidal, trisilicat de magneziu, polivinil pirolidonă, polivinilpirolidonă-acetat de vinil, substanţe pe bază de celuloză (de ex., celuloză microcristalină, hidroxipropil metilceluloză, succinat acetat de hidroxipropil metilceluloză, ftalat de hidroxipropil metilceluloză), amidon, lactoză monohidrat, manitol, laurilsulfat de sodiu, şi crosscarmeloză de sodiu, polietilenglicol, carboximetilceluloză de sodiu, poliacrilaţi, polimetacrilat, ceruri, polimeri bloc polietilenă-polioxipropilenă, polietilenglicol, şi grăsime de lână.

Termenii "tratament", "tratează" şi "tratare" se referă la inversarea, atenuarea, reducerea probabilităţii de a dezvolta, sau inhibarea progresului unei boli sau tulburări sau a unuia sau mai multor simptome ale acesteia, aşa cum este descris aici. În unele variante de realizare, tratamentul poate fi administrat după ce s-au dezvoltat unu sau mai multe simptome, adică tratament terapeutic. În alte variante de realizare, tratamentul poate fi administrat în absenţa simptomelor. De exemplu, tratamentul poate fi administrat unui individ susceptibil înainte de apariţia simptomelor (de ex., în lumina istoricului de simptome şi/sau în lumina factorilor genetici sau a altor factori de susceptibilitate), adică tratament profilactic. Tratamentul poate fi continuat, de asemenea, după ce simptomele au fost eliminate, de exemplu, pentru a preveni sau a întârzia reapariţia acestora.

Termenul "cantitate eficientă" sau "cantitate eficientă terapeutic" include o cantitate de un compus descris aici care va determina un răspuns biologic sau medical al unui subiect, de exemplu, o doză între 0,001 - 100 mg/kg de greutate corporală/zi de Compus 1.

Forme exemplificatoare

Sfera de întindere a invenţiei este definită prin revendicări. Într-un prim aspect, aici este furnizată o formă cristalină 1 a unui compus care are formula structurală:

Într-un al doilea aspect (care este inclus în primul aspect), Forma 1 cristalină este caracterizată prin cel puţin trei vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°. Ca alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, forma 1 cristalină este caracterizată prin cel puţin patru vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin cel puţin cinci vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin cel puţin şase vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 10,2°, 12,3°, 12,7°, 13,3°, 14,9°, 15,3°, 20,2°, 20,8°, 21,3°, 22,2°, 22,5° şi 23,8°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 10,2°, 11,0°, 11,4°, 11,8°, 12,3°, 12,7°, 13,3°, 14,9°, 15,3°, 16,1°, 17,4°, 20,2°, 20,8°, 21,3°, 22,2°, 22,5°, şi 23.8°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 14,9°, 20,2° şi 20,8°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 14,9°, 20,2° şi 20,8°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 14,9°, 20,2°, 20,8° şi 22,2°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8° şi 22,2°. Într-o altă alternativă, ca parte a unui al doilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată printr-o XRPD (difracţie de raze X în pulbere) substanţial similară cu cea din FIG. 1.

Într-un al treilea aspect, Forma 1 cristalină este caracterizată printr-o calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) cu o endotermă ascuţită la 179,5 °C (temperatura de debut), sau printr-o analiză termogravimetrică (TGA) a unei pierderi de greutate de 1,0% între 36 şi 179 °C, sau prin ambele, în care forma 1 cristalină poate cuprinde, de asemenea, vârfuri XRPD la unghiuri 2Θ selectate dintre oricare dintre cele descrise în cel de-al doilea aspect. În alte aspecte, forma 1 cristalină este caracterizată printr-o calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) substanţial similară cu cea din FIG. 2, în care forma 1 cristalină poate cuprinde, de asemenea, vârfuri XRPD la unghiuri 2Θ selectate dintre oricare dintre cele descrise în cel de-al doilea aspect.

Într-un al patrulea aspect, Forma 1 cristalină este anhidră, în care forma 1 cristalină poate cuprinde, de asemenea, vârfuri XRPD la unghiuri 2Θ selectate dintre oricare dintre cele descrise în cel de-al doilea aspect, şi/sau valori sau figuri TGA sau DSC menţionate în cel de-al treilea aspect.

Într-un al cincilea aspect, Forma 1 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în primul, al doilea, al treilea sau al patrulea aspect), este cel puţin 60% o formă monocristalină, cel puţin 70% o formă monocristalină, cel puţin 80% o formă monocristalină, cel puţin 90% o formă monocristalină, cel puţin 95% o formă monocristalină sau cel puţin 99% o formă monocristalină, în greutate.

Într-un al şaselea aspect, Forma 1 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în primul, al doilea, al treilea, al patrulea sau al cincilea aspect), are o puritate chimică de cel puţin 60%, cel puţin 70%, cel puţin 80%, cel puţin 90%, cel puţin 95%, sau cel puţin 99% în greutate. Următoarele aspecte, al şaptelea până la al şaisprezecelea şi al şaptesprezecelea în legătură cu Formele 2 şi 3, nu fac parte din invenţie.

De asemenea, aici este dezvăluită, într-un al şaptelea aspect, forma 2 cristalină a unui compus care are formula structurală:

Într-un al optulea aspect, Forma 2 cristalină este caracterizată printr-o XRPD (difracţie de raze X în pulbere) substanţial similară cu cea din FIG. 3.

Într-un al nouălea aspect, Forma 2 cristalină este caracterizată printr-o analiză termogravimetrică (TGA) printr-o pierdere în greutate de 3,48% între 46 şi 114 °C, precum şi printr-o pierdere în greutate de 0,97% între 114 şi 156 °C, sau prin calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) cu două endoterme la 34,2 °C şi 122,6 °C (temperaturi de debut), sau prin ambele, în care Forma 2 cristalină poate cuprinde, de asemenea, vârfuri XRPD la unghiuri 2Θ substanţial similare cu cu cele din FIG. 3. Ca alternativă, ca parte a unui al nouălea aspect, Forma 2 cristalină este caracterizată printr-o analiză termogravimetrică (TGA) sau prin calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) substanţial similară cu FIG. 4, în care forma 2 cristalină poate cuprinde, de asemenea, vârfuri XRPD la unghiuri 2Θ substanţial similare cu cele din FIG. 3.

Într-un al zecelea aspect, Forma 2 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în al şaptelea, al optulea sau al nouălea aspect), este cel puţin 60% o formă monocristalină, cel puţin 70% o formă monocristalină, cel puţin 80% o formă monocristalină, cel puţin 90% o formă monocristalină, cel puţin 95% o formă monocristalină, sau cel puţin 99% o formă monocristalină, în greutate.

Într-un al unsprezecelea aspect, Forma 2 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în al şaptelea, al optulea, al nouălea sau al zecelea aspect), are o puritate chimică de cel puţin 60%, cel puţin 70%, cel puţin 80%, cel puţin 90%, cel puţin 95% sau cel puţin 99% în greutate.

De asemenea, aici este dezvăluită, într-un al doisprezecelea aspect, forma 3 cristalină a unui compus care are formula structurală:

Într-un al treisprezecelea aspect, Forma 3 cristalină este caracterizată printr-o XRPD (difracţie de raze X în pulbere) substanţial similară cu cea din FIG. 5.

Într-un al patrusprezecelea aspect, Forma 3 cristalină este caracterizată printr-o analiză termogravimetrică (TGA) printr-o pierdere în greutate de 5,93% între 43 şi 143 °C, sau prin calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) cu două endoterme la 34,5 °C şi 107,0 °C (temperaturi de debut) şi o exotermă la 249,0 °C (temperatura de debut), sau prin ambele, în care forma 3 cristalină poate cuprinde, de asemenea, vârfuri XRPD la unghiuri 2Θ substanţial similare cu cele din FIG. 5. Ca alternativă, ca parte a celui de-al paisprezecelea aspect, Forma 3 cristalină este caracterizată printr-o analiză termogravimetrică (TGA) sau prin calorimetrie de scanare diferenţială (DSC) substanţial similare cu cele din FIG. 6, în care forma 3 cristalină poate cuprinde, de asemenea, vârfuri XRPD la unghiuri 2Θ substanţial similare cu cele din FIG. 5.

Într-un al cincisprezecelea aspect, Forma 3 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în al doisprezecelea al treisprezecelea sau al patrusprezecelea aspect), este cel puţin 60% o formă cristalină, cel puţin 70% o formă monocristalină, cel puţin 80% o formă monocristalină, cel puţin 90% o formă monocristalină formă cristalină, cel puţin 95% o formă monocristalină, sau cel puţin 99% o formă monocristalină, în greutate.

Într-un al şaisprezecelea aspect, Forma 3 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în al doisprezecelea, al treisprezecelea, al paisprezecelea sau al cincisprezecelea aspect), are o puritate chimică de cel puţin 60%, cel puţin 70%, cel puţin 80%, cel puţin 90%, cel puţin 95% sau cel puţin 99% în greutate.

Într-un al şaptesprezecelea aspect, Forma 1 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în primul, al doilea, al treilea, al patrulea sau al cincilea aspect), forma 2 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în al şaptelea, al optulea, al nouălea, al zecelea sau al unsprezecelea aspect), sau forma 3 cristalină (de ex., ca în al doisprezecelea, al treisprezecelea, al paisprezecelea, al cincisprezecelea sau al şaisprezecelea aspect), este reprezentată prin următoarea formulă structurală:

Ca alternativă, ca parte a unui al şaptesprezecelea aspect, Forma 1 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în primul, al doilea, al treilea, al patrulea sau al cincilea aspect), forma 2 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în al şaptelea, al optulea, al nouălea, al zecelea sau al unsprezecelea aspect), sau forma 3 cristalină (de ex., ca în al doisprezecelea, al treisprezecelea, al paisprezecelea, al cincisprezecelea sau al şaisprezecelea aspect) este reprezentată prin următoarea formulă structurală:

Ca alternativă, ca parte a unui al şaptesprezecelea aspect, Forma 1 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în primul, al doilea, al treilea, al patrulea sau al cincilea aspect), forma 2 cristalină, aşa cum este descris aici (de ex., ca în al şaptelea, al optulea, al nouălea, al zecelea sau al unsprezecelea aspect), sau forma 3 cristalină (de ex., ca în al doisprezecelea, al treisprezecelea, al paisprezecelea, al cincisprezecelea sau al şaisprezecelea aspect) este reprezentată prin următoarea formulă structurală:

care are denumirea chimică (2R)-7-clor-2-(trans-4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetil-N-((6-metil-4-(metiltio)-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxamidă.

Utilizări, formulare şi administrare

Formele cristaline descrise aici şi compoziţiile acestora sunt utile pentru tratarea bolilor sau tulburărilor care răspund la inhibarea EZH2. Astfel de boli şi tulburări le includ pe cele asociate cu proliferarea celulară. În unele variante de realizare, formele cristaline şi compoziţiile acestora descrise aici sunt utile în tratarea bolilor şi/sau a tulburărilor asociate cu reglarea greşită a ciclului celular sau repararea ADN-ului. În unele variante de realizare, formele cristaline şi compoziţiile acestora descrise aici sunt utile în tratarea cancerului. Tipuri exemplificatoare de cancer includ, de ex., cancer suprarenal, carcinom cu celule acinoase, neurom acustic, melanom lentiginos acral, acrospirom, leucemie acută eozinofilică, leucemie acută eritroidă, leucemie limfoblastică acută, leucemie megacarioblastică acută, leucemie monocitară acută, leucemie promielocitară acută, adenocarcinom, carcinom adenoid chistic, adenom, tumoră odontogenă adenomatoidă, carcinom adenoscuamos, neoplasm de ţesut adipos, carcinom corticosuprarenal, leucemie/limfom cu celule T la adulţi, leucemie agresivă cu celule NK, limfom asociat cu SIDA, rabdomiosarcom alveolar, sarcom alveolar al părţilor moi, limfom ameloblastic, limfom anaplazic cu celule mari, cancer tiroidian anaplazic, limfom angioimunoblastic cu celule T, angiomiolipom, angiosarcom, astrocitom, tumoră rabdoidă teratoidă atipică, leucemie limfocitară cronică cu celule B, leucemie prolimfocitară cronică cu celule B, leucemie cu celule B, carcinom cu celule bazale, cancer de tract biliar, cancer de vezică urinară, blastom, cancer osos, tumoră Brenner, tumoră Brown, limfom Burkitt, cancer de sân, cancer cerebral, carcinom, carcinom in situ, carcinosarcom, tumoră de cartilaj, cementom, sarcom mieloid, condrom, cordom, coriocarcinom, papilom al plexului coroid, sarcom cu celule clare al rinichiului, craniofaringiom, limfom cutanat cu celule T, cancer de col uterin, cancer colorectal, boala Degos, tumoră desmoplazică cu celule rotunde mici, limfom difuz cu celule B mari, tumoră neuroepitelială disembrioplazică, disgerminom, carcinom embrionar, neoplasm al glandelor endocrine, tumoră sinusală endodermică, limfom cu celule T asociat cu enteropatie, cancer esofagian, făt în făt, fibrom, fibrosarcom, limfom folicular, cancer tiroidian folicular, ganglioneurom, cancer gastrointestinal, tumoră cu celule germinale, coriocarcinom gestaţional, fibroblastom cu celule gigant, tumoră osoasă cu celule gigant, tumoră glială, glioblastom multiform, gliom, gliomatoză cerebrală, glucagonom, gonadoblastom, tumoră cu celule granuloase, ginandroblastom, cancer de vezică biliară, cancer gastric, leucemie cu celule păroase, hemangioblastom, cancer de cap şi gât, hemangiopericitom, afecţiune malignă hematologică, hepatoblastom, limfom hepatosplenic cu celule T, limfom Hodgkin, limfom non-Hodgkin, carcinom lobular invaziv, cancer intestinal, cancer de rinichi, cancer laringian, lentigo malign, carcinom letal de linie mediană, leucemie, tumoră cu celule Leydig, liposarcom, cancer pulmonar, limfangiom, limfangiosarcom, limfoepiteliom, limfom, leucemie limfocitară acută, leucemie mielogenă acută, leucemie limfocitară cronică, cancer hepatic, cancer pulmonar cu celule mici, cancer pulmonar fără celule mici, limfom MALT, histiocitom fibros malign, tumoră malignă a tecii nervilor periferici, tumoră triton malignă, limfom cu celule de manta, limfom cu celule B de zonă marginală, leucemie mastocitară, tumoră cu celule germinale mediastinale, carcinom medular al sânului, cancer medular tiroidian, meduloblastom, melanom, meningiom, cancer cu celule Merkel, mezoteliom, carcinom urotelial metastatic, tumoră mixtă Mulleriană, tumoră mucinoasă, mielom multiplu, neoplasm al ţesutului muscular, micoze fungoide, liposarcom mixoid, mixom, mixosarcom, carcinom nazofaringian, neurinom, neuroblastom, neurofibrom, neurom, melanom nodular, cancer ocular, oligoastrocitom, oligodendrogliom, oncocitom, menangiom al tecii nervului optic, tumoră de nerv optic, cancer oral, oteosarcom, cancer ovarian, tumoră Pancoast, cancer tiroidian papilar, paragangliom, pinealoblastom, pineocitom, pituicitom, adenom hipofizar, tumoră hipofizară, plasmocitom, poliembriom, limfom limfoblastic cu precursor de celule T, limfom primar al sistemului nervos central, limfoton primar de efuziune, cancer primar perfuzional, cancer de prostată, cancer pancreatic, cancer faringian, pseudomixom de peritoneu, carcinom cu celule renale, carcinom medular renal, retinoblastom, rabdomiom, rabdomiosarcom, transformare Richter, cancer rectal, sarcom, Schwannomatoză, seminom, tumoră cu celule Sertoli, carcinom cu celule de cordon sexual stromal, carcinom cu celule inelare de tip sigiliu, cancer de piele, tumori cu celule rotunde mici albastre, carcinom cu celule mici, sarcom de ţesut moale, somatostatinom, cancer de scrot, tumoră spinală, limfom splenic de zonă marginală, carcinom cu celule scuamoase, sarcom sinovial, boala Sezary, cancer de intestin subţire, carcinom scuamos, cancer de stomac, limfom cu celule T, cancer testicular, tecom, cancer tiroidian, carcinom cu celule de tranziţie, cancer de gât, urachal cancer, cancer urogenital, carcinom urotelial, melanom uveal, cancer uterin, carcinom verrucos, gliom al căii vizuale, cancer vulvar, cancer vaginal, macroglobulinemie Waldenstrom, tumoră Warthin şi tumoră Wilms.

Într-un aspect, cancerul tratat cu formele cristaline şi compoziţiile acestora descrise aici este selectat dintre cancer de sân, cancer de prostată, cancer de colon, carcinom cu celule renale, cancer multiform de glioblastom, cancer de vezică urinară, melanom, cancer bronşic, limfom, cancer hepatic, mielom multiplu, limfom, cancer ovarian, NSCL, cancere pancreatice, tumoră malignă rabdoidă, sarcom sinovial şi gliom.

Un alt aspect al prezentei dezvăluiri este utilizarea uneia sau a mai multor forme cristaline descrise aici pentru fabricarea unui medicament pentru utilizare în tratamentul unei tulburări sau boli de aici. Un alt obiect al prezentei dezvăluiri este una sau mai multe dintre formele cristaline sau compoziţiile descrise aici pentru utilizare pentru tratamentul unei tulburări sau boli de aici.

De asemenea, sunt furnizate compoziţii farmaceutice care cuprind una sau mai multe dintre formele cristaline dezvăluite; şi un purtător acceptabil farmaceutic.

Compoziţiile descrise aici pot fi administrate oral, parenteral, prin pulverizare prin inhalare, topic, rectal, nazal, bucal, vaginal sau printr-un rezervor implantat. Termenul "parenteral", aşa cum este utilizat aici, include tehnici de injectare sau perfuzie subcutanată, intravenoasă, intramusculară, intraarticulară, intrasinovială, intrasternală, intratecală, intrahepatică, intralezională şi intracraniană.

Cantitatea de formă cristalină furnizată care poate fi combinată cu materiale purtător pentru a produce o compoziţie într-o formă de dozare unică va varia în funcţie de pacientul care urmează să fie tratat şi de modul particular de administrare. Compoziţiile furnizate pot fi formulate astfel încât o doză între 0,001 - 100 mg/kg de greutate corporală/zi de inhibitor să poată fi administrată la un pacient care primeşte aceste compoziţii.

De asemenea, trebuie să se înţeleagă că o doză şi un regim de tratament specifice pentru un anumit pacient vor depinde de o varietate de factori, incluzând vârsta, greutatea corporală, starea generală de sănătate, sexul, alimentaţia, timpul de administrare, viteza de excreţie, combinaţia de medicamente, judecata medicului curant şi severitatea bolii particulare care este tratată. Cantitatea de o formă cristalină furnizată în compoziţie va depinde, de asemenea, de compusul particular din compoziţie.

EXEMPLIFICARE

Aşa cum este ilustrat în exemplele de mai jos, formele cristaline au fost preparate conform următoarelor proceduri generale.

Prepararea compusului 1 amorf

Forma amorfă a Compusului 1 a fost preparată sub forma unui singur enantiomer, un singur izomer geometric, utilizând următoarea procedură de mai jos. Modelul XRPD al produsului amorf din această procedură este arătat în FIG. 7.

Intermediarul 1: 7-clor-2,4-dimetil-2-(4-oxociclohexil)benzo[d] [1,3]dioxol-5-carboxilat de metil

Etapa 1: Sinteza 5-clor-3,4-dihidroxi-2-metilbenzoatului de metil

La o soluţie de 3,4-dihidroxi-2-metilbenzoat de metil (5,11 g, 27,9 mmoli) în tetrahidrofuran (199 mL) la -20°C a fost adăugată prin picurare clorură de sulfuril (2,45 mL, 30,6 mmoli). Amestecul de reacţie a fost agitat la -20 °C timp de 3 ore apoi a fost stins cu o soluţie apoasă saturată de clorură de amoniu (50 ml). Produsul dorit a fost extras cu acetat de etil (25 ml x 3). Straturile organice combinate au fost spălate cu saramură (25 ml), au fost uscate pe sulfat de sodiu, au fost filtrate şi concentrate până la uscare la presiune redusă. Reziduul a fost purificat prin cromatografie rapidă (silicagel, gradient 0% până la 60% acetat de etil în heptan) pentru a se obţine compusul din titlu (4,117 g, randament 68%) sub forma unui solid bej. LCMS [M+H]+ m/z: calculat 217,0; găsit 217,1 (model de izotop Cl).

Etapa 2: Sinteza 7-clor-2,4-dimetil-2-(4-oxociclohexil)-2H-1,3-benzodioxol-5-carboxilatului de metil

Un amestec de 5-clor-3,4-dihidroxi-2-metilbenzoat de metil (1,2 g, 5,53 mmoli), dodecacarbonil de triruteniu (176 mg, 276 µmoli) şi trifenilfosfină (145 mg, 553 µmoli) a fost degazat şi purjat sub vid cu azot (3 cicluri). A fost adăugat toluen (8,1 mL) şi amestecul de reacţie a fost încălzit la reflux timp de 30 de minute. O soluţie de 4-etinilciclohexan-1-onă (1,34 g, 11,0 mmoli) în toluen (17 mL) a fost apoi adăugată prin picurare, şi reacţia a fost agitată timp de 23 ore la reflux. În final, amestecul de reacţie a fost răcit la temperatura camerei şi a fost concentrat până la uscare la presiune redusă. Reziduul a fost purificat prin cromatografie rapidă (silicagel, gradient de la 0 la 60% acetat de etil în heptan) pentru a se obţine compusul din titlu (1,327 g, randament 70%) sub forma unui ulei galben. LCMS [M+Na]+ m/z: calculat 361,1; găsit 361,1 (model izotopic Cl).

Etapa 3: Separarea (R)-7-clor-2,4-dimetil-2-(4-oxociclohexil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxilatului de metil şi a (S)-7-clor-2,4-dimetil-2-(4-oxociclohexil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxilatului de metil

Amestecul racemic de 7-clor-2,4-dimetil-2-(4-oxociclohexil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxilat de metil (4,4 g, 13 mmoli) a fost dizolvat prin SFC preparativă [Coloană: ChiralPak AY de la industria chimică (250mm×50mm I.D., 10µm). Fază mobilă A: CO2/Fază mobilă B: 0,1% NH4OH în metanol. Izocratic (85% Fază mobilă A şi 15% Fază mobilă B). Debit: 80 mL/min. Temperatura coloanei: 40°C]. Intermediar 1 (Vârful 1) (enantiomer/distomer nedorit): Timp de retenţie = 6,2 min. Recuperare = 1,4 g, 4,05 mmoli, randament 31%, ee 90%, puritate 98% (solid galben). 1H RMN (400 MHz, Cloroform-d) δ 7,48 (s, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,44 - 2,36 (m, 2H), 2,35 - 2,25 (m, 6H), 2,19 (tdd, J = 2,8, 5,6, 13,1 Hz, 2H), 1,70 - 1,57 (m, 5H). Intermediar 1 (Vârful 2) (enantiomer/eutomer dorit): Timp de retenţie = 7,0 min. Recuperare = 1,1 g, 3,08 mmoli, randament 23,75%, 99% ee, 95% puritate (solid galben). 1H RMN (400 MHz, Cloroform-d) δ 7,49 (s, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,44 - 2,36 (m, 2H), 2,36 - 2,25 (m, 6H), 2,20 (tdd, J = 2,8, 5,6, 13,1 Hz, 2H), 1,72 - 1,59 (m, 5H). Metoda analitică SFC: [Coloană: ChiralPak AY-3 (150×4.6mm I.D., 3µm). Fază mobilă A: CO2/Fază mobilă B: 0,05% Et2NH în iPrOH. Gradient: de la 5 până la 40% din faza mobilă B (peste 5,5 min). Debit: 2,5 mL/min. Temperatura coloanei: 40°C]. Intermediar 1 (Vârful 1 - enantiomer/distomer nedorit): Timp de retenţie = 2,853 min. Intermediar 1 (Vârful 2 - enantiomer/eutomer dorit): Timp de retenţie = 2,979 min.

Intermediarul 2: acid 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetilbenzo[d] [1,3]dioxol-5-carboxilic

Etapa 1: Sinteza 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetilbenzo[d][1,3]dioxol-5-carboxilatului de metil O soluţie de sare clorhidrat de 3-metoxiazetidină (8 g, 64,75 mmoli) şi N,N-diizopropiletilamină (12 ml, 68,9 mmoli) în metanol (30 ml) a fost agitată la temperatura camerei timp de 30 de minute înainte să fie adăugată o altă soluţie de 7-clor-2,4-dimetil-2-(4-oxociclohexil)-1,3-benzodioxol-5-carboxilat de mettil (Intermediar 1 - Vârful 2) (4,1 g, 12,10 mmoli) în tetrahidrofuran (30 mL). Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 1 oră apoi a fost răcit la -70 °C. A fost adăugată borohidrură de litiu (500 mg, 22,96 mmoli) şi reacţia a fost agitată la -70 °C timp de 30 de minute [sau până când a fost observat prin TLC consumul complet al materiei prime, acetat de etil/metanol 5:1]. Apoi, două loturi de reacţie au fost combinate şi stinse cu o soluţie apoasă saturată de clorură de amoniu (120 ml) la 0 °C şi produsul dorit a fost extras cu diclormetan (200 ml x 3). Straturile organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, au fost filtrate şi concentrate până la uscare la presiune redusă. Reziduul a fost purificat prin cromatografie rapidă (silicagel, gradient 0 până la 14% metanol în diclormetan) pentru a se obţine compusul din titlu (8,05 g, randament 67%, puritate 83%) sub forma unui ulei galben deschis. O probă (50 mg) a fost purificată suplimentar prin cromatografie preparativă în strat subţire (silicagel, acetat de etil metanol 15:1). LCMS [M+H]+ m/z: calculat. 410,2; găsit 410,1. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,39 (s, 1H), 3,95 - 3,91 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,59 - 3,51 (m, 2H), 3,16 (s, 3H), 2,97 (br dd, J = 6,4, 8,0 Hz, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,11 - 2,02 (m, 1H), 1,91 - 1,73 (m, 5H), 1,54 (s, 3H), 1,22 - 1,12 (m, 2H), 0,98 - 0,86 (m, 2H).

Etapa 2: Sinteza acidului 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetilbenzo[d][1,3]dioxol-5-carboxilic

La o soluţie de 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetilbenzo[d][1,3]dioxol-5-carboxilat de metil (4 g, 9,75 mmoli) în metanol (48 mL) a fost adăugată o soluţie de hidroxid de litiu hidrat (4,03 g, 96,06 mmoli) în apă (12 ml). Reacţia a fost agitată la 70 °C timp de 2 ore, apoi două loturi au fost combinate şi concentrate la presiune redusă. A fost adăugată apă (50 mL) şi pH-ul a fost ajustat la 6 cu o soluţie apoasă saturată de acid citric la 0°C. Produsul dorit a fost extras cu un amestec 3:1 de diclormetan şi izopropanol (300 ml x 5). Straturile organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, au fost filtrate şi concentrate până la uscare la presiune redusă pentru a se obţine compusul din titlu (6,1 g, brut) sub forma unui solid alb murdar, care a fost utilizat în etapa următoare fără purificare suplimentară. LCMS [M+H]+ m/z: calculat. 396,2; găsit 396,1. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,07 (s, 1H), 4,05 - 4,10 (m, 2H), 3,76 - 3,88 (m, 1H), 3,67 (br dd, J= 10, 3,6 Hz, 2H), 3,22 (s, 3H), 2,71 - 2,81 (m, 1H), 2,19 (s, 3H), 1,91 - 1,99 (m, 4H), 1,75 - 1,85 (m, 1H), 1,52 (s, 3H), 1,18 - 1,28 (m, 2H), 1,06 - 1,14 (m, 2H).

La o soluţie de acid 7-clor-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetilbenzo[d][1,3]dioxol-5-carboxilic (Intermediar 2 - un singur enantiomer şi izomer geometric) (5 g, 12,63 mmoli) în N,N-dimetilformamidă (50 ml) au fost adăugate hexafluorofosfat de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluroniu (5,7 g, 14,99 mmoli) şi N,N-diizopropiletilamină (11 mL, 63,15 mmoli). Amestecul a fost agitat la 20 °C timp de 30 de minute înainte de a fi adăugată sare clorhidrat de 3-(aminometil)-6-metil-4-(metiltio)piridin-2(1H)-onă (Intermediar 1) (4,2 g, 19,03 mmoli). Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de încă 1,5 ore, apoi a fost filtrat. Filtratul a fost purificat prin HPLC preparativă [Coloană: Phenomenex Gemini C18 (250mm×50mm, 10µm). Fază mobilă A: apă (hidroxid de amoniac 0,04% v/v şi bicarbonat de amoniu 10 mM)/Fază mobilă B: acetonitril. Gradient (75 până la 44% faza mobilă A/25 până la 56% faza mobilă B, peste 23 min). Temperatura coloanei: 30 °C] pentru a se obţine compusul din titlu (4,4 g, randament 60%, puritate 96% sub forma unui solid alb. LCMS [M+H]+ m/z: calculat.562,2; găsit 562,2. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) δ 6,91 (s, 1H), 6,29 (s, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,01 (quin, J = 6 Hz, 1H), 3,58 (dd, J = 8,8, 6,4 Hz, 2H), 3,26 (s, 3H), 2,92 - 3,02 (m, 2H), 2,54 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,01 - 2,11 (m, 1H), 1,79 - 2,00 (m, 5H), 1,62 (s, 3H), 1,19 - 1,34 (m, 2H), 0,91 - 1,08 (m, 2H). Modelul XRPD al produsului amorf din această procedură este arătat în FIG. 7.

Lista de abrevieri

Acronim Semnificaţie % g/g Procent de greutate 1H-NMR Rezonanţa magnetică nucleară de proton DMF dimetil formamidă DMSO dimetilsulfoxid DSC Calorimetrie de scanare diferenţială DVS Absorbţie dinamică a vaporilor EtOAc Acetat de etil EtOH etanol GVS Absorbţie gravimetrică a vaporilor H2O apă HPLC Cromatografie de lichid de înaltă performanţă HCl Acid clorhidric IC Cromatografie ionică IPA propan-2-ol KF Karl Fischer MAS Unghi magic de rotire MDSC Calorimetrie de scanare diferenţială modulată MEK metil etil cetonă MeOH metanol N/A Nu se aplică PLM Microscopie cu lumină polarizată RH Umiditate relativă RT Temperatura camerei SCXRD Difracţia de raze X în monocristal SEM Microscop electronic cu scanare TFA acid trifluoroacetic Tg Tranziţie vitroasă TGA Analiză termogravimetrică THF tetrahidrofuran UV Ultraviolet VT-XRPD Difracţie de raze X în pulbere cu temperatură variabilă XRPD Difracţia de raze X în pulbere

1. Detalii privind instrumentul şi metodologia

Difracţia de raze X în pulbere (XRPD):

Difractogramele XRPD au fost colectate pe un Bruker AXS C2 GADDS, Bruker AXS D8 Advance sau PANalytical Empyrean, aşa cum este detaliat mai jos.

Bruker AXS C2 GADDS

XRPD utilizând difractometrul Bruker AXS C2 GADDS a fost efectuată utilizând radiaţie Cu Kα (40 kV, 40 mA), o etapă XYZ automată, un microscop video laser pentru poziţionarea automatului de probe şi un detector în 2 dimensiuni de suprafaţă Våntec-500. Aparatul optic de raze X a constat dintr-o singură oglindă multistrat Göbel cuplată cu un colimator cu orificiu mic de 0,3 mm. Divergenţa fasciculului, adică dimensiunea efectivă a fasciculului de raze X pe probă, a fost de aproximativ 4 mm. A fost utilizat un mod de scanare continuă θ-θ cu o distanţă probă - detector de 20 cm, ceea ce oferă un interval efectiv 2θ de 1,5°-32,5°. De obicei, proba a fost expusă la fascicul de raze X timp de 120 de secunde. Software-ul folosit pentru colectarea şi analiza datelor a fost GADDS pentru Win7/XP şi, respectiv, Diffrac Plus EVA. Probele prelucrate în condiţiile mediului ambiant au fost preparate sub formă de eşantioane de plăci plate utilizând pulbere, aşa cum a fost primită, fără măcinare. Probele au fost preparate şi analizate, fie pe o lamă de sticlă, fie pe frită de sticlă. Probele au fost uşor presate pe o lamă de sticlă pentru a obţine o suprafaţă plană pentru analiză. Un bloc de filtru cu frită de sticlă a fost folosit pentru a izola şi analiza solidele din suspensii prin adăugarea unei cantităţi mici de suspensie direct la frita de sticlă înainte de filtrare sub un vid uşor. Pentru experimente la temperatură variabilă (VT) probele au fost montate în stadiu fierbinte pe Anton Paar DHS 900 în condiţiile mediului ambiant. Proba a fost apoi încălzită la temperatura adecvată cu 10 °C/min şi ulterior a fost menţinută izotermic timp de 1 minut înainte de a iniţia colectarea datelor. Probele au fost preparate şi analizate pe o placă de siliciu montată în stadiu fierbinte utilizând un compus conducător de căldură.

Bruker AXS D8 Advance

XRPD utilizând difractometrul Bruker D8 a fost efectuată utilizând radiaţie Cu Kα (40 kV, 40 mA) şi un goniometru θ-2θ echipat cu un monocromator Ge. Fasciculul incident trece printr-o fantă de divergenţă de 2,0 mm urmată de o fantă anti-împrăştiere de 0,2 mm şi muchie cuţit. Fasciculul difractat trece printr-o fantă de recepţie de 8,0 mm cu fante Soller de 2,5° urmate de detectorul Lynxeye. Software-ul utilizat pentru colectarea şi analiza datelor a fost Diffrac Plus XRD Commander şi, respectiv, Diffrac Plus EVA. Probele au fost prelucrate în condiţiile mediului ambiant sub formă de eşantioane de plăci plate utilizând pulbere aşa cum a fost primită. Proba a fost preparată pe o plachetă de siliciu lustruită, cu fond zero (510), prin apăsare uşoară pe suprafaţa plană sau ambalată într-o cavitate tăiată. Proba a fost rotită în propriul său plan.

PANalytical Empyrean

XRPD utilizând difractometrul PANalytical Empyrean a fost efectuată utilizând radiaţie Cu Ka (45 kV, 40 mA) în geometria transmisiei. Pe fasciculul incident au fost utilizate o fantă de 0,5°, mască de 4 mm şi fante Seller de 0,04 rad cu o oglindă de focalizare. Un detector PIXcel3D, plasat pe fasciculul difractat, a fost echipat cu o fantă de recepţie şi fante Seller de 0,04 rad. Software-ul utilizat pentru colectarea datelor a fost colectorul de date X'Pert utilizândinterfaţa pentru operator X'Pert. Datele au fost analizate şi prezentate utilizând Diffrac Plus EVA sau HighScore Plus. Probele au fost preparate şi analizate, fie într-o placă de godeu de metal sau Millipore 96 în modul de transmisie. A fost utilizat un film transparent pentru raze X între foile de metal de pe placa de metal cu godeuri şi au fost folosite pulberi (aproximativ 1-2 mg) aşa cum au fost primite. Placa Millipore a fost utilizată pentru a izola şi analiza solidele din suspensii prin adăugarea unei cantităţi mici de suspensie direct pe placă înainte de filtrare sub un vid uşor.

Calorimetrie de scanare diferenţială (DSC):

Datele DSC au fost colectate pe un TA Instruments Q2000 echipat cu un automat de probe cu 50 de poziţii. De obicei, 0,5-3 mg din fiecare probă, într-o tavă de aluminiu cu orificii, au fost încălzite cu 10 °C/min de la 25 °C până la 300 °C. Peste probă a fost menţinută o purjare de azot uscat la 50 ml/min. Temperatura modulată DSC a fost efectuată utilizând o viteză de încălzire de bază de 2 °C/min şi parametrii de modulare a temperaturii de ± 0,318 °C (amplitudine) la fiecare 60 de secunde (perioada). Software-ul de control al instrumentelor a fost Advantage pentru Q Series şi Thermal Advantage, şi datele au fost analizate utilizând Universal Analysis sau TRIOS.

Datele DSC au fost, de asemenea, colectate pe un TA Instruments Discovery DSC echipat cu un automat de probe cu 50 de poziţii. De obicei, 0,5-3 mg din fiecare probă, într-o tavă de aluminiu cu orificii, au fost încălzite cu 10 °C/min de la 25 °C până la 300 °C. Peste probă a fost menţinută o purjare de azot uscat la 50 ml/min. Software-ul de control al instrumentului a fost TRIOS, şi datele au fost analizate utilizând TRIOS sau Universal Analysis.

Analiza termogravimetrică (TGA)

Datele TGA au fost colectate pe un TA Instruments Q500 TGA, echipat cu un automat de probe cu 16 poziţii. De obicei, 5-10 mg din fiecare probă au fost încărcate pe o tavă DSC din aluminiu tarată în prealabil şi au fost încălzite cu 10 °C/min de la temperatura ambiantă până la 300 °C. Peste probă a fost menţinută o purjare de azot la 60 ml/min. Software-ul de control al instrumentelor a fost Advantage pentru Q Series şi Thermal Advantage, şi datele au fost analizate utilizând Universal Analysis sau TRIOS.

Datele TGA au fost, de asemenea, colectate pe un TA Instruments Discovery TGA, echipat cu un automat de probe cu 25 de poziţii. De obicei, 5-10 mg din fiecare probă au fost încărcate pe o tavă DSC din aluminiu tarată în prealabil şi au fost încălzite cu 10 °C/min de la temperatura ambiantă până la 300 °C. Peste probă a fost menţinută o purjare de azot la 25 ml/min. Software-ul de control al instrumentului a fost TRIOS, şi datele au fost analizate utilizând TRIOS sau Universal Analysis.

2. Metode generale de cristalizare

Metode de screening pentru cristalizare sunt evidenţiate în metodele descrise mai jos.

Maturarea/Îmbătrânirea suspensiei

În camera de maturare: Suspensiile pentru maturare au fost plasate într-un incubator cu agitator cu platformă (Heidolph Titramax/Incubator 1000, Figura 2) şi au fost supuse unei serii de cicluri de încălzire-răcire de la mediul ambiant până la aproximativ 50 °C. Acest lucru a fost realizat prin pornirea sau oprirea încălzirii la fiecare 4 ore. Agitarea a fost menţinută tot timpul.

În Bloc Polar: Suspensiile au fost agitate (500 rpm) într-un bloc polar (Cambridge Reactor Design) diverse perioade de timp la 50 °C. Probele au fost apoi răcite la 25 °C cu 0,1 °C/min şi au fost agitate timp de încă patru ore. După acest timp, probele au fost încălzite din nou la 50 °C cu 0,1 °C/min. Ciclul a fost apoi repetat.

Cristalizare de răcire

Soluţiile au fost răcite la 5 °C cu 0,1 °C/min într-un bloc polar şi au fost agitate la această temperatură diverse perioade de timp. Toate solidele au fost filtrate şi uscate sub aspiraţie timp de 10 minute şi au fost analizate iniţial prin XRPD. Soluţiile au fost răcite suplimentar la -20 °C timp de 16 ore şi orice solide noi au fost apoi tratate ca anterior. Toate soluţiile rămase au fost evaporate (vezi Metoda 3 de mai jos).

Evaporare controlată

Soluţiile plasate în flacoane au fost evaporate în condiţiile mediului ambiant prin îndepărtarea capacelor flacoanelor sau prin introducerea unui ac în capacul septului flacoanelor. Probele au fost lăsate să se evapore lent până la uscare sau până când a apărut un solid în condiţiile ambiante.

Precipitare/Cristalizare prin adăugare de anti-solvent

Soluţiile au fost tratate cu anti-solvent prin picurare la 50 °C până când au devenit tulburi. Probele au fost apoi răcite la 5 °C cu 0,1 °C/min şi au fost menţinute izotermic. Acolo unde a fost necesar, a fost adăugat anti-solvent suplimentar la suspensii. Solidele au fost filtrate şi uscate sub aspiraţie timp de 10 min şi reziduurile au fost analizate iniţial prin XRPD.

3. Metode de screening

Forma amorfă a probelor de Compus 1 cu purităţi diferite, una cu puritate 95,2% (30 mg) şi alta cu puritate 97,6% (20 mg), au fost fiecare suspendate sau dizolvate în 10-30 vol. de un solvent dat, la RT. După 5 minute de echilibrare la temperatura camerei, toate probele (soluţii şi suspensii) au fost încălzite la 50 °C timp de 10 minute şi probele rezultate au fost tratate după cum urmează: suspensiile au fost maturate între 60 şi 5 °C timp de 72 de ore (4 ore la fiecare temperatură). Soluţiile au fost răcite de la 50 până la 5 °C cu 0,1 °C/min şi au fost menţinute la 5 °C timp de 72 de ore. Cu excepţia cazului în care a fost obţinut un solid, soluţiile au fost lăsate să se evapore la RT. Toate solidele recuperate au fost analizate prin XRPD şi ulterior prin tehnici adecvate. Vezi Tabelele 1-3 pentru procedurile de screening şi rezultatele analitice.

Pe baza analizei XRPD, screeningul de polimorf utilizând forma amorfă a compusului 1 cu puritate de 95,2% a dat trei forme cristaline, denumite aici Forma 1, Forma 2, şi Formă 3 (Tabelele 1 şi 2). Forma 1 a fost cea mai abundentă formă, care a fost obţinută din mai multe sisteme de solvenţi. Forma 3 a fost observată o singură dată din solventul 2-butanol. Screeningul de polimorf utilizând forma amorfă a compusului 1 cu o puritate de 97,6% a dat Forma 1 şi Forma 2, dar nu Forma 3 (Tabelul 3). Forma 1 a fost mai abundentă decât Forma 2. Caracterizările Formelor 1-3 sunt prezentate mai jos.

Tabelul 1. Screening de polimorf utilizând forma amorfă a compusului 1 cu puritate de 95,2% (30 mg)

Solvent 10 vol 20 vol 30 vol Observare la 50 °C Tratament Evaporare la RT XRPD n-Heptan x x x Suspensie Maturare 60/5 °C N/P Forma 1 Acetonă ✔ - Soluţie Răcire la 5 °C N/P Forma 1 2-Propanol ✔ - Soluţie Răcire la 5 °C Sticlă/Gumă N/P Etanol ✔ - Soluţie Răcire la 5 °C Sticlă/Gumă N/P Acetat de etil x - Suspensie Maturare 60/5 °C N/P Forma 2 Acetat de izopropil x ✔ x Suspensie Maturare 60/5 °C N/P Forma 1 terţ-Butilmetil Eter x ✔ x Suspensie Maturare 60/5 °C N/P Forma 1 Metilizobutil cetonă x x Suspensie Maturare 60/5 °C N/P Forma 1 Dimetil sulfoxid ✔ - Soluţie Răcire la 5 °C Solid Amorf Anisol ✔ - Soluţie Răcire la 5 °C Sticlă/Gumă N/P Metanol ✔ - Soluţie Răcire la 5 °C Solid Amorf Toluen x ✔ x ✔ x Suspensie Maturare 60/5 °C N/P Forma 2 Cheie: ✔= soluţie limpede; ✔x = tulbure; x = suspensie; N/P = neefectuat

Tabelul 2. Screening de polimorf utilizând forma amorfă a compusului 1 cu puritate de 95,2% (30 mg)

Solvent 10 vol 20 vol 30 vol Observare la 50 °C Tratament Observatre după tratament (72 ore) Evaporare la RT XRPD Tetrahidrofuran ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Sticlă/Gumă N/P Diclormetan ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Sticlă/Gumă N/P Acetonitril ✔ - - Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 10% apă/EtOH ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Sticlă/Gumă N/P 10% apă/IPA ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Sticlă/Gumă N/P 10% apă/THF ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Sticlă/Gumă N/P MEK x ✔ - Soluţie Răcire la 5 °C Suspensie N/P Forma 2 apă x x x Suspensie gumoasă Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 2-Butanol ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Suspensie N/P Forma 3 Acetat de izobutil x x ✔ x Suspensie subţire Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 Ciclohexan x x x Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 + două vârfuri suplimentare 1,4-Dioxan ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Solid Amorf Cheie: ✔= soluţie limpede; ✔x = tulbure; x = suspensie; N/P = neefectuat

Tabelul 3. Screening de polimorf utilizând forma amorfă a compusului 1 cu puritate de 97,6% (20 mg)

Solvent 10 vol 20 vol 30 vol Observare la 50 °C Tratament Observatre după tratament (72 ore) Evaporare la RT XRPD n-Heptan x x x Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 Acetonă x ✔ x ✔ Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 2-Propanol ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie sticlă/ gumă N/P Etanol ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie sticlă/ gumă N/P Acetat de etil x x x Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 Acetat de izopropil x x x Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 terţ-Butilmetil Eter x x x Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 MEK ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Suspensie N/P Forma 1 Toluen ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Solid Similar cu Forma 2 Tetrahidrofuran ✔ - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie Solid Similar cu Forma 2 Acetonitril x x x Suspensie Maturare 60/5 °C Suspensie N/P Forma 1 10% apă/IPA - - - Soluţie Răcire la 5 °C Soluţie sticlă/ gumă N/P Cheie: ✔= soluţie limpede; ✔x = tulbure; x = suspensie; N/P = neefectuat

4. Selectarea noilor forme cristaline

Formele 1 şi 2 au fost selectate pentru analiză ulterioară deoarece XRPD pentru Forma 3 a relevat o fază slab cristalină. Pentru Forma 1, proba obţinută din acetonă a avut cea mai mare puritate (97,4 %) şi a conţinut doar cantităţi infime de solvent. Experimente la scară mărită pentru Forma 1 au fost efectuate în consecinţă, aşa cum este descris mai jos. Pentru Forma 2, proba obţinută din MEK a avut o puritate mai mare (97,2 %) şi a conţinut doar o cantitate mică de MEK rezidual. Experimente la scară mărită pentru Forma 1 au fost efectuate în consecinţă, aşa cum este descris mai jos.

Scară mărită pentru forma 1 şi forma 2 cristaline

Experimente la scară mărită pentru Forma 1 în acetonă şi Forma 2 în MEK au fost efectuate fiecare conform următoarei proceduri. Forma amorfă a compusului 1 preparat urmând metodele din U.S. 62/659.408 (1 g) a fost cântărită în două flacoane scintilate de 20 ml şi a fost dizolvată, fie în 20 volume (20 ml) de acetonă, fie în 20 volume (20 ml) de MEK la 50 °C, cu agitare. Soluţiile au fost apoi răcite la 5 °C cu 0,1 °C/min şi aufost menţinute la această temperatură timp de 20 de ore. Ambele probe au format suspensii albe care au fost filtrate şi uscate în pâlnie Buchner sub vid. Solidele au fost lăsate să se usuce la aer timp de o oră înainte de caracterizarea ambelor modele utilizând o mare varietate de tehnici (prezentate pe scurt în Tabelele 4 şi 5 şi în FIG. 1-4). Randamentele au fost de asemenea calculate din solidele recuperate.

Pentru Forma 1 la scară mărită, proba solidă a fost confirmată prin XRPD că este forma 1 cristalină (Tabelul 4 şi FIG. 1). Puritatea a fost determinată prin HPLC că este de 96,6 %. Proba s-a potrivit, prin 1H RMN, cu forma amorfă a materialului de referinţă, compusul 1, cu o cantitate mică de acetonă reziduală (0,04 echiv.) rămasă în probă. Analiza termică a arătat o mică pierdere în greutate de 1,0 % g/g (care echivalează cu 0,32 echiv. apă), în concordanţă cu datele KF. Analiza DSC a arătat o endotermă ascuţită la 179,5 °C (debut) (FIG. 2). Analiza GVS a constatat că materialul este uşor higroscopic, cu o absorbţie de 1,7 % g/g apă între 0 şi 90 % RH. Proba a rămas Forma 1 după analiza GVS sau după depozitare timp de 5 zile în condiţii de RH crescută. Morfologia formei 1, prin PLM şi SEM, a fost aglomerate de particule cristaline mici. Aceste aglomerate pot varia ca dimensiune şi formă (între 20 şi 650 µm), şi particulele cristaline sunt mici şi neregulate (până la 20 µm). În general, a fost determinat că Forma 1 este anhidră. Vezi, de asemenea, Tabelul 5 pentru Forma 1 pentru proprietăţi prezentate pe scurt.

Pentru Forma 2 la scară mărită, proba solidă a fost confirmată prin XRPD că este forma 2 cristalină (FIG. 3). Cu toate acestea, alte caracterizări au sugerat că Forma 2 a fost o formă cristalină mai puţin stabilă decât Forma 1. De exemplu, spre deosebire de Forma 1, care şi-a păstrat forma cristalină iniţială, analiza XRPD a arătat că Forma 2 a devenit amorfă după analiza GVS sau după depozitare timp de 5 zile în condiţii de RH crescută. Spre deosebire de Forma 1 care prezintă o endotermă ascuţită (FIG. 2), Forma 2 a prezentat două evenimente endoterme în analiza DSC (FIG. 4). Forma 2 a prezentat, de asemenea, în analiza TGA o pierdere totală în greutate mai mare decât Forma 1. Forma 1 a fost observată mai frecvent decât Forma 2, atât în timpul screening-ului de polimorf, cât şi în experimentele competitive cu suspensie, fiind susţinut în continuare faptul că Forma 1 era mai stabilă decât Forma 2.

Tabelul 7. XRPD pentru forma 1 cristalină

Unghiul 2-Teta ° Intensitate % 10,0 61,1 10,2 37,5 11,0 21,9 11,4 23,9 11,8 20,4 12,3 24,7 12,7 27,6 13,3 52,8 14,9 85,3 15,3 24,8 16,1 22,5 17,4 18,5 20,2 100,0 20,8 63,9 21,3 43,1 22,2 52,9 22,5 49,2 23,8 28,4

Tabelul 8. Caracterizarea Formei 1 cristaline

Analiză Producerea la scară mărită a formei 1 XRPD Forma 1 cristalină (bază liberă) 1H-NMR În concordanţă cu materialul de referinţă. 0,04 echivalenţi de acetonă reziduală HPLC 96,6 % TGA Pierdere de greutate de 1,0 % între 36 şi 179 °C (echivalează cu 0,32 echivalent de apă) DSC Endotermă la 179,5 °C (debut, 61 J/g). KF 1,0 % g/g (0,32 echiv de apă). GVS Absorbţie de ~1,7 % g/g apă între 0 şi 90 % RH. Fără histerezis. XRPD după GVS a arătat că materialul a rămas modelul 1. randament 54,1 % (unele materiale au trecut prin filtru. Randamentul real ar putea fi Analiză Producerea la scară mărită a formei 1 semnificativ mai mare). Stabilitate statică 40 °C/75 % RH (5 zile) XRPD: Uşoară reducere a cristalinităţii, a rămas modelul 1 HPLC: 96,5 %. Stabilitate statică 25 °C/97 % RH (5 zile) XRPD: Uşoară reducere a cristalinităţii, a rămas modelul 1 HPLC: 96,8 %. PLM Aglomerate de particule cristaline mici. Aglomeratele variază foarte mult ca dimensiune şi formă între 20 µ şi 650 µ în lungime. Particule cristaline de până la 20 µ în lungime cu formă neregulată. SEM Aglomerate de diferite dimensiuni compuse din particule cristaline mici, cu formă neregulată.

Deşi a fost descris un număr de variante de realizare ale acestuia, este evident că exemplele noastre de bază pot fi modificate pentru a furniza alte variante de realizare care utilizează compuşii şi metodele din această dezvăluire. Prin urmare, se va aprecia că sfera de întindere a acestei dezvăluiri trebuie să fie definită prin revendicările anexate, mai degrabă decât prin variantele de realizare specifice care au fost reprezentate cu titlu de exemplu.

Cu excepţia cazului în care este definit altfel, tuturor termenilor tehnici şi ştiinţifici utilizaţi aici li se acordă semnificaţia cunoscută în mod obişnuit de către o persoană cu calificare obişnuită în domeniu.

Claims (15)

1. O formă 1 cristalină a unui compus care are formula structurală:

în care forma cristalină este caracterizată prin cel puţin trei vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°.

2. Forma 1 cristalină din revendicarea 1, în care forma cristalină este caracterizată prin cel puţin patru vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°.

3. Forma 1 cristalină din revendicarea 1 sau 2, în care forma cristalină este caracterizată prin cel puţin cinci vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°.

4. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 3, în care forma cristalină este caracterizată prin cel puţin şase vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°.

5. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 4, în care forma cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8°, 22,2° şi 22,5°.

6. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 5, în care forma cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 10,0°, 10,2°, 12,3°, 12,7°, 13,3°, 14,9°, 15,3°, 20,2°, 20,8°, 21,3°, 22,2°, 22,5°, şi 23,8°.

7. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 6, în care forma cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulberele la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 10,0°, 10,2°, 11,0°, 11,4°, 11,8°, 12,3°, 12,7°, 13,3°, 14,9°, 15,3°, 16,1°, 17,4°, 20,2°, 20,8°, 21,3°, 22,2°, 22,5°, şi 23,8°.

8. Forma 1 cristalină din revendicarea 1, în care forma cristalină este caracterizată prin vârfuri de difracţie de raze X în pulbere la unghiuri 2Θ utilizând radiaţia Cu Kα1 selectate dintre 14,9°, 20,2° şi 20,8°, sau selectate dintre 10,0°, 14,9°, 20,2° şi 20,8°, sau selectate dintre 10,0°, 14,9°, 20,2°, 20,8° şi 22,2°, sau selectate dintre 10,0°, 13,3°, 14,9°, 20,2°, 20,8° şi 22,2°.

9. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 8, în care forma cristalină este anhidră.

10. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 9, în care Forma 1 cristalină este cel puţin 90% o formă monocristalină, în greutate, sau cel puţin 95% o formă monocristalină, în greutate.

11. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 10, în care compusul are o puritate chimică de cel puţin 90% în greutate, cel puţin 95% în greutate sau cel puţin 99% în greutate.

12. Forma 1 cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 11, în care compusul are formula structurală:

13. O compoziţie farmaceutică care cuprinde forma cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 12, şi un purtător sau diluant acceptabil farmaceutic.

14. Forma cristalină din oricare dintre revendicările 1 până la 12, sau compoziţia farmaceutică din revendicarea 13, pentru utilizare în tratarea unei boli sau tulburări asociate cu proliferarea celulară.

15. Forma cristalină pentru utilizare sau compoziţia farmaceutică pentru utilizare din revendicarea 14, în care boala este cancer.