LV15485B

LV15485B - Selenofēnhromenonu hidroksāmskābes, to izgatavošana un izmantošana angioģenēzes inhibīcijā

Info

Publication number: LV15485B
Application number: LVP-18-72A
Authority: LV
Inventors: Pavels Arsenjans; Arsenjans Pavels; Jeļena VASIĻJEVA; VASIĻJEVA Jeļena; Ilona Domračeva; DOMRAČEVA Ilona
Original assignee: Latvijas Organiskās Sintēzes Institūts
Priority date: 2018-09-13
Filing date: 2018-09-13
Publication date: 2020-06-20
Also published as: WO2020053639A1; CA3111351A1; US20210403486A1; LV15485A; JP2022500356A; EP3849988B1; AU2018440927A1; CN112654628A; EP3849988A1

Abstract

1. Savienojums ar vispārējo formulu I: kur: R1 ir halogēna atoms (piem. Br), R2 ir C1-4-alkil-N-heterociklilgrupa, tā optiskie izomēri, polimorfi un farmaceitiski pieņemamie skābes pievienošanās sāļi, hidrāti un solvāti. 2. Savienojums saskaņā ar 1. pretenziju izmantošanai par medikamentu tādu slimību ārstēšanai, kurā angioģenēzes inhibīcija ir nepieciešama vai vēlama. 3. Savienojums saskaņā ar 1. vai 2. pretenziju, kur savienojums ir izvēlēts no grupas, kas satur: 7-Brom-N-hidroksi-8-((4-metilpiperazin-1-il)metil)-2-okso-2Hselenofēn[3,2-h]hromēn-3-karboksamīdu; 7-Brom-N-hidroksi-8-(piperazin-1 -ilmetil)-2-okso-2Hselenofēn[3,2-h]hromēn-3-karboksamīdu; 7-Brom-N-hidroksi-8-(2-(piperazin-1-il)etil)-2-okso-2Hselenofēn[3,2-h]hromēn-3-karboksamīdu; 8-((1 ,4-Diazepan-1-il)metil)-7-brom-N-hidroksi-2-okso-2Hselenofēn[3,2-h]hromēn-3-karboksamīdu; un tā farmaceitiski pieņemamus enantiomērus, diastereomērus, racemātus un to sāļus. 4. Savienojums saskaņā ar jebkuru no 1. līdz 3. pretenzijai, kur savienojumam ir sekojoša struktūra: 5. Paņēmiens, savienojumu saskaņā ar 1. pretenziju, sintēzei kur: R1 ir halogēna atoms (piem. Br); R2 ir C1-4-alkil-N-heterociklilgrupa; no savienojuma, kas izvēlēts no starpproduktiem 5-8: kur: R ir C1-4alkil-N-heterociklilgrupa, apstrādājot ar hlorūdeņradi; kur starpprodukti 5-8 tika iegūti no sākotnējiem savienojumiem 1-4:

Description

Izgudrojuma apraksts

Izgudrojums attiecas uz jaunām selenofenhromenona hidroksāmskābēm, kuras var darboties kā angioģenēzes inhibitor!, to sintēzes metodēm un izmantošanu farmakoloģisku kompozīciju veidošanā dažādu slimību ārstēšanai vai profilaksei.

Zināmā tehnikas līmeņa analīze

Ļaundabīgie audzēji ir viens no galvenajiem mirstības cēloņiem visās vecuma grupās. Audzēju augšana ir sarežģīts daudzpakāpju process. Audzēja rašanās un attīstība ir atkarīga gan no audzēja šūnu īpašībām, gan no organisma imūnsistēmas stāvokļa. Šie apstākļi ir iemesls pretvēža terapijas metožu daudzveidībai: ķirurģijai, staru terapijai, ķīmijterapijai un imūnterapijai. Šo metožu mērķis ir samazināt audzēja apjomu. Matricas metālproteināzes (MMP) stimulē audzēja invāziju un metastāžu veidošanos, noārdot ārpusšūnas matriksu. Nelielas molekulas ar hidroksāmskābes grupu ir efektīvas ne tikai vēža terapijas jomā, bet ari kā vielas, kas novērš mutagenitāti. \J Adv Pharm Technol Res. 2012, 3, 92-99].

No hidroksāmskābes atvasinājumiem, SAHA {Suberoylanilide Hydroxamic Acid) ir atzīts kā potenciāls pretvēža savienojums ādas T-šūnu limfomas {cutaneous T cell lymphoma) ārstēšanai. Arī vairākas citas hidroksāmskābes ir apstiprinātas kā medikamenti pretvēža terapijā, piemēram, Batimastat - pretvēža medikaments, kas pieder angioģenēzes inhibitoru grupai; Ilomastat - plaša spektra MMP inhibitors, kā ari Marimastat - antineoplastisks medikaments.

Salicilhidroksāmskābei ir pierādīts prettuberkulozes efekts gan in vivo, gan in vitro pētījumos [Antimicrob Agents Chemother. 1977, 11, 753-5]. Ir atrasts, kā stēriski apgrūtinātām sulfonamīdu hidroksāmskābēm piemīt spēja mazināt MMP-1 un MMP-13 aktivitāti. Metaboliski stabilāki savienojumi šajā sērijā satur monociklisku vai biciklisku pirānu savienotu ar hidroksamātgrupu [Bioorg Med Chem Lett., 2004, 14, 3389-3395; Bioorg Med Chem Lett. 2011, 21, 6440-6445]. Bez tam, MMP 10 (stromelizīns 2) pārmērīga ekspresija palielina plaušu vēža cilmes līdzīgo šūnu (CSC) [PLoS One, 2012, 7, e35040],

Mūsu nesenie pētījumi liecina, ka 2/7-selenofen[3,2-/z]hromēni ir potenciāli izmantojami kā antimetastātiski savienojumi karcinomas un melanomas gadījumos. Šie atvasinājumi uzrāda zemu akūto toksiskumu un gandrīz pilnībā (98 %) novērš metastāžu veidošanos 4T1 piena dziedzeru karcinomai in vivo (Balb/c peļu mātītēm), ka ari par 82 % samazina melanomas B16-F10 izraisīto metastāžu daudzumu plaušās, neradot nevēlamus blakusefektus [WO2018015788 (AI)].

Diemžēl pēdējo gadu laikā gandrīz divkārt pieaudzis diagnosticēto vēža gadījumu skaits. Klīnikā ļaundabīgo audzēju ārstēšanā tiek plaši izmantota ķīmijterapija. Vairumā gadījumu novērojami tādi nevēlami blakusefekti kā augsts toksiskums un maz izteikta selektivitāte. Viens no galvenajiem medicīniskās ķīmijas un farmācijas industrijas mērķiem ir netoksisku un selektīvu jaunas paaudzes pretvēža savienojumu radīšana.

Izgudrojuma būtība

Esam noskaidrojuši, ka atsevišķām selenofenhromenona hidroksāmskābēm piemīt spēja inhibēt MMP un darboties par angioģenēzes inhibitoriem. Šīs savienojumu īpašības iespējams izmantot dažādu slimību ārstēšanā un/vai novēršanā, kas saistītas ar šūnu proliferāciju. Šīs substances iespējams uzņemt farmaceitisku kompozīciju veidā, kurās tās apvienotas ar vienu vai vairākiem (farmaceitiski pieņemamiem) šķīdinātājiem, nesējiem vai palīgvielām.

Izgudrojuma mērķis

Pētījuma mērķis ir radīt jaunus farmaceitiskus savienojumus, kuri spēj inhibēt matricas metālproteināzes un kurus iespējams izmantot kā angioģenēzes inhibitorus, šo savienojumu sintēzes metodes, kā arī slimību, kuru pamatā ir paaugstināta MMP ekspresija, ārstēšanas/novēršanas metodes.

Izgudrojuma kopsavilkums

Mes atklajam savienojumus, kas izvēlēti no savienojumu grupas ar Formula I kur:

Ri ir halogēna atoms (piem. Br);

R2 ir Ci-4-alkil-N-heterociklilgrupa.

Kā šeit lietots, termins alkilgrupa attiecas uz taisnu vai sazarotu ogļūdeņražu ķēdi, kurā ir norādītais oglekļa atomu skaits.

Piemēram, C1-C12 alkilgrupa norāda, ka alkilgrupā var būt no 1 līdz 12 (ieskaitot) oglekļa atomu. Termins alkilēngrupa attiecas uz diaizvietotu alkilgrupu, piemēram, -CH2-, CH2CH2-, -CH2CH2CH2- vai -СНгСН(СНз)СН2-. Alkilgrupa vai alkilēngrupa neobligāti var būt aizvietota.

Termins cikloalkilgrupa, kā lietots šeit, attiecas uz nearomatiskiem, piesātinātiem vai daļēji nepiesātinātiem cikliskajiem, bicikliskiem, tricikliskiem vai policikliskiem ogļūdeņražu grupām ar 3 līdz 12 oglekļa atomiem.

Jebkurš gredzena atoms var būt aizvietots (piemēram, ar vienu vai vairākiem aizvietotājiem). Cikloalkilgrupās var būt kondensētie gredzeni. Sakausēti gredzeni ir gredzeni, kuriem ir viens vai vairāki parastie oglekļa atomi. Cikloalkilgrapu piemēri ir (bet ne tikai) ciklopropilgrupa, ciklobutilgrupa, ciklopentilgrupa, cikloheksilgrupa, cikloheksenilgrupa, cikloheksadienilgrupa, metilcikloheksilgrupa, adamantil-, norbomil- un norbomenilgrupa.

Termins alkenilgrapa attiecas uz taisnu vai sazarotu ogļūdeņražu ķēdi, kurā ir viena vai vairākas dubultsaites. Alkenilgrupu piemēri ir, bet neaprobežojas ar, alilgrupu, propenilgrupu, 2-butenilgrupu, 3-heksenilgrupu un 3-oktenilgrupu. Viens no divkāršās saites oglekļa atomiem pēc izvēles var būt alkenilaizvietotāja piestiprināšanas punkts. Termins alkenilēns attiecas uz diaizvietotu alkenilgrupu, piemēram, -CH=CH-, -СН^СНгСНг- vai CH=C=CH-,

Termins heterociklilgrupa, kā lietots šeit, attiecas uz nearomātisku, piesātinātu vai daļēji nepiesātinātu 3-10 locekļu monociklisku, 8-12 locekļu biciklisku vai 11-14 locekļu triciklisku gredzenu sistēmu, kas satur 1-3 heteroatomus, ja tā ir monocikliska, 1-6 heteroatomus, ja tā ir bicikliska vai 1-9 heteroatomus, ja tā ir tricikliska. Minētie heteroatomi, izvēlēti no Ο, N, S, Si un P (piemēram, oglekļa atoms un 1-3, 1-6 vai 1-9 heteroatomi Ο, N, S, Si un P, ja attiecīgi, tie ir monocikliski, bicikliski vai tricikliski). Jebkurš gredzena atoms var būt aizvietots (piemēram, ar vienu vai vairākiem aizvietotājiem). Heterociklilgrupas var saturēt kondensētos gredzenus, tie ir gredzeni, kuriem ir viens vai vairāki atomi.

Heterociklilgrupu piemēri ir tetrahidrofurāns, tetrahidrotiofens, tetrahidropirāns, piperidīns, piperazīns, homopiperazīns, morfolīns, pirolīns, pirimidīns, pirolidīns, indolīns, tetrahidropiridīns, dihidropirāns, tiantrēns, pirāns, benzopirāns, ksantēns, fenoksatīns, fenotiazīns, furazāns, laktoni, laktāti, piemēram, azetidinoni un pirolidīnoni, sulfāti, sultoni un tamlīdzīgi.

Termins halogēns, kā tiek lietots šeit, attiecas uz fluoru, hloru, bromu un jodu.

Šīs informācijas izklāsts ietver jebkuru racēmisku, optiski aktīvu, polimorfu, tautomēru vai stereoizomēru formu vai to maisījumu no savienojuma, kuram piemīt šeit aprakstītās derīgās īpašības.

Gadījumos, kad savienojumi ir pietiekami bāziski vai skābi, lai veidotu stabilus ne toksisku skābju vai bāžu sāļus, savienojumu izmantošana par farmaceitiski pieņemamiem sāļiem var būt piemērota. Izgudrojuma realizācijas piemēru ietvaros farmaceitiski pieņemamu sāļu piemēri ir organiskās skābes pievienošanās sāļi, kas veidoti ar skābēm, kuras veido fizioloģiski pieņemamu anjonu un neorganiskus sāļus.

Specifiskie savienojumi ar formulu I šajā izgudrojumā ietver, bet neaprobežojas ar:

7-Brom-A-hidroksi-8-((4-metilpiperazin-l-il)metil)-2-okso-2/7-selenofen[3,2-/z]hrornēn-3karboksamīds;

7-Brom-V-hidroksi-8-(piperazin-l-ilmetil)-2-okso-27/-selenofen[3,2-A]hromēn-3karboksamīds;

7-Brom-V-hidroksi-8-(2-(piperazin-l-il)etil)-2-okso-2/7-selenofen[3,2-/?]hromēn-3karboksamīds;

8-((1,4-Diazepan-l-il)metil)-7-brom-V-hidroksi-2-okso-2/7-seleno fen[3,2-A]hromēn-3karboksamīds.

Izgudrojuma detalizēts izklāsts

Termins alkilgrupa attiecas uz taisnu vai sazarotu ogļūdeņražu ķēdi, kurā ir norādītais oglekļa atomu skaits.

Piemēram, C1-C12 alkilgrupa norāda, ka alkilgrupā var būt no 1 līdz 12 (ieskaitot) oglekļa atoms/i. Termins alkilēngrupa attiecas uz diaizvietotu alkilgrupu, piemēram, -CH2-, CH2CH2-, -CH2CH2CH2- vai -СН2СН(СНз)СН2-. Alkilgrupa vai alkilēngrupa neobligāti var būt aizvietota.

Jebkurš gredzena atoms var būt aizvietots (piemēram, ar vienu vai vairākiem aizvietotājiem). Cikloalkilgrupās var būt kondensētie gredzeni. Sakausēti gredzeni ir gredzeni, kuriem ir viens vai vairāki parastie oglekļa atomi. Cikloalkilgrupu piemēri ir (bet ne tikai) ciklopropilgrupa, ciklobutilgrupa, ciklopentilgrupa, cikloheksilgrupa, cikloheksenilgrupa, cikloheksadienilgrupa, metilcikloheksilgrupa, adamantil-, norbomil- un norbomenilgrupa.

Termins alkenilgrupa attiecas uz taisnu vai sazarotu ogļūdeņražu ķēdi, kurā ir viena vai vairākas dubultsaites. Alkenilgrupu piemēri ir, bet neaprobežojas ar, alilgrupu, propenilgrupu, 2-butenilgrupu, 3-heksenilgrupu un 3-oktenilgrupu. Viens no divkāršās saites oglekļa atomiem pēc izvēles var būt alkenilaizvietotāja piestiprināšanas punkts. Termins alkenilēns attiecas uz diaizvietotu alkenilgrupu, piemēram, -CH=CH-, -СН=СНгСН2- vai CH=C=CH-,

Termins heterociklilgrupa, kā lietots šeit, attiecas uz nearomātisku, piesātinātu vai daļēji nepiesātinātu 3-10 locekļu monociklisku, 8-12 locekļu biciklisku vai 11-14 locekļu triciklisku gredzenu sistēmu, kas satur 1-3 heteroatomus, ja tā ir monocikliska, 1-6 heteroatomus, ja tā ir bicikliska vai 1-9 heteroatomus, ja tā ir tricikliska. Minētie heteroatomi, izvēlēti no Ο, N, S, Si un P (piemēram, oglekļa atomi un 1-3, 1-6 vai 1-9 heteroatomi Ο, N, S, Si un P, ja tie, attiecīgi, ir monocikliski, bicikliski vai tricikliski). Jebkurš gredzena atoms var būt aizvietots (piemēram, ar vienu vai vairākiem aizvietotājiem). Heterociklilgrupas var saturēt kondensētos gredzenus, tie ir gredzeni, kuriem ir viens vai vairāki atomi. Heterociklisko grupu piemēri ir tetrahidrofurāns, tetrahidrotiofens, tetrahidropirāns, piperidīns, piperazīns, homopiperazīns, morfolīns, pirolīns, pirimidīns, pirolidīns, indolīns, tetrahidropiridīns, dihidropirāns, tiantrēns, pirāns, benzopirāns, ksantēns, fenoksatīns, fenotiazīns, furazāns, laktoni, laktāti, piemēram, azetidinoni un pirolidīnoni, sulfāti, sultoni un tamlīdzīgi.

Gadījumos, kad savienojumi ir pietiekami bāziski vai skābi, lai veidotu stabilus ne toksisku skābju vai bāžu sāļus, savienojumu izmantošana par farmaceitiski pieņemamiem sāļiem var būt piemērota. Šī izgudrojuma realizācijas piemēru ietvaros farmaceitiski pieņemamu sāļu piemēri ir organiskās skābes pievienošanās sāļi, kas veidoti ar skābēm, kuras veido fizioloģiski pieņemamu anjonu un neorganiskus sāļus.

1. Shēmā ir attēlota izgudrojuma formulas I savienojumu iegūšanas ceļš. Visi izejmateriāli 1-4 ir sintezēti pēc metodēm, kuras aprakstītas publikācijā WO 02/018015788 (AI), starpprodukti 5-8 - ar paņēmieniem, kas labi pazīstami attiecīgās jomas lietpratējam. Šī izgudrojuma visi gala savienojumi ir sintezēti, izmantojot procedūras, kas ir aprakstītas zemāk vai ar tām pielīdzināmām procedūrām, kuras būtu labi zināmas attiecīgās jomas lietpratējam. Visi mainīgie, kas tiek izmantoti shēmās, ir definēti tālāk vai kā norādīts pretenzijās.

1. Shēma. Savienojumu ar formulu I vispārīgā sintēzē

Reakcijas apstākļi: a: THP-ONH₂, HOBt, EDCxHCl, NMM, DMF; b: HCl(Et₂O), DCM.

Mēs esam noskaidrojuši, ka selenofenhromenonkarbonskābju 1-4 apstrāde ar O(tetrahidro-2/7-piran-2-il)hidroksilamīnu 1-hidroksibenztriazola (0,8 mmol, 122 mg), V-(3dimetilaminopropil)-A-etilkarbodiimīda hidrohlorida un N-metilmorfolīna klātienē DMF, noved pie intermediātu 5-8 izveides ar 62-76 % iznākumiem. Tālāk, THP un Boc aizsarggrupas tika novāktas, izmantojot hidrogēnhlorīda šķīdumu dietilētera/DCM maisījumu. Vēlamās hidroksāmskābes 1-1 -1-4 tika izolētas ar filtrēšanu ar ļoti augstiem iznākumiem bez papildu tīrīšanas.

Izgudrojuma realizācijas piemēri

Izgudrojumā atklāto savienojumu sagatavošana ir aprakstīta turpmākajos piemēros, kuri ir paredzēti, lai ilustrētu, nevis ierobežotu izgudrojuma darbības jomu.

Turpmāk tekstā DMF definē kā Ν,Ν-dimetilformamīdu, DMSO kā dimetilsulfoksīdu, HCl kā sālsskābi, MeCN kā acetonitrilu, DIEA kā diizopropiletilamīnu, EtOAc kā etilacetātu.

Vispārīgā procedūra 7-brom-8-(aizvietota)-2-okso-N-((tetrahidro-2H-piran-2-il) oksi)-2Hselenofen[3,2-h hromēn-3-karboksamīdu 5-8 sintēzei: Hromēnkarbonskābe 1-4 (0,5 mmol), 1-hidroksibenztriazols (0,8 mmol, 122 mg) un O-(tetrahidro-2H-piran-2-il)hidroksilamīns (0,8 mmol, 94 mg) tika izšķīdināti DMF (10 ml). Tad pievieno N-metil-morfolīnu (1,3 mmol, 142 μΐ) un N-(3-dimetilaminopropil) -N'-etilkarbodiimīda hidrohlorīdu (1 mmol, 192 mg) un reakcijas maisījumu maisīja 12-24 h. DMF tika novākts pie pazemināta spiediena, sauso atlikumu mazgā ar metanolu un filtrē, iegūst tīrus intermediātus 5 un 6. Savukārt, intermediāti 7 un 8 tika attīrīti ar tiešās hromatogrāfijas palīdzību uz silikagēla (eluents: DCM / EtOAc = 10/1).

Intermediāts (5)

7-Brom-8-((4-metilpiperazin-l-il)metil)-2-okso-N-((tetrahidro-2H-piran-2-iI)oksi)-2Hselenofen[3,2-h]hromēn-3-karboksamīds (5) £ Iznākums, 76 %. ‘H-NMR (CDC1₃): 1,62-1,98 (m, 6H),

X J I н T J 2,51 (s, 3H, СНз), 2,65-2,89 (m, 8H), 3,69-3,73 (m, 1H), VSe 3,92 (s, 2H, NCH₂), 4,06-4,12 (m, 1H), 5,13-5,15 (m, n-a 1H), 7,68 (d, 1H), 7,77 (d, 1H), 9,00 (s, 1H), 11,05 (s,

1H);

¹³C-NMR (CDCI3): 18,3; 24,9; 27,9; 45,2; 52,1; 54,8;

58,5; 62,4; 102,3; 113,9; 116,6; 121,7; 125,5; 126,3;

146,4; 149,3; 151,7; 159,2; 160,3. ŠH-MS [M+l]: 584.

Intermediāts (6)

Terc-butil 4-((7-brom-2-okso-3-(((tetrahidro-2Z7-piran-2-il)oksi)karbamoil)-27/ selenofen[3,2-A]hromēn-8-il)metil)piperazīn-l-karboksilāts (6)

Boc

Iznākums, 64 %. Ή-NMR (CDCI3): 1,46 (s, 9H), 1,601,96 (m, 6H), 2,61-2,63 (m, 4H), 3,47-3,49 (m, 4H), 3,673,72 (m, 1H), 3,85 (s, 2H), 4,05-4,11 (m, 1H), 5,12-5,14 (m, 1H), 7,61 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 8,93 (s, 1H), 11,04 (s, 1H).

¹³C-NMR (CDCI3): 18,3; 24,9; 27,9; 28,3; 53,4; 58,8;

62,3; 79,8; 102,2; 106,0; 113,8; 116,5; 121,4; 125,4; 126,2; 146,3; 149,1; 151,6; 152,4; 154,6; 159,1; 160,1.

ŠH-MS [M+l]: 670.

Intermediāts (7)

Terc-butil 4-(2-(7-brom-2-okso-3-(((tetrahidro-2//-piran-2-iI)oksi)karbamoil)-2// selenofen[3^-A]hromēn-8-iI)etil)piperazīn-l-karboksilāts (7)

Iznākums, 69 %. Ή-NMR (CDCI3): 1,48 (s, 9H), 1,601,95 (m, 6H), 2,54-2,59 (m, 4H), 2,69 (t, 2H), 3,17 (t, 2H), 3,58-3,62 (m, 4H), 3,68-3,71 (m, 1H), 4,05-4,11 (m, 1H), 5,12-5,14 (m, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,69 (d, 1H), 8,87 (s, 1H), 11,05 (s, 1H).

^,3C-NMR (CDCI3): 18,3; 24,9; 27,9; 28,4; 29,6; 52,5;

56,0; 62,3; 79,7; 102,2; 108,5; 113,6; 115,9; 121,5;

125,4; 126,0; 127,5; 144,7; 148,1; 149,1; 151,5; 154,7;

159,2; 160,4. ŠH-MS [M+l]: 684.

Intermediate (8)

Terc-butil 4-((7-hrom-2-okso-3-(((tetrahidro-2//-piran-2-il)oksi)karbamoil)-2// selenofēn[3,2-A]hromēn-8-iI)metiI)-l,4-diazepān-l-karboksilāts (8)

Iznākums, 62 %. Ή-NMR (CDCh): 1,48 (s, 9H), 1,611,97 (m, 6H), 2,78-2,89 (m, 4H), 3,48-3,56 (m, 4H), 3,693,72 (m, 1H), 3,96 (s, 2H), 4,06-4,12 (m, 1H), 5,13-5,15 (m, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,73 (d, 1H), 8,97 (s, 1H), 11,06 (s, 1H). ŠH-MS [M+l]: 684.

Vispārīgā procedūra 8-(aizvietotu)-7-brom-N-hidroksi-2-okso-2H-selenofen[3,2-A] hromēn-3karboksamīdu (I-1-I-4) sintēzei: karboksamīda (5-8) (150-200 mg) šķīdumam dihlormetānā (15 ml) pievieno 1 N hidrogēnhlorida šķīdumu dietilēterī (5 ml). Reakcijas maisījumu maisa 12 h vai līdz izejvielas izžūšanai. Nogulsnes filtrē un žāvē, iegūstot tīru savienojumu (I-l-I4).

1. Piemērs

7-Brom-V-hidroksi-8-((4-metilpiperazin-l-il)metil)-2-okso-277-selenofen[3,2-A]hromen-3karboksamids (1-1) о

Iznākums, 84 %, k.p. > 200 °C. Ή-NMR (D2O): 2,99 (s, 3H), 3,15-3,76 (m, 8H), 4,08 (s, 2H), 7,18-7,20 (m, 2H), 8,09 (s, 1H). LC-MS [M+l]: 500. HRMS (ESI): Ci8Hi₈BrN₃O4Se, aprēķ. [M+l]: 499,9646, atrasts: 499,9726. Elementanalīze, aprēķ. (%) Ci8Hi₈BrN₃O4Se x

2,5 HC1: C 36,62; H 3,50; N 7,12; atrasts: C 36,54; H 3,63; N 6,91.

2. Piemērs

7-Brom-V-hidroksi-8-(piperazin-l-ilmetil)-2-okso-2/7-selenofen[3,2-/i]hromen-3 karboksamids (1-2) j? _oh Iznākums, 99 %, k.p. > 200 °C. ’H-NMR (DMSO-d₆): 2,90» 2,95 (m, 4H), 3,15-3,23 (m, 4H), 4,08 (s, 2H), 7,76 (d, 1H), fr ° °

Vse 8,02 (d, 1H), 8,85 (s, 1H), 9,04 (br s, 2H), 10,82 (br s, 1H).

x 3 HC1 n^-ŠH-MS [M+l]: 486. AEŠH tīrība: 98,4 % (pie UV 254 nm).

nh HRMS (ESI): CnHieBrNaCUSe, aprēķ. [M+l]: 485,9489, atrasts: 485,9569. Elementanalīze, aprēķ. (%)

С1?Н1бВгКзО48е х 3 НС1: С 34,34; Н 3,22; N 7,07; atrasts: С 34,28; Н 3,39; N 6,89.

3. Piemērs

7-Brom-A-hidroksi-8-(2-(piperazin-l-il)etil)-2-okso-2/7-selenofen[3,2-/z]hromēn-3karboksamids (1-3)

Iznākums, 99 %, k.p. > 200 °C. Ή-NMR (D₂O): 3,31-3,34 (m, 4H), 3,46-3,47 (m, 4H), 3,60-3,63 (m, 4H), 7,47-7,48 (m, 2H), 8,36 (s, 1H). ŠH-MS [M+l]: 500. AEŠH tīrība: 98,3 % (pie UV 254 nm). HRMS (ESI): Ci₈Hi₈BrN₃O₄Se, aprēķ. [M+l]: 499,9646, atrasts: 499,9743. Elementanalīze, aprēķ. (%) Ci₈Hi₈BrN₃O4Se x 3 HC1: C 35,52; H 3,48; N 6,90; atrasts: C 35,38; H 3,35; N 6,79.

4. Piemers

8-((1,4-Diazepan-l-il)metil)-7-brom-V-hidroksi-2-okso-2//-selenofen[3,2-A] karboksamids (1-4) hromen-310

Iznākums, 94 %. ‘H-NMR (DMSO-d₆): 1,94-2,00 (m, 2H), UL -он ί J I ^H 2,96-2,98 (m, 2H), 3,12-3,14 (m, 2H), 3,20-3,28 (m, 4H), W 4,21 (s, 2H), 7,71 (d, 1H), 7,89 (d, 1H), 8,70 (s, 1H). LC-MS

V-, [M+l]: 500. AEŠH tīrība: 97,7 % (pie UV 254 nm). HRMS (ESI): CisHisBrNaCUSe, aprēķ. [M+l]: 499,9646, atrasts: 499,9730. Elementanalīze, aprēķ. (%) CisHisBrNaCUSe x 3 HC1: C 35,52; H 3,48; N 6,90; atrasts: C 35,37; H 3,39; N

6,81.

Angioģenezes inhibīcija

Matricas metālproteināzes (MMP), hidrolizē ārpusšūnas matriksa komponentus. MMP ir būtiska nozīme tādos bioloģiskos procesos kā embrioģenēze, normālo audu atjaunošanās, brūču dzīšana, angioģenēze, kā arī slimību norisē, piemēram, ateromas, artrīta, vēža un čūlu veidošanās procesos. Ļaundabīgu audzēju šūnu invāzija un metastāžu veidošanās notiek daudzpakāpju procesā, kas sevī ietver starpšūnu adhēzijas tīkla izzušanu, ārpusšunas matriksa noārdīšanos un angioģenēzes indukciju. MMP-10 (stromelizīns 2) ir viena no mazāk izpētītajām metālproteināzēm, kura galvenokārt sastopama epitēlija šūnās un var veicināt audzēja šūnu invāziju, kā mērķi izmantojot kolagēnu, elastīnu un laminīnu. Paaugstināta MMP 10 ekspresija novērojama onkoloģiskajiem pacientiem ar resnās zarnas, žultspūšļa un urīnpūšļa vēzi.

MMP inhibīcija ar sintezētajiem selenofen[3,2-/z]hromēniem 1-1 - 1-4 tika noteikta ar aktivitātes noteikšanas reaģentu komplektu {MMP Inhibitor Fluorimetric Profiling kit) kā standarta inhibitoru izmantojot NNGH (V-izobutil-N-(4-metoksifenilsulfonil)glicilhidroksāmskābe). Negaidīti atklājām, ka jaunajai selenofen[3,2A]hromēnhidrokāmskābei 1-1 piemīt spēja selektīvi inhibēt MMP 10 aktivitāti līdz 97 % 20 μΜ koncentrācijā (ICso=l,92 μΜ, Tabulas 1 un 2). Savukārt, metilgrupas noņemšana no piperazilfragmenta (savienojums 1-2) noved pie selektivitātes zaudēšanas, 1-2 inhibē MMP-1, MMP-2, MMP-8, MMP-9, MMP-10, MMP-13 un MMP-14 ar IC₅₀ = 1,37 - 6,27 μΜ. Visaktīvākais ir atvasinājums 1-3 ar IC50 = 0,96 μΜ aktivitāti uz MMP-10. Jāatzīmē, ka MMP-3, MMP-7 un MMP-12 nav jutīgi pret šiem savienojumiem.

MMP tests: MMP enzīmu inhibitori tika noteikti, izmantojot aktivitātes noteikšanas reaģentu komplektu {MMP Inhibitor Fluorimetric Profiling kit; Biomol, USA) atbilstoši ražotāju prasībām. MMP aktivitātes testi tika viekti 96-lauciņu platēs, izmantojot cilvēka тм rekombinanto MMP-1-10, 12 - 14 katalitiskos domēnus un OmniMMP fluorogēno substrātu Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH₂. Pētāmie savienojumi (20 μΜ) tika izšķīdināti DMSO. NNGH (A-izobutil-N-(4-metoksifenilsulfonil)-glicilhidroksāmskābe) tika izmantota kā standarta inhibitors. Substrāta hidrolizēs līmenis tika noteikts mērot fluorescences intensitāti 10 min 37 °C, izmantojot fluorescences plašu lasītāju (Tecan infinite Ml000, Austria) pie 328 nm ierosināšanas un 420 nm emisijas. Datu analīze tika veikta izmantojot programmu Graph Pad Prism® 3.0.

ММР 14	СЧ -н оо	сч сэ 1— -н ст	04 Ογ о -Н 00 00^ СП
		1Г)	ип
2		со	о
CU		о -н	-Н
я S	пе	^Г1 ЧО
12
Си
S
	пе	0> Й	О Й
	СТ'	ич
о	о	00	сч
	о	сГ	о'
Он	-н	-н	-н
S	СЧ		40
S		1——<	<о
о\		Г—t	о
CU		-н	-Н
	>20	00	40 о_ »—<
		мп	т1-
00		сч	»——t
Си		-н	-н
S	20		т—-и 40^ 1—<

си
я	о
Ž.	СЧ Л	Й	Q Й
сп
Сч
S	О	о	о
S	Л	Л	Л
		00	00
<м			о
CU		-н	-н
S	20	т·^	CO »“·<
		’З’	ип
		ип	00
		o'	о’
Си		-Н	-Н
S	>20	ΠΊ ογ кГ	40 'О 4©

о' е я сл ',31 1,71±0,18 пе 4,74±0,95 4,04±0,97

Claims

PRETENZIJAS

1. Savienojums ar vispārējo formulu I:

О

R₂ kur:

Ri ir halogēna atoms (piem. Br),

R2 ir Ci-4-alkil-N-heterociklilgrupa, ta optiskie izomeri, polimorfi un farmaceitiski pieņemamie skābes pievienošanās sāļi, hidrāti un solvāti.
2. Savienojums saskaņa ar 1. pretenziju izmantošanai par medikamentu tādu slimību ārstēšanai, kurā angioģenēzes inhibīcija ir nepieciešama vai vēlama.
3. Savienojums saskaņā ar 1. vai 2. pretenziju, kur savienojums ir izvēlēts no grupas, kas satur:

7-Brom-A-hidroksi-8-((4-metilpiperazin-1 -il)metil)-2-okso-277-selenofen[3,2-/?]hromēn-3 karboksamīdu;

7-Brom-A-hidroksi-8-(piperazin-l-ilmetil)-2-okso-277-selenofen[3,2-/?]hromēn-3karboksamīdu;

7-Brom-A-hidroksi-8-(2-(piperazin-l-il)etil)-2-okso-2/7-selenofen[3,2-/j]hromēn-3karboksamīdu;

8-((1,4-Diazepan-l-il)metil)-7-brom-A-hidroksi-2-okso-2#-selenofen[3,2-/z]hromēn-3karboksamīdu;

un tā farmaceitiski pieņemamus enantiomērus, diastereomērus, racemātus un to sāļus.
4. Savienojums saskaņā ar jebkuru no 1. līdz 3. pretenzijai, kurā savienojumam ir sekojoša struktūra:
5. Paņēmiens, savienojumu saskaņā ar 1. pretenziju, sintēzei

kur:

Ri ir halogēna atoms (piem. Br);

R2 ir Ci-4-alkil-N-heterociklilgrupa;

no savienojuma, kas izvēlēts no starpproduktiem 5-8:

Rir Ci^alkil-N-heterociklilgrupa, apstrādājot ar hlorudeņradi;

kur starpprodukti 5-8 tika iegūti no sākotnējiem savienojumiem 1-4:

kur:

R ir Ci-4alkil-N-heterociklilgrupa, apstrādājot ar O-(tetrahidro-2H-piran-2-il)hidroksilamīnu, 1-hidroksibenztriazolu un N-(3dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimīdahidrohlorīdu.