LU508779B1

LU508779B1 - Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des Überlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen

Info

Publication number: LU508779B1
Application number: LU508779A
Authority: LU
Inventors: Kailiang Zhou
Original assignee: The Second Affiliated Hospital Of Wenzhou Medical Univ Yuying Childrens Hospital Of Wenzhou Medical
Priority date: 2024-11-04
Filing date: 2024-11-04
Publication date: 2025-05-05

Abstract

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der biomedizinischen Technologie, insbesondere die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des Überlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen, mit einer Konzentration von 1 mg/ml in C57BL6 Mäusen: männlich, 8 Wochen, mit einem Gewicht von etwa 20 g, dorsale Hautlappen angehoben und injiziert in-situ, mit nur einer Behandlung; Vorteilhafte Effekte sind: die Anwendung von SCTCs-ABs, die in der vorliegenden Erfindung zur Förderung des Überlebens von extralangen Hautlappen vorgeschlagen werden, durch SCTCs-ABs haben einen offensichtlichen anti-ischämischen Nekrose-Effekt von Hautlappen, haben einen offensichtlichen Effekt auf die Verbesserung des Blutflusses von Hautlappen, haben einen besseren Effekt auf die Förderung der Kollagenreparatur während des Überlebens von Hautlappen und haben einen guten Effekt auf die Förderung der Mikroangiogenese von Hautlappen. Bild 1

Description

Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des Uberlebens von ultra-langen LU508779 zufilligen Hautlappen

Technischer Bereich

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der biomedizinischen Technologie, insbesondere auf die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des Uberlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen.

Technologie im Hintergrund

In den letzten Jahren ist der zufällige Lappen ein gängiger Wiederherstellungslappen, der zur Reparatur von Hautdefekten verwendet wird, die aus verschiedenen Gründen entstanden sind (z. B. Trauma, angeborene Erkrankungen, Krebsresektion, Diabetes mellitus). Wenn das

Verhältnis von Länge zu Breite des Lappens jedoch 1,5:1 übersteigt, wird das distale Ende des

Lappens schlecht durchblutet, was zu Nekrosen unterschiedlichen Ausmaßes führt, was die klinische Anwendung des Lappens stark einschränkt. Die Vorbeugung und Behandlung von ischamischen Nekrosen am distalen Ende des Randomisierungslappens ist der Schlüssel zu einer erfolgreichen Operation.

Die derzeitigen Behandlungsmethoden sind jedoch nicht ideal. Jüngste Studien haben gezeigt, dass apoptotische Korper (Apoptotic bodies, ABs), die in benachbarten Geweben produziert werden, von den umliegenden Zellen aufgenommen werden können und die

Zellproliferation fordern. Dies deutet darauf hin, dass von Hautbindegewebszellen (Skin connective tissue cells, SCTCs) stammende ABs ein großes therapeutisches Potenzial haben könnten. Die Verabreichung von Staurosporin (Staurosporine, STS) löste Apoptose aus, um

SCTCs-ABs zu produzieren, die nach differentieller Zentrifugation isoliert und gereinigt wurden. Es wurde auch festgestellt, dass SCTCs-ABs den Blutfluss verbesserten, die

Kollagenreparatur und die Mikroangiogenese fôrderten. Darüber hinaus gibt es keine Berichte darüber, dass SCTCs-ABs das Überleben von zufälligen Hautlappen beeinflussen können.

Daher muss die Rolle von SCTCs-ABs bei der Förderung des Uberlebens überlanger

Lappen untersucht werden. Aus diesem Grund ist es notwendig, eine Studie über die Rolle von

SCTCs-ABs bei der Förderung des Uberlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen vorzuschlagen.

Inhalt der Erfindung

Ziel der vorliegenden Erfindung ist es, die Anwendung von SCTCs-ABs zur Förderung des Uberlebens von ultralangen Hautlappen bereitzustellen, um die oben genannten Probleme aus dem Stand der Technik zu 16sen, mit dem Ziel, das Uberleben von ultralangen Hautlappen zu fördern.

Um das oben genannte Ziel zu erreichen, bietet die vorliegende Erfindung die folgende technische Lösung: die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des Uberlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen wird als einmalige Behandlung in einer Konzentration von 1 mg/ml in C57BL6-Mäusen verwendet: Männchen, 8 Wochen alt, mit einem Gewicht von etwa 20 g, dorsale Lappen angehoben und in situ nur einmal injiziert.

Vorzugsweise handelt es sich bei den SCTCs-ABs um epitheliale Bindegewebszellen von

Mäusen, die in einem Medium mit hohem Glukosegehalt kultiviert werden. Nach 12 Stunden

Stimulation durch Verabreichung von Astrocystin STS 0,5 uM werden die Zelltrimmer durch differenzielle Zentrifugation bei 300 g*5 Minuten und der Uberstand bei 2000 g*30 Minuten entfernt, und das Präzipitat wird in PBS resuspendiert und so bald wie möglich bei 4 °C appliziert oder für eine Langzeitlagerung bei -80 °C aufbewahrt.

Vorzugsweise wird das Arzneimittel als eine Konzentration von SCTCs-ABs konfiguriert-U508779 die mit BCA-Haar gemessen und mit PBS auf eine Konzentration von 1 mg/ml verdiinnt wird.

Vorzugsweise wird der Wirkstoff an durchschnittlich 8 Stellen in situ mit einer

Mikroinjektionsnadel verabreicht, nachdem der dorsale Hautlappen bei Mäusen angehoben wurde.

Vorzugsweise wird die Rolle von SCTCs-ABs bei der Förderung der Lebensfähigkeit von ultralangen, willkürlichen Lappen zur Verbesserung des Blutflusses untersucht.

Vorzugsweise ist die Rolle von SCTCs-ABs bei der Förderung der Kollagenreparatur bei der Förderung der Lebensfähigkeit von ultralangen, unregelmäßigen Hautlappen eingeschlossen.

Vorzugsweise wird die Rolle von SCTCs-ABs bei der Förderung der Kollagenreparatur zur

Förderung der Lebensfähigkeit von ultralangen zufälligen Lappen einbezogen.

Die vorteilhafte Wirkung der vorliegenden Erfindung im Vergleich zum Stand der Technik ist:

Die vorliegende Erfindung schlägt die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des

Überlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen vor, durch die SCTCs-ABs einen offensichtlichen anti-ischämischen Nekrose-Effekt von zufälligen Hautlappen, einen offensichtlichen Effekt auf die Verbesserung des Blutflusses von zufälligen Hautlappen, einen besseren Effekt auf die Förderung der Kollagenreparatur während des Uberlebens von zufälligen Hautlappen und einen guten Effekt auf die Förderung der Mikroangiogenese von zufälligen Hautlappen haben.

Beschreibung der beigefügten Zeichnungen

Bild 1 zeigt die Rasterelektronenmikroskopie und Marker-Identifikation von SCTCs-ABs der vorliegenden Erfindung;

Bild 2 zeigt den Vergleich der Lappenüberlebensfläche in der Kontrollgruppe, der

PBS-Gruppe und der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe 7 Tage nach der Operation der vorliegenden Erfindung;

Bild 3 zeigt einen Vergleich des Blutperfusionsvolumens in der Kontrollgruppe, der

Bild 4 zeigt einen Vergleich der Förderung der Kollagenreparatur in der Kontrollgruppe, der PBS-Gruppe und der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe 7 Tage nach der Operation der vorliegenden Erfindung;

Bild 5 zeigt eine vergleichende Grafik der Förderung der mikrovaskulären Verbesserung in der Kontrollgruppe, der PBS-Gruppe und der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe 7 Tage nach der

Operation der vorliegenden Erfindung.

Detaillierte Beschreibung

Um den Zweck der vorliegenden Erfindung, die technischen Lösungen für eine klare und vollständige Beschreibung, und die Vorteile klarer zu verstehen, sind die folgenden

Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung im Detail in Verbindung mit den beigefügten

Zeichnungen beschrieben. Es sollte verstanden werden, dass die spezifischen

Ausführungsformen hierin beschrieben sind Teil der Ausführungsformen der vorliegenden

Erfindung, nicht alle der Ausführungsformen, nur für die Erklärung der Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung, und wird nicht verwendet, um die Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung zu begrenzen, alle anderen Ausführungsformen durch den normalen

Fachmann auf dem Gebiet erhalten, ohne dass kreative Arbeit unter der Prämisse des Schutze4U508779 des Anwendungsbereichs der vorliegenden Erfindung.

Ausführungsform 1

Die vorliegende Erfindung bietet eine technische Lösung: die Anwendung von

SCTCs-ABs in der Förderung des Überlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen unter

Verwendung einer Konzentration von 1 mg/ml bei C57BL6-Mäusen: männlich, 8 Wochen, mit einem Gewicht von etwa 20 g, dorsale Lappen angehoben und in situ für nur eine Behandlung injiziert. SCTCs-ABs waren epitheliale Bindegewebszellen von Mäusen, die in einem Medium mit hohem Glukosegehalt kultiviert und durch die Verabreichung von Astrocystin STS 0,5 uM für 12 Stunden stimuliert wurden. Zelluläre Rückstände wurden durch differentielle

Zentrifugation bei 300g*5min entfernt, und der Überstand wurde bei 2000g*30min abgetrennt, das Präzipitat wurde in PBS resuspendiert und so bald wie möglich bei 4°C appliziert oder für längere Zeit bei -80°C gelagert.

Das Medikament wurde als Konzentration von SCTCs-ABs konfiguriert, die mit

BCA-Haar gemessen und mit PBS auf eine Konzentration von 1mg/ml verdünnt wurde. Die

Verabreichungsmethode bestand darin, durchschnittlich 8 Stellen in situ mit einer

Mikroinjektionsnadel zu injizieren, nachdem der Dorsallappen der Mäuse angehoben wurde.

Ausführungsform 2

Ausgehend von Ausführungsform 1 wird Folgendes vorgeschlagen:

Die Stimulation der SCTCs induzierte die Produktion von ABs, die durch differentielle

Zentrifugation isoliert und gereinigt wurden.

Die subkutane Bindegewebszelllinie L-wnt3A wurde ausgewählt, in DMEM-Medium mit hohem Glukosegehalt (10 % fötales Rinderserum) kultiviert und 12 Stunden lang mit 0,5 uM

Stellatospondin (STS) stimuliert. Die verbleibenden Zelltrimmer wurden durch differenzielle

Zentrifugation bei 300 g * 5 Minuten entfernt, und der Uberstand wurde bei 2000 g * 30

Minuten abgetrennt; das Präzipitat wurde in PBS resuspendiert und entweder so schnell wie möglich bei 4 °C appliziert oder bei -80 °C für längere Zeit gelagert .

Rasterelektronenmikroskopie: Zentrifugation zum Sammeln der SCTCs-ABs nach

Verwerfen des Mediums und vorsichtigem Spülen mit PBS, Verwerfen von PBS plus

Elektronenmikroskop-Fixiermittel und Aufblasen der in dem Fixiermittel suspendierten Zellen, die bei Raumtemperatur 2 Stunden lang fixiert wurden. Die fixierten Proben wurden dreimal mit 0,1 M Phosphatpuffer PBS (PH7,4) für jeweils 15 Minuten gespült. 0,1 M Phosphatpuffer

PBS (PH7,4) mit 1 % Osmiumsäure wurde bei Raumtemperatur fixiert und für 1 bis 2 Stunden vor Licht geschützt. 0,1 M Phosphatpuffer PBS (PH7,4) wurde dreimal für jeweils 15 Minuten gespült. Die Gewebe wurden nacheinander für Jeweils 15 Minuten in 30%-50%-70%-80%-90%-95%-100%-100% Alkohol und für 15 Minuten in Isoamylacetat dehydriert. Danach wurden die Proben zum Trocknen in einen Kritisch-Punkt-Trockner gegeben. Dann wurden die Proben auf das doppelseitige Klebeband aus leitfähigem

Kohlenstofffilm geklebt und für ca. 30 Sekunden in die Probenbühne des Ionen-Sputtergeräts zum Goldsprühen gelegt. Schließlich wurde die Probe unter dem Rasterelektronenmikroskop betrachtet. (Siehe Bild 1)

Western Blotting zum Nachweis von Oberflächenmarkern: extrahierte SCTCs-ABs und

SCTCs wurden mit 50ul RIPA-Zelllysat + 1ul PMSF pro 100ug versetzt, 30 Minuten lang auf

Eis lysiert und anschließend fünfmal 5s*3Mal mit Ss Intervall mit Ultraschall lysiert.

Zentrifugieren bei 12000 U/min für 30 Minuten, um das Präzipitat zu entfernen, und der

Überstand wurde in einer Standardmenge von 20ug Protein pro 20ul Volumen nach BCA für did 508779

Proteinkonzentration verteilt. Die Proteine wurden durch

Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) aufgetrennt und durch

Elektrotransfer auf eine Polyvinylidendifluorid-Membran (PVDF) übertragen. Die Membranen wurden mit 5% Magermilch verschlossen und über Nacht bei 4°C mit den folgenden

Antikörpern nachgewiesen: H3 (1:1000), H2B (1:1000), CIQC (1:1000), C3B (1:1000),

Capase-3 (CASP-3, 1:1000), B-Actin (1:1000). Nach 2 Stunden Inkubation mit sekundären

Antikörpern wurden die Banden mit dem ECL-Plus-Kit sichtbar gemacht. Die Intensität der einzelnen Banden wurde mit der Software Image Lab 3.0 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) gemessen. (siehe Bild 1)

Herstellung eines ultralangen Hautlappenmodells nach dem Zufallsprinzip: 90 gesunde männliche C57BL/6-Mäuse mit einem Gewicht von 20-30 g wurden vom Experimental Animal

Centre of Wenzhou Medical University, SCXK[ZJ]2005-0019, zur Verfügung gestellt. Die

Mäuse wurden gemäß der Zufallszahlentabelle in drei Gruppen aufgeteilt: Kontrollgruppe, 30

Mäuse in der PBS-Kontrollgruppe und 30 Mäuse in der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe. Die

Mäuse wurden durch intraperitoneale Injektion von 1 % Natrium-Pentobarbital betäubt, in

Bauchlage fixiert, enthaart, mit Jodophor desinfiziert und abgetrocknet, und in der Mitte des

Rückens wurde ein rechteckiger kaudolateraler Random-Typ-Lappen mit einer Breite von 1,5 cm und einer Länge von 4,5 cm angelegt, wobei die Verbindungslinie zwischen den beiden

Beckenkämmen des Schwanzes der Mäuse als Schienbein verwendet wurde. Die Haut und das subkutane Gewebe wurden entlang der Designlinie eingeschnitten, um die oberflächliche

Schicht der tiefen Faszie zu erreichen, das subkutane Kapillarnetz blieb erhalten, und das subkutane Gewebe wurde von der oberflächlichen Oberfläche der tiefen Faszie getrennt, wobei bekannte Blutgefäße angetroffen wurden, die mit 4-0 Seidenfäden ligiert wurden. Nachdem der

Hautlappen vollständig angehoben war, wurde die Blutung vollständig gestillt, und der

Hautlappen wurde sofort mit unterbrochenen 4-0 medizinischen Mousse-Nähten verschlossen.

Jeder Lappen wurde in drei gleich große Zonen eingeteilt: Zone I (der kaudale Teil, der dem lockeren Lappen am nächsten liegt), Zone II und Zone III (der am weitesten distal gelegene

Teil), und der Peri-Inzisionsbereich wurde mit Jod-Povidon sterilisiert (siehe Bild 1).

SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe: 1 mg/ml SCTCs-ABs wurde mit einer Mikroinjektionsnadel in situ injiziert und gleichmäßig über den Lappen verteilt; PBS-Gruppe: die gleiche Dosis wurde in situ injiziert; Kontrollgruppe: es wurde nur die Modellierung ohne jegliche

Behandlung durchgefiihrt. Die Injektion erfolgte nur einmal intraoperativ. Um die durch den chirurgischen Eingriff verursachten Fehler zu verringern, wurden alle Eingriffe von einer

Person durchgeführt. (siehe Bild 1).

Ausführungsform 3

Auf der Grundlage von Ausführungsform 2 wird Folgendes vorgestellt: Ermittlung des

Lappenüberlebensflächenverhältnisses.

Am 7. postoperativen Tag wurde die Ebenheit des Lappens anhand hochwertiger

Fotografien bewertet. Überlebende und ischämische Bereiche wurden mit der Imag-Pro Plus

Bildgebungssoftware identifiziert. Der Prozentsatz der überlebenden Fläche wurde berechnet als [(überlebende Fläche)/(gesamte überlebende ischämische Fläche)] x 100 %.Die

Überlebensrate der SCTCS-ABs-Behandlungsgruppe war deutlich besser als die der

PBS-Gruppe. Die mittlere Uberlebensfliche der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe, der

PBS-Gruppe und der Kontrollgruppe betrug (83,98+4,91)%, (56,08+5,84)% bzw.

(59,53+6,25)%. Vergleicht man das Verhältnis der Lappenüberlebensfläche zwischen der mit/508779

SCTCs-ABs behandelten Gruppe und der PBS-Gruppe, so war der Unterschied statistisch signifikant (p < 0,05). Vergleicht man das Verhältnis der Lappenüberlebensfläche zwischen der

Kontroll- und der PBS-Gruppe, so war der Unterschied statistisch nicht signifikant (p > 0,05). 5 (Siehe Bild 2).

Ausführungsform 4

Auf der Grundlage von Ausführungsform 3 wird Folgendes vorgeschlagen: Die

Laser-Doppler-Durchflussmessung wird zur Messung der Neovaskularisierung verwendet.

Zur Messung des Blutflusses wurden sieben Tage postoperativ sechs Mäuse pro Gruppe betäubt und mit einem Laser-Doppler-Gerät gescannt. Der Blutfluss wurde mit einem

Perfusionsgerät quantifiziert und mit der Moor LDI Review Software berechnet. Der Blutfluss verbesserte sich in der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe, und die quantitativen

Blutflussmessungen waren im Vergleich zur PBS-Gruppe deutlich verbessert. Die

Durchblutung in der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe, der PBS-Gruppe und der

Kontrollgruppe betrug jeweils (377,40+40,92) PU, (361,40+14,46) PU und (257,60+21,80) PU.

Beim Vergleich zwischen der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe und der PBS-Gruppe war der

Unterschied statistisch signifikant (p < 0,05). Beim Vergleich der Kontroll- und der

PBS-Gruppe war der Unterschied nicht statistisch signifikant (p > 0,05). (Siehe Bild 3).

Ausführungsform 5

Auf der Grundlage von Ausführungsform 4 wird vorgeschlagen, dass: das Lappenkollagen durch Masson-Färbung (Masson) beobachtet wurde.

Sieben Tage nach der Operation, nachdem die Tiere eingeschläfert worden waren, wurden in jeder Gruppe sechs 1 cm x 1 cm große Gewebeproben aus dem Bereich II (mittlere Position) des Hautlappens entnommen.

Die Gewebe wurden zur Fixierung in 4 %iges Paraformaldehyd getaucht, dehydriert und in Paraffin eingebettet. Anschließend wurden die Proben quer geschnitten, um 4-um-Schnitte zu erstellen, und die auf Poly-L-Lysin-beschichtete Schnitte montierten Schnitte wurden einer

Matson-Färbung unterzogen. Unter einem 200-fachen Lichtmikroskop wurden sechs Bereiche jedes Schnittsatzes ausgewählt, und Image J berechnete den prozentualen Anteil des Kollagens in der gesamten Hautschicht, um die Menge des in der Haut enthaltenen Kollagens zu quantifizieren. Die Kollagendichte in der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe war signifikant höher als die in der PBS-Gruppe: Der Kollagenanteil in der SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe, der PBS-Gruppe und der Kontrollgruppe betrug (35,10+4,36) Prozent, (16,27+3,80) Prozent bzw. (16,20+3,39) Prozent. Der Unterschied war statistisch signifikant (p < 0,05), wenn die mit

SCTCs-ABs behandelte Gruppe mit der PBS-Gruppe verglichen wurde, und nicht statistisch signifikant (p > 0,05), wenn die Kontrollgruppe mit der PBS-Gruppe verglichen wurde. (Siehe

Bild 4).

Ausführungsform 6

Auf der Grundlage von Ausführungsform 5 wird Folgendes vorgeschlagen:

Immunfluoreszenzbeobachtung.

Die Neovaskularisierung ist eine Schlüsseldeterminante für das Überleben des Lappens, und durch den Nachweis der Verteilung von CD31/EMCN innerhalb des Lappens haben wir untersucht, ob die überlebensfördernde Wirkung der SCTCs-ABs auf den Lappen mit der endogenen Neovaskularisierung in Zusammenhang steht. Die oben genannten Paraffinschnitte wurden mit Xylol entparaffiniert und einem abgestuften Ethanolbad unterzogen. Die Schnitte wurden 20 Minuten lang bei 95 °C in Natriumcitratpuffer zur Antigenreparatur eingelegt und 100508779

Minuten lang mit 10 % (w/v) Rinderserumalbumin-Phosphatpuffer verschlossen. Anschließend wurden die Schnitte bei 4 °C mit Antikörpern inkubiert. Die primären Antikörper wurden 2

Stunden bei Raumtemperatur für die Primärfärbung inkubiert und dann mit dem sekundären

Anti-Kaninchen-Antikörper DAPI 1 Stunde lang bei 37 °C inkubiert. Die Zellen in den

Präparaten wurden mit einem Fluoreszenzmikroskop und einem

DP2-TWAN-Bildaufnahmesystem (Olympus Corporation, Tokio, Japan) beobachtet. Sechs homogen gefärbte Bereiche aus drei Gruppen von Schnitten wurden nach dem Zufallsprinzip ausgewählt, und die Lappengewebe wurden mit dem DP2TWAN-Bildaufnahmesystem bei 100facher Vergrößerung abgebildet, und die CD31/EMCN-positive Gefäßexpression wurde mit

ImageProPlus bewertet. Die Anzahl der CD31/EMCN-positiven Mikrogefäße betrug (85,89+4,83)/mm?2 , (51,1943,31)/mm?2 und (52,21+5,44)/mm2 in der

SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe, der PBS-Gruppe bzw. der Kontrollgruppe. Der Unterschied war statistisch signifikant (p < 0,05), wenn die SCTCs-ABs-Behandlungsgruppe mit der

PBS-Gruppe verglichen wurde, und nicht statistisch signifikant (p > 0,05), wenn die

Kontrollgruppe mit der PBS-Gruppe verglichen wurde. (Siehe Bild 4) (Siehe Bild 5).

Obwohl Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung gezeigt und beschrieben worden sind, wird der Fachmann erkennen, dass eine Vielzahl von Anderungen, Modifikationen,

Substitutionen und Variationen an diesen Ausführungsformen vorgenommen werden kônnen, ohne von dem Prinzip und dem Geist der vorliegenden Erfindung abzuweichen, deren Umfang durch die beigefügten Ansprüche und deren Aquivalente begrenzt ist.

Claims

Ansprüche LU508779

1. Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des Überlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen, dadurch gekennzeichnet, dass die Methode der Anwendung eine Konzentration von 1 mg/ml in C57BL6-Mäusen ist: männlich, 8 Wochen, mit einem Gewicht von etwa 20 g, dorsaler Hautlappen angehoben und in situ injiziert, nur eine Behandlung.

2. Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Förderung des Überlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass: SCTCs-ABs epitheliale Bindegewebszellen von Mäusen sind, die in einem Medium mit hohem Glukosegehalt kultiviert und 12 Stunden lang mit Astrocystin STS 0,5 uM stimuliert wurden, wobei eine Differenzialzentrifugation mit 300 g*5 min zur Entfernung von Zelltrimmerresten und 2000 g*30 min zur Entfernung des Uberstands durchgeführt wurde, und das Präzipitat mit PBS resuspendiert und so bald wie moglich bei 4 °C appliziert oder fur eine lange Zeit bei -80°C gelagert wurde.

3. Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Forderung des Uberlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass: das Medikament als die Konzentration von SCTCs-ABs konfiguriert ist, die durch BCA-Haar gemessen wird, und mit PBS auf die Konzentration von 1mg/ml verdünnt wird.

4. Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Forderung des Uberlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass: das Verfahren zur Verabreichung des Arzneimittels darin besteht, eine Mikroinjektionsnadel zu verwenden, um durchschnittlich 8 Stellen in situ zu injizieren, nachdem die dorsalen Hautlappen von Mäusen angehoben wurden.

5. Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Forderung des Uberlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass: die Wirkung von SCTCs-ABs auf die Verbesserung des Blutflusses bei der Forderung des Uberlebens von ultralangen Hautlappen umfasst.

6. Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Forderung des Uberlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass sie die Rolle der SCTCs-ABs bei der Förderung des Uberlebens eines extralangen zufälligen Lappens bei der Fôrderung der Kollagenreparatur umfasst.

7. Die Anwendung von SCTCs-ABs in der Fôrderung des Überlebens von ultra-langen zufälligen Hautlappen nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass sie die Rolle von SCTCs-ABs bei der Förderung des Uberlebens von ultralangen zufälligen Lappen bei der Förderung der Kollagenreparatur umfasst.