LU500095B1 - LAMP Detection Method for Identifying Dog Meat in Beef and Mutton - Google Patents
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Claims (3)
1. Die LAMP-Detektionsmethode zum Identifizieren von Hundefleisch in Rind- und Hammelfleisch ist dadurch gekennzeichnet, dass ein LAMP-Detektionssystem unter Verwendung von DNA eines nachzuweisenden Fleischprodukts als Exemplar und unter Verwendung von DF3, DB3, DFIP und DBIP als Primer aufgebaut wird; wobei das LAMP- Detektionssystem in einem Wasserbad mit konstanter Temperatur bei 64 °C 40 min lang reagiert und der Reaktionsflüssigkeit nach der Reaktion 1 pL Fluoreszenzfarbstoff SYBR GREEN I zugesetzt wird; wenn die Reaktionsflüssigkeit grün wird, bedeutet es, dass das detektierende Fleischprodukt Hundefleisch enthält; wenn die Reaktionsflüssigkeit safrangelb wird, bedeutet es, dass kein Hundefleisch in dem zu detektierenden Fleischprodukt vorhanden ist; darunter sind die verwendeten Primer wie folgt: DF3: TTATTTACAGTAGGCGGGTT, wie in SEQ ID NO.1 gezeigt, DB3: GTAAAGTGAATCTTTGCTCAAG, wie in SEQ ID NO.2 gezeigt, DFIP: ACATAGTGAAAATGAGCCACAACATATTGTCCTAGCTAATTCGTCC, wie in SEQ ID NO 3 gezeigt, DBIP: CTTTCAATAGGAGCAGTTTTTGCCTATCGTTAAGAGTATAACCTGAGA, wie in SEQ ID NO .4 gezeigt, das LAMP-Detektionssystem hat ein Gesamtvolumen von 25 pL und ist zusammengesetzt aus: 0,5 uL 10 pmol/L DF3, 0,5 pL 10 pmol/L DB3, 4 pL 10 pmol/L DFIP, 4 uL 10 pmol/L DBIP, 4 pL 2,5 mmol/L dNTP, 2 uL 50 mmol/L MgSO4, 2,5 pL 5 mol/L Betain, 1 pL Bst DNA- Polymerase, 2,5 uL 10xThermopuffer, 2 uL Template, und der Rest ist Reinstwasser.
2. Ein Detektionsreagenz fir das LAMP-Detektionsmethode zur Identifizierung von Hundefleisch in Rind- und Hammelfleisch ist dadurch gekennzeichnet, dass es die folgenden Primer umfasst:
DF3: TTATTTACAGTAGGCGGGTT, wie in SEQ ID NO.1 gezeigt, DB3: GTAAAGTGAATCTTTGCTCAAG, wie in SEQ ID NO.2 gezeigt, DFIP: ACATAGTGAAAATGAGCCACAACATATTGTCCTAGCTAATTCGTCC, wie in SEQ ID NO 3 gezeigt, DBIP: CTTTCAATAGGAGCAGTTTTTGCCTATCGTTAAGAGTATAACCTGAGA, wie in SEQ ID NO .4 gezeigt.
3. Reagenzien-Testkit für das LAMP-Detektionsmethode zur Identifizierung von Hundefleisch in Rind- und Hammelfleisch ist dadurch gekennzeichnet, dass es 0,5 uL von 10 pmol/L DF3,
0.5 pL von 10 pmol/L DB3, 4 pL von 10 pmol/L DFIP, 4 uL von 10 pmol/L DBIP, 4 uL von 2,5 mmol/L dNTP, 2 uL von 50 mmol/L. MgSO4, 2,5 uL von 5 mol/L Betain, 1 uL von Bst DNA und 2,5 pL von 10xThermopuffer; wobei: DF3: TTATTTACAGTAGGCGGGTT, wie in SEQ ID NO.1 gezeigt, DB3: GTAAAGTGAATCTTTGCTCAAG, wie in SEQ ID NO.2 gezeigt, DFIP: ACATAGTGAAAATGAGCCACAACATATTGTCCTAGCTAATTCGTCC, wie in SEQ ID NO 3 gezeigt, DBIP: CTTTCAATAGGAGCAGTTTTTGCCTATCGTTAAGAGTATAACCTGAGA, wie in SEQ ID NO .4 gezeigt.
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Family Applications (1)
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| LU500095A LU500095B1 (en) | 2021-04-28 | 2021-04-28 | LAMP Detection Method for Identifying Dog Meat in Beef and Mutton |
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| LU (1) | LU500095B1 (de) |
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2021
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Effective date: 20211028 |