KR970027311A - 효모를 이용한 과립구-군체 자극인자(g-csf)의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 천연형 G-CSF 단백질의 생산방법에 관한 것으로, 아미노 말단의 염기서열이 다음과 같이 치환된 것을 특징으로 하는 과립구-군체 자극인자(G-CSF)를 코드하는 재조합 cDNA:

를 포함하는 효모용 발현벡터로 형질전환된 효모세포를 배양하여 천연형 G-CSF를 회수하는 것을 포함하는 본 발명의 천연형 G-CSF 단백질의 생산방법에 따르면, 과립구-군체 자극인자를 효율적으로 생산할 수 있다.

Description

효모를 이용한 과립구-군체 자극인자(G-CSF)의 제조방법

본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

제1도는 인간 U-937 세포로부터 유래된 G-CSF의 유전자 염기서열 및 아미노산 서열을 나타낸 것이고,

제2도는 인간 U-937 세포로부터 유래된 G-CSF 유전자를 효모 발현벡터 pYLBC A/G UB-MetG-CSF3으로 클로닝하는 과정을 도시한 것이고,

제3도는 본 발명의 발현벡터 pYLBC A/G UB-MetG-CSF3로 형질전환된 효모세포를 배양한 후 변성 폴리아크릴아미드 겔 전기영동한 결과를 나타낸 것이고,

제4도는 본 발명에 따라 효모세포에서 발현된 G-CSF 단백질을 정재하여 아미노 말단을 분석한 결과를 나타낸 것이고,

제5도는 본 발명에 따른 변형된 G-CSF 유전자를 효모 발현백트 pYLBC A/GF-G-CSF4로 클로닝하는 과정을 도시한 것이고,

제6도는 본 발명의 발현벡터 pYLBC A/GF-G-CSF4로 형질전환된 효모세포를 배양한 후 변성 폴리아크릴아미드 겔 전기영동한 결과를 나타낸 것이다.

Claims (9)

1. 아미노 말단의 염기서열이 다음과 같이 치환된 것을 특징으로 하는 과립구-군체 자극인자(G-CSF)를 코드하는 재조합 cDNA:
2. 제1하의 cDNA를 포함하는 효모용 G-CSF 발현벡터.
3. 제2항에 있어서, G-CSF를 코드하는 cDNA가 그의 -1 위치에 메티오닌 코돈이 첨가되고 유비퀴틴 유전자와 융합된 것을 특징으로 하는 발현벡터.
4. 제3항에 있어서, pYLBC A/G UB-MetG-CSF3.
5. 제2항에 있어서, 효모의-인자 전구서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 발현벡터.
6. 제5항에 있어서, pYLBC A/GF-G-CSF4.
7. 제2항의 발현벡터로 형질전환된 효모세포주.
8. 제7항에 있어서, 사카로마이세스 세레비지애 DC04/pYLBC A/G UB-MetG-CSF(KCTC 8691P) 또는 사카로마이세스 세레비지애 DC04/pYLBC A/GF-G-CSF(KCTC 8692P).
9. 제7항의 효모세포를 배양하여 천연형 G-CSF를 회수하는 것을 포함하는 G-CSF 단백질의 제조방법.

   ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.