KR970005180B1

KR970005180B1 - Ldl-결합 과산화물에 의해 유발된 맥관성 병변증 예방을 위한 마그네슘-피리독살-5'-포스페이트-글루타민산염을 함유한 약학 조성물

Info

Publication number: KR970005180B1
Application number: KR1019910008233A
Authority: KR
Inventors: 슈나이더 베르너; 메이어 브리타; 에프.엘스트너 에리히
Original assignee: 슈타이게어발트 아르쯔나이미텔베르크 게엠베하; 로브로 엑스 마스셀
Priority date: 1990-05-25
Filing date: 1991-05-22
Publication date: 1997-04-14
Also published as: GR3021077T3; HU911756D0; LT3335B; LV10046A; LTIP580A; DE69122170T2; EP0458287A2; CS156391A3; AU7730191A; JPH07119174B2; UA26973A1; KR910019616A; ES2091262T3; RU2041713C1; HRP931445B1; MD306B1; CZ280683B6; MX171883B; ZA913692B; IE911783A1

Abstract

내용없음

Description

LDL-결합 과산화물에 의해 유발된 맥관성 병변증 예방을 위한 마그네슘-피리독살-5'-포스페이트-글루타민간염을 함유한 약학 조성물

제1도는 리놀렌산의 스펙트럼(0.88mM)으로서, 주 피크는 211nm에서 나타나는 한편, 소량의 산화 리놀렌산의 존재를 나타내는 보다 작은 피크는 약 232nm에서 나타난다.

제2도는 MPPG(0.124nM)의 스펙트럼으로서, 222, 327 및 387nm에서 피크가 나타난다.

제3도는 리놀렌산과 MPPG용액의 스펙트럼으로서, 이 스펙트럼은 211, 243 및 289nm에서 피크가 나타난다. 제1도중 232nm에서 나타난 피크는 제3도에서는 나타나지 않으며, 대신 제3도에서는 243 및 289nm에서 두 개의 새로운 피크가 나타난다.

제4a도 및 제4b도는 MPPG또는 PP에 의한 ACC분해 자극을 CumOOH농도에 다라 나타낸 도면이다.

본 발명은 LDL-결합 과산화물에 의해 유발되어 맥관성 병변(vascular lesions)을 초래하는 질병을 예방하는데 사용되는 마그네슘-피리독살-5'-포스페이트-글루타민간염(MPPG)을 함유한 약학 조성물에 관한 것이다.

최근 40년간, 서구 공업국에서는 대사장애, 특히 지방대사의 장애 중상이 급속히 증가되고 있음을 관찰할 수 있다. 이러한 환경은 과다한 영양섭취 및/또는 지방식품의 과잉섭취와 운동부족이 주요 원인이 된다. 이러한 상태에서는 혈관내의 콜레스테롤 및 지방수치가 상승하여, 동맥경화성 심장질환 및 말초 맥관성 질환의 발병 위험이 증가되게된다. 혈액내 콜레스테롤 수치의 상승은 동맥 경화증 발생의 또다른 원인이 되는 것으로 공지되어 있다. 과콜레스테롤 혈증(Hypercholesteraemia)은 항상 과지혈증(Hyperlipidaemia)을 동반하는 대사장애이다. 병원적으로는 상이하나 증상에 있어서는 서로 유사한 임상상태를 보이는 과자혈증(유미지립(乳靡脂粒)에 의한 혈청의 혼탁) 및 과콜레스테롤 혈중(혈장중의 콜레스테롤 함량이 200mg%이상으로 증가)은 괴지단백 혈증(Hyperlipoproteinaemia) 또는 과지혈증(Hyperlipiaemia)이라는 집합 개념으로 요약된다.

과콜레스테롤혈증의 치료에는 니코틴산 유도체뿐 아니라 아릴옥시아세트산 유도체, 특히 α-(p-클로로페녹시)-이소부티르산-에틸에스테르가 주로 이용된다.

또한, 동일 출원인에 의해 출원된 독일 특허공보 제24 61 742호에는 괴콜레스테롤 혈증의 예방 및 치료시 피리독신-5'-인산 에스테르-글루타민산염 및 아스파라긴산염을 사용하는 방법이 개시되어 있다.

과콜레스테롤 혈증 또는 과지혈증의 임상적 증상이 나타나지 않고서도, 흡연자, 당뇨병 환자, 노인 및 고혈압 환자 또는 과다한 스트레스를 받는 사람 등의 위험군에 속한 자들의 경우에는 맥관성 병변이 발생할 수 있다. 이러한 사실은 LDL(저밀도 지단백질)과 결합된 과산화물의 농도가 혈액중에서 상승하는 것을 통해 알 수 있다. 이러한 LDL-결합 과산화물은 혈관내에서 족종 및 동맥경화성 혈전의 혈성을 유도하고 촉진시키므로 당뇨병 맥관장애의 원인으로 간주할 수 있다.

과산화 생성물의 증가된 농도 및 이것과 맥관성 병변증과의 상관관계는 다음 문헌에 개시되어 있다 :

J.M.C 구터리지의 다수의 문헌[Biochemical Sciences, 1990년 4월, p129-135]; 및 D.W.모렐외 다수의 문헌[Jourmal of Lipid Research, Vol. 30, 1989, p1827-1834].

혈관내의 동맥경화성 변화들은 내피혈관 병변에 의한 것이며, 병원(病源)이 다음과 같이 진행된다는 사실은 잘 알려져 있다 : 내피혈관 병변→혈소판 유착→평활근 세포의 증식→지질 침착.

먼저 내피혈증 병변은 ①긴장항진(Hyperonia)시 전단력에 의한 기계적 손상, ②과콜레스테롤 혈증에서 콜레스테롤에 의한 화학적 손상, 및 ③특히 혈액내의 오염물질에 의한 치명적인 손상을 비롯한 다수의 원인에 의해 유발될 수 있다. 부가의 과정은 상기 세가지 유형의 손상과 거의 동일한 것으로 추정된다.

내피혈관성 병변과 동맥 내막 세포내 및 세포 사이에서의 잇따른 지방침착에 의하면, 혈소판의 유착이 증가돼 평활근의 세포증식이 수반되며, 결체조직의 기본물질내에 지단백질의 유입량이 더욱 증가되어, 결체조직의 글루코스 아미노-글리칸과착물을 형성하며 세포질 수준에서 대사장애가 초래된다. 이후, 손상된 영역에 칼슘이 형성되는 것으로 해서 모든 변화가 종결되며 최종 분석시 혈관의 수축이 초래된다.

더불유.슈나이더는 그의 논문(요하네스 구텐베르크 유니버시티 오브 메인즈, 1987)에서, 과콜레스테롤 혈증이 있는 토끼 및 쥐를 대상으로 실험한 결과 마그네슘-피리독살-5'-인산염-글루타민산염(MPPG)을 비교적 고농도로 투여했을 때 간 및 대동맥의 지방농도가 저하된다는 점을 밝혔다. 그러나, 이러한 연구작업은 위험군의 사람들에 있어서 혈관 죽종의 형성을 개시하는 매카니즘과 관련하여 어떠한 지침을 제공해주지는 못한다. 따라서 상기 더블유.슈나이더의 논문 결과를 토대로 하여, 혈액내 개시 오염물을 제거하면 혈관의 죽종 형성을 방지할 수 있다고 단정할 수는 없다.

과거 얼마동안, 혈액중의 과산화물이 대사장애 개시체로서 작용할 수 있는지의 여부에 대해 연구되었었다. 산화 변성된 LDL과 이것의 수용체의 존재에 대해서는, U.P.슈타인브레커의 다수의 문헌[J.Biol. Chem. Vol. 264, No. 26, p15216-15223(1989)].에 기재되어 있다. 본 출원인은 맥관죽종이 LDL-겨합 과산화물과 관련이 있다는 것을 의도한 실함을 통해 입증되었다. 본 출원인은 맥관죽종이 LDL-결합 과산화물과 관련이 있다는 것을 의도한 실험을 통해 입증하였다. 생체외 실험을 통해, 치명적인 내피혈관 병변을 일으키는 매카니즘들중 하나를 규명할 수 있었으며, 이러한 매카니즘에 의해 상기 관산화물을 차단하여 이들을 무해하게 할 수 있다는 것을 밝혀냈다.

본 발명의 목적은 맥솬성 병변, 특히 당뇨병 환자의 맥관장애 질환뿐만 아니라 동맥혈관내의 죽종 또는 동맥경화성 혈전의 형성을 방지 및/또는 지연시키기 위하여 LDL-결합 과산화물을 감소시키는 약학 조성물을 제공하는데 있다. 본 발명의 목적은 특히 과지혈증 또는 과콜레스테롤 혈증의 증상이 없는 경우에 상기 용도로서 유용한 약학 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 목적은 마그네슘-피리독살-5'-인산염-글루타민산염을 맥관성 병변의 의한 질환의 예방에 적합한 약학 조성물을 제조하므로써 이루어진다. 특히 본 발명에 따르면, 당뇨병 환자, 흡연자, 노인, 고혈압 환자 및 스트레스를 받는자들로 구성된 위헙군 사람들의 경우에 있어서 죽종증 뿐 아니라 맥관 질환을 예방할 수 있다.

마그네슘-피리독살-5'-인산염-글루타민산염은, 종전에는 증가된 혈중 지방농도를 감소시키는데 사용되었던 물질이다. 이 물질(MPPG)은 세달리피드(Sedalipid, 등록상표명)라는 상표명으로 공지되어 있으며 슈타이게어발트 아르쯔나이미켈베르크사에 의해 배급되어 있다. 마그네슘-피리독살-5'-인산염-글루타민산염을 방해제로서의 작용을 기초로 하여, 특히 과지혈증 및/또는 콜레스테롤 혈증의 증상이 없는 경우에 MPPG를 사용하여 맥관성 병변을 예방할 수 있다.

MPPG는 하기의 화학식을 갖는 피리독신 유도체이다.

본 발명에 있어서, 위험군의 사람이라 함은 구체적으로 흡연자, 당뇨병 환자, 고혈압 환자, 인가정상의 운동 선수와 같이 스트레스를 많이 받는 자 및 노인이다.

본 발명의 LDL-결합 과산화물의 농도는 높으나 과지혈증 및/또는 과코레스테롤 혈증의 증상이 없는 상기 휘험군의 사람들에게 상기 화합물 MPGG를 투여하는 것을 특징으로 한다. 상기 증상은 일반적으로 콜레스테롤 수치와 콜레스테롤 및 트리글리세리드의 수치를 기초로 하여 결정한다. 유럽과 미합중국에는 정상 및 초괴된 콜레스테롤 및 트리글리세리드 수치에 대한 지침이 존재하는데, 이에 대해서는 US NCEP(국립 콜레스테롤 교육 프로그램) 및 유럽 동맥경화증 학회에 의한 지침을 참고로 한다. 하기 표1 및 표2는 콜레스테롤 및 트리글리세리드등의 정상 수준 및 치료를 시작해야 할 시기를 요약한 것이다.

* CHD : 심장관상 혈관질환

이와 유사하게, 다음 협회들에 대한 발표된 지침들이 존재한다 : British Cardiac Working Group on Coronary Prevention(관상 질환 예방에 대한 지침); British Hyperlipidaemia Association(콜레스테롤에 대한 지침); Canadian Consensus Conference(콜레스테롤에 대한 지침).

상기 표에 제시된 자료에 있어서 콜레스테롤 함량의 유해수준이 약간씩 상이한 것은 사실이나, 경고수준 이하 또는 특히 정상치와 초과된 수준 사이의 중간 영역에서, LDL-질환 과산화물 함량이 높은 위험군에 속한 사람들에게 본 발명에 따른 MPPG을 투여하는 것이 매우 유익함을 인식하는 데는 이러한 자료들이 유용하다.

진단된 콜레스테롤 수준이 과지혈증으로 해석되어야 하는 경우에 대한 어떠한 규정된 경고 기준을 제시할 수는 없으나, 약 240mg/dℓ(US NCEP지침) 또는 250mg/dℓ(EG지침)을 과지혈증의 초기단계로 해석될 수 있다. 따라서, 본 발명에 다른 MPPG의 튜여는 특히 상기 제시된 콜레스테롤 수준 이하로 실시된다.

본 발명의 발명자는, 위험군의 사람들에 있어서 LDL-결합 과산화물 함량을 수준으로 존재함을 규명하기 위하여 여러 가지 실험을 하였다. 또한, MPPG첨가시 LDL-결합 과산화물 함량을 지시해주는 검출신호가 사라지는 것을 알 수 있다. 따라서, 위험 군에 속한 환자들에게 MPPG를 투요하는 것이 타당하며 유용한 것이라고 결론지을 수 있다.

특히 상기 위험군의 사람들에 있어서, 죽종 형성아 상승적으로 개시되는 동안에는 하기의 매카니즘이 이루어지는데, 이는 후술되는 생체외 테스트를 통해 입증될 것이다 :

LDL은 혈액내에 존재하는 반응성 산소류(초과산화물 라디칼(O, 수산화라디칼 OH), 특히 과산화물에 의해 산화되어 LDL 과산화물을 형성한다. 이러한 LDL과산화물은 마크로파지에 의해 거의 흡수되지 않고, 내피세포상에 위치하는 스캔빈저 수용체에 결합된다(슈타인브레허외 다수에 의하 상기 문헌 참고). 이러한 방식으로, 내피세포에 LDL침전물이 형성된 후 부가의 지방 침전물을 끌어당긴다.

또한, 과산화물 및/또는 LDL-결합 과산화물에 의한 글루타티온의 산화반응에 의하여 맥관 내피 세포가 손상된다. 이러한 산화 반응하에서는, 세포가 더 이상 그의 산화환원 전위를 우지할 수 없기 때문에, 세포의 사멸을 초래한다(K. 크즈야외 다수의 문헌[Biochem. Biophys. Res. Comm., Vol. 163, No. 3, 1989, p1466-1472]참고).

이하에서는 LDL-결합 과산화물에 대해 MPPG가 미치는 영향의 매카니즘을 보다 상세히 설명한다. 이하의 실험들에서는, 지방산-결합 과산화물이 MPPG의 존재하에 분해됨을 따라 무해하게 됨을 보여준다.

하기의 반응 경로식은 다음 문헌에 기재된 바와 같이, 지방산이 산화되는 동안의 반응 매카니즘을 가정하여 나타낸 것이다 : J.M.C구터리지외 다수의 문헌[Trends in Biochemical Sciences, 1990년 4월, p130] :

먼저, H라디칼이 측쇄 -CH를 공격한다. 이로써 전위가 이루어져 단리된 이중결합으로부터 공역 이중 결합이 형성된다. 결과적으로 지방산 라디칼이 형성되는데, 이것은 산소의 존재하에서 과산화믈 라디칼을 형성한다. 부가의 지방산 분자의 존재하에서는, 지방산 수화과산물 및 지방산 라디칼이 형성되어 연쇄반응이 개시된다.

상기 반응사은 234nm에서 디엔 반응으로 이루어질 수 있다.

제1도 내지 제3도를 통해, 산화 리놀렌산이 피크가 0.125nM(제3도)농도의 MPPG를 첨가함에 따라 232mm(제1도)에서 사라질수 있으며, 이로써 상기 개시된 연쇄반응이 중지되어 질병의 진행도 역시 중단될 수 있음을 알 수 있다.

본 발명에 따라 사용되는 물질 MPPG의 존재하에 수산과산화물이 분해되는 반응의 경우에는 망간에 의해 촉매되는 하기의 반응 매카니즘이 추정된다 :

MPPG-Mn-촉매된 수화과산화물의 분해 매카니즘

이제는 지시 물질인 아미노시클로프로판 카르복실산(ACC)을 통해 이러한 분해 반응을 입증할 수 있다. ACC는 사실상 에틸렌 형성을 야기하는 기본 물질이며, 생성된 에틸렌의 양은 정량적으로 결정할 수 있다.

수화과산화물은, 예를 들어 쿠멘 수화과산화물에 의해 분해될 수 있다. ACC는 지시제 기능을 한다. 피리독살 포스페이트에서의 아민을 통해 반응이 진행되며, 이로써 라디칼이 형성되는 것으로 가정된다. 이러한 라디칼은, ACC를 CH2H4, CO2 및 시안화물로 분해시키는 분해반응을 개시한다.

다음 실험은 쿠멘 수화과산화물의 존재하에서 쿠멘 수화과산화물(CumOOH)의 농도에 따라 MPPG에 의한 ACC의 해리 반응이 촉진됨을 밝힌 것이다. 동시에, 상응하는 물량의 피리독살 포스페이트(PP)를 사용하여 비교 테스트를 수행하였다.

시험예 :

pH7.4하의 포스페이트 완충액(0.1m)중에서 각기 다른 농도의 쿠멘 수화과산화물로써 하기 용액들을 제조하였다.

배치 : 포스페이트 완충액 0.1M, pH 7.4

ACC : 1.0mM

MPPG : 0.5mM

Mn2+ : 0.1mM

LA : 0.88mM

CumOOH : 0.006-1.2mM

증류수 : 2mℓ첨가

CumOOH의 존재하에 MPPG/PP에 의한 ACC해리의 촉진(CumOOH 농도에 따른)(LA= 리롤렌산; CuMOOH= 쿠멘 수화과산화물; ACC-아미노시클로프로판카르복실산)

피리도살 포스페이트에 의한 ACC해리의 경우에는 MPPG와는 달리, 쿠멘 수화과산화물(0.006mM)에 사용된 범위보다 낮은 농도 범위내에서 측정 가능한 에틸렌의 방출이 관찰되었다. 0.12mM의 CumOOH하에서는, MPPG의 존재하에 70%의 ACC해리 반응 촉진율이 70%인 것으로 관찰되었다. 0.6mM 및 1.2mM의 CumOOH농도에서는, PP에 비해, MPPG의 존재하에서 명백히 높은 촉진 효과가 측정되었다.

Claims

마그네슘-피리독실-5'-포스페이트-글루타민산염(MPPG)을 함유하며, 과콜레스테롤혈증 및 과지혈증이 없으면서 LDL-결합 과산화물에 의해 유발되는 맥관성 병변에 있어서 LDL-결합 과산화물을 감소시키는데 유용한 약학 조성물.
제1항에 있어서, 맥관성 병변이 당뇨병 환자, 흡연자, 노인, 고혈압 환자, 및 스트레스를 많이 받는 자를 포함하는 위험군 사람들에게서 나타나는 약학 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 맥관성 병변이 죽종증(Atheromatosis)인 약학 조성물. 상기 맥관성 병변이 맥관병인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 망간염을 부가로 함유하는 약학 조성물.