KR950008693A - 시스-3-히드록시-l-프롤린의 제조법 - Google Patents
시스-3-히드록시-l-프롤린의 제조법Info
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Abstract
L-프롤린의 3 위치의 위치에서 L-프롤린을 수산화하는 반응을 촉매하는 효소원, 이가철이온, 2-케토글루타르산 및 L-프롤린을 수성 매체중에 존재시키고, L-프롤린을 시스-3-히드록시-L-프롤린으로 변환시키고, 생성된 시스-3-히드록시-L-프롤린을 이 수성매체중으로부터 채취하는 것을 특징으로 하는 시스-3-히드록시-L-프롤린의 제조법.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
Claims (7)
- L-프롤린의 3 위치의 위치에서 L-프롤린을 수산화하는 반응을 촉매하는 효소원, 이가철이온, 2-케토글루타르산 및 L-프롤린을 수성 매체중에 존재시키고, L-프롤린을 시스-3-히드록시-L-프롤린으로 변환시키고, 생성된 시스-3-히드록시-L-프롤린을 이 수성 매체중으로부터 채취하는 것을 특징으로 하는 시스-3-히드록시-L-프롤린의 제조법.
- 제1항에 있어서, 효소원이 스트렙토마이세스속 또는 바실러스속에 속하는 미생물 유래인 제조법.
- 제2항에 있어서, 효소원이 미생물의 배양물, 균체, 균체처리물, 정제효소 또는 조(粗) 효소인 제조법.
- 제1항에 있어서, L-프롤린으로부터 시스-3-히드록시-L-프롤린으로의 변환을, 미생물의 배양액중에서 실시하는 것을 특징으로 하는 제조법.
- 제1항 있어서, 효소원이 하기 (1)∼(11)의 이화학적 성질을 나타내는 L-프롤린 3 위치 수산화효소인 제조법.(1) 작용 및 기질 특이성2-케토글루타르산 및 2가 철이온의 존재하, 유리의 L-프롤린에 작용하여 시스-3-히드록시-L-프롤린을 생성한다.(2) 최적 pH30℃, 20분간의 반응에서, pH 6.5∼7.5에 최적 pH를 갖는다.(3) pH 안정성4℃, 23시간의 처리로, PH 6.5∼8.0의 범위에서 안정적으로 유지된다.(4) 최적 온도pH 7.0, 15분간의 반응에서, 35∼40℃에 적정온도를 갖는다.(5) 온도 안정성pH 7.5, 50℃, 30분간의 처리에서 실활한다.(6) 저해제Zn++, Cu++, Co++및 Ba++의 금속이온 및 에틸렌디아민테트라아세트산에 의해 저해를 받는다.(7) 활성화활성화에는 보효소를 필요로하지 않는다. 반응액에의 L-아스코르브산의 첨가는 반응을 촉진한다.(8) Km 치100mM의 N-트리스 (히드톡시메틸) 메틸-2-아미노에탄술폰산 완충액(pH 7.0)중에 5mM L-아스코르브산, 1mM 황산 제1철 및 효소표품을 함유하는 반응액중에서 측정한 L-프롤린에 대한 Km치는 0.49mM이며, 2-케토글루타르산에 대한 Km치는 0.11mM 이다.(9) 등전점패스트시스템(Phast system : 팔마시아사제)에서 측정한 등전점이 4.3이다.(10) 분자량도데실황산나트륨-폴리아크릴아미드 전기 영동법에 의한 측정으로 35,000±5,000이다.(11) N 말단 아미노산 배열배열번호 1로 표시되는 N 말단 아미노산 배열을 갖는다.
- 하기 (1)∼(11)의 아화학적 성질을 나타내는 L-프롤린 3 위치 수산화 효소.(1) 작용 및 기질 특이성2-케토글루타르산 및 2가 철이온의 존재하, 유리 L-프롤린에 작용하여 시스-3-히드록시-L-프롤린을 생성한다.(2) 최적 pH30℃, 20분간의 반응에서 pH 6.5∼7.5에 최적 pH를 갖는다.(3) pH 안정성4℃, 23시간의 처리로 pH 6,5∼8,0의 범위에서 안정적으로 유지된다.(4) 최적 온도pH 7.0, 15분간의 반응에서, 35∼40℃에 최적온도를 갖는다.(5) 온도 안정성pH 7.5, 50℃, 30분간의 처리에서 실활한다.(6) 저해제Zn++, Cu++, Co++및 Ba++의 금속이온 및 에틸렌디아민테트라 아세트산에 의해 저해를 받는다.(7) 활성화활성화에는 보효소를 필요로하지 않는다. 반응액에의 L-아스코르브산의 첨가는 반응을 촉진한다.(8) Km 치100mM의 N-트리스 (히드록시메틸) 메틸-2-아미노에탄술폰산 완충액(pH 7.0)중에 5mM L-아스코르브산, 1mM 황산 제1철 및 효소표품을 함유하는 반응액중에서 측정한 L-프롤린에 대한 Km치는 0.49mM이며, 2-케토글루타르산에 대한 Km치는 0.11mM 이다.(9) 등전점패스트시스템(Phast system : 팔마시아사제)에서 측정한 등전점이 4.3이다.(10) 분자량도데실황산나트륨-폴리아크릴아미드 전기 영동법에 의한 측정으로 35,000±5,000이다.(11) N 말단아미노산 배열배열번호 1로 표시되는 N 말단 아미노산 배열을 갖는다.
- 스트렙토마이세스속에 속하고, 또한 L-프롤린 3 위치 수산화 효소를 생산하는 능력을 갖는 미생물을 배양하고, 배양물중에 L-프롤린 3 위치 수산화효소를 생성축적시키고, 이 배양물로 부터 L-프롤린 3 위치 수산화효소를 채취하는 것을 특징으로 하는 L-프롤린 3 위치 수산화 효소의 제조법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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