KR940001125B1

KR940001125B1 - 국화추출물을 함유하는 티로시나제 저해제 조성물

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Publication number: KR940001125B1
Application number: KR1019910003588A
Authority: KR
Inventors: 이옥섭; 김영대; 전광호; 박도근
Original assignee: 주식회사 태평양; 한동근
Priority date: 1991-03-06
Filing date: 1991-03-06
Publication date: 1994-02-14
Also published as: KR920017634A

Abstract

내용 없음.

Description

국화추물물을 함유하는 티로시나제 저해제 조성물

본 발명은 기 출원된 발명특허(출원번호 88-47740)와 관련된 것으로서 기 출원된 발명특허는 들국화 추출물이 인체의 두피에 작용하여 비듬 및 두피의 가려움 방지 및 치료에 유효하여 모발광택, 두피보호 등 콘디쇼닝 효과가 뛰어나기 때문에 이를 샴푸, 린스 또는 헤어토닉에 사용하여 만들어진 두발용 화장료에 관한 것이다. 본 발명자는 국화의 효능 효과에 관한 계속적인 연구 결과 국화 추출물의 피부 흑화의 원인인 티로시나제를 저해하는, 우수한 효과를 갖는 것을 발견하고, 본 발명을 완성하였다.

국화는 엉거시과에 속하는 다년생 초본으로 재배종은 시베리아, 한국 등의 산야에 자생하는 구절초(Chrysanthemum sibrim)와 중국 하남이 감국(Chrysanthemum indicum)과의 교배에 의해서 만들어진 국화의 선조라고 생각되며, 국화속 식물이 상당 부분이 통상 국화라고 불리워 진다. 국화속 식물은 세계적으로 약 200여종알려지고 잇으나 본 발명에서 사용된 국화속 식물로는 국내에서 구하기가 용며, 또 그 추출한 유효성분이 유사한것으로서국화(ChrysanthemummorifoliumRamat), 감국(Chry sant he mum indicum Linne), 산국(Chrysanthem umboreale Makiono ),서홍구절초 (Chrysanthemumzawadskiivar.leiophyllum),산구절초(ChrysanthemumzawaskiihHerbich),구절초(Chrysanthemum zawadskiivar. latilobum Kitamura)이다. 일반적으로 국화속 식물(통상적으로 국화라고 총칭하기도 하며 이 이하로는 국화라 칭한다)은 꽃이 아름다울뿐만 아니라 국화로 몸을 가꾸면 장수하고 몸이 가벼워진다고 하였으며, 감국은 일종이 재배국으로 생엽, 건엽, 꽃 다위가 식용되고 있는 것은 이미 알려진 사실이다. 또 문헌 등에 나타난 국화의 약효에 대하여 살펴보면 국화는 청열 해도 작용을 가지고 있으며, 소염효과와 모세혈관의 저항력을 증강시켜 주며 항염증 작용 등의 약효가 있는 것으로 소개되어 있다.

본 발명자들은 이러한 국화의 효과에 착안하여 구고하 추출성분의 화장료에의 응용에 관하여 조사한 결과, 국화의 화장료에 응용한 예는 본 발명자가 기 출원한 들국화 추출물을 함유하는 샴푸 및 린스 조성물(출원번호 88-4774)이 유일하며, 다른 한편으로는 육모-양모 식품으로서 일본 공개특허 소 61-33123에 육모, 양모 미발식품에 그 응용이 소개되어 있을 뿐이었다. 그래서 본 연구자들은 국화의 유효 성분을 피부화장료로서 응용하고자 하는 연구를 하였으며 그 결과 국화 추출물은 피부에 대하여 부작용이 거의 없을 뿐만 아니라, 모세혈관을 확장시켜 혈액 순환을 왕성하게 하여 주고, 여드름이 있는 피부에 도포하였을 경우 상당한 호전 효과가 있음을 발견하엿다.

한편, 일반적으로 피부가 검게 되는데는 여러 원인이 관여하고 있는데, 그 중에서도 가장 중요한 것은 아미노산의 일종인 티로신에 티로시나제라는 효소가 작용하여 멜라닌이라는 흑색색소가 생성되는 것이다.

따라서, 티로시나제 저해활성이 있는 물질을 피부에 도포할 경우 미백효과가 기대되며, 본 발명자들이 국화 추출물을 실험한 결과 티로시나제 저해효과가 우수할뿐만 아니라 임상실험에서도 좋은 미백효과를 나타내는 것을 발견할 수 있었다.

따라서, 본 발명의 목적은 피부에 대한 부작용이 없으며 티로시나제 저해 활성을 갖는 국화 추출물을 함유하는 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명에서 국화의 유효성분을 추출하기 위하여 사용된 유기용매로는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 에칠아세테이트, 헥산, 벤젠, 아세톤 등의 친수성 또는 비친수성 용제가 포함된다.

국화 추출물의 유효 성분으로는 국화이 종류나 추출방법에 따라 차이가 있지만,정유,아미노산,비타민,플라보노이드성분등이함유되있다.정유에는폴레놀(polenol), 캄파(camphor), 글루산테(glusantenone)등함유되어 있으며 플라보노이드로서는 루테오린글루코사이드(luteolin-7glucoside),코스모신(cosmosin),아카신(acasin)등이있으며이외에도크리산드민(chrsandermine),수크리닉산(sucriniacid),디메칠하이드라지드(dimethyl hydrazide)이 함유되어 있다.

특히 본 발명에서 국화 추출물을 제조할 때 꽃, 잎, 줄기, 뿌리 각각을 사용할 수도 있으나 전초를 사용하는 것이 바람직하며, 국화의 채취 시기는 꽃이 만개하기 전에, 또 추출은 시들기 전에 실시하는 것이 가장 많은 국화의 피부 유효 성분을 함유한 국화 추출물을 얻을 수 있었다.

본 발명에서 국화추출 유효성분을 함유한 조성물은 연고, 로션, 크림 또는 화장료의 제형을 취할 수 있으며, 조성물 중량에 대하여 추출물 건조중량으로 나타내어 0.0 01-30%의 국화 추출물을 함유한다.

이하, 예에 의하여 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.

[실시예 1]

국화 추출물의 제조방법

국화, 산국, 감국, 구절초 혼합물 건조 1킬로그램을 씻어 짜른 후 물 10킬리그람을 가하여 5시간 가열 추출한 후 이를 300메쉬 여과포로 여과하여 진공 증발기에서 농축하여 약 3킬로그람의 수용성 추출물(1)을 얻는다.

[실시예 2]

국화 추출물의 제조방법

감국및 산국 혼합물 1킬로그램을 씻어 짜른 후 90퍼센트 메탄올 수용액 10킬리그람을 넣어 8시간 동안 가열 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과한 후 이를 증발 건조하여 건조 추출물(2) 약 96그람을 얻는다.

[실시예 3]

국화 추출물의 제조방법

감국및 산국 혼합물 1킬로그램을 씻어 짜른 후 90퍼센트 메탄올 수용액 10킬리그람을 넣어 8시간 동안 가열 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과한 후 이를 증발 건조하여 건조 추출물(3) 약 82그람을 얻는다.

[실시예 4]

국화 추출물의 제조방법

감화, 산국, 구절초 혼합물 건조 1킬로그램을 씻어 짜른 후 50퍼센트 프로필렌글리콜 수용액 10킬리그람에 넣어 약 14일간 실온에서 정치 추출한 후 이를 300메쉬 여과포로 여과하여 국화 추출액(4) 약9.4킬로그람을 얻는다.

[실시예 5]

국화 추출물의 제조방법

국화 전초 약 1킬로그램을 씻어 짜른 후 50퍼센트 에탄올, 30퍼센트 1, 3부틸렌 글리콜 수용액 10킬리그람에 넣어 약 10일간 실온에서 정치 추출한 후 이를 300메쉬 여과포로 여과하여 국화 추출액(5) 약 9.2킬로그람을 얻는다.

[실시예 6]

국화 추출물의 제조방법

감국 및 산화국 혼합물 1킬로그램을 씻어 짜른 후 에칠아세테이트 10킬리그람에 넣어 약 10일간 실온에서 정치 추출한 후 이를 300메쉬 여과포로 여과하여 이를 증반 건조하여 건조 추출물(6) 약 48그람을 얻는다.

[실시예 7]

국화 추출물의 제조방법

감국 전초 1킬로그램을 물로 깨끗이 씻은 후 이를 약 5-10센티미터 정도로 잘게 짜른 후 10퍼센트 에탄올 수용액 10리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 약 12시간 끊여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과한다. 이때 국화 추출액은 약 9.2리터 정도가 된다. 이것을 증발 건조시키면 약 260그람의 수용성 건조 국화 추출물(7)로 얻을 수 있다.

[실시예 8]

국화 추출물의 제조방법

실시예 7에서 여과하고 남은 국화 고형물을 건조시킨 후 헥산 약 10리터에 넣고 추출한 후 헥산을 증발제거 분리하면 약 40그람 정도의 수 불용성 국화 추출물(8)을 얻을 수 있다.

[실시예 9]

국화 추출물의 제조방법

산국, 감국 혼합물 전초 1킬로그람을 물로 씻어 짜른 후 10퍼센트 메탄올, 10퍼센트 이소프로판올 수용액 10킬로그람에 넣어 8시간 가열 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하여 건조하면 국화 추출물 약 190그람이 얻어진다. 다음으로 여과 잔유물을 1:1벤젠, 아세톤 혼합용매 10리터에 24시간 침적 후 300메쉬 여과포로 여과 건조하여 약 50그람의 건조물을 얻는다. 친수성 건조물 190그람과 비친수성 건조물 50그람을 혼합하여 약 240그람의 건조 국화 추출물(9)을 얻는다.

이상과 같이 얻어진 국화 추출물로 피부 안정성 및 각종 효과 실험을 하여 아래와 같은 결과를 얻었다.

[실험예 1. 피부 작극 실험]

(1) 실험방법 : 드레이즈(Draize)의 피부 자극성 실험법에 따라 6마리의 토끼를 사용하여 실시예 7에서 얻은 국화 추출물(7)의 10퍼센트 수용액을 시험물질로 사용하여 홍반, 부종의 형성 정도를 실험한다.

(2) 평가 기준 : 평가 기준은 아래 표1과 같다.

[표 1]

(3) 결과 : 평가 결과가 아래 표2에 나타나 있다. 표2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 국화 추출물(7)의 수용액은 거의 자극이 없다는 것을 알 수 있다.

[표 2]

[실험예 2. 인체 첩포 실험]

실시예 7에서 얻은 국화 추출물(7)의 10퍼센트 수용액을 18세 부터 30세의 건강한 여성 20명의 상박 피부에 24시간 동안 첩포한 후 이를 제거하고 피부 자극 유무를 측정하고 다시 24시간 경과 후의 피부 반응을 조사한 결과 1명의 여성만이 24시간 첩포 후 아주 약한 피부자극을 나타내었으나 24시간 경과후에는 자극이 없어졌다. 따라서, 본 발명의 국화 추출물은 피부작극이 없는 것으로 판정된다.

[실험예 3. 모세혈관 혈행 촉진 효과 실험]

22-28세의 정상적인 피부를 가진 여성 5명을 선정하여 상기 실시예 7에서 얻은 국화 추출물(7)의 10퍼센트 수용액과 대조군으로 물을 상박피부에 첩포하여 24시간 경과 후 이를 제거하고 페리플럭스(Periflux)로 혈류량을 측정한 결과 아래 표3과 같은 결과를 얻었다. 이는 본 발명의 국화 추출물이 모세혈관의 혈행을 촉진시키는 효과를 갖고 있음을 입증한다.

[표 3]

[실험예 4. 여드름 치유효과 실험]

흰 토끼 6마리를 사용하여 50:50올레인산-유동파라핀으로 토끼의 양쪽 귀안쪽에 1일 1회 2주간 도포하여 여드름을 유발시킨 후 순간 접착제를 사용하여 여드름의 레프리카를 만들어 여드름의 크기를 광학 현미경으로 측정한다. 여기서 실시예 7에서 만든 국화 추출물(7)이 10퍼센트 수용액과 대조군으로 이온교환수를 각각 2주간 1일 2회 도포한후 여드름의 크기 변화 정도를 측정하였다. 그 결과 국화 추출물을 도포한 경우가 대조군에 비하여 평균 약 40퍼센트 정도 여드름의 크기가 감소하였다. 이는 본 발명의 국화 추출물이 여드름 치유에 효과가 있다는 것을 입증한다.

[실험예 5. 피부 미백효과 실험]

(1) 티로시나제 저해효과에 의한 피부미맥효과 실험

효소 티로시나제는 버섯류로부터 추출한 것으로, 시그마사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 증류수에 0.3밀리그램/밀리리터의 용액으로 만들어서, 1.0밀리리터씩 시험관에 넣고, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액 0.3밀리그램/밀리리터의 용액으로 만들어서 1.0밀리리터씩 시험관에 넣고, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액 (0.1물농도, pH 6.8)1.0밀리리터와 실시예 2, 3, 5및 6에서 얻은 각 추출물 0.9밀리리터를 넣은 뒤 37℃ 항온조에서 10분동안 반응시킨다. 이때 대조군은 각 추출물 대신 용매만을 0.9밀리리터 넣는다. 이 반응용액에 2500 유니트/ 밀리리터의 티로시나제 용액 0.1밀리리터씩을 넣고 다시 37℃항온조에서 10분 동안 반응시킨다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전분광분석계로 파장 475나노미터에서의 흡광도를 측정한다. 각 추출물의 티로시나제 저해효과는 다음의 공식으로 구한다.

실험결과는 아래의 표 4와 같다.

[표 4]

표에서 보는 바와같이 이미 미백효과가 확인된 아스콜빈산에 비하여 본 발명의 국화 추출물이 보다 우수한 티로시나제 저해효과를 보여 주었다.

(2) 임상실험에 의한 피부 피백효과 실험

아래 표 5의 처방에 의해 만들어진 제품을 피부가 비교적 검은 여성 60명을 대상으로 12주간 사용하게 하여 피부상태의 변화를 관찰하였다.

[표 5]

실험효과는 두가지 방법으로 확인하였다. 한가지는 사용하는 사람과 관찰자가 눈으로 관찰한 것을 매주 기록하여 확인하는 방법이며 또 한가지는 변화된 피부 상태를 좀 더 객관적으로 측정할 수 있게 일본 미놀타 카메라(Minolta camera)상의 색상 측정기기 크로마메타 씨알-100(Chromameter CR-100)을 사용하여 크림의 사용을 시작하기 전에 피부의 명도(L값)를 측정하여 두고 매주 1회 명도(L)값을 측정하여 그 효과를 확인하였다. 이 크로마메타 씨알-100은 명도(L), 색도(A) 및 채도(B)를 측정하는 기기로서 명도(L)값의 경우 어두울수록 낮은 수치에 접근하고(검은색의 경우 L=0)밝을수록 높은 수치(흰색의 경우 L=100)에 접근한다. 품평대상자 60명을 가군에 10명, 나군에 50명으로 나누어서 가군에는 본 발명의 국화 추출물이 함유되어 있지 않은 크림 A를 사용하게 하였으며 나군에는 본 발명의 국화추출물이 함유되어 있는 크림 B를 사용하게 하였다. 이 결과 가군 및 나군에서 시각적을 미백효과를 느끼기 시작한 정도는 아래 표 6과 같다.

[표 6]

즉 가군에서는 12주 후에 미백효과를 자신이 느끼는 시간이 10%정도로서 이것은 크림에 의한 효과 외에 다른 조건에 의하여 얻을 수 있는 정도의 효과로 볼 수 있다. 반면 나군에서는 8주 후에는 56%정도가 미백효과를 느끼고 12주 후에는 68%로서 상당한 효과를 느낀다고 응답하고 있다. 한편 가군 및 나군에 대한 크로마메터 씨알-100으로 측정한 얼굴피부의 명도값 L의 평균값은 아래 표 7과 같다.

[표 7]

즉 상기 실험에서 본 발명의 국화 추출물을 함유한 나군의 피부의 명도 값이 증가가 대조군에서의 명도값의 증가보다 훨씬 큼을 알 수 있다. 특히 사용 8주 후이 효과가 아주 우수함을 알 수 있는데 이는 국화 추출물의 성분의 작용이 일반적으로 서서히 이루어짐을 알 수 있었다. 이들 결과는 시간적으로 판정한 실험결과와 잘 일치함을 알 수 있다.

이상과 같이 본 발명의 국화 추출물을 함유한 조성물은 우수한 티로시나제 저해 효과 및 미백효과를 가짐을 알 수 있으며, 조성물을 제형화할 수 있는 구체적인 제제예를 들면 다음 제제예 1-7과 같다.

제제예 1. 크림 조성물

원료명 %

1. 세토스테아릴알코올 1.0

2. 자기유화형 모노스테아린산글리세린 1.0

3. 친유형 모노스테아린산글리세린 2.5

4. 마이크로크리스탈린납 2.0

5. 파라옥시안식향산메칠 0.2

6. 파라옥시안식향산프로필 0.1

7. 밀납 2.0

8. 모노스테아린산폴리에칠렌글리콜 2.0

9. 모노스테아린산소르비탄 1.0

10. 트리(카프릴, 카프린산)글리세린 5.0

11. 액상라놀린 5.0

12. 미리스틴산옥틸도데실 8.0

13. 스쿠알란 8.0

14. 농글리세린 5.0

15. 1, 3-부틸렌글리콜 5.0

16. 알란토인 0.1

17. 국화 추출물(7)(실시예 7) 0.6

18. 국화 추출물(8)(실시예 8) 0.4

19. 향료 적량

20. 황색 4호 적량

21. 정제수를 가하여 100%로 만든다

“제조방법”

유상과 수상을 각각 75℃로 가열 혼합한 후 실온으로 냉각한다.

제제예 2. 마사지크림

원료명 %

1. 세토스테아릴알코올 2.0

2. 친유형 모노스테아린산글리세린 2.5

3. 자기유형 모노스테아린산 1.5

4. 파라옥시안식향산메칠 0.2

5. 파라옥시안식향산프로필 0.1

6. 바셀린 3.5

7. 모노스테아린산폴리에칠렌 글리콜 3.5

8. 세스퀴올레인산소르비탄 1.8

9. 유동파라핀 35.0

11. 트리(카프릴, 카프린산)글리세린 3.0

12. 옥틸도데칸올 5.0

13. 스쿠알란 2.0

17. 농글리세린 5.0

25. 국화 추출물(2)(제조실시예 2) 1.0

27. 히아론산추출물 1.0

36. 향료 적량

39. 정제수를 가하여 100%로 만든다.

“제조방법”

유상과 수상을 각각 75℃로 가열 용해 혼합 유화한 후 실온으로 냉각한다.

제제예 3. 로션

원료명 %

1. 세토스테아릴알코올 2.0

2. 스테아린산 1.0

3. 자기유화형 모노스테아린산글리세린 2.0

4. 친유형 모노스테아린산 글리세린 1.0

5. 바셀린 1.0

6. 모노스테라인산폴리옥시에칠렌소르비탄(20E. O) 1.5

7. 세스퀴올레인산소르비탄 1.0

8. 유동파라핀 5.0

9. 스쿠알란 5.0

10. 파라옥시안식향산프로필 0.2

11. 파리옥시안식향산메칠 0.2

12. 농글리세린 5.0

13. 국화 추출물(4)(실시예 4) 15.0

14. 트리에탄올아민 0.5

15. 카르복시비닐폴리머 0.2

16. 향료 적량

17. 정제수를 가하여 100%로 만든다.

“제조방법”

수상과 유상을 각각 75℃로 가열 혼합한 후 실온으로 냉각한다.

제제예 4. 스킨로션

원료명 %

1. 글리세린 2.0

2. 1, 3-부틸렌글리콜 2.0

3. 구연산 0.01

4. 에탄올 15.0

5. 폴리옥시에칠렌경화피마자유 1.0

6. 국화 추출물(5)(실시예 5) 5.0

7. 향료 적량

8. 위치하젤추출물 1.0

9. 정제수를 가하여 100%로 만든다.

“제조방법”

수상과 에탄올상을 각각 제조 혼합한 후 여과한다.

제제예 5. 에센스

원료명 %

1. 농글리세린 15.0

2. 1,3 - 부틸렌글리콜 5.0

3. 알란토인 0.1

4. 에탄올 7.0

5. 파라옥시안식향산메칠 0.15

6. 트리에탄올아민 0.15

7. 폴리옥시에칠렌경화피마자유 1.0

8. 초산토코페롤 0.5

9. 카르복시비닐폴리머 0.15

10. 국화 추출물(1)(실시예 1) 10.0

11. 향료 적량

12. 정제수를 가하여 100%로 만든다.

“제조방법”

수상과 에탄올상을 각각 제조혼합 후 여과한다.

제제예 6. 팩

원료명 %

1. 폴리비닐알코올 15.0

2. 카르복시메칠셀룰로오스나트륨 0.3

3. 농글리세린 3.0

4. 알란토인 0.1

5. 에칠렌디아민테트라초산디나트륨 0.01

6. 폴리에칠렌글리콜 4000 1.0

7. 에탄올 6.0

8. 파라옥시안식향산메칠 0.15

9. 파라옥시안식향산프로필 0.05

10. 디엘판테놀 0.1

11. 폴리옥시에칠렌(12)노닐페닐에텔 0.5

12. 국화 추출물(9)(실시예 9) 1.0

13. 향료 적량

14. 정제수를 가하여 100%로 만든다.

“제조방법”

수상과 알코올상을 각각 분산 용해하여 혼합시킨 후 실온으로 냉각한다.

제제예 7. 클렌징폼

원료명 %

1. 스테아린산 6.5

2. 미리스틴산 28.0

3. 자기유화형 모노스테아린산글리세린 3.0

4. 프로필렌글리콜 5.0

5. 농글리세린 10.0

6. 수산화칼륨 7.0

7. 에칠렌디아민테트라초산디나트륨 0.1

8. 프라센타추출물 0.5

9. 국화 추출물(4)(실시예 4) 5.0

10. 향료 적량

11. 정제수를 가하여 100%로 만든다.

“제조방법”

수상과 오일상을 각각 분산 용해하여 혼합, 검화한 후 실온으로 냉각한다.

Claims

국화속 식물의 유기 용매 추출물을 함유함을 특징으로 하는 티로시나제 저해제 조성물.
제1항에 있어서, 국화속 식물의 추출물의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 건조 추출물의 중량으로 0.001∼30%임을 특징으로 하는 티로시나제 저해제 조성물.