KR930702535A - 골격구조(framework)가 돌연 변이된 항체 및 그들의 제조 방법 - Google Patents
골격구조(framework)가 돌연 변이된 항체 및 그들의 제조 방법Info
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Abstract
본 발명은 항체사슬의 가변부를 구성하는 CDR들이 제1의 포유류종으로부터 유도된 것인 돌연변이된 항체사슬 및 그들의 제조 방법에 관한 것이다. 그 제1의 포유류종의 가변부를 암호하는 DNA의 골격 구조-암호 영역은 돌연변이되어 그 돌연변이된 골격구조-암호 영역은 제2의 다른 포유류종으로부터 유도된 골격구조를 암호하게 된다. 그 항체 쇄의 불변부나 각각의 불변부는, 존재한다면, 또한 제2의 포유류 종으로부터 유도될 수 있다.
사람 CD4 항원에 결합할 수 있는 항체는 또한 그 항체를 포함하는 약학적 조성물로 제공된다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 래트 CD4 항체 경쇄 가변부의 뉴클레오티드서열 및 추정된 아미노산 서열을 나타낸다. 제2도는 재구성된 CAMPATH-1 항체 경쇄 cKNA의 뉴클레오티드서열 및 추정된 아미노산 서열을 나타낸다. 제3도는 재구성된 CD4 항체 경쇄 cDNA인 CD4VLREI의 뉴클레오티드서열 및 추정된 아미노산 서열을 나타낸다.
Claims (19)
- 항체 사슬의 가변부를 구성하는 상보성 결정영역(CDR)들은 제1의 포유류 종으로부터 유도된 것이고, 가변부의 골격구조 및, 만일 존재한다면, 항체사슬의 불변부나 각각의 불변부는 제2의 포유류 종으로부터 유도된 것인 항체 사슬의 제조 방법으로서, 그 방법은, (i) 상기 제1의 포유류 종의 항체 사슬의 가변부를 암호하는 DNA의 골격구조-암호 영역을 돌연변이시켜 그 돌연변이된 골격구조-암호영역이 상기 제2의 포유류 종으로부터 유도된 상기 골격구조를 암호하도록 하는 단계, 및 (ii) 단계 (i)에서 돌연변이된 DNA를 이용하여 상기 항체사슬을 형질발현시키는 단계를 포함함을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제1항에 있어서, 항체 중쇄의 상기 가변부를 암호하는 DNA의 골격구조-암호 영역은 단계(i)에서 돌연변이됨을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 항체 경쇄의 상기 가변부를 암호하는 DNA의 골격구조-암호 영역은 단계(i)에서 돌연변이됨을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제1항 내지 제3항중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1의 포유류종은 래트나 마우스임을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2의 포유류 종은 사람임을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제1항 내지 제5항중 어느 한 항에 있어서, (a) 상기 제1의 포유류 종에 있어서 소정의 항체 사슬의 가변부의 뉴클레오티드 서열과 추정된 아미노산 서열을 결정하는 단계, (b) 상기 항체 골격구조가 상기 가변부의 어떤 골격 구조로 변형화되어야만 하는지를 결정하는 단계, (c) 상기 가변부를 암호하는 DNA의 골격구조-암호 영역을 돌연변이시켜 그 돌연변이된 골격구조-암호 영역이 단계(b)에서 결정된 골격구조를 암호하도록 하는 단계, (d) 단계 (c)에서 수득한 돌연변이된 DNA를 상기 제2의 포유류종의 불변부를 암호화하는 DNA에 연결시키고, 그 DNA를 형질발현 벡터내로 클로닝시키는 단계, 및 (e) 상기 형질 발현 벡터를 화합성인 숙주세포내로 도입시키고, 항체 사슬이 형질 발현될 수 있는 조건하에서 상기 숙주 세포를 배양하는 단계를 포함함을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제6항에 있어서, 상기 가변부의 골격구조가 변형화 되어야만 하는 골격구조로서 다른 종의 항체사슬의 골격구조와 거의 상동성인 골격구조를 단계(b)에서 선택하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제1항 내지 제7항중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1의 포유류종의 항체는 CD4 항체임을 특징으로 하는 제조 방법.
- 제1항 내지 제8항중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 사슬은 상보적인 항체 사슬과 함께 동시-형질 발현되고 상기 2개의 사슬은 함유하는 항체가 회수됨을 특징으로 하는 제조방법.
- 사람 CD4 항원에 결합할 수 있는 항체로서, 이 항체의 경쇄중의 CDR들은 하기 아미노산 서열을 갖으며, CDR 1 : LASEDIYSDLA CDR 2 : NTDTLQN CDR 3; QQYNNYPWT, 상기 항체의 중쇄중의 CDR들은 하기 아미노산 서열을 갖으며, CDR 1 : NYGMA CDR 2 : TISHDGSDTYFRDSVKG CDR 3 : QGTIAGIRH, 그리고 또한 상기 가변부의 골격구조 및, 만일 존재한다면 각 사슬의 불변부나 각각의 불변부는 비-래트 포유류종으로부터 유도됨을 특징으로 하는 항체.
- 제10항에 있어서, 상기 비-래트 포유류 종은 사람임을 특징으로 하는 항체.
- 제11항에 있어서, 상기 중쇄의 가변부 골격구조는 KOL 단백질의 중쇄 가변부 골격구조와 상동성임을 특징으로 하는 항체.
- 제12항에 있어서, 상기 중쇄 가변부는 제10도 또는 제12도에서 윗줄에 나타낸 아미노산 서열을 가짐을 특징으로 하는 항체.
- 제11항에 있어서, 상기 중쇄의 가변부 골격구조는 NEW 단백질의 중쇄 가변부 골격구조와 상동성임을 특징으로 하는 항체.
- 제14항에 있어서, 상기 중쇄의 가변부는 제6도 또는 제7에서 윗줄에 나타낸 아미노산 서열을 가짐을 특징으로 하는 항체.
- 제11항 내지 제15항중 어느 한 항에 있어서, 상기 경쇄의 가변부 골격구조는 REI 단백질의 가변부 골격구조와 상동성임을 특징으로 하는 항체.
- 제16항에 있어서, 상기 경쇄는 제3도에서 윗줄에 나타낸 아미노산 서열을 가짐을 특징으로 하는 항체.
- 약학적 허용성 담체나 희석제 및 활성성분으로서 제10항 내지 제17항중 어느 한 항에서 청구된 항체를 포함하는 약학적 조성물.
- ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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