KR930702341A - 타겟 특이물질인 적혈구와 혈전-적혈구 - Google Patents
타겟 특이물질인 적혈구와 혈전-적혈구Info
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Abstract
본 발명은 혈소판웅집을 촉진시켜 출혈을 조절할 수 있는 신규한 성분물과 방법을 제공한다. 본 발명은 RGD 펩티드를 포함하는 폴리펩티드에 적혈구가 결합하여 활성혈소판에 선택적으로 결합하는 놀라운 것을 발견하였다. 유도체적혈구의 인식으로 이를 혈전-적혈구라하고 이는 기존의 혈액특징을 가지고 있다. 구체예에서 혈전 적혈구는 적혈구의 글리코포린 A와 B가 특이적으로RGD 펩티드에 교자결합함을 알 수 있다. 본 발명의 혈전-적혈구에서 RGD의 Arg의 N말단은 거리가 9-50, 적절하게는 10-40, 가장 적절하게는 11-25 A으로 적혈구 단백질과 거리를 두고 있다. 본 발명은 라벨 또는 시약으로 구성된 성분물이 적혈구 세포내 물질과 치환시키는 것이다. 이와 같은 것을 운반-적혈구라 하고 이분반적혈구는 타겟팅 물질이 특이조직에 결합하여 이러한 물질의 수송에 대한 이용에 관계한다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 적혈구와 혈전-적혈구의 삼투용해를 나타낸다, 제2도는 적혈구와 혈전-적혈구의 에카타사이토메티 분석을 한 것이다, 제3도는 펩티드 결합에 의한 혈전-적혈구 막단백질의 분석을 한 것이다.
Claims (68)
- 혈전-적혈구의 구성에 있어서, a)적혈구; b)적혈구에 제1 기능기가 공유결합된 생체 경쟁성이 있는 다가기능기 분자, 그리고 c)다음의 식으로 폴리펩티드 R1-Arg-Gly-Asp-R2, 이때 R1은 아미노산 또는 하나 이상의 아미노산으로 된 서열, R1은 다가기능기 분자의 제2기능기에 공유결합되어 있고, R2는 OH, 아미노산 또는 아미드 또는 하나이상의 아미노산 서열로 구성되고, 혈전-적혈구는 활성화된 혈소판에 선택적으로 결합할 수 있는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제1항에 있어서, 고유의 적혈구의 혈액특징과 비교할때 혈액특징상에 중요한 차이점이 없는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제2항에 있어서, 레이져 회절 에크타사이토메트리(laser diffraction ektacytome try)에 의해 차이점이 없는 것이 설명되는 것을 특징으로 하는 혈전 적혈구.
- 제1항에 있어서, 적혈구와 다가기능의 제1기능기 사이에 공유결합에서 폴리펩티드의 Arg의 N-단부까지의 거리가 2중 결합의 길이를 포함해서 직선거리는 9-50Å인 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제4항에 있어서, 거리가 10-40A인 것을 특징으로 하는 혈전 적혈구.
- 제4항에 있어서, 거리가 11-25A인 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제1항에 있어서, 다기능 분자의 제1기능기는 글리코포린 A 이량체, 글리코포린 A단량체 그리고 글리코포린 B로 구성된 집단에서 선택된 적혈구에 결합되는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 혈전-적혈구의 구성에 있어서, a)적혈구; b)적혈구에 제1기능기가 공유결합된 생체 경쟁성이 있는 다가기능기 분자, 그리고 c)하기의 식으로 된 펩티드 XY(Z)n-Arg-Gly-Asp-R X,Y,Z는 독힙적으로 아미노산을 나타내고 X는 다가기능기분자에 제2기능기에 공유결합되고, n은 0또는 1 그리고 R은 OH1 아미노산 또는 아미드 또는 하나이상의 아미노산 서열로 구성되고 혈전적혈구는 활성화된 혈소판에 선택적으로 결합할 수 있는 능력이 있는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 내용 없음.
- 혈전-적혈구를 만드는 방법에 있어서, a)폴리펩티드가 R1-Arg-Gly-Asp-R2 이고 pH6.0 에서 폴리펩티드에 다가기능기 분자를 결합시키고 이때, R1은 아미노산 또는 하나 이상의 아미노산 서열이며, 폴리펩티드에 다가기능기 분자의 결합은 R1과 분자의 제1기능기 사이에 공유결합의 형성을 통해서 시행되고, b)생성된 다가기능기 분자결합된 폴리펩티드 복합체의 pH를 7.4로 조정하고, 그리고 c)pH7.4에서 다가기능기 분자-폴리펩티드 복합체와 적혈구를 결합시키고, 그리고 다가기능기 분자의 제2기능기와 적혈구 사이에 공유결합이 형성된 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제10항의 방법에 따라 생성된 것을 특징으로 하는 혈전 적혈구.
- 제11항에 있어서, 고유의 적혈구의 혈액특징과 비교할때 혈액특징상에 중요한 차이점이 없는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제12항에 있어서, 레이져 회절 에크타사이토메트리(laser diffraction ektacytome try)에 의해 차이점이 없는 것이 설명되는 것을 특징으로 하는 혈전 적혈구.
- 제11항에 있어서, 적혈구와 다가기능의 제1기능기 사이에 공유결합에서 폴리펩티드의 Arg의 N-단부까지의 거리가 2중결합의 길이를 포함해서 직선거리를 9-50A인 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제14항에 있어서, 거리가 10-40A인 것을 특징으로 하는 혈전 적혈구.
- 제14항에 있어서, 거리가 11-25A인 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제11항에 있어서, 다기능 분자의 제1기능기는 글리코포린 A 이량체, 글리코포린 A단량체 그리고 글리코포린 B로 구성된 집단에서 선택된 적혈구에 결합되는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제11항에 있어서, 다가기능기 분자는 1-하이드록시-2-니트로벤젠-4-숙신산 소듐염의 N-말레이미도-6-아미노카프로일 에스테르이고, 폴리펩티드는 아세틸-Cys- Gly-Arg-Gly-Asp-Phe-아미드인 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제11항에 있어서, 다가기능기 분자의 제2기능기는 적혈구의 아미노 또는 설피하이드릴기로 공유결합에 의해 적혈구와 결합되는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제11항에 있어서, 다가기능기 분자의 제1기능기는 R1의 아미노산 또는 SH기의 고유결합을 형성함으로써 R1에 부착된 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제11항에 있어서, R2는 페닐알라닌, 트립토판, 트레오닌 그리고 이들의 아미드에서 선택되는 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제21항에 있어서, R1은 Cys-Gly-Gly 또는 이의 아세틸화된 유도체인 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 혈전-적혈구를 만드는 방법에 있어서, a)폴리펩티드가 XY(Z)n-Arg-Gly-Asp-R이고 pH6.0에서 폴리펩티드에 다가기능기 분자를 결합시키고 이때, XYZ는 각각 독립 아미노산이고 n은 0또는 1,R은 OH, 아미노산, 아미드, 또는 하나이상의 아미노산 서열이며, 폴리펩티드에 다가기능기 분자의 결합은 X과 분자의 제1기능기 사이에 공유결합의 형성을 통해서 시행되고, b)생성된 다가기능기 분자결합된 폴리펩티드 복합체의 pH를 7.4로 조정하고, 그리고 c)pH7.4에서 다가기능기 분자-폴리펩티드 복합체와 적혈구를 결합시키고, 그리고 다가기능기 부나의 제2기능기와 적혈구 사이에 공유결합이 형성된 것을 특징으로 하는 혈전-적혈구.
- 제1항에 따른 혈전-적혈구의 효과량을 포유류에 주입시켜 포유류에서의 출혈을 조절하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 방법.
- 제3항에 따른 혈전-적혈구의 효과량을 포유류에 주입시켜 포유류에서의 출혈을 조절하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 방법.
- 제4항에 따른 혈전-적혈구의 효과량을 포유류에 주입시켜 포유류에서의 출혈을 조절하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 방법.
- 제11 또는 16항에 따른 혈전-적혈구의 효과량을 포유류에 주입시켜 포유류에서의 출혈을 조절하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 방법.
- 제24항에 있어서, 포유류가 사람인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제27항에 있어서, 포유류가 사람인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제28항에 있어서, 혈전-적혈구는 사람에게 자가 발생되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제29항에 있어서, 혈전-적혈구는 사람에게 자가 발생되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 포유류의 출혈을 조절하는 방법에 있어서, a)포유류에서 kg당 적혈구로 구성된 혈액 0.286내지 3.57ml을 뽑아내고, b)절혈구를 세척하고; c)적혈구당 약 0.05X 106내지 20 ×106폴리펩티드를 다가기능기 분자를 통해 적혈구에 결합시키고, 이때 폴리펩티드는 R1-Arg-Gly-Asp-R2 이며, R1은 아미노산 또는 하나 이상의 아미노산서열, R2는 OH, 아미노산 또는 아마이드, 또는 하나 이상의 아미노산 서열 그리고 d)포유류에 적혈구 결합된 폴리펩티드를 주입하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 포유류의 출혈조절방법.
- 제1항 또는 3항에 따른 혈전-적혈구와 제약학적으로 이용가능한 운반체 또는 부형체로 구성된 것을 특징으로 하는 제약학적 성분물.
- 제11항 또는 16항에 따른 혈전-적혈구의 효과량을 포유류에 주입시켜 포유류에서의 출혈을 조절하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 방법.
- 제33항에 따른 제약학적 성분물을 사람에게 주입하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 사람에게 출혈을 조절하는 방법.
- 제34항에 따른 제약학적 성분물을 사람에게 주입하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 사람에게 출혈을 조절하는 방법.
- 제34항에 있어서, 혈전-적혈구는 사람에게서 자가발생되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 하기의 구조식을 가진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드. XY(Z)n-Arg-Gly-Asp-R X,Y,z는 각각 독립적인 아미노산, n=0또는 1, 그리고 R은 OH, 또는 NH2, 세린, 트레오닌 또는 시스테인 또는 이의 아미드를 제외한 아미노산 또는 하나 이상의 아미노산으로 된 아미노산서열, 이서열에서 제1아미노산은 세린, 트레오닌, 또는 시스테인이 아닌 아스타르트산에 연결되어 있거나 또는 카르복실기의 아미드에 연결되어 있고, R이 페닐알라닌인 경우 Y 또는 Z는 글리신이 아님.
- 제38항에 있어서, X는 시스테인, 글리신에서 선택되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
- 제38항에 있어서, X는 페닐알린, 트립토판, 이의 아미드에서 선택되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
- 제38항에 있어서, n은 1이고 Y와 Z는 글리신인 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
- 제38항에 따른 폴리펩티드에서 X는 생체경쟁성이 있는 링거 분자에 공유결합으로 결합되어 있고 펩티드에 결합된 링커는 적어도 하나 이상의 자유 반응 기능기로 구성된 것을 특징으로 하는 폴리펩티드-교차 결합제 성분물.
- 제42항에 있어서, 교차결합제의 자유반응기는 설퍼하이드릴과 아민에서 선택된 기능기와 반응하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 교차결합체 성분물.
- a)적혈구내에 라벨이 포함된 재봉합된 적혈구 환영세포, 그리고 b)공유결합에 의해 적혈구 환영세포에 결합된 타겟팅 분자로 구성된 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제44항에 있어서, 라벨은 라디오뉴클리드, 중금속과 마그네틱 레조넌스 이메이징 물질에서 선택되는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- a)적혈구내에 생물학적 활성제가 포함된 재봉합된 적혈구 환영세포, 그리고 b)공유결합에 의해 적혈구 환영 세포에 결합된 타겟팅 분자로 구성된 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제46항에 있어서, 생물학적 활성제는 화학치료요법제, 약물, 뉴로특신, 혈전용해제, 성장인자, 향신경성인자, 호르몬, 그리고 핵산에서 선택되는 것을 특징으로하는 표식화된 적혈구.
- 제44 또는 46항에 있어서, 타겟팅 분자는 펩티드 또는 단백질, 항체, 렉틴, 탄수화물, 스테로이드에서 선택되는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제44또는 46항에 있어서, 타겟팅 분자가 단클론 항체 또는 이단편인 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제49항에 있어서, 단클론 항체가 혈소판 항원에 결합되는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제44 또는 46항에 있어서, 타겟팅 분자는 Arg-Gly-Asp 서열로 구성된 폴리펩티드인 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제46항에 있어서, 생물학적 활성제는 혈전용해제이고 타겟팅 분자는 Arg-Gly-Asp 으로 구성된 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제44항에 있어서, 적혈구 환영세포는 다기능기 분자의 제1기능기에 의해 다기능 분자에 공유결합하고, 다기능 분자는 다기능분자의 제2기능기를 통해 R-Arg-Gly-Asp-R2의 구조식을 가지는 폴리펩티드에 공유결합하고, 이때 R1은 아미노산 또는 하나이상의 아미노산으로 구성된 서열이 되고, 온 다가기능기 분자의 제2기능기에 공유결합되어 있고, R2는 OH, 아미노산 또는 아미드 또는 하나 이상의 아미노산으로된 아미노산 서열이 되고, 생성된 적혈구 환영세포는 활성화된 혈소판에 선택적으로 결합할 수 있는 능력을 가지는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구.
- 제46항 또는 46항에 따른 표식화된 적혈구와 제약학적 수용가능한 운반체 또는 부형제로 구성된 것을 특징으로 하는 제약학적 성분물.
- 표식화된 적혈구를 제조하는 방법에 있어서, a)적혈구를 적혈구 세포내용물을 유리할 수 있도록 하고, b)a)단계에서 만들어진 적혈구에 물질을 도입시키고, c)b)단계에서 만들어진 막을 재봉합시키고, 그리고 d)공유결합을 통하여 적혈구에 타겟팅 분자를 결합시키는 단계로 구성된 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구 제조방법.
- 제55항에 있어서, (d)의 결합단계를 (a)단계에 선행 실시하는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구 제조방법.
- 제55항에 있어서, (d)의 결합단계에 이어서 (c)단계를 실시하는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구 제조방법.
- 제55항에 있어서, 도입 물질이 라벨 또는 생물학적 활성물질이 되는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구 제조방법.
- 제58항에 있어서, 타겟팅 분자는 단클론 항체 또는 의의 간편이 되는 것을 특징으로 하는 표식화된 적혈구 제조방법.
- 생물학적 활성물질이 치료요법제인 제46항에 따른 표식화된 적혈구의 치료요법적 효과량으로 구성된 제약학적 성분물을 표유류에 주입하여 질환 또는 질병의 치료를 하는 방법.
- 제45항에 따른 표식화된 적혈구의 효과량을 표유류에 주입하는 것으로 구성된 것을 특징으로 하는 표유류 질환 치료방법.
- 출혈조절에 이용하는 것을 목적으로 제1,10또는 12항의 혈전-적혈구로 구성된 것을 특징으로 하는 성분물.
- 질병의 치료에 사용하기 위해 활성성분이 치료요법제인 제46항에 따른 표식화된 적혈구로 구성된 것을 특징으로 하는 성분물.
- 질병의 진단에 사용하기 위해 활성성분이 치료요법제인 제45항에 따른 표식화된 적혈구로 구성된 것을 특징으로 하는 성분물.
- 출혈을 조절할 수 있는 약물을 제조하기 위해 제1항에 따른 혈전-적혈구로 구성된 성분물의 용도.
- 질병의 치료를 위한 것으로 생물학적 활성제가 치료요법제인 제46항에 따른 표식화된 적혈구로 구성된 성분물의 용도.
- 질병의 진단을 위한 것으로 제45항에 따른 표식화된 적혈구로 구성된 성분물의 용도.
- ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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