KR930019828A - 대장균에서 발현된 소 성장 호르몬의 정제 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 유전자 재조합된 대장균에서 발현된 소 성장 호르몬을 정제하는데 있어서, (가) 소 성장 흐르몬이 발현된 대장균을 계면활성제가 함유된 완충용액중에서 호모지나이저로 분쇄하여 불용성의 소 성장 호르몬 굴절체를 분리하고; (나) 분리된 용성 굴절체를 계면활성제 및 에틸디아민테트라아세트산이 함유된 용액으로 세척한 다음 다시 100 내지 500mM 염화나트륨 또는 증류수를 세척하고; (다) 불용성 굴절체를 수산화나트륨을 사용하여 pH 11.5 내지 13.0에서 용해시킨 후; (라)원심분리 및 한 외여과법에 의해 용해되지 않은 침전물을 제거하고; (마) 양이온 교환수지 컬럼 크로마토그래피하여서 소 성장 호르몬을 정제함으로써, 소 성정 호르몬을 저렴한 비용으로 고순도 및 고수율로 대량 정제하는 방법을 제공하는 것이다.

Description

대장균에서 발현된 소 성장 호르몬의 정제 방법.
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 소 성장 호르몬의 아미노산 서열을 나타낸 것이다.
제2도는 소 성장 호르몬이 발현된 대장균 추출액을 소듐 도데실 설페이트 폴리아크릴 아마이드 젤 전기영동(SDS-PAGE) 한 결과를 나타낸 것이다.
제3도는 소 성장 호르몬 굴절체를 분리, 정제하는 동안 얻어진 중간 생성물을 SDS-PAGE하여 나타낸 것이다.

Claims (5)

  1. 유전자 재조합된 대장균에서 발현된 소 성장 호르몬을 정제하는 방법에 있어서, (가) 소 성장 호르몬이 발현된 대장균을 계면활성제가 함유된 완충용액중에서 호모지나이저로 분쇄하여 불용성의 소 성장 호르몬 굴절체를 분리하고; (나) 분리된 용성 굴절체를 계면활성제 및 에틸디아민테트라아세트산이 함유된 용액으로 세척한 다음 다시 100 내지 500mM 염화나트륨 또는 증류수로 세척하고; (다) 불용성 굴절체를 수산화나트륨을 사용하여 pH 11.5 내지 13.0에서 용해시킨 후; (라) 원심분리 및 한 외여과법에 의해 용해되지 않는 침전물을 제거하고; (마) 양이온 교환수지 컬럼 크로마토그래피로 분리하는 단계를 포함하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 소 성장 호르몬이 발현된 대장균은 트립토판 프로모터를 이용하여 소 성장 호르몬을 발현시키는 대장균인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 (가) 단계 또는 (나) 단계의 계면활성제가 0.05 내지 1% 농도의 트리톤 엑스-100(Triton X-100) 또는 트윈 80 (Tween)인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 (라) 단계의 한외여과는 분자량 10만 이하 또는 30만 이하의 물질만을 통과시키는 한외여과막을 사용하는 것인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 (마) 단계의 양이온 교환 수지가 디에틸아미노에틸 또는 디에틸-(2-히드록-프로필)아미노에틸을 기능기로 하며 글리신 완충용액으로 평형화시킨 것임이 특징인 제1항의 방법
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100808172B1 (ko) * 2005-02-28 2008-02-29 엘지전자 주식회사 리프레쉬 장치

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