KR910016926A - 인간 β-인터페론의 정제방법 - Google Patents

Abstract

내용 없음

Description

인간 β-인터페론의 정제방법

본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

제1도는 본 발명에 따른 정제방법의 개요를 도표로 나타낸 것이고, 제2도는 본 발명에 따라 구아니딘 농도 분획법으로 정제할 때 그 정제되어가는 과정을 SDS-PAGE하여 나타낸 것이다.

Claims (4)

1. 유전공학적인 방법으로 박테리아내에서 발현된 인간 β-인터페론을 정제하는데 있어서, 인간 β-인터페론이 발현되어 있는 박테리아 세포를 파괴하고 원심 분리하여 용해 단백질을 제거하는 과정을 거쳐 얻어진 불용해 침전물을 인산염수완충용액으로 세척 및 원심 분리한 다음, 그 침전물을 8M 구아니딘 용액에 용해시킨 후 원심 분리하여 침전물을 제거하고, 그 상등액을 디티오에리트리톨을 함유하는 인산염수완충액으로 4M 구아니딘 용액 농도까지 희석시킨 후 원심 분리하여 침전물을 제거하고, 그 상등액을 디티오에리트리톨을 함유하는 인산염수완충액으로 1.3M 구아니딘 농도까지 희석시킨 후 원심분리하여 상등액을 제거한 다음, 그 침전물을 환원상태에서 배제한계가 300,000이상인 덱스트란-비스아크릴아마이드계 겔 컬럼을 이용하여 1차 겔 여과 크로마토그라피하고, 1차 분리된 분획을 수집하여 이를 비환원상태에서 동일 컬럼을 이용하여 2차 겔 여과 크로마토그라피하여서, 순도 95% 이상의 인간 β-인터페론을 얻는 것임을 특징으로 하는 인간 β-인터페론의 정제방법.
2. 제1항에 있어서, 상기 환원상태에서의 1차 겔 여과 크로마토그라피는 50mM 소듐아세테이트, pH 5.5 10mM 디티오에리트리톨, 2mM 에틸렌디아민테트라아세트산, 0.1% 소듐도데실설페이트로 구성된 완충용액을 사용하여서 실시되는 것임을 특징으로 하는 인간 β-인터페론의 정제방법.
3. 제1항에 있어서, 상기 비환원상태에서의 2차 겔 여과 크로마토그라피는 50mM 소듐아세테이트, pH 5.5 2mM 에틸렌디아민테트라아세트산, 0.1% 소듐도데실설페이트로 구성된 완충용액을 사용하여서 실시되는 것임을 특징으로 하는 인간 β-인터페론의 정제방법.
4. 제1항에 있어서, 디티오에리트리톨은 그 농도가 10mM인 것임을 특징으로 하는 인간 β-인터페론의 정제방법.

   ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.