KR910006498A - 중합효소 인쇄 반응에서 동일하지 않은 프라이머 농도를 사용한 핵산 검출 방법. - Google Patents

중합효소 인쇄 반응에서 동일하지 않은 프라이머 농도를 사용한 핵산 검출 방법. Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

중합효소 연쇄 반응에서 동일하지 않은 프라이머 농도를 사용한 핵산 검출 방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (10)

  1. 하기 A-D단계를 포함하는 2개의 상보적 가닥들을 갖는 핵산의 검출 방법; A. 핵산의 변성된 상보적 가닥과 데옥시리보뉴클레오 사이드-5′-트리포스페이트, 중합체, 및 상기 변성된 핵산 가닥에 대해 실질적으로 상보적인 한 쌍의 프라이머(상기 프라이머들은 적어도 2:1의 몰비로 존재한다)를 프라이머와 그의 상보적인 핵산 가닥의 하이브리드 형성된 연장 생성물(상기 연장 생성물은, 그의 상보물로부터 분리시, 연장 생성물의 합성을 위한 주형으로서 작용할 수 있다)을 형성하기 위한 하이브리드 형성 조건하에서 접촉시키고, B. 프라이머 연장 생성물을 이들이 합성된 주혐으로부터 분리시키며, C. 분리된 프라이머 연장 생성물에 증폭 조건을 가하고, D. 단계 C에서 형성된 증폭, 생성물의 추가의 변성없이, 과량의 프라이머를 사용하여 형성된 프라이머 연장 생성물의 존재를 검출된 프라이머 연장 생성물에 대해 상보적이거나 또는 그와 결합될 수 있고 그의 기질의 존재하에 검출할 수 있는 비색 또는 형광 신호를 제공하는 효소-표지된 시약을 사용하여 비색법 또는 형광법으로 검출한다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 프라이머들이 적어도 5:1의 몰비로 존재하는 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 중합체가 내열성 중합요소인 방법.
  4. 제1항 내지 제3항중 어느 한 항에 있어서, 상기 증폭된 생성물을 효소의 존재하에 염색을 제공하는 효소-표지된 시약용 기질 조성물을 사용하여 비색법으로 검출하는 방법.
  5. 제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 상기 효소 표지 과산화효소이며, 상기 기질 조성물이 과산화효소 및 과산화수소의 존재하에 염색을 제공하는 류코 염료를 포함하는 방법.
  6. 제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 상기 효소표지가 알칼리성 인산효소인 방법.
  7. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 있어서, 상기 효소-표지된 시약이 검출된 프라이머 연장 생성물에 상보적인 효소-표지된 올리고뉴클레오타이드 탐침인 방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 효소 표지가 과산화효소인 방법.
  9. 제1항 내지 제8항중 어느 한 항에 있어서, 과량으로 존재하는 프라이머 연장 생성물의 검출이 포착 탐침으로 생성물을 하이브리드 형성시킴으로 포함하는 방법.
  10. 제1항 내지 제9항중 어느 한 항에 있어서, 상기 효소-표지된 시약이 과량으로 존재하는 비오티닐화 프리이 머 연장 생성물과 착화될 수 있는 효소와 아비딘의 결합체인 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019900014994A 1989-09-22 1990-09-21 중합효소 인쇄 반응에서 동일하지 않은 프라이머 농도를 사용한 핵산 검출 방법. KR910006498A (ko)

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