KR900006510A - 배양된 표피시트의 제조방법, 제조품 및 사용방법 - Google Patents

배양된 표피시트의 제조방법, 제조품 및 사용방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

배양된 표피시트의 제조방법, 제조품 및 사용방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (27)

  1. a. 콜라겐 타입 Ⅰ으로 처리된 용기에 혈청은 없고 표피생육인자(EGF) 존재하에 세포를 거의 집밀될 때까지 생육시키는 단계 ; b. 배지를 혈청함유 배지에 이동시키는 단계 ; c. 복수의 층으로 조직을 생장시키는 단계로 구성되어 있는 것을 특징으로 하는 동총이식에 적합한 포유동물 표피세포를 배양하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 세포가 케라틴 세포인 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 세포의 입수원이 사람피부인 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 세포의 입수원이 인간의 표피인 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제1항에 있어서, EGF가 5ng/ml 내지 50ng/ml, 바람직하게는 10ng/ml 내지 400ng/ml 가장 바람직하게는 10ng/ml인 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 제1항에 있어서, 배양용기에 콜라겐을 용기 75cm2당 0.1 내지 100mg, 바람직하게는 75cm2당 0.5mg 피복하는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 무혈청 생장배지가 수정된 MCDB153인 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 제7항에 있어서, 소 뇌하수체 추출액을 돼지 뇌하수체 추출액으로 대체한 것을 특징으로 하는 방법.
  9. a. 배양된 표피시트를 배양용기로부터 분리하는 단계 ; b. 동결단계 ; c. 소정의 시간동안 저장하는 단계 ; 그리고 d. 신속하게 해동시키는 단계로 구성되어 있는 것을 특징으로 하는 제1항의 방법에 따라 제조된 피부이식용의 배양된 표피시트를 저장하는 방법.
  10. 제9항에 있어서, 배양된 표피시트를 용기로부터 분리시키기 위하여 디스파스로 소화시키는 것을 특징으로 하는 방법.
  11. 제10항에 있어서, 디스파스를 1-10%로 1-2시간 동안 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  12. 제9항에 있어서, 배양된 표피시트를 냉동액에 배치한 후 점진적으로 온도를 낮추는 것을 특징으로 하는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 냉동액이 디메틸술폭시드(DMSO)를 3-10%, 바람직하게는 DMSO 5%와 글리세롤 5-20%, 바람직하게는 글리세롤 20%를 함유하는 조직배양 배지인 것을 특징으로 하는 방법.
  14. 제12항에 있어서, 배양된 표피시트를 약 -20℃에서 소정의 시간동안, 바람직하게는 1-2시간동안 배치하고 -70℃에서 소정의 기간동안, 바람직하게는 하루밤동안 배치한 후 약 -135℃로 옮기는 것을 특징으로 하는 방법.
  15. 제12항에 있어서, 배양된 표피시트를 냉동기에 배치하고 온도를 분당 1℃로 약 -135℃까지 하강시키는 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 제9항에 있어서, 동결된 배양 표피시트를 1시간으로부터 적어도 2년까지 저장하는 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 제9항에 있어서, 동결된 배양 표피시트를 30℃-40℃에서, 바람직하게는 37℃에서 해동시키는 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 제9항에 있어서, 동결된 배양 표피시트를 공기 또는 물 인큐베이터, 바람직하게는 물 인큐베이터에서 해동시키는 것을 특징으로 하는 방법.
  19. 제1항의 방법에 따라 제조된 배양 표피시트를 피부이식으로 상처에 이식하는 것을 특징으로 하는 방법.
  20. 제19항에 있어서, 조직배양배지가 DMEM(Dulbecco's modified Eagle medium)인 것을 특징으로 하는 방법.
  21. 제1항에 있어서, 세포를 집밀도 80% 내지 집밀 후 3일까지 사이에서 생장시키는 것을 특징으로 하는 방법.
  22. 제1항에 있어서, 제2생장배지가 DMEM과 같은 다른 어떠한 표준적인 혈청함유 배지인 것을 특징으로 하는 방법.
  23. 제1항의 방법에 따라 제조된 배양된 표피시트.
  24. 제19항에 기재된 방법에 따라 피부이식용으로 사용되는 배양된 표피시트.
  25. 제19항에 있어서, 상기 이식이 동종이식인 것을 특징으로 하는 방법.
  26. 제19항에 있어서, 상기 표피시트가 동결 및 해동된 것을 특징으로 하는 방법.
  27. 제19항에 있어서, 상기 시트에 가아제를 올려놓아서 배지 에서 상처로 이동시키는 것을 특징으로 하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019890014760A 1988-10-14 1989-10-14 배양된 표피시트의 제조방법, 제조품 및 사용방법 KR900006510A (ko)

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