KR890000524B1 - 퍼플루오로 화합물의 수성분산액의 재조방법 - Google Patents

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Description

퍼플루오로 화합물의 수성분산액의 제조방법

본 발명은 인간을 포함한 동물에서 기체운반제(gas transfer agents)로서, 그리고 약물이송 및 기타 치료용으로 유용한 퍼플루오로 화합물의 수성분산액에 관한 것이다. 대표적인 퍼플루오로 화합물과 분산액 및 그 용도에 관한 것이 미국특허 3,911,138(Clark) 및 4,105,798(Moore 및 Clark)에 공지되어 있다. 이들 특허에 언급된 퍼플루오로 화합물들은 본질적으로 무독성이며 따라서 치료용에 아주 적합하다.

상기 언급된 미국특허에 공지된 것과 같은 퍼플루오로 화합물의 수성분산액은 계면활성제를 물에 용해시킨 다음 퍼플루오로 화합물을 첨가해 주고 이어 퍼플루오로 화합물의 균일한 분산액이 얻어질때 까지 혼합물을 진탕해 줌으로써 제조된다. 퍼플푸오로 화합물은 아주 소수성이기 때문에 효과적인 분산을 얻기 위해선 고압균질화 또는 초음파에 의해 유도된 캐비테이션과 같은 상당한 기계적 에너지가 요구된다. 퍼플루오로 화합물과 계면활성제의 선택 및 성분들의 비에 따라 평균입자 크기가 직경 약 0.1-1.0미크론 정도로 아주 작은 안정한 분산액이 얻어진다. 이런 경우 분산액은 본질적으로 투명하며 때로 문헌에 마이크로에멀션(미국특허 번호 3,778,381 Rosano et all)으로 언급되어 있다. 그러나, 그밖의 경우에서 유용한 분산액은 더큰 평균입자 크기로 제조될 수 있으며 이들은 현탁액과 유탁액 경계가 될 수 있다. 따라서 본 명세서에서 사용된 "분산액"이란 용어는 일반적으로 수중유, 유중수 형태의 현탁액이나, 유탁액 또는 마이크로에멀션 같은 2상계를 나타내며 "퍼플루오로 화합물상"이란 용어는 분산액중 퍼플루오로 화합물 함유입자를 의미한다. 예시할 목적으로 본 명세서에서는 좀더 바람직한 조성물인 수중유 형태의 유탁액 또는 마이크로에멀션에 중점을 두었다.

극히 소수성인 퍼플루오로 화합물로 우수한 분산액을 제조하는데 따른 어려움을 극복하기 위해 보통 퍼플루오로 화합물에 비해 높은 비율의 계면활성제(중량 약 1:5)를 사용하고 저농도의 퍼플루오로 화합물(약 20-25% W/V)을 사용하여 분산액을 제조하여 왔다. 이것은 분산성을 양호하게 해줄 뿐 아니라 작은 입자 크기를 얻는 것을 용이하게 해준다. 결과 생성된 분산액은 폐색 또는 협착상태의 심장혈관계 특히 모세혈관이나 혈관으로서의 급속한 통과를 촉진시켜주는 낮은 점도 및 우수한 안정성을 갖는다. 이런 분산액은 또한 세망내피계(RES)에의 체류감소를 나타낸다. 그러나 분산액의 물리적 성질(특히 안정성 및 점도) 및 분산법을 최적으로 해주기 위해선 최종 분산액중 퍼플루오로 화합물 양에 상한선을 두어야 하며 그로인해 분산액의 기체운반 용량 및 유럽특허 공보 A 105584에 언급된 바와 같이 친유성 약제를 운반하고 저산소 세포를 처치하는 그들의 능력이 제한을 받게된다.

또한, 비록 LD₅₀기준에 따라 충분히 무독성인 계면활성제 및/또는 그 용량을 선택할 수는 있으나(제제화 하는데 따른 어려움 때문에 언제나 실제적인 것은 아니다.) 보족 약제의 활성화와 같은 계면활성제로 인한 그밖의 독성반응이 보고된 바 있다. 따라서 퍼플루오로 화합물 분산액중 계면활성제를 사용하지 않거나 또는 그 농도를 감소시키고 그에 비례하여 퍼플루오로 화합물 양을 효과적으로 분산될 수 있도록 감소시켜 주었다.

요약하면 이제까지는 효율적인 분산성, 낮은 입자크기, 안정성 및 점도 요구치를 만족시키고, 또 한편 충분한 기체 전달 능력과 생물학적 적합성을 만족시키고, 또 한편 충분한 기체 전달능력과 생물학적 적합성을 만족시키기 위해선 수성분산액중 퍼플루오로 화합물의 농도를 상당히 낮은 농도로 예컨대 분산액 100ml 당 약 25g 정도와 같이 약 25%(W/V)를 넘지 않도록 유지시켜 주어 그에 따라 계면활성제 양도 낮게 즉 총분산액 100ml 당 약 2-5g이 되게 약 2-5%(W/V)이하로 유지될 수 있게 해주는 것이 필요하다고 생각되어왔다.

이제금 본 발명에 따라 높은 품질의 생물학적으로 적합한 치료용 퍼플루오로 화합물 수성분산액을 얻기위해 필요하다고 생각했던 계면활성제의 양을 퍼플루오로 화합물을 안정한 균질분산액으로 유지시켜주는 능력을 감소시키지 않고 또 치료효율에 영향을 주는 분산액의 성질 예컨대 저점도, 안정성, 높은 함량의 퍼플루오로 화합물과 같은 것을 희생시키지 않고서도 실질적으로 크게 감소시킬 수 있음을 발견하게 되었다. 또한 퍼플루오로 화합물 분산액이 좀더 효율적으로 제조될 수 있으며 이제까지 가능하다고 생각했던 것보다 더 많은 양의 퍼플루오로 화합물을 함유할 수 있으면서도 상기 언급한 특허(Clark and Moore)의 분산액과 같이 낮은 입자크기, 저점도, 우수한 안정성을 나타내는 것으로 나타났다.

이런 상반된 것 같이 보이나 상당히 유액한 결과는 (a)퍼플루오로 화합물과 계면활성제의 최초수성 분산액을 제조한 후 (b)최초분산액의 퍼플루오로 화합물상을 농축시키고 (c)농축된 퍼플루오로 화합물상의 일부 또는 전부를 수상으로부터 분리한 후 (d)농축된 퍼플루오로 화합물상을 수성 매체중에 재분산 시킴으로써 얻어진다(본 발명의 한 방법). 여기서 "농축 시킨다"는 용어는 최초분산액에서 보다 퍼플루오로 화합물이 더 농축된 퍼플루오로 화합물상을 형성하기 위해 퍼플루오로 화합물 입자를 용축, 축적 또는 집합시키것을 의미한다. 재분산은 멸균수 단독에 의해 이루어질 수 있으며 또는 적당한 보조 계면활성제나 기타 약제를 함유하는 수성매체를 첨가해줌으로써 재분산이 용이해질 수 있다. 또한 상기 언급한 바와 같이 앞서의 농축, 분리 및 재분산 단계들은 연속법으로 실시될 수 있으며 또는 농축된 퍼플루오로 화합물상 입자들의 분류단계를 조합하는 경우 좀더 균일한 입자크기가 얻어진다.

따라서 본 발명의 또 한 일면에 따라 계면활성제가 최종 , 분산액중에 이런 분산액에 이제까지 필요하다고 생각했던 양보다 적게 존재하는 이점을 가진 퍼플루오로 화합물의 수성분산액을 제조하는 방법이 제공된다.

본 발명의 또 다른 일면에 따라 상기 방법은 또한 점도를 바람직하지 않는 레벨까지 증가시키거나 많은 계면활성제와 관련된 허용될 수 없는 독성문제를 도입시킴 없이 고품질의 퍼플루오로 화합물 분산액의 형성을 용이하게 해주며 좀더 효율적으로 분산되게 해주는 것으로 알려진 계면활성제를 퍼플루오로 화합물에 비해 높은 비율로 최초분산액을 제조하는데 사용할 기회도 제공해준다. 체내사용을 위해 본 발명의 분산액은 체온(37℃)에서 혈액의 점도보다 높지 않은 정도, 바람직하게는 예컨대 물의 점도(약 0.7센티포아스)에서 약 3.0센티포아스에 이르는 상당히 낮은 점도를 갖는다.

본 발명의 또 다른 일면에 따라 이제까지 만족스런 분산액을 제공하는데 필요로 했던것 보다 더 적은 양의 계면활성제와 더 많은 양의 퍼플루오로 화합물을 함유하며 퍼플루오로 화합물의 증가된 양에 비례하여 기체운반 능력 및 치료효과가 더 증가되며 계면활성제로 인한 독성이 상대적으로 더 감소된 그런 퍼플루오로 화합물의 수성분산액이 제공된다.

또한 본 발명의 아주 의미있고 바람직한 일면에 따라 앞서 언급된 특징 뿐 아니라 제어된 작은 입자크기 범위와 낮은 점도 및 양호한 안정성을 갖고 있는 퍼플루오로 화합물의 수성분산액이 제공된다. 이들 향상된 성질에 의해 양호한 심장혈관계 체류시간 및 낮은 광내체류와 같은 바람직한 생물학적 특성이 얻어지며 궁극적으로 앞서 언급된 크라크 및 무어의 특허와 유럽특허 공고 A-105584에 언급된 것보다 더 큰 치료상의 이점이 얻어지게 된다.

본 발명의 특별한 이점은 최초 분산액의 퍼플루오로 화합물상을 농축시켰을 때 계면활성제의 일부, 보통은 아주 적은 부분은 퍼플루오로 화합물 입자와 남게되며 나머지 대부분의 계면활성제는 존재하게 된다. 이어 수상으로부터 농축된 퍼플루오로 화합물을 분리시키면 이것은 분리단계에서 수상과 함께 제거된 계면활성제를 함유하지 않는 수성매체내 쉽게 재분산된다. 몇몇 예에서 농축단계를 거친후 퍼플루오로 화합물상과 수상으로 구성된 2개의 상이 생기게 된다. 그러나 하기에 기재된 바와 같이 연속조작하는 경우는 이런 상분화는 공정의 동적성질 때문에 관찰되지 않으나, 그럼에도 농축, 분리 및 재분산이 일어나게 된다.

왜 어떻게 이런 현상이 일어나는지는 아직 완전히 해명되지 않았다. 몇몇 경우, 최초 분산단계 및/또는 농축단계에서 계면활성제 일부가 퍼플루오로 화합물과 결합하거나 퍼플루오로 화합물에 흡수되어 그결과 퍼플루오로 화합물 함유입자가 형성되며 이때 계면활성제기 아주 견고히 결합되어 있기 때문에 뒤이은 농축 및/또는 상분리 단계중 퍼플루오로 화합물입자와 복합화된 상태로 존재하게 된다. 나머지 계면활성제는 최초 분산액의 연속 수상중 유리상태로(복합화되지 않은)남게된다. 따라서 본 발명의 중요한 특징은 대부분의 계면활성제는 최초 분산액중에 유리된 비복합화된 상태로 존재하여 퍼플루오로 화합물상과 분리된다는데 있다. 따라서 유리된 계면활성제는 최종 분산액중에 따라 들어오지 않는다. 나머지 계면활성제는 재분산이 이루어지기에 충분한 양만큼 퍼플루오로 화합물 함유입자와 함께 남아있게 된다.

결국 본 발명에 따라 다량의 계면활성제로 인한 최종 분산액의 독성 및/또는 허용되지 않은 점도와 같은 악영향을 나타냄이 없이 초기 분산을 용이하게 해주는 것으로 알려진 계면활성제를 초기에 더 많은 양(퍼플루오로 화합물에 대한 계면활성제의 비를 더 높게)사용할 수 있게 되었다.

또한 최초 분산액중에서 더 많은 양의 계면활성제가 허용될 수 있게됨에 따라 이제까지 상한선으로 생각되었던 예컨대 20-25%(W/V)보다 더 많은 양의 퍼플루오로 화합물이 허용될 수 있게 되었으며 그 결과 더 적은 양의 퍼플루오로 화합물을 함유한 분산액보다 더 큰 기체운반 용량을 가지며 적당히 작은 입자크기와 낮은 점도를 가진 분산액을 얻을 수 있게 되었다.

본 명세서에서 농축 및 분리단계에서 퍼플루오로 화합물 입자와 남은 계면활성제를 "연결"계면활성제라 칭하며 분리된 수성 액체중에 남아있는 계면활성제를 "유리"계면활성제라 칭하기로 한다. 최초 분산액(농축 및 분리단계 이전의)을 생성하는 데 사용된 계면활성제를 재분산단계에 임의로 사용될 수 있는 보조계면활성제와 구별하기 위해 때로 "기본"계면활성제로 칭한다. 조건없이 계면활성제라 할 경우는 최초분산액 제조시 사용되는 계면활성제로 알면된다. 여기서 사용된 "최초분산액" 및 "최종분산액"은 각기 본 발명의 방법의 초기단계에서 얻어진 분산액과 여러단계를 거쳐 그로부터 얻어진 분산액을 의미한다.

농축된 퍼플루오로 화합물상중 결합계면활성제의 대부분은 퍼플루오로 화합물과 복합화된 형태로 존재하며 분산액 샘플의 퍼플루오로 화합물상을 농축시켜 결과 생성된 상층액중의 계면활성제 양을 측정하여 이것을 샘플중 계면활성제 전량으로부터 빼주면 농축된 퍼플루오로 화합물상 입자내 결합된 계면활성제양을 알수 있게 된다. 본 발명의 방법은 순조로이 실시되며 계산된 차이가 상층액중 계면활성제 양보다 많은 경우 샘플은 본 발명의 분산액이다. 대부분의 계면활성제가 최종분산액 형성시 최초분산액에 대해 수행된 상농축 및 분리단계중 제거된 것으로 나나탄 경우가 많다. 여하튼 농축된 퍼플루오로 화합물상중 연결 계면활성제의 대부분은 최종분산액중 퍼플루오로 화합물과 복합화된 형태로 존재하며 아주 소량만의 수상에서 발견되는 것으로 나타났다. 최종 분산액중 계면활성제의 적어도 75중량% 이상이 퍼플루오로 화합물과 복합화되어 있는 것이 바람직하다. 여기서 사용된 "복합화된" 계면활성제란 용어는 수상을 제거한 후 농축된 퍼플루오로 화합물상 물질과 남게되는 계면활성제를 의미한다. 이런 계면활성제는 퍼플루오로 화합물상 물질과 화학적으로 결합되어 있지는 않은 것으로 생각되나 물리적, 화학적 성질에 관한 어떤 이론에 의해 본 발명은 한정되지 않는다.

퍼플루오로 화합물의 수성분산액중 복합화된 계면활성제의 양을 측정하기 위해 원심분리가 사용되며 그결과 분산액은 상징 수층과, 퍼플루오로카본 분산액인 하부층으로 나누어지게 되며 전체 분산액은 그대로 유지되나 퍼플루오로 화합물면에서 보면 그로부터 물이 수층으로 게거되었기 때문에 좀더 농축된 상태가 된다. 본 발명의 분산액을 하기 표1의 실험4-9에 열거된 조건하에서 원심분리한 경우 바람직하게도 계면활성제의 대부분이 퍼플루오로 화합물상에 복합화된 상태로 남게된다. 또한 바람직하게도 분산액을 표1의 실험 10에서와 같이 강한 조건하에서 원심분리한 몇몇 예에서 계면활성제의 대부분은 퍼플루오로 화합물상과 복합화된 상태로 남아있는다.

본 발명의 분산액을 제조하는데 사용되는 퍼플루오로 화합물은 기체운반성을 가지고 있으며 수성매체중 분산액으로 될 수 있으며 인간을 포함한 동물에 수성분산액으로 전신 투여할 수 있는 그런 임의로 불소화된 탄화수소 또는 헤테로원자를 함유하는 그의 유도체이다. 화합물은 실질적으로 불소화되거나 완전히 불소화될 수 있으며 꼭 필요한 것은 아니나 일반적으로 주위온도 및 압력에서 액체이다.

본 명세서에서 "실질적으로 불소화되었다."는 말은 화합물의 수소원자의 대부분이 불소원자로 치환되어 있어 또 다른 치환이 일어난다 해도 물질의 기체운반 능력을 실질적으로 증가시키지 못하는 상태를 의미한다.

이런 상태는 수소원자의 적어도 약 80-90%가 불소원자로 치환되었을 때 얻어진다. 그러나 수소원자의 적어도 95%, 바람직하게는 적어도 98%, 가장 바람직하게는 100%가 치환된 것이 바람직하다. 앞서 언급한 미국특허 3,911,138 및 4,105,798에서 산소운반 능력은 산소같은 기체물질의 재료중의 용해도와 관련된다. 상기 특허에서 퍼플루오로 화합물 물질은 25℃, 760mmHg에서 물질 100cc 당 10-100cc의 산소를 흡수한다. 본 발명에 사용하기 적합한 불화물질 중에는 환식 퍼플루오로 탄화수소 또는 그 유도체로 언급된 것들이 포함된다.

그 예에는 비사이클로노난류(예 : 비사이클로[3.3.1]노난, 2,6-디메틸비사이클로[3.3.1]노난, 3-메틸비사이클로[3.3.1]노난, 트리메틸비사이클로[3.3.1]노난)와 같은 화학적으로 불활성인 C₉-C₁₈다환식 화합물 ; 메틸 및 디메틸아다만탄, 에틸 및 디에틸아다만탄, 트리메틸아다만탄, 에틸메틸 아다만탄, 에틸디메틸아다만탄, 트디에틸아다만탄 같은 아다만탄 및 알킬(C₁-C₆)아다만탄류 ; 메틸디아다만탄 및 트리메틸아다만탄 ; 메틸 및 디메틸비사이클로옥탄 ; 테트라하이드로비노트-에스, 피난, 캠팬, 데칼린 및 1-메틸데칼린 같은 알킬데칼틴류 ; 및 1,4,6,9-디메타노데칼린 : 비사이클로[4.3.2]운데칸, 비사이클로[5.3.0]데칸, 비사이클로[2.2.1]옥탄, 트리사이클로[5.2.1.O^2,6]데칸, 메틸트리사이클로[5.2.1.O^2,6]데칸 같은 것의 퍼플루오로 유도체 또는 그들중 어떤것의 혼합물 같은 것이 있다.

헤테로 원자를 함유하는 퍼플루오로 화합물에는 F-트리부틸아민, F-트리프로필아민 및 F-N,N-디메틸 사이클로헥실메틸아민 ; F-2-부틸테트라하이드로푸란, F-2-부틸푸란, F-하이드로푸란, F-(2,5,8-트리메틸-3,6,9-트리옥사-1-도데칸올)의 1,2,2,2-테트라 플루오로메틸에테르 같은 퍼플루오로에테르 ; 및 기타 F-N-메틸-데카히이드로퀴놀리린 및 F-1-메틸옥타하이드로퀴놀리진, F-옥타하이드로퀴놀리딘 및 F-N-사이클로헥실 피롤리딘 같은 기타 헤테로화합물들이 포함된다.

방향족 및 지방족 화합물에는 F-나프탈렌, F-1-메틸-나프탈렌, F-n-메틸-모르폴린, F-n-헵탄, F-도데칸 및 1,2-비스-노닐플루오로부틸 레틸렌이 포함된다. 단환식 지방족 화합물에는 F-트리메틸사이클로 헥산, F-이소프로필 사이클로헥산, F-n-부틸사이클로헥산, F-1-메틸-4-이소프로필사이클로헥산, F-P-디이소프로필 사이클로헥산 및 유사 화합물이 포함된다.

상기한 물질들의 불소원자 중 어떤것은 브롬같은 할로겐원자에 의해 치환될 수 있다. 이런 화합물에는 예컨대 1-브로모-펜타데카플루오로-4-이소프로필사이클로헥산, 1-브로모트리데카 플루오로헥산, 1-브로모-펜타데카플루오로옥탄, 1-브로모-펜타데카플루오로-3-이소프로필-사이클로펜탄 및 퍼플루오로-1-브로모부틸이소프로필에테르 또는 그의 폴리브롬화 유도체 같은 것이 포함된다.

퍼플루오로화된 C₈또는 그 이하의 물질 및 C₁₈까지 또는 그 이상의 물질 및 그의 부분적으로 브롬화된 유사체는 물론 각종 다양한 퍼플루오로 화합물의 혼합물이 본 발명에 사용될 수 있다.

주위 온도에서 고체인 상기한 불화 화합물들은 적당한 용매나 또는 주위 온도에서 액체인 다른 퍼플루오로 화합물에 용해시킬 수 있으며 결과 생성된 혼합물을 본 발명의 분산액을 만드는데 사용할 수 있다. 본 명세서에서 플루오로화합물을 설명하는데 있어 "액체"란 그 자체가 주위 온도에서 액체인 플루오로화합물이나 또는 고체 플루오로화합물의 플루오로화합물 용매중 용액을 의미한다.

상대불활성(화학적 및 생물학적), 양호한 분산성 및 체류시간을 근거로 했을 때 본 발명에서 사용하기 좀더 바람직한 퍼플루오로 화합물은 미국특허 4,105,798의 퍼를루오로 C₉-C₁₈폴리고리 탄화수소 및 특히 F-디메틸아다만탄, F-트리메틸 비사이클로[3.3.1]노난, F-트리사이클로[5.2.1.O^2,6]데칸, F-메틸트리사이클로[5.2.

O^2,6]데칸, F-비사이클로[5.2.0]데칸 및 F-메틸비사이클로[5.2.0]데칸 및 그의 이성체와 그런 화합물의 혼합물 예컨대 F-디메틸아다만탄과 F-트리메틸비사이클로[3.3.

1]노난의 90/10/-10/90중량비 혼합물이다.

퍼플루오로 화합물을 수성 매체에 균일하게 분산시키는데 바람직한 분산제는 비이온성 계면활제이다. 본 발명의 몇몇 조성물 및 시스템에서 특히 분산액이 국소용 또는 국부처치와 같이 전신적으로 사용되지 않는 경우에선 퍼플루오로 화합물을 분산시키는데 이온성 또는 양성 계면활성제를 사용할 수 있다. 전신 처치의 경우 등장성과 같은 화합물의 생리적 수용성에 세심한 유의를 해야하기 때문에 이온 계면활성제는 덜 바람직하나 분산액을 전해질 또는 기타 첨가제와 함께 처방해줌으로서 그 이온특성을 경감 또는 완화 시켜줄 수 있다.

적당한 비이온 계면활성제에는 옥시에틸렌 또는 옥시프로필렌 단일중합체나 소수성 프로필렌옥사이드 부분이 하나 또는 그 이상의 친수성 에틸렌옥사이드 부분과 결합한 에틸렌옥사이드와 프로필렌 옥사이드의 블럭 공중합체 같은 지방족 물질 예컨대 "플루로닉"(상표) 계면활성제(BASF-Wyandotte, Inc로부터 이용가능)가 포함된다. 덜 바람직하나, 방향족 유형의 것도 사용될 수 있으며 이들에는 C₇-C₁₈의 알킬기와 1-60개 또는 그 이상의 옥시에틸렌 단위를 갖고 있는 알킬펜옥시폴리에톡시에탄올 예컨대 헵틸펜옥시폴리 에톡시에탄올, 옥틸펜옥시폴리 에톡시에탄올, 메틸옥틱펜 옥시 폴리 에톡시에탄올, 노닐펜옥시폴리 에톡시에탄올, 도데실펜옥시폴리 에톡시에탄올 같은것 ; 메틸렌 결합된 알킬페놀의 폴리에톡시에탄올 유도체 ; 상기한 것의 유황을 함유한 유사체 ; 장쇄 카복실산 예컨대 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 올레산의 메틸렌옥사이드 유도체 및 톨(tall)유에서 발견된 것과같이 분자당 1-60개의 옥시에틸렌 단위를 함유하고 있는 산들의 혼합물 ; 및 1-60개의 옥시에틸렌기를 함유하고 있는 장쇠 또는 분지쇄 아민 예컨대 도데실아민, 헥사데실아민 및 옥타데실아민의 에틸렌옥사이드 축합생성물이 포함된다.

천연산 유화제 또는 그의 유도체도 유용하다. 이들에는 알기네이트, 메틸셀룰로오즈 및 카복시메틸 셀룰로오즈와 같은 셀룰로오즈유도체, 아라비아고무 및 트라가칸트고무와 같은 수용성 고무, 인지질(레시틴 및 미국특허 4,397,870-Sloviter에 언급된 것과 같은 난황인지질) 및 스테롤이 포함된다.

비이온성 불소함유 계면활성제가 특히 바람직하다. 불소화된 알킬에스테르는 이런 계면활성제의 한 부류이며 FC-93, FC-95, FC-128, FC-143, FC-430 및 FC-431 이란 명칭하에 3M 컴패니에 의해 시판되고 있다.

실온에서 35주-1년 또는 그이상 장기간에 걸쳐 작은 입자크기를 그대로 유지하는 분산액을 형성하는 그들의 능력면에서 볼때 좀더 바람직한 비이온성 불소함유 계면활성제는 미국특허 3,828,085(Price et al) 및 3,547,995(Bartleet)에 언급된 불소화된 아미도 아민옥사이드류 이다. 이들 화합물들은 하기 일반식(1)로 표시될 수 있다.

상기 식에서 R_f는 1-25개의 탄소원자를 함유하는 퍼플루오로알킬라디칼 이거나 또는 알콕시기가 3-40개의 탄소원자를 함유하며 적어도 그대부분이 퍼플루오로화 되었으며 알킬기가 2-40개의 탄소원자를 함유하며 불화되었거나 되지않은 폴리플루오로 알콕시라디칼이며 ; Y는 수소 또는 C_1-6알킬이며 ; R은 하기 구조의 알킬렌라디칼이며 : -C_ZH_2Z- 여기서 z는 1-6의 정수이며 ; Q는 하기 구조의 지방족 아민 옥사이드 라디칼이며 :

여기서 R₅와 R₆은 각기 C_1-6알킬라디칼 이거나 C_2-6하이드록시말단 알킬라디칼이다. 모든 경우에서 알콕시, 알킬 및 알킬렌기는 직쇄이거나 분지쇄일 수 있다.

상기 특허들의 계면활성제중 바람직한 아류는 구조(2) 및 (3)의 화합물이다.

여기서 n은 적어도 3(바람직하게는 3-10)이며 ; x는 적어도 2(바람직하게는 2-6)이며 ; y는 적어도 1(바람직하게는 2-6)이며 ; R¹과 R²는 독립적으로 1-6개의 탄소원자를 함유하는 알킬라디칼이다.

여기서 n은 적어도 3(바람직하게는 3-10)이며, z은 적어도 1(바람직하게는 2-6)이며, R¹과 R²는 독립적으로 1-6개의 탄소원자를 함유하는 알킬라디칼이다.

구조식(1)의 범위에 속하는 특정한 아미도 아민옥사이드들이 미국특허 3,828,085의 실시예 1-6에 기재되어 있으며 즉 하기와 같다.

최초 분산액을 얻기 위해 통상적으로 미리 제조된 퍼플루오로 화합물 분산액을 공급해주거나 또는 퍼플루오로 화합물과 기본 계면활성제를 균일한 분산액이 얻어질 수 있는 양 및 비율로 물에 넣어 혼합해줌으로써 분산액을 제조해 주거나 할 수 있다. 전형적인 사용량은 분산액 총용량을 기준으로 퍼플루오로 화합물 약 5-75%(W/V)와 계면활성제 약 1.0-15%(W/V)이며 즉 분산액 100ml당 퍼플루오로 화합물 5-75g과 계면활성제 1-15g이 사용된다. 바람직한 양은 퍼플루오로 화합물 약 5-25%(W/V)와 계면활성제가 초기에 약 2-10%(W/V)이다. 그러나 본 발명은 퍼플루오로 화합물이 초기에 약 25-60%(W/V)존재하며 기본 계면활성제가 초기에 약 10-20%(W/V), 바람직하게는 5-10%(W/V)존재하는 분산액의 제조를 허용한다.

좀더 일반적인 수성분산액(초기 및 말기모두)은 수중유형 유탁액이나 유중수형 유탁액도 포함한다. 몇몇 예에서 유탁액은 아주 미세한 입자크기를 가지며 육안으로 볼때 투명하거나 용액과 같다. 미국특허 3,823,085의 분산제와 배합제로된 마이크로 에멸션은 이런 특성을 갖고 있어 바람직하다. 콜로이드성 현탁액은 본 발명에서 제외되는 것은 아니나 덜 바람직하며 그들의 큰 입자 크기 및 낮은 안정성 때문에 특히 전신투여에 덜 바람직하다.

퍼플루오로 화합물, 물 및 계면활성제 혼합물을 통상적인 진탕수단 예컨대 수동 에어레이션, 프로펠러 교반, 터어빈교반, 콜로이드밀링기, 균등기, 고주파 또는 초음파 진동기 같은 것 및 이들을 조합사용하여 분산시킨다. 대부분의 예에서 유화는 주위온도에서 효과적으로 일어난다. 그러나 상기 교반수단중 몇몇에서 유탁액제조중 과량의 열이 발생할 수 있으며 이들은 냉각자켓과 같은 공지된 방법으로 제거해줄 수 있다. 각종 교반장치로부터 얻는 기계적에너지 투입량은 조작되는 재료의 양 및 사용설비등에 따라 다를 수 있다. 워닝 브렌더 같은 데서 약하게 교반하여 조대(粗大)한 유탁액을 우선 제조하는 것이 바람직하다. 이어 유탁액을 균등기로 옮겨 유화를 완료시키면 최초분산액이 형성된다.

본 발명의 분산액을 제조하는 두번째 단계에선 분산액의 퍼플루오로 화합물상을 농축시켜 농축된 퍼플루오로 화합물함유 입자와 그와 복합된 계면활성제로 구성된 제1상 및 제2수상을 형성시킨다. 농축의 한 방법은 예컨대 약 10000-20000rpm에서 약 0.5-3시간 동안 고속 원심분리시키는 것이다. 원심분리 속도 및 기간의 선택은 분산액중 퍼플루오로 화합물의 비율 및 유형에 따라 달라진다.(퍼플루오로 화합물 양이 적거나 덜 조밀하면 그 속도를 더 크게한다.) 몇몇 회분식 원심분리법에선 원심분리 결과 맑은 상등액층이 위로 올라오며 퍼플루오로 화합물 함유층이 용기바닥으로 가게된다. 직교류 여과(하기 설명한) 또한 퍼플루오로 화합물상을 연속농축시키는데 사용될 수 있는 통상적으로 인정된 기술이다.

본 명세서로부터, 이 분야 숙련된 자라면 바라는 농도의 퍼플루오로 화합물상을 얻는 조건을 선택할 수 있을 것이다. 농도는 분산액을 원래있던 계면활성제의 적어도 약 50중량%가 수상내로 제거되는 농도로 되는 것이 바람직하다. 계면활성제의 약 90-95중량% 이하가 제거되는 것이 바람직하다.

계면활성제 제거 한계는 주어진 예에 포함한 특정 분산액의 특성에 따라 다르며 본 명세서로부터 이 분야 숙련된 자라면 결정할 수 있을 것이다. 여하튼 농축정도는 분산액이 파괴되거나 농축된 유탁액이 본 발명의 제3단계에서 첨가된 물에 재분산되는데 나쁜 영향을 미칠 정도로 커서는 안된다.

본 발명의 제3단계에선, 2상을 경사 또는 유사한 방법으로 물리적으로 분리시킨후 유리 계면활성제를 함유하고 있는 수상으로부터 농축된 퍼플루오로 화합물상을 제거하는 것이다.

상기한 제2 및 제3단계는 농축 및 분리공정이다. 이들 단계는 마이크로 여과(한외여과)에 의해 동시에 수행될 수도 있다. 본 발명의 분산액은 약 0.05-10미크론 범위의 입자 크기를 가지며 따라서 한외여과는 농축된 퍼플루오로 화합물상을 생성하기 위해 유탁을 농축시키면서 동시에 수상으로부터 이런 상을 분리해주는 실질적인 방법이다. 적당한 한외여과막에는 예컨대 미국특허 3,615,024 및 3,856,569에 언급된 밀리포오 컴패니와 아미콘 코오포레이션 제품이 포함된다. 한외여과 하는데 있어 분산액을 막의 한쪽 측면에 공급해준후 막을 가로질러 차등압력을 적용해주면 분산액의 일부(수상)가 막을 통과한다. 막위에 남은 부분이 퍼플루오로 화합물상이다. 원한다면 한외여과와 함께 가압 또는 감압여과나 경사법을 사용할 수도 있다. 감압여과 도중에 발포하는 경향이 있기 때문에 진공여과 보다는 가압여과가 바람직하다.

본 발명의 분산액을 제조하는 마지막 단계에선 그와 복합화된 소량의 잔류 계면활성제를 함유하는 퍼플루오로 화합물 입자로 구성된 분리된 농축 퍼플루오로 화합물상 물질을 재분산시키기 위해 수성매체(증류수나 멸균수 같은것)중에서 진탕해 준다. 통상적인 진탕 또는 혼합장치 및 조건이 사용된다. 최종 분산액중 퍼플루오로 화합물의 양은 약 20-75%(W/V)이며 주 계면활성제 약은 약 0.1-3.0%(W/V)인 것이 바람직하다. 내부치료용 최종분산액은 보통 입자크기가 약 0.05-0.6미크론이며, 장기간 동안 즉 실온에서 35주 이상 평균입자 크기가 0.3미크론 이하(예컨대 0.1-0.28미크론)로 유지되는 것이 즉 우수한 안정성을 나타내는 것이 바람직하다.

초기 분산액의 수상에 있는 바람직하지 않은 계면활성제 농도를 연속적으로 감소시키고 바라는 농도의 퍼플루오로 화합물 물질을 함유한 최종 분산액을 얻기위해 직교류 여과가 사용될 수 있다. 이 방법은 수성매체(제거되는 것이 바람직한 계면활성제를 함유치 않음)를 초기 퍼플루오로 화합물 분산액을 장입한 여과용기에 연속적으로 또는 간헐적으로 첨가해주는 방법이다. 여과와 더불어 분산액의 퍼플루오로 화합물상의 농축 및 분리가 진행됨에 따라 첨가된 수성매체가 초기분산액의 수산대신 교체되거나 이를 씻어준다. 그 결과 초기분산액의 수상이 적당히 희석되어 바람직하지 못한 계면활성제를 함유하는 물이 제거되고 잔류수상중 바람직하지 않은 계면활성제의 농도가 실질적으로 감소되거나 제거되게 된다. 따라서 바라는 농도를 가진 퍼플루오로 화합물상 물질이 얻어진다.

임의로 무독성 보조 계면활성제(레시틴이나 난황인 지질 같은 것)를 재분산에 앞서 수성매체에 첨가해주거나 또는 재분산을 더 촉진시키기 위해 재분산중 이나 후에 첨가해줄 수 있다. 보조 계면활성제를 첨가해주는 대신 또는 첨가하는 외에 커플링제, 극저온제와 같은 다른 약제를 소망에 따라 재분산도중 첨가해줄 수 있다. 결과생성된 분산액은 퍼플루오로 화합물, 계면활성 및 비율과 기타 첨가제에 따라 투명하거나 유상일 수 있다.

본 발명에 따른 분산액을 제조한 상기한 방법을 변경하여 최종 분산액중 바라는 입자크기가 얻어지는 것을 도와주기 위해 농축된 퍼플루오로 화합물상으로 구성된 입자들을 회수, 스크린 또는 분류해줄 수 있다.

예컨대 항생제, 단백질 분자 또는 바이러스를 회수 농축하기위해 개발된 통상적인 원심분리 장치를 본 발명의 퍼플루오로 화합물 함유입자를 분리 및/또는 분류하고 복합화되지 않은 계면활성제를 제거하는데 쉽게 적용해줄 수 있다. 분산액의 수상과 비교했을 때 입자의 밀도가 높기 때문에 이런 시스템은 본 발명을 실시하는 데 적합하다. 더우기 분리 또는 분류는 원심분리 장치의 유형에 따라 회분식으로 또는 연속적으로 실시될 수 있다.

예컨대 그 상단위의 수평 덮개판상에 방사상으로 간격져 위치한 구멍을 갖고 있는 수직축을 따라 회전하는 실린더로 구성된 드라발식향류 분리기(De Laval countercurrent separator)하단을 통해 초기분산액을 도입시켜줄 수 있다. 분산액은 내벽위 실린더내로 올라오며 입자들은 판의 구멍을 통해 다수의 흐름으로 나누어지게 되며 그 결과 원하는 미세한 입자가 바람직하지 않은 조대한 입자들로부터 분리되게 된다. 동시에 복합되지 않은 계면활성제를 함유하고 있는 수성매체가 제거되게 된다. 이상의 분류는 임의의 흐름에 대해 실시할 수 있으며 또는 흐름을 최종분산액 제조를 위해 재분산대역내로 보낼 수 있다.

관보울형 원심분리기는 상기 언급한 실린더형 원심분리기에서와 같이 분류를 가능하게 해줄 뿐 아니라 퍼플루오로 화합물상의 연속농축, 분리 및 재분산도 가능하게 해준다. 이런 시스템에서 초기분산액을 회전하는 보울의 최하부 근처로 도입된다. 이어 퍼플루오로 화합물상이 수상으로부터 분리된 후, 입자크기에 따라 보울의 내벽위의 여러 대역으로 나누어진다. 이어 복합된 계면활성제를 함유하는 바라는 크기의 퍼플루오로 화합물 입자를 취하여 재분산 대역내로 보낼 수 있으며, 이때 범위 밖의 크기를 가진 입자는 버리거나 초기 분산액에 재사용하기 위해 재순환시킬 수 있다. 최초 분산액으로부터 분리된 유리 계면활성제를 함유하고 있는 수상은 버리거나, 퍼플루오로 화합물의 최초분산액에 사용하기 위해 회수 또는 재순환시킬 수 있다.

공지된 시스템을 사용하여 최초 분산액의 수상으로부터 퍼플루오로 화합물상이 완전히 분리되는 것을 막고, 최종 분산액을 연속적으로 생성시키는 것이 실제적이다. 이 방법에서 최초분산액은 연속농축되고 바라는 입자크기 범위에 따라 분류되는 한편 유리된 기본 계면활성제를 함유하는 수성매체는 제거되며 이어 재분산을 위한 수성매체(보조 계면활성제를 함유하거나 함유치 않은)를 첨가해 준다.

본 발명의 방법을 회분식, 연속시, 또는 반연속식으로 수행하는 상기한 방법 및 기타 방법들이 문헌에 언급되어 있다(Handlbook of Separation Techniques for Chemical Engineers, Schweitzer, P.A, Ed., NcGraw-Hill Book Co., New York, 1975, specifically Section 4.5 entitled Centrifugation).

본 발명의 분산액을 전신투여를 위해 최종적으로 제제화하는 경우 분산액을 생리적으로 허용되게 해주며(포유동물 세포와 등장으로 해주기 위해), 필요한 경우 pH를 조절해주는 전해질 및 기타 물질을 첨가해주는 것이 바람직하다. 적당한 pH 범위는 7.2-7.4이다. 유체가 생리적으로 허용될 수 있게 하는데 통상 사용되는 첨가제에는 중탄산나트륨 같은 완충액 및 링거용액과 같은 혼합물이 있다. 약제제조시 통상 사용되는 이분야 숙련된 자에게 잘 알려진 기타 물질들도 분산액중에 첨가해줄 수 있다. 이들에는 점도조정제, 안정제(예컨대 동결 또는 오염으로 인한 변질에 대해), 극저온 방부제, 증량제, 부호제(encoding agents) 같은 것도 포함된다. 이런 첨가제로 글리세린, 디메틸설폭사이드, 천연 및 합성 젤라틴 및 솔비톨 같은 폴리올을 들 수 있다.

약물 운반을 위해 본 발명의 분산액을 사용하는데 있어 만일 약물이 충분히 친유성인 경우 이것을 바라는 비율로 퍼플루오로 화합물과 혼합해줄 수 있다. 이어 이 혼합물을 최초 퍼플루오로 혼합물 분산액을 생성하는데 사용한후 본 발명의 방법에 따라 최종 퍼플루오로 화합물 분산액으로 가공해줄 수 있다. 또 약물을 바라는 양만큼 본 발명의 농축 및 분리단계로부터 얻은 농축된 퍼플루오로 화합물상에 첨가해준 후 재분산단계를 거쳐 약물을 함유하는 최종분산액을 생성해줄 수 있다. 세번째 방법으로는 약물을 필요한 양만큼 최종 퍼플루오로 화합물 분산액에 첨가해줄 수 있다. 퍼플루오로 화합물에 물질에 대한 약물의 친유성 여부는 효과적 운반을 위한 약물을 선택하는데 중요한 인자로서 약물이 친유성일수록 더 성공적으로 전달된다(유럽특허 A-105584에 언급된 바와 같음). 본 발명을 하기 실시예에 더 예시 설명했다.

[실시예 1]

플루로닉 F-68폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 공중합체 계면활성제(분자량 약 8200)을 4.375%(W/V) 농도로 증류수에 용해시킨 다음 이 용액에 25%(W/V)농도의 F -1,3- 디메틸아다만탄과 F-트리메틸비사이클로 [3.3.1]노난의 액체 혼합물(약 80/20 중량비)로 구성된 정제된 퍼플루오로 탄소(퍼플루오로 화합물)를 첨가함으로써 통상적인 방법(미국특허 4,105,798)으로 최초 유탁액을 제조했다. 결과 생성된 조성물을 우선 워닝 브렌더 내에서 혼합해주어 조제한 분산액을 형성시킨 다음 이를 만틴-가울린(Mantin-Gaulin)균등기에 옮겨 혼합하여 안정하고 균일한 투명한 유탁액을 제조했다.

동량의 유탁액을 관 2개의 실험실용 원심분리기의 제1 및 제2관에 첨가하고 12500RPM 및 상대원심력 최대 20000g 하에 30분간 회전시켜 퍼플루오로 화합물상을 농축시켰다. 각 샘플은 상부 상등액상과 하부 젤라틴 퍼플루오로 화합물상으로 나누어지며, 제1관은 28.7g이 상등액이고 15.4g이 겔이며, 제2관은 28.5g이 상등액이고, 15.5g이 겔이었다. 각 관의 두상을 경사로 분리하였으며 상등액 2개는 모두 1.0148의 밀도를 갖고 있으며 이는 원 25% 퍼플루오로 화합물중 23.9%가 겔중에 들어있고 오직 1.1%만이 상등액에 들어있음을 나타낸다. 제2관으로부터 얻은 겔을 증류수 41ml와 함께 진탕해준 결과 잘 분산되어 20%(W/V)의 퍼플루오로 화합물을 함유하는 거의 투명한 유탁액으로 되는 것으로 나타났다.(GC 분석). 레이저 분광분석법으로 입자크기를 분석한 결과 평균입자크기는 0.17미크론 이었다. 유탁액은 5℃(평균)에서 104일간 저장한 후에도 투명하고 안정한채로 남아 있었다. 저장후 평균입자 크기는 0.24미크론이었다.

최초에 형성된 유탁액은 원심분리 및 분리시 그 대부분이 재분산 사용되지 않는 액체물질이기 때문에 원 계면활성제의 대부분은 재분산된 유탁액중에 존재하지 않으나 퍼플루오로 화합물 물질을 증류수와 함께 진탕하였을 때 적은 양이긴 하나 퍼플루오로 화합물이 재분산되기 충분한 양은 퍼플루오로 화합물상에 잔류해 있는다. 따라서, 원 유탁액중에 존재하는 계면활성제 양과 비교시 최종분산액은 크게 감소된 양의 계면활성제를 함유하며 최종 유탁액중 거의 모든 계면활성제는 퍼플루오로 화합물 입자와 복합화된 상태로 존재하며 있다해도 아주 작은 양이 연속상내로 옮겨간다.

[실시예 2]

실시예 1에 기재된 것과 본질적으로 동일하게 수행된 또 다른 실험에서, 동일한 퍼플루오로 화합물 25%(W/V)와 동일한 계면활성제 4.357%(W/V)와 글리세린(극저온제로서) 1.25%(W/V)를 함유한 통상적으로 제조된 안정하고 균일한 최초유탁액은 실온에서 2.5센티모아스의 점도를 가지며 평균입자크기가 0.11미크론이며 0.3미크론을 넘는 입자가 1%이하인 것으로 나타났다. 유탁액을 상대원심력 최대 3100g(중력)하에 6.1시간 동안 3500RPM 속도로 원심분리했을 때 2상은 부유하는 상부층과 젤라틴상 퍼플루오로 화합물 기저층으로 분리되었다. 겔을 상등액으로부터 분리한 후 겔부분을 두개의 최종 유탁액 A 및 B를 생성하기에 충분한 양의 증류수에 재분산시켰으며, 이때 유탁액 A는 25%(W/V)의 퍼플루오로 화합물과 1.9%(W/V)의 계면활성제를 함유하며 유탁액 B는 50%(W/V)의 퍼플루오로 화합물과 3.4%(W/V)의 계면활성제를 함유했다.

최종 유탁액중 계면활성제 양이 퍼플루오로 화합물 농도에 비해 감소 되었음은 초기 형성된 분산액중 존재하는 대부분의 계면활성제가 상등액으로 제거되었음을 나타내준다. 최종 유탁액을 맑고 균일하며 안정했다. 유탁액 A는 1.3센티스톡스의 점도를 가지며, 유탁액 B는 3.1센티스톡스의 점도를 가진다. 최초 및 최종 유탁액의 퍼플루오로 화합물 농도 대 점도를 도면에 그려본 결과 본 발명에 따라 제조된 유탁액은 최초 유탁액과 비교시 점도의 증가없이 퍼플루오로 화합물을 약 42.7%(W/V)까지 함유할 수 있는 것으로 나타났다. 따라서 본 실시예는 본 발명에 따라 이제까지 가능했던 것보다 더 높은 농도의 퍼플루오로 화합물을 유탁액의 균일성, 투명도 및 안정성을 감소시킴이 없이 허용점도에서 얻으면서도 계면활성제의 농도를 실질적으로 감소시킬 수 있음을 입증하고 있다.

[실시예 3]

본 발명에 따라 제조된 재구성된 유탁액의 입자크기, 점도 및 안정성을 연구하기 위해 통상적으로 제조된 유탁액과 퍼플루오로 화합물 및 계면활성제 농도를 비교하는 일련의 실험을 수행했다. 퍼플루오로 화합물과 계면활성제 성분은 실시예 2에서와 동일하다. 성분들 농도와 시험조건 차이를 시험결과에 함께 하기 표1에 나타냈으며 여기서 "PFC"는 퍼플루오로 화합물을 의미한다. 실험 1, 4 및 5는 실시예 2의 실험이다. 실험 10은 실시예 1의 실험이다. 실험 1-3은 대조로서 즉 실험 4-10의 재구성된 유탁액을 제조하는데 사용된 유탁액과 같이 원심분리되지 않은 통상적으로 제조된 안정된 최초 유탁액을 나타낸다. 실험 4-9의 재구성된 유탁액은 실시예 2에서와 같이 제조되며 즉 실험 1의 대조 유탁액 샘플을 원심분리한후 결과 생성된 겔과 상등층을 분리하고 겔을 지시된 농도의 퍼플루오로 화합물을 얻기에 충분한 양의 증류수에 재현탁시킴으로써 제조된다. 최초 계면활성제 농도와 퍼플루오로 화합물의 농도를 퍼플루오로 화합물의 밀도 및 크로마토그래피 분석에 의해 결정한다.

하기 결과는 본 발명에 따라 과거 얻을 수 있는 것보다 퍼플루오로 화합물 농도가 더 크며, 계면활성제 농도가 더 낮은 안정한 저점도의 유탁액이 효과적으로 제조될 수 있음을 나타내고 있다. 결과적으로 유탁액은 더 큰 기체운반 용량을 가지면서도 계면활성제로 인한 독성이 감소되었으며 따라서 실질적으로 개선된 치료적 이점을 가진다.

[표 1]

* 냉장시키지 않고 실온에서 유지시킴.

** 상대 원심력 최대 20000에서 조작되는 로우데스 앵글 헤드 테이블톱 원심분리기 사용(Lourdes Angle Head Tabletop centrifuge)나머지 모든 원심분리는 DPR 600수윙 버켓 헤드 원심분리기(International Equipment Company)를 사용하여 상대원심력 최대 3100g에서 수행했음.

Claims (17)

1. (a)(i) 퍼플루오로 화합물과 복합체로 존재하는 기본 계면활성제를 함유하는 퍼플루오로 화합물상과 (ii) 유리상태의 기본 계면활성제를 함유하는 수상으로 구성된 최초 분산액을 얻은 다음 ; (b) 퍼플루오로 화합물상을 농축시키고 ; (c) 수상의 일부 또는 전부를 농축된 퍼플루오로 화합물상으로부터 분리하고 ; (d) 농축된 퍼플루오로 화합물상을 재분산시키기에 효과적인 양의 수성 매체에 재분산시켜 최종 분산액을 얻는 것으로 구성됨을 특징으로 하는 퍼플루오로 화합물의 수성분산액을 제조하는 방법.
2. 제1항에 있어서, 단계(c)에서 실질적으로 모든 수상을 퍼플루오로 화합물상으로부터 분리시키는 방법 .
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 단계(d)에서 농축된 퍼플루오로 화합물의 재분산을 촉진시키는데 효과적인 양의 보조 계면활성제를 첨가해주는 방법.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 단계(b)의 농축을 원심분리로 수행하는 방법.
5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 최초 분산액으로부터 단계(c)에서 분리된 퍼플루오로 화합물상이 어떤 범위의 입자크기를 특징으로 하며, 여기에 입자들은 바람직한 입자크기 범위의 물질과 바람직하지 못한 입자크기 범위의 물질로 분류되며, 바람직한 입자크기 범위의 물질이 단계(d)에서 재분산되는 방법.
6. 제5항에 있어서, 최초 분산액을 퍼플루오로 화합물과 기본 계면활성제의 혼합물을 수성매체중에서 진탕하여 줌으로써 제조하며 바람직하지 못한 입자크기 범위의 물질을 상기 초기분산액 제조용 혼합물에 재순환 시켜주는 방법.
7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 퍼플루오로 화합물이 적어도 하나의 탄소원자를 함유하는 다리를 통해 결합된 적어도 2개의 다리목 탄소원자를 함유하는 비-방향족화될 수 있는 퍼플루오로화된 C₉-C₁₈다환식 탄화수소이며, 계면활성제가 비이온성인 방법.
8. 제1항 또는 제2항에 있어서, 퍼플루오로 화합물이 F-디메틸아다만탄과 F-트리메틸비사이클로[3.3.1] 노난의 혼합물로 구성된 방법.
9. 분산액속에 존재하는 약 75중량% 이상의 계면활성제가 퍼플루오로 화합물과 복합화된 계면활성제와 기체운반 성질을 갖는 퍼플루오로 화합물의 안정하고 균일한 수성 분산액으로 이루어지는 조성물.
10. 제9항에 있어서, 분산액의 견본을 원심분리하여 퍼플루오로 화합물-함유 분산액층과 상등액층을 형성시키고, 결과 생성된 상등액층에서 계면활성제의 양을 측정하고, 나머지로서 복합화된 계면활성제의 양을 얻기위해 견본에서 계면활성제의 전체 원래양으로부터 측정된 양을 빼줌으로써 퍼플루오로 화합물과 복합화된 계면활성제의 계면활성제의 비율이 측정되는 조성물.
11. 제9항에 있어서, 존재하는 계면활성제의 85-90중량% 이상이 퍼플루오로 화합물과 복합화되어있는 조성물.
12. 제9항에 있어서, 퍼플루오로 화합물이 적어도 한개의 탄소원자를 갖는 다리(bridge)를 통해 결합된 두개 이상의 다리목 탄소원자를 함유하는 비-방향족화될 수 있는 퍼플루오로화 C₉-C₁₈다환식 탄화수소이며, 계면활성제가 비이온성인 조성물.
13. 제12항에 있어서, 퍼플루오로 화합물이 F-디메틸아다만탄과 F-트리메틸비사이클로[3.3.1]노난의 혼합물로 이루어지는 조성물.
14. 제9항 또는 제13항에 있어서, 계면활성제가 플루오로화 산화 아미도 아민 화합물인 조성물.
15. 제9항 또는 제13항에 있어서, 계면활성제가 옥시에틸렌이나 옥시프로필렌 단일 중합체나 산화 에틸렌과 산화 프로필렌의 블럭 공중합체인 조성물.
16. 제9항 또는 제13항에 있어서, 계면활성제가 레시틴 및 난황인지질로 이루어진 군으로부터 선택된 인지질인 조성물.
17. 제9항에 있어서, 분산액이 부가적인 계면활성제를 함유하는 조성물.