KR850001285A - 천연 인체 인터로이킨-2의 제조방법 - Google Patents

천연 인체 인터로이킨-2의 제조방법 Download PDF

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KR850001285A
KR850001285A KR1019840004207A KR840004207A KR850001285A KR 850001285 A KR850001285 A KR 850001285A KR 1019840004207 A KR1019840004207 A KR 1019840004207A KR 840004207 A KR840004207 A KR 840004207A KR 850001285 A KR850001285 A KR 850001285A
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히로무 스기노 (외 3)
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구라바야시 이꾸시로
다께다 야꾸힝 고오교 가부시끼 가이샤
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    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
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    • C07K14/55—IL-2

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Abstract

내용 없음

Description

천연 인체 인터로이킨-2의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 인체 IL-2A-1 및 IL-2A-2의 고수율 액체 크로마토그래피 결과를 나타낸 것이다.
제2도는 인체 IL-2B-1 및 IL-2B-2의 고수율 액체 크로마토그래피 결과를 나타낸 것이다.
제3도는 인체 IL-2의 SDS-폴리아크릴아미드 겔 전기영동 결과를 나타낸 것이다.

Claims (12)

  1. IL-2를 생성할 수 있는 인체세포를 유도인자 존재하에 배양시켜 배양 브로스에 인체 IL-2A 및 B를 생성 및 축적하고, (a) 이 배양액을 술포프로필-교차결합 덱스트란 컬럼에 넣어 흡착시키고, 완충액으로 용출시킨 후, (b) 용출액을 음이온 교환 크로마토그래피 담체가 패킹된 컬럼에 넣어 흡착시키고, 염용액으로 용출시킨 후, (c) 용출액을 폴리아크릴아미드-아가로즈 컬럼에 겔 여과시킨 다음, (d) 용출액을 DEAE-셀룰로오즈 컬럼에 넣어 흡착시키고, 염용액으로 활성 피크의 용출을 수행하여 낮은 염농도에서 용출된 활성 피크로부터는 IL-2A-함유 용액을 수득하고 높은 염농도에서 용출된 활성피크로부터는 IL-2B-함유 용액을 수득한 다음, (e) IL-2A-함유 용액, IL-2B-함유 용액, 또는 IL-2A-함유용액 및 IL-2B-함유 용액을 폴리아크릴아미드-아가로즈 컬럼에 제2겔 여과시키고, (f) 그 용출액을 고수율 액체 크로마토그래피하고 용매로 용출을 수행하여, IL-2A-함유용액으로부터는 IL-2A를 수득하고, IL-2B-함유 용액으로부터는 IL-2B를 수득하고, IL-2A-함유 용액 및 IL-2B-함유 용액으로부터는 IL-2A 및 IL-2B의 혼합물을 수득함을 특징으로 하는 인체 IL-2A, B 또는 그의 혼합물의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, IL-2를 생성할 수 있는 인체세포가 말초혈액유도 림파구인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 배양을 혈청이 없는 배지에서 수행하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 유도인자가 동종항원, TPA, Con A 또는 그의 혼합물인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 수득된 인체 IL-2A의 활성 피크중에서 고수율 액체 크로마토그래피할 때 다른 것보다 짧은 체류시간에서 용출되는 활성 피크를 회수하여 인체 IL-2A-1을 수득하거나, 또는 제1항에서 수득된 인체 IL-2A의 활성 피크중에서 고수율 액체 크로마토그래피 할 때 다른 것보다 긴 체류시간에서 용출되는 활성 피크를 회수하여 인체 IL-2A-2를 수득함을 특징으로 하는 인체 IL-2A-1 또는 A-2의 제조방법.
  6. 제1항에서 수득된 인체 IL-2B의 활성 피크중에서 고수율 액체 크로마토그래피 할 때 다른 것보다 짧은 체류 시간에서 용출되는 활성 피크를 회수하여 인체 IL-2B-1을 수득하거나 또는 제1항에서 수득된 인체 IL-2B의 활성 피크중에서 고수율 액체 크로마토그래피할 때 다른 것보다 긴 체체류시간에서 용출되는 활성 피크를 회수하여 인체 IL-2B-2를 수득함을 특징으로 하는 인체 IL-2B-1 또는 B-2의 제조방법.
  7. IL-2을 생성할 수 있는 인체세포를 유도인자 존재하에 배양하여 배양 브로스에 인체 IL-2A 및 B를 생성 및 축적하고, (a) 이 배양액을 술포프로필-교차결합 덱스트란 컬럼에 넣어 흡착시키고 완충액으로 용출시킨 후, (b) 용출액을 음이온 교환 크로마토그래피 담체로 패킹된 컬럼에 넣어 흡착시키고 염 용액으로 용출시킨 다음, (c) 용출액을 폴리아크릴 아미드-아가로즈 컬럼에 겔 여과시키고, (d) 용출액을 고수율 액체 크로마토 그래피하고 용매로 용출시킴을 특징으로 하는 인체 IL-2A 및 B의 혼합물의 제조방법.
  8. 제7항에 있어서, II-2를 생성할 수 있는 인체세포가 말초혈액유도 림파구인 방법.
  9. 제7항에 있어서, 배양을 혈청이 없는 배지에서 수행하는 방법.
  10. 제7항에 있어서, 유도인자가 동종항원, TPA, Con A 또는 그의 혼합물인 방법.
  11. 제7항에서 수득된 인체 IL-2A 및 B의 활성 피크중에서 고수율 액체 크로마토래피 할때 다른 것보다 짧은 체류시간에서 용출되는 활성 피크를 회수함을 특징으로 하는 인체 IL-2A-1 및 B-1의 혼합물의 제조방법.
  12. 제7항에서 수득된 인체 IL-2A 및 B의 활성 피크중에서 고수율 액체 크로마토래피 할때 다른 것보다 긴 체류시간에서 용출되는 활성 피크를 회수함을 특징으로 하는 인체 IL-2A-2 및 B-2의 혼합물의 제조방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019840004207A 1983-07-19 1984-07-18 천연 인체 인터로이킨-2의 제조방법 KR850001285A (ko)

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IL72317A (en) 1988-12-30
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