KR20240094129A - 유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 노란색 종피를 갖는 종자를 생산할 수 있는 돌연변이 벼 식물체(KCTC 18500P)로부터 얻은 본 발명의 유색미 추출물은 3T3-L1 세포주에서 지방 축적을 저해시키고, 비만 관련 유전자(PPARγ, FASN)의 발현을 억제시키는 효과가 있으므로, 비만의 예방, 개선 또는 치료용 건강기능식품 또는 의약품에 매우 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
비만은 에너지 섭취와 소비 간의 불균형으로 인해 과도하게 체지방이 축적되어 지방세포의 수와 크기가 증가하는 것으로, 체내 에너지는 지방세포에 중성지방(triglyceride) 형태로 저장되었다가 에너지원이 고갈되면 저장되었던 지방이 유리지방산과 글리세롤로 분해되어 에너지원으로 사용되게 되지만, 에너지의 과잉 섭취는 지방세포의 분화를 촉진하고 체내 저장 지방량을 증가시켜 비만의 직접적인 원인이 된다.
비만은 내장과 복부의 지방축적에 따른 체형의 변화뿐만 아니라 각종 질환의 발병률을 증가시키는 위험요소로 작용한다. 내장지방이 과도하게 쌓이게 되면 체내 당 대사에 문제가 생기게 되며, 호르몬 분비 이상, 사이토카인 분비 이상 등의 증상이 발생하게 된다. 비만으로 인해 중성지방과 LDL-콜레스테롤의 증가, HDL-콜레스테롤의 감소는 체내 지방 대사 이상을 가져오고, 조직에 존재하는 인슐린 수용체를 감소시키며, 인슐린 민감도 또한 감소시켜 세포 내로 이동되는 포도당의 운반이 억제되면서 고혈당, 당뇨병을 유발하기도 한다. 또한 비만은 고지혈증, 심혈관계 질환, 암, 호흡기 장애, 뇌졸중, 골관절염(osteoarthritis) 등의 대사질환의 발생과 관계가 깊은 것으로 알려져 있다.
지방세포는 지방전구세포로부터 분화하여 만들어지는데, 이러한 지방세포 분화 시 중성지방의 축적이 일어나고 지방세포 특이적 단백질(aP2, FAS, GLUT4, LPL, leptin)의 발현이 유도되며, 이에는 PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptor γ), C/EBP family(CCAAT/enhancer binding proteins; C/EBRα, C/EBRβ 및 C/EBRδ), ADD1/SREBP1c(adipocyte determination differentiation factor 1)/(sterol regulatory element binding protein 1c)라고 불리는 전사인자들이나 지방세포 신호전달물질(adipokines) 등이 중추적인 역할을 담당하는 것으로 알려져 있다.
지방지방세포인 3T3-L1은 Green과 Meuth에 의해 처음으로 3T3 세포로부터 분리되었고, 생물학적 특성과 적절한 배양 조건으로 지방세포로 분화하는 성질이 밝혀진 후 지방세포의 분화과정과 축적된 지방의 분해에 대한 연구를 수행하는데 널리 이용되고 있다. 지방전구세포인 3T3-L1 세포는 성숙 지방세포로 분화되면서 관련 유전자의 발현과 관련 효소 활성의 증가로 세포 내 중성지방을 축적하게 된다. 기능성 소재 개발 연구를 위해서 지방조직 내의 중성지방의 과도한 축적 저해를 목표로 3T3-L1 세포를 이용하여 분화 과정을 억제하거나 지방 분해를 촉진하는 소재를 탐색하는 방법이 널리 사용되고 있다.
기존의 오르리스타트(orlistat), 시부트라민(sibutramin) 등의 항비만 약물은 구토, 변비, 위장장애, 심혈관 질환 등 심각한 부작용을 지닌 것으로 알려졌기 때문에, 효과적이고 안전한 물질 개발 노력이 지속되고 있다. 레티놀, 비타민 E, 비타민 U, 산초나무 추출물 등이 지방 세포 분화 억제 기능을 하는 물질로서 보고된 바 있으며, 안전하고 지속적인 섭취가 가능한 천연물 소재의 항비만제 개발 연구가 활발하게 이루어지고 있다.
항비만 관련 선행기술로는 한국등록특허 제1778227호에 '뽕나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물'이 개시되어 있으며, 한국등록특허 제-2099147호에 '어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물'이 개시되어 있다. 하지만, 본 발명의 '유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물'에 대해서는 아직까지 개시된 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 노란색 종피를 갖는 종자를 생산할 수 있는 돌연변이 벼 식물체(KCTC 18500P)로부터 얻은 본 발명의 유색미 추출물이 3T3-L1 세포주에서 지방 축적을 저해시키고, 비만 관련 유전자(PPARγ, FASN)의 발현을 억제시키는 효과가 우수한 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 수의학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 노란색 종피를 갖는 종자를 생산할 수 있는 돌연변이 벼 식물체(KCTC 18500P)로부터 얻은 본 발명의 유색미 추출물은 3T3-L1 세포주에서 지방 축적을 저해시키고, 비만 관련 유전자(PPARγ, FASN)의 발현을 억제시키는 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 유색미 추출물(CR-Mu) 처리에 따른 3T3-L1 지방전구세포에서의 지방세포 분화 억제능을 확인한 결과로, A는 분화된 지방세포를 ORO(Oil-red-O)로 염색한 뒤 분화 정도를 위상차 현미경으로 촬영한 세포 사진이고, B는 ORO(Oil-red-O) 함량을 측정한 결과이다. NDC는 아무것도 처리하지 않은 정상군이고, DC는 지방전구세포의 분화유도인자인 MDI를 처리한 음성대조군, NAC는 MDI 및 NAC(N-acetyl-L-cysteine)를 처리한 양성대조군이며, CR은 MDI 및 백색미 추출물을 처리한 실험군이고, CR-Mu는 MDI 및 본 발명의 유색미 추출물 처리한 실험군이다. ###는 NDC 대비 DC의 ORO 함량이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.001이고; ***는 DC 대비 NAC 또는 CR-Mu의 ORO 함량이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, ***는 p<0.001이며; +++는 CR 대비 CR-Mu의 ORO 함량이 통계적으로 유의미하게 더 감소하였다는 것으로, p<0.001이다.
도 2는 본 발명의 유색미 추출물(CR-Mu) 처리에 따른 비만 관련 유전자(fasn 및 pparγ)의 발현 억제효과를 확인한 결과이다. NDC는 아무것도 처리하지 않은 정상군이고, DC는 지방전구세포의 분화유도인자인 MDI를 처리한 음성대조군, NAC는 MDI 및 NAC(N-acetyl-L-cysteine)를 처리한 양성대조군이며, CR은 MDI 및 백색미 추출물을 처리한 실험군이고, CR-Mu는 MDI 및 본 발명의 유색미 추출물 처리한 실험군이다. ###는 NDC 대비 DC의 fasn 및 pparγ 발현 정도가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.001이고; ***는 DC 대비 NAC 및 CR-Mu의 fasn 및 pparγ 발현 정도가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.001이며; +++는 CR 대비 CR-Mu의 fasn 및 pparγ 발현 정도가 통계적으로 유의미하게 더 감소하였다는 것으로, p<0.001이다.
도 2는 본 발명의 유색미 추출물(CR-Mu) 처리에 따른 비만 관련 유전자(fasn 및 pparγ)의 발현 억제효과를 확인한 결과이다. NDC는 아무것도 처리하지 않은 정상군이고, DC는 지방전구세포의 분화유도인자인 MDI를 처리한 음성대조군, NAC는 MDI 및 NAC(N-acetyl-L-cysteine)를 처리한 양성대조군이며, CR은 MDI 및 백색미 추출물을 처리한 실험군이고, CR-Mu는 MDI 및 본 발명의 유색미 추출물 처리한 실험군이다. ###는 NDC 대비 DC의 fasn 및 pparγ 발현 정도가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, p<0.001이고; ***는 DC 대비 NAC 및 CR-Mu의 fasn 및 pparγ 발현 정도가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로, p<0.001이며; +++는 CR 대비 CR-Mu의 fasn 및 pparγ 발현 정도가 통계적으로 유의미하게 더 감소하였다는 것으로, p<0.001이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 유색미는 노란색 종피를 갖는 종자를 생산할 수 있는 돌연변이 벼 식물체(KCTC 18500P)로부터 얻은 유색미인 것이 바람직하지만, 이에 한정하지 않는다.
상기 유색미 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다:
(1) 유색미에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
(2) 단계 (1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
(3) 단계 (2)의 여과한 추출물을 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.
상기 단계 (1)에서 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물 중에서 선택하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 에탄올이지만 이에 한정하지 않는다.
상기 제조방법에 있어서, 추출방법은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 유색미 중량의 1~20배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 5~15배 첨가하는 것이다. 추출시간은 0.5~10시간인 것이 바람직하며, 0.5~5시간이 더욱 바람직하지만 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 (3)의 농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하지만, 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하지만 이에 한정하지 않는다.
상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것이 바람직하지만 이에 제한하는 것은 아니다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 유색미 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합체 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명의 조성물을 건강 음료로 사용할 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 텍스트린, 사이클로텐스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제, 사카린 또는 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100g당 일반적으로 약 0.01~0.04g, 바람직하게는 약 0.02~0.03g이다. 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물은 100 중량부 당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 캡슐제, 산제, 과립제, 정제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한 다양한 화합물 혹은 혼합물을 들 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 약학 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당하는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구 투여의 경우, 피부에 국소적으로 도포, 정맥 내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.
또한, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어 '사료'는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미할 수 있다. 상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 수의학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 유색미 추출물을 포함하는 수의학적 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 유색미 추출물을 포함하는 수의학적 조성물에 포함될 수 있는 부형제 및 희석제로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 세탄올, 스테아릴알콜, 유동파라핀, 솔비탄모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 메칠파라벤, 프로필파라벤 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명에 따른 유색미 추출물을 포함하는 수의학적 조성물은 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향신료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있는데, 본 발명에 의한 수의학적 조성물은 동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 잘 알려진 방법을 사용하여 제형화될 수 있고, 제형은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 용액, 시럽, 에어로졸, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 좌제, 멸균 주사용액, 멸균 외용제 등의 형태일 수 있다.
본 발명에 의한 수의학적 조성물은 동물의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 1일 1회 내지 수회 투여할 수 있고, 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
이하, 본 발명의 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1. 유색미 추출물의 제조
노란색 종피를 갖는 종자를 생산할 수 있는 돌연변이 벼 식물체(KCTC 18500P)로부터 얻은 유색미 1kg에 대하여 10배수의 70%(v/v) 에탄올을 가하고, 3시간 동안 환류 추출하였다. 추출물은 여과한 후 감압농축기로 농축하고 동결건조기를 이용하여 얻은 유색미 추출물(CR-Mu)을 하기 실험에 사용하였다. 백색미 추출물(CR)의 경우, 본 발명의 유색미의 모본이 되는 추청벼의 백색미를 대상으로 상기 유색미 추출물과 동일한 방법으로 추출물을 제조하였다.
실시예 1. 유색미 추출물의 지방축적 억제 효과
3T3-L1 지방전구세포를 10% BCS(Bovine Calf Serum) 및 1% PEST(penicillin-streptomycin)를 함유한 high-glucose DMEM(Dulbecco’Modified Eagle’Media; Gibco) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 이후, 6웰 플레이트에 1×105 세포/웰의 농도로 분주하였고, 100% 컨플루언트(confluent) 상태인 4일 후 10% FBS 및 1% PEST를 함유한 high-glucose DMEM에 지방전구세포의 분화 유도인자인 MDI[3-isobutyl-1-methylxanthine(0.25mM), dexamethasone(1μM), insulin(1㎍/㎖)]를 첨가하여 분화를 유도하였다. 분화 초기 3일 동안 매일 같은 배양액을 교환해 주었고, 분화 중기 3일 동안 배양액을 인슐린(1㎍/㎖)을 포함하는 DMEM으로 교환하였다. 이후 분화 후기 3일 동안은 DMEM 배양액으로 교환하여 실험에 사용하였다. 이때 시료는 분화 유도 시작과 동시에 같이 처리해주었다.
분화된 3T3-L1 세포를 PBS 용액으로 2회 세척한 뒤 10% 포르말린을 첨가하고 20분간 실온에서 세포를 고정시킨 후 60% 이소프로판올을 처리함으로써 ORO(Oil-red-O) 시약이 잘 염색될 수 있도록 5분간 실온에서 배양하였다. 이후 플레이트를 완전히 건조시키고 ORO 용액을 첨가하여 30분 동안 지방구를 염색하였다. 염색 후 증류수로 2회 세척하여 지방구의 세포 내 축적을 현미경을 이용하여 육안으로 관찰하였다. 염색된 지방구 정량을 위해 잘 건조된 상태에서 100% 이소프로판올을 첨가하여 ORO 염료를 용출시킨 뒤 분광광도계(SpectraMax i3, Molecular devices, CA, USA)를 이용하여 490nm 파장에서 OD(optical density) 값을 측정하였다.
그 결과, 도 1에 개시한 바와 같이 3T3-L1 세포는 지방세포 분화유도인자인 MDI에 의해 지방세포로 분화가 현저하게 증가하였으며, MDI에 의해 증가된 지방세포로의 분화가 본 발명의 유색미 추출물(CR-Mu) 처리에 의해 억제되었으며, 특히 본 발명의 유색미 추출물이 백색미 추출물(CR)에 대비하여 지방세포의 분화가 통계적으로 유의미하게 더 억제하는 것을 확인하였다.
실시예 2. 유색미 추출물의 비만 관련 유전자의 발현 억제 효과
본 발명의 유색미 추출물의 지방 분화 관련 유전자 발현 조절을 확인하기 위해, real-time PCR을 실시하였다. 분화가 끝난 3T3-L1 세포를 RNeasy mini kit(QIAGEN)를 이용하여 RNA를 추출한 뒤, 1㎍의 RNA를 정량하여 Maxima frist strand cDNA synthesis kit for RT-qPCR(Thermo scientific, USA)를 이용하여 cDNA를 합성한 뒤 PCR를 수행하였다(표 1).
정방향(5'-3') | 역방향(5'-3') | |
GAPDH | GAAGGGTGGAGCCAAAAG(서열번호 1) | GCTGACAATCTTGAGTGAG(서열번호 2) |
fasn | ACCTGGTAGACCACTGCATTG(서열번호 3) | CCTGATGAAACGACACATTCTCA(서열번호 4) |
pparγ | ACCCTTGCATCCTTCACAAG(서열번호 5) | AAGAGCTGACCCAATGGTTG(서열번호 6) |
그 결과, 도 2에 개시한 바와 같이 지방세포 분화유도인자인 MDI에 의해 비만 관련 유전자인 fasn 및 pparγ의 발현이 현저하게 증가된 반면, 본 발명의 유색미 추출물(CR-Mu)을 처리한 경우 fasn 및 pparγ의 발현이 감소되었고, 특히 백색미 추출물(CR)에 대비하여 fasn 및 pparγ의 발현 억제 효과가 더 우수한 것을 확인하였다.
서열목록 전자파일 첨부
Claims (8)
- 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유색미는 노란색 종피를 갖는 종자를 생산할 수 있는 돌연변이 벼 식물체(KCTC 18500P)로부터 얻은 유색미인 것을 특징으로 하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 이용하여 추출한 것을 특징으로 하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 사료 조성물.
- 유색미 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 수의학적 조성물.
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