KR20240044149A - 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물 - Google Patents

모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 모발 성장 촉진 및 탈모 예방 효과가 뛰어날 뿐만 아니라 독성 및 부작용이 거의 없으므로 화장료 조성물 또는 약제학적 조성물로 유효하게 사용될 수 있다.

Description

모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물{Cosmetic composition for promoting hair growth and preventing hair loss comprising fermented extract of Moringa oleifera Leaf, Acorus calamus var. angustatus BESS. plant and Lycium chinense MILL. Fruit}
본 발명은 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.
사람의 모발은 약 15만 개 전후로 구성되며, 각각의 모발은 서로 다른 모발주기를 거쳐 머리가 자라고 빠지는 과정을 반복하게 된다. 모발의 성장주기는 크게 3단계로 나뉘며, 모발이 성장하는 성장기 (anagen), 성장을 마치고 모발을 유지하는 유지기 (catagen), 모유두가 수축되고 모낭이 점차 쪼그라들어 탈모가 진행되는 휴지기 (telogen)의 3단계를 주기적으로 반복한다(Herbal Extracts Induce Dermal Papilla Cell Proliferation of Human Hair Follicles, Ann Dermatol, 2015:667-675). 모발성장주기는 가족력, 유전, 체질, 호르몬조절 등의 내적요인과 영양상태, 노화, 주위환경, 스트레스 등의 외적요인에 의해 달라지며, 탈모가 진행되면 성장주기가 비정상적으로 단축되어 모발의 길이가 짧아지고 가늘어지며 모낭이 쪼그라드는 것을 관찰할 수 있다.
탈모의 원인으로는 유전적 요인뿐 아니라 환경적 요인도 있으며, 최근 환경적 요인에 의한 탈모가 증가하고 있는 추세로, 이러한 환경적 요인은 활성산소와 밀접한 관련이 있다. 활성산소란 여러 대사과정에서 생성된 산화력이 강한 산소로, 피로와 잘못된 식단, 자외선, 화학물질, 스트레스 등과 같은 환경적 요인으로 인해 과잉 발생하며, 산화 작용으로 노화를 촉진하고 모발의 활력을 감소시킨다. 그리고 활성산소는 콜레스테롤과 결합하여 과산화 지질로 변하게 되고 혈관 벽에 붙게 되어 두피 혈관을 좁게 하고 모공을 막아 혈류를 감소시켜 모근에 영양 공급을 어렵게 하며, 모낭을 구성하는 세포의 세포막을 공격하여 세포 사멸을 일으키고, 두피 염증을 유발해 탈모를 일으킨다. 따라서 탈모 치료제를 개발함에 있어서 두피에서의 활성산소 발생을 억제하고, 과잉 발생된 활성산소를 제거하거나 활성을 낮추는 항산화능은 중요한 지표가 될 수 있다.
또한, 탈모의 가장 큰 원인 중 하나는 남성호르몬으로, 남성 호르몬인 테스토스테론이 모낭에서 5α-reductase의 작용을 받으면 DHT (dehyrotestosterone)로 전환되며, 전환된 DHT가 전두부와 두정부에 있는 모유두 세포막의 안드로젠 수용체와 결합하면 모모세포 (Hair mother cells)의 DNA에 세포파괴 신호가 전달되어 세포괴사인자인 BMP, DKK-1, TGF-β가 생성된다. 이렇게 생성된 세포괴사인자는 모모세포를 공격, 파괴시켜 모발의 생장기를 짧게 하고 이른 시기에 퇴행기가 오게 한다. 5α-reductase는 주로 피지선에 분비되는 제1형과 모낭의 외측모근초, 모유두에 분포하는 제2형이 있으며 탈모에는 제2형 효소가 주된 원인이다. 따라서 5α-reductase를 억제하거나 제거할 수 있다면 남성형 탈모와 같은 안드로젠성 탈모증을 예방하거나 치료할 수 있다.
이외에도 출산, 질병, 식생활, 혈액순환장애, 과산화 등의 외부 스트레스가 탈모에 영향을 주는 것으로 보고되었다. 최근에는 낮은 연령층과 여성에게서 탈모 현상이 나타나고 있어 탈모에 대한 관심도가 증가하고 있는 상황으로, 탈모를 하나의 질환으로 보고 이에 대한 다양한 치료제가 출시되고 있으며, FDA 승인을 받은 탈모 치료제로는 미녹시딜 (Minoxidil)과 피나스테라이드 (Finasteride)가 있다. 대표적인 제품인 미녹시딜은 혈관에 작용해 혈류를 증가시켜 영양공급을 원활하게 하여 모발성장을 촉진시키며, 직접적으로 모낭에 작용하여 발모효과를 유도시키나, 매일 2회씩 지속적으로 발라줘야 하는 번거로움이 있고, 모발에 효과를 나타내기까지 3시간 정도 소요되기 때문에 이로 인한 두피건조, 두피가려움증, 두피자극 등의 부작용이 따르며, 솜털을 자라게는 하지만 굵은 털이 길게 자라는 효과를 기대하기는 어렵다는 단점이 있다. 한편, 피나스테라이드는 남성호르몬인 DHT 억제를 통해 탈모의 진행을 지연시키고 발모를 유도하나, 복용을 중단하면 다시 원상태로 돌아가 탈모가 또다시 진행되는 문제점이 있으며, 남성에게서 성욕감퇴로 인한 발기부전을 일으키고 여성에게서는 드물게 기형아를 유발한다는 부작용이 보고되어 복용이 제한되고 있다. 이와 같이 미녹시딜과 피나스테라이드를 비롯한 기존 탈모 치료제들은 사용 중단 시 효과가 저해되기 때문에 장기적인 치료를 필요로 하는 탈모 치료는 부작용을 최소화하는 것이 요구된다. 이에 따라 화학적 치료제가 아닌 부작용을 최소화한 새로운 천연물질 유래 탈모 치료제의 개발이 필요한 실정이다.
본 발명자들은 인체에 무해하고 모발 성장 촉진 및 탈모 방지 효과를 갖는 천연물 유래 소재를 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물이 우수한 라디칼 소거 활성 뿐만 아니라, 모발 성장 유전자의 발현을 촉진하고 남성호르몬인 DHT의 활성화를 유도하는 효소 유전자 발현을 저해할 수 있음을 확인한 후, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
본 발명은 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 발효 추출물은 건조된 모링가 잎, 창포 전포 및 구기자 열매를 포함한 배지에 효모를 접종한 후 배양하여 수득한 것일 수 있다. 상기 효모는 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)일 수 있다. 상기 배양은 20℃ 내지 40℃ 온도에서 12 시간 내지 60 시간 동안 수행될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 중량비는 1:1:1일 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 발효 추출물은 화장료 조성물 내 0.001 내지 20 mM의 농도로 함유될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물의 제형은 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어마사지크림, 헤어왁스, 헤어 에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 및 헤어스프레이로 이루어진 군으로부터 하나 또는 그 이상 선택될 수 있다.
본 발명은 또한 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 약제학적 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 발효 추출물은 건조된 모링가 잎, 창포 전포 및 구기자 열매를 포함한 배지에 효모를 접종한 후 배양하여 수득한 것일 수 있다. 상기 효모는 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)일 수 있다. 상기 배양은 20℃ 내지 40℃ 온도에서 12 시간 내지 60 시간 동안 수행될 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 중량비는 1:1:1일 수 있다.
본 발명에 따른 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 모발 성장 촉진 및 탈모 예방 효과가 뛰어날 뿐만 아니라 독성 및 부작용이 거의 없으므로 화장료 조성물 또는 약제학적 조성물로 유효하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
한편, 전술한 바와 같은 효과들에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
도 1은 제조예 1 내지 7에 따른 추출물의 DPPH 소거 활성을 나타낸다.
도 2는 제조예 1 내지 7에 따른 추출물의 TGF-β 억제 활성을 나타낸다.
도 3은 제조예 1 내지 7에 따른 추출물의 DKK-1 억제 활성을 나타낸다.
도 4는 제조예 1 내지 7에 따른 추출물의 VEGF 촉진 활성을 나타낸다.
도 5는 제조예 7에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물의 마우스에 처리시 모발 성장 촉진 효과를 나타낸다.
도 6는 제조예 7에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물의 마우스에 처리시 모발 성장 촉진 효과를 나타낸다.
도 7은 제조예 7에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물의 세포 독성을 나타낸다(왼쪽: Raw264.7 세포독성 시험 결과, 오른쪽: HDP 세포독성 실험 결과).
이하, 발명의 구체적인 구현예에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물에 대하여 상세하게 설명하기로 한다. 다만, 이는 발명의 하나의 예시로서 제시되는 것으로, 이에 의해 발명의 권리범위가 한정되는 것은 아니며, 발명의 권리범위 내에서 구현예에 대한 다양한 변형이 가능함은 당업자에게 자명하다. 본 명세서 전체에서 특별한 언급이 없는 한 "포함" 또는 "함유"라 함은 어떤 구성 요소(또는 구성 성분)를 별다른 제한 없이 포함함을 지칭하며, 다른 구성 요소(또는 구성 성분)의 부가를 제외하는 것으로 해석될 수 없다.
본 발명에서 “모링가 잎”은 모링가 나무의 잎으로서, 모링가 나무는 모링가과(Moringaceae Family), 모링가속(Moringa Genus)의 식물로서 학명은 Moringa Oleifera(이명 Moringa Pterygosperma)이며, 학명이 유래한 타밀어로는 Murunggai라고도 한다. 모링가는 콩과식물로 나뭇잎과 열매는 물론 나무전체를 식용으로 하는 열대성 나무이며, 다량의 아미노산, 무기질, 비타민 등 90가지 이상의 영양소를 함유하고 있다. 특히, 모링가잎에는 콜레스테롤 예방, 항염증 작용, 시력개선, 에너지 증가, 혈압 정상화, 피부 건강 회복, 소화기능 개선, 면역 시스템 강화 주름/노화 방지, 상처 치료 개선, 종양 예방, 혈당 정상화, 궤양 방지에 탁월한 효과를 보이며 모링가 식물에는 46가지 이상의 항산화제와 36가지 이상의 항염증 혼합물이 함유하고 있다.
본 발명에서 “창포 전초”는 천남성과(Araceae)에 속하며, 유게놀(eugenol), 아사릴알데히드(asarylaldehyde), 아사론(asarone) 등의 정유성분, 탄닌(tannin), 아코린(axorin), 팔미틴산(palmitic acid) 등의 성분을 함유하고, 진정, 진통, 진경, 진해 거담작용을 나타내는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 “구기자”는 가지과의 구기자 잎속의 목본식물로 우리나라를 비롯한 중국, 대만, 일본, 유럽 등지에 자생하거나 재배되고 있는 생약재이다. 구기자는 열매, 잎, 뿌리를 부위별로 이용하며, 상기 구기자열매, 잎, 뿌리 등에는 베타인(betaine), 루틴(rutin), 쿠코아민 A(kukoamine A), 베타시토스테롤(-sitosterol)과 같은 기능성 성분이 다량 함유되어 있다.
본 명세서에서 사용된 용어 “발효”는 미생물을 이용한 유기물질의 효소적 또는 대사적 분해를 포함하는 모든 활성 또는 과정을 의미한다. 상기 미생물은 효모, 유산균, 세균 및 곰팡이로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상일 수 있다. 상기 효모는 예를 들어 사카로마이시스 세레비시애(Saccharomyces　cerevisiae), 사카로마이세스 엘립소이데우스(S.　ellipsoideus), 사카로마이세스 코레아누스(S.　coreanus), 사카로마이세스 칼스버젠시스(S.　carlsbergensis), 사카로마이세스 파스토리아누스(S.　pastorianus), 사카로마이세스 락티스(S.　lactis), 사카로마이세스 룩시(S.　rouxii), 시죠사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces　pombe), 지고사카로마이세스 메이저(Zygosaccharomyces　major), 한세눌라 아노말라 (Hansenula　anomala), 브레타노마이세스 블룩셀렌시스(Brettanomyces　bruxellensis), 브레타노마이세스 커스터시아누스(B.　custersianus), 데케라 아노말라(Dekkera　anomala), 스트렙토마이세스 올리보크로모제네스(Streptomyces　olivochromogenes), 또는 스트렙토마이세스 그리세우스(S. griseus)일 수 있다. 상기 유산균은 예를 들어 비피도박테리움 속(Bifidobacteriumsp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus　sp.), 락토코커스 락티스 속(Lactococcus　sp.), 페디오코커스 속(Pediococcus　sp.), 스트렙토코커스 속(Streptococcus.　sp), 또는 류코노스톡 속(Leuconostocsp.)일 수 있다. 상기 발효에 사용되는 곰팡이는 이에 제한되지는 않지만, 버섯을 포함할 수 있는데, 상기 버섯은 예를 들어 표고버섯, 느타리버섯, 팽이버섯, 송이버섯, 양송이버섯, 목이버섯, 노루궁뎅이 버섯, 영지버섯, 또는 상황버섯일 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어 "추출물"은 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고 천연물의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질을 의미하는 것으로, 천연물의 성분을 뽑아내어 얻어진 물질을 추출 후 다른 방법으로 가공 또는 처리하여 얻어질 수 있는 물질을 모두 포함할 수 있다. 상기 추출물은 당업계에 공지된 추출방법 및 추출용매를 이용하여 수득할 수 있다. 상기 추출용매는 물, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매이다. 추출하는 추출용매에 따라 식물 추출물의 유효성분의 추출정도와 손실정도가 차이가 날 수 있어, 바람직하게는 메탄올, 에탄올, 이소프로탄올, 부탄올 등 알코올을 이용하며, 보다 바람직하게는 70 내지 100% 에탄올을 용매를 이용한다. 추출방법은 특별히 제한되지 않고, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출 등을 이용할 수 있으며, 추출 혼합물의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 또한, 상기 추출물은 상기 추출용매에 의해 추출하는 방법 외에 통상적인 정제과정을 거쳐서도 수득할 수 있다. 예를 들어, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과, 냉동여과법, 원심분리법, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 크로마토그래피)에 의한 분리 등이 추가적으로 실시된 다양한 정제과정을 통해 얻어진 분획을 통하여서도 수득할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용된 용어 "모발"은 신체의 털을 의미하며, 케라틴 단백질로 구성된 실 모양의 형태를 말한다. 구체적으로, 두발, 눈썹, 속눈썹, 코털 또는 체모일 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용된 용어 "모발 성장"이란 3단계으 모발 성장 주기, 성장기, 퇴화기, 휴지기에 있어서 성장기에 있는 모발을 말하며, 모발 성장을 촉진시키는 것은 성장기의 모발의 비율을 증가시키고, 세포들이 신속하게 분화되어 다른 세포들을 모낭 밖으로 밀어냄으로써 개개의 모발이 형성되는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "탈모"는 성장기의 모발 비율이 짧아지고 퇴행기 또는 휴지기의 모발이 많아져 비정상적으로 모발이 탈락하는 숫자가 증가하는 것을 말한다. 탈모에는 모낭의 사멸과 탈락이 관련되어 있으며, 모낭의 사멸과 탈락에는 남성 호르몬이 주되게 작용하는 것으로 보고된 바 있다
본 명세서에서 사용된 용어 "탈모 방지"는 남성 호르몬인 테스토스테론에 관여하는 효소의 작용을 조절하고, 모유두세포를 활성화시킴으로써 비정상적인 모발의 탈락을 방지하고자 함을 말한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "개선"은 개체에서 탈모의 (a) 발전의 억제 (b) 경감 및 (c) 제거를 의미하며, "예방"의 의미를 포함한다. 상기 "예방"은 질환 또는 질병을 보유하고 있다고 진단된 적은 없으나, 이러한 질환 또는 질병에 걸리기 쉬운 경향이 있는 개체에서 질환 또는 질병의 발생을 억제하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "개체"는 본 발명의 상기 조성물을 투여하여 증상이 호전될 수 있는 질환을 가진 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 돼지, 양, 개, 고양이, 랫드, 마우스, 침팬지 등의 포유동물을 의미한다.
제1구현예에 따르면,
본 발명은 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 중량비는 1:1:1인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 추출 추출물은 화장료 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.5 내지 20중량%, 바람직하게는 1 내지 10중량%, 보다 바람직하게는 2 내지 6중량%의 양으로 함유될 수 있다. 상기 양이 0.5중량% 미만일 경우 원하는 모발 성진 촉진 및 탈모 방지 효과를 얻기 어렵고, 20중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않아서 생산 경제성이 떨어지는 문제점이 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 발효 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 상기 발효 추출물의 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 추가로 함유할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 화장료 조성물은 모발 성장 및 탈모 방지 효과가 알려져 있는 임의의 다른 물질들 뿐만 아니라, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 또는 담체를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않고, 본 기술분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들면, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 헤어오일, 유액, 스크레이, 무스, 헤어로션, 헤어젤, 헤어팩, 헤어앰플, 비누 등을 들 수 있고, 그 제형은 특별히 제한되지 않는데, 예를 들면, 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어마사지크림, 헤어왁스, 헤어 에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 또는 헤어스프레이로 제조될 수도 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있고, 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용될 수 있고, 예를 들어 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으며, 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 구체적인 구현예에 따르면, 본 발명의 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)를 포함하는 발효 추출물은 생체 적합성이 뛰어나며, 우수한 라디칼 소거 활성 뿐만 아니라, 모발 성장 인자 VEGF의 발현 증가 및 모발 성장 억제 인자인 TGF-β1 및 DKK-1의 발현 억제 효과를 갖는다. 따라서, 본 발명의 발효 추출물은 모발 성장 촉진 및 탈모 예방을 위한 화장료 조성물의 유효성분으로서 유용하게 사용될 수 있다.
제2구현예에 따르면,
본 발명은 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 중량비는 1:1:1인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 상기 발효 추출물을 약학적 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.0001 내지 50중량%, 바람직하게는 0.001 내지 30중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 20중량%의 양으로 포함한다. 상기 양이 0.0001중량% 미만일 경우 원하는 모발 성장 촉진 및 탈모 예방 효과를 얻기 어렵고, 50중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않아서 생산 경제성이 떨어지는 문제점이 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 피부, 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장 투여가 포함되고, 경구 또는 비경구 투여가 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 비경구 투여는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 병소내 주사 또는 주입기술을 포함한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 본 발명에 따른 발효 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 상기 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 약제학적 조성물의 경구투여를 위한 고형제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질캅셀제, 환 등이 포함된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제형화할 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 개체의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 투여시간, 투여 경로, 배출률, 약물 배합 및 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
제3구현예에 따르면,
본 발명은 화장품학적 또는 약제학적으로 유효한 양의 본 발명은 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 개체에 처리 또는 투여하는 단계를 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 예방 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 방법에 있어서, 상기 화장품학적 또는 약제학적으로 유효한 양이란 0.0001 내지 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 0.001 내지 10 ㎎/㎏이며, 이에 제한되는 것은 아니다. 처리 또는 투여량은 특정 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여기간, 투여방법, 제거율, 질환의 중증도 등에 따라 조절될 수 있다. 처리 또는 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 실시할 수도 있다.
본 발명에 따른 방법에 있어서, 상기 개체는 척추동물이고 바람직하게는 포유동물이며, 보다 바람직하게는 인간 또는 쥐, 토끼, 기니아피그, 햄스터, 개, 고양이와 같은 실험동물이고, 가장 바람직하게는 인간일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 방법에 있어서, 상기 처리 또는 투여 방법은 도포, 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여시 복강내주사, 직장내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사, 자궁내 경막 주사, 뇌혈관내 주사 또는 흉부내 주사에 의해 투여될 수 있다.
이하, 실시예, 시험예 및 제조예를 들어 본 명세서의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예, 시험예 및 제조예는 본 명세서에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 명세서의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.
<제조예>
제조예 1. 모링가 잎( Moringa oleifera , Leaf) 추출물의 제조
건조된 모링가 잎 300g을 40배 부피의 3차 증류수로 2시간 동안 추출(85±2 ℃, 1.2 Pa)한 다음 50%로 농축하였다. 상기 추출물에 효모균(Saccharomyces　cerevisiae)을 5 × 106 CFU/mL의 농도로 접종하여 37±1℃에서 24시간 공동배양한 후 멸균(120℃에서 30분)하였다. 그 다음, 생성된 배양액을 4겹의 거즈로 여과한 다음 원심분리(6,000 G/10min)하여 상등액을 취하여 동결건조시키고, 생성된 건조분말은 냉동(-20℃) 보관하여 사용하였다.
제조예 2. 창포 전초( Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 추출물의 제조
건조된 모링가 잎 대신에 건조된 창포 전초를 사용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법을 사용하여 창포 전초 추출물을 제조하였다.
제조예 3. 구기자 열매( Lycium chinense MILL., Fruit) 추출물의 제조
건조된 모링가 잎 대신에 건조된 구기자 열매를 사용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법을 사용하여 구기자 열매 추출물을 제조하였다.
제조예 4 내지 7. 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물의 제조
건조된 모링가 잎 대신에 하기의 표 1에 따른 혼합 추출물(단위: g)을 사용한 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법을 사용하여 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물을 제조하였다.
No. 모링가 잎 창포 전초 구기자 열매
제조예 4 150 150 -
제조예 5 - 150 150
제조예 6 150 - 150
제조예 7 100 100 100
<실험예>
실험예 1. 항산화 효과
상기 제조예 1 내지 7에서 제조된 추출물들의 항산화능을 확인하기 위해 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 제거 분석(radical scavenging assay)을 실시하였다. DPPH시약을 Methanol에 0.5mM 로 녹여서 제조하고, 상기 제조예 1 내지 7에 따른 추출물 각각을 DPBS에 희석하여 96-well plate에 100ul 넣고 제조한 DPPH 시약을 100ul 넣어준 후 30분 동안 어두운 곳에서 반응시켰다. Microplate reader(SpectraMax ABS, Molecular Devices Co.) 장비를 이용하여 517nm 파장에서 분석하여 양성대조군인 Ascrobic acid와 비교하였다.
그 결과, 본 발명에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물인 제조예 4 내지 5은 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매 각각의 추출물에 비하여 자유라디칼 소거율(%)이 우수한 것으로 나타났으며, 특히 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매를 1:1:1의 중량비로 포함하는 제조예 7의 경우 아스코르브산의 항산화능과 거의 유사할 정도로 뛰어난 항산화활성을 갖는 것으로 확인되었다(도 1).
실험예 2. 모발 성장 억제 인자 저해 효과
상기 제조예 1 내지 7에서 제조된 추출물들의 모발 성장 억제 인자에 대한 저해 효과를 알아보기 위하여 ELISA kit를 이용해 TGF-β 및 DKK-1 발현 억제 활성을 평가하였다. HDP 세포를 10% FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 96-well plate에 well당 2X104 개로 접종한 후, 5% CO2, 37℃incubator에서 24시간 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 분말로 된 모링가 복합 추출물을 DPBS에 100mg/ml 로 녹인 후, DMEM 배지를 이용해 희석하여 넣고 5nM의 Testosterone에서 24시간 배양하였다. 원심분리기를 이용하여 기타 부유물질을 모두 제거한 후, 배양액만을 수확하여 ELISA kit로 TGF-β 및 DKK-1의 저해율을 평가하고 양성대조군 미녹시딜과 비교하였다.
그 결과, 본 발명에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물인 제조예 4 내지 5은 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매 각각의 추출물에 비하여 TGF-β 억제 활성이 우수한 것으로 나타났다. 특히 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매를 1:1:1의 중량비로 포함하는 제조예 7의 경우 TGF-β의 활성을 41.26% 억제시킴으로써 미녹시딜의 억제활성 25.29%에 비해 현저히 우수한 효과를 갖는 것으로 나타났다 (도 2). 또한, 본 발명에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물인 제조예 4 내지 5은 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매 각각의 추출물에 비하여 DKK-1 억제 활성이 우수한 것으로 나타났다. 특히 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매를 1:1:1의 중량비로 포함하는 제조예 7의 경우 DKK-1의 활성을 51.17% 억제시킴으로써 미녹시딜의 억제활성 44.19%에 비해 현저히 우수한 효과를 갖는 것으로 나타났다 (도 3).
실험예 3. 모발 성장 인자 촉진 효과
상기 제조예 1 내지 7에서 제조된 추출물들의 모발 성장 인자에 대한 촉진 효과를 알아보기 위하여 RT-PCR을 이용해 VEGF 발현 증가 활성을 평가하였다. HDP 세포를 10% FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 6 well plate에 well 당 1X105 개로 접종한 후, 5% CO2, 37℃incubator에서 24시간 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 분말로 된 모링가 복합 추출물을 DPBS에 100mg/ml로 녹인 후, DMEM 배지를 이용해 희석하여 넣고 5nM의 Testosterone의 조건에서 72시간 배양하였다. 그 다음 배양액을 모두 제거한 뒤 DPBS로 2회 약하게 씻어내고, 세포를 해리하여 RNA prep kit를 사용하여 RNA를 추출하였다. 추출한 RNA의 농도는 NanoDrop(NanoDrop One, Thermo Fisher scientific)으로 측정하였다. RNA 농도를 일정하게 맞춰서 Onestep PCR mix 분주하고, 그 다음 RT-PCR(QuantStudio 5, Thermo Fisher Scientific)을 이용하여 모발 성장 인자인 VEGF의 발현량을 양성대조군 미녹시딜과 비교하였다.
그 결과, 본 발명에 따른 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 혼합 추출물인 제조예 4 내지 5은 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매 각각의 추출물에 비하여 VEGF의 발현을 촉진시키는 것으로 나타났다. 특히 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매를 1:1:1의 중량비로 포함하는 제조예 7의 경우 상대적 발현량이 2.7로서 미녹시딜의 상대적 발현량 1.6에 비하여 현저히 우수한 효과를 갖는 것으로 나타났다 (도 4).
실험예 4. 모낭세포 활성화 효과
상기 제조예 7에서 제조된 추출물의 모낭세포 활성화에 미치는 효과를 알아보았다. 실험 동물은 49일령의 C57BL/6 암컷 마우스 모델을 사용하였으며, 사육은 온도 22±1℃습도 50%, day/night cycle(12h light, 12 h dark)의 동물사육기 안에서 자유급식조건으로 사육하였다. 49일령 휴지기 C57BL/6 쥐들의 등 털을 Clipper를 이용하여 깎은 후, 21일간 매일 실험군인 상기 제조예 7에 따른 추출물 10 mg/ml과 양성대조군인 미녹시딜 3 %(현대약품, Korea)를 100 μl씩 손으로 직접 도포하였다. 그 다음 날짜 간격을 두고 사진을 찍으면서 털이 나는 과정을 기록하였다. 21일이 지난 후엔 마우스를 모두 희생하여 피부 조직을 채취한 후 Hematoxylin and eosin staining(H&E staining)을 통해 제조예 7에 따른 발효 추출물 처리군, 무처리군 및 미녹시딜 처리군의 모낭세포 활성을 조직 형태학적으로 관찰하였다.
그 결과, 본 발명에 따른 특히 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매를 1:1:1의 중량비로 포함하는 제조예 7의 경우 도포 11일 이후부터는 마우스 등에서 털이 자라는 것으로 나타났으며, 21일차에는 털이 완전히 자람으로써 미녹시딜 처리군과 유사하거나 더 우수한 모낭 세포 활성 효과를 갖는 것으로 확인되었다(도 5 및 6).
실험예 5. 세포 독성
상기 제조예 7에서 제조된 발효 추출물의 세포 독성을 알아보기 위하여 Raw264.7 세포독성 및 HDP 세포독성 실험을 수행하였다. 쥐의 대식세포 cell line인 Raw 264.7을 10% FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 96-well plate에 well당 4X104 개로 접종한 후, 5% CO2, 37℃ incubator에서 24시간 배양하였다. 또한, 인간모유두종 세포인 HDP(Human Hair Follicle Dermal Papilla Cell, 이하 HDP)를 10% FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 96-well plate에 well당 2X104 개로 접종한 후, 5% CO2, 37℃ incubator에서 24시간 배양하였다. 배양 후 각각의 배지를 제거하고 제조예 7에 따른 발효 추출물을 DPBS에 100mg/ml 로 녹인 후, DMEM 배지를 이용해 희석하여 넣고 24시간 배양하였다. 배양 후 MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl_-2,5,-Diphenyltetrazolium Bromide) 시약을 Serum Free DMEM 배지에 녹여서 1시간 30분 동안 배양 후 Microplate reader(SpectraMax ABS, Molecular Devices Co.) 장비를 이용하여 570 nm 파장에서 분석하여 시료를 처리하지 않은 대조군과 비교하여 세포독성을 확인하였다.
그 결과, 본 발명에 따른 특히 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매를 1:1:1의 중량비로 포함하는 제조예 7의 경우 우수한 세포 생존율을 나타내었다(도 7).
실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (7)

  1. 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 발효 추출물은 건조된 모링가 잎, 창포 전포 및 구기자 열매를 포함한 배지에 효모를 접종한 후 배양하여 수득된 것을 특징으로 하는 것인, 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 효모는 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)인 것을 특징으로 하는 것인, 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물.
  4. 제2항에 있어서,
    상기 배양은 20℃ 내지 40℃ 온도에서 12 시간 내지 60 시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 것인, 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 모링가 잎(Moringa oleifera, Leaf), 창포 전초(Acorus calamus var. angustatus BESS., plant) 및 구기자 열매(Lycium chinense MILL., Fruit)의 중량비는 1:1:1인 것을 특징으로 하는 것인, 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 발효 추출물은 화장료 조성물 내 0.001 내지 20 mM의 농도로 함유되는 것을 특징으로 하는 것인, 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물의 제형은 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어마사지크림, 헤어왁스, 헤어 에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 및 헤어스프레이로 이루어진 군으로부터 하나 또는 그 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 것인, 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물.
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KR1020220123577A KR20240044149A (ko) 2022-09-28 2022-09-28 모링가 잎, 창포 전초 및 구기자 열매의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발 성장 촉진 및 탈모 방지용 화장료 조성물

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