KR100554947B1 - 생약 추출물을 함유하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진효과를 갖는 화장료 조성물 - Google Patents

생약 추출물을 함유하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진효과를 갖는 화장료 조성물 Download PDF

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주식회사 케이엠에스아이
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Abstract

본 발명은 생지황, 하수오 및 황정 혼합 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 본 발명의 추출물은 모모(毛母)의 상피 세포 성장 효과 및 마우스를 통한 모발 생장 효과를 나타내는바 탈모 방지, 개선 및 발모 효과를 나타내는 화장료 조성으로 유용하게 이용될 수 있다.
생지황, 하수오, 황정, 탈모, 발모, 대머리, 화장료

Description

생약 추출물을 함유하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진 효과를 갖는 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising crude drug extract for preventing and improving baldness}
도 1은 혼합추출물(1), (2) 및 (3)의 모모(毛母)의 상피세포 성장 효과에 미치는 영향을 나타낸 도이며,
도 2는 혼합추출물(1), (4), (5) 및 (6)의 모모(毛母)의 상피세포 성장 효과에 미치는 영향을 나타낸 도이고,
도 3은 혼합추출물(1), (7) 및 (8)의 모모(毛母)의 상피세포 성장 효과에 미치는 영향을 나타낸 도이며,
도 4는 혼합추출물(1) 및 단일추출물(1) 내지 단일추출물(3)의 모모(毛母)의 상피세포 성장 효과에 미치는 영향을 나타낸 도이고,
도 5는 혼합추출물(1), (5), (7) 및 (8)의 발모 효과를 나타낸 도이며,
도 6a는 음성대조군의 모발 생장 효과를 나타낸 도이고,
도 6b는 혼합추출물(1)의 모발 생장 효과를 나타낸 도이며,
도 6c는 혼합추출물(5)의 모발 생장 효과를 나타낸 도이고,
도 6d는 혼합추출물(7)의 모발 생장 효과를 나타낸 도이며,
도 6e는 혼합추출물(8)의 모발 생장 효과를 나타낸 도이고,
도 6f는 양성 대조군인 미녹시딜(Minoxidil)의 모발 생장 효과를 나타낸 도이며,
도 6g는 양성 대조군인 H사의 마이녹실의 모발 생장 효과를 나타낸 도이고,
도 7a는 혼합추출물(1) 도포 전 피험자의 탈모 진행 상태를 나타낸 도이며,
도 7b는 혼합추출물(1)을 피험자에게 6개월 동안 도포했을 때, 피험자의 발모 진행 정도를 나타낸 도이다.
본 발명은 생지황, 하수오 및 황정 혼합 추출물을 함유하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 머리는 두피에서 모발이 나오는 상태를 일컫는 것으로 몸이 허약하거나 또는 여러 가지 스트레스, 각종 공해 등으로 인하여 머리카락의 영양이 미약해 지는가 하면 머리가 잘 빠지거나 심지어는 대머리 현상까지 이르게 되는데 이러한 현상은 여성보다는 남성에게서 월등하게 그 발생빈도가 높다고 하겠다. 모발이 잘 빠지거나 거칠며 영양이 없는 원인은 아직 과학적으로 명확하게 구명되지는 않았지만, 이는 유전적 소인이 가장 큰 것으로 알려져 있고, 그 밖에 내분비계의 장애, 자율신경계의 이상, 알레르기, 모근의 영양결핍, 세균 감염, 노화 등의 원인 으로 추정되고 있다.
탈모증은 남녀 모두에게서 흔히 볼 수 있는 증상이며 이로 인해서 많은 사람들이 생활에 지장을 받고 있고 탈모증을 치료하거나 외모를 개선하기 위해서 상당한 사회적 비용이 지출되고 있다. 정상적인 모발의 성장은 성장기(anagen), 퇴축기(catagen) 그리고 휴식기(telogen)의 주기에 따라서 이루어진다. 동물의 털이나 인체의 다른 부위의 모발에 비해 인간 머리카락은 상대적으로 긴 성장주기를 가진다(성장기, 2-5년; 퇴축기, 수일-수주; 휴식기, 3달). 모발의 성장주기를 조절하는 과정에는 여러 요인이 관여하는 것으로 알려져 있으나 아직 정확한 작용 기작은 정확히 알려져 있다.
탈모증은 크게 두 종류가 있다. 첫째는 남성형 탈모증(male pattern baldness), 장년형 탈모증(alopecia seniles) 또는 남성호르몬성 탈모증 (androgenic alopecia)이라고 불리는 것으로 중년 남성에서 흔히 볼 수 있으며 전두부와 두정부에서 시작되고, 둘째로는 원형 탈모증(alopecia areata)이라고 불리는 것으로 원형 내지는 타원형의 비교적 경계가 명확한 탈모를 보이며 청소년기에 발생할 수 있는 탈모증이 있다. 탈모증은 남성에만 있는 질병이 아니고 여성에서도 발생하며, 탈모증의 대부분은 남성형 탈모증으로서 남녀에 상관없이 발생한다. 원형 탈모증 역시 남녀 모두에게 발생하나 여성이 남성에 비하여 발생 빈도가 낮다. (M. Inaba 등, Androgenetic Alopecia, Springer-Berlag, Tokyo, Japan, 1996).
일반적으로 사람의 두발이 탈모되는 원인은 유전적 요인, 노화의 진행, 약물 복용, 방사선 치료, 및 중병 후 스트레스 등을 들 수 있다. 생화학적 및 생리학적 관점에서 탈모 현상은 남성호르몬의 과다 활동, 두피 혈액순환의 문제 및 모발대사에 필수적인 영양소의 결핍의 세 가지 주요 원인에 의한 것이라고 알려져 있다. 상기 세 가지 요인들이 단독으로도 탈모를 유발할 수 있지만, 탈모요인들이 복합되어 상승작용을 일으키게 되면 탈모증이 가속화되고 증상이 심해지게 된다. 특히, 유전적 요인 또는 후천적 특수조건으로 인하여 남성호르몬의 생성, 변화, 인식 및 신호전달 과정이 과도하게 작동하여 모낭 조직이 조기 노화되는 경향을 갖게 된다면 그렇지 않은 일반인 보다 조기에 대머리가 될 확률이 높다. 또한 유전적 요인, 노화, 서구적 고지방 식생활 및 기타 외부적 요인으로 인하여 두피의 긴장도가 쉽게 높아지거나 동맥경화증 등의 증상이 있는 경우 혈액순환 장애가 쉽게 일어나므로 원활한 모발 대사에 장애가 생긴다.
원형 탈모증은 원형 또는 타원형으로 탈모의 경계가 명확하며, 단발 또는 다발이 될 수도 있고, 심하면 두발 전부 혹은 눈썹까지 빠지는 경우도 있다(범발성 탈모증). 단발성인 것들은 특별한 치료 없이 치유되기도 하지만 범위가 넓은 경우는 재발할 수 있다. 최근의 세포생물학적 연구에 의하면 원형탈모증이 일종의 자가면역질환인 것으로 밝혀지고 있다. 즉, 모포에 손상을 줄 수 있는 임파구(CD4+)가 모포의 주변에 집결하여 있고 주된 표적은 멜라닌세포(melanocyte), 각화세포 (keratinocyte), 모유두(dermal papilla), 그리고 혈관내피세포(vascular endothelium)로 알려져 있다.
남성형 탈모증이나 원형 탈모증 이외에, 각종 항암제를 투여하였을 때 탈모 현상이 발생한다. 항암제는 사람과 동물에 투여하였을 때 분열하는 조직에 가장 먼 저 작용하는데 암조직은 물론 조혈 장기, 위장관 내피세포군, 그리고 피부의 피지선과 모낭세포에도 작용하게 되므로 부작용으로 탈모가 유발된다.
최근에 현대인들에게는 대기오염과 같은 환경적인 요인과 정신적인 스트레스, 그리고 헤어미용 제품의 과다 사용으로 인하여 원형 또는 불규칙한 원형으로 흔히 대머리라고 하는 탈모증이 많이 발생하고, 나이도 점차 낮아지고 있다. 이와 같은 대머리나 기타의 탈모증은 당사자들에게 심각한 스트레스를 유발시키고 자신감을 잃게 만들어 대인관계에 지장을 초래할 수 있으므로 발생 초기에 치료하는 것이 바람직하지만, 현재 시중에 판매되는 대머리 치료제들은 그 효과가 미약하거나 전혀 없고, 의학적으로도 검증되지 않은 것이 많아 오히려 인체에 심각한 부작용을 일으킬 문제점이 있다.
생약성분의 추출물을 이용하여 두피에 바르거나 복용함으로써 발모를 촉진시키려는 시도 또한 많이 있었는데, 난초과 식물의 추출물을 이용하는 경우(대한민국특허 제0157667호), 웅지와 만형자를 이용하는 경우(대한민국 특허 제0161338호), 만병초 엑기스를 유효성분으로 사용하는 경우(한국특허공개 제91-106호), 소나무잎 추출물을 이용한 발모촉진제(한국특허공개 제96-40346호), 누에 등을 이용한 발모촉진제(한국특허공개 제 90-2757호), 오갈피 뿌리, 단삼 뿌리, 적하수오 뿌리, 부채마, 및 메밀을 유효성분으로 하는 발모 육모제(한국공개 특2000-24499), 반하, 정향, 복분자, 산초, 만형자, 단삼 및 백자인을 이용하는 경우(대한민국 특허 제259037), 원잠아, 잠종, 잠태, 잠사, 및 번데기를 약 200℃에서 15분 정도 가열하여 얻은 기름을 사용하는 경우 (한국공개특허 제90-2757호), 인삼, 황기, 당귀, 하 수오, 호도, 복분자, 생지황, 보골지, 송채, 단삼, 홍화, 여정실 혼합 추출물을 사용하는 경우(한국공개특허 제90-13934호), 원잠아(누에나방), 잠종(누에씨), 번데기(누에), 검은깨, 다시마, 참깨, 및 호두알을 고압 고온 추출하여 사용하는 경우(한국공개특허 제90-5952호), 녹두분, 대두분, 흑미분, 들깨분, 참깨분, 호두분, 김분, 홍합분, 굴분, 멸치분, 미역분, 다시마분, 효모농축액 또는 이의 건조분을 혼합 사용하는 경우(대한민국 특허 제0260673호), 사상자, 솔잎, 및 원잠아를 사용하는 경우(한국공개특허 제90-002757호), 구기자 열매, 뿌리, 가지(줄기), 잎, 순, 꽃 및 강냉이 수염을 사용하는 경우(한국공개특허 특2000-36534호) 등이 공개된 바 있으나 그 작용 원리가 명확하지 않으며 효능이 충분히 검증되지 않은 실정이다.
상기와 같이, 전술한 공지의 방법 및 발모제들은 탈모 환자에게 경제적 부담 및 고통을 주거나 부작용을 유발하고, 효과가 일시적이거나 또는 단편적인 약리학적 기작만을 사용하는 등의 문제점을 가지고 있어서, 효과가 보다 탁월하고 지속적이며, 부작용이 없는 약제들의 요구가 증대되고 있는 실정이다.
본 발명의 생지황(Rehmannia glutinosa Libschitz var . purpurea Makino)은 현삼과에 속하는 다년생 초본식물의 신선한 뿌리를 약재로 쓰는데, 이것을 지황이라고 한다. 신선한 근경을 생지황 또는 선지황, 말린 것을 건지황, 생지황을 황주(黃酒)에 넣고 찌고 햇볕에 말린 것을 9번 거듭한 것을 숙지황이라고도 한다. 생지황은 맛과 성질은 달고 쓰며, 차갑다. 십이경락 중 심경(心經), 간경(肝經), 신경(腎經)에 들어간다. 효능은 열을 내리고, 피를 맑게 하고, 진액을 만들어준다. 임상응용 및 용법은 열이 몸의 속 부위인 영혈로 들어간 것, 진음이 손상되어 가슴이 답답하고 갈증을 느끼는 것, 혀가 심하게 붉으면서 건조한 것, 피가 섞인 기침, 피를 토하는 증상, 코피가 나는 증상, 소변이나 대변에 피가 섞여 나오는 증상, 또한 몸이 쇠약하여 나타나는 발열, 목이 붓고 아픈 증상, 당뇨병 등에 사용한다.
하수오(Cynanchum silfordii Hemsley)는 여뀌과에 속하는 다년생 덩굴초본으로 산삼과 견줄만한 약성을 인정받으며, 성질은 따뜻하고 맛은 쓰고 떫으며 독이 없다. 하수오는 고구마처럼 생겼는데 그보다 약간 작고, 인삼이 귀할 때는 인삼 대신으로, 숙지황이 없으면 대용품으로, 또는 숙지황이 있어도 숙지황보다 금기 기운이 덜하고 소화가 잘되기 때문 하수오를 쓰기도 하였다. 하수오는 당귀나 숙지황의 기능과 같이 피를 생성하여 원활하게 해주는 작용, 염증, 종기, 부스럼을 없애주는 작용을 하고 이외에도 가래와 담을 삭히고 부인의 산후병, 냉, 대하 등을 치료하고, 골수를 채우며, 근골을 튼튼하게 하는 작용이 있다. 생으로 쓸 경우에는 기운을 소통시켜 대변 소통을 원활히 해주는 작용 외에 해독작용을 하기도 하며 적당히 찌거나 삶은 다음에 말려서 쓰면 간과 신을 보해서 혈과 정이 생겨나게 한다. 머리를 검게 할 목적으로는 사용할 때는 검은 콩, 검은 깨와 함께 사용하는 것이 좋다고 되어 있다.
황정(Polygonatum sibiricum Redt .)은 나리과의 숙근초로서 전국각지의 숲 속에 자생한다. 줄기에 6줄의 능각이 있고 근경은 굵으며 옆으로 뻗는다. 근경의 마디에서 많은 수염뿌리가 난다. 대잎 둥글레(죽대)뿌리줄기를 황정이라고 하고, 과혈당을 일으킨 동물에게서 혈당량을 뚜렷이 줄이는 효과를 보인다. 또한 강심작용이 있어서 심장을 강하게 수축시키고 율동을 느리게 한다. 혈압을 높이며 호흡을 흥분시키기도 한다.
본 발명은 한방제로 사용되고 있는 생약, 야채, 과일, 꽃 등의 식물 추출물 가운데 안정성이 뛰어나고 탈모 방지 및 발모 효능을 가진 원료를 찾고자 하는 노력을 계속 해오는 가운데 생지황, 하수오 및 황정의 혼합 추출물이 모모(毛母)의 상피 세포 성장 효과 및 마우스를 통한 모발 생장 효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 탈모 방지 및 발모 효과를 갖는 천연의 약재인 생지황, 하수오 및 황정 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
상기 목적에 따라, 본 발명은 탈모 방지 및 발모 효과를 갖는 생지황, 하수오 및 황정 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 정제수를 포함한 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 프로필렌글리콜, 초산에칠, 부틸렌글리콜, 에테르 및 클로로포름, 바람직하게는 에탄올 가용 추출물, 더욱 바람직하게는 70%에탄올 가용 추출물임을 특징으로 한다.
본 발명의 생지황, 하수오 및 황정 혼합추출물은 그 구성 배합비가 생지황 : 하수오 : 황정(1~10 : 1~5 : 1~5), 바람직하게는 생지황 : 하수오 : 황정(1~6 : 1~3 : 1~3)의 중량비(w/w)임을 특징으로 한다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 생지황, 하수오 및 황정 혼합추출물은 우선, 생지황은 세척 후 음건하여 세절하고, 하수오 및 황정은 불순물을 제거하여 세절한 후 생지황, 하수오 및 황정, 바람직하게는 그 구성 배합비가 생지황 : 하수오 : 황정(1~10 : 1~5 : 1~5)의 중량비(w/w), 더욱 바람직하게는 그 구성 배합비가 생지황 : 하수오 : 황정(1~6 : 1~3 : 1~3)의 중량비(w/w)로 이것의 1 내지 10, 바람직하게는 1 내지 5배 부피의 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 C1 내지 C4의 저급 알콜의 극성 용매 또는 이들의 약 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합용매, 바람직하게는 에탄올을 가하여 0.5 내지 10시간, 바람직하게는 2 내지 5시간 동안 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법으로, 바람직하게는 환류 추출한 후, 추출액을 여지로 감압 여과하는 제 1단계 ; 상기 제 1단계에서 얻은 조추출물에 수포화 헥산(Hexane)을 첨가하여 3회 층으로 분리한 후 헥산(Hexane)층만을 모아 40 내지 80℃, 바람직하게는 60 내지 70℃ 온도에서 감압 농축한 후, 증류수를 가해 현탁하여 진공 동결건조, 열풍건조 또는 분사방식에 의한 건조법으로, 바람직하게는 -44℃, 70 x 10-3 mbar 조건 하에서 1 ~ 5일, 바람직하게는 2 내지 3일 동안 동결 건조하여 분말 상태의 생지황, 하수오 및 황정의 추출물을 수득하는 제 2단계의 공정을 통하여 본 발명의 정제된 혼합 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명의 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 혼합추출물을 0.01 내지 10 % 중량 백분율, 바람직하게는 0.1 내지 8 % 중량 백분율, 가장 바람직하게는 0.5 내지 5 % 중량 백분율로 포함한다.
상기 추출방법에 의해 얻어진 생지황, 하수오 및 황정의 혼합추출물은 모모(毛母)의 상피 세포 성장 효과 및 마우스를 통한 모발 생장 효과를 나타내었으며, 또한 생지황, 하수오 및 황정의 혼합추출물을 함유한 화장료 조성물은 첩포 검사를 통해 안전성에도 문제가 없음을 확인할 수 있었다.
본 발명의 생지황, 하수오 및 황정의 혼합추출물을 포함하는 조성물은 탈모 방지 및 발모 효과를 위한 화장품 및 샴푸 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스, 팩, 헤어토닉, 헤어로션, 샴푸, 린스 또는 비누 등이 있다.
본 발명의 화장료는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함한다.
수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.
유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.
고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.
고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.
스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.
해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.
본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.
이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.
에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소 스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜 레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.
탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.
실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.
불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.
동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.
보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.
수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.
지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.
수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.
지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.
에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.
계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.
비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌 글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.
음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인산염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.
양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.
양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.
유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.
유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.
자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노 벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.
살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.
산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.
pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.
알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 - 5 % 중량 백분율, 보다 바람직하게는 0.01 - 3 % 중량 백분율로 배합된다.
본 발명의 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.
본 발명의 탈모 방지 및 발모 촉진용 기능성 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토 스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 생지황, 하수오 및 황정 혼합 추출물의 제조
1-1. 혼합추출물(1)
생지황은 수돗물로 잘 세척하고 하루 동안 건조시킨 후 세절하고, 하수오 및 황정은 불순물을 제거하여 세절한 후 생지황 50g, 하수오 25g, 황정 25g(중량비(w/w) = 2 : 1 : 1)를 준비하여 70%(v/v) 에탄올 수용액 300㎖를 가한 후 3 시간 동안 환류 장치를 이용하여 추출하고 와트만지(whatman No.2)에 여과한 후 감압 농축하여 에탄올 추출물을 수득하였다. 상기 에탄올 추출물에 400㎖의 수포화 헥산(Hexane)을 첨가하여 3회 층으로 분리하여 헥산(Hexane)층만을 모아 60 내지 70℃ 온도에서 감압 농축한 후, 증류수 50㎖을 가해 현탁하여 -44℃, 70 x 10-3 mbar 조건 하에서 2 ~ 3일 동안 동결 건조하여 최종적으로 분말 상태의 생지황, 하수오 및 황정의 혼합 추출물(1) 0.42g를 수득하였다.
1-2. 혼합추출물(2)
하수오는 수돗물로 잘 세척하고 하루 동안 건조하여 세절하고, 하수오 및 황정은 불순물을 제거한 후 세절하여 생지황 50g, 하수오 25g, 황정 25g(중량비(w/w) = 2 : 1 : 1)에 물 300㎖를 가한 후 3 시간 동안 환류장치를 이용하여 추출하고 와트만지(whatman No.2)에 여과한 후 감압 농축하여, 증류수 50 ㎖을 가하고 현탁시킨 후 -44℃, 70 x 10-3 mbar 조건 하에서 2 ~ 3일 동안 동결 건조하여 생지황, 하수오 및 황정의 혼합 추출물(2) 20.4g를 수득하였다.
1-3. 혼합추출물(3)
하수오는 수돗물로 잘 세척하고 하루 동안 건조하여 세절하고, 하수오 및 황정은 불순물을 제거한 후 세절하여 생지황 50g, 하수오 25g, 황정 25g(중량비(w/w) = 2 : 1 : 1)에 70%(v/v) 에탄올 수용액 300 ㎖를 가한 후 3 시간 동안환류 장치를 이용하여 추출하고 와트만지(whatman No.2)에 여과한 후 감압 농축하여 증류수 50㎖을 가하고 현탁시킨 후 -44℃, 70 x 10-3 mbar 조건 하에서 2 ~ 3일 동안 동결 건조하여 생지황, 하수오 및 황정의 혼합 추출물(3) 12.0 g를 수득하였다.
1-4. 혼합추출물(4)
생지황은 수돗물로 잘 세척하고 하루 동안 건조하여 세절하고, 하수오 및 황정은 불순물을 제거하여 생지황 50g, 하수오 50g, 황정 50g (중량비(w/w) = 1 : 1 : 1)에 70%(v/v) 에탄올 수용액 450㎖를 가한 후 3 시간 동안 환류 장치를 이용하여 추출하고 와트만지(whatman No.2)에 여과한 후 감압 농축하여 에탄올 추출물을 수득하였다. 상기 에탄올 추출물에 400㎖의 수포화 헥산(Hexane)을 첨가하여 3회 층으로 분리하여 헥산(Hexane)층만을 모아 60 내지 70℃ 온도에서 감압 농축한 후, 증류수 50㎖을 가해 현탁하여 -44℃, 70 x 10-3 mbar 조건 하에서 2 ~ 3일 동안 동결 건조하여 최종적으로 분말 상태의 생지황, 하수오 및 황정의 혼합 추출물(4) 31.34g를 수득하였다.
1-5. 혼합추출물(5)
수돗물로 잘 세척하여 하루 동안 건조한 생지황 25g, 불순물을 제거한 하수오 50g 및 황정 25g(중량비(w/w) = 1 : 2 : 1)를 실시예 1-4와 같은 방법으로 생지황, 하수오 및 황정의 혼합 추출물(5) 15.59g를 수득하였다.
1-6. 혼합추출물(6)
생지황은 수돗물로 잘 세척하고, 하수오 및 황정은 불순물을 제거하여 생지황 40g, 하수오 40g 및 황정 20g(중량비(w/w) = 1 : 1 : 1)를 준비하여 실시예 1-4와 같은 방법으로 생지황, 하수오 및 황정의 혼합 추출물(6) 21.06g를 수득하였다.
1-7. 혼합추출물(7)
생지황은 수돗물로 잘 세척하고 하루 동안 건조시킨 후 세절하고, 하수오 및 황정은 불순물을 제거하여 세절한 후 생지황 50g, 하수오 25g 및 황정 25g(중량비(w/w) = 2 : 1 : 1)에 70%(v/v) 에탄올 수용액 300㎖를 가한 후 3 시간 동안 환류 장치를 이용하여 추출하고 와트만지(whatman No.2)에 여과한 후 감압 농축하여 에탄올 추출물을 수득하였다. 상기 에탄올 추출물에 400㎖의 수포화 클로로포름(Chloroform)을 첨가하여 3회 층으로 분리하여 클로로포름(Chloroform) 층만을 모아 60 내지 70℃ 온도에서 감압 농축한 후, 증류수 50㎖을 가해 현탁하여 -44℃, 70 x 10-3 mbar 조건 하에서 2 ~ 3일 동안 동결 건조하여 최종적으로 분말 상태의 생지황, 하수오 및 황정 혼합추출물(7) 0.36g를 수득하였다.
1-8. 혼합추출물(8)
실시예 1-7과 같은 방법으로, 클로로포름(Chloroform) 대신 부탄올(butanol)을 이용하여 0.41 g의 생지황, 하수오 및 황정 혼합추출물(8)을 수득하였다.
비교실시예 1. 생지황, 하수오 및 황정 단일 추출물의 제조
1-1. 단일추출물(1)
수돗물로 생지황 세척하여 하루 동안 건조시킨 생지황 200g를 세절하여 70%(v/v) 에탄올 수용액 300㎖를 가한 후 3 시간 동안 환류장치를 이용하여 추출하고 와트만지(whatman No.2)에 여과한 후 감압 농축하여 생지황 에탄올 추출물을 수득하였다. 상기 에탄올 추출물에 400㎖의 수포화 헥산(Hexane)을 첨가하여 3회 층으로 분리하여 헥산(Hexane)층만을 모아 60 내지 70℃ 온도에서 감압 농축한 후, 증류수 50㎖을 가해 현탁하여 -44℃, 70 x 10-3 mbar 조건하에서 2 ~ 3일 동안 동결 건조하여 0.51 g의 생지황 단일추출물(1)을 수득하였다.
1-2. 단일추출물(2)
불순물을 제거한 하수오 100g를 상기 비교실시예 1-1과 같은 방법으로 하수오 단일추출물(2) 0.43 g를 수득하였다.
1-3. 단일추출물(3)
불순물을 제거한 황정 100g를 상기 비교실시예 1-1와 같은 방법으로 황정 단일추출물(3) 0.27g를 수득하였다.
실험예 1. 추출 용매에 따른 모모 상피 세포( Hair epithelial cell ) 성장 효과에 미치는 영향 실험
상기 실시예 1에서 수득한 혼합추출물(1), 혼합추출물(2) 및 혼합추출물(3)이 마우스의 모모 상피세포의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위해 4일 된 C3H/HeSlc 마우스(중앙실험동물, SLC사, Japan)의 등 쪽 피부를 분리하여 세포를 분리하였다. 50U/㎖ 페니실린, 50㎍/㎖ 스트렙토마이신, 10% FCS(fetal calf serum, Gibco, 16000)이 포함된 DMEM 배지에 3 x 105 cell/㎖가 되도록 하여 타입 1 콜라겐(type 1 collagen)으로 코팅된 24 웰(well)에 접종하여 1일 동안 37℃, 5% CO2 습윤 조건 하에서 배양하였다. 24 시간 후 5㎍/㎖ 소의 인슐린(bovine insulin, Sigma, I6634), 5pg/㎖ 마우스 EGF(Sigma E4127), 40㎍/㎖ 소의 뇌하수체 추출물(bovine pituitary extract, Gibco 13028), 10㎍/㎖ 휴먼 트랜스페린(human transferrin, Sigma, T3309), 0.4㎍/㎖ 하이드로코르티손(hydrocortisone, Sigma, H0888), 0.63pg/㎖ 프로게스테론(progesterone), 14㎍/㎖ O-포스포릴에타놀아민(O-phosphorylethanolamine, Sigma, P0503), 6.1㎍/㎖ 에탄올아민(ethanolamine, Sigma, E0135), 50U/㎖ 페니실린(penicillin), 50㎍/㎖ 스트렙토마이신(streptomycin, Gibco, 15140)이 포함된 MCDB153 배지(Sigma, M7403)로 바꾸고, 37℃, 5% CO2 습윤 조건 하에서 2일 간격으로 새로운 배지로 갈아 주면서 5일간 더 배양하였다.
배양한 마우스 모모 상피 세포에 상기 실시예 1에서 수득한 혼합추출물(1), 혼합추출물(2) 및 혼합추출물(3)을 처리하여 24시간 동안 배양한 후 5 ㎎/㎖의 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)시약 200㎕를 배지에 넣고 37℃, 5% CO2 습윤 조건 하에서 4 시간 동안 배양하였다. 배양 시, 살아있는 세포에는 보라색의 크리스탈이 형성된다. 4 시간 배양 후 배지를 제거하고 DMSO 400㎕를 넣어 30분 동안 쉐이킹 인큐베이터(shaking incubator)에서 크리스탈을 녹인 후 540nm에서 흡광도를 측정하여 세포 성장의 정도를 확인하여 마우스의 모모 상피 세포 성장 효과에 미치는 영향을 도 1에 나타내었다. 실험 결과 도 1에 나타난 것처럼, 혼합추출물(2)을 제외하고 세포 성장 효과를 나타내었으며, 특히 혼합추출물(1)이 뛰어난 모모 상피 세포 성장 효과를 나타내었다.
실험예 2. 혼합 중량비에 따른 추출물이 마우스 모모 상피 세포( hair epithelial cell ) 성장 효과에 미치는 영향 실험
상기 실시예 1에서 수득한 혼합추출물(4) 내지 혼합추출물(6)이 마우스의 모모 상피 세포의 성장 효과에 미치는 영향을 알아보기 위해 실험예 1과 동일한 방법으로 실험하여 도 2에 나타내었다. 실험 결과 도 2에 보여지는바와 같이 모모 상피 세포의 성장 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
실험예 3. 분획을 거친 추출물이 마우스 모모 상피 세포( hair epithelial cell ) 성장 효과에 미치는 영향 실험
상기 실시예 1에서 수득한 혼합추출물(1), 혼합추출물(7) 및 혼합추출물(8)이 마우스의 모모 상피 세포 성장 효과에 미치는 영향을 알아보기 위해 실험예 1과 동일한 방법으로 실험하여 그 결과를 도 3에 나타내었다. 실험 결과 도 3에서 보여지는바와 같이 혼합추출물(1)은 뛰어난 세포 성장 효과를 나타내었으며, 혼합추출물(7)은 50 ㎍/㎖ 이하 범위에서는 낮은 세포 성장 효과를 나타내지만, 그 이상의 범위에서는 세포 성장 효과를 보였으나 혼합추출물(8)에서는 효과를 확인할 수 없었다.
실험예 4. 단일 추출물이 마우스 모모 상피 세포( hair epithelial cell ) 성장 효과에 미치는 영향 실험
상기 비교실시예 1에서 수득한 단일추출물(1) 내지 단일추출물(3)이 마우스의 모모 상피 세포의 성장 효과에 미치는 영향을 알아보기 위해 실험예 1과 동일한 방법으로 실험하여 그 결과를 도 4에 나타내었다. 실험 결과, 도 4에서 보여지는바와 같이 단일추출물(1) 내지 단일추출물(3)이 마우스의 모모 상피 세포의 성장에 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
실험예 5. C3H / HeSlc 마우스를 통한 모발 생장 효과 실험
상기 실시예 1에서 수득한 혼합추출물(1), 혼합추출물(5), 혼합추출물(7) 및 혼합추출물(8)을 시료로 이용하여 마우스에서의 실제 모발 생장 효과 실험을 실시하였다. 7 주령의 C3H/HeSlc 마우스의 등 부위 털을 제거하고, 등 부위 피부가 깨끗한 것을 골라 물질군마다 4마리씩을 선정하여 매일 상기 시료 물질을 개체당 200㎕씩, 2주 동안 도포하며 진행하였으며, 양성 대조군으로 1% 미녹시딜(Minoxidil) 및 H사의 마이녹실을 이용하였다.
시간 경과에 따른 모발 생장 정도 및 분포도를 각각 비교하였으며, 모발 생장 정도를 비교하기 위하여 대조군에는 상기 시료를 녹인 용매(64% 에탄올, 20% propylene glycol, 16% 증류수)를 각 개체에 동일하게 도포하여 모발의 생장 상태를 관찰하였다. 2주 후의 모발의 분포 정도를 다음 표 1, 도 5 및 도 6a 내지 도 6g에 나타내었다.
경과시간 시험물질
대조군 혼합추출물(1) 혼합추출물(5) 혼합추출물(7) 혼합추출물(8) 미녹시딜(minoxidil) 마이녹실(H사)
2주 51.97% 94.79% 79.35% 87.31% 83.44% 90.91% 89.11%
표 1 및 도 5에서 보여지는바와 같이, 혼합추출물(1), (5), (7) 및 (8)은 양성 대조군인 미녹시딜 및 마이녹실과 유사하거나 뛰어난 발모 효과를 나타내었다. 또한 혼합추출물(1)은 양성 대조군인 미녹시딜과 마이녹실 보다 더욱 뛰어난 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. 특히 H사의 마이녹실은 이용된C3H/HeSlc 마우스에서 피부 자극의 흔적이 발견되어, 본 발명의 혼합추출물이 피부 자극이 없는 안전한 물질임이 확인되었다.
실험예 6. 혼합추출물(1)의 피부 자극성 시험
상기 실시예 1에서 수득한 혼합추출물(1)의 피부 자극 정도를 알아보기 위하여 식품의약품안전청 고시1999-61호 "의약품의 독성 시험 기준"에 따라 본 연구소 내부적으로 뉴질랜드 화이트(New Zealand White) 수컷 토끼를 대상으로 피부자극시험을 실시하였다. 관찰은 첩포 24시간 후 첩포 부위에 대한 홍반, 가피형성, 부종형성 등의 피부자극 반응을 관찰하였다.
혼합추출물(1)을 토끼의 피부에 적용한 결과, 혼합추출물(1)에 따른 일반증상의 변화는 관찰되지 않았으며, 사망동물도 관찰되지 않았다. 또한 홍반, 가피 형성 등을 관찰한 결과 6마리 2마리에서 가벼운 홍조가 발견되었으나, 자극성을 평가한 결과 자극 지수가 약한 자극성 물질로 분류되어 자극성이 거의 없는 물질로 평가되어 안전하게 사용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
실험예 7. 혼합추출물(1)의 임상실험을 통한 모발 생장 효과 시험
32세의 여성 피험자는 탈모가 급격히 시작되어 불과 몇 개월 만에 앞머리와 정수리 부분의 원형 탈모로 머리숱이 거의 없어 대머리의 조짐이 보이기 시작했다. 증상으로는 머리 가려움, 비듬, 스트레스에 의한 피로, 신장 기능과 내분비 계통 저하로 탈모가 심각하게 진행되어 왔다.
이에 본 발명에 따른 혼합추출물(1)을 1일 3회에 걸쳐 두피에 도포하게 하였다. 도포 30일 후부터 머리 가려움과 비듬이 없어지면서 건강이 호전 되는 동시에 현저하게 탈모 현상이 줄어들어 점차 정상화되면서 도포 3개월 후부터 정수리 부분의 탈모된 부위에서 솜털 같은 머리카락이 나기 시작하더니 약 2cm 자라나오면서 뒤이어 연속적으로 머리카락이 자라기 시작하여 도포 6개월 만에 거의 정상적인 모발 상태로 회복되었다. 본 피험자의 도포 기간에 따른 발모 사진을 도 7b에 나타내었다.
도 7b에서 확인할 수 있듯이, 본 발명에 따른 혼합추출물(1)의 우수한 모발 생장효과와 장기간 도포에 따른 인체 무해성을 확인할 수 있었다.
본 발명의 생지황, 하수오 및 황정 혼합추출물을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 헤어 토닉의 제조
에탄올 55.0%
피마자유 5.0%
글리세린 3.0%
피록톤아민 0.1%
실시예 1의 혼합추출물(7) 1.0%
향료, 색소 적량
정제수 잔량
계 100.0%
제제예 2. 헤어 로션의 제조
세토스테아릴알코올 2.0%
염화스테아릴트리에틸암모늄 2.0%
히드록시에틸셀룰로오즈 0.5%
피록톤올아민 0.1%
실시예 1의 혼합추출물(1) 1.0%
향료, 색소 0.5%
정제수 잔량
계 100.0%
제제예 3. 헤어 비누의 제조
실시예 1의 혼합추출물(8) 0.1%
이산화티탄 0.2%
폴리에틸렌글리콜 0.8%
글리세린 0.5%
에틸렌디아민테트라아세트산 0.05%
나트륨 1.0%
색소 적량
비누향 적량
화장비누베이스 (수분 13%, 중량부) 잔량
계 100.0%
상기와 같이, 본 발명은 생지황, 하수오 및 황정 혼합 추출물은 모모(毛母)의 상피 세포 성장 효과 및 마우스를 통한 모발 생장 효과를 나타내는바, 탈모 방지, 개선 및 발모 효과를 나타내는 화장료 조성으로 유용하게 이용될 수 있다.

Claims (5)

  1. 구성 배합 중량비(w/w)가 생지황(1~6) : 하수오(1~3) : 황정(1~3)인 생지황, 하수오 및 황정 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 제 1항 있어서, 상기 추출물은 물, 70%(v/v)에탄올 수용액, 헥산 또는 클로로포름으로부터 선택된 용매로 추출된 화장료 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 ~ 5 % 중량 백분율로 함유되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션 및 클렌징크림으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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