KR20230174920A - 옥수수 잎 추출물을 포함하는 갱년기 증상 개선용 조성물 - Google Patents

옥수수 잎 추출물을 포함하는 갱년기 증상 개선용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 식품조성물; 사료조성물; 약학 조성물; 및 상기 식품 조성물을 이용한 갱년기 증상의 예방 또는 개선 방법에 관한 것이다.

Description

옥수수 잎 추출물을 포함하는 갱년기 증상 개선용 조성물 {A composition comprising an extract of corn leaf for preventing or treating menopausal symptoms}
본 발명은 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 식품조성물; 사료조성물; 약학 조성물; 및 상기 식품 조성물을 이용한 갱년기 증상의 예방 또는 개선 방법에 관한 것이다.
폐경이 나타난 이후의 약 1년까지를 폐경 이행기, 흔히 갱년기라고 하며, 그 기간은 일반적으로 평균 4~7년 정도이다. 폐경은 포도당 대사, 지질 대사, 및 에너지 대사 장애 및 호르몬 장애를 나타내며, 이로 인해 폐경기 여성에서 안면홍조, 발한, 비뇨생식기계의 위축에 따른 증상(질 건조감, 반복적인 질 감염과 요로계 감염으로 인한 질염, 방광염, 배뇨통, 급뇨), 정신적 불안정(집중장애 및 단기 기억장애, 불안과 신경과민, 기억력 감소) 등과 같은 갱년기 증상이 발생할 수 있다.
이러한 여성 갱년기 증상 예방, 개선 및 치료하기 위한 후보 물질로서 천연 약초에 대한 연구가 활발히 진행되어, 여성 갱년기장애 개선에 효과를 갖는 홍삼 복합물 조성물 (한국공개특허 제10-2006-0061323호) 등이 개발된 바 있다. 그러나, 그들의 효능은 여전히 확신할 수 없는 실정이다(Cano et al., 2008; Somjen et al., 2008).
이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 옥수수 잎 추출물이 여성 호르몬과 유사하게 갱년기 증상 개선 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
또한, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 통상의 실험만을 사용하여 본 발명에 기재된 본 발명의 특정 양태에 대한 다수의 등가물을 인지하거나 확인할 수 있다. 또한, 이러한 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.
본 발명의 하나의 양태는 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어, "옥수수"는 벼과에 속하는 1년생 초본식물이다. 줄기는 곧게 서며 높이 1.5~3m 자라고 일반적으로 가지를 치지 않는다. 잎은 너비 5~10㎝, 길이 1m 이상이며 줄기에 어긋나게 달린다. 본 발명에서 옥수수 잎은 옥수수의 영양 기관의 하나로서, 줄기의 끝이나 둘레에 붙어 호흡작용과 탄소 동화 작용을 하는 기관을 의미한다.
상기 옥수수는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나 자연에서 채취 또는 재배된 것일 수 있으며, 본 발명에서 사용되는 옥수수 품종은 특별히 제한은 없으나, 광평옥, 얼룩대학찰, 대학찰 또는 미흑찰을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 옥수수 잎은 옥수수의 이삭, 줄기, 수술, 수염, 뿌리, 꽃을 제외한 부분일 수 있으나, 이들과 옥수수 잎 부분을 혼합한 혼합물일 수 있고, 원물, 건조물, 또는 가공물일 수 있으며, 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 품종을 분양 받거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것 등을 추출물 제조에 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 있어서, 상기 옥수수 잎 추출물은 골다공증, 여성호르몬 분비 감소 등을 치료하는 효과를 나타낼 수 있으므로, 골다공증, 여성호르몬 분비 장애, 비만, 홍조 등의 다양한 증상을 나타내는 갱년기 장애를 예방, 치료 또는 개선하는데 사용될 수 있다.
본 발명의 용어 "추출물"이란, 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온 상태에서 일정 시간 동안 추출하여 수득한 액상 성분, 상기 액상 성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 상기 추출은 1회 이상 수행될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 뿐만 아니라, 상기 결과물의 여과액, 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물, 건조물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다. 이에 따라, 본 발명에서 제공하는 옥수수 잎 추출물은 옥수수 잎을 추출하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액을 효소 분해하여 얻어지는 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물, 및/또는 이들의 건조물을 포함하는 것으로 해석될 수 있다.
본 발명의 옥수수 잎을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
상기 추출물의 제조에 사용되는 용매로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있고, 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합하여 사용될 수 있으며, 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 구체적으로 탄소수 1 내지 4의 알코올, 에탄올, 메탄올 또는 부탄올을 사용할 수 있다. 구체적으로, 증류수를 사용하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 유기 용매, 또는 이들의 혼합 용매 역시 사용 가능하다. 본 발명의 추출물은 옥수수 잎 물 추출물로서 옥수수 잎을 물로 추출하여 제조된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어 "분획물"이란 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 다양한 용매를 처리하여 수행하는 분획법, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 수행하는 한외여과 분획법, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)를 수행하는 크로마토그래피 분획법, 및 이들의 조합 등이 있다. 본 발명의 옥수수 잎을 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데 사용되는 분획 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 등의 극성 용매; 헥산(Hexan), 에틸 아세테이트(Ethyl acetate), 디메틸클로라이드(Dimethyl chloride), 클로로포름(Chloroform), 디클로로메탄(Dichloromethane) 등의 비극성 용매; 또는 이들의 혼합용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니며, 구체적으로, 헥산, 에틸 아세테이트, 부탄올(butanol) 또는 물이 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 추출물 또는 분획물은 추출 및/또는 분획 후 액체, 고형, 또는 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어 "갱년기 증상"이란, 난소의 노화 등으로 인하여 여성호르몬의 분비가 감소됨에 따라 폐경을 전후로 여성에게서 나타나는 증상 및 증상을 총칭한다. 상기 갱년기 증상은 '갱년기 질환', '갱년기 증후군' 또는 '폐경기 증상'과 혼용될 수 있다.
상기 갱년기에는 여성호르몬이 변화하는데 특히 여성호르몬인 에스트로겐의 수준 또는 활성이 감소하는 것이 특징일 수 있고, 이러한 호르몬의 변화와 함께 다양한 갱년기 증상을 경험할 수 있다.
상기 갱년기 증상은 폐경을 전후로 여성에게서 나타나는 증상 및 증상이라면 제한이 없으며, 여성호르몬 장애, 홍조, 발한, 신경질, 우울증, 어지럼증, 피로감, 관절통, 근육통, 두통, 가슨 두근거림, 의주감, 수면 중 발한, 수면 장애, 피부 건조, 질 건조증, 질 위축, 하부 요도 위축, 성교 통, 질염, 방광염, 배뇨통, 급뇨, 집중 장애, 기억력 장애, 불안, 신경 과민, 기억력 감퇴, 피부건조, 관절통, 심장병, 고혈압, 심혈관계 기능 감소, 몸무게 증가, 비만으로 구성되는 군에서 선택되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
구체적으로, 상기 갱년기 증상은 여성호르몬 장애에 의한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
갱년기에는 난소에서 난포의 고갈로 인해 에스트로겐(에스트라다이올, 에스트론)의 분비가 감소하는데, 에스트론의 감소율은 에스트라디올보다 작으며 에스트로겐 신호전달은 에스트로겐 수용체를 매개하여 일어난다. 이에, 갱년기 개선 및 에스트로겐 활성을 측정하기 위한 마커로 에스트로겐 수용체-α(Estrogen receptor-α; ERα) 및 에스트로겐 수용체-β(Estrogen receptor-β; ERβ), 에스트로겐 반응 유전자인 pS2 등이 알려져 있다. 또한, 에스트로겐의 신호전달에 필수적인 지표인 AKT, ERK, 및 이의 인산화된 형태도 갱년기 개선 및 에스트로겐 활성 마커로 활용될 수 있다
본 발명의 일 실시예에서는 세포에 옥수수 잎 물 추추출을 처리하였을 때, 에스트로겐 유사 활성 및 항에스트로겐 활성이 옥수수 잎 주정 추출물 대비 우수함을 확인하였다. 또한, 갱년기 관련 유전자인 ER-α 발현이 현저히 감소함을 확인하였다. 이 결과는 양성 대조군인 에스트라다이올(estradiol; E2)를 처리하였을 때와 동일한 경향이거나 더욱 우수하였으며, 파골세포에 옥수수 잎 물 추출물을 처리한 경우, 파골세포 분화 억제 활성이 우수한 것임을 확인하였다. 상기 결과는 옥수수 잎 추출물이 여성호르몬 장애를 개선하여 갱년기 증상 개선 효과가 있음을 시사하는 것이다.
본 발명의 용어, "예방"이란 본 발명의 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 개체에 투여하여 갱년기 증상의 발현을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 발명의 용어, "개선"이란, 본 발명의 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 개체에 투여하여 갱년기의 증상이 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 발명의 용어 "식품"이란, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합제, 건강 기능 식품, 및 건강 식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
본 발명의 식품 조성물은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 여성 갱년기 증상에 대한 개선 효과를 기대할 수 있으므로, 건강 증진 목적으로 매우 유용하게 사용될 수 있다.
상기 건강 기능(성) 식품(functional food)이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 여기서 '기능(성)'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나므로, 본 발명의 식품은 여성 갱년기 질환의 개선 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
상기 건강 식품(health food)은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 증진 효과를 가지는 식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)은 건강보조 목적의 식품을 의미한다. 경우에 따라, 건강 기능 식품, 건강식품, 건강보조식품의 용어는 혼용된다.
구체적으로, 상기 건강 기능 식품은 본 발명의 화합물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용이 없는 장점이 있다.
상기 식품 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있는데, 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신(niacin), 비오틴(biotin), 폴레이트(folate), 판토텐산(panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu), 크륨(Cr) 등의 미네랄; 및 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 방부제(소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제(표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 산화방지제(부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨류엔(BHT) 등), 착색제(타르색소 등), 발색제(아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제(아황산나트륨), 조미료(MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료(둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료(바닐린, 락톤류 등), 팽창제(명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품 첨가물(food additives)을 포함할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물의 일 예로 건강음료 조성물로 사용될 수 있으며, 이 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강음료 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 내지 0.04 g, 구체적으로 약 0.02 내지 0.03 g이 될 수 있다.
상기 외에 건강음료 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강음료 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공한다.
상기 "옥수수 잎", "추출물", "분획물", "갱년기 증상", "예방", "개선"은 전술한 바와 같다.
상기 사료 조성물에는 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물 외에도 사료용으로 허용되는 공지의 담체, 안정화제, 또는 첨가제가 포함될 수 있다. 예를 들어, 품질 저하를 방지하기 위하여 첨가하는 결착제, 유화제, 보존제 등이 있고, 효용 증대를 위하여 사료에 첨가하는 아미노산제, 비타민제, 효소제, 향미제, 비단백질태질소화합물, 규산염제, 완충제, 추출제, 올리고당 등이 있다. 그 외에도 사료 혼합제 등을 추가로 포함할 수 있으며 이에 한정된 것은 아니다. 상기 사료 조성물은 필요에 따라 비타민, 아미노산류, 미네랄 등의 각종 양분, 항산화제 및 기타의 첨가제 등을 포함할 수도 있으며, 그 형상으로서는 분체, 과립, 펠릿, 현탁액 등의 적당한 상태일 수 있다. 본 발명의 사료 조성물은 단위 동물에 대하여 단독으로 또는 사료에 혼합하여 공급할 수 있다. 본 발명의 사료는 특별히 한정되는 것은 아니고, 분말 사료, 고형 사료, 건사료, 습식사료, 모이스트 펠릿 사료, 드라이 펠릿 사료, EP(Extruder Pellet) 사료, 날먹이 등 어떠한 사료라도 무방하다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 "옥수수 잎", "추출물", "분획물", "갱년기 증상", "예방"은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "치료"란, 본 발명의 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 개체에 투여하여 갱년기 증상을 다스리거나 낫게 하는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 "약학적 조성물"은 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 약학적으로 허용되는 담체, 부형제, 또는 희석제는 비자연적으로 발생된 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 액제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명에서, 상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 약학 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는 갱년기 증상의 예방 또는 치료방법을 제공한다.
상기 "옥수수 잎", "추출물", "분획물", "약학 조성물", "갱년기 증상" 은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "개체"란, 갱년기 증상이 발현되었거나 발현할 가능성이 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미할 수 있다. 상기 동물은 인간뿐만 아니라 이와 유사한 증상의 치료를 필요로 하는 소, 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개, 고양이 등의 포유동물일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 본 발명의 조성물을 필요로 하는 개체는 인간이거나, 또는 인간을 제외한 개체일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 개체에 본 발 명의 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다. 구체적으로, 경구 투여의 방법일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 상기 예방 또는 치료 방법은 구체적으로, 갱년기 증상이 발병하였거나 발병할 위험이 있는 개체에 상기 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 유효성분은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 수 있다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 본 발명의 조성물의 투여 빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물은 천연물로서 에스트라다이올과 마찬가지로 갱년기 증상을 개선할 수 있다. 이에 따라, 관련 식품, 약품, 사료 업계에서 산업적 활용을 기대할 수 있다.
도 1은 옥수수 잎 추출물이 세포 독성이 없음을 나타낸 그래프이다.
도 2는 옥수수 품종별 에스트로겐 유사 활성을 측정한 그래프이다.
도 3는 옥수수 잎 추출물의 용매별 항에스트로겐 활성을 측정한 그래프이다.
도 4는 옥수수 잎 추출물의 에스트로겐 활성 평가를 위한 ER-α 유전자 발현을 측정한 그래프이다.
도 5는 옥수수 잎 추출물의 파골세포 분화 억제 활성을 측정한 그래프이다.
이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 옥수수 잎 추출물의 제조
옥수수잎을 채취하여 건조 후 분쇄하였다. 상기 시료 무게 대비 10배에 해당하는 물 또는 주정으로 상온에서 24시간 추출하였다. 추출한 추출물을 여과지를 이용하여 여과하고, 여과한 추출물은 회전진공증발장치를 이용하여 농축한 후, 동결건조하였다.
실시예 2. 세포 독성 평가
에스트로겐 수용체가 많이 분포되어 있는 조직의 확립된 세포주인 MCF-7 cell(유방암세포)을 RPMI, 10% FBS 및 1% P/S 배지에서 배양하였으며, MCF-7 cell을 96 웰 플레이트에 1Х104cells/well로 100 μL씩 분주하였다. 24시간 후, RPMI 및 1% P/S 배지에 희석된 옥수수 잎 추출물을 농도별로 처리하였으며 (25μg/ml, 50 μg/ml, 100 μg/ml), 다시 24시간 후, EZ-Cytox 10 μL 첨가하여, 흡광도가 1 정도가 되었을 때 450 nm에서 측정하였다.
그 결과, 옥수수 잎 추출물은 25μg/ml, 50 μg/ml 및 100 μg/ml에서 독성이 나타나지 않음을 확인하였다 (도 1).
실시예 3. 옥수수 잎 품종별 에스트로겐 유사 활성 측정 (E-screen assay)
옥수수 잎 추출물의 에스트로겐 활성 평가를 위해 에스트로겐 수용체 의존성인 MCF-7 유방암 세포를 이용하여 E-screen assay를 실시하였다. MCF-7 세포는 에스트로겐에 의해 세포의 증식이 촉진되고 반대로 이 조건에 에스트로겐 길항제(antagonist)를 투여하면 세포의 증식이 억제되며, 이러한 관점에서 본 발명에서는 옥수수 잎 추출물의 에스트로겐 활성과 항에스트로겐(antiestrogen) 활성을 측정하였다.
구체적으로, phenol red-free RPMI, 5% charcol-dextran stripped-FBSa (CD-FBS), 및 1% P/S 배지를 이용하였으며, MCF-7 cell을 96 웰 플레이트에 5Х103cells/well로 100 μL씩 분주하였다. 24시간 후, 상기 배지에 희석한 옥수수 잎 추출물 (100 μg/ml)을, 양성대조군으로서 100 nM β-estradiol을 처리하였다 (E 100). 48시간 후, 석션 한 뒤 페놀 레드를 포함하는 RPMI 및 1% P/S 배지에 EZ-Cytox를 희석하여 100 μL 첨가하였으며, 흡광도 1 정도가 되었을 때 450 nm에서 측정하였다.
그 결과, 에스트로겐 유사 활성은 옥수수 잎 물 추출물이 옥수수 잎 주정 추출물보다 에스트로겐 유사 활성이 우수하였으며, 양성대조군과 유사한 활성을 나타내었고, 특히 50 μg/ml이상에서 에스트로겐 유사 활성이 현저히 우수함을 확인하였다. 옥수수 품종별 에스트로겐 유사 활성은 광평옥, 얼룩대학찰, 대학찰, 미흑찰 순으로 우수함을 확인하였다 (도 2).
실시예 4. 옥수수 잎 추출물의 용매별 항에스트로겐 활성 측정
옥수수 잎 추출물의 항에스트로겐 (antiestrogenic) 활성 평가를 위해 에스트로겐 수용체 의존성인 MCF-7 유방암 세포를 이용하였다. phenol red-free RPMI, 5% charcol-dextran stripped-FBSa (CD-FBS), 및 1% P/S 배지를 이용하였으며, MCF-7 cell을 96 웰 플레이트에 5Х103cells/well로 100 μL씩 분주하였다. 24시간 후, 100 nM β-estradiol (E 100)이 포함된 배지에 희석한 옥수수 잎 추출물 (100 μg/ml)을 처리하였다. 48시간 후, 석션 한 뒤 페놀 레드를 포함하는 RPMI 및 1% P/S 배지에 EZ-Cytox를 희석하여 100 μL 첨가하였으며, 흡광도 1 정도가 되었을 때 450 nm에서 측정하였다.
그 결과, 항에스트로겐 활성은 옥수수 잎 물 추출물이 옥수수 주정 추출물 대비 에스트로겐 활성 억제 효과를 확인하였으며, 양성대조군인 에스트라다이올(estradiol; E2)보다도 우수한 활성을 나타냄을 확인하였다 (도 3).
따라서, 옥수수 잎 물 추출물이 에스트로겐 부족 시에는 에스트로겐 작용체로서 작용하고, 생리적 수준 또는 그 이상 수준의 에스트로겐 존재 시에는 효과적으로 그 작용을 차단함을 확인한 것으로, 옥수수 잎 추출물이 여성호르몬 대체 요법 시 야기되는 것으로 알려진 부작용의 우려 없이 에스트로겐 결핍으로 인한 각종 갱년기 증상을 완화하거나 치료할 수 있는 가능성을 가지고 있음을 보여준다.
실시예 5. 에스트로겐 활성 평가를 위한 real-time qPCR 수행
옥수수 잎 추출물의 에스트로겐 활성 평가를 위해 에스트로겐 수용체 의존성인 MCF-7 유방암 세포를 이용하여 E-screen assay를 실시하였다. MCF-7 cell을 well당 3Х105개, 6 웰 플레이트에 접종하고, 외재적인 에스트로겐성 효과를 배제시키기 위해 24시간 후 5% charcoal-stripped serum을 포함하는 DMEM 배지에 옥수수 잎 추출물을 다양한 농도로 희석하여 각 웰에 처리한 후 48 시간 후에 수거하여 mRNA를 추출하였다. 이후, cDNA를 합성한 후 real-time qPCR을 수행하였다.
갱년기 여성 건강의 주요 증상은 체내 에스트로겐 농도 저하로 인해 발생하며, 에스트로겐 신호전달은 에스트로겐 수용체를 매개하여 일어나므로, 에스트로겐 수용체의 발현을 측정하였다.
에스트로겐 수용체는 핵에 위치하고 있는 estrogen receptor-α (ER-α)의 발현을 조사함으로써 옥수수 잎 추출물의 여성 갱년기 개선에 미치는 영향을 조사하였다.
그 결과, 갱년기 관련 유전자인 ER-α 유전자는 옥수수 잎 주정 추출물 처리한 경우 음성 대조군 대비 발현이 오히려 증가하였으며, 옥수수 잎 물 추출물 처리한 경우 양성 대조군 (E2)과 마찬가지로 ER-α 유전자의 발현이 현저히 감소함을 확인하였다 (도 4).
실시예 6. 파골세포 분화 억제 활성 검정
골다공증 억제활성을 확인하기 위해, 파골 전구세포에 파골세포 분화 유도 싸이토카인인 RANKL (10 ng/ml)을 첨가하여 분화를 유도시켰다. 4일 후에 파골세포의 분화 관련 분자마커인 Tartrate resistant acid phosphatase (TRAP)를 염색하여 광학현미경으로 사진을 찍어 비교 하였다. TRAP의 활성은 Sigma aldrich사의 Tartrate resistant acid phosphatase Reagents를 이용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하는 방법으로 수행하였다.
그 결과, 파골 전구세포에 RANKL을 처리했을 때 파골세포로의 분화가 증가하였으며, 옥수수 잎 추출물 처리시 파골세포의 수가 현저히 감소하였는바, 이를 통해 옥수수 잎 추출물의 파골세포 분화 억제 활성이 우수함을 확인하였다 (도 5).
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (7)

  1. 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 갱년기 증상은 여성호르몬 장애를 포함하는 것인, 식품 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물에 의해 추출된 것인, 식품 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 옥수수는 광평옥, 얼룩대학찰, 대학찰 및 미흑찰로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인, 식품 조성물.
  5. 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 사료 조성물.
  6. 옥수수 잎 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  7. 제6항의 약학 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는 갱년기 증상의 예방 또는 치료방법.
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