KR20230148538A - 포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물 - Google Patents

포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20230148538A
KR20230148538A KR1020220047368A KR20220047368A KR20230148538A KR 20230148538 A KR20230148538 A KR 20230148538A KR 1020220047368 A KR1020220047368 A KR 1020220047368A KR 20220047368 A KR20220047368 A KR 20220047368A KR 20230148538 A KR20230148538 A KR 20230148538A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
strain
present
active ingredient
lactobacillus acidophilus
Prior art date
Application number
KR1020220047368A
Other languages
English (en)
Inventor
석기태
박희진
최미란
김동준
Original Assignee
한림대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 한림대학교 산학협력단 filed Critical 한림대학교 산학협력단
Priority to KR1020220047368A priority Critical patent/KR20230148538A/ko
Publication of KR20230148538A publication Critical patent/KR20230148538A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/332—Promoters of weight control and weight loss
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/113—Acidophilus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 포카이콜라 도레이 균주(Phocaeicola dorei) 및 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 균주를 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 자세하게는 상기 균주 혼합물을 포함하는 염증성 질환 및 비만에 대한 예방, 개선 및 치료용 식품 조성물, 사료 첨가제 조성물 및 약학적 조성물을 제공하는 것일 수 있다.

Description

포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물 {Composition comprising Phocaeicola dorei strain and Lactobacillus acidophilus strain}
본 발명은 포카이콜라 도레이 균주(Phocaeicola dorei) 및 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 균주를 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 자세하게는 상기 균주 혼합물을 포함하는 염증성 질환 및 비만에 대한 예방, 개선 및 치료용 식품 조성물, 사료 첨가제 조성물 및 약학적 조성물을 제공하는 것일 수 있다.
비알코올성 지방간(Non-alcoholic fatty liver disease; NAFLD)은 전 세계적으로 가장 흔한 간질환으로 인식되고 있으며 당뇨병 및 대사증후군의 증가와 함께 그 유병률이 증가하고 있지만 아직까지 명확한 치료법이 기술되어 있지 않다. NAFLD가 진행되면 비알코올성 지방간염(NASH)을 유발하며 결과적으로 간경화 및 간암으로 이어질 수 있다.
또한, 비만은 대부분의 국가에서 주요한 보건 상의 문제가 되고 있다. 이러한 비만은 심혈관 질환, 뇌졸중, 인슐린 내성, 당뇨병, 간 질환, 신경퇴행성 질환, 호흡기 질환 및 기타 중 증 질환 등에 대한 주요한 위험 인자(Risk factor)이고, 유방암 및 결장암을 포함한 일부 암에 대한 위험 인자인 것으로 확인되었다. 또한, 신체 건강에 대한 영향 이외에, 비만은 우울증 및 식이장애 등 정신 건강에 유해한 영향을 미친다.
한편, 간과 장 사이에는 밀접한 관계성이 존재한다. 간문맥계(hepatic portal system)를 통한 장과 간 사이의 해부학적 연결고리는 장-간 축(gut-liver axis)이라고도 불리며 장과 간 사이의 연결에 기반하여 장내 미생물총의 대사 부산물이 된다. 인간의 장내 미생물총인 마이크로바이옴(microbiome)은 장에 있는 1010개 이상의 미생물로 복잡한 유전자로 구성되어 있다. 장내 미생물총과 인간 건강 사이의 관계는 지난 수십년 동안 많은 연구에서 인식되었다. 인체면역세포의 약 60%가 장에 존재하기 때문에 장내세균의 불균형이 일어날 경우 다양한 질병이 발병될 수 있고, 장내세균 불균형을 막기 위해 유산균이 장내 유익균 증가와 유해균 감소에 도움을 주어 장내 미생물총을 조절한다. NAFLD 및 비만의 경우에도, 장내 미생물총의 구성 및 대사활동의 변화와 관련성이 알려져 있다.
따라서, 프로바이오틱스(probiotics)는 장내 미생물 균형의 조절로 인해 유익한 효과가 있기 때문에 부작용이 많은 항생제를 대신하여 생물 치료제로 적용될 수 있다. 그 중 Lactobacillus 속은 가장 대표적인 프로바이오틱스로 알려져 있다. 프로바이오틱스가 NAFLD에서 지방증을 감소시킨다고 알려져 있으나, 현재까지 프로바이오틱스와 장내미생물의 상호관계와 이를 통해 발생하는 메커니즘에 대한 연구는 미미하며, 더 많은 연구가 필요하다.
이에, 본 발명에서는 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei와 L.acidophilus 균주의 혼합물을 섭취할 경우, 장내미생물총이 조절되어 비알코올성 간질환 및 비만을 개선시킬 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
한국등록특허 제10-1992537호
본 발명의 목적은 P.dorei와 L.acidophilus 균주의 혼합물이 장내 미생물 조성을 유익하게 조절하여 비알코올성 지방간을 개선하고 면역을 증진시키는 효과가 있어, 상기 혼합 생균제를 비알코올성 지방간 치료제로 제안함에 있다.
또한, 본 발명이 해결하고자 하는 과제들은 이상에서 언급된 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명에서, 상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것일 수 있다.
또한 본 발명에서, 상기 락토바실러스 아시도필러스 균주는 분말의 생균제 형태로 포함된 것일 수 있다.
또한 본 발명에서, 상기 염증성 질환은 위, 소장, 대장, 맹장, 치주조직, 관절, 신장 및 간 중 어느 하나 이상에서 발생한 것일 수 있다.
또한 본 발명에서, 상기 조성물은 AST(aspartate transaminase), ALT(alanine transaminase, GPT) 또는 CHOL(total cholesterol) 수치를 감소시키는 활성을 가지는 것일 수 있다.
또한 본 발명에서, 상기 조성물은 장내 박테로이데테스에 대한 페르미쿠테스의 비율(Firmicutes/Bacteroidetes ratio; F/B ratio)을 감소시키는 활성을 가지는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 실시예에 따르면, 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제 조성물을 제공하는 것일 수 있다.
또한 본 발명에서, 상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것 일 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것일 수 있다.
또한 본 발명에서, 상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것일 수 있다.
또한 본 발명에서, 상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 P.dorei와 L.acidophilus의 혼합물을 고지방 식이로 유도된 비알코올성 지방간 마우스에 투여하였을 경우 혈액 생화학적으로 AST, ALT, 콜레스테롤을 감소시킬 뿐만 아니라 병리학적으로 간 지방증과 간세포의 손상 및 풍선 변성을 억제하는 효과를 가지고 간 조직에서 염증과 지방 대사 관련 유전자의 발현을 유의미하게 저하시키기 때문에 비알코올성 지방간에 대한 치료 및 비만 개선에 이용될 수 있다.
본 발명의 효과들은 이상에서 언급된 효과로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 아래의 기재로부터 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
도 1은 Western diet 섭취로 비알코올성 지방간 유도 마우스 모델에 대한 실험 과정을 나타낸 모식도이다.
도 2는 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 체중 및 간 무게를 측정한 결과를 확인한 것이다.
도 3은 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 간의 병리학적 상태를 나타낸 결과를 확인한 것이다.
도 4는 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 간 기능 지표 변화를 확인한 것이다.
도 5는 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 염증인자 변화를 확인한 것이다.
도 6은 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 염증인자 변화를 확인한 것이다.
도 7은 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 지질대사 인자 변화를 확인한 것이다.
도 8은 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 장내 미생물총 분포를 확인한 것이다.
도 9는 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 장내 미생물총 변화를 확인한 것이다.
도 10은 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델에서 P.dorei 및 L.acidophilus 균주의 혼합물을 투여할 경우, 장내 미생물총 다양성을 확인한 것이다.
이하, 본 발명에 대하여 상세히 설명하기로 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 특허청구범위에 사용된 용어 또는 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다. 따라서, 본 명세서에 기재된 실시예에 기재된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
한편, 본 명세서에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 명세서에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.

본 발명에서 "예방"이란, 본 발명의 상기 조성물을 이용하여 비알코올성 간질환 또는 비만에 의해 발생되는 증상을 차단하거나, 그 증상을 억제 또는 지연시키는 행위라면 제한 없이 포함될 수 있다.
본 발명에서 "치료"란, 본 발명의 상기 조성물을 이용하여 비알코올성 간질환 또는 비만에 의해 발생된 증상이 호전되거나 이롭게 되는 행위라면 제한 없이 포함될 수 있다.
본 발명에서 "개선"이란, 본 발명의 상기 조성물을 이용하여 비알코올성 간질환 또는 비만에 의해 발생되는 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위라면 제한 없이 포함될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다. 상기 포카이콜라 도레이(Phocaeicola dorei; P.dorei) 균주는 혐기성의 그람 음성균이다.
본 발명에서, 상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에서, 상기 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus; L.acidophilus) 균주는 락토바실러스 속에 속하는 그람 양성 박테리아의 일종으로, 미호기성 종으로, 당을 젖산으로 발효시키며, pH 5.0 미만의 다소 낮은 pH에서 쉽게 성장하고 약 37°C의 최적 성장 온도를 갖는 것이며, 상기 락토바실러스 아시도필러스 균주는 Lactobacillus acidophilus CKDB018 균주인 것일 수 있다.
본 발명의 유효성분인 상기 균주는, 상기 균주를 분리 및/또는 정제한 균체 외에 균체를 포함하는 배양물, 균체의 추출물, 배양물 상층액, 이들의 농축액, 농축물, 건조물 또한 필요에 따라서 희석액, 희석물 등이며, 배양액, 배양물을 처리하여 얻어지는 모든 상태의 것을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 상기 락토바실러스 아시도필러스 균주는 분말의 생균제 형태로 포함된 것 일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 균주의 농도는 1x108 CFU/g 이상인 것일 수 있고, 바람직하게는 1x109 CFU/g 인 것일 수 있다. 상기 농도 이상의 균주를 포함한 생균제의 경우, 섭취하였을 때 체내에서 장내 마이크로바이옴을 변화시키기에 충분할 수 있다.
본 발명에서, 상기 균주의 균체에 대한 배양법, 추출법, 분리법, 농축법, 건조법, 희석법 등은 특별히 한정되지 않는다. 상기 균체를 배양하기 위한 배지로는 EG 배지; LB 배지; RCM 배지; 및/또는 혈소판(blood plate), 말토오즈(maltose), 수크로오즈(sucrose), 글루코오즈(glucose), 녹말(starch), 만니톨(mannitol), 젤라틴(gelatin), 카제인(casein), 스킴밀크(skim milk), 그 밖의 당류 및 효모 추출물에서 선택된 어느 하나 이상의 성분을 포함하는 배지;일 수 있으며, 배양 방법으로는 일반적인 각종 호기적 또는 혐기적인 방법을 사용할 수 있고, 상기 균주의 배양 온도로는 30℃내지 40℃를 설정하고, 배양 중에는 수산화나트륨 등의 알칼리를 사용하여 배지의 pH를 중성으로부터 산성, 예를 들어 pH가 5 내지 6 정도가 되도록 유지하는 중화배양법을 사용할 수도 있다. 이와 같은 중화배양법 외에 회분배양법 등의 임의의 배양 방법을 사용할 수 있으며, 배양한 후에는 필요에 따라서 배양물이나 그 상층액을 농축, 건조, 희석 등을 할 수도 있다. 또한 원심분리법이나 막분리법을 사용하여 배양물의 상층액과 균체를 분리하여 균체를 농축한 상태로 회수할 수도 있다. 그리고 균체에 초음파 처리나 효소 처리 등을 행하여 균체 내의 성분을 추출하거나, 배양물이나 그 상층액, 균체나 그 추출물 등을 건조할 수도 있다. 이들은 본 발명의 상기 조성물의 유효성분으로서 사용할 수 있다. 일 예로, 상기 락토바실러스 아시도필러스 균주는 코팅 처리된 것일 수 있고, 이 경우 장내에서 병용 투여된 상기 포카이콜라 도레이와 활성화 정도가 비슷하게 유지될 수 있는 효과를 가질 수 있다.
본 발명에서, 상기 염증성 질환은 위, 소장, 대장, 맹장, 치주조직, 관절, 신장 및 간 중 어느 하나 이상에서 발생한 것 일 수 있다. 일 예로, 상기 염증성 질환은 염증성 간 간질환일 수 있고, 간경변(cirrhosis), C형 간염, 알코올성 간질환, 진행성 섬유증으로 인한 간 손상, 간 섬유증, 원발성 담즙성 간경변(PBC) 및 원발성 경화성 담관염(PSC)에서 선택된 어느 하나 이상이 질환을 동반한 간 염증이 포함될 수 있다. 본 발명의 조성물은 특히 상기 간 질환 중 상승된 지질 수준 및/또는 간 효소 수준을 제어하기 위한 기존 약물에 저항성을 가지거나, 부작용을 동반하거나, 불충분한 효과를 가지는 경우에 효과적일 수 있다. 예를 들어 우르소데옥시콜산(ursodeoxycholic acid; UDCA)에 대해 약물 저항성이 생긴 간 질환인 경우; 스타틴 약물로 인하여 근육 문제, 인지 손실, 신경병증, 췌장기능 이상, 간기능 이상과 같은 유해 효과가 발생한 간 질환인 경우; 한 가지 지질 저하제 단독으로는 중증 수준의 지방간을 제어하는 데 있어서 불충분하여 병용 요법이 필요한 간 질환인 경우 유용할 수 있다. 상기와 같은 경우 본 발명의 균주를 단독 또는 병용으로 투여 또는 섭취하여 상기에 언급된 문제를 해결할 수 있고, 예를 들어 상승효과, 약물의 효능 손실 없이 일일 투여 횟수의 감소, 콜레스테롤 또는 트리글리세리드 수준 개선, 약물 선택성, 조직 침투, 반감기, 및/또는 대사 안정성 확보 중 한 가지 이상의 이점을 가질 수 있다.
본 발명에서, 상기 조성물은 AST(aspartate transaminase), ALT(alanine transaminase, GPT) 또는 CHOL(total cholesterol) 수치를 감소시키는 활성을 가지는 것 일 수 있다. 통상적으로 간 검사는 혈액 내 AST 또는 ALT 테스트를 통하여 수행되며, 40IU/L 이하이면 정상으로 판단하고, 이보다 높으면 간 손상이 있다고 판단한다. 종래의 공지되어 있는 항비만 소재들 중 일부는 지방조직 내 지방이 축적되는 것을 억제할 수는 있으나, AST 또는 ALT 수치를 감소시키지 못하는 것으로 알려져 있다. 즉, 공지된 일부 항비만 소재는 간 조직 손상을 예방하거나 개선하지 못하므로, 이들을 섭취한다 하여도 지방간과 같은 간 질환이 발병할 가능성은 여전히 남아있을 수 있다. 하지만, 본 발명의 균주 혼합물은 다른 균주에 비하여 체내의 AST 및/또는 ALT 수치가 증가하는 것을 억제하거나, AST 및/또는 ALT 수치를 감소시켜 간 조직 내 지방이 축적되는 것을 억제하고 간 조직의 손상을 예방 또는 치료할 수 있다.
본 발명에서, 상기 조성물은 장내 박테로이데테스에 대한 페르미쿠테스의 비율(Firmicutes/Bacteroidetes ratio; F/B ratio)을 감소시키는 활성을 가지는 것 일 수 있다. 상기 F/B ratio는 정상적인 장 항상성을 유지하는 데 중요한 영향을 미치는 것으로 알려져 있고, 본 발명의 조성물이 장에 작용할 경우, 서양식 식이(Western diet)에 의하여 상승된 F/B ratio를 낮추어 정상치로 회복시킬 수 있고, 그 결과 세균불균형(dysbiosis)에 대한 예방, 개선 및 치료효과를 가질 수 있다.
본 발명의 조성물은 식품 조성물로 제공되는 것일 수 있다.
본 발명에서, 상기 식품 조성물은 건강기능식품, 건강식품 또는 식품 첨가제 일 수 있고, 종류에는 특별한 제한은 없다. 일 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 정제, 캡슐, 환제 또는 액제 형태 등 통상적인 의미에서의 건강기능식품 및 건강식품 조성물을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 상기 균주를 포함하는 건강기능식품, 건강식품 및 식품 첨가제 조성물은 식품 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
본 발명에서, 상기 건강기능식품, 건강식품 또는 식품 첨가제 중의 상기 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 유지를 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양의 범위 이하일 수 있다.
본 발명에서 상기 균주를 함유하는 것 외에 추가되는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트라이톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제인 타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능식품, 건강식품 또는 식품 첨가제 조성물 100g 당 일반적으로 약 1g 내지 20g, 바람직하게는 약 5g 내지 12g일 수 있다.
본 발명에서, 상기 균주를 함유하는 건강기능식품, 건강식품 또는 식품 첨가제 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은 사료 첨가제 조성물로 제공되는 것일 수 있다.
본 발명의 상기 균주가 사료 조성물 또는 사료 첨가제 조성물에 함유되어 이용될 경우, 상기 조성물은 20 내지 90% 고농축액이거나 분말 또는 과립형태로 제조될 수 있다. 상기 사료 첨가제는 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성 피로인산염 등의 인산염이나, 폴리페놀, 카테킨, 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물, 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제 중 어느 하나 또는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에서, 상기 균주가 사료로 이용될 경우, 상기 조성물은 통상의 사료 형태로 제제화될 수 있으며, 통상의 사료 성분을 함께 포함할 수 있다. 상기 사료 첨가제 및 사료는 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩 및 해바라기를 주성분으로 하는 사료; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조 성분 등을 더 포함할 수 있으며, 이외에도 영양 보충제, 소화 및 흡수 향상제, 성장 촉진제 등을 더 포함할 수 있다.
본 발명에서, 상기 균주가 상기 사료 첨가제로 사용될 경우에는 동물에게 단독으로 투여하거나 식용 담체 중에서 다른 사료 첨가제와 조합하여 투여할 수도 있다. 또한, 상기 사료 첨가제는 탑 드레싱으로서 또는 이들을 동물 사료에 직접 혼합하거나 또는 사료와 별도의 경구 제형으로 용이하게 동물에게 투여할 수 있다. 상기 사료 첨가제를 동물 사료와 별도로 투여할 경우, 당해 기술분야에 잘 알려진 바와 같이 약제학적으로 허용 가능한 식용 담체와 조합하여, 즉시 방출 또는 서방성 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 식용 담체는 고체 또는 액체, 예를 들어 옥수수 전분, 락토오스, 수크로오스, 콩 플레이크, 땅콩유, 올리브유, 참깨유 및 프로필렌글리콜일 수 있다. 고체 담체가 사용될 경우, 사료 첨가제는 정제, 캡슐제, 산제, 트로키제 또는 함당정제 또는 미분산성 형태의 탑 드레싱일 수 있다. 액체 담체가 사용될 경우, 사료 첨가제는 젤라틴 연질 캡슐제, 또는 시럽제나 현탁액, 에멀젼제, 또는 용액제의 제형일 수 있다. 상기 사료는 동물의 식이 욕구를 충족시키는데 통상적으로 사용되는 임의의 단백질-함유 유기 곡분을 포함할 수 있다. 이러한 단백질-함유 곡분은 통상적으로 옥수수, 콩 곡분, 또는 옥수수/콩 곡분 믹스로 구성되어 있다. 또한 사료 조성물은 예를 들어 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액 촉진제 등을 함유할 수 있다. 또한 사료 첨가제 조성물은 침지, 분무 또는 혼합하여 동물의 사료에 첨가하여 이용될 수 있다.
본 발명의 사료 또는 사료 첨가제 급여의 대상은 비알코올성 간질환 또는 비만의 예방 또는 개선이 필요한 개체로, 상기 개체는 상기 염증성 질환이 발생하였거나 발생할 수 있는 인간을 제외한 모든 동물을 포함할 수 있고, 상기 동물은 비-인간 영장류, 예컨대 침팬지, 다른 유인원 또는 원숭이 종; 축산 동물, 예컨대 소, 말, 양, 염소, 돼지; 사육 동물, 예컨대 토끼, 개 또는 고양이; 실험 동물, 예를 들어 설치류, 예컨대 랫드, 마우스 또는 기니 피그; 비-포유동물, 예를 들어 조류 또는 어류 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 예시에서, 상기 사료 또는 사료 첨가제 조성물은 유효성분으로 글리시리진을 더 포함하고; 옥수수 전분, 수크로오스, 셀룰로오스 및 귀리를 더 포함하며; 상기 옥수수 전분 100 중량부에 대하여 상기 수크로오스는 5 내지 15 중량부, 상기 셀룰로오스는 10 내지 20 중량부 및 상기 귀리는 10 내지 25 중량부인 것;일 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적 조성물로 제공되는 것일 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 상기 균주 조성물을 유효량으로 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 비알코올성 간질환 또는 비만의 진단, 예방 또는 치료 방법을 제공할 수 있다.
본 발명의 상기 약학적 조성물은 이들로 한정되는 것은 아니지만, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 캡슐, 정제, 수성 현탁액 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사 용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용되는 담체는 경구 투여 시에는 결합제, 활탁제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소, 향료 등을 사용할 수 있고, 주사제의 경우에는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제 등을 혼합하여 사용할 수 있으며, 국소투여용의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제 등을 사용할 수 있다.
본 발명의 상기 약학적 조성물의 제형은 상술한 바와 같은 약학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 투여시에는 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭서(Elixir), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 제조할 수 있으며, 주사제의 경우에는 단위 투약 앰플 또는 다수 회 투약 형태로 제조할 수 있다. 기타, 용액, 현탁액, 정제, 캡슐, 서방형 제제 등으로 제형화 할 수 있다.
본 발명의 상기 제제화에 적합한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말디톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등이 사용될 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 상기 약학적 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함된다. 경구 또는 투하가 바람직하다. 본 발명에서 상기 "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액낭내, 흉골내, 경막내, 병소내 및 두개골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다.
본 발명의 상기 약학적 조성물은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 정식, 투여 시간, 투여 경로, 배출율, 약물 배합 및 예방 또는 치료될 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있고, 상기 약학적 조성물의 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 다르지만 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있고, 1일 0.0001 내지 50 mg/kg 또는 0.001 내지 50 mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 환제, 당의정, 캡슐, 액제, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁제로 제형화될 수 있다.
본 발명에서 상기 “개체”란, 비알코올성 간질환 또는 비만의 예방 또는 치료가 필요한 개체로서, 포유동물 및 비-포유동물을 모두 포함할 수 있다. 여기서, 상기 포유동물의 예로는 인간, 비-인간 영장류, 예컨대 침팬지, 다른 유인원 또는 원숭이 종; 축산 동물, 예컨대 소, 말, 양, 염소, 돼지; 사육 동물, 예컨대 토끼, 개 또는 고양이; 실험 동물, 예를 들어 설치류, 예컨대 랫드, 마우스 또는 기니 피그 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 본 발명에서 상기 비-포유동물의 예로는 조류 또는 어류 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 용어 “투여”란, 임의의 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 유효성분을 도입하는 과정을 의미하는 것으로서, 본 발명의 상기 치료 방법에서 투여 방법은 경구 또는 비경구 등의 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다.
본 발명의 목적상, 목적하는 개체에 대한 구체적인 약학적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 상기 유효성분을 포함하는 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 상기 유효성분을 포함하는 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 또 다른 구현예에 따르면, 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 개선용 조성물을 제공하는 것일 수 있다.
본 발명에서, 상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에서, 생략된 나머지 기재들은 본 발명의 나머지 기재와 마찬가지로 해석될 수 있다.
이하 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. Phocaeicola dorei 와 Lactobacillus acidophilus CKDB018 혼합물의 준비
Lactobacillus acidophilus CKDB018 균주는 ㈜종근당바이오에서 공급받았다. 상기 균주는 정제 및 냉동건조 시킨 후 특수 코팅처리되어 위산에서 생존율을 높였고, 5x108 CFU/g의 농도의 미세분말 형태로 준비되었다.
Phocaeicola dorei 균주는 ㈜씨제이바이오사이언스에서 분양받았다. 혐기성 균배양을 위한 혐기성팩(A-04 Anaeropack; Mitsubishi Gas Chemical Company, Tokyo, Japan), indicator(A-66 Anaerobic indicator; Mitsubishi Gas Chemical Company, Tokyo, Japan)와 RCM(Difco Reinforced Clostridial Medium; Becton-Dickinson and Company, MD, USA)배지를 사용하였다. P.dorei를 고체 RCM 배지에 도말하여 Jar(Mitsubishi Gas Chemical Company, Tokyo, Japan)에 혐기성팩과 indicator를 넣고 37℃에서 72시간 배양하였다. 다음으로 배양한 P.doeri를 5x108 CFU/g의 농도로 준비하였다.
P.dorei와 L.acidophilus는 각각 5x108 CFU/g의 농도로 혼합하여, 혼합물을 총 109 CFU/g의 농도로 증류수에 현탁하여 주 2회 공급하였다.
실시예 2. 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델 유도
동물모델 평가를 위해 특정 병원체가 없는 5주령의 C57BL/6J 수컷 마우스를 두열바이오텍(서울, 한국)에서 구매하였다. 모든 마우스들은 12/12시간 명/암 주기로 22℃±2℃온도에서 전용 케이지에 개별적으로 수용하였다. 실험을 진행하는 동안 모든 마우스들은 물과 음식에 자유롭게 접근할 수 있도록 하였다. 실험은 모든 그룹에 대한 적응기간을 포함하였고 이 기간 동안에는 1주일 동안 정상적인 사료를 제공하였다. 실험동물들은 인도주의적 치료를 받았으며 모든 절차는 실험실 동물의 관리 및 사용을 위한 국립보건원 지침을 따랐으며 한림대학교 의과대학 동물실험 및 사용위원회의 승인을 받았다.
식이 섭취로 비알코올성 지방간 모델을 유도하기 위해 고지방 식이인 Western diet를 두열바이오텍에서 제조하여 8주간 자유롭게 섭취하도록 하였다. 그 후 비알코올성 지방간 모델 마우스는 정상식이 그룹(Normal diet group, n=8), 질병유도식이 그룹(Western diet group, n=10) 및 질병유도식이와 P.dorei, L.acidophilus 혼합물 섭취를 병행한 실험군(P.dorei + L.acidophilus, n=10)의 3개의 그룹으로 분류하였고, 상기 실험군에만 P.dorei와 L.acidophilus 혼합물을 각각 5x108 CFU/g씩 총 109 CFU/g의 농도로 혼합하여 증류수에 현탁한 것을 8주간 주 2회 공급하였다(도 1).
실시예 3. 비알코올성 간질환 유도 마우스 모델의 간 조직 샘플 수집
1주의 적응기간, Western diet 급여 8주 및 P.dorei와 L.acidophilus 투여 8주의 총 17주 후, 혼합물 투여 흡입 마취제 투여(이소플루란)를 통해 동물을 희생시켰다. 체중과 간 무게를 측정하고 혈액 및 간 조직을 분리했다. 전혈 샘플은 4℃overnight 후 원심 분리(2000g, 20분)하여 혈청을 분리하였다. 간 조직은 빠르게 분리하여 80℃에 보관했다.
실시예 4. 간 조직의 병리학적 분석
분리된 간 조직을 10% 포르말린으로 고정시키고 파라핀에 매립시키고, 조직 섹션을 헤마톡실린 및 에오신(H&E) 염색을 하였다. 비알코올성 지방간의 정도를 진단하기 위해 사용되는 병리학적 분석인 NAS(Non-alcoholic fatty liver disease Activity Score)를 확인 및 평가하였다. 상기 NAS는 지방증(steatosis), 소엽 염증(lobular inflammation), 팽창(ballooning)의 세 항목을 평가 및 합산하여, 총 점수가 0~2인 경우 not NASH로, 3~4인 경우 NASH borderline으로, 5 이상인 경우 NASH로 평가하는 것이다. 상기와 같이 제시된 병리학적 분석법에 따라 분석한 결과, 정상식이를 섭취한 대조군에 비해 Western diet를 섭취한 실험군에서 지방증 및 염증, 풍선 변형이 발생하였고, P.dorei 및 L.acidophilus 혼합물의 섭취로 인하여 간의 무게와 지방증 및 염증, 풍선변형 등이 감소함을 확인하였다(도 2, 도 3).
실시예 5. 간 기능 지표 측정 및 분석
채취한 전혈샘플은 원심 분리(2000g, 20분)하여 혈청을 분리하였다. 분리한 혈청으로 aspartate aminotransferase(AST), alanine aminotransferase(ALT), total cholesterol(CHOL)을 혈액생화학분석기(KoneLab 20, Thermo Fisher Scientific, Finland)를 이용하여 측정하였다.
그 결과, 정상식이를 먹은 대조군인 Normal에 비해 고지방 식이를 섭취한 Western diet에서 간 기능 지표인자인 AST, ALT, CHOL 수치가 증가하였고 P.dorei 및 L.acidophilus 혼합물을 섭취한 실험군에서는 AST, ALT, CHOL수치가 감소하였다. 상기 결과로 P.dorei 및 L.acidophilus 혼합물이 NAFLD와 간 기능을 개선하는데 유용하다는 것을 확인하였다(도 4).
실시예 6. 지방 대사 및 염증 인자에 대한 간 조직 분석
지방간 질환에서는 매우 심각한 염증반응이 일어난다. 증가된 지방증으로 인한 불균형으로 인해 유도되기도 하고, 최근에는 장내세균의 불균형(dysbiosis)으로 인해 생성된 염증유도 인자들이 장관막을 투과하여 간에 직접적인 염증을 유도한다고 밝혀졌다. 따라서, 상기 모델에서 지방간 질환에 의한 염증반응을 확인하기 위하여, qPCR을 수행하여 염증성 사이토카인, 케모카인 유전자(Tnf-α, Il-1βCxcl2, Cxcl0)의 mRNA 발현정도를 확인하였다. 조직으로부터의 mRNA의 분리는 제조사의 지시에 따라 트리졸 시약 키트(인비트로젠, 미국)를 사용하여 수행했다. mRNA 발현 확인을 위하여, cDNA 합성 키트(어플라이드 바이오시스템즈, 미국)를 사용하여 타겟 mRNA(2 μg)를 cDNA로 합성했다. 상기 cDNA는 루나 유니버셜 마스터 믹스(뉴잉글랜드바이오랩, 미국) 및 각 표적-특이적 프로브-프라이머를 사용하여 정량적 PCR(qPCR)을 수행하였다.
그 결과, Western diet로 인해 증가된 Tnf-α, Il-1βCxcl2, Cxcl0 유전자 발현이 P.dorei, L.acidophilus 홉합물을 투여하였을 때 유의미하게 줄어들었다. 이는 P.dorei, L.acidophilus 혼합물이 지방간 질환에 대하여 염증반응 억제 효능이 우수하다는 것을 보여준다(도 5, 도 6).
추가로 지방생성(de novo lipogenesis) 및 Triglyceride(TG) 합성 관여 및 지질대사 관련 유전자인 Pparα, Cpt-1α, Cd36 mRNA level을 분석하였다. 마찬가지로 NAFLD를 유도한 Western diet에서는 Normal 대조군에 비해 간 지방 합성 유전자 발현이 증가하였고 P.dorei, L.acidophilus 혼합물을 섭취함에 따라 해당 인자들이 감소함 보여주었다. 이는 P.dorei, L.acidophilus 혼합물이 염증반응 뿐만 아니라 지방합성과 대사를 개선시킬 수 있음을 확인하였다(도 7).
실시예 7. 장내 미생물 구성 및 다양성 분석
대변으로부터의 DNA 분리는 QIAamp fast stool kit(큐아젠, 미국)를 사용하여 수행했다. 추출한 DNA는 16S rRNA 유전자 증폭 및 서열분석을 진행하여 장내 미생물을 분석하였고 이를 통해 장내 미생물의 분포 및 구성, 다양성과 바이오마커 등을 평가하였다.
그 결과 P.dorei, L.acidophilus 혼합물을 섭취함에 따라 Western diet 급여에 의해 유발되는 F/B ratio 상승을 억제할 수 있음을 확인할 수 있었다(도 8, 도 9, 도 10).
실시예 8. 데이터 분석
연속 변수는 평균 및 표준편차로 분석하였다. 체중, 조직학 분석, 간기능 분석 및 분류학적 바이오마커 발견을 위해 One-way ANOVA 및 independent sample T-test를 수행하였다. 유의확률 P값이 0.05 미만일 경우, 통계적 유의성을 나타내는 것으로 간주하였다. 모든 통계 분석은 GraphPad Prism(ver. 8.0.2, GraphPad Software, LLC, San Diego, CA 92108 USA)와 SPSS 소프트웨어(ver. 19, SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 사용하여 수행하였다.
상기 결과들은 본 발명의 균주 혼합물이 Western diet 섭취로 인해 유도되는 간 내 지방대사 및 염증을 개선할 수 있음을 보여주었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시예일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (12)

  1. 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것인, 식품 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 락토바실러스 아시도필러스 균주는 분말의 생균제 형태로 포함된 것인, 식품 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 염증성 질환은 위, 소장, 대장, 맹장, 치주조직, 관절, 신장 및 간 중 어느 하나 이상에서 발생한 것인, 식품 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 AST(aspartate transaminase), ALT(alanine transaminase, GPT) 또는 CHOL(total cholesterol) 수치를 감소시키는 활성을 가지는 것인, 식품 조성물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 조성물은 장내 박테로이데테스에 대한 페르미쿠테스의 비율(Firmicutes/Bacteroidetes ratio; F/B ratio)을 감소시키는 활성을 가지는 것인, 식품 조성물.
  7. 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것인, 사료 첨가제 조성물.
  9. 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것인, 약학적 조성물.
  11. 포카이콜라 도레이 균주를 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 조성물은 유효성분으로 락토바실러스 아시도필러스 균주를 더 포함하는 것인, 식품 조성물.
KR1020220047368A 2022-04-18 2022-04-18 포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물 KR20230148538A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220047368A KR20230148538A (ko) 2022-04-18 2022-04-18 포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220047368A KR20230148538A (ko) 2022-04-18 2022-04-18 포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230148538A true KR20230148538A (ko) 2023-10-25

Family

ID=88515734

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220047368A KR20230148538A (ko) 2022-04-18 2022-04-18 포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20230148538A (ko)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101992537B1 (ko) 2016-09-30 2019-06-25 씨제이제일제당 (주) 신규한 락토바실러스 사케이 및 이를 포함하는 조성물

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101992537B1 (ko) 2016-09-30 2019-06-25 씨제이제일제당 (주) 신규한 락토바실러스 사케이 및 이를 포함하는 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102032982B1 (ko) 류코노스톡 시트래움 WiKim0104를 포함하는 비만 또는 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR101825836B1 (ko) 신규한 락토바실러스 플란타룸 Lb41 균주 및 이를 포함하는 당뇨 또는 인슐린 저항성 증후군의 예방 및 치료용 약학적 조성물
KR101736033B1 (ko) 항비만 활성을 가지는 락토바실러스 사케아이
US20190262409A1 (en) Novel lactobacillus sakei and composition comprising the same
KR102072059B1 (ko) 와이셀라 헬레니카 WiKim0103를 포함하는 비만 또는 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20160132050A (ko) 신규한 락토바실러스 파라카세이 균주
KR102543494B1 (ko) 신규 프로바이오틱스 및 이의 용도
JP2021527414A (ja) ロイコノストック属菌株を含む腸機能改善用組成物
KR102039229B1 (ko) 비만, 당뇨와 지방간의 예방과 치료 효과를 갖는 바실러스 혼합 조성물 및 이의 용도
JP7196314B2 (ja) ヘリコバクターピロリ連関疾患の予防又は治療用キムチ
KR102037897B1 (ko) 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물
KR20230148538A (ko) 포카이콜라 도레이 균주 및 락토바실러스 아시도필러스 균주를 포함하는 조성물
KR101834379B1 (ko) 항비만 활성을 갖는 와이셀라 컨퓨사 WIKIM51(Weissella confusa WIKIM51) 및 이를 포함하는 조성물
KR102626672B1 (ko) 락토바실러스 헬베티커스 ckdb001 균주를 포함하는 알코올성 간질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물
KR20190090408A (ko) 항비만 효과를 갖는 락토바실러스 플란타룸 k50 균주 및 이의 용도
KR102571732B1 (ko) 페디오코쿠스 펜토사세우스 kid7 균주를 포함하는 알코올성 간질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물
KR20240094238A (ko) 비피도박테리움 브레베 ckdb002 균주를 포함하는 염증성 질환의 예방 및 치료용 조성물
KR20240094239A (ko) 비피도박테리움 롱검 ckdb004 균주를 포함하는 염증성 질환의 예방 및 치료용 조성물
KR20230001030A (ko) 박테로이데스 도레이를 포함하는 간 질환 예방 및 치료용 조성물
KR102657370B1 (ko) 대두 단백질 분해능, 아미노산 생성능 개선 효과를 갖는 프로바이오틱스 조성물
RU2793287C2 (ru) Кимчи для предотвращения или лечения связанных с helicobacter pylori заболеваний
KR102037898B1 (ko) 케피어 유래 유산균 및 포도씨 분말을 포함하는 지방간의 예방 또는 치료용 조성물
KR102616412B1 (ko) 비피도박테리움 애니말리스 락티스 mg741 균주를 포함하는 비만 또는 비알콜성 지방간 예방 또는 치료용 조성물
KR102434006B1 (ko) 항비만 활성을 갖는 유산균을 함유하는 식품 조성물
KR102593538B1 (ko) 박테로이데스 도레이 균주를 포함하는 간섬유증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물